חשיפת שינויים עדינים בתפקוד הלב באמצעות אקו לב מתח דובוטמין דרך בית החזה בעכברים

סיכום

תפקוד לקוי של החדר השמאלי מהווה את המסלול המשותף האחרון לשורה של הפרעות לב. אנו מספקים כאן פרוטוקול מפורט של גישת אקו לב במאמץ דובוטמין טרנס-חזה להערכה מקיפה של תפקוד החדר השמאלי של מודלים עכבריים של מחלות לב כמו גם פנוטיפ לבבי.

תקציר

תפקוד לקוי של החדר השמאלי (LV) סולל את המסלול הסופי למספר רב של הפרעות לב. עם אקו לב מתח טרנס-חזה לא פולשני בתדר גבוה בבני אדם, התאפשרה גישת חקירה רדוקציוניסטית לחשיפת שינויים עדינים בתפקוד הלב. כאן, אנו מספקים פרוטוקול לשימוש בטכניקה זו בעכברים כדי להקל על ניתוח מורחב של ארכיטקטורת LV ותפקוד בפיזיולוגיה ופתולוגיה המאפשר התבוננות בשינויים במודלים של מחלות לב החבויות בלבבות לא לחוצים. חקירה זו יכולה להתבצע באותה חיה ומאפשרת מדידות בסיסיות ותרופתיות הנגרמות על ידי מתח. אנו מתארים קריטריונים מפורטים להרדמה מתאימה, ניתוח LV מבוסס הדמיה, התחשבות בשונות תוך-צופית ובין-צופית, והשגת תגובת אינוטרופ חיובית שניתן להשיג בעכברים לאחר הזרקה תוך-צפקית של דובוטמין בתנאים פיזיולוגיים קרובים. כדי לסכם את המאפיינים של הפיזיולוגיה והמחלה האנושית במודלים של בעלי חיים קטנים, אנו מדגישים מלכודות קריטיות בהערכה, למשל, אפקט בודיץ' בולט בעכברים. כדי לעמוד עוד יותר ביעדי התרגום, אנו משווים השפעות הנגרמות על ידי מתח בבני אדם ועכברים. בשימוש במחקרים תרגומיים, יש לשים לב להבדלים פיזיולוגיים בין עכברים לבני אדם. קפדנות ניסויית מכתיבה כי ניתן להשתמש בפרמטרים מסוימים המוערכים בחולים רק בזהירות עקב מגבלות ברזולוציה מרחבית וזמנית במודלים של עכברים.

מבוא

סימן ההיכר של מחלות לב רבות בבני אדם הוא ליקוי תפקודי סיסטולי ו/או דיאסטולי של החדר השמאלי (LV). לאיתור חריגות מבניות, אבחון וניהול אי ספיקת לב סיסטולית וכן הערכת תפקוד דיאסטולי בחולים עם תסמינים של אי ספיקת לב, אקו לב משמש כשיטת הערכה בסיסית.

מכיוון שהתסמינים אינם ספציפיים ויותר משליש מהחולים עם התסמונת הקלינית של אי ספיקת לב עשויים שלא לסבול מאי ספיקת לב בפועל, חשוב למצוא מתאם אקו לב אובייקטיבי להופעה הקלינית של המטופל¹. יתר על כן, חלק מהתסמינים הנסתרים במצב מנוחה או סטטי עשויים להופיע בתנאים של פעילות או לחץ. בחולים עם מחלת עורקים כליליים, שינויים קלים כבר בז....

פרוטוקול

כל השיטות והנהלים בוצעו בהתאם ועמדו בכל התקנות הרלוונטיות ('האמנה האירופית להגנה על בעלי חוליות המשמשים למטרות ניסיוניות ומדעיות אחרות' (הנחיה 2010/63/EU) והטיפול בבעלי חיים היה בהתאם להנחיות המוסדיות. הנתונים מבני אדם נותחו בהתאם לכל ההנחיות המוסדיות, הלאומיות והבינלאומיות לרווחת האדם ואושרו על ידי ועדת האתיקה המקומית (20-9218-BO). כל הניסויים בוצעו עם C57BL/6JRj זכר בגיל 12 שבועות.

1. הכנת חומרים וציוד

הערה: איור 1 מציג דוגמה למקום עבודה של אולטרסאונד של חיות קטנות.

1. הקפד לפעול בסביבה מבוקרת שקטה עם אור הניתן לעמעום.
2. מחממים מראש את ג'ל האולטרסאונד, למשל באמצעות....

תוצאות

תמונה אקו לב פיזיולוגית לא לחוצה שנרכשה ב-PSLAX מוצגת באיור 3. בדיאסטולה, דפנות החדרים מופיעות באופן אחיד (איור 3A) ומתעבות במידה מסוימת (איור 3B,C). הזרקה של 5 מיקרוגרם/גרם משקל גוף dobutamine i.p. מובילה לעלייה משמעותית בקצב הלב (אפקט כרונוטרופי חיובי)¹² וב-LVEF (אפקט אינוטרופי חיובי) (איור 3, איור 6

דיון

הערכה הנגרמת על ידי מתח של תפקוד הלב נמצאת בשימוש נרחב בבני אדם בסביבה קלינית באמצעות בדיקות מאמץ או בדיקות מאמץ פרמקולוגיות ^6,7. מכיוון שאקו לב מיידי לאחר פעילות גופנית של עכברים מוגבל מאוד בשל הצורך בהרגעה, אקו לב במאמץ המושרה על ידי דובוטמין עשוי להיות השיטה התרגומית ביותר להערכת פיזיופתולוגיה של הלב הנגרמת על ידי מתח. ניתן לקבל מידע אמין על תפקוד הלב באמצעות ניתוח לחץ-נפח בזמן אמת בגישה סופית²³. אקו לב.......

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה

שם	חברה	מספר קטלוג	הערות
מסנן פחם פעיל	UNO BV	180000140	http://www.unobv.com/Rest%20Gas%20Filters.html
Aquasonic 100 אולטרסאונד שידור ג'ל	Parker Laboratories	001-02
https://www.parkerlabs.com/aquasonic-100.asp תחליב להסרת שיער כימי	אספקה כללית-כותנה
מחליפים	אספקה	כללית-
ddH2O	אספקה	כללית-Dobutamine
	Carinopharm	71685.00.00
https://www.carinopharm.de/stammsortiment/#103 מד זרימה להרדמה של בעלי חיים מעבדה	UNO BV	SF3
יחידת פליטה גז	http://www.unobv.com/Flowmeters.html UNO BV-http://www.unobv.com/Gas%20Exhaust%20Unit.html
חימום מנורה
	BV-http://www.unobv.com/Induction%20box.html
מיכל חדים רפואיים	BD		305626 https://legacy.bd.com/europe/safety/de/products/sharps/
מתמר אולטרסאונד MX400 (20-46 מגה-הרץ)	VisualSonics	MX400	https://www.visualsonics.com/product/transducers/mx-series-transducers
חומר חיטוי אוקטניספט	Schuelke		173711 https://www.schuelke.com/de-de/produkte/octenisept.php
מזרק Omnican F עם מחט 1 מ"ל	B. Braun	9161502S	https://www.bbraun.de/de/products/b60/omnican-f.html
מגבות נייר	אספקה כללית-Signacreme
קרם אלקטרודות	Parker Laboratories	017-05	https://www.parkerlabs.com/Signacreme.asp
רפידות גזה סטנדרטיות	BeeSana Meditrade		4852728 https://www.meditrade.de/de/wundversorgung/verbandstoffe/beesana-mullkompresse/
Thermasonic Gel Warmer	Parker Laboratories	82-03-20 CE
https://www.parkerlabs.com/thermasonic_apta_sbp.asp Transpore Tape	3M	1527NP-0	https://www.3mdeutschland.de/3M/de_DE/unternehmen-de/produkte/~/3M-Transpore-Fixierpflaster/
Vaporizer Sigma Delta	UNO BV-http://www.unobv.com/Vaporizers.html
Vevo 3100 מערכת הדמיית אולטרסאונד פרה-קלינית בתדר גבוה	VisualSonics	Vevo3100	https://www.visualsonics.com/product/imaging-systems/vevo-3100 * חבילת תוכנה נדרשת: חבילת לב וכלי דם; B-mode, M-mode, דופלר גל דופק
תחנת הדמיה Vevo עם מערכת מסילות משולבת, פלטפורמה מחוממת ויחידת ניטור פיזיולוגית	VisualSonics-https://www.visualsonics.com/product/accessories/imaging-stations
VevoLab Analysis Software	VisualSonics	Vers. 3.2.5	https://www.visualsonics.com/product/software/vevo-lab *חבילת תוכנה נדרשת: Vevo Strain, ניתוח LV

קופסת אינדוקציה של פיליפס-UNO