הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

מודל עכברי של אינטובציה אורוטרכאלית וניתוח איסכמיה ריאה מונשמת

3.8K צפיות

DOI:

10.3791/64383

9 בספטמבר 2022

* These authors contributed equally

במאמר זה

סיכום

מודל ניתוחי בעכבר ליצירת פגיעה באיסכמיה של הריאה השמאלית (IR) תוך שמירה על אוורור והימנעות מהיפוקסיה.

תקציר

פגיעה באיסכמיה רפרפוזיה (IR) נובעת לעתים קרובות מתהליכים הכוללים תקופה חולפת של הפסקת זרימת הדם. בריאה, IR מבודד מאפשר את המחקר הניסיוני של תהליך ספציפי זה עם אוורור מתמשך alveolar, ובכך למנוע את התהליכים המזיקים המורכבים של היפוקסיה ו atelectasis. בהקשר הקליני, פגיעה באיסכמיה רפרפוזיה של הריאות (הידועה גם בשם ריאה IRI או LIRI) נגרמת על ידי תהליכים רבים, כולל אך לא מוגבל לתסחיף ריאתי, טראומה דימומית שעברה החייאה והשתלת ריאות. קיימות כיום אפשרויות טיפול יעילות מוגבלות עבור LIRI. כאן, אנו מציגים מודל כירורגי הפיך של IR ריאה הכולל אינטובציה אורוטרכאלית ראשונה ואחריה איסכמיה חד-צדדית של הריאה השמאלית ו- reperfusion עם אוורור alveolar משומר או חילופי גזים. עכברים עוברים כריתת בית חזה שמאלית, שדרכה עורק הריאה השמאלי נחשף, מדומה, מבודד ודחוס באמצעות החלקה הפיכה. לאחר מכן החתך הניתוחי נסגר במהלך התקופה האיסכמית, ובעל החיים מתעורר ומופקר. כאשר העכבר נושם באופן ספונטני, reperfusion נוצר על ידי שחרור החלקה סביב עורק הריאה. מודל הישרדות רלוונטי מבחינה קלינית זה מאפשר הערכה של פגיעה ב-IR של הריאה, שלב הרזולוציה, השפעות במורד הזרם על תפקוד הריאות, כמו גם מודלים של שתי פגיעות המערבות דלקת ריאות ניסיונית. למרות שהוא מאתגר מבחינה טכנית, ניתן לשלוט במודל זה במשך מספר שבועות עד חודשים עם שיעור הישרדות או הצלחה בסופו של דבר של 80%-90%.

מבוא

פגיעה באיסכמיה רפרפוזיה (IR) יכולה להתרחש כאשר זרימת הדם משוחזרת למיטת איברים או רקמות לאחר תקופה מסוימת של הפרעה. בריאה, IR יכול להתרחש בבידוד או בשיתוף עם תהליכים מזיקים אחרים כגון זיהום, היפוקסיה, atelectasis, volutrauma (מנפחי גאות גבוהים במהלך אוורור מכני), barotrauma (שיא גבוה או לחצים מתמשכים במהלך אוורור מכני), או קהה (לא חודר) פגיעה חבלת ריאות 1,2,3 . קיימים מספר פערים בידע שלנו על המנגנונים של LIRI ועל ההשפעה של תהליכים מקבילים (למשל, זיהום) על תוצאות LIRI, וגם אפשרויות הטיפול ב-LIRI מוגבלות. מודל in vivo של LIRI טהור נדרש כדי לזהות את הפתופיזיולוגיה של פגיעה IR ריאה בבידוד ולחקור את תרומתו לכל תהליך מרובה פגיעות שבו פגיעה ריאה היא מרכיב.

ניתן להשתמש במודלים של IR ריאה מורין כדי לחקור את הפתופיזיולוגיה הספציפית לריאות של תהליכים מרובים, כולל השתלת ריאות3, תסחיף ריאתי4, ופגיעה בריאות בעקבות טראומה דימומית עם החייאה5. מודלים המשמשים כיום כוללים השתלת ריאות כירורגית6, הידוק הילאר7, ex vivo ריאה perfusion8, וריאה מאווררת IR9. כאן, אנו מספקים פרוטוקול מפורט עבור מודל IR ריאה מאוורר של מורין של פגיעה ריאתית סטרילית. ישנם יתרונות רבים לגישה זו (איור 2), כולל העובדה שהיא משרה היפוקסיה מינימלית ואטלקטזיס מינימלי, וזהו מודל ניתוחי הישרדות המאפשר מחקרים ארוכי טווח.

הסיבות לבחור בדגם זה של LIRI על פני דגמים אחרים כגון הידוק הילאר ומודלים של פרפוזיה ex vivo הן כדלקמן: מודל זה ממזער את התרומות הדלקתיות של אטלקטזיס, אוורור מכני והיפוקסיה; הוא משמר אוורור מחזורי; הוא שומר על מערכת חיסונית במחזור הדם in vivo שלמה שיכולה להגיב לפגיעה ב-IR; ולבסוף, כהליך הישרדותי, הוא מאפשר ניתוח ארוך טווח של המנגנונים של יצירת פציעות משניות (מודלים של 2 פגיעות) ופתרון פציעות. באופן כללי, אנו מאמינים שמודל IR ריאות מאוורר זה מספק את הצורה "הטהורה" ביותר של פגיעת IR שניתן לחקור בניסוי.

פרסומים אחרים תיארו את השימוש באינטובציה אורו-טרכאלית של עכברים לביצוע הזרקות IT או התקנות10,11, אך לא כנקודת המוצא לניתוח הישרדות כפי שהוא במודל זה. המיקום של צינור אורוטרכאלי מאפשר ביצוע של ניתוח ריאות על ידי מתן אפשרות לקריסת הריאה הניתוחית. זה גם מאפשר reinflation של הריאה בסוף ההליך, אשר קריטי עבור pneumothorax ועל היכולת של העכבר לחזור אוורור ספונטני בסיום ההליכים. לבסוף, הסרת הצינור האורוטרכאלי המאובטח היא הליך פשוט, שבניגוד לטרכאוטומיה פולשנית, תואם לניתוח הישרדות. זה מאפשר מחקרים ארוכי טווח המתמקדים בהבנת ההתקדמות והפתרון של LIRI והפרעות נלוות, כמו גם יצירת מודלים של פציעות כרוניות.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

כל הנהלים והשלבים המתוארים להלן אושרו על ידי הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים (IACUC) באוניברסיטת קליפורניה בסן פרנסיסקו. ניתן להשתמש בכל זן עכבר, אם כי לחלק מהזנים יש תגובה דלקתית IR ריאה חזקה יותר בהשוואה לאחרים12. עכברים שגילם כ-12-15 שבועות (30-40 גרם) או מבוגרים יותר סובלים ושורדים את ניתוח ה-IR הריאה טוב יותר מעכברים צעירים יותר. עכברים זכרים ונקבות כאחד יכולים לשמש לניתוחים אלה.

1. פרוטוקול אינטובציה של עכבר

  1. הרדמה והכנה לאינטובציה
    1. נגב את בטן העכבר עם מקלון אתנול. הרדמת העכבר עם הזרקה intraperitoneal של tribromoethanol (250-400 מ"ג / ק"ג). להעריך את העומק המתאים של הרדמה על ידי חוסר רפלקס נסיגה דוושה. יש להניח משחת סיכה לעיניים עכשיו או מאוחר יותר (שלב 2.1.4).
      הערה: עבור הליך זה, tribromoethanol (ו etomidate כאופציה חלופית) מספק מישור הרדמה יציב מבלי להשפיע על התנאים ההמודינמיים הדרושים לניתוח זה. הרדמה זו משמשת רק פעם אחת כדי למנוע את הסיכון של הידבקויות הצפק. איזופלוראן יכול לשמש גם, אבל אנחנו לא משתמשים בו כאן. המתרגל חופשי להשתמש בכל מתכון הרדמה שהוא רואה לנכון.
    2. הניחו את העכבר המרדים על מעמד אינטובציה או תמיכת פלסטיק במצב שכיבה, התלוי על ידי החותכות העליונות שלו על תפרים 4-0 לולאתיים (משי או אחרים) על פני שני עוגני תמיכה.
    3. כדי לשמור על העכבר משותק במהלך הליך אינטובציה, להדביק באופן רופף את החלק התחתון של החזה (או שתי הגפיים העליונות) על הרציף.
    4. הניחו את האור הגמיש הפיברופטי בעדינות על קנה הנשימה של העכבר, מעט מתחת למיתרי הקול. כוונן את רמת ההארה כך שרק שדה כהה נראה לעין כאשר מסתכלים לתוך הלוע של העכבר למעט אור אדום הנובע מתחת למיתרי הקול, ומדגים את המטרה למיקום הסופי של הצינור האנדוטרכאלי. שים לב שתנועות מיתרי הקול צריכות להיות גלויות בעין בלתי או, במידת הצורך, תחת הגדלה.
  2. הליך אינטובציה
    1. החזיקו את הפינצטה ביד הדומיננטית והשתמשו בהן כדי לאחוז בעדינות ולהוציא את הלשון מחלל הפה.
    2. פתח את הלסת התחתונה באמצעות מלקחיים המוחזקים על ידי היד הלא דומיננטית, ולאחר מכן דחף את המלקחיים לתוך הגרון כדי להרים בעדינות את האפיגלוטיס. בשלב זה, לשחרר את הלשון מן הפינצטה.
    3. חפשו את מיתרי הקול. הם צריכים להיפתח ולהיסגר בהתאם לכל נשימה. מחזיקים את הצינורית עם חוט ההנחיה טעון מראש, מכניסים את קצה החוט דרך מיתרי הקול.
    4. נזהרים מאוד לא להזיז את החוט על ידי החזקת חלק ממנו שנמצא מחוץ לצינורית אלא ממש מעל מיתרי הקול, מושכים את הצינורית, ומשאירים רק את החוט במקום עם הקצה הדיסטלי שלו בתוך קנה הנשימה.
    5. בשלב זה, בצע הדמיה שנייה של מיתרי הקול כדי לאשר כי קצה הדיסטלי של החוט נשאר מועבר דרך מיתרי הקול המוארים אל קנה הנשימה, ואינו נמצא בוושט הלא מואר.
    6. החזק את החוט מחוץ לפה עם המלקחיים המעוקלים ביד שמאל, התייצב על משטח קשה, וקדם בזהירות את קטטר 20G עם כנפי סרט על החוט.
    7. ברגע שהקצה הדיסטלי של החוט יוצא מהקצה האחורי של קטטר 20G או צינור אנדוטרכאלי, החזיקו את הקצה הזה עם המלקחיים המעוקלים וקדמו בצורה חלקה את קטטר ה-20G לתוך קנה הנשימה.
    8. הסר בזהירות את החוט מהקצה הדיסטלי של קטטר 20G עם המלקחיים המעוקלים מבלי לעקור את מיקום הקטטר.
    9. חברו לזמן קצר את הקטטר למכונת ההנשמה לפני שאתם מאבטחים אותו כדי לוודא מיקום נכון לקנה הנשימה ולא לוושט. אשר את מיקום קנה הנשימה על ידי תצפית על תנועות דופן בית החזה הדו-צדדיות התלויות באוורור מכני והיעדר אינפלציה של הבטן.
  3. לאחר אינטובציה
    1. נתק את הקטטר ממכונת ההנשמה. תקן את כנפי הקלטת (המחוברות לקטטר) דרך השפה התחתונה של העכבר באמצעות תפר 4-0 vicryl כדי להדק בחוזקה את הצינור האנדוטרכאלי (ETT) לעכבר במהלך כל ההליכים / המניפולציות הבאים.
      הערה: לחלופין, ניתן להשתמש בנייר דבק משי או בקלטת אחרת כדי לאבטח את ה- ETT, אולם יש לנקוט בזהירות כדי למנוע פריקה של ה- ETT במהלך תנועת החיה ממזחלת האינטובציה למשטח הניתוח.
    2. הסר בזהירות את העכבר ממזחלת האינטובציה. לחבר לזמן קצר את הקטטר למכונת ההנשמה שנקבעה בנפח גאות 0.2-0.225 מ"ל וקצב נשימה של 120-150 נשימות לדקה כדי לאשר מיקום קנה הנשימה הנכון של צינור האורוטרצ'אל ולאחר מכן להתנתק עם העכבר נושם באופן ספונטני דרך צינור האורוטרצ'אל.
    3. אין להשאיר את בעל החיים ללא השגחה מנקודה זו ואילך עד שהוא חזר להכרה מספקת כדי לשמור על משכיבה סטרנלית בסוף ההליך.

2. פרוטוקול ניתוח איסכמיה ריאה ורפרפוזיה (IR)

  1. משכך כאבים והכנת האתר הכירורגי
    1. נגבו את בטן העכבר במקלון אתנול והזריקו בופרנורפין (0.05-0.1 מ"ג/ק"ג) באופן תוך-צפקי.
    2. לגלח את השיער מעל אזור בית החזה השמאלי עד עצם השכמה השמאלית. הסר שיער מגולח עודף באמצעות ספוגיות אלכוהול.
      הערה: ניתן לבצע שלבים 2.1.1 ו- 2.1.2 גם לפני אינטובציה אם יש חשש להתנתקות מה- ETT כאשר הוא מאובטח בנייר דבק משי.
    3. הניחו את העכבר על משטח חימום במצב רוחבי שמאלי או 3/4 מסתובב וחברו את צינור קנה הנשימה על מכונת ההנשמה עם נפח גאות של 0.2-0.225 מ"ל (~ 8 מ"ג / ק"ג) וקצב נשימה של 120-150 נשימות לדקה. אין להשתמש בתוספת חמצן לצורך הליך זה.
    4. יש למרוח חומר סיכה לעיניים עם צמר גפן סטרילי. סובבו את העכבר ל-3/4 צד שמאל למעלה ושיתקו את כל ארבעת הגפיים ואת הזנב בעזרת סרט מעבדה.
    5. יש לחטא את אזור העור המגולח והפרווה שמסביבו באמצעות פובידון-יוד ולהמתין לייבוש התמיסה. לאחר מכן מכסים את שדה הניתוח בווילון סטרילי או בסרט פלסטיק שקוף ויוצרים פתח מלבני בווילון או בסרט הפלסטיק לשדה הניתוח.
  2. הליך כירורגי
    1. אשר את הרמה המתאימה של הרדמה (המסופקת על ידי הממשל של tribromoethanol ו buprenorphine כפי שתואר קודם לכן) על ידי בדיקת התגובה צביטה הבוהן.
    2. באמצעות זוג מספריים חדים וזוג מלקחיים גדולים יותר (מלקחיים בדוגמה צרה או דומה), בצע חתך עור רוחבי באורך 2 ס"מ מתחת לזווית הנחותה של עצם השכמה בבית החזה הצדדי השמאלי. השתמשו במספריים ובזוג מלקחיים עדינים יותר (מלקחיים עדינים במיוחד או דומים) כדי לחתוך לשכבת השרירים ולנתח עד לצלעות.
    3. זהה את החלל האינטרקוסטלי השני והחזק את הצלע השנייה עם המלקחיים העדינים הנוספים. משיכת הצלע כלפי מעלה, השתמש בלהב אזמל סטרילי #11 או #12 (מעוקל) (אין צורך בידית) כדי להיכנס לחלל הצדר על ידי הפרדה וחיתוך על פני השרירים הבין-קוסטלייםשל החלל השני-3. שקול להשהות את האוורור כדי להפחית את הפגיעה בריאה השמאלית.
    4. הכנס שלושה retractors מעוקרים. השתמש בצפלד הקטן ביותר/הצר ביותר לאורך כיוון הצלעות, במחזיר בגודל בינוני שמאלה לאורך הצלעהשנייה , ובמשענת הגדולה ביותר מימין לאורך פני הצלעהשלישית .
    5. פתח את החזה עם נסיגה איטית ומתקדמת באמצעות מיתרי retractor אלסטי. חשוף וזהה את עורק הריאה השמאלי (PA) על ידי הזזת קצה הריאה השמאלית בעזרת צמר גפן סטרילי.
    6. השתמש במיקרו מלקחיים, מלקחיים דקים במיוחד ביד ימין ו- PA או מלקחיים מתרחבים ביד שמאל, כדי לחשוף בעדינות וליצור את השדה שבו ניתן לראות את הרשות השמאלית ואת הברונכוס.
    7. באמצעות מלקחיים של PA, הרימו את הרשות השמאלית ומשכו בעדינות אך בחוזקה כלפי מעלה וצפלאד כדי לדמיין את הברונכוס השקוף למטה. הגדל את ההגדלה במיקרוסקופ הדיסקציה (ראה רשימת ציוד לפרטים נוספים) בנקודה זו למקסימום (2x).
      הערה: יש לעקר את כל הציוד לפני השימוש. בנוסף, כדי לשמור על סטריליות, רק קצות כלי הניתוח צריכים להיכנס לשדה הניתוח הסטרילי.
    8. תוך כדי התרחקות הרשות מהברונכוס, מעבירים בזהירות את המלקחיים האולטרה-דקים הסגורים דרך החלל שבין הרשות השמאלית לברונכוס. לאחר מכן, השתמש במלקחיים אלה כדי להחזיק ולמשוך 7-0 או 8-0 תפר פרולן דרך החלל שבין עורק הריאה השמאלי (מעל) לברונכוס (להלן).
    9. הקיפו את הרש"פ השמאלית על ידי קשירת תלוש כדי ליצור חסימה ברשות. הפרעה בזרימת הדם ניתנת להדמיה בקלות תחת המיקרוסקופ. זה מסמן את תחילת התקופה האיסכמית.
    10. החצנת הקצה החופשי של הקשר דרך נקודת כניסה שונה בבית החזה השמאלי הקדמי באמצעות מחט 24G-28G ואבטחת קצה התפר באמצעות פיסת נייר דבק קטנה לזיהוי קל יותר בהמשך.
    11. יש לנפח מחדש את הריאה כדי להוציא כמה שיותר אוויר מחלל בית החזה באמצעות שסתום/צינורות PEEP במאוורר המכרסמים. לאחר מכן, סגרו את הצלעות עם שני תפרים מניילון 4-0 מופרעים.
    12. סגור את השריר ואת השכבה התת עורית עם תפר ניילון פועל 4-0. לאחר מכן יש למרוח שתיים או שלוש טיפות של בופיווקאין מקומי (0.5%) על החתך. השתמשו בתפר ניילון 4-0 כדי לסגור את שכבת העור עם תפר רץ.
  3. טיפול לאחר הניתוח
    1. כאשר האוורור הספונטני התחדש, נתק את הצינור האנדוטרכאלי ממכונת ההנשמה והוציא את העכבר.
    2. הניחו את העכבר על משטח החימום כדי לשמור על טמפרטורת הגוף במהלך ההתאוששות המוקדמת שלאחר ההרדמה.
    3. בזהירות לפקח על העכבר תוך התאוששות מהרדמה כללית. משוך את החלקה המוחצנת בעדינות בסוף התקופה האיסכמית (30 דקות או שעה).
    4. הזיזו את העכבר ממשטח החימום לכלוב לאחר שהפגין סימני התאוששות: ימין עצמי ו/או תנועה.
    5. לאחר תקופת reperfusion (1 שעה או 3 שעות), להרדים את החיה ולאסוף דם על ידי נקב לב ורקמת ריאות לניתוח נוסף. במשך שעה אחת reperfusion, לאסוף פלזמה עבור ELISA, רקמה עבור RNA, וניתוח חלבונים; עבור 3 שעות reperfusion, בנוסף לאסוף רקמות עבור היסטולוגיה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

דלקת שנוצרת כתוצאה מפגיעה חד-צדדית באיסכמיה סטרילית של הריאות הסטריליות (IR): לאחר שעה אחת של איסכמיה, ראינו רמות גבוהות יותר של ציטוקינים בסרום ובתוך רקמת הריאה הן על ידי ELISA והן על ידי qRT-PCR שהגיעו לשיא של שעה לאחר רפרפוזיה וחזרו במהירות לנקודת ההתחלה תוך 12-24 שעות לאחר רפרפוזיה13. עבור דגימות שנאספו ב-3 שעות לאחר רפרפוזיה, צפינו בחדירת נויטרופילים אינטנסיבית לתוך רקמת הריאה השמאלית וציינו שעוצמת הדלקת הייתה תלויה בזן של העכבר שבו נעשה שימוש (איור 1). יש לציין ...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

כתב יד זה מפרט את השלבים הכרוכים בביצוע מודל IR הריאה המאווררת שפותח על ידי Dodd-o et al.9. מודל זה סייע לזהות מסלולים מולקולריים המעורבים ביצירה ובפתרון של דלקת מ-IR ריאה בבידוד 14,15,16,17, IR ריאה בשילוב עם זיהום קיים 18, ו-IR ריאה ביחס לציר המעיים-ריאה ותרומת מיקרוביום המעי13,18,19

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים מצהירים כי אין להם אינטרסים כלכליים מתחרים.

תודות

עבודה זו מומנה על ידי תמיכה מחלקתית ממחלקת ההרדמה והטיפול הפריאופרטיבי, אוניברסיטת קליפורניה סן פרנסיסקו ובית החולים הכללי של סן פרנסיסקו, כמו גם על ידי פרס NIH R01 (ל- AP): 1R01HL146753.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
<חזק>ציוד
צינור אור סיבים אופטייםCole-ParmerUX-41720-65צינור אור סיבים
אופטיים מקור אור סיבים אופטייםAmScopeמק"ט: CL-HL250-Bמקור אור לאורות סיבים אופטיים
Germinator 500Cell Point Scientific, Inc.No.5-1450כרית חימום מעקר חרוזים
AIMS14-370-223אפשרות חלופית
ערכות טיפוח ליתיום.יון (קוצץ שיער)מוצרים ביתיים WAHLמק"ט 09854-600Bלהסרת שיער עכבר באתר הניתוח
מיקרוסקופNikonSMZ-10אפשרויות חדשות אחרות זמינות באתר החברה
הנשמה MiniVentHavard 845מאוורר עכבר
מנקה אולטרסאונדCole-ParmerUX-08895-05כלים נקיים ששימשו בפעולה
כרית חימוםKent ScientificRT-0501כדי לשמור על חום העכבר בזמן ההתאוששות מניתוח
משקלמשקל Cole-ParmerUX-11003-41משקל שקילה
<חזק>כלי ניתוח
4-0 תפר משיEthicon683Gלסגירת שכבת שריר
7-0 Prolene SetureEthicon IndustryEP8734Hשימוש ליצירת קשר החלקה של עורק הריאה השמאלי
Bard-Parker (11) אזמל (להב כירורגי מפלדת פחמן צלעות אחורית, סטרילי, לשימוש חד פעמי)372611 כירורגי אספןלכניסה לחלל בית החזה (אפשרות 1)
Bard-Parker (12) אזמלאספן כירורגי372612לכניסה לחלל בית החזה (אפשרות 2)
מלקחיים עדינים במיוחד FST11150-10מלקחיים להחזקת שרירים/צלעות
מערכת נסיגה מגנטית מקבעFST1. לוחית בסיס (מס' 18200-03)
2. מקבעים (מס' 18200-01)
3. מחזירים (מס' 18200-05 עד 18200-12)
4. אלסטומר (מס' 18200-07) 5. מפסק (No.18200-08)
מערכת נסיגה של בעלי חיים
קטנים מונוject מחט היפודרמית סטנדרטיתCOVIDIEN05-561-20למתן תרופות IP
מלקחיים דפוס צרFST11002-12מלקחיים בגובה העור
מחזיק מחט/נהג מחטFST12565-14להחזקת
מחטיםמחטים BD305110מחט 26 מד להחצנת קשר החלקה (גם מחט 24 או 26 מד בסדר)
PA / מלקחיים מרחיבי כליFST00125-11להחזיק PA; מספריים אחיזה לא מזיקים
FST14060-09משמש לחתך וחיתוך לתוך ניתוח הדחיפה של שכבת השרירים
אולטרה עדין Dumont מיקרו מלקחייםFST11295-10 (מלקחיים Dumont #5, קצה ביולוגיה, ממד קצה: 0.05*0.02 מ"מ, 11 ס"מ)למעבר במרווח שבין עורק הריאה השמאלי לסימפונות
<חזק>ריאגנטים
0.25% BupivacaineHospira, Inc.0409-1159-02משכך כאבים מקומי המשמש במהלך סגירת פצע כירורגי
Avertin (2,2,2-Tribromoethanol)Sigma-AldrichT48402-25Gחומר הרדמה, המשמש להרדמת העכבר לניתוח IR, הריכוז המשמש בניתוחי IR הוא 250-400 מ"ג/ק"ג.
BuprenorphineCovetrus North America59122משכך כאבים: הריכוז המשמש לניתוח הוא 0.05-0.1 מ"ג/ק"ג
חומר סיכה לעינייםBAUSCH + LOMBמרגיע משחת עינייםמקלה על יובש בעין
פובידון-יוד 10% תמיסהMEDLINE INDUSTRIES INCSKU MDS093944H (2 FL OZ, חומר חיטוי מקומי)נוזל מקומי המיושם לחיטוי יעיל לעזרה ראשונה יעילה בתחילת הניתוח
<חזק>חומרים
מותג אלכוהולBD  BD 326895לעיקור אזור הזרקה וניתוח
סרט פלסטיKIRKLANDStretch-Tite פרימיוםאלטרנטיבה לכיסוי השדה הכירורגי המעוקר (חסכוני יותר)
וילונות כירורגיים למכרסמיםStoelting50981שדה סטרילי או וילון לשדה כירורגי
יישום כותנה סטריליPwi-Wnaps703033משמש למריחת חומר
Top SpongesDukal Corporaton Reorder# 5360עצירת דימום מהעור/שריר
דגם מכשירסיכה לעיניים

מקורות

  1. Shen, H., Kreisel, D., Goldstein, D. R. Processes of sterile inflammation. Journal of Immunology. 191 (6), 2857-2863 (2013).
  2. Fiser, S. M., et al. Lung transplant reperfusion injury involves pulmonary macrophages and circulating leukocytes in a biphasic response. The Journal of Thoracic and Cardiovascular Surgery. 121 (6), 1069-1075 (2001).
  3. Lama, V. N., et al. Models of lung transplant research: A consensus statement from the National Heart, Lung, and Blood Institute workshop. JCI Insight. 2 (9), 93121(2017).
  4. Miao, R., Liu, J., Wang, J. Overview of mouse pulmonary embolism models. Drug Discovery Today: Disease Models. 7 (3-4), 77-82 (2010).
  5. Mira, J. C., et al. Mouse injury model of polytrauma and shock. Methods in Molecular Biology. 1717, 1-15 (2018).
  6. Krupnick, A. S., et al. Orthotopic mouse lung transplantation as experimental methodology to study transplant and tumor biology. Nature Protocols. 4 (1), 86-93 (2009).
  7. Gielis, J. F., et al. A murine model of lung ischemia and reperfusion injury: Tricks of the trade. The Journal of Surgical Research. 194 (2), 659-666 (2015).
  8. Nelson, K., et al. Animal models of ex vivo lung perfusion as a platform for transplantation research. World Journal of Experimental Medicine. 4 (2), 7-15 (2014).
  9. Dodd-o, J. M., Hristopoulos, M. L., Faraday, N., Pearse, D. B. Effect of ischemia and reperfusion without airway occlusion on vascular barrier function in the in vivo mouse lung. Journal of Applied Physiology. 95 (5), 1971-1978 (2003).
  10. Lawrenz, M. B., Fodah, R. A., Gutierrez, M. G., Warawa, J. Intubation-mediated intratracheal (IMIT) instillation: a noninvasive, lung-specific delivery system. Journal of Visualized Experiments. (93), e52261(2014).
  11. Rayamajhi, M., et al. Non-surgical intratracheal instillation of mice with analysis of lungs and lung draining lymph nodes by flow cytometry. Journal of Visualized Experiments. (51), e2702(2011).
  12. Dodd-o, J. M., Hristopoulos, M. L., Welsh-Servinsky, L. E., Tankersley, C. G., Pearse, D. B. Strain-specific differences in sensitivity to ischemia-reperfusion lung injury in mice. Journal of Applied Physiology. 100 (5), 1590-1595 (2006).
  13. Prakash, A., et al. Lung ischemia reperfusion (IR) is a sterile inflammatory process influenced by commensal microbiota in mice. Shock. 44 (3), 272-279 (2015).
  14. Prakash, A., et al. Alveolar macrophages and toll-like receptor 4 mediate ventilated lung ischemia reperfusion injury in mice. Anesthesiology. 117 (4), 822-835 (2012).
  15. Dodd-o, J. M., et al. The role of natriuretic peptide receptor-A signaling in unilateral lung ischemia-reperfusion injury in the intact mouse. American Journal of Physiology. Lung Cellular and Molecular Physiology. 294 (4), 714-723 (2008).
  16. Prakash, A., Kianian, F., Tian, X., Maruyama, D. Ferroptosis mediates inflammation in lung ischemia-reperfusion (IR) sterile injury in mice. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine. 201, (2020).
  17. Tian, X., et al. NLRP3 inflammasome mediates dormant neutrophil recruitment following sterile lung injury and protects against subsequent bacterial pneumonia in mice. Frontiers in Immunology. 8, 1337(2017).
  18. Tian, X., Hellman, J., Prakash, A. Elevated gut microbiome-derived propionate levels are associated with reduced sterile lung inflammation and bacterial immunity in mice. Frontiers in Microbiology. 10, 159(2019).
  19. Liu, Q., Tian, X., Maruyama, D., Arjomandi, M., Prakash, A. Lung immune tone via gut-lung axis: Gut-derived LPS and short-chain fatty acids' immunometabolic regulation of lung IL-1β, FFAR2, and FFAR3 expression. American Journal of Physiology. Lung Cellular and Molecular Physiology. 321 (1), 65-78 (2021).
  20. Dodd-o, J. M., et al. Interactive effects of mechanical ventilation and kidney health on lung function in an in vivo mouse model. American Journal of Physiology. Lung Cellular and Molecular Physiology. 296 (1), 3-11 (2009).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות