מאמר שיטה

מערכת זלוף ריאות מבודדת במודל הארנב

DOI:

10.3791/62734

⸱

15 ביולי 2021

 ,  ,  , 
1Departamento de Investigación en Hiperreactividad Bronquial, Instituto Nacional de Enfermedades Respiratorias, 2Facultad de Medicina, Universidad Nacional Autónoma de México

במאמר זה

סיכום

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

הכנת ריאות ארנב מבודד הוא כלי סטנדרטי זהב במחקר ריאתי. פרסום זה נועד לתאר את הטכניקה כפי שפותחה לחקר מנגנונים פיזיולוגיים ופתולוגיים המעורבים בתגובה בדרכי הנשימה, שימור ריאות ומחקר פרה-אקליני בהשתלת ריאות ובבצקת ריאות.

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מערכת זלוף הריאות המבודדת נמצאת בשימוש נרחב במחקר ריאתי, ותרמה לתרומת הפעילות הפנימית של הריאות, הן מיקרו והן מקרוסקופית. טכניקה זו שימושית באפיון פיזיולוגיה ופתולוגיה ריאתית על ידי מדידת פעילויות מטבוליות ותפקודים נשימתיים, כולל אינטראקציות בין חומרים במחזור הדם והשפעות של חומרים בשאיפה או חדורים, כמו בבדיקות סמים. בעוד שיטות במבחנה כרוכות חיתוך פולחן של רקמות, מערכת זלוף ריאות ex vivo מבודד מאפשר לעבוד עם איבר פונקציונלי מלא המאפשר את המחקר של פונקציה פיזיולוגית מתמשכת תוך יצירה מחדש של אוורור וזלוף. עם זאת, יש לציין כי ההשפעות של היעדר innervation מרכזי ניקוז לימפתי עדיין צריך להיות מוערך במלואו. פרוטוקול זה נועד לתאר את ההרכבה של מנגנון הריאות המבודד, ואחריו מיצוי כירורגי ו cannulation של ריאות ולב מחיות מעבדה ניסיוניות, כמו גם להציג את טכניקת זלוף ועיבוד אותות של נתונים. הכדאיות הממוצעת של הריאות המבודדות נעה בין 5-8 שעות; במהלך תקופה זו, חמיץ נימים ריאתי עולה, גרימת בצקת ופגיעה בריאות. הפונקציונליות של רקמת ריאות שהשתמרה נמדדת על ידי מקדם סינון נימי (Kfc), המשמש לקביעת היקף בצקת הריאות לאורך זמן.

מבוא

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ברודי ודיקסון תיארו לראשונה את מערכת זלוף הריאות לשעבר בשנת 1903 1. מאז, הוא הפך לכלי תקן זהב לחקר הפיזיולוגיה, הפרמקולוגיה, טוקסיקולוגיה וביוכימיה של הריאות2,3. הטכניקה מציעה דרך עקבית וניתנת לשחזור להעריך את הכדאיות של השתלות ריאות, ולקבוע את ההשפעה של מתווכים דלקתיים כגון היסטמין, מטבוליטים חומצה ארכידונית, וחומר P, בין היתר, כמו גם את האינטראקציות שלהם במהלך תופעות ריאות כגון ברונכוקונסטריה, אטלקטטזיס, בצקת ריאות. מערכת הריאות המבודדת הייתה טכניקה מרכזית בחשוף התפקיד החשוב של הריאות בחיסול אמינים ביוגניים ממחזור הדם הכללי4,5. בנוסף, המערכת שימשה להערכת הביוכימיה של פעילי שטח ריאתיים6. במהלך העשורים האחרונים, מערכת זלוף הריאות לשעבר הפכה לפלטפורמה אידיאלית למחקר השתלת ריאות7. בשנת 2001 תיאר צוות בראשות סטיג סטיין את היישום הקליני הראשון של מערכת זלוף הריאות ex-vivo על ידי שימוש בו כדי לשחזר את ריאותיו של תורם בן 19, שנדחה בתחילה על ידי מרכזי השתלה בשל פציעותיו. הריאה השמאלית נקצרה וחולבה במשך 65 דקות; לאחר מכן, הוא הושתל בהצלחה בגבר בן 70 עם COPD8. מחקר נוסף על שיפוץ ריאות באמצעות זלוף ex-vivo הוביל לפיתוח טכניקת טורונטו עבור זלוף ריאות מורחב כדי להעריך ולטפל ריאות תורם פצוע9,10. מבחינה קלינית, מערכת זלוף הריאות ex-vivo הוכיחה להיות אסטרטגיה בטוחה כדי להגדיל את מאגרי התורמים על ידי טיפול ושיפוץ ריאות תורם תת-סטנדרטי, הצגת שום הבדל משמעותי בסיכונים או תוצאות נגד תורמים קריטריונים סטנדרטיים10.

היתרון העיקרי של מערכת זלוף הריאות המבודדת הוא שניתן להעריך את הפרמטרים הניסיוניים באיבר פונקציונלי מלא המשמר את תפקודו הפיזיולוגי תחת מערך מעבדה מלאכותי. יתר על כן, הוא מאפשר מדידה ומניפולציה של אוורור מכני ריאתי לנתח את המרכיבים של פיזיולוגיה ריאתית כגון התנגדות דרכי הנשימה, התנגדות כלי דם כוללת, חילופי גזים, היווצרות בצקת, אשר עד כה לא ניתן למדוד בדיוק vivo על חיות מעבדה2. ראוי לציין, את הרכב הפתרון שבו הריאה מנוטרלת ניתן לשלוט באופן מלא, המאפשר תוספת של חומרים כדי להעריך את ההשפעות שלהם בזמן אמת איסוף מדגם מ זלוף למחקר נוסף11. חוקרים העובדים עם מערכת הריאות המבודדת צריכים לזכור כי אוורור מכני גורם לריקבון רקמת הריאה המקצרת את זמן השימוש שלה. נפילה הדרגתית זו בפרמטרים מכניים יכולה להתעכב באופן משמעותי על ידי ניפוח יתר של הריאות מדי פעם במהלך הניסוי4. ובכל זאת, ההכנה בדרך כלל לא יכולה להימשך יותר משמונה שעות. שיקול נוסף במערכת זלוף הריאות לשעבר הוא היעדר ויסות עצבים מרכזי וניקוז לימפתי. ההשפעות של היעדרם עדיין לא מובנות במלואן ועלול להיות מקור להטיה בניסויים מסוימים.

טכניקת מערכת זלוף הריאות המבודדת יכולה להתבצע במודל הארנב עם רמה גבוהה של עקביות ושחזור. עבודה זו מתארת את ההליכים הטכניים והניתוחיים ליישום טכניקת זלוף הריאות המבודדת ex-vivo כפי שפותחה עבור מודל הארנב במכון נאסיונאל דה אנפרמדדס Respiratorias במקסיקו סיטי, בכוונה לחלוק את התובנות ולספק מדריך ברור על צעדים מרכזיים ביישום מודל ניסיוני זה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מערכת זלוף מבודד במודל הארנב כבר בשימוש נרחב במעבדת Hyperresponsiveness הסימפונות במכון הלאומי הלאומי דה Enfermedades Respiratorias. הפרוטוקול כולל ארנבות ניו זילנדיות במשקל משוער של 2.5-3 ק"ג. כל בעלי החיים נשמרו בתנאי ויבריום סטנדרטיים והאכלת ליביטום על פי ההנחיות המקסיקניות הרשמיות לחיות מעבדה (NOM 062-ZOO-1999) ותחת המדריך לטיפול ושימוש בחיות מעבדה (מהדורה 8, 2011). כל ההליכים בבעלי חיים ושיטות טיפול בבעלי חיים שהוצגו בפרוטוקול זה אושרו בעבר על ידי ועדת האתיקה של המכון הלאומי הלאומי של Enfermedades Respiratorias.

הערה: הכנת מערכת זלוף הריאות המבודדת כרוכה במוות מכוון של בעל חיים בהרדמה ובאמצעות המתת חסד.

1. ציוד והכנת מנגנון.

  1. סידור ציוד:
    1. הגדר שולחן ניתוח עם גודל בהתאם למשקל הארנב.
    2. הר את הכיסוי של בית החזה המלאכותי על עמוד הפלדה עם תא הזכוכית מתחת ואת מכונת ההנשמה עם משאבת רולר על ידי הצדדים.
    3. ודא כי הכיסוי נוטה בקלות יש צינורית קנה הנשימה בקנה אחד עם קנה הנשימה כדי לאפשר חיבור מהיר יותר.
  2. בית החזה המלאכותי:
    הערה: זהו חלק חיוני של המערכת. הוא מורכב מתא זכוכית מצופה מים החתום על ידי כיסוי מיוחד. הכיסוי עובד כמחזיק האיברים עם החיבורים כדי לנפח את קנה הנשימה ואת כלי הדם המוטמעים בו.
    1. הקימו סילון ונטורי המופעל על ידי אוויר דחוס כדי ליצור את הלחץ השלילי בתוך בית החזה המלאכותי.
      הערה: מודול בקרת האוורור (VCM) מאפשר התאמות נפרדות של לחצים מעוררי השראה ותפוגת קצה, כמו גם קצב נשימה והיחס בין משך מעורר השראה למשך המחזור הכולל.
  3. מנגנון:
    1. ודא כי מנגנון עובד בדרך כלל מורכב עמוד פלדה ראשי רכוב על צלחת בסיס מחזיק את בית החזה המלאכותי, עם pneumotachometer ומתמר משקל ממוקם מעליו ומאחורי סליל התחממות מראש עם מלכודת בועה.
    2. חבר מתמר לחץ דיפרנציאלי אחד לדשא ריאות ועוד אחד ללחץ התאי. הגדר זוג אחר של מתמרים לחץ מאחורי בית החזה כדי למדוד זלוף ולחצים ורידים.
    3. חבר את מלאי ההחלפה מתחת למחמצן עם אלקטרודה ברמה ומערכת האוורור ליד המנגנון.

2. מיצוי כירורגי של בלוק לב ריאה.

  1. הרדמה:
    1. השתמש בשילוב של סם הרגעה (קסילאסין) וברביטורט (פנטוברביטל).
      הערה: קוקטיילים הרדמה שונים ניתן להשתמש ללא השפעה על תוצאות ניסיוניות.
    2. ראשית, להסתים את הארנבים הניו זילנדיים הבריאים עם הזרקה תוך שרירית אחת של קסילאסין הידרוכלוריד (3-5 מ"ג/ק"ג). ודא כי הארנבים להישאר רגוע ונינוח כדי לאפשר מניפולציה נוספת לאחר כמה דקות של הזריקה.
    3. לאחר ההרעשה, השתמש בוורידים השוליים (לרוחב) האוזן כגישה להרדמת הארנבים עם הזרקה תוך ורידי של נתרן פנטוברביטל (28 מ"ג/ק"ג).
  2. ניטור:
    1. כדי למנוע הרדמה לא מספקת או דיכאון מוגזם של תפקודי לב ונשימה, לפקח על הפרמטרים הבאים. כדי להעריך את עומק ההרדמה, בצע בדיקת צביטת בוהן.
    2. ודא כי הקרום הרירי הוא ורוד. גוונים כחולים או אפורים מצביעים על היפוקסיה.
    3. ודא כי קצב הלב הוא בין 120-135 פעימות/ דקה, וכי טמפרטורת הגוף אינה יורדת מתחת 36 °C (5 °F).
  3. מיקום בעלי חיים:
    1. מגלחים את פלג פלג עליון של הארנב ומניחים את החיה על שולחן הניתוחים בתנוחה עלית. מניחים את מערכת האוורור ליד השולחן, מאחורי ראשו של הארנב, כדי לאפשר חיבור הצינורית במהירות לאחר קנה הנשימה כדי למנוע נזק tissular.
  4. חצירה ו tracheotomy:
    1. לנתח את העור עם פירוק קו חציוני גחוני של 3-5 ס"מ מן הסרעפת עד הצוואר.
    2. עם המספריים הפועלים, לחתוך את 2/3 של קנה הנשימה בין שתי טבעות סחוס כדי להכניס את צינורית קנה הנשימה דרך קרום סיבי קנה הנשימה.
    3. הכנס 5 מ"מ (קוטר חיצוני; OD) צינורית קנה הנשימה דרך קרום סיבי קנה הנשימה ולהשתמש 4-0 תבר משי כדי לתקן את זה בזהירות.
    4. מניחים מלקחיים או פינצטה מתחת לקנה הנשימה כדי להבטיח שהזנובה לא תתכופף כנגד קנה הנשימה.
  5. אוורור בלחץ חיובי:
    1. כל עוד הריאות נשארות מחוץ לבית החזה המלאכותי, השתמש במשאבת נשימה של מינים קטנים כדי לאוורר לחץ חיובי על מנת למנוע קריסת ריאות במהלך הניתוח.
    2. ליזום אוורור דרך צינור קנה הנשימה מחובר משאבת הנשימה במהירות לאחר tracheotomy ולפני בית החזה נפתח.
    3. הגדר את עוצמת הגאות והשפל ב- 10 מ"ל/ק"ג.
      הערה: בהתאם להגדרת הניסוי ודגם בית החזה המלאכותי, ספק אוורור בלחץ חיובי על ידי אותה משאבת אוורור המשמשת לאספקת לחץ שלילי או אחר, המעניקה שינון מחדש מהיר.
  6. ניקור חזה ודמום:
    1. כדי לגשת לחלל בית החזה, השתמש באזמל או במספריים כדי לפתוח את דופן בית החזה ולבצע סטרנוטומיה בינונית עד לשליש העליון של בית החזה.
    2. החזק את חצאי בית החזה פתוחים על ידי שני מפסקים. מספר מדפים ריאות בדרך כלל מקיפים את הלב.
    3. לוקליזציה של הוועד העליון והנחית והפנים אותם עם חוטים.
    4. לפני חיקת החיה, לזהות את החדר הימני ולהזריק 1000 ממשק משתמש / קילוגרם של הפרין.
    5. מיד לאחר ההזרקה, ליגט את הוועד העליון והנחית עם החוט טרום לולאה ולבצע פימום.
  7. קציר לב-ריאה:
    1. קציר את בלוק לב ריאה בעדינות ובמהירות. השתמש ביתור דיגיטלי ישיר או מספריים קפיציים כדי להפריד את רקמת החיבור כדי להסיר את הריאות מבית החזה.
    2. לנתח את כלי היתווה באזור, כמו גם את הוושט.
    3. חותכים דרך המנובריום סטרני כדי להרחיב את החזה המהודרת לכיוון צינורית קנה הנשימה, ומשחררים את קנה הנשימה משני הצדדים מרקמות חיבור.
    4. עכשיו, לכרות את קנה הנשימה מעל צינור קנה הנשימה. משכו בעדינות את הצינורית בציר קרניובודאלי כאשר הקיבעון של קנה הנשימה והריאות נפלט.
  8. קנוניציה:
    1. הרימו את הריאות המבודדות מחוץ לבית החזה והניחו אותן בזהירות על גזה סטרילית על צלחת פטרי.
    2. כדי למנוע אטאלקתזיס, יש לאוורר את הריאות באמצעות אוורור בלחץ חיובי עם לחץ חיובי של תפוגת קצה (PEEP) שנקבע על 2 ס"מH2O.
    3. הסר את החדרים על ידי חיתוך אותם את הלב ברמה של חריץ atrioventricular.
    4. לאחר פתיחת שני החדרים, להציג את צינורית עורק הריאות OD 4.6 מ"מ עבור הארנב עם סל דרך עורק הריאות ולהציג את צינורית אטריום שמאל OD 5.9 מ"מ עבור הארנב עם הסל דרך שסתום מיטרלי לתוך האטריום השמאלי.
    5. השתמש תיל משי 4-0 בעורק הריאות והשאיר אטריום כדי לתקן את הצינוריות. כלול את הרקמות שמסביב קשירה של עורק הריאות ואטריום שמאל כדי למנוע את distension של מבנים אלה.
    6. הזריק 250 מ"ל של תמיסת תמיסת מלח איזוטונית דרך הצינורית העורקים כדי לשטוף את הדם הנותר ממיטת כלי הדם.

3. טכניקת זלוף.

  1. ההתקנה:
    1. מניחים את הריאות המבודדות בזהירות לתוך תא הריאות.
    2. חבר את קנה הנשימה למשתנה על מכסה התא.
    3. חבר את כלי השיט המנוצלים למערכת ההזדווגות.
    4. סגור את התא ותאבטח אותו עם המנעול הסיבובי.
      הערה: מעגל הזלוף המחודש מורכב ממאגר ורידים פתוח, משאבה פרייסטלית, מחליף חום ומלכודת בועה.
    5. בשלב זה, חבר את מכסה התא ולעבור מעל stopcock לעבור חיובי אוורור לחץ שלילי. כדי לבדוק את אוורור הלחץ השלילי של הריאות וסגירה אטומה של התא, בדוק את טיול הנשימה של לחץ הריאות והתא על מד הלחץ.
    6. לחדיר את הריאות עם 200 מ"ל של זלוף מלאכותי ללא דם (מאגר ביקרבונט קרבס-רינגר המכיל 2.5% אלבומין בקר).
    7. התחל את זרימת זלוף ב 3 מ"ל / דקה / קילוגרם, ולאחר מכן לאט להגביר את הזרימה על פני תקופה של 5 דקות ל 5 מ"ל / דקה / קילוגרם. להגיע לזרימה של 8 מ"ל / דקה / קילוגרם במהלך 5 הדקות הבאות ולאחר תקופה נוספת 5 דקות להגיע שטף מקסימלי של 10 מ"ל / דקה / קילוגרם. שמור על הימנעות מאוויר מלהיכנס למעגל.
      הערה: לשמור על ה- pH ועל הטמפרטורה של זלוף בטווחים פיזיולוגיים (pH 7.4-7.5; טמפרטורה, 37 °C(38 °F) כדי להתאים את ה- pH, הוסף NaHCO3 (1N) או הגדל את זרימת הפחמן הדו-חמצני. לחלופין, השתמש HCl (0.1N) כדי חומצה.
  2. פרמטרים:
    1. בדוק אם הפרמטרים שנקבעו מראש של זלוף ואוורור מוגדרים כנדרש.
    2. לאוורר את הריאות עם אוויר לח בתדר של 30 bpm, נפח גאות ושפל של 10 מ"ל / קילוגרם, ולחץ תפוגה קצה (Pe) של 2 cmH2O.
      הערה: לחץ עורקי ריאתי (0-20 מ"מ כ"ג) מתאים לגובה רמת הנוזל בחמצן או במאגר בסנטימטרים מעל תא המטען הריאתי, בעוד לחץ ורידים ריאתי מתאים לגובה תא שיווי משקל הלחץ מעל האטריום השמאלי. ניתן לשנות את שני הערכים. שים לב כי לחץ אטריום שמאל הוא גם 0-20 מ"מ כ"ג.
  3. השגת תנאי אזור 3:
    1. השתמש בשני הצנתרים המחוברים ליציאות הצדדיות של הצינורית המאובטחות בעורק הריאות, אטריום שמאלי ומתמרי לחץ כדי למדוד את הלחצים העורקיים (Pa) והווריים (Pv).
    2. הגדר את הלחצים הבסיסיים ברמת hilum הריאות (אפס הפניה).
    3. לערוך את הניסויים בתנאי אוורור באזור 3. כדי להשיג זאת, לחכות 10-15 דקות כדי להשיג שיווי משקל המאופיין במצב איזוגרבימטרי.
    4. ודא כי הלחץ ורידים גבוה יותר מאשר הלחץ המכתשי (Palv) ואת הלחץ העורקי נשאר גבוה יותר מאשר שניהם (Pa > Pv > Palv) עבור תנאי אזור 3 להתרחש.
    5. ודא כי משקל הריאות נשאר קבוע ועורקי ולחצי עזיבות שמאל יציבים כדי להשיג תנאי אזור 3 כדי לפתוח מספר מרבי של כלי ריאות ולשמור על תוכן המיטה microvascular במהלך הניסוי.
      הערה: המדידה של Kfc כאינדיקטור לבצלת ריאות אין וריאציה בין מערכת הידנית למערכת זלוף אוטומטית.
  4. שליטה אלקטרונית ועיבוד אותות: ודאו כי זרימת הנשימה, שינויי משקל, לחץ מיקרו-וסקולרי, נפח גאות ושפל, התנגדות כלי דם, בין היתר, רשומים ביחידת אלקטרוניקה מרכזית מרובה המשלבת אותות המגיעים מהמתמרים ומציגה אותם במערכת ההערכה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מערכת זלוף הריאות המבודדת מאפשרת מניפולציה של איברים לביופסיה, איסוף דגימות מזלוף ואיסוף נתונים בזמן אמת של פרמטרים פיזיולוגיים. המערכת המבודדת יכולה לשמש לבדיקת השערות רבות המערבות פונקציות שונות ותופעות ריאות, מפעילות מטבולית ואזיזמטית ועד להיווצרות בצקת ותקופות שימור להשתלות ריאות.

איור 1 מציג תרשים של מערכת זלוף הריאות המבודדת שהורכבה במלואה יחד עם מערכת האוורור ורכישת הנתונים המחושבים. רכיב ההזנקה של המערכת מבטיח כי זלוף זורם כל הזמן דרך הריאות המבודדות. עורק...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

עבודה זו מציגה מבט כללי על מערכת זלוף הריאות המבודדת, טכניקה חיונית במחקר פיזיולוגיה ריאתית. מערכת זלוף הריאות המבודדת מציעה מידה רבה של רב-תכליתיות בשימושיה ומאפשרת הערכה של מספר פרמטרים רלוונטיים בבדיקת מגוון רחב של השערות15. מערכת ריאות מבודדת היא כלי בעל נוכחות כלל עולמית, שבעשור האחרון ביססה עוד יותר את הרלוונטיות שלה להערכות ספציפיות לאיברים וגם הרחיבה את התועלת שלה כהרחבה של טכנולוגיות חדשניות טיפולים חדשניים הכוללים תאי גזע מזנכימליים16 ו- CRISPR/Cas9 הנדסת גנום17, בין היתר.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

המחברים אינם מצהירים על ניגודי עניינים.

תודות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

המחברים מבקשים להודות לדוקטורט בטינה זומר סרוונטס על תמיכתה בכתיבת כתב היד הזה, וקיציה אלנה לארה ספונט על תמיכתה באיורים.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
צינורות 2 מצבים Tygon E-Lab, 3.17 מ"מ ID, 12/חבילה, שחור/לבןהוגו סאקס אלקטרוניק (HSE)73-1864
לאוורור בלחץ חיובי במתאם IPL-4הוגו זקס אלקטרוניק (HSE)73-4312
לאוורור בלחץ חיובי ב-IPL-4הוגו זקס אלקטרוניק (HSE)73-4312
אספקת גז חלופית ללא לחץ עבור IPL-4: כדי לספק לקנה הנשימה תערובת גז שונה מאוויר החדר במהלך אוורור שליליהוגו סאקס אלקטרוניק (HSE)73-4309
יחידת בסיס לארנב לחזיר עובר ריאה מבודדתהוגו סאקס אלקטרוניק (HSE)73-4138
סרום בקר A2:D41אלבומין אבקת ליופיליזציהסיגמא3912500 גרם
סידן כלורי, CaCl<תת>2· 2H2O.JT Baker10035-04-8
בקבוקונים קריוגנייםקורנינג4306592 מ"ל
D-glucosa, C6H12O6.סיגמאG5767
מתמר דיפרנציאלי בלחץ נמוך DLP2.5, טווח +- 2.5 סמ"ק <>תת2O, מחבר HSEהוגו זקס אלקטרוניק (HSE)73-3882
מתמר לחץ דיפרנציאלי MPX, טווח +- 100 סמ"ק <תת>2O, מחבר HSEהוגו זקס אלקטרוניק (HSE)73-0064
אפנדורף
אתנול קלדון
מוחלטת14 מ"ל
משאבה פריסטלטית של הרווארד P-230 (עם תיבת בקרה וכונן מנוע P-230)הוגו סאקס אלקטרוניק (HSE)70-7001
פנאומוטכומטר ליניארי מחומם 0 עד 10 ליטר / דקה טווח זרימההוגו סאקס אלקטרוניק (HSE)59-9349
בקר חימום למד פנאומוטכומטר יחיד 230 VAC, 50 הרץHugo Sachs Elektronik (HSE)59-9703
HeparinPISA5000 UI
HPLC Column (C18 100A 5U)Alltech98121213150 מ"מ x 4.6 מ"מ
מסנן מזרק הידרופיליMillexSLLGR04NL4 מ"מ
מערכת ליבת IPL-4 לארנב מבודד לריאה חזיר עוברית, 230הוגו זקס אלקטרוניק (HSE)73-4296
מערכת ליבת IPL-4 לריאה מבודדת של ארנב לחזיר עוברי, 230 VHugo Sachs Elektronik (HSE)73-4296
מאגר זכוכית מעוטר לתמיסת חיץ, עם פריט וצינורות, 6.0 ליטרהוגו זקס אלקטרוניק (HSE)73-0322
סירקולטור תרמוסטטי Lauda, סוג E-103, 230 וולט/50 הרץ, נפח אמבטיה 3 ליטר, טווח טמפרטורות 20 עד 150 מעלות; CHugo Sachs Elektronik (HSE)73-0125
צינורית אטריום שמאלית לארנב עם סל, OD 5.9 מ"מHugo Sachs Elektronik (HSE)73-4162
מתמר לחץ דם בטווח נמוך P75 למודול PLUGSYSהוגו זקס אלקטרוניק (HSE)73-0020
מגנזיום סולפט הפטהידרט, MgSO4· 7H2OJT Baker10034-99-8
צינורמיקרוצנטריפוגה430909
אפשרות בקרת אוורור בלחץ שלילי עם ווסת לחץ עבור IPL-4הוגו זקס אלקטרוניק (HSE)73-4298
ארנבות
PISABENTAL (נתרן פנטוברביטל)PISAQ-7833-215
מארז PLUGSYS, סוג 603* 7הוגו סאקס אלקטרוניק (HSE)73-0045
PLUGSYS TCM מודול מונה זמןהוגו זקס אלקטרוניק (HSE)73-1750
מודול מגבר מתמר PLUGSYS (TAM-A)הוגו זאקס אלקטרוניק (HSE)73-0065
מודול מגבר מתמר PLUGSYS (TAM-D)הוגו זקס אלקטרוניק (HSE)73-1793
מודול בקרת אוורור PLUGSYS VCM-4R עם ווסת לחץהוגו זקס אלקטרוניק (HSE)73-1755
אשלגן כלורי, KCl.JT Baker3040-01
אשלגן דימימן פוספט, KH2PO4JT Baker7778-77-0
פרוסין (קסילאצין קלורוהידרט)PISAQ-7833-099
צינורית עורק ריאה לארנב עם סל, OD 4.6 מ"מהוגו זקס אלקטרוניק (HSE)73-4161
סכיןאזמל
בקר סרוו סרוטונין 5-HT
לזילוף (SCPHugo Sachs Elektronik (HSE)73-2806
צינור מיקרוצנטריפוגה מכסה הצמדCostar36201.7 מ"ל
נתרן ביקרבונט, NaHCO3sigmaS6014
נתרן כלורי, NaCl.סיגמאS9888
כפפות כירורגיות מס' 7 1/2
כפפות כירורגיות מס' 8
צינורות טייגוןMasterflex
צינורית קנה הנשימה לארנב, OD 5.0 מ"מהוגו סאקס אלקטרוניק (HSE)73-4163
מתאם צינורות צינורות פלקון בדרגת HPLCזלנד חדשות

מקורות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Dixon, W. E. Contributions to the physiology of the lungs: Part I. The bronchial muscles, their innervation, and the action of drugs upon them. The Journal of Physiology. 29 (2), 97-173 (1903).
  2. Nelson, K., et al. Animal models of ex vivo lung perfusion as a platform for transplantation research. World Journal of Experimental Medicine. 4 (2), 7-15 (2014).
  3. Roman, M. A., Nair, S., Tsui, S., Dunning, J., Parmar, J. S. Ex vivo lung perfusion: a comprehensive review of the development and exploration of future trends. Transplantation. 96 (6), 509-518 (2013).
  4. Delaunois, A., Gustin, P., Ansay, M. Multiple muscarinic receptor subtypes mediating pulmonary oedema in the rabbit. Pulmonary Pharmacology. 7 (3), 185-193 (1994).
  5. Delaunois, A., Gustin, P., Vargas, M., Ansay, M. Protective effect of various antagonists of inflammatory mediators against paraoxon-induced pulmonary edema in the rabbit. Toxicology and Applied Pharmacology. 132 (2), 343-345 (1995).
  6. Barr, H. A., Nicholas, T. E., Power, J. H. Control of alveolar surfactant in rats at rest and during prolonged hyperpnoea: pharmacological evidence for two tissue pools of surfactant. British Journal of Pharmacology. 93 (3), 473-482 (1988).
  7. Machuca, T. N., Cypel, M. Ex vivo lung perfusion. Journal of Thoracic Disease. 6 (8), 1054-1062 (2014).
  8. Steen, S., et al. First human transplantation of a nonacceptable donor lung after reconditioning ex vivo. The Annals of Thoracic Surgery. 83 (6), 2191-2194 (2007).
  9. Cypel, M., et al. Technique for prolonged normothermic ex vivo lung perfusion. The Journal of Heart and Lung Transplantation: The Official Publication of the International Society for Heart and Lung Transplantation. 27 (12), 1319-1325 (2008).
  10. Cypel, M., et al. Normothermic ex vivo lung perfusion in clinical lung transplantation. New England Journal of Medicine. 364 (15), 1431-1440 (2011).
  11. Kao, C. C., Parulekar, A. D. Is perfusate exchange during. Annals of Translational Medicine. 8 (3), 43(2020).
  12. Alquicira-Mireles, J. Participación de la serotonina en los cambios de permeabilidad vascular en la preservación pulmonar en conejo. , Universidad Nacional Autónoma de México. Biología thesis (2013).
  13. Arreola-Ramírez, J. L. Papel de la liberación de acetilcolina y sustancia P en el deterioro de la función pulmonar en un modelo experimental de preservación pulmonar en conejo. , Universidad Nacional Autónoma de México. Doctorado en Ciencias Biomédicas thesis (2009).
  14. Isolated lung perfusion systems for small to large animal models. Harvard Apparatus. Hugo Sachs Elektronik (HSE). , Available from: https://www.harvardapparatus.com/media/harvard/pdf/Isolated%20Lung%20Perfusion%20Systems%20Brochure.pdf (2021).
  15. Jiao, G. Evolving trend of EVLP: Advancements and emerging pathways. SN Comprehensive Clinical Medicine. 1 (4), 287-303 (2019).
  16. Mordant, P., et al. Mesenchymal stem cell treatment is associated with decreased perfusate concentration of interleukin-8 during ex vivo perfusion of donor lungs after 18-hour preservation. The Journal of Heart and Lung Transplantation: The Official Publication of the International Society for Heart and Lung Transplantation. 35 (10), 1245-1254 (2016).
  17. Cowan, P. J., Hawthorne, W. J., Nottle, M. B. Xenogeneic transplantation and tolerance in the era of CRISPR-Cas9. Current Opinion in Organ Transplantation. 24 (1), 5-11 (2019).
  18. Collaborators, G. C. R. D. Prevalence and attributable health burden of chronic respiratory diseases, 1990-2017: a systematic analysis for the Global Burden of Disease Study 2017. The Lancet Respiratory Medicine. 8 (6), 585-596 (2020).
  19. Bravo-Reyna, C. C., Torres-Villalobos, G., Aguilar-Blas, N., Frías-Guillén, J., Guerra-Mora, J. R. Comparative study of capillary filtration coefficient (Kfc) determination by a manual and automatic perfusion system. Step by step technique review. Physiological Research. 68 (6), 901-908 (2019).
  20. Pereira, M. R., et al. COVID-19 in solid organ transplant recipients: Initial report from the US epicenter. American Journal of Transplantation. 20 (7), 1800-1808 (2020).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

Ex Vivo

מאמרים קשורים