צוות ייעודי יכול להציע למטופלות מאייר-רוקיטנסקי-קוסטר-האוזר את האפשרות לבצע גירוי שחלות מבוקר ושימור ביציות בהקפאת בזמן הווגינופלסטיקה הלפרוסקופית.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
* These authors contributed equally
צוות ייעודי יכול להציע למטופלות מאייר-רוקיטנסקי-קוסטר-האוזר את האפשרות לבצע גירוי שחלות מבוקר ושימור ביציות בהקפאת בזמן הווגינופלסטיקה הלפרוסקופית.
בחולי תסמונת מאייר-רוקיטנסקי-קוסטר-האוזר (MRKHS) המתוכננים לווגינופלסטיקה לפרוסקופית ויש להם רצון לאימהות ביולוגית, אנו מציעים כי תבוצע שאיבת ביציות לפרוסקופית במקביל לשימור בהקפאה. שאיבת ביציות מתבצעת בתחילת הלפרוסקופיה. ימין ושמאל 5 מ"מ trocars ממוקמים, שדרכו מחט שאיפת ביצית 17 G משמש לנקב של השחלות הימנית והשמאלית, בהתאמה. כדי להקל על החשיפה של הזקיקים, השחלות מגויסות ומוחזקות עם מלקחיים לפרוסקופיים.
כאשר שואפים זקיקים מרובים זה ליד זה, קצה המחט נשמר בשחלה כדי להפחית את מספר הפעמים כי קליפת השחלות הוא transfixed ובשל הסיכון האינהרנטי של דימום. הצעדים הבאים אינם משתנים בהשוואה לטכניקה הלפרוסקופית של Davydov עבור vaginoplasty. לפני הניתוח, גירוי שחלות מבוקר מבוצע עם פרוטוקול אנטגוניסט הורמון משחרר הורמונים גונדוטרופין (Gn-RH), וההליך המקביל של שאיבת ביציות ו vaginoplasty מתוכנן 36 שעות לאחר טריגר ההבשלה הסופי של הזקיק. נוזל פוליקולרי נאסף באותם צינורות סטריליים של 10 מ"ל המשמשים במהלך שאיבת ביציות טרנסווגינליות ומועבר בבלוק התחממות (37 מעלות צלזיוס) למעבדת הרבייה בסיוע, שם ביציות בוגרות (metaphase II) הן vitrified.
במקרה זה, סדרה של 23 נשים עם MRKH, ביציות הוחזרו בהצלחה בהקפאה בכל החולים; Vaginoplasty נערך לאחר מכן ללא שינויים, והטיפול באשפוז ובאשפוז לאחר הניתוח (יום הסרת קטטר שתן, יום שחרור מבית החולים, שימוש מרחיב ונוחות במעקב) נותר ללא השפעה. סיבוך אחד לאחר הניתוח התרחש בחולה אחד (חום שהתפתח ביום 5 לאחר הניתוח וזיהוי נוזלים תוך צפקיים באולטרסאונד טרנסבדומינלי) ונפתר לאחר טיפול שמרני. במקום לבצע וגינופלסטיקה כירורגית ולעכב את שאיבת הביציות בחולי MRKH, גישה זו משלבת את שני ההליכים בלפרוסקופיה אחת, ובכך ממזערת את הפולשנות הניתוחית ואת הסיכונים ההרדמה.
עם שכיחות של כ-1 מתוך 4-10,000 נשים, MRKHS הוא הגורם ל-15% ממקרי אמנוריאה ראשוניים. MRKHS מאופיין בהיעדר מולד של החלק העליון של הנרתיק והרחם, ואילו אנומליות בדרכי השתן והשלד קשורות באופן משתנה. ליתר דיוק, קמרון הנרתיק עם עומק של 1-2 ס"מ הוא בדרך כלל נוכח, ושתי קרניים הרחם הבסיסיות ניתן למצוא1.
בעבר, העניין הרפואי העיקרי ב- MRKHS היה לאפשר יחסי מין תקינים, אשר בדרך כלל דורשים בניית ניאוווגינה על ידי גישות לא כירורגיות או כירורגיות2. עם זאת, ההתקדמות ברפואת הרבייה מאפשרת כיום אימהות גנטית במטופלות MRKHS, על ידי פונדקאות 3,4 או לאחרונה השתלת רחם5. בעוד שהשתלת רחם היא עדיין הליך ניסיוני, פונדקאות זמינה במדינות רבות ברחבי העולם6, והתוצאות המיילדותיות והפסיכו-סוציאליות המדווחות דומות לאלה של הפריה חוץ גופית סטנדרטיתותרומת ביציות 7.
גם פונדקאות וגם השתלת רחם דורשות שאיבת ביציות והפריה חוץ גופית, אך לא קיים קונצנזוס לגבי אופן ביצוע איסוף הביציות במטופלות עם MRKHS. גישה טרנסווגינלית יכולה להיות בלתי אפשרית בגלל גמישות נרתיקית לא מספקת8 גם לאחר וגינופלסטיקה, מיקום לא טיפוסי של השחלות9, או מרחק מוגזם בין השחלות לשרוול הנרתיק 4,10. במקרים אלה, שאיבת ביציות לפרוסקופית מייצגת את הגישה האופטימלית מבחינת גישה כירורגית. עם זאת, מכיוון שרוב מטופלות MRKHS עוברות כיום ניאו-וגינופלסטיקה לפרוסקופית, אנו מציעים לבצע שאיבת ביציות לפרוסקופית בזמן הניתוח עבור vaginoplasty11, ולאחר מכן שימור ביציות בהקפאה לשימוש עתידי, ובכך למזער את הפולשנות תוך שילוב הטיפול בתפקוד המיני והרבייה של מטופלות MRKHS.
נתונים דמוגרפיים של חולים
23 חולי MRKH עברו טיפול בפרוטוקול זה עד כה. ממצאים אנמנסטיים, אינסטרומנטליים ומעבדתיים של מטופלים מסוכמים בטבלה 1. אלא אם כן צוין בטבלה 1, לא נמצאו אנומליות מולדות קשורות.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הוועדה האתית המקומית במרכז ההפניות השלישוני ל-MRKHS (בית החולים האוניברסיטאי IRCCS San Raffaele, מילאנו, איטליה) קיבלה הודעה ואישרה את הפרוטוקול לפני יישומו ביולי 2017. כל המטופלים או האפוטרופוסים נתנו הסכמה מדעת חתומה לשליפת ביציות לפרוסקופיות ושימור בהקפאה במהלך וגינופלסטיקה ולשימוש בנתונים קליניים/מעבדתיים אנונימיים למטרות מדעיות.
1. הרכב הקבוצה
2. עבודת אבחון וייעוץ
3. תזמון ההליך הכירורגי וגירוי השחלות המבוקר
4. גירוי שחלות מבוקר: מינון התחלתי, התאמות מינון וניטור, טריגר הבשלת ביציות סופית
5. הליך קליני (לפרוסקופיה): שאיבת ביציות
6. הליך קליני (לפרוסקופיה): וגינופלסטיקה
הערה: צעדי Vaginoplasty נשארים ללא שינוי בהשוואה לטכניקת השינוי הלפרוסקופי של Davydov12.
7. מעבדת הפריה חוץ גופית: יום לפני שאיבת הביציות
8. מעבדת הפריה חוץ גופית: הליך שאיבת ביציות
9. דנודציית ביציות
10. ויטריפיקציה של ביציות
11. אשפוז לאחר הניתוח
12. אשפוז לאחר הניתוח
13. מעקב
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
טבלה 2 כוללת נתוני גירוי שחלתי של המטופלות, ואילו התוצאות הניתוחיות והתפקודיות העיקריות מתוארות בטבלה 3. ההליכים הלפרוסקופיים במקביל של שאיבת ביציות ו vaginoplasty שולבו בהצלחה בכל החולים. 11.4 ± 5.4 (ממוצע ± SD) ביציות הוחזרו, ו-9.6 ± 4.3 MII ביציות הוקפאו (טבלה 3). מניסיוננו עם שימור ביציות בהקפאה בחולים שעברו ART, שיעור ההישרדות של ביציות לאחר חימום בעקבות פרוטוקול ויטריפיקציה זה - המוגדר כשיעור הביציות השלמות מבחינה מורפולוגית בזמן הזרקת זרע תוך-ציטופלסמי - היה 84.5 ...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול זה מפחית את הפולשנות בטיפול ב- MRKHS על ידי שילוב ההליכים של vaginoplasty ושליפת ביציות. למטרה זו, חיוני כי צוות ייעודי מיועד כדי להבטיח כי העיתוי של COS, ההליך הכירורגי, ואת vitrification ביציות מתוזמנים ביעילות.
מטופלות MRKHS שעבורן שיטה לפרוסקופית משולבת זו צפויה להיות מועילה ביותר הן אלה שבהן שליפה טרנסווגינלית תיחשב מאתגרת מבחינה טכנית או בלתי אפשרית בשל שחלות חוץ-אגני הממוקמות לרוחב לאורך קירות האגן14 או בקרבת איברים כגון הכבד וכיס המרה9...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
למחברים אין ניגודי עניינים לחשוף.
לא התקבל מימון ספציפי לעבודה זו.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| הליך אחזור ביציות | |||
| ציוד | |||
| CO2 O2 Incubator | Sanyo Incubator | ||
| Thermo Scientific | |||
| Laminar Flow Hood | Cooper Surgical | ||
| חממה ניידת | כירורגי | ||
| Nikon | |||
| Consumables | |||
| 14 מ"ל פוליסטירן צינור עגול תחתון | בז | 352057 | |
| צלחת 4 בארות | Nunc | 144444 | |
| צלחת פטרי 60 מ"מ Nunc | FA9150270 | ||
| 90 מ"מ פטרי צלחת | Nunc | FA9150360 | |
| סרום אנושי אלבומין 100 מ"ג/מ"ל במי מלח רגילים (5%) | Origio | 3001 | |
| שמן מינרלי לתרבית עוברים | Origio | 4008 | |
| One Well Dish | Oosafe | OOPW-CW05 | |
| Quinn' s יתרון מדיום הפריה SAGE | Origio | 1020 | |
| Quinn' s יתרון בינוני עם HEPES | Origio | 1024 | |
| פיפטות פסטור זכוכית סטריליות<חזקות | |||
| ציוד | |||
| CO2 O2 Incubator | Sanyo | ||
| Flexipet ידית מתכווננת סט | קוק | G18674 | |
| חממה | תרמו מדעי | ||
| למינרי זרימה קולט אדים | כירורגי | ||
| Nikon | |||
| Consumables | |||
| 4 בארות | צלחת Nunc | 144444 | |
| CSCM (Continuos Single Culture) בינוני | Fujifilm irvine Scientific | 90165 | |
| אלבומין אנושי 100 מ"ג/מ"ל במי מלח רגילים (5%) | Origio | 3001 | |
| Hyaluronidase | Fujifilm Irvine Scientific | 90101 | |
| תרבית IVF 60 מ"מ צלחת פטרי | Nunc | FA9150270 | |
| שמן מינרלי לתרבית עוברים | Origio | 4008 | |
| One Well | Dish Oosafe | OOPW-CW05 | |
| קווין s Advantage בינוני עם HEPES | Origio | 1024 | |
| תוסף תחליף סרום | Fujifilm irvine Scientific | 99193 | |
| פיפטות פסטר זכוכית סטריליות הפשטת | |||
| קצות פיפטות (140 μ m) | Cook | K-FPIP-1140-10BS-5 | |
| הפשטת קצות פיפטה (170 μ m) | טבח | K-FPIP-1170-10BS-5 | |
| <חזק>זיגוג ביציות | |||
| 35 מ"מ צלחת פטרי | NUNC | 150255 | |
| 60 מ"מ צלחת פטרי | NUNC | 150270 | |
| 90 מ"מ צלחת פטרי | NUNC | 150360 | |
| מיכל לקירור מתלה | Kitazato | ||
| Cryodevice/cryotop | Kitazato | 81111 | |
| טיימר | |||
| Flexipet | COOK | K- 1000 | |
| Gilson Pipetman | Gilson | F123601 | |
| מדפסת מעבדה LabXpert | Brady | XSL-86-461 | |
| טיפים 20-200 ומיקרו; L | Thermo Scientific | 2160G | |
| טיפים 2-20 ומיקרו; L | Thermo Scientific | 2139-HR | |
| Visotubes | Cryo Bio System | 20 | |
| ערכת הקפאת ויטריפיקציה | Fujifilm Irvine Scientific | 90133-SO | |
| ערכת הפשרת ויטריפיקציה | Fujifilm Irvine Scientific | 90137-SO |
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.