מאמר שיטה

מדידה כמותית בסיוע תוכנה של עובי עצם תת-תכונדרית אוסטיאוארתרית

DOI:

10.3791/62973

⸱

18 במרץ 2022

 ,  ,  ,  ,  , 
1Harrington Laboratory for Molecular Orthopedics, Department of Orthopedic Surgery, University of Kansas Medical Center, 2Division of Sports Medicine, Department of Orthopedic Surgery, University of Kansas Medical Center, 3Department of Biochemistry & Molecular Biology, University of Kansas Medical Center

* These authors contributed equally

במאמר זה

סיכום

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מאמר מתודולוגיה זה מציג פרוטוקול מדידה כמותית בסיוע תוכנה כדי לכמת את עובי העצם התת-צ'ונדרלי היסטולוגי במפרקי הברך האוסטאוארת-דלקתיים של מורין ומפרקי הברך הרגילים כפקדים. פרוטוקול זה רגיש מאוד לעיבוי עדין ומתאים לאיתור שינויים מוקדמים בעצם התת-מפרקתית האוסטאוארתרית.

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

עיבוי עצם תת-קונדרלי וטרשת הם סימני ההיכר העיקריים של דלקת מפרקים ניוונית (OA), הן במודלים של בעלי חיים והן בבני אדם. נכון לעכשיו, חומרת עיבוי העצם התת-קונדרלי ההיסטולוגי נקבעת בעיקר על ידי מערכות דירוג חצי כמותיות מבוססות הערכה חזותית. מאמר זה מציג פרוטוקול ניתן לשחזור ומבוצע בקלות כדי למדוד כמותית את עובי העצם התת-קונדרלי במודל עכבר של OA הברך המושרה על ידי ערעור היציבות של המניסקוס המדיאלי (DMM). פרוטוקול זה השתמש בתוכנת ImageJ כדי לכמת את עובי העצם התת-קונדרלי בתמונות היסטולוגיות לאחר שהגדיר אזור מעניין בקונדיל הירך המדיאלי ובמישור הסיבתי הרפואי שבו עיבוי עצם תת-קונדרלי מתרחש בדרך כלל ב- DMM המושרה בברך OA. תמונות היסטולוגיות ממפרקי הברך עם הליך מזויף שימשו כפקדים. ניתוח סטטיסטי הצביע על כך שמערכת מדידת העצם התת-קונדרלית הכמותית שפותחה לאחרונה הייתה ניתנת לשחזור עם שונות פנים-ארצית ובין-צופה נמוכה. התוצאות מצביעות על כך שהפרוטוקול החדש רגיש יותר לעיבוי עצם תת-קונדרלי עדין או מתון מאשר למערכות הדירוג החזותיות הנפוצות. פרוטוקול זה מתאים לאיתור שינויים מוקדמים ומתקדמים בעצם תת-מפרקית אוסטיאוארתרית והן להערכת היעילות של טיפולי vivo של טיפולי OA בתיאום עם דירוג סחוס OA.

מבוא

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

דלקת מפרקים ניוונית (OA), המאופיינת באופן רדיוגרפי על ידי צמצום מרחב משותף עקב אובדן סחוס מפרקי, ניוונית, וטרשת עצם תת-קונדרלית (SCB), היא הצורה הנפוצה ביותר של דלקת פרקים 1,2. למרות שתפקידה של עצם פרי-מפרקית באטיולוגיה של OA אינו מובן במלואו, היווצרות אוסטאופיטים וטרשת SCB נחשבים בדרך כלל לתוצאות תהליך המחלה ולא לגורמים סיבתיים, אך שינויים בארכיטקטורת העצם/הצורה והביולוגיה הפרי-מפרקית עשויים לתרום להתפתחות ולהתקדמות של OA3,4 . הפיתוח של מערכת דירוג OA מדויקת וקלה לביצוע, כולל מדידת SCB, הוא קריטי למחקרים השוואתיים בקרב מעבדות מחקר ובהערכת היעילות של סוכנים טיפוליים שנועדו למנוע או להחליש התקדמות OA.

SCB בנוי עם צלחת עצם דמוית כיפה דקה ושכבה בסיסית של עצם טרבלקולרית. צלחת SCB היא lamella קליפת המוח, שוכב במקביל ומיד מתחת הסחוס מסויד. ענפים קטנים של כלי עורקים ורידים, כמו גם עצבים, לחדור דרך הערוצים בלוח SCB, תקשורת בין הסחוס מסויד ועצם trabecular. העצם התת-קונדרלית trabecular מכיל כלי דם, עצבים חושיים, מח עצם והוא נקבובי יותר ופעיל מטבולית יותר מאשר צלחת SCB. לכן, SCB מפעילה פונקציות סופגות זעזועים ותומכות והיא חשובה גם לאספקת חומרים מזינים סחוס וחילוף חומרים במפרקים רגילים5,6,7,8.

עיבוי SCB (בהיסטולוגיה) וטרשת (ברדיוגרפיה) הם סימני ההיכר העיקריים של OA ואזורי מחקר מרכזיים של פתולוגיה OA. מדידת עיבוי SCB היא מרכיב חשוב בהערכות היסטולוגיות של חומרת OA. דיווח בעבר מיקרורדיוגרפיה דיגיטלית למדידת צפיפות מינרלים SCB מכרסמים9, כמו גם טומוגרפיה מיקרו-ממוחשבת (מיקרו-CT) מבוסס מדידת SCB כמותית במודלים מכרסמים של OA10,11,12,13 שיפרו את ההבנה שלנו של מבנה SCB ואת התפקיד של שינויים SCB בפתופיזיולוגיה OA. שטח ועובי SCB גם כונתה עם שקופיות היסטולוגיות באמצעות מערכת מחשב מתוחכמת עם תוכנה היסטומורפומטריית עצם ספציפית ויקרה14. עם זאת, מערכות דירוג OA חצי-כמותיות מבוססות הערכה חזותית, כולל דירוג עיבוי SCB, נמצאות בשימוש נרחב יותר מאשר מיקרו-CT בעת הנוכחית מכיוון שמערכות הדירוג קלות לשימוש, במיוחד להקרנת תמונות היסטולוגיות רבות. עם זאת, רוב מערכות הדירוג הקיימות של OA מתמקדות בעיקר בשינויי סחוס15,16,17. שיטת דירוג עובי SCB ניוונית בשימוש נרחב המקטלגת את עיבוי SCB כמתון, מתון וחמור היא סובייקטיבית ברובה, ואמינותה לא אומתה במלואה15. פרוטוקול מדידת עובי SCB אוסטיאוארתריטיס אמין וניתן לביצוע בקלות בשלב אחר שלב אינו מפותח במלואו או אינו מתוקנן.

מחקר זה נועד לפתח פרוטוקול ניתן לשחזור, רגיש וקל לביצוע כדי למדוד כמותית את עובי SCB במודל עכבר של OA. בדיקות המדידה הקפדניות שלנו והניתוח הסטטיסטי שלנו הראו שפרוטוקול מדידה כמותי זה בסיוע תוכנת ImageJ יכול לכמת את עובי ה- SCB במפרקי הברך הרגילים והאוסטאוארתרטיים כאחד. הפרוטוקול החדש שפותח ניתן לשחזור ורגיש יותר לשינויי SCB קלים מאשר מערכות הדירוג החזותיות הנפוצות. זה יכול לשמש לאיתור שינויים SCB osteoarthritic מוקדם להערכת יעילות vivo של טיפולי OA בתיאום עם דירוג סחוס OA OA.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כל ההליכים בבעלי חיים הכלולים בפרוטוקול זה אושרו על ידי הוועדה המוסדית לטיפול בבעלי חיים ולשימוש (IACUC) במרכז הרפואי של אוניברסיטת קנזס, בהתאם לכל החוקים והתקנות הפדרליים והמדינתיים.

1. יצירת OA הברך בעכברים

  1. צור מודל עכבר של OA הברך על ידי ערעור כירורגי של המניסקוס המדיאלי (DMM) כפי שתואר על ידי Glasson et al.18 ב 22 עכברי BALB / c מסוג פראי בגיל 10-11 שבועות. בצע ניתוח מזויף כהליך בקרה על שמונה עכברים עם אותו רקע וגיל.
    הערה: שני המינים שימשו לפרויקט המקורי כדי לענות על דרישת NIH להתחשבות במין כמשתנה ביולוגי, אם כי בחינת הבדלי מין אינה היקף הפרוטוקול הזה.
  2. מרדים בעלי חיים על ידי שאיפה של איזופלוריין. בדוק את עומק ההרדמה על ידי ניטור קצב הנשימה שלהם / מאמץ וחוסר תגובה לצביטת בוהן / זנב. שים את החיות בתנוחה סופית.
  3. לגלח את העור באזור הברך ולנקות את העור עם Povidone-יוד + קרצוף עור אלכוהול; שלושה מחזורים מתחלפים.
  4. בצע את הליך DMM בברך ימין תחת מיקרוסקופ כירורגי. לחשוף את מפרק הברך באמצעות חתך parapatellar המדיאלי (1.2-1.5 ס"מ אורך) ו לכרות את כמוסת המפרק. שמור את פיקת הברך ואת גיד פיקת הברך ללא פגע. לאחר חשיפה מדוקדקת של הרצועה המניסקוטיבלית המדיאלית (MML) המעגנת את המניסקוס המדיאלי לרמה הסיבית, סובבו אותה במספריים מיקרו-כירורגיות כדי לערער את המניסקוס המדיאלי.
  5. בצע ניתוח מזויף בברך ימין כהליך בקרה, שבו ה- MML הומחה אך לא הועבר.
  6. סוגרים את הקפסולה המשותפת עם 8-0 תפרי פוליגלקטין נספגים וחתך בעור עם 7-0 תפרים שאינם ניתנים לספיגה הן עבור DMM והן עבור הליכי זיוף כדי להבטיח שימוש נכון בברך לאחר הריפוי.
  7. הזרקת SR Buprenorphine (0.20-0.5 מ"ג/ק"ג) תת עורית (SC) מיד לפני ההליך הכירורגי עבור משככי כאבים, אשר מספק הקלה בכאב עד 72 שעות לאחר זריקה אחת. לפקח על בעלי חיים שניתחו לאחר הניתוח.
  8. המתת חסד של בעלי חיים באמצעות תא CO2 ב 2, 8, ו 16 שבועות לאחר הניתוח. לאחר חוסר הכרה, לאשר את מותם של בעלי החיים בשיטה פיזית (פתיחת חלל החזה). שיטות אלה של המתת חסד עולות בקנה אחד עם המלצות הפאנל על המתת חסד של האגודה האמריקאית לרפואה וטרינרית (AVMA).
  9. לקצור את מפרקי הברך עבור ניתוחים היסטולוגיים ב 2, 8, ו 16 שבועות לאחר ניתוח DMM וב 2 ו 16 שבועות לאחר ניתוח שאם כדי להשיג מפרקי ברך העכבר עם דרגות שונות של חומרת OA או עיבוי SCB.

2. הכנת קטעי רקמות ותמונות היסטולוגיות

  1. תקן דגימות רקמת מפרק הברך של העכבר ב- 2% paraformaldehyde, נקה אותן ב-25% חומצה פורמית, הטמע בפרפין, וקטע את קורונלילי כדי לבחון הן את התאים המדיאליים והן את התאים הצדדיים.
  2. לחתוך דגימות הברך מהצד האחורי של הברך באמצעות microtome ולאסוף קטעי רקמה כי הם 5-מיקרומטר עובי במרווחי 70-80 מיקרומטר כדי לקבל כ 40 שקופיות רקמות על פני מפרק הברך כולו. הערכה בסיוע מיקרומטר עולה כי מספרי שקופיות 1-6 הם מן האחורי הרחוק, 11-18 מאמצע האחורי, 23-30 מאמצע הקדמי, ו 35-40 מהחלק הקדמי הרחוק של מפרק הברך. יש להשליך או לאסוף מקטעים מתערבים לכתמים נוספים.
  3. בצע Safranin-O וכתמים ירוקים מהירים על פי הוראות היצרן כדי לזהות באופן ספציפי תאי סחוס ומטריצות על כל חמש שקופיות. בצע כתמי המטוקסילין-אאוזין על פי הוראות היצרן לבחון את מפרקי הברך ברמות התא והרקמות כפי שתואר קודם לכן 19,20,21,22.
  4. רכש תמונות היסטולוגיות עם מיקרוסקופ המצויד במצלמה דיגיטלית. ניתוח היסטופתולוגי כללי ודירוג OA היסטולוגי נערכו כמתואר לעיל 15,19,20,20,21,22.

3. מדידה כמותית של עצם תת-תכונדרלית אוסטיאוארטית עם תוכנת ImageJ

  1. הורד את תוכנת ImageJ ופתח תמונות היסטולוגיות מעניינות.
    1. הורד את ImageJ יחד עם Java 1.8.0_172 מ- https://imagej.nih.gov/ij/.
    2. פתח את תוכנית ImageJ. לחץ על הכרטיסיה קובץ ברצועת הכלים ולחץ על האפשרות פתח כדי לפתוח את התמונה ההיסטולוגית.
    3. חפש את כתובת ספריית הקבצים, בחר את קובץ התמונה ולחץ על פתח.
  2. כייל את ImageJ עם המיקרומטר בתמונות ההיסטולוגיות.
    1. השתמש בכלי קו ישר כדי לשרטט יחידת אורך אחת במיקרומטר ולחץ על נתח > (לאחר מכן) הגדר קנה מידה. הגדר את יחס הגובה-רוחב של המרחק הידוע והפיקסל ל- 1 ולחץ על אישור. ImageJ יכול להמיר את אורך הפיקסלים לאורך היחידה במיקרומטר.
    2. הגדר את הגורם הנמדד לאזור. לחץ על נתח > הגדר מדידה וסמן את התיבה אזור והגבלה לסף תחת חלון חדש. שלב זה מגדיר את ImageJ כדי למדוד את הפרמטר "Area" בתוך "סף" שנבחר.
  3. מדוד את אזור העניין הכולל של העצם התת-קונדרלית (SCB).
    1. הגדר את אזור העניין של SCB (ROI) כפי שמוצג בקופסאות הכתומות של איור 1A, המכסה את לוחית קליפת המוח SCB וחלק מהעצם הטרבקרית הבסיסית הצמודה לצלחת קליפת המוח בקונדיל הירך המדיאלי (MFC) וברמה המדיאלית (MTP) עם ממדים ספציפיים לכל החזר על ההשקעה. עיבוי SCB osteoarthritic מתרחשת בדרך כלל באזורים אלה. הגדר את ההחזר על ההשקעה של SCB עם אותה צורה וממד בכל MFC או MTP עבור כל המפרקים שנבדקו כדי להבטיח שאותו גודל של ההחזר על ההשקעה הספציפי נמדד עבור כל בעלי החיים.
    2. שרטטו את החלוקה לרמות של אזור העניין הכולל של SCB באמצעות כלי הבחירה Polygon מתחת לחלון הראשי של ImageJ.
      הערה: כלי הבחירה מעניקים למערכת סף להגבלת האזור הנמדד.
    3. מדוד את אזור ה- SCB הכולל: לאחר בחירת הסף, לחץ על נתח > מדידה. ייפתח חלון "תוצאות" עם מדידת שטח.
  4. מדוד את אזור חומר העצם המכיל עצם מוצקה ללא מח עצם.
    1. לחץ על ערוך > נקה בחוץ כדי לא לכלול את האזור מחוץ לאזור ה- SCB הכולל.
      הערה: רק אזור ה- SCB הכולל גלוי לאחר לחיצה על האפשרות נקה חיצונית . התמונה מחוץ לאזור SCB הכולל תהפוך לשחורה. שלב זה מאפשר למשקיפים להתמקד באזור חומר העצם בתחום העניין.
    2. לחץ על תמונה > התאם > סף צבע כדי לפתוח את החלון "צבע סף". לחץ על מקורי בתחתית החלון "צבע סף" כדי לשחזר את התמונה למצב המקורי. השתמש בכלי בחירה בשלב 3.3.2 כדי לצייר קופסה קטנה באזור חומר העצם. לחץ על האפשרות דוגמה בתחתית החלון "צבע סף" כדי להגדיר את אזור חומר העצם.
      הערה: האפשרות "מדגם" בחלון "צבע סף" מאפשרת ל- ImageJ לבחור את כל אותם פיקסלים באזור ה- SCB הכולל כמו אזור דגימת חומר העצם. אזור חומר העצם שנבחר יהפוך לאדום.
    3. לחץ על בחר בתחתית חלון איזון צבע הסף כדי ליצור סף מדידת שטח. לחץ על נתח > מדוד בתפריט הראשי של ImageJ, ותוצאת מדידת אזור חומר העצם תוצג בחלון "תוצאות".
    4. שמור את הנתונים של אזור SCB הכולל ואזור חומר העצם.
  5. חשב את היחס בין אזור חומר העצם (mm2) לאזור SCB הכולל (mm2) של עניין המייצג את עובי חומר העצם (mm2/1.0 mm2) בתוך שטח SCB הכולל.
  6. מדוד את עובי ה-SCB של מקטעים/תמונות היסטולוגיים (כמתואר בשלבים 3.1-3.5) של אזורים אחוריים רחוקים, אמצע-אחוריים, אמצע-קדמיים וקדימיים רחוקים (כמתואר בשלב 2.2) של OA המושרה ב-DMM כדי להעריך עובי SCB ספציפי לאזור של 6 מפרקי ברכיים (איור 1B).
    הערה: זה יכול לאמת את האמינות של פרוטוקול מדידה כמותית זה כי ידוע כי שינויים SCB osteoarthritic בשיתוף לוקליזציה עם נגעים סחוס וכי נזק סחוס osteoarthritic עם עיבוי SCB הוא חמור יותר באזורים נושאי משקל (אמצע החלק) של מפרקי הברך מכרסמים14,15. לכן, ראוי להשתמש באמצע מקטעים למדידה כמותית של עיבוי SCB osteoarthritic.

4. סטטיסטיקה

  1. בצע ניתוחים סטטיסטיים באמצעות נתונים ממדידה כמותית ודירוג חזותי של עובי SCB. קבעו את השונות והשחזור הבין-צופה-תוך-צופה על-ידי ניתוח מקדם המתאם של פירסון.
  2. קבע את משמעות ההבדלים בין קבוצות לימוד באמצעות מבחני t של סטודנט או ANOVA חד כיווני, ואחריו מבחן פוסט הוק (Tukey) באמצעות תוכנת גיליון אלקטרוני. שקול p-ערך של פחות מ 0.05 להיות משמעותי מבחינה סטטיסטית.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

השוואת שחזור בין דירוג הערכה חזותית למדידה כמותית בסיוע ImageJ:
עובי SCB ב -48 אזורי עניין (ROI) (24 MFC ו- 24 MTP), המוגדר ממקטע ביניים של כל ברך מ -24 ברכיים / בעלי חיים הובקע על ידי שלושה אנשים עצמאיים באמצעות ערכת הניקוד החזותי הקיימת 0-3 כמתואר בספרות15,23, כאשר 0 = נורמלי (ללא עיבוי SCB), 1 = מתון, 2 = מתון, ו - 3 = עיבוי SCB חמור. תמונות אלה נבחרו מתוך שלוש נקודות זמן שונות לאחר הניתוח ב 2, 8, ו 16 שבועות לאחר הליך DMM או מזויף. בדרך כל...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מדידת עיבוי SCB היא מרכיב חשוב בהערכות היסטולוגיות של חומרת OA. רוב מערכות הדירוג הקיימות של OA מתמקדות בעיקר בשינויי סחוס15,16,17. שיטת דירוג עובי SCB אוסטיאוארתריטית נפוצה, המקטלגת את עיבוי SCB כמתון, מתון וחמור, היא סובייקטיבית ברובה, ואמינותה לא אומתה במלואה15. המחקר הנוכחי פיתח ואימת פרוטוקול מדידה חדש כדי לכמת את עובי SCB, הכולל את השלבים הבאים: יצירת OA הברך בעכברים, הכנת קטעי רקמות ותמונות היסטולו...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

המחברים מצהירים שאין ניגודי עניינים מתחרים.

תודות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

עבודה זו נתמכה על ידי המכון הלאומי לדלקת פרקים ומחלות שרירים ושלד ועור של המכונים הלאומיים לבריאות (NIH) תחת מספר הפרס R01 AR059088, משרד ההגנה (DoD) תחת פרס מחקר מספר W81XWH-12-1-0304, וקרן הפרופסורים המכובדת של מרי ופול הרינגטון.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
Safranin-OSigma-AldrichS8884
ירוק מהירSigma-AldrichF7252
HematoxylinSigma-AldrichGHS216
EosinSigma-AldrichE4382
IllustratorAdobeלא ישים

מקורות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Kotlarz, H., Gunnarsson, C. L., Fang, H., Rizzo, J. A. Insurer and out-of-pocket costs of osteoarthritis in the US: evidence from national survey data. Arthritis and Rheumatology. 60 (12), 3546-3553 (2009).
  2. Buckwalter, J. A., Martin, J. A. Osteoarthritis. Advanced Drug Delivery Reviews. 58 (2), 150-167 (2006).
  3. Weinans, H., et al. Pathophysiology of peri-articular bone changes in osteoarthritis. Bone. 51 (2), 190-196 (2012).
  4. Baker-LePain, J. C., Lane, N. E. Role of bone architecture and anatomy in osteoarthritis. Bone. 51 (2), 197-203 (2012).
  5. Li, G., et al. Subchondral bone in osteoarthritis: Insight into risk factors and microstructural changes. Arthritis Research and Therapy. 15 (6), 223(2013).
  6. Madry, H., van Dijk, C. N., Mueller-Gerbl, M. The basic science of the subchondral bone. Knee Surgery, Sports, Traumatology, Arthrosclerosis. 18 (4), 419-433 (2010).
  7. Milz, S., Putz, R. Quantitative morphology of the subchondral plate of the tibial plateau. Journal of Anatomy. 185, Pt 1 103-110 (1994).
  8. Blalock, D., Miller, A., Tilley, M., Wang, J. Joint instability and osteoarthritis. Clinical Medicine Insights: Arthritis and Musculoskeleton Disorders. 8, 15-23 (2015).
  9. Waung, J. A., et al. Quantitative X-ray microradiography for high-throughput phenotyping of osteoarthritis in mice. Osteoarthritis Cartilage. 22 (10), 1396-1400 (2014).
  10. Botter, S. M., et al. Cartilage damage pattern in relation to subchondral plate thickness in a collagenase-induced model of osteoarthritis. Osteoarthritis Cartilage. 16 (4), 506-514 (2008).
  11. Nalesso, G., et al. Calcium calmodulin kinase II activity is required for cartilage homeostasis in osteoarthritis. Science Reports. 11 (1), 5682(2021).
  12. Ding, M., Christian Danielsen, C., Hvid, I. Effects of hyaluronan on three-dimensional microarchitecture of subchondral bone tissues in guinea pig primary osteoarthrosis. Bone. 36 (3), 489-501 (2005).
  13. Kraus, V. B., Huebner, J. L., DeGroot, J., Bendele, A. The OARSI histopathology initiative - recommendations for histological assessments of osteoarthritis in the guinea pig. Osteoarthritis Cartilage. 18, Suppl 3 35-52 (2010).
  14. McNulty, M. A., et al. A comprehensive histological assessment of osteoarthritis lesions in Mice. Cartilage. 2 (4), 354-363 (2011).
  15. Glasson, S. S., Chambers, M. G., Van Den Berg, W. B., Little, C. B. The OARSI histopathology initiative - recommendations for histological assessments of osteoarthritis in the mouse. Osteoarthritis Cartilage. 18, Suppl 3 17-23 (2010).
  16. Pritzker, K. P., et al. Osteoarthritis cartilage histopathology: grading and staging. Osteoarthritis Cartilage. 14 (1), 13-29 (2006).
  17. Mankin, H. J., Dorfman, H., Lippiello, L., Zarins, A. Biochemical and metabolic abnormalities in articular cartilage from osteo-arthritic human hips. II. Correlation of morphology with biochemical and metabolic data. Journal of Bone and Joint Surgery American. 53 (3), 523-537 (1971).
  18. Glasson, S. S., Blanchet, T. J., Morris, E. A. The surgical destabilization of the medial meniscus (DMM) model of osteoarthritis in the 129/SvEv mouse. Osteoarthritis Cartilage. 15 (9), 1061-1069 (2007).
  19. Wang, J., et al. Transcription factor Nfat1 deficiency causes osteoarthritis through dysfunction of adult articular chondrocytes. Journal of Pathology. 219 (2), 163-172 (2009).
  20. Zhang, M., Lu, Q., Budden, T., Wang, J. NFAT1 protects articular cartilage against osteoarthritic degradation by directly regulating transcription of specific anabolic and catabolic genes. Bone Joint Research. 8 (2), 90-100 (2019).
  21. Zhang, M., et al. Epigenetically mediated spontaneous reduction of NFAT1 expression causes imbalanced metabolic activities of articular chondrocytes in aged mice. Osteoarthritis Cartilage. 24 (7), 1274-1283 (2016).
  22. Rodova, M., et al. Nfat1 regulates adult articular chondrocyte function through its age-dependent expression mediated by epigenetic histone methylation. Journal of Bone and Mineral Research. 26 (8), 1974-1986 (2011).
  23. Jackson, M. T., et al. Depletion of protease-activated receptor 2 but not protease-activated receptor 1 may confer protection against osteoarthritis in mice through extracartilaginous mechanisms. Arthritis and Rheumatology. 66 (12), 3337-3348 (2014).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

OsteoarthritisImageJMedial Tibial Plateau

מאמרים קשורים