מאמר שיטה

אוסף של ביו-חומרים וניסויים ביומכניים ושיטות ניתוח

13 ביולי 2021

במאמר זה

תקציר

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מאמרים שנדונו:

Kolel, A., et al. זן מבוקר של הידרוג'לים תלת מימדיים תחת הדמיית מיקרוסקופיה חיה. כתב העת לניסויים חזותיים. (2020).

Yang, F., Wang, Z., and Yang, S. צילום פוטו-אקוסטי כפול של בעלי חיים קטנים לסריקת רסטר להדמיה של כלי הדם. כתב העת לניסויים חזותיים. (2020).

Tamburrini, R., et al. דה-סלולריזציה ללא חומרי ניקוי של הלבלב האנושי לייצור מטריצה חוץ-תאית מסיסה (ECM). כתב העת לניסויים חזותיים. (2020).

Koch, S.E., et al. ביו-ריאקטור רב-רמזי להערכת יכולת הדלקת וההתחדשות של ביו-חומרים בזרימה ומתיחה. כתב העת לניסויים חזותיים. (2020).

Zhou, H., Cen, X., Song, Y., Ugbolue, U.C., and Gu, Y. מאפיינים ביומכניים של הגפיים התחתונות הקשורים לסיום הליכה לא מתוכנן במהירויות הליכה שונות. כתב העת לניסויים חזותיים. (2020).

Yin, L., Lai, Z., Hu, X., Liu, K., Wang, L. הערכת בקרת יציבה והפעלת שרירי הגפיים התחתונות אצל אנשים עם חוסר יציבות כרוני בקרסול. כתב העת לניסויים חזותיים. (2020).

מאמר מערכת

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כתחום מחקר בין-תחומי חשוב, ביו-חומרים וביומכניקה חושפים את הקשרים והמנגנונים בין המבנה, הביצועים והתפקוד של ביו-חומרים באמצעות מחקר ניסיוני וניתוח תיאורטי, הקשור למדעי החומרים, מכניקה, ביו-הנדסה, מתמטיקה וכו'. על מנת לשפר את השיטות הניסיוניות של ביו-חומרים וביומכניקה, אוסף שיטות JoVE זה דן בשיטות הניסוי המתאימות ובמאפייניהן בשתי קטגוריות: תכונות מכניות של רקמות ומכניקת ביוניקה. התצפיות במכניקת הרקמות כוללות שיטת מתיחת הידרוג'ל תלת מימדית, שיטה פוטו-אקוסטית לסריקת רסטר כפולה, שיטת דה-סלולריזציה ללא חומרי ניקוי של הלבלב האנושי, ושיטת ניתוק של מתחי מתיחה וגזירה על פיגומים צינוריים. תצפיות מכניקת הביוניקה כוללות שיטת איסוף נתונים של תנועת הגפיים התחתונות ובקרת יציבה עבור חולים עם חוסר יציבות בקרסול.

ההשפעות של כוח מכני על הארגון כוללות בעיקר ביטוי גנים, התמיינות תאים, שיפוץ רקמות 1,2,3 ושינויים במטריצה החוץ-תאית (ECM)4,5,6. הבנת תגובת הרקמה לכוחות מכניים 7,8,9 תסייע בפיתוח תחום הנדסת הרקמות ומודלים תיאורטיים. Kolel et al.10 מציעים שיטה למתיחת הידרוג'לים תלת מימדיים, המאפשרת מתח חד צירי סטטי או מחזורי במהלך מיקרוסקופ קונפוקלי. הם יצקו ג'ל פיברין עם חור בקוטר של כ-2 מ"מ על רצועות גומי סיליקון בעובי 0.5 מ"מ, ולאחר מכן בוצעה מתיחה חד-צירית במיקרוסקופיה קונפוקלית חיה. לבסוף, הם דנים באפשרות להטמיע תאים בהידרוג'לים ולחשוף אותם למתיחה חיצונית מבוקרת. מערכת המתיחה המשמשת בפרוטוקול זה מורכבת מרכיבי הדפסת תלת מימד ורכיבים אלקטרוניים בעלות נמוכה. למערכת יש את התכונות הייחודיות הבאות בהשוואה לשיטות קיימות אחרות. ראשית, המערכת מאפשרת מתיחה חד-צירית של הידרוג'לים רכים תלת מימדיים עבים, ולכל ההידרוג'ל יש עיוות אחיד Z. שנית, בגלל הפשטות של הדפסת תלת מימד והעלות הנמוכה של ציוד זה, קל לבנות ציוד מתיחה מסוג זה במעבדות אחרות. שלישית, ניתן להפעיל את הגיאומטריה והגודל של המדגם באופן חופשי בהתאם למשתמש. שיטה זו שיפרה את היכולת לחקור כוחות חיצוניים על תהליכים ביולוגיים בתנאים תלת מימדיים פיזיולוגיים יותר ותרמה לתחום הנדסת הרקמות.

הדמיה של בעלי חיים קטנים ממלאת תפקיד חשוב בהנחיית המחקר על מחלות הומולוגיות אנושיות ובחיפוש אחר שיטות טיפול יעילות. הדמיה פוטו-אקוסטית (PAI) היא טכנולוגיית הדמיה לא פולשנית המשלבת את היתרונות של הדמיה אופטית והדמיה אולטרסאונד11,12. יאנג ואחרים מדווחים על צילום פוטו-אקוסטי כפול בסריקת רסטר (DRS-PAI), ובאמצעות סריקת צימוד אקוסטית של חלקים שונים של עכברים, נאספות תמונות כלי הדם במצבי WIM ו-RIM, בהתאמה. היתרון של DRS-PAI הוא ש-WIM ו-RIM משולבים במערכת אחת ומספקים הדמיה של כלי דם ברזולוציה גבוהה של דינמיקת דם בזמן אמת. מצב ההדמיה בזמן אמת (RIM) יכול לחשוף את מאפייני הנשימה או הדופק על ידי מדידת תזוזה של כלי הדם לאורך כיוון העומק. בנוסף, RIM יכולה למדוד כמותית את האזור הספציפי של תמונות ה-WIM. על ידי השוואת התמונות ניתן לחשוף במדויק את פרטי השינויים המקומיים. ניתן ליישם שיטה זו בקלות בתחומים שונים של מחקר בסיסי ביו-רפואי.

הביקוש הגובר לאיים מציב דרישות גבוהות יותר לבידוד איים 14,15,16. Tamburrini et al.17 מציעים שיטת דה-סלולריזציה חדשה ונטולת חומרי ניקוי שיוצרת פחות נזק ל-ECM ויכולה לשמר רכיבים קריטיים של ה-ECM בלבלב. שיטת הדסלולריזציה נמנעת משימוש בחומרי ניקוי כימיים יוניים ולא יוניים קלאסיים. יתר על כן, דה-סלולריזציה של רקמה בוויברטור אורביטלי במקום הזרקת חומר ניקוי דרך מערכת כלי דם מקדמת מאוד את הפשטות, העקביות וההיתכנות של טכנולוגיית הדסלולריזציה, ובכך מגדילה את ייצור ה-ECM לתרגום. מכיוון שהשיטות הא-תאיות הנוכחיות אינן יכולות לכמת את שאריות הטריטון X-100 ב-ECM לאחר דה-סלולריזציה וההיתכנות של הרחבת תהליך הייצור בסביבת cGMP נמוכה, הם גם חקרו את ההיתכנות של השגת דה-סלולריזציה על ידי רטט מכני ולא זלוף של הלבלב כולו. נתונים על כימות קולגן וגליקוזאמינוגליקנים מראים מגמה העולה בקנה אחד עם ניסיון קודם. כמה מגבלות נמצאו על ידי שימוש בפרוטוקול זה. לכן, לבלב אנושי מתורמים עם BMI <30 נחשב בדרך כלל מתאים לדה-סלולריזציה.

השימוש בביו-חומרים נספגים כדי לגרום להתחדשות ישירות in vivo הוא אסטרטגיה אטרקטיבית 18,19,20,21,22, אך סוג זה של חומר ביולוגי יכול לגרום לתגובה דלקתית לאחר ההשתלה, שהיא גם הכוח המניע לספיגה והתחדשות של רקמות חדשות לאחר מכן. גם תהליך הדלקת וגם תהליך ההתחדשות נקבעים על ידי מתח המתיחה והגזירה. קוך ואחרים 23 מתארים בפירוט את השימוש בביו-ריאקטור לניתוק מתחי מתיחה וגזירה על פיגומים צינוריים. הם מציעים כי היישום של מערכת ביו-ריאקטור צינורית זו יעזור לחקור את ההשפעות האישיות והמשולבות שלהם במכניקה. ביו-ריאקטור זה מעריך באופן שיטתי את התרומות של מתח גזירה ומתיחה מחזורית לדלקת והתחדשות רקמות בפיגומים הניתנים לספיגה צינורית. כמו כן, זה מאפשר לתקנן את יכולות הדלקת וההתחדשות בהשפעת סטנטים צינוריים בעומסים מכניים מבוקרים היטב. השלבים העיקריים של שיטה זו נדונים בפירוט: בנייה והתקנה של הביוריאקטור, הכנת הפיגום וחיסון התאים, יישום ותחזוקה של זרימת מתיחה וגזירה, איסוף הדגימות והניתוח. מערכת זו יכולה לבדוק מגוון שתלים וסקולריים מהונדסי רקמות (למשל, מקורות סינתטיים או טבעיים, מיקרו-מבנים שונים, נקבוביות שונה). על מנת לנתק ביעילות את היישום של מתח ומתח גזירה, מושגי המפתח המשמשים בביו-ריאקטור הם כדלקמן. ראשית, מתח הגזירה ובקרת המתיחה מופרדים באמצעות מערכות משאבה שונות. שנית, הפיגומים מגורים באופן מבפנים החוצה עם ממדים מונעים חישוביים. הזרימה מוחלת על המשטח החיצוני של הפיגום הצינורי באמצעות משאבת זרימה, בעוד שצינור הסיליקון מורחב באמצעות משאבת מתח נפרדת, והמתח ההיקפי של התמיכה מורחב באמצעות משאבת מתח נפרדת. שיטה זו יכולה לשמש גם למספר רב של ניתוחים על בניית כלי דם. התוצאות מצביעות על ההשפעות הייחודיות של שילובים שונים של גזירה ומתח על הצמיחה והעיצוב מחדש של מבנה שתל כלי דם מהונדס רקמות (TEVG). התובנות המתקבלות באמצעות איסוף פלטפורמת המבחנה עוזרות לייעל את פרמטרי העיצוב החדשים שפותחו עבור TEVG באתרם.

ניתן לחלק את בקרת היציבה ושיווי המשקל למצבים סטטיים ודינמיים 24,25,26,27. ביניהם, יכולת שיווי משקל דינמית מתייחסת ליכולתו של הגוף לשלוט ולהתאים את מרכז הכובד והיציבה של הגוף בתנועה28. מנקודת המבט של ביומכניקת הספורט, הגוף העיקרי לשמירה על שיווי משקל דינמי הוא מפרק הקרסול של הגפיים התחתונות. אם מפרק הירך היה הגוף העיקרי לשמירה על שיווי משקל, היה קל ליפול. Zhou et al.29 מנתחים את השינויים בביומכניקה של הגפיים התחתונות בסיום ההליכה שנגרמו על ידי גירוי בלתי צפוי. מערכת ניתוח תנועה ופלטפורמת לחץ פלנטרי משמשות לאיסוף נתוני התנועה של תנועת הגפיים התחתונות באתרן. ניתן להשתמש בשיטה זו במחקר ביומכניקה, מערכות מציאות מדומה, שלט רחוק רובוט, הפקת אנימציה, אימוני ספורט, מחקר ארגונומיה, משחקים אינטראקטיביים וכו'.

חוסר יציבות כרוני בקרסול (CAI) היא אחת מפציעות הספורט הנפוצות ביותר, המאופיינת בכאבים ונפיחות מתמשכים בקרסול, הקרסול מפנה את מקומו ונכות מדווחת על עצמה, המשפיעה באופן חמור על יציבות היציבה של המטופלים30,31. ניתן לשפר את CAI באמצעות טייפינג קינסיולוגי. Yin et al.32 מנתחים את התרומות של ראייה, פרופריוספציה ותחושה שיווי משקל בשמירה על יציבות היציבה באמצעות יציבה דינמית ממוחשבת. נערכו ונמדדו מבחני ארגון חושי (SOT), עמידה חד צדדית (US), גבול יציבות (LOS), מבחן בקרת מנוע (MCT) ומבחני הסתגלות (ADT). מדידות אלו מספקות שיטה חדשה להתבוננות בתהליך התיאום בין שלוש מערכות החישה וויסות הפעלת השרירים לשמירה על יציבות היציבה.

בשילוב עם מחקר מקיף רב-תחומי, ציוד ושיטות המדידה המתקדמים מקדמים את הפיתוח והאבולוציה של ביו-חומרים וביומכניקה. למרות שמאמר זה דן בשיטות בדיקה שונות, יש צורך לשלב שיטות מחקר ורעיונות שונים בתחומים שונים ככיוון מחקר בינתחומי ומקיף על מנת להאיץ את המחקר של ביו-חומרים וביומכניקה ולקדם את התקשורת בין חוקרים בתחומים שונים.

גילויים

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

למחברים אין מה לחשוף.

תודות

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מחקר זה נתמך על ידי לשכת המדע והטכנולוגיה העירונית של וונג'ואו (Y2020069).

מקורות

Loading...
$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Bleuel, J., Zaucke, V., Bruggemann, G. P., Niehoff, A. Effects of cyclic tensile strain on chondrocyte metabolism: a systematic review. Plos One. 10, 0119816(2015).
  2. Pennisi, C. P., Olesen, C. G., de Zee, M., Rasmussen, J., Zachar, V. Uniaxial cyclic strain drives assembly and differentiation of skeletal myocytes. Tissue Engineering Part A. 17, 2543-2550 (2011).
  3. Grodzinsky, A. J., Levenston, M. E., Jin, M., Frank, E. H. Cartilage tissue remodeling in response to mechanical forces. Annual Review of Biomedical Engineering. 2 (1), 691-713 (2000).
  4. Ban, E., et al. Mechanisms of plastic deformation in collagen networks induced by cellular forces. Biophysical Journal. 114 (2), 450-461 (2018).
  5. Storm, C., Pastore, J. J., MacKintosh, F. C., Lubensky, T. C., Janmey, P. A. Nonlinear elasticity in biological gels. Nature. 435, 191-194 (2005).
  6. Muiznieks, L. D., Keeley, F. W. Molecular assembly and mechanical properties of the extracellular matrix: a fibrous protein perspective. Biochimica et Biophysica Acta. 1832, 866-875 (2012).
  7. Livne, A., Bouchbinder, E., Geiger, B. Cell reorientation under cyclic stretching. Nature Communications. 5, 3938(2014).
  8. Xu, G. K., Feng, X. Q., Gao, H. Orientations of cells on compliant substrates under biaxial stretches: a theoretical study. Biophysical Journal. 114 (3), 701-710 (2017).
  9. Chagnon-Lessard, S., Jean-Ruel, H., Godin, M., Pelling, A. Cellular orientation is guided by strain gradients. Integrative Biology. 9 (7), 607-618 (2013).
  10. Kolel, A., et al. Controlled strain of 3D hydrogels under live microscopy imaging. Journal of Visualized Experiments. (166), (2020).
  11. Li, L., et al. Single-impulse panoramic photoacoustic computed tomography of small-animal whole-body dynamics at high spatiotemporal resolution. Nature Biomedical Engineering. 1 (5), 0071(2017).
  12. Jeon, S., Kim, J., Lee, D., Baik, J. W., Kim, C. Review on practical photoacoustic microscopy. Photoacoustics. 15, 100141(2019).
  13. Yang, F., Wang, Z., Yang, S. Dual raster-scanning photoacoustic small-animal imager for vascular visualization. Journal of Visualized Experiments. (161), (2020).
  14. Korpos, E., et al. The peri-islet basement membrane, a barrier to infiltrating leukocytes in type 1 diabetes in mouse and human. Diabetes. 62 (2), 531-542 (2013).
  15. Daoud, J., Petropavlovskaia, M., Rosenberg, L., Tabrizian, M. The effect of extracellular matrix components on the preservation of human islet function in vitro. Biomaterials. 31 (7), 1676-1682 (2010).
  16. Paraskevas, S., Maysinger, D., Wang, R., Duguid, T. P., Rosenberg, L. Cell loss in isolated human islets occurs by apoptosis. Pancreas. 20 (3), 270-276 (2000).
  17. Tamburrini, R., et al. Detergent-free decellularization of the human pancreas for soluble extracellular matrix (ECM) production. Journal of Visualized Experiments. (163), (2020).
  18. Wang, J., et al. Ex vivo blood vessel bioreactor for analysis of the biodegradation of magnesium stent models with and without vessel wall integration. Acta Biomaterials. 50, 546-555 (2017).
  19. Wolf, F., et al. VascuTrainer: a mobile and disposable bioreactor system for the conditioning of tissue-engineered vascular grafts. Annals of Biomedical Engineering. 46 (4), 616-626 (2018).
  20. Ramaswamy, S., et al. A novel bioreactor for mechanobiological studies of engineered heart valve tissue formation under pulmonary arterial physiological flow conditions. Journal of Biomechanical Engineering. 136 (12), 121009(2014).
  21. Vanerio, N., Stijnen, M., de Mol, B. A. J. M., Kock, L. M. An innovative ex vivo vascular bioreactor as comprehensive tool to study the behavior of native blood vessels under physiologically relevant conditions. Journal of Engineering and Science in Medical Diagnostics and Therapy. 2 (4), (2019).
  22. Kural, M. H., Dai, G., Niklason, L. E., Gui, L. An ex vivo vessel injury model to study remodeling. cell Transplantation. 27 (9), 1375-1389 (2018).
  23. Koch, S. E., et al. A multi-cue bioreactor to evaluate the inflammatory and regenerative capacity of biomaterials under flow and stretch. Journal of Visualized Experiments. (166), (2020).
  24. Gribble, P. A., Hertel, J., Denegar, C. R. Chronic ankle instability and fatigue create proximal joint alterations during performance of the star excursion balance test. International Journal of Sports Medicine. 28 (3), 236-242 (2006).
  25. Herrington, L., Hatcher, J., Hatcher, A., McNicholas, M. A comparison of star excursion balance test reach distances between ACL deficient patients and asymptomatic controls. The Knee. 16 (2), 149-152 (2009).
  26. Olmsted, L. C., Hertel, J. Influence of foot type and orthotics on static and dynamic postural control. Journal of Sport Rehabilitation. 13 (1), 54-66 (2004).
  27. Kahle, N. L., Gribble, P. A. Core stability training in dynamic balance testing among young, healthy adults. Athletic Training & Sports Health Care. 1 (2), 65-73 (2009).
  28. Lieberman, D. E., et al. Foot strike patterns and collision forces in habitually barefoot versus shod runners. Nature. 463 (7280), 531-535 (2010).
  29. Zhou, H., Cen, X., Song, Y., Ugbolue, U. C., Gu, Y. Lower-limb biomechanical characteristics associated with unplanned gait termination under different walking speeds. Journal of Visualized Experiments. (162), (2020).
  30. Doherty, C., et al. The incidence and prevalence of ankle sprain injury: a systematic review and meta-analysis of prospective epidemiological studies. Sports Medicine. 44, 123-140 (2013).
  31. Vuurberg, G., et al. Diagnosis treatment and prevention of ankle sprains: update of an evidence-based clinical guideline. British Journal of Sports Medicine. 52 (15), 956(2018).
  32. Yin, L., Lai, Z., Hu, X., Liu, K., Wang, L. Evaluating postural control and lower-extremity muscle activation in individuals with chronic ankle instability. Journal of Visualized Experiments. (163), (2020).

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

3D HydrogelsLive MicroscopyPhotoacoustic ImagingVascular VisualizationExtracellular Matrix ECMDecellularizationInflammatory CapacityRegenerative CapacityBioreactorGait TerminationWalking SpeedsPostural ControlChronic Ankle Instability

מאמרים קשורים