במאמר זה אנו מתארים מודל עכבר אורתוטופי פרה-קליני עבור GBM, שהוקם על ידי הזרקה תוך-גולגולתית של תאים שמקורם בגידולי מודל עכבר מהונדסים גנטית. מודל זה מציג את סימני ההיכר של המחלה של GBM אנושי. עבור מחקרים תרגומיים, הגידול במוח העכבר נמצא במעקב על ידי MRI in vivo והיסטופתולוגיה.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
מודלים אורתוטופיים תרגומיים של גליובלסטומה מולטיפורמה
במאמר זה
סיכום
תקציר
מודלים של עכברים מהונדסים גנטית (GEM) עבור גליובלסטומה מולטיפורמה אנושית (GBM) הם קריטיים להבנת ההתפתחות וההתקדמות של גידולי מוח. שלא כמו גידולי xenograft, ב- GEMs, גידולים מתעוררים במיקרו-סביבה הטבעית בעכבר כשיר חיסון. עם זאת, השימוש ב- GBM GEMs במחקרי טיפול פרה-קליניים מאתגר בשל השהיות ארוכות של גידולים, הטרוגניות בתדירות הניאופלזמה ועיתוי התפתחות הגידול בדרגה מתקדמת. עכברים המושרים באמצעות הזרקה אורתוטופית תוך גולגולתית ניתנים יותר למחקרים פרה-קליניים, ושומרים על מאפיינים של גידולי GEM. יצרנו מודל גידול מוח אורתוטופי הנגזר ממודל GEM עם סטיות Rb, Kras ו-p53 (TRP), המפתח גידולי GBM המציגים מוקדים ליניאריים של נמק על ידי תאים ניאופלסטיים, וכלי דם צפופים המקבילים ל-GBM אנושי. תאים שמקורם בגידולי GBM מסוג GEM מוזרקים תוך גולגולתית לעכברים מושתלים מסוג בר ומותאמים לזנים ומרבים גידולים בדרגה IV, ובכך עוקפים את תקופת החביון הארוכה של הגידול בעכברי GEM ומאפשרים יצירת קבוצות גדולות וניתנות לשחזור למחקרים פרה-קליניים. המאפיינים הרבים, החודרניים וכלי הדם של מודל TRP GEM עבור GBM משוחזרים בגידולים האורתוטופיים, וסמנים היסטופתולוגיים משקפים תת-קבוצות GBM אנושיות. צמיחת הגידול מנוטרת על ידי סריקות MRI סדרתיות. בשל האופי הפולשני של גידולים תוך גולגולתיים במודלים חיסוניים, מעקב קפדני אחר הליך ההזרקה המתואר כאן חיוני למניעת צמיחת גידול מחוץ לגולגולת.
מבוא
גליובלסטומה (GBM; גליומה דרגה IV) היא הגידול השכיח והממאיר ביותר במוח, והטיפולים הנוכחיים אינם יעילים, וכתוצאה מכך הישרדות חציונית של 15 חודשים1. מודלים פרה-קליניים אמינים ומדויקים המייצגים את מסלולי האיתות המורכבים המעורבים בצמיחת גידולי מוח ופתוגנזה חיוניים כדי לזרז את ההתקדמות בהערכת משטרים טיפוליים חדשים עבור GBM. מודלים עכבריים שבהם שורות תאי גידול במוח האנושי מושתלים באופן תת-עורי בעכברים מדוכאי חיסון אינם משקפים את הסביבה החיסונית הטבעית של גידולי מוח, וגם לא ניתן להשתמש בהם כדי להעריך את יכולתם של טיפולים לחצות את מחסום הדם-מוח2. באופן אידיאלי, מודלים פרה-קליניים של עכברים צריכים גם לשחזר מקרוב את ההיסטופתולוגיה האנושית של GBM, כולל הרמה הגבוהה של פולשניות לתוך פרנכימה3 שמסביב. למרות שמודלים של עכברים מהונדסים גנטית (GEM) מפתחים גידולים בהקשר של מערכת חיסון שלמה, לעתים קרובות נדרשות תוכניות רבייה מסובכות, וגידולים עלולים להתפתח לאט ולא באופן עקבי4. מודלים של אלוגרפט שמקורם ב-GEM מתאימים יותר למחקרים טיפוליים פרה-קליניים, שבהם יש צורך בקבוצות גדולות של עכברים נושאי גידול במסגרת זמן קצרה יותר.
בדו"ח קודם, תיארנו מודל עכבר GBM אורתוטופי הנגזר ישירות מגידולי GEM. גידולים ב-GEM נובעים מאירועים גנטיים באוכלוסיות תאים (בעיקר אסטרוציטים) המבטאים חלבון גליה פיברילרי חומצי (GFAP), הגורמים להתקדמות לגליובלסטומה. אבני חן TRP אלה מכילות טרנסגן TgGZT121 (T), המבטא T121 לאחר חשיפה לרקומבינאז Cre מונע GFAP. ביטוי חלבון T121 גורם לדיכוי פעילות החלבון Rb (Rb1, p107 ו-p103). ביטוי משותף של טרנסגן Cre מונע GFAP (GFAP-CreERT2) מכוון ביטוי לאסטרוציטים בוגרים לאחר השראת טמוקסיפן. עכברי TRP מחזיקים גם בקראס מוטנטי תלוי Cre (KrasG12D; R) אלל, המייצגים הפעלה של מסלול הקולטן טירוזין קינאז, והם הטרוזיגוטיים לאובדן Pten (P)5,6. סטיות גנים מקבילות ברשתות הקולטן טירוזין קינאז (RTK), PI3K ו-RB מעורבות ב-74% מפתוגנזה7 של GBM. לכן, מסלולי האיתות העיקריים שהשתנו בגליובלסטומה אנושית מיוצגים על ידי המוטציות המהונדסות בעכברי TRP, במיוחד גידולי GBM, שבהם מופעלות מטרות משותפות במורד הזרם של RTK5.
המודל האורתוטופי הסינגני שמקורו ב-GEM אומת כמודל המשחזר מאפיינים של גידולי מוח אנושיים, כולל פולשניות ונוכחות של סמנים ביולוגיים תת-סוגיים, לשימוש כפלטפורמה להערכת טיפולים בסרטן המתמקדים במסלולים חריגים בגליובלסטומה. תאים גודלו בתרבית מגידולים שנקצרו ממוחות TRP והושתלו מחדש במוחם של עכברים מותאמי זן, תוך שימוש בציוד סטריאוטקטי להזרקה תוך גולגולתית בקליפת המוח. מודל עכבר אורתוטופי פרה-קליני זה פיתח גידולי GBM שהיו תאיים מאוד, פולשניים, פלאומורפיים עם קצב מיטוטי גבוה, והציגו מוקדים ליניאריים של נמק על ידי תאים ניאופלסטיים וכלי דם צפופים, כפי שנצפה עבור GBM אנושי. נפחי הגידול וצמיחתו נמדדו על ידי דימות תהודה מגנטית in vivo (MRI).
בדו"ח זה, אנו מתארים את הטכניקה האופטימלית להזרקה תוך גולגולתית של תאי GBM ראשוניים או קווי תאים לתוך מוח עכבר מסוג פראי, תוך שימוש בגידולי TRP כדוגמה. אותו פרוטוקול עשוי להיות מותאם לעכברים מדוכאי חיסון ולקווי תאים אחרים של GBM. טיפים חיוניים ניתנים למניעת מלכודות נפוצות, כגון הכנת תאים תת-אופטימלית או דליפת תאים באתר ההזרקה, ולשימוש נכון בציוד הסטריאוטקטי כדי להבטיח שחזור ואמינות של המודל. למטרות תרגומיות, אנו מאמתים את המודל על ידי זיהוי MRI של גידול גידולי מוח בבעלי חיים חיים, אפיון היסטולוגי, ומציגים דוגמה לטיפול בעכברים נושאי גידול.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול
פרוטוקול המחקר המתואר כאן אושר על ידי NCI בוועדת פרדריק לטיפול ושימוש בבעלי חיים. NCI-Frederick מוכר על ידי AAALAC International ועוקב אחר מדיניות שירותי בריאות הציבור לטיפול ושימוש בחיות מעבדה. הטיפול בבעלי חיים ניתן בהתאם לנהלים המפורטים ב"מדריך לטיפול ושימוש בחיות מעבדה (המועצה הלאומית למחקר, 2011; The National Academies Press, וושינגטון די.סי).
1. הכנת תאים להזרקה
הערה: תאים ראשוניים של גידול במוח עכבר (MBR) ששימשו למודל זה בודדו במקור מעכברי TRP GEM המושרים על ידי טמוקסיפן, כמתואר ב- El Meskini et al.5. פרטים על הכנת התא ניתן למצוא בהפניה זו.
- בצע את השלבים הבאים בטכניקה סטרילית בארון בטיחות ביולוגית.
- תרבית תאי גידול ראשוניים במוח במבחנה עד שהם מגיעים לשלב הצמיחה המעריכי.
- קצרו את התאים ב -0.25% טריפסין, ולאחר שהם התנתקו, דללו אותם עם מדיום צמיחה כדי להשבית את הטריפסין.
- משחררים את התאים בצנטריפוגה ב 400 x גרם ושוטפים עם מדיה ללא סרום. יש לחזור על הפעולה פעם אחת לפני הספירה.
- ספור את התאים באופן ידני או באמצעות מונה תאים אוטומטי. להשהות מחדש את התאים במתילצלולוז סטרילי 5% במי מלח חוצצים פוספט 1x (PBS) בריכוז הרצוי, בהתבסס על נפח הזרקה סופי של 2 μL. ריכוז התאים הרצוי עשוי להשתנות בהתאם לקו התא ולמודל הגידול במוח. עבור תאי GBM GEM TRP, אנו מזריקים 2 μL של תמיסת 25 x 106 תאים/מ"ל, או 50,000 תאים.
2. מתח עכבר
- לגדל או לרכוש זן עכבר מתאים התואם את רקע הזן של תאי הגידול במוח. עבור תאי TRP, השתמש בעכברי B6D2F1/J בני 9 שבועות (מהכלאה בין נקבות C57BL/6J [B6] וזכרי DBA/2J [D2]) כמושתלי תאים סרטניים.
3. הקמת אזור הניתוח
הערה: כל שלבי הניתוח מתבצעים בטכניקה אספטית בסביבה נקייה ומחוטאת. פילינג וציוד מגן אישי, כולל מסכה, צריכים להילבש על ידי המנתח. כלי ניתוח חייבים להיות מעוקרים בחום לפני השימוש.
- הניחו את מגיני המשטחים מתחת למנגנון הסטריאוטקסי ועל משטח העבודה.
- חבר את צינור הוויניל ממכונת ההרדמה ליציאת IN של פלטפורמת ההרדמה בגז של המנגנון הסטריאוטקסי, וצינור נוסף ליציאת Out.
- חבר את הצג הדיגיטלי למקור חשמל ולמנגנון.
- חברו את בקר המיקרו-משאבה (איור 1A) למקור חשמל וחברו את המיקרו-משאבה (איור 1A) לזרוע המניפולטורית של המכשיר (ראו גם הוראות היצרן).
- הגדר את המיקרו-משאבה ל- 5.6 nL/s עבור הזרקת נפח של 2,000 nL.
- הפעל את מעקר החרוזים החם.
- חבר את כרית החימום של העכבר לבקר הטמפרטורה וחבר למקור חשמל. מניחים את הצלחת על במת הבמה. כוונו את טמפרטורת הצלחת ל-37°C.
- טען בחזרה מזרק מדויק 30 גרם, נזהר לא להכניס בועות. הכנס את הבוכנה וחבר את המחט. הקפד לאחוז את המחט על ידי הרכזת בלבד. לחץ על הבוכנה עד שטיפה של תערובת תאי מתילצלולוז יוצאת דרך המחט. נקו את המחט עם פד להכנת אלכוהול 70% על ידי ניגוב זהיר של דפנות המחט, או על ידי הנחת פד גזה סטרילי על משטח העבודה והכתמתו. היזהר לא לכופף או לשבור את המחט.
- חבר את המזרק המדויק למיקרו-משאבה וסובב את זרוע המניפולטור הרחק מהבמה, כדי למנוע תזוזה של מחט המזרק לפני הנחת העכבר על הבמה.
4. הכנת העכבר לניתוח
- הרדימו את העכבר על ידי הכנסתו לתא האינדוקציה עם וופורייזר איזופלורן המוגדר ל -2.5%, או על פי הנחיות מוסדיות. הפעל את זרימת האיזופלורן אל חרוט האף.
- העבירו את העכבר למנגנון הסטריאוטקסי והצמידו אותו לקונוס האף, כשהשיניים העליונות ממוקמות על תמיכת חרוט האף (איור 1B, 9). הדקו את הידית על חרוט האף כדי לאבטח (איור 1B). ודא רמה מתאימה של הרדמה על ידי ביצוע צביטת בוהן כדי לבדוק רפלקס.
- עקוב אחר צבע האוזניים, כפות הרגליים והריריות (ורוד) כדי להבטיח חמצון הולם. כמו כן, לפקח על קצב הנשימה (עלייה או ירידה יכולה להצביע על הצורך להתאים את רמות isoflurane).
- הכניסו מוטות אוזניים (איור 1B) לשתי האוזניים והדקו את הידית כדי לאבטח את הראש.
- החל משחת עיניים כדי לשמן את העיניים בזמן העכבר תחת הרדמה.
- השתמש במלקחיים מעוקלים כדי למרוט את השיער על ראשו של העכבר לאזור גדול בכ -150% מהחתך המתוכנן, כדי להבטיח תנאים אספטיים נאותים.
- הזריקו 0.5-1 מ"ג/ק"ג buprenorphine SR analgesia תת עורית, או השתמשו במשכך כאבים אחר שאושר על ידי פרוטוקול.
- מקם את הבדיקה הרקטלית של העכבר כדי לפקח על הטמפרטורה הפנימית ולמנוע היפותרמיה עקב הרדמה. שמור על טמפרטורת גוף העכבר בין 36.5 ל 38.5 ° C.
- לחטא את שדה הניתוח באמצעות עיגולים חיצוניים, לסירוגין בין קרצוף כירורגי אתנול שלוש פעמים.
- באמצעות מלקחיים כדי למשוך את העור מתוח, לעשות חתך של כ 1 ס"מ עם להב אזמל, החל בין העיניים. הברגמה צריכה להיות גלויה דרך החתך.
הערה: לטכניקה סטרילית נכונה, גע באתר הניתוח רק עם קצות הכלים המעוקרים, והנח את קצות הכלים על משטח סטרילי בלבד (כגון החלק הפנימי של חבילת כלים אוטומטית). - השתמשו בקצה העץ של אפליקטור עם קצוות כותנה כדי לגרד רקמת חיבור עודפת, ולאחר מכן בקצה הכותנה של אפליקטור אחר לייבוש.
5. הזרקת תאים
- החזר את זרוע המניפולטור עם חיבור המזרק מעל העכבר, הידוק הידית כדי לאבטח. השתמש בידיות X ו- Y במישור האופקי כדי להזיז את תושבת המזרק מעל ברגמה. הורידו את המחט באמצעות ידית Z כדי לאשר את מיקום הברגמה. הגדר את מסוף הקריאה הדיגיטלי לאפס.
- השתמש בידיות X ו- Y ובקריאה הדיגיטלית המתאימה כדי להזיז את המחט למיקום הרצוי. עבור מיקום קליפת המוח, הקואורדינטות המתאימות הן 3 מ"מ אחורית, 2 מ"מ לרוחב ימינה לברגמה, ועומק 2 מ"מ מהדורה מאטר. השתמש בידית Z כדי להזיז את המחט לפני השטח של הגולגולת.
- נקב חור בגולגולת באמצעות מזרק 1 מ"ל עם מחט 25 G מחובר. מניחים את שיפוע המחט לכיוון מזרק ומחט מדויקים 30 G, ובזהירות לסובב את זרוע מניפולטור הצידה. בעזרת האגודל והאצבע, גלגלו את המחט קדימה ואחורה באיטיות ובלחץ עדין עד שקצה המחט פשוט חודר את כובע הגולגולת.
- השתמש אפליקטור עם קצוות כותנה כדי לטפוח כל דם מחור המחט. החלף את זרוע המניפולטור למיקום המתאים עם מחט מזרק מדויקת טעונה מעל החור. יישרו את קצה המחט עם החור, השתמשו בידית Z כדי להוריד את המחט מטה אל הדורא של המוח, והגדירו את מסוף הקריאה הדיגיטלי לאפס.
- באמצעות ידית Z, להוריד את המחט 1 מ"מ, ולאחר מכן לחכות 1 דקה. חזור על הפעולה עד לקבלת העומק הרצוי (2 מ"מ כפי שצוין).
הערה: המחט מונמכת באיטיות כדי למנוע נזק נוסף לרקמת המוח שמסביב ולזרימה האחורית של תמיסת התא. - הפעל את המיקרו-משאבה ולאחר מכן עקוב כדי לוודא שהמשאבה מפסיקה כאשר הוזרק 2 מיקרוליטר. תהליך זה אמור להימשך כ -6 דקות במהירות שצוינה. לאחר מכן, המתן דקה לפני הזזת המחט.
6. הסרת המחט וסגירת הפצע
- הרימו את המחט 1 מ"מ ולאחר מכן המתינו דקה. חזור על הפעולה עד שהמחט נקייה לחלוטין מהגולגולת.
- במידת הצורך, השתמש במוליך עם קצוות כותנה כדי לטפוח כל דם הרחק מאתר ההזרקה.
- בעזרת קצה העץ של מוליך כותנה, לוקחים חתיכה קטנה של שעוות עצם (~ 1 מ"מ) ומעצבים אותה לחרוט. מניחים אותו לתוך הפתח בגולגולת, דוחפים את השעווה לתוך החור.
- מחממים מלקחיים באמצעות מעקר חרוזים ומשתמשים בהם כדי להמיס את שאריות השעווה על הגולגולת ולהחליק אותה.
- יש לטפטף כשתי טיפות של תמיסת בופיוואקאין (חומר הרדמה) לתוך החתך ולהשתמש במלקחיים כדי למשוך את קצוות העור יחד.
- משכו את העור מתוח והניחו קליפס פצע אחד או שניים כדי לסגור את העור.
- הניחו את העכבר בכלוב התאוששות נקי על כרית חימום באזור ללא טיוטות, והתבוננו בעכבר מקרוב. אפשר לעכבר להתעורר באופן מלא מההרדמה, לחזור לפעילות רגילה, לפני החזרתו לדיור רגיל.
- בדוק את העכבר מדי יום לאחר ההליך הכירורגי ונהל טיפול בכאב, בהתאם להנחיות המוסדיות.
- אם buprenorphine SR (שלב 4.6) משמש לשיכוך כאבים, נוסחת שחרור מושהה נמשכת 72 שעות. חזור על הזריקה רק אם קיים כאב או אי נוחות נראים לעין לאחר 72 שעות. כאשר מבוצע כראוי, העכברים להתאושש היטב מן זריקות תוך גולגולתי ומשככי כאבים נוספים אין צורך.
- הסר את הסיכות 7-10 ימים לאחר הניתוח.
- מעקב אחר צמיחת הגידול על ידי הדמיה חיה של בעלי חיים (MRI).
- הרדימו את העכברים כאשר מגיעים לנקודות קצה אנושיות (כלומר, אם בעל החיים מאבד 20% ממשקל גופו או הופך להיפותרמי).
- בשל האופי החודרני של גידולי מוח אלה, צפו בעכברים לתסמינים נוירולוגיים, כגון הליכה לא אחידה, שיתוק חלקי, ספינינג או הטיית ראש. הרדימו עכבר אם נצפים אחד מהסימנים הקליניים הללו לצמיחת גידול מתקדם.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות
עכברים המוזרקים עם תאי גידול במוח צריכים להיות במעקב יומי עבור סימנים של צמיחת הגידול כגון התקפים, אטקסיה, או ירידה במשקל. גידול במוח עשוי להיות מנוטר גם על ידי סריקת MRI במרווחי זמן קבועים. סריקות MRI שבועיות מאפשרות הדמיה של עומס הגידול הגובר במוח ומדידות נפח הגידול (איור 1C). בפרט, גידולי TRP מציגים צמיחה אגרסיבית, ונפחי הגידול התלת-ממדיים ניתנים למדידה על ידי MRI תוך שבועיים עד שלושה שבועות לאחר הזרקה תוך גולגולתית (עם נפח ממוצע של 30 עד 40 מ"מ3). במחקר מייצג אחד, קבוצה של עכב...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
מודלים פרה-קליניים חיוניים להערכת מטרות טיפוליות חדשות ואסטרטגיות טיפול חדשניות בגליובלסטומה. מודלים של עכברים מהונדסים גנטית עבור GBM הם בעלי יתרון של הופעת הגידול באתר האוטוכתוני, אך לעתים קרובות עם חביון ארוך וצמיחת גידול בלתי צפויה13. גידולי מודל GEM מציגים שיהוי של 4-5 חודשים, וחלון הזמן האידיאלי להדמיה, גיוס וטיפול משתנה בקרב עכברים בודדים. למודל האורתוטופי יש ציר זמן מבוסס היטב ומתמשך של צמיחה וטיפול של 4-5 שבועות, וגידולים מזוהים באופן אמין על ידי MRI לאחר השתלה. השימוש במודלים אורתוטופיים...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
המחברים מצהירים כי אין ניגודי עניינים.
תודות
אנו אסירי תודה למר אלן א. קולאגה על הסיוע הטכני המצוין ולגב' מישל ל. גומפרכט על שליטוש טכניקות הניתוח. אנו מודים לד"ר פיליפ ל. מרטין על ניתוח פתולוגיה ולגב' ליליה אילבה וד"ר ג'וזף קלן מהתוכנית הלאומית לדימות בעלי חיים קטנים במעבדה הלאומית פרדריק עבור סריקות MRI.
פרויקט זה מומן במלואו או בחלקו במימון פדרלי מהמכון הלאומי לסרטן, המכונים הלאומיים לבריאות, תחת חוזה מס' HHSN261201500003I. התוכן של פרסום זה אינו משקף בהכרח את ההשקפות או המדיניות של מחלקת הבריאות ושירותי האנוש, וגם אזכור שמות מסחריים, מוצרים מסחריים או ארגונים אינו מרמז על תמיכה מצד ממשלת ארה"ב.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| 5% מתיל צלולוז ב-1X PBS, מזרק טוברקולין | Millipore Sigma | M7027 | |
| 1 מ"ל, קצה החלקה | BD | 309659 | |
| 6 אינץ' אפליקטורים עם קצה כותנה | פוריטן | S-18991 | |
| פלטפורמת במה מתכווננת | דיוויד קופף מכשירים | דגם 901 | |
| טיפים למחסום אירוסול | פישר סיינטיפיק | 02-707-33 | |
| רפידות הכנה לאלכוהול סטריליות, גדולות - 2.5 x 3 אינץ' | PDI | C69900 | |
| B6D2 זן עכבר (C57Bl/6J x DBA/2J) | Jackson Laboratory | Jax #10006 | |
| התמחויות כירורגיות | שעוות עצם | 901 | |
| Bupivacaine 0.25% | Henry Schein | 6023287 | |
| BuprenorphineSR | ZooPharm | n/a | |
| צינורות ויניל שקופים 1/8ID X 3/16OD | UDP | T10004001 | |
| CVS חומר סיכה משחת עיניים | CVS בית מרקחת | 247881 | |
| אזמל חד פעמי, #10 | להב אזמל Miltex | 16-63810 | |
| מכונת הרדמה בגז עם חיבור חמצן ותיבת הרדמה | Somni Scientific | n/a | החוקר עשוי להשתמש בציוד סטנדרטי מתקן |
| גז פלטפורמת הרדמה לעכברים | מכשירי דיוויד קופף | דגם 923-B | |
| GraphPad פריזמה | Graphpad | פריזמה 9 גרסה 9.4.1 | |
| מחט המילטון 30 גרם, ½ ", רכזת קטנה, נקודה pst 3 | המילטון | הזמנה | |
| מיוחדת מזרק מיקרוליטר מדויק המילטון, 1701 RN, ללא מחט 10 ומיקרו; L | Hamilton | 7653-01 | |
| מעקר חרוזים חם עם חרוזים | Fine Science Tools | 18000-45 | |
| Invitrogen Countess 3 Automated Cell Counter | Fisher Scientific | AMQAX2000 | |
| IsoFlurane | Piramal Critical Care | 29404 | |
| רפידות הכנה לאלכוהול איזופרופיל | PDI | C69900 | |
| ITK_SNAP (גרסה 36.X, 2011- נוכח) | מעבדת המחשוב והמדע של פן תמונה (PICSL) באוניברסיטת פנסילבניה, והמכון המדעי למחשוב והדמיה (SCI) באוניברסיטת יוטה | ||
| KOPF מכשיר סטריאוטקסי לבעלי חיים קטנים עם קונסולת קריאה דיגיטלית | David Kopf Instruments | דגם 940 | |
| Masterflex Fitting, PVDF, ישר, מפחית דוקרני צינור, מזהה 1/4 אינץ' x 1/8 אינץ' מזהה | Masterflex | HV-30616-16 | |
| עכבר חימום צלחת | דיוויד קופף מכשירים | PH HP-4M | |
| עכבר בדיקה רקטלית | דיוויד קופף מכשירים | PH RET-3-ISO | |
| Nalgene סופר Versi-יבש משטח מגינים | ThermoFisher Scientific | 74000-00 | |
| P20 פיפטה | גילסון | F123600 | |
| פובידון יוד קרצוף כירורגי | Dynarex | 1415 | |
| רפלקס 9 מ"מ מוליך קליפ פצע | כלי מדע עדינים | 12031-09 | |
| רפלקס 9 מ"מ מסיר קליפ פצע | כלי מדע עדינים | 12033-00 | |
| רפלקס 9 מ"מ קליפס פצע | כלי מדע עדינים | 12032-09 | |
| מלקחיים של סמקן, | כלי מדע עדינים | 11009-13 | |
| בקר טמפרטורה | מכשירי דיוויד קופף | PH TCAT-2LV | |
| Trypsin-EDTA (0.25%) | ThermoFisher Scientific | ||
| עם מחט 25 גרם, קצה החלקה | BD | 309626 | |
| UltraMicroPump 3 עם בקר Micro2T | דיוק עולמיים | דגם UMP3T |
מקורות
- Tamimi, A. F., Juweid, M. Epidemiology and Outcome of Glioblastoma. Glioblastoma. , (2017).
- Robertson, F. L., Marques-Torrejon, M. A., Morrison, G. M., Pollard, S. M. Experimental models and tools to tackle glioblastoma. Disease Models & Mechanisms. 12 (9), (2019).
- Wen, P. Y., Kesari, S. Malignant gliomas in adults. The New England Journal of Medicine. 359 (5), 492-507 (2008).
- Haddad, A. F., et al. Mouse models of glioblastoma for the evaluation of novel therapeutic strategies. Neuro-Oncology Advances. 3 (1), (2021).
- El Meskini, R., et al. A preclinical orthotopic model for glioblastoma recapitulates key features of human tumors and demonstrates sensitivity to a combination of MEK and PI3K pathway inhibitors. Disease Models & Mechanisms. 8 (1), 45-56 (2015).
- Song, Y., et al. Evolutionary etiology of high-grade astrocytomas. Proceedings of the National Academy of Sciences. 110 (44), 17933-17938 (2013).
- Cancer Genome Atlas Research Network. Comprehensive genomic characterization defines human glioblastoma genes and core pathways. Nature. 455 (7216), 1061-1068 (2008).
- Motomura, K., et al. Immunohistochemical analysis-based proteomic subclassification of newly diagnosed glioblastomas. Cancer Science. 103 (10), 1871-1879 (2012).
- Choyke, P. L., Dwyer, A. J., Knopp, M. V. Functional tumor imaging with dynamic contrast-enhanced magnetic resonance imaging. Journal of Magnetic Resonance Imaging. 17 (5), 509-520 (2003).
- Raza, S. M., et al. Identification of necrosis-associated genes in glioblastoma by cDNA microarray analysis. Clinical Cancer Research. 10, 212-221 (2004).
- Raza, S. M., et al. Necrosis and glioblastoma: a friend or a foe? A review and a hypothesis. Neurosurgery. 51 (1), 2-12 (2002).
- Hambardzumyan, D., Bergers, G. Glioblastoma: defining tumor niches. Trends in Cancer. 1 (4), 252-265 (2015).
- Kijima, N., Kanemura, Y. Glioblastoma. Mouse Models of Glioblastoma. , Exon Publications. (2017).
- Casanova, F., Carney, P. R., Sarntinoranont, M. Effect of needle insertion speed on tissue injury, stress, and backflow distribution for convection-enhanced delivery in the rat brain. PloS One. 9 (4), 94919(2014).
- Jin, F., Jin-Lee, H. J., Johnson, A. J. Mouse Models of Experimental Glioblastoma. Gliomas. , Exon Publications. (2021).
- Zalles, M., Towner, R. A. Pre-Clinical Models and Potential Novel Therapies for Glioblastomas. Gliomas. , Exon Publications. 1-13 (2021).
- Wierzbicki, K., et al. Targeting and therapeutic monitoring of H3K27M-mutant glioma. Current Oncology Reports. 22 (2), 19(2020).
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
