מאמר שיטה

שיטה פשוטה שונה להשראת אוטם שריר הלב בעכברים

DOI:

10.3791/63042

⸱

3 בדצמבר 2021

 ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Cardiology, The First Affiliated Hospital of Bengbu Medical College, 2Department of Cardiology, Ren Ji Hospital, School of Medicine, Shanghai Jiao Tong University

* These authors contributed equally

במאמר זה

סיכום

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

תחת הרדמה מספקת, לב העכבר הוחצן דרך החלל הבין-קוסטלי, ואוטם שריר הלב נגרם בהצלחה על ידי קשירת העורק היורד הקדמי השמאלי (LAD) באמצעות חומרים הזמינים ברוב המעבדות.

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

אוטם שריר הלב (MI) מייצג את אחד הגורמים המובילים למוות. מודלים של MI נמצאים בשימוש נרחב לחקר הפתומנגנונים של שיפוץ פוסט-MI והערכה של טיפולים חדשניים. שיטות שונות (למשל, טיפול באיזופרוטרנול, קריופציעה, קשירת עורקים כליליים וכו ') שימשו להשראת MI. בהשוואה לטיפול באיזופרוטרנול והקפאה, קשירת עורקים כליליים עשויה לשקף טוב יותר את התגובה האיסכמית ואת העיצוב מחדש הכרוני לאחר MI. עם זאת, שיטות מסורתיות לקשירה כלילית בעכברים מאתגרות מבחינה טכנית. המחקר הנוכחי מתאר תהליך פשוט ויעיל להשראת MI בעכברים עם חומרים זמינים. עור החזה של העכבר נחתך בהרדמה יציבה. הלב הוחצן מיד דרך החלל הבין-קוסטלי לאחר הפרדה בוטה של החזה הגדול והפקטורליס מינור. הענף היורד הקדמי השמאלי (LAD) היה קשור בתפר 6-0 3 מ"מ ממקורו. לאחר קשירת LAD, צביעה עם 2,3,5-Triphenyltetrazolium כלוריד (TTC) הצביעה על השראת MI מוצלחת ושינויים זמניים בגודל הצלקת שלאחר MI. בינתיים, תוצאות ניתוח ההישרדות הראו תמותה גלויה תוך 7 ימים לאחר MI, בעיקר בגלל קרע לבבי. יתר על כן, הערכה אקוקרדיוגרפית לאחר MI הדגימה השראות מוצלחות של תפקוד לקוי של התכווצות ועיצוב מחדש של חדרים. לאחר השליטה, מודל MI ניתן להקים בעכברים בתוך 2-3 דקות עם חומרים זמינים.

מבוא

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

אוטם שריר הלב (MI) מייצג את אחד הגורמים המשמעותיים למוות ונכות ברחבי העולם 1,2,3,4,5. למרות reperfusion בזמן, יש כיום מחסור של טיפולים יעילים לטיפול remodeling לב לאחר MI. בהתאמה, נעשו מאמצים ניכרים לחקירה מכניסטית ולניצול טיפולי עבור MI 6,7,8. יש לציין כי הקמת מודלים של אמ"ן היא תנאי מוקדם לעמידה ביעדים אלה.

מספר שיטות (למשל, טיפול באיזופרוטרנול, קריופציעה, קשירת עורקים כליליים וכו ') ה....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

הניסויים הכוללים עבודה בבעלי חיים מבוצעים עם כל האישורים הדרושים מוועדת האתיקה לרווחת בעלי חיים במעבדה של בית החולים רנג'י, אוניברסיטת ג'יאו טונג בשנחאי, בית הספר לרפואה (R52021-0506). במחקר נעשה שימוש בעכברי C57BL/6J נקבות וזכרים בגילאי 8-10 שבועות.

1. הכנת ציוד הרדמה פשוט (אופציונלי)

הערה: זוהי התקנה אופציונלית לפני הניתוח וניתן להחליפה בהרדמה טיטראטית כנזכר בסעיף 2. יש להתייעץ עם ועדת האתיקה המוסדית של בעלי חיים ועם הווטרינרים לפני התאמת מערך זה בנוהלי בעלי חיים.

  1. קח צינור צנטריפוגה 15 מ"ל, ולעשות חתך בניצב לציר הארוך של הצינור כ 3 ס"מ מהפתח.
    הערה: ודא שהחתך גדול ממחצית ההיקף המעגל....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

פרוטוקול הניסוי וחלק מהשלבים הקריטיים מוצגים באיור 1. ציוד ההרדמה הפשוט גרם להרדמה. כפי שניתן לראות באיור 2A, ההרדמה המושרה הייתה יציבה, כפי שמשתקף מקצב הנשימה הסדיר (נע בין 90 ל-107 נשימות לדקה בעכברים שנבדקו). לאחר קשירת עורקים כליליים, ניתוח צביעת TTC הצביע על השראת אוטם שריר הלב מוצלחת ושינויים זמניים בגודל הצלקת שלאחר MI (איור 2B). בינתיים, תוצאות ניתוח הישרדות הראו תמותה גלויה בתוך 7 ימים לאחר MI בעכברים זכרים ונקבות C57BL/6J .......

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

הדו"ח הנוכחי הדגים פרוטוקול קל להשראת MI בעכברים עם חומרים זמינים, אשר שונה משיטה שדווחה על ידי גאו16. מודלים של Murine MI הם הכרחיים לחקירה מכניסטית וסינון תרופות עבור תפקוד לקוי לאחר MI ושיפוץ12. בין הטכניקות הקיימות להשראת MI, קשירת עורקים כליליים מייצגת את הנפוצה ביותר. קשירת עורקים כליליים משחזרת נאמנה את אופי האיסכמיה של אוטם שריר הלב ומובילה לתגובת ריפוי ושיפוץ צלקת בדומה לתרחיש הקליני18,19. עם זאת, הפרוטוקול.......

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

למחברים אין מה לחשוף.

תודות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

עבודה זו נתמכה על ידי מענקים מהקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (81930007, 81625002, 81800307, 81470389, 81500221, 81770238), תוכנית המנהיגים האקדמיים המצטיינים של שנחאי (18XD1402400), ועדת המדע והטכנולוגיה של עיריית שנחאי (201409005200), תוכנית הכישרונות של שנחאי פוג'יאנג (2020PJD030) והקרן למדע פוסט-דוקטורט בסין (2020M671161, BX20190216).

....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
2,3,5-Triphenyltetrazolium chlorideSIGMAT8877-25GTTC מכתים
4-0 תפר משיYUANKANG4-0מכשיר כירורגי
חיטויHIRAYAMAHVE-50עיקור עבור המוצק
BuprenorphineQinghai Pharmaceutical FACTORY Co., Ltd.H10940181להפחית כאבים לאחר הניתוח
צינור צנטריפוגהביולוגי תקווה1850-K15 מ"ל
קרם אפילציהZIKER BIOTECHNOLOGYZK-L2701חומר אפילציה לחיות מעבדה
מלקחייםRWDF12028מכשיר כירורגי
מסנן גזZHAOXINSA-493הגנת המפעיל
איזופלורןRWD20071302משמש להרדמה
מקור אורבייג'ינג PDVLG-150Bמנורת הפעלה
מיקרו-יתושים המוסטטFST13011-12מכשיר כירורגי
מחטBINXIONG42180104מכשיר כירורגי
מחט ותפר משי 6-0JIAHESC086כירורגי
מחזיק מחטShangHaiJZJ32030מכשיר כירורגי
מחזיק מחטShangHaiJZJ32010מכשיר כירורגי
ספוגיות פובידון-יודSingleLadyGB26368-2010לחיטוי עור
CNSTRONGJYJ1030מכשיר כירורגי
קרם עיניים סטרילישניאנג Xingqi פרמצבטיקה ושות', בע"מH10940177למנוע יובש בקרנית
מערכת הדמיית אולטרסאונד ברזולוציה גבוהה במיוחד לבעלי חיים קטניםVisualSonicsVevo 2100ניתוח אקו לב
מכשיר מספריים

מקורות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Fu, Y., et al. A simple and efficient method for in vivo cardiac-specific gene manipulation by intramyocardial injection in mice. Journal of Visualized Experiments. (134), e57074(2018).
  2. Pell, S., Fayerweather, W. E.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

Myocardial InfarctionCoronary Artery LigationMouse MI ModelVentricular RemodelingTTC StainingPost MI RemodelingContractile DysfunctionEchocardiographic AssessmentCardiac RuptureIntramyocardial Injection

מאמרים קשורים