פותחה מתודולוגיה חזקה לביצוע ניסויים מחקרי האכלה של אובו תוך שימוש בביצי ברוילר מסחריות לא דוגרות כדי לבחון את יכולתן של תרכובות טבעיות וסינתטיות, במקרה זה, ניקוטאינאמיד ריבוזיד, להשפיע על התפתחות השרירים וצמיחתם.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
פותחה מתודולוגיה חזקה לביצוע ניסויים מחקרי האכלה של אובו תוך שימוש בביצי ברוילר מסחריות לא דוגרות כדי לבחון את יכולתן של תרכובות טבעיות וסינתטיות, במקרה זה, ניקוטאינאמיד ריבוזיד, להשפיע על התפתחות השרירים וצמיחתם.
במהלך שלושת העשורים האחרונים, מדעני בשר אדום ועופות התמקדו בפיתוח אסטרטגיות וטכנולוגיות למניפולציה של התפתחות השרירים במהלך התפתחות העובר והעובר. אזור זה ממשיך להיות תחום מיקוד מכיוון שמספר סיבי השריר נקבע בתקופה זו וקובע את הבסיס לכל הצמיחה העתידית. בעופות, מחקרים רבים שהודגמו בהזנת אובו של גורמי גדילה, ויטמינים או חומרים מזינים אחרים שיפרו את השריר העוברי של אפרוח ואת התפתחות המעיים. שיפור בהתפתחות שרירי אובו עשוי להועיל לתעשיית העופות על ידי השפעה אפשרית על תפוקת הבשר, קצב הצמיחה או תנאי המיופתיה. במהלך חמש השנים האחרונות, מעבדת גונזלס באוניברסיטת ג'ורג'יה פיתחה ריבוזיד ניקוטינמיד במתודולוגיית האכלת אובו עבור עוברי עוף-ברוילר, אשר שינתה את התפתחות השרירים. כאשר הוא מוזרק לתוך שק החלמון של העובר המתפתח, ניקוטינמיד ריבוזיד הגדיל את משקל השריר העיקרי של הפקטורליס ואת צפיפות סיבי השריר בצוהר. פרוטוקול זה ידגים מתודולוגיה לביצוע מדויק ושחזורי במחקרי האכלה של אובו תוך שימוש בעוברי ברוילר מסחריים בעלי תקינה גבוהה ובעלי תפוקה גבוהה. נתונים ושיטות אלה יאפשרו לקבוצות מחקר אחרות לבצע במחקרי האכלה של אובו בהצלחה רבה ובשכפול.
מאז 1960, הצריכה לנפש של בשר מעופות בארצות הברית עלתה בקצב מדהים, בעוד שמקורות חלבון ראשוניים אחרים נותרו בקיפאון, ירידה או עלייה מינימלית. תעשיית העופות השקיעה זמן רב ומאמצי מחקר באופטימיזציה של התזונה והגנטיקה כדי לייצר ציפור יעילה שתעמוד בקצב הביקוש. מכיוון שהמטרה העיקרית של תעשיית העופות היא לייצר שרירים להמרה לבשר, מאמציהם שינו באופן דרסטי את מסת השריר האולטימטיבית של הציפור בעת הקטיף.
כמו רוב המינים, עופות מפתחים שרירים באופן דו-פאזי. מיוגנטינה ראשונית משתמשת בתאי גזע מזנכימליים כדי לייצר סיבי שריר ראשוניים, המשמשים כפיגום לגל השני של התפתחות סיבי שריר1. בעופות, מיוגנטיקה ראשונית מתרחשת בימים העובריים 3 עד 8, ומיוגנזה משנית מתרחשת מימים 8 עד 212. לאחר הפיתוח, סיבי שריר ראשוניים ומשניים משמשים כבסיס לכל צמיחת השרירים העתידית באמצעות היפרטרופיה תאית. לכן, מדענים ותעשייה השקיעו מאמצים רבים בניסיון לתמרן מיוגנזה ראשונית ומשנית בכל המינים המייצרים בשר כדי למקסם את תפוקת הבשר.
טכנולוגיה אחת שנחקרת בעופות, הנקראת בהאכלת אובו, כוללת האכלת תרכובות באמצעות הזרקה. בהאכלת אובו, טכנולוגיה המועסקת על ידי תעשיית העופות במשך כמעט 40 שנה, פותחה בתחילה למתןחיסונים 3. הספרות מתעדת כי בהאכלת אובו של תרכובות וחומרים מזינים שונים בתקופות התפתחותיות שונות ובמיקומים שונים בתוך הביצית שהושפעו לטובה בהתפתחות שרירי אובו ובצמיחתם 4,5,6. נכון להיום, מעבדת גונזלס באוניברסיטת ג'ורג'יה היא החלוצה בשימוש בניקוטינמיד ריבוזיד בהאכלת אובו כדי לתפעל את התפתחות שרירי העופות.
ניקוטין-אמיד ריבוזיד, אנלוגי פירידין-נוקלאוזיד של ויטמין B3, מייצר NAD+ דרך מסלול ההצלה7. מכיוון שמסלול זה משתמש בפחות שלבים אנזימטיים כדי לייצר NAD+, הייצור הואה-8 היעיל ביותר. גונזלס וג'קסון9 הדגימו כי תוסף של שק חלמון עוברי מתפתח עם ניקוטינמיד ריבוזיד הגדיל את משקל השריר העיקרי של האפרוח הבוקע ואת צפיפות סיבי השריר. זה אושר מאוחר יותר על ידי Xu et al.10, שמצאו כי הגדלת מינון הריבוזיד של ניקוטינמיד העלתה את משקל השריר והגדילה את צפיפות סיבי השריר. שני המחקרים הראשונים נערכו ב-broiler בעל תפוקה מסחרית. מאחר שלברוילרים בעלי תפוקה גבוהה יש פוטנציאל גנטי משמעותי יותר לגודל מסת שריר אולטימטיבי, מטרת המחקר הייתה לקבוע את ההשפעות של מינון ניקוטינמיד ריבוסייד על מינון הבוקע של אפרוח הבוקע בתפוקה גבוהה על ידי צנובר פקורליס התפתחות וצמיחה משמעותית של השרירים בפתח.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
כל המתודולוגיות אושרו על ידי הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים באוניברסיטת ג'ורג'יה.
1. דגירה של ביצים ומתן טיפול
2. המתת חסד ואיסוף דגימות שריר עיקריות של פקטורליס
3. סטטיסטיקה
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
לא היו השפעות DOS למשקל הגוף של עוברי יום-18 וגוזלים בקעו (P > 0.52; איור 2). לא היו השפעות DOS עבור כל מדידות השרירים העיקריים של החזה העוברי (P > 0.24; איור 3). לא היו השפעות DOS עבור מדידות אורך ורוחב שרירים עיקריות של אפרוחים בקועים (P > 0.26); עם זאת, DOS כן השפיע על משקל השריר ועומקו (P < 0.03; איור 4). לאפרוחים מעוברים שלא הוזרקו להם ניקוטינמיד ריבוזיד היו שריר...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
נכון להיום, מעבדת גונזלס באוניברסיטת ג'ורג'יה היא הקבוצה היחידה שהדגימה השפעות חיוביות של ניקוטינמיד ריבוזיד באובו הניזונה מהתפתחות וצמיחת שרירים עיקריים של פקטורליס . המחקר הראשון מצא כי בהזנת אובו של 250 mM ניקוטינמיד ריבוזיד הגדילה את משקל השריר ואת ממדיו כאשר הוזרקה בשק החלמון9. במחקר המעקב, הזרקת מינון ריבוזיד ניקוטינמיד עולה לתוך החלמון, בדומה למינונים שנבדקו במחקר הנוכחי, לא העלתה את מורפומריית השרירים העיקריים של פקטורליס מעבר למינון10<...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
למחברים אין ניגוד עניינים להצהיר עליו.
המחברים רוצים להודות לקוב ונטרס בע"מ על תרומת הביציות ומתן סיוע טכני על הדגירה של הביציות. המחברים רוצים להודות ל- ChromaDex, Inc. על הסיוע הטכני של ניקוטינמיד ריבוסייד.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| אוויר-טיט וסחר; מחטים היפודרמיות סטריליות - 20 גרם; 1 אינץ' | פישר סיינטיפיק | 14-817-208 | https://www.fishersci.com/shop/products/sterile-hypodermic-needles-32/p-7182916#?keyword= |
| איזון אנליטי | VWR | VWR-214B2 | |
| https://us.vwr.com/store/product/20970740/vwr-b2-series-analytical-and-precision-balances סט חיתוך מלא | DOCAZON | DK1001 | https://www.amazon.com/DOCAZON-Complete-Dissection-Set-Dissecting/dp/B07VBHKSW3 |
| Fisherbrand™ איזוטמפ וסחר; אמבטיות מים דלוקס לשימוש כללי | פישר סיינטיפיק | FSGPD02 | https://www.fishersci.com/shop/products/isotemp-general-purpose-water-baths/p-6448020 |
| פישרברנד וסחר; מזרקים סטריליים לשימוש חד פעמי | פישר סיינטיפיק | 14-955-464 | https://www.fishersci.com/shop/products/sterile-syringes-single-use-12/p-7114739#?keyword= |
| חממות טיטאן ביצה בעוצמה גבוהה | N/A | מדחום | |
| מצח אינפרא אדום | https://www.titanincubators.com/collections/egg-candlers/products/egg-candler-high-intensity HALIDODO | XZ-001 | |
| מיקרוסופט אקסל | מיקרוסופט | N/A | |
| Neiko Tools קליפר דיגיטלי | Neiko | Tools 01408A | https://www.amazon.com/Neiko-01407A-Electronic-Digital-Stainless/dp/B000NEA0P8?th=1 |
| Nexcare Absolute קלטת עמיד למים | Nexcare מותג | 732 | https://www.nexcare.com/3M/en_US/nexcare/products/catalog/~/Nexcare-Absolute-Waterproof-Tape/?N=4326+3294529207+3294631805 & rt=rud |
| גודל עט טמפרטורה ולחות USB Data Logger עם תצוגה | אומגה | OM-HL-SP-TH | |
| SAS 9.4 עבור Windows | SAS Institute | N/A | https://www.sas.com/en_us/home.html |
| Sportsman 1502 Incubator | GQF Manufacturing | 1502 | https://www.gqfmfg.com/item/1502-digital-sportsman/ |
| Tru Niagen (ניקוטינאמיד ריבוזיד) | ChromaDex, Inc. | לא ישים | https://www.truniagen.com/truniagen-300mg/ - הערה, צור קשר עם החברה למוצר טהור |
| Wood Craft Sticks | Creatology | M20001547 https://www.michaels.com/wood-craft-sticks-by-creatology/M20001547.html |
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.