מאמר שיטה

טכניקות טיפול להפחתת מתח בעכברים

41.4K צפיות

DOI:

10.3791/62593

25 בספטמבר 2021

במאמר זה

סיכום

מאמר זה מתאר טכניקת טיפול בעכברים, טכניקת הטיפול בתלת-ממד, המאפשרת טיפול שגרתי על ידי הפחתת התנהגויות דמויות חרדה ומציגה פרטים על שתי טכניקות קשורות קיימות (טיפול במנהרה וזנב).

תקציר

חיות מעבדה נתונות למניפולציות מרובות על ידי מדענים או ספקי טיפול בבעלי חיים. הלחץ זה גורם יכול להיות השפעות עמוקות על רווחת בעלי חיים והוא יכול גם להיות גורם מבלבל עבור משתנים ניסיוניים כגון צעדי חרדה. במהלך השנים פותחו טכניקות טיפול הממזערות את הלחץ הקשור לטיפול עם דגש מיוחד על חולדות, ותשומת לב מועטה לעכברים. עם זאת, הוכח כי עכברים יכולים להיות מורגלים מניפולציות באמצעות טכניקות טיפול. התרגלות עכברים לטיפול מפחיתה את הלחץ, מקלה על טיפול שגרתי, משפרת את רווחת בעלי החיים, מפחיתה את השתנות הנתונים ומשפרת את האמינות הניסיונית. למרות ההשפעות המועילות של הטיפול, הגישה לאיסוף זנב, שהיא מלחיצה במיוחד, עדיין נמצאת בשימוש נרחב. מאמר זה מספק תיאור מפורט והדגמה של טכניקה חדשה לטיפול בעכבר שנועדה למזער את הלחץ שחוותה החיה במהלך אינטראקציה אנושית. טכניקה ידנית זו מבוצעת במשך 3 ימים (טכניקה לטיפול בתלת-ממד) ומתמקדת ביכולתו של בעל החיים להרגיל את הנסיין. מחקר זה מראה גם את ההשפעה של טכניקות טיפול במנהרות שהוקמו בעבר (באמצעות מנהרת פוליקרבונט) וטכניקת איסוף הזנב. נחקרו במיוחד הם ההשפעות שלהם על התנהגויות דמויי חרדה, באמצעות בדיקות התנהגותיות (מבוך גבוה פלוס והאכלה מדוכאת חידוש), אינטראקציה מרצון עם ניסויים ומדידה פיזיולוגית (רמות קורטיקוסטרון). טכניקת הטיפול בתלת-ממד וטכניקת הטיפול במנהרות הפחיתו פנוטיפים דמויי חרדה. בניסוי הראשון, באמצעות עכברים זכרים בני 6 חודשים, טכניקת הטיפול בתלת-ממד שיפרה באופן משמעותי את אינטראקציית הנסיין. בניסוי השני, באמצעות נקבה בת חודשיים וחצי, היא הפחיתה את רמות הקורטיקוסטרון. ככזה, טיפול בתלת-ממד הוא גישה שימושית בתרחישים שבהם נדרשת אינטראקציה עם הנסיין או מועדפת, או כאשר טיפול במנהרות עשוי שלא להיות אפשרי במהלך הניסוי.

מבוא

עכברים וחולדות הם נכסים חיוניים למחקרים פרה-קליניים1,2 למטרות מרובות, כולל אנדוקרינלית, פיזיולוגית, מחקרים פרמקולוגיים או התנהגותיים2. מהמספר ההולך וגדל של מחקרים הקשורים בבעלי חיים, עלה כי משתנים סביבתיים בלתי מבוקרים כולל אינטראקציה אנושית משפיעים על תוצאות שונות במחקר ביו-רפואי3,4,5. זה אחראי על שונות משמעותית שנצפו על פני ניסויים ומעבדות מחקר4,5, מהווה אזהרה גדולה במחקר בבעלי חיים.

גישות שונות יושמו במטרה....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

נהלים הנוגעים לנושאים בעלי חיים אושרו על ידי הוועדה לטיפול בבעלי חיים CAMH ונערך בהתאם להנחיות המועצה הקנדית לטיפול בבעלי חיים.

הערה: שיטת הטיפול המתוארת בזאת יכולה לשמש בזני עכבר שונים, כולל קווים לא מהונדסים (C57/BL6, BalbC, CD1, SV129 וכו ') וקווים מהונדסים. זה יכול לשמש גם עם עכברים צעירים או זקנים, וציין כי צעירים (4-6 שבועות) עכברים נוטים להיות קצת יותר פעילים מאשר עכברים מבוגרים או זקנים, במיוחד ביום 1.

1. הכנה ניסיונית

  1. לפני תחילת הלימודים, לפי הנחיות ARRIVE21, הקצה עכברים באופן אקראי לכל קבוצת טיפול (טיפול בתלת-ממד, טיפול במנהרות או טיפול בזנב).
  2. זהה את החדר לביצ....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

שני מחקרים נפרדים בוצעו עם עכברי C57BL/6. המחקר #1 כלל זכרים בני 6 חודשים ומחקר #2 כללו נקבות בנות חודשיים וחצי (N= 36/מחקר) ממעבדות ג'קסון (Cat #000664). עכברים הגיעו למתקן בגיל חודשיים. בעוד מחקר #2 נקבות טופלו ונבדקו שבועיים לאחר ההגעה, מחקר #1 זכרים טופלו ונבדקו רק בגיל 6 חודשים (עיכוב עקב השבתת המגפה העולמית). במהלך תקופה זו, עכבר אחד ממחקר #2 מת, לפני תחילת הטיפול בניסויים. המחקר #1 עכברים זכרים טופלו על ידי צוות מתקן בעלי חיים. כל העכברים נשמרו במחזור בהיר/כהה של 12 שעות (7:00 ON, 19:00 OFF), ניתנה גישה למזון ומים.......

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

מחקר זה ופיתוח השיטה מבוססים על התצפית כי טיפול בטכניקות בעכברים עדיין מתעלמים על ידי הקהילה המדעית, וכי מעבדות מסוימות עדיין מסרבות ליישם הרגלה או טיפול בטכניקות כדי להפחית את הלחץ והתגובה של בעלי החיים שלהם לפני ניסויים. בעוד המייצג מחויבות זמן, טיפול בבעלי חיים מספק השפעות מועילות לבעלי החיים שעשויים לתרום להצלחת הניסויים להתבצע ומונע ניסויים להתבצע מספר פעמים בשל שונות נתונים או תגובת יתר של בעלי חיים. השימוש בטכניקת הטיפול בתלת-ממד הפחית את ניסיונות הבריחה בעכברים. זה גם הגביר את האינטראקציה עם הנסיין וירידה פנוטיפי.......

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

למחברים אין ניגוד אינטרסים לחשוף.

תודות

המחברים מודים לוועדה לטיפול בבעלי חיים של CAMH על תמיכתם בעבודה זו, כמו גם למטפלים בבעלי חיים של CAMH שסיפקו משוב נרחב על התועלת של ההליך, המניעים את ביצוע הניסויים המתוארים והגשת הפרוטוקול המפורט למשתמשים אחרים. עבודה זו מומנה בחלקה על ידי CAMH BreakThrough Challenge, שהוענק ל- TP, ועל ידי כספים פנימיים מ- CAMH.

....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
23 גרם x 1 אינץ'. BD PrecisionGlide שימוש כללי במחט היפודרמית סטרילית. סוג קיר רגיל ושיפוע רגיל.BD2546-CABD305145מחטים לאיסוף דם
BD Vacutainer® צינורות EDTA לאיסוף דם ורידי עם לבנדר BD Hemogard™ סגירה, 2.0 מ"ל (13x75 מ"מ), 100/pkBD367841צינורות מצופים EDTA לאיסוף דם
מיטה' o קלחים ו-frac14; ” מצעי חיות מעבדה של קלחי תירסBed-O-CobsBEDO1/4מצעים חדשניים להאכלה מדוכאת
צנטריפוגה צנטריפוגהאפנדורף5424 Rלצנטריפוגה של דם.
Corticosterone ELISA KitArbor מבחניםK003-H1W
מצלמה דיגיטליתPanasonicHC-V770מצלמה להקלטת אינטראקציות EPM/Experimenter
מבוך מוגבה פלוסתוצרת ביתn/aמבוך מותאם אישית העשוי מארבע זרועות פרספקס שחורות (שתי זרועות פתוחות (29 ס"מ אורך על 7 ס"מ רוחב) ושתי זרועות סגורות (29 ס"מ אורך x 7 ס"מ רוחב עם קירות בגובה 16 ס"מ)) היוצרות צורת צלב כאשר שתי הזרועות הפתוחות מנוגדות זו לזו מוחזק 55 ס"מ מעל הרצפה
אתנולMedstore House מותג39753-P016-EA95לדלל ל-70% עם מים מזוקקים, לניקוי
Ethovision XT 15Noldusn/aתוכנת מעקב אחר בעלי חיים אוטומטית
מעבדת דיאטת מכרסמיםדיאטת מכרסמים דיאטה 5001דיאטת מכרסמים סטנדרטית
כרטיס זיכרוןKingstone טכנולוגיהSDA3/64GBלהקלטת וידאו והעברת קבצים
תא האכלה מדוכא חידושתוצרת ביתn/aתא בדיקת פרספקס לבדיקה מותאמת אישית עם רצפות וקירות שקופים באורך 62 ס"מ, על 31 ס"מ רוחב על 40 ס"מ גובה.
צינורות Parlycarbonateתוצרת ביתn/aבאורך 13 ס"מ ובקוטר 5 ס"מ
פורינה אתמול' s חדשות מצעי עיתון ממוחזריםPurinan/aמצעים סטנדרטיים
BiotekEpoch Microplate Reader
מעבדה ספקטרופוטומטר

מקורות

  1. Deacon, R. M. Housing, husbandry and handling of rodents for behavioral experiments. Nature Protocols. 1 (2), 936(2006).
  2. Bryda, E. C. The Mighty Mouse: the impact of rodents on advances in biomedical research. Missouri Medicine. 110

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

מאמרים קשורים