מאמר שיטה

הקמת מודל עכברוש של חסימת קשת-סינוס מעולה באמצעות שיטת תסחיף חוט

DOI:

10.3791/62118

⸱

4 ביולי 2021

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Clinical Laboratory, the Second Affiliated Hospital and Yuying Children’s Hospital of Wenzhou Medical University, 2Rehabilitation Department, Wenzhou Hospital of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine, 3Department of Neurosurgery, the Hospital of Changle, 4Pediatrics Ward 2, Shouguang Hospital of Traditional Chinese Medicine, 5Fujian University of Traditional Chinese Medicine, 6National-Local Joint Engineering Research Center of Rehabilitation Medicine Technology, Fujian University of Traditional Chinese Medicine, 7Rehabilitation Industry Institute, Fujian University of Traditional Chinese Medicine, 8Department of Neurosurgery, the First Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University

* These authors contributed equally

במאמר זה

סיכום

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כאן, אנו מקימים מודל עכברוש ספראג-דולי (SD) חדשני של פקקת סינוס קשת מעולה (SSS) באמצעות שיטת תסחיף חוט, ואת היציבות והאמינות של המודל אומתו.

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

המנגנונים התורמים להתפרצות הטבעית של פקקת סינוס ורידי מוחי (CVST) אינם ידועים ברובם, ומגוון גורמים בלתי נשלטים מעורבים במהלך המחלה, וכתוצאה מכך מגבלות גדולות במחקר קליני. לכן, הקמת מודלים יציבים של בעלי חיים CVST שיכולים לתקנן מגוון של גורמים מבלבלים בלתי נשלטים סייעו לעקוף חסרונות במחקר קליני. בעשורים האחרונים נבנו מגוון מודלים של בעלי חיים CVST, אך התוצאות המבוססות על מודלים אלה היו לא עקביות ולא שלמות. לפיכך, על מנת להמשיך לחקור את המנגנונים הפתופיזיולוגיים של CVST, יש צורך להקים מודל בעלי חיים חדשני ותואם מאוד, אשר יש ערך מעשי חשוב ומשמעות מדעית לאבחון וטיפול של CVST. במחקר הנוכחי, מודל עכברוש ספראג-דולי (SD) חדשני של פקקת סינוס קשת מעולה (SSS) הוקם באמצעות שיטת תסחיף חוט, ואת היציבות והאמינות של המודל אומתו. בנוסף, הערכנו שינויים בזרימת הדם הוורידי במוח בחולדות לאחר היווצרות CVST. באופן קולקטיבי, מודל SSS-פקקת SSS-thrombosis מייצג מודל חדש של בעלי חיים CVST כי הוא הוקמה בקלות, ממזער טראומה, מניב יציבות טובה, ומאפשר שליטה מדויקת תזמון איסכמי ומיקום.

מבוא

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

פקקת סינוס ורידי מוחי (CVST) היא מחלה נדירה של המערכת הורידית המוחית המהווה רק 0.5-1.0% מכל הגורמים לשבץ אבל יש שיעור התרחשות גבוה יחסית אצל ילדים ומבוגרים צעירים1. במהלך הנתיחה שלאחר המוות, CVST נמצאה הגורם 10% של מקרי מוות ממחלות כלי דם במוח2. פקקת יכולה להתרחש בכל חלק של המערכת הוורידית תוך ורידי. סינוס קשת מעולה (SSS) הוא אחד האזורים המושפעים הנפוצים ביותר ב- CVST והוא יכול לערב כלי דם מרובים. בשל היצרות או חסימה של הסינוסים הוורידיים, החזרה הוורידית תוך ורידי חסומה, אשר מלווה לעתים קרובות בלחץ תוך ורידי מוגבר3. הביטויים הקליניים של CVST הם מורכבים ומשתנים עם הזמן; למרות שיש חוסר ספציפיות של הסימפטומים, הסימפטומים הנפוצים ביותר כוללים כאב ראש (77.2%), התקפים (42.7%), וגירעונות נוירולוגיים (39.9%). במקרים חמורים, תרדמת ואפילו מוות עלולים להתרחש4,5. בשנים האחרונות, בשל השיפור הכולל של תקנים רפואיים ובריאותיים ומודעות לבריאות הציבור, שיעור גורמי הסיכון הקשורים השתנה, שיעור הטראומה והזיהום ירד, ושיעור CVST הנגרמת על ידי הריון, puerperium, גלולות למניעת הריון, וסיבות אחרות גדל בהדרגה5.

כיום, הפתוגנזה של CVST עדיין לא מובנת היטב. כדי לחקור את CVST לעומק, דרוש מחקר פתופיזיולוגי נוסף. עם זאת, רוב שיטות המחקר הללו הן פולשניות ולכן קשה ליישם קלינית. בשל מגבלות רבות של מחקר קליני, למודלים של בעלי חיים יש יתרונות שאין להם תחליף במונחים של מחקר בסיסי ותרגומי.

הגורם ל- CVST הוא מורכב, שכן הופעתו הראשונית אינה מזוהה לעתים קרובות ומיקום היווצרות פקקת משתנה מאוד. למרבה המזל, מודלים של בעלי חיים יכולים להשיג שליטה טובה יותר בגורמים אלה. בעשורים האחרונים הוקמו מגוון מודלים של בעלי חיים CVST, ולכל דגם יש חסרונות משלו. על פי שיטות ייצור שונות, הם יכולים להיות מחולקים בערך לקטגוריות הבאות: פשוט SSS-ligation מודל6,7; SSS פנימי הזרקה מאיץ דגם8; פקקת SSS הנגרמת על ידי ברזל-כלורידמודל 9; פקקת SSS הנגרמת על ידי פוטוכימיה מודל10; ואת התסחיף העצמי-חסימה SSS מודל11. עם זאת, רוב המודלים הללו אינם מסוגלים לעקוף נזק פולשני לקליפת המוח של החיה ואינם מסוגלים לשלוט במדויק בזמן ובמיקום האיסכמיים. במודלים מסוימים, הטרומבוס יתחדש באופן ספונטני; בדגמים אחרים, ה-SSS מסתגר לצמיתות. בנוסף, ניתוחים מורכבים ו/או פציעות חמורות עלולים להשפיע על הממצאים הפתופיזיולוגיים הבאים במודלים אלה.

במחקר הנוכחי, תקע חוט הוכנס לתוך SSS של Sprague-Dawley (SD) חולדות כדי להקים בהצלחה מודל CVST כי מזער נזק, אפשר יכולת שליטה מדויקת, והניב יציבות טובה. בנוסף, הדמיית תהודה מגנטית של בעלי חיים קטנים (MRI) והדמיה של זרימת דם של כתמי לייזר שולבו כדי לאמת את יעילות המודל. הערכנו שינויים בזרימת הדם המוחי לפני ואחרי הקמת המודל שלנו, כמו גם הערכנו את היציבות של המודל שלנו, הנחת בסיס למחקרים נוספים לחקור את התרחשות, פיתוח, ומנגנונים פתופיזיולוגיים הקשורים של CVST.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

נהלים העוסקים בנושאים בבעלי חיים אושרו על ידי הנורמות הרפואיות וועדת האתיקה של האוניברסיטה הרפואית וונג'ואו והם בהתאם לחקיקה הסינית על שימוש וטיפול בחיות מעבדה.

1. הכנת תקע החוט, חולדות SD וציוד ניסיוני

  1. השתמש חוט ניילון בקוטר של 0.28 מ"מ כגוף העיקרי של תקע החוט.
    הערה: הרכות והקשיות של חוט הניילון צריכות להיות מתונות.
  2. מכסים קצה אחד של חוט הניילון בחומר סיליקון. אורך חלק הסיליקון של תקע החוט הוא כ 1.2 ס"מ, ואת הקוטר הוא כ 1.2 מ"מ. קצה הראש מחודד, וחלק הסיליקון גלילי. שמור עוד 5-7 ס"מ. חוט הניילון קל להדק וניתן לחתוך אותו בהתאם לצרכים ספציפיים לאחר הניתוח.
  3. השתמש 75% אתנול כדי להשרות את תקע החוט במשך 3 דקות לפני הניתוח ולשטוף כל אתנול שיורית עם מלוחים רגילים לפני חיבור.
  4. בחר 12 חולדות SD זכר במשקל בין 280 ל 320 גרם, באופן אקראי לחלק אותם לקבוצה מזויפת וקבוצה ניסיונית (n = 6 לכל קבוצה). לאחר שבוע של הסתגלות סביבתית, מהר החולדות במשך 12 שעות ומחסור במים אותם במשך 4 שעות לפני הניתוח.
  5. הכינו את הציוד הניסיוני הבא הדרוש לניסוי: מכונת הרדמה לבעלי חיים קטנה, מכשיר סטראוטקסי למוח, מיקרוסקופ מנתח, מקדחת גולגולת במהירות גבוהה, מספריים, פינצטה, מלקחיים בכלי הדם, מחזיק מחט, חוט מחט, מזרק 2 מ"ל, מערכת הדמיה של זרימת דם עם כתמי לייזר וסורק MRI של בעלי חיים קטנים.

2. בניית מודל SSS-אמבוליזציה SSS-עכברוש באמצעות אמבוליזציה חוט

  1. מניחים את חולדת ה-SD בתיבת הרדמה ומשתמשים במכונת הרדמה לבעלי חיים קטנים כדי לספק 4% isoflurane כדי לגרום להרדמה. לאחר מכן, השתמש במלקחיים כדי לאשר כי הגפיים האחוריות של חולדת SD ובהונות אינן מגיבות לצביטה מתונה.
  2. תקן במהירות את ה-SD ratwith שיער עליון מגולח בתנוחה נוטה על מכשיר סטראוטקסי במוח. לשמור על הרדמה עם 1.5-2.0% isoflurane (במהירות של 0.5 L / min), ולייצב את קצב הנשימה ב 40-60 נשימות / דקה. לייצב את טמפרטורת הגוף של החולדה באמצעות כרית חימום ב 37±0°C.
    1. החל חומר סיכה סטרילי עיניים עיניים עיניים לאחר החולדה ממוקמת על מסגרת סטראוטקסית כדי להגן על הקרניות מפני ייבוש במהלך הרדמה.
  3. לעקר את פני השטח בחלק העליון של ראש החולדה עם 5% יוד povidone לסירוגין שלוש פעמים עם 75% אתנול. בצע חתך בעור (2.0 ס"מ אורך) באמצע הראש, ולאחר מכן בזהירות לקלף את fascia העליון periosteum לחשוף את הגולגולת באופן מלא.
    1. אשרו את מיקומם של הפונטנלים האחוריים, הפונטנל האחורי, תפר הקורונל, תפר הסגיטלי ותפר הרינגבון.
  4. השתמש באזור שבין תפר הקורונל לתפר עצם הרינג כאזור התצפית של זרימת הדם. כדי למנוע מהגולגולת להשפיע על התצפית במהלך הדמיית זרימת הדם בלייזר, יש לדלל את הגולגולת באזור התצפית עד שכלי הדם יהיו גלויים בבירור. גודל הגולגולת הדקה צריך להיות כ 1.0 ס"מ × 1.0 ס"מ. שלב זה והבא מבוצעים כולם תחת מיקרוסקופ מנתח.
    1. במהלך שחיקת הגולגולת, השתמש מלוחים בטמפרטורה נורמלית כדי לשטוף את התרגיל שוב ושוב, כדי למנוע כוויות בטמפרטורה גבוהה קליפת המוח.
  5. השתמש מקדחה במהירות גבוהה כדי לטחון את הגולגולת בתוך חלון עצם 6.0 מ"מ x 4.0 מ"מ מרוכז bregma לחשוף את SSS של אזור bregma.
    1. השתמש מלוחים רגילים כדי לקרר את הגולגולת במהלך שחיקה. כאשר הגולגולת הופכת דקה, להשתמש בפינצטה כדי להסיר בזהירות את חתיכות העצם הנותרות, כדי למנוע קריעת SSS.
  6. בחר תקע חוט מתאים, להשתמש בנקודת ברגמה SSS כנקודת התקע, לנקב אותו בזהירות עם מחט מזרק 2 מ"ל, במהירות להכניס את ראש תקע החוט לנקודת התקע.
    1. בשלב זה, הזווית בין קצה ראש תקע החוט לבין SSS צריך להיות כ 30-45 °; לאחר מכן התאימו את הזווית בין קצה תקע החוט ל-SSS ל-0-10 מעלות, והכניסו לאט את ה-SSS למרכז עד שהראש יגיע לקצה האחורי של מפגש הסינוסים. לאחר מכן, לחתוך את החלק העודף של הזנב.
      הערה: דימום מהיר עלול להתרחש כאשר SSS מנוקב. אם לא ניתן להכניס במהירות את קצה תקע החוט לנקודת התקע בבת אחת, השתמש בכדור גזה או כותנה קטן כדי ללחוץ בעדינות על נקודת התקע תוך החלקה איטית למטה כדי לחשוף את נקודת התקע בזהירות, ולאחר מכן הכנס במהירות את קצה בורג התיל לתוך ה- SSS. לאחר תקע החוט מוכנס, אם יש דימום בנקודת התקע, חומרים עצירת דימום כגון ספוג ג'לטין ניתן להשתמש כדי לעצור את הדימום.

3. גילוי זרימת הדם על פני המוח של חולדות SD

  1. השתמש במקור אור לייזר כדי להאיר באופן אחיד את אזור התצפית של זרימת הדם. האור המוחזר נאסף על ידי מצלמה ומועבר למחשב לצורך ניתוח. השתמש בהגדרות הפרמטרים הבאות עבור מערכת הדמיית זרימת הדם של כתמי לייזר: אורך גל: ρ = 785 ננומטר; וזמן חשיפה לתמונה: T = 10 אלפיות השנייה.
  2. מרכז את אזור התצפית של זרימת הדם של חולדת SD לשדה הראייה של מערכת ההדמיה של זרימת הדם בלייזר-כתמים ונהל ניטור מתמשך של זרימת הדם על פני השטח של המוח במשך 2 דקות. לאסוף ולעבד את נתוני זרימת הדם לפני ואחרי תסחיף עבור כל חולדת SD, ולקבל את מפת זרימת הדם של כתמי לייזר של האזור שנצפה.
  3. לשטוף שוב ושוב את האזור המופעל עם מלוחים רגילים לשטוף פסולת עצם ושאריות. לתפור את העור (0 # חוט) ולחטא עם יודפור.
  4. שמור על טמפרטורת הגוף עד שהחולדה מתעוררת לאחר הניתוח ולאחר מכן בית בכלוב אחד עם מזון ומים שסופקו libitum המודעה. אין אפשרות לחבר את קבוצת המזויפים.
  5. לאחר השלמת איסוף הנתונים, בצע לאחר העיבוד.
    1. בחירה מלאה של אזור העניין (ROI) באמצעות הכלים המסופקים על ידי תוכנת מערכת ההדמיה של זרימת הדם בלייזר. הערכים המתקבלים הם ערך זרימת הדם הממוצע בהו"ר, וערכי זרימת הדם-המוחיים המקומיים לפני ואחרי התסחיף. השתמש בערך זרימת הדם לפני התסחיף כערך הבסיסי.
    2. בחר ארבעה ROIs ולמדוד את השינוי היחסי בזרימת הדם המוחי בכל החזר על ההשקעה, לידי ביטוי כשינוי באחוזים מהערך הבסיסי.

4. איתור מיקום חוט על בעלי חיים קטנים MRI

  1. השתמש בפרמטרים הבאים של דימות T2 משוקלל (T2WI) עבור מערכת דימות MRI: זמן הד (TE) = 33 אלפיות השנייה, זמן חזרה (TR) = 3000 אלפיות השנייה, מספר עירור (NEX) = 4, פרוסות = 28, עובי פרוסה = 0.8 מ"מ, גודל מטריצה = 256 * 256 מ"מ 2 ,זוויתהיפוך = 80°, שדה הראייה (FOV) = 30 * 30 מ"מ2, זמן סריקה = 6 דקות 24 שניות; פרמטרי אנגיוגרפיה תהודה מגנטית (MRA) הוגדרו כדלקמן: TE = 4.4 אלפיות השנייה, TR = 12 אלפיות השנייה, NEX = 4, פרוסות = 80, עובי פרוסה = 0.4 מ"מ, גודל מטריצה = 256 * 256 מ"מ 2 ,זוויתהיפוך = 80°, FOV = 30 * 30 מ"מ2, זמן סריקה = 16 דקות 23 שניות 40 אלפיות השנייה.
  2. תקן את החיה על שולחן הסריקה MRI, כייל את מיקום המוח על ידי מיקום סריקה, ולבצע סריקת רצף T2WI ו- MRA לאחר אישור המיקום.
  3. השתמש בהרדמה רציפה באמצעות מכונת הרדמה לבעלי חיים במהלך הגילוי. לאחר מכן, המתת חסד חולדות SD על ידי הזרקה תוך-אישית של pentobarbital מוגזם.
  4. רכישת תמונה ועיבוד לאחר: לאחר איסוף נתוני התמונה, על מנת לבחון את מצב תקע החוט ב- SSS בצורה ברורה יותר, השתמש בשיטת שיפור הצבע המדומה כדי להציג את תמונת T2WI של מוח החולדה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כדי להקים את מודל פקקת SSS-thrombosis של חולדת SD באמצעות שיטת התפר, יש להכין את התפר מראש (איור 1A), ויש להכין את הציוד הדרוש לניסוי (איור 1B). בשל האופי העדין של המבצע, הכנת המודל צריכה להסתיים תחת מיקרוסקופ מנתח. המדרגות הראשיות מוצגות באיור 2. כדי להקל על התיאור של הפרטים הספציפיים של תצפית זרימת הדם של הדגם, איור 3B מסמן את אזור התצפית של זרימת הדם, את חלון העצם ואת נקודת התקע, וגם מראה את מצב תקע ...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

במחקר זה, סוג חדש של מודל CVST הוקמה בהצלחה על ידי החדרת תקע חוט מתוצרת עצמית לתוך SSS של חולדות SD. בנוסף, הדמיית זרימת דם של כתמי לייזר ו- MRI של בעלי חיים קטנים שולבו כדי לפקח על שינויים בזרימת הדם על פני השטח של חולדות SD לפני ואחרי התסחיף על מנת לתקנן את התזמון והמיקום של איסכמי.

בשנת 1989, לונגה ואח 'עשה מודל חסימה MCA הפיך על ידי החדרת בנסיגה תפר ניילון מתוצרת עצמית לתוך העורק הראשי החיצוני של חולדות12. כדי לשפר את היציבות של מודל זה, מספר שיטות משופרות הוצגו מאז...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

המחברים מצהירים כי אין להם אינטרסים כלכליים מתחרים.

תודות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מחקר זה נתמך על ידי קרן המחקר המדעי גרנט עבור כישרונות ברמה גבוהה, אוניברסיטת פוג'יין לרפואה סינית מסורתית (X2019002-כשרונות).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
מזרק 2 מ"לבקטון, דיקינסון וחברה301940
מכשיר סטריאוטקסי מוחשנזן RWD Life Technology Co., Ltd68025
מיקרוסקופ ניתוחווהאן SIM Opto-technology Co.SIM BFI-HR PRO
מקדחת גולגולת במהירות גבוההשנזן RWD Life Technology Co., Ltd78046
מערכת הדמיית זרימת דם בלייזרווהאן SIM Opto-technology Co.SIM BFI-HR PRO
שנזןRWD חיים טכנולוגיה ושות', בע"מF31022-12
חוט מחטשנזן RWD חיים טכנולוגיה ושות', בע"מF33303-08
מספרייםשנזן RWD חיים טכנולוגיה ושות', בע"מS13029-14
סיליקה ג'לHeraeus Kulzer302785
מכונתהרדמה לבעלי חיים קטניםשנזן RWD חיים טכנולוגיה ושות', בע"מR540
חיות קטנות MRIBruker רפואי GmbHBiospec 94/30 USR
פינצטהשנזן RWD חיים טכנולוגיה ושות', בע"מF11029-11
מלקחיים כלי דםשנזן RWD חיים טכנולוגיה ושות', בע"מF22003-09
מחזיק מחט

מקורות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Bousser, M. G., Ferro, J. M. Cerebral venous thrombosis: an update. Lancet Neurology. 6 (2), 162-170 (2007).
  2. Guenther, G., Arauz, A. Cerebral venous thrombosis: A diagnostic and treatment update. Neurologia. 26 (8), 488-498 (2011).
  3. Stam, J. Thrombosis of the cerebral veins and sinuses. New England Journal of Medicine. 352 (17), 1791-1798 (2005).
  4. Einhäupl, K., et al. EFNS guideline on the treatment of cerebral venous and sinus thrombosis in adult patients. European Journal of Neurology. 17 (10), 1229-1235 (2010).
  5. Coutinho, J. M., Zuurbier, S. M., Stam, J. Declining mortality in cerebral venous thrombosis: a systematic review. Stroke. 45 (5), 1338-1341 (2014).
  6. Gotoh, M., Ohmoto, T., Kuyama, H. Experimental study of venous circulatory disturbance by dural sinus occlusion. Acta Neurochir (Wien). 124 (2-4), 120-126 (1993).
  7. Miyamoto, K., Heimann, A., Kempski, O. Microcirculatory alterations in a mongolian gerbil sinus-vein thrombosis model. Journal of Clinical Neuroscience. 8 (4), (2001).
  8. Ungersböck, K., Heimann, A., Kempski, aO. Cerebral Blood Flow Alterations in a Rat Model of Cerebral Sinus Thrombosis. Stroke. 24 (4), (1993).
  9. Röttger, C., et al. A new model of reversible sinus sagittalis superior thrombosis in the rat: magnetic resonance imaging changes. Neurosurgery. 57 (3), 573-580 (2005).
  10. Chen, C., et al. Photothrombosis combined with thrombin injection establishes a rat model of cerebral venous sinus thrombosis. Neuroscience. 306, 39-49 (2015).
  11. Yang, H., Meng, Z., Zhang, C., Zhang, P., Wang, Q. Establishing a new rat model of central venous sinus thrombosis and analyzing its pathophysiological and apoptotic changes. Journal of Neuroscience Methods. 203 (1), 130-135 (2012).
  12. Longa, E. Z., Weinstein, P. R., Carlson, S., Cummins, R. Reversible middle cerebral artery occlusion without craniectomy in rats. Stroke. 20 (1), 84-91 (1989).
  13. Fluri, F., Schuhmann, M. K., Kleinschnitz, C. Animal models of ischemic stroke and their application in clinical research. Drug Design, Development and Therapy. 9, 3445-3454 (2015).
  14. Wang, E., et al. Mapping tissue pH in an experimental model of acute stroke - Determination of graded regional tissue pH changes with non-invasive quantitative amide proton transfer MRI. Neuroimage. 191, (2019).
  15. Liu, C., et al. Identification of Vigilin as a Potential Ischemia Biomarker by Brain Slice-Based Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment. Analytical Chemistry. 91 (10), 6675-6681 (2019).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

Sprague DawleyMRI

מאמרים קשורים