מאמר שיטה

כריתת בלוטות לימפה בכלי הדם הפופליטאליים בגפה האחורית של הארנב לאינדוקציה של בצקת לימפה משנית

DOI:

10.3791/64576

⸱

30 בנובמבר 2022

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Microsurgery, Jesús Usón Minimally Invasive Surgery Centre, 2Department of Plastic Surgery, Hospital de la Santa Creu i Sant Pau

במאמר זה

סיכום

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כאן מתוארת האינדוקציה הכירורגית של בצקת לימפה נרכשת יציבה בגפה האחורית של הארנב. ניתן להשתמש בחיית ניסוי זו כדי לחקור עוד יותר את השפעת הטיפול בלימפאדמה בטכניקות מיקרו-כירורגיות.

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

בצקת לימפה היא מצב שכיח הקשור לעתים קרובות לסרטן ולטיפול בו, מה שמוביל לפגיעה במערכת הלימפה, והטיפולים הנוכחיים הם בעיקר פליאטיביים ולא מרפאים. שכיחותו הגבוהה בקרב חולים אונקולוגיים מעידה על הצורך לחקור הן תפקוד לימפטי תקין והן תפקוד פתולוגי. כדי לשחזר לימפאדמה כרונית, יש צורך לבחור חיית ניסוי מתאימה. ניסיונות לבסס מודלים של בעלי חיים מוגבלים על ידי יכולת ההתחדשות של מערכת הלימפה. מבין המועמדים הפוטנציאליים, הגפה האחורית של הארנב קלה לטיפול ואקסטרפולציה לתרחיש הקליני האנושי, מה שהופך אותה ליתרון. בנוסף, גודלו של מין זה מאפשר בחירה טובה יותר של כלי לימפה לכריתת בלוטות לימפה בכלי דם.

במחקר זה אנו מציגים הליך של כריתת בלוטות לימפה וסקולריות בגפה האחורית של הארנב לגרימת לימפאדמה משנית. בעלי חיים מורדמים עברו מדידה היקפית, חדירת V כחולה פטנט ולימפוגרפיה ירוקה אינדוציאנין (ICG-L) באמצעות פלואורסצנציה קרובה לאינפרא אדום בזמן אמת, טכניקה המאפשרת זיהוי של בלוטות פופליטאליות בודדות ותעלות לימפה. הגישה למבנים המזוהים מושגת על ידי כריתת הצומת הפופליטאלי וקשירת הלימפה האפרנטית האפרנטית האמצעית והרוחבית. יש לנקוט בזהירות מיוחדת כדי להבטיח שניתן יהיה לזהות ולקשור כל כלי לימפה המצטרף למערכת הלימפה של עצם הירך בתוך הירך מבלי להיכנס לצומת הפופליטאלי.

הערכה לאחר הניתוח בוצעה 3, 6 ו-12 חודשים לאחר הזירוז באמצעות מדידות היקפיות של הגפה האחורית ו-ICG-L. כפי שהודגם במהלך המעקב, החיות פיתחו זרימה חוזרת עורית שנשמרה עד החודשה-12 , מה שהופך את חיית הניסוי הזו לשימושית להערכות חדשות לטווח ארוך בניהול בצקת לימפה. לסיכום, הגישה המתוארת כאן היא ישימה וניתנת לשחזור. בנוסף, במהלך חלון הזמן המוצג, הוא יכול לייצג לימפאדמה אנושית, ובכך לספק כלי מחקר שימושי.

מבוא

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

בצקת לימפטית היא מצב כרוני הראוי לתשומת לב מיוחדת, בשל שכיחותה ברחבי העולם, היעדר טיפול מרפא וסטנדרטי והשפעתה החמורה על איכות חייהם של החולים 1,2.

במדינות מפותחות, בצקת לימפה נרכשת בעיקר והיא משנית לסרטן השד, בשל השכיחות הגבוהה של ממאירות זו; השכיחות המצטברת של לימפאדמה הקשורה לסרטן השד 10 שנים לאחר הניתוח יכולה להגיע עד 41.1%3. עם זאת, מחלות כמו מלנומה, סרטן גינקולוגי, גידולים באברי המין וניאופלזמות ראש וצוואר קשורות גם לשכיחות גבוהה של מחלה זו4. כריתה אזורית של בלוטות הלימפה, כחלק מהטיפול האונקולוגי הדרוש להגדלת שיעורי ההישרדות, מובילה לשיבוש הניקוז הלימפטי התפקודי. במקרים מסוימים, הדבר מביא למנגנוני פיצוי המונעים או מעכבים את הופעת הלימפאדמה5. עם זאת, כאשר ניתנים כימותרפיה והקרנות, מנגנונים אלה אינם מסוגלים לפצות על השינוי, וכתוצאה מכך מתרחשת בצקת לימפה. יש לכך השפעה שלילית על איכות החיים של המטופלים, ומשפיעה על רווחתם התפקודית, החברתית והפסיכולוגית 6,7.

הצורך בריפוי יעיל לבצקת לימפה דורש הבנה של הפיזיופתולוגיה של מערכת הלימפה, כמו גם תובנה עמוקה של המנגנונים התאיים המורכבים ותגובותיהם במערכות לימפה תקינות ולא מתפקדות 8,9,10. תובנות כאלה ניתן לקבל בתחילה ממודלים ניסיוניים של בעלי חיים שיכולים לשחזר מחלות אנושיות כרוניות11.

נעשו ניסיונות רבים לשכפל לימפאדמה במודלים ניסיוניים של בעלי חיים; עם זאת, רובם נפגעו על ידי מגבלות מסוימות, כולל חוסר היכולת לשחזר אי ספיקה לימפטית כרונית במודל חי יציב, עלויות המחקר, והכי חשוב, יכולת ההתחדשות הגדולה של מערכת הלימפה, המאפשרת לה להחזיר את זרימת הדם12,13.

מחקר זה מציג את הגישה הניסיונית להשראת בצקת לימפה נרכשת יציבה בניתוח באמצעות הגפה האחורית של הארנב. בהתבסס על סקירת ספרות, חיה זו יכולה להיחשב אופטימלית להתפתחות לימפאדמה בגלל האנטומיה העקבית של מערכת הלימפה האחורית שלה, הכוללת צומת פופליטאלי יחיד המנקז את הגפה האחורית ומגיע למערכת הלימפה העיקרית של עצם הירך ברגל14,15.

האנטומיה הספציפית של הגפה האחורית של הארנב מאפשרת רבייה של ההליכים הכירורגיים המבוצעים בבני אדם כדי לגרום לבצקת לימפה משנית. לכן, הליך זה יכול לשמש להכשרה מיקרוכירורגית ולמחקר פרה-קליני כדי להוציא את התוצאות לרפואה האנושית.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כל ההליכים אושרו על ידי ועדת האתיקה של המרכז לכירורגיה זעיר פולשנית חסוס אוסון והנחיות הרווחה של הממשלה האזורית, המבוססות על חקיקה אירופאית.

1. הכנה טרום ניתוחית וכירורגית

  1. מאכלסים תשע נקבות ארנבות לבנות ניו זילנדיות במשקל 4-4.5 ק"ג וגילן 4 חודשים בכלובים נפרדים המוחזקים בטמפרטורה של 22-25 מעלות צלזיוס, עם גישה חופשית למזון ומים. וודאו כי הכלובים מכילים מגש פוליסולפון בשטח פנים של 3 מ"ר וגובה 40 ס"מ, כמו גם מיטה עם שבבי עץ.
    1. זהה את הכלובים עם קוד הפרויקט ומספר זיהוי החיה.
    2. אקלום את בעלי החיים במשך שבוע לפני הניתוח כדי למנוע בעיות הנגרמות על ידי לחץ. אסוף ערכי מעבדה לפני הניתוח של דגימות דם כדי להבטיח שכל בעל חיים במצב בריאותי תקין לפני ההרדמה.
  2. ודא שכל הארנבים עוקבים אחר צום של 12 שעות לפני כל הליך כירורגי.
    1. לאחר תרופות מקדימות יש לחמצן את הארנבים באמצעות מסכת פנים (מסכת הול) למשך 5 דקות עם 100% חמצן וזרימת גז טרי של 3-5 ליטר לדקה. בצע את שלב האינדוקציה המשותפת עם מידזולם (0.3 מ"ג/ק"ג) ופרופופול (10 מ"ג/ק"ג) תוך ורידי.
  3. החדרו את הארנבים עם 3.0-3.5 צינורות אנדוטרכיאליים, עם פנאומוטפונציה, המחוברים למעגל מעגלי סגור למחצה המקושר למכונת הנשמה עם זרימת גזים טריים במהירות של 1 ליטר לדקה למשך 5 דקות ראשוניות, ולאחר מכן מוגדר על 0.5 ליטר לדקה.
    1. בצע הרדמה תחזוקתית על ידי שאיפת סבופלורן בריכוז של 3%-3.5% המוגדר על הוופורייזר.
  4. יש לתת עירוי רציף של תמיסת הלקטט של רינגר (2-4 מ"ל/ק"ג/שעה) דרך הווריד השולי של האוזן לארנבים המורדמים לאורך כל ההליך הכירורגי.
    1. השתמש במשחת עיניים מגן כדי להגן על פני העין.
  5. ניטור הרדמה כללית: השתמש במדחום רקטלי כדי לנטר את הטמפרטורה ב-38.7-39.7 מעלות צלזיוס, לבדוק את צבע הקרום הרירי ולעקוב אחר רוויית O2ב->95% וקצב הלב ב-180-240 פעימות לדקה באמצעות אוקסימטר דופק ארנב.
  6. הניחו תמיכה תרמית כך שהחיה תשמור על טמפרטורה קבועה לאורך כל ההליך.
  7. יש לתת קטורולאק (1.5 מ"ג/ק"ג) בתוספת טרמדול (3 מ"ג/ק"ג) תוך ורידי לשיכוך כאבים תוך ניתוחי.
  8. יש לתת אנטיביוטיקה (7.5 מ"ג/(ק"ג∙יום) אנרופלוקסצין תת עורי [s.c.]) לפני הניתוח ו-5 ימים לאחר הניתוח, כמו גם משככי כאבים לאחר הניתוח (10 מיקרוגרם/(ק"ג∙יום) בופרנורפין S.C.) למשך 5 ימים.
  9. הניחו את הארנבים במצב שכיבה וגלחו את הגפיים האחוריות והמפשעה של החיה. הניחו את החיה בשכיבה גבית/שכיבה וגזיזו את השיער מהגפיים האחוריות ומאזורי המפשעה.
  10. בצע חיטוי עור על ידי מריחת 0.5% כלורהקסידין ו-70% אתנול על העור שגולח בעבר. לאחר חיטוי האזור, כסו את הארנב במטלית סטרילית, למעט הגפה האחורית השמאלית.

2. ניתוח כריתת בלוטות לימפה בכלי הדם הפופליטאליים (איור 1)

  1. הסתנן 0.2-0.3 מ"ל של אינדוציאנין ירוק (ICG) תוך עורי במרחבים הבין-דיגיטליים השני והשלישי של הגפה האחורית השמאלית. עסו, כופפו בעדינות והאריכו את הגפה האחורית למשך מספר דקות כדי להקל על ספיגת הצבע לכלי הלימפה. השתמש בגפה הנגדית כבקרה.
  2. השתמשו במצלמת פלואורסצנטיות קרובה לאינפרא-אדום בזמן אמת כדי לדמיין ולסמן (באמצעות סמן כירורגי) את כלי הלימפה החוצים בגובה הברך ואת בלוטת הלימפה הפופליטאלית (PLN) על העור (איור 2).
  3. הזרקת V כחול פטנט (0.2 מ"ל) לאזור הבין-דיגיטלי לזיהוי לאחר מכן של כלי הלימפה ובלוטות הלימפה.
  4. ברגע שה-PLN מזוהה באמצעות מצלמת פלואורסצנטיות קרובה לאינפרא-אדום בזמן אמת (איור 3), צרו חתך של 2 ס"מ במרכז הפוסה הפופליטאלית, לאורך הציר הארוך של הגפה האחורית דרך הווריד האיסכיאלי, שנראה דרך העור.
    1. כדי לקבל תמונות פנורמיות בזמן אמת של מערכת הלימפה עם מצלמת הקרינה הקרובה לאינפרא אדום בזמן אמת, השתמש בראש האופטי המצויד בלייזר מסוג 1 כמקור אור העירור ובמצלמה רגישה לאינפרא אדום, מהקרסול ועד הברך של הגפה האחורית של החיה.
    2. דמיין את כלי הלימפה מעל פאשיה השריר על ידי כריתת השומן התת עורי5. כלי הלימפה נראים כחולים עקב צביעת ה-V הכחולה הפטנט בשלב 2.3.
    3. השתמש במלקחיים מיקרו-כירורגיים כדי למתוח את החתך ולחשוף את ה- PLN, כולל כלי הדם והלימפה הנכנסת. הקפידו על נראות ברורה של כל מבני הלימפה וכלי הדם (איור 4).
    4. זהה את ה- PLN, בקוטר של 0.8 מ"מ, מתחת לווריד האיסכיאלי ובין שרירי הזרוע שרירי הירך האחורי המדיאלי.
  5. זהה את שני כלי הלימפה העיקריים בהיבט המדיאלי של ה- PLN. כלים אלה ממוקמים במקביל לווריד הספנוס הדיסטלי ומתחלקים לרשת של מיקרו-כלים כשהם מתקרבים ל-PLN (איור 5).
  6. לנתח את פדיקל בלוטות הלימפה תוך הימנעות מנזק לרקמות ולכלי הדם שמסביב (איור 6).
  7. קשרו את העורק המדיאלי (ענף של העורק הפופליטאלי) ואת הווריד הספנוס הצדדי באופן דיסטלי וקרוב באמצעות תפרי ניילון 10/0 שאינם נספגים.
  8. זהה וצרב את שתי הקבוצות של כלי לימפה אפרנטיים המצטרפים ישירות למערכת הלימפה של עצם הירך בתוך הירך, אך אינם נכנסים ל-PLN (איור 7).
    הערה: הקבוצה הראשונה מתאימה לכלי הלימפה המדיאליים המנקזים את הלימפה מהרגל העליונה והשוק. הקבוצה השנייה מורכבת מכלי לימפה בשרירי הגפיים התחתונות. כלים אלה עוברים לאורך שריר הגסטרוקנמיוס, יחד עם הווריד הספנוס.
  9. אשר שיבוש מוחלט של מערכת הלימפה על ידי חזרה על הדמיה פלואורסצנטית קרובה לאינפרא אדום בזמן אמת.
  10. הסר לחלוטין את רקמת השומן שמסביב כדי למנוע לימפאנגיוגנזה אפשרית.
  11. לתפור את חתך העור עם תפרים קלועים נספגים של 4-0 חומצה פוליגליקולית (PGA) (עם מחט משולשת 16 מ"מ 3/8) באמצעות דפוס תוך-עורי רציף כדי למנוע השחתה אוטומטית לאחר הניתוח.
  12. לשכן את הארנבים בנפרד בכלובים לאחר הניתוח; שמור אותם תחת מעקב ובטמפרטורת החדר בין 16 ל-22 מעלות צלזיוס.

3. הערכה לאחר הניתוח

  1. בצע הערכות לאחר הניתוח 3, 6 ו-12 חודשים לאחר האינדוקציה.
  2. הרדמו את הארנבים לפי השלבים ששימשו קודם לכן (שלבים 1.2-1.7).
  3. מדוד את היקף הגפיים האחוריות של הארנבים המורדמים בעזרת סרט מדידה. בצע מדידות כל 2 ס"מ, כאשר הנקודה הראשונה היא בקרסול והאחרונה בברך. חשב את הנפח הכולל באמצעות נוסחת החרוט החתוך.
  4. השתמש בלימפוגרפיה ירוקה אינדוציאנין (ICG-L) להערכת תפקוד הלימפה.
    1. החדרו 0.2-0.3 מ"ל של ICG תוך עורית לתוך החללים הבין-דיגיטליים השני והשלישי ועסו בעדינות במשך דקה אחת כדי להקל על קליטת ICG לכלי הלימפה.
  5. אסוף תמונות לאחר 15 דקות באמצעות מערכת הקרינה הקרובה לאינפרא אדום כדי להעריך זרימה חוזרת עורית.
  6. לאחר השלמת המעקבים, המתת חסד של הארנב לפי אותו פרוטוקול הרדמה כמו זה ששימש בהתערבות. לאחר השגת מישור ההרדמה הרצוי, יש לתת אשלגן כלורי תוך ורידי לווריד האפרכסת בקצב ממוצע של 2 מק"ל/ק"ג.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

תשעה ארנבים עברו השראת לימפאדמה במחקר זה, אולם שלושה ארנבים מתו בתקופה המיידית שלאחר הניתוח ולא ניתן היה להעריך אותם. נתוני המחקר התקבלו לאחר 3, 6 ו-12 חודשים לאחר הניתוח על ידי שלושה חוקרים עצמאיים. מדידות גפיים אחוריות היקפיות ו-ICG-L בוצעו בהרדמה כללית כדי להעריך את תפקוד מערכת הלימפה ואת הזרימה החוזרת של העור.

הנתונים שהתקבלו על ידי ICG-L לאחר 3 חודשים לאחר הניתוח הראו זרימה חוזרת עורית והיעדר PLNs בגפיים האחוריות השמאליות של הארנבים, התואמים להפרעה בתפקוד תקין של מערכת הלימפה. תוצאות ICG-...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כריתת ה- PLN בבעל חיים ניסיוני היא הליך חדש יחסית שיכול לגרום לבצקת לימפתית משנית בגפיים לצורך הערכה ומחקר. לאחר כריתת בלוטות הלימפה, יש תקופה של שינוי בתפקוד מערכת הלימפה, הצטברות לימפה ושינויים היסטולוגיים של כלי הלימפה שנראים מורחבים. כאשר הצטברות לימפה זו מגיעה לרמות נאותות, ניתן לצפות בזרימה החוזרת העורית האופיינית של בצקת לימפה, בדומה לזו שנצפתה בבני אדם, באמצעות טכניקות אובייקטיביות כגון ICG-L. פיתוח טכניקה זו עשוי ליצור חיית מחקר פרה-קלינית חסכונית, שעשויה לסייע במניעה וטיפול בתה...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

למחברים אין ניגודי אינטרסים לחשוף.

תודות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

פרויקט מחקר זה בוצע במרכז לכירורגיה זעיר פולשנית Jesús Usón (CCMIJU), שהוא חלק מ-ICTS Nanbiosis. המחקר בוצע בסיוע יחידות Nanbiosis הבאות: U21, חדר ניתוח ניסיוני, ו-U22, דיור לבעלי חיים. עבודה זו נתמכה על ידי בית החולים דה לה סנטה קרו אי סנט פאו. עבודה זו מומנה בחלקה על ידי החונטה דה אקסטרמדורה, הקרן האירופית לפיתוח אזורי (מענק מספר GR21201). המממן מילא תפקיד בתכנון המחקר, איסוף הנתונים, הניתוח, ההחלטה לפרסם והכנת כתבי היד. תודה מיוחדת למריה פרז על הכנת הדמויות ולמחלקה למיקרוכירורגיה של JUMISC על העידוד המתמיד.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
Bleu Patente V sodique (Guerbet)Guerbet. וילפינט, צרפת2.5 גרם/100 מ"ל
בופרנורפין (Bupaq)ריכטר פארמה. Wels, אוסטריה0820645AA3 מ"ג/10 מ"ל
FluobeamFluoptics. גרנובל, צרפתהדמיה פלואורסצנטית
IBM SPSS תוכנהIBMגרסה 21.0
Indocyanine green (Verdye, Diagnostic Green GmbH)Diagnostic Green GmbH. Aschheim-Dornach, גרמניה5 מ"ג/מ"ל
Ketorolaco  (נורמון) Normon, S.A. מדריד, ספרדT01H30 מ"ג/מ"ל
מיקרוסופט אקסלמיקרוסופטגרסה 16.66.1
מידזולם (נורמון) נורמון, S.A. מדריד, ספרדT35M15 מ"ג/3 מ"ל
מיקרוסקופ פנטרו 800, מודול פלואורסצנטיCarl Zeiss Meditec AG. Goeschwitzer Strasse 51-52. יינה, גרמניה302581-9245-000
אשלגן כלורי (בראון)B.Braun. ברצלונה, ספרד1926201020 מילימול ל-10 מ"ל
פרופופול (פרופומיטור, אוריון פארמה) אוריון פארמה. ספו, פינלנד20R039B200 מ"ג/20 מ"ל
RÜ צינורות אנדוטרכאליים של SCH,טלפלקס מדיקל, IDA פארק עסקים וטכנולוגיה. אתיון, אירלנד.12CE 12גודל צינור 4.0 תעודת זהות מ"מ
Sevoflurano (SevoFlo, Zoetis)Zoetis בלגיה. Luvain-la-Neuve, בלגיה60935591,000 מ"ג/גרם (250 מ"ל)
טרמדול (נורמון)Normon, S.A. מדריד, ספרדT08U100 מ"ג/2 מ"ל

מקורות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Taylor, G. W. Lymphoedema. Postgraduate Medical Journal. 35 (399), 2-7 (1959).
  2. Weissleder, H., Schuchhardt, C. Lymphedema Diagnosis and Therapy. 2nd ed. , Kagerer Kommunikation. (1997).
  3. Pereira, A. C. P. R., Koifman, R. J., Bergmann, A. Incidence and risk factors of lymphedema after breast cancer treatment: 10 years of follow-up. The Breast. 36, 67-73 (2017).
  4. Coriddi, M., et al. Systematic review of patient-reported outcomes following surgical treatment of lymphedema. Cancers. 12 (3), 565(2020).
  5. Fernández Peñuela, R., Casaní Arazo, L., Masiá Ayala, J. Outcomes in vascularized lymph node transplantation in rabbits: A reliable model for improving the surgical approach to lymphedema. Lymphatic Research and Biology. 17 (4), 413-417 (2019).
  6. Armer, J. M., et al. ONS GuidelinesTM for cancer treatment–related lymphedema. Oncology Nursing Forum. 47 (5), 518-538 (2020).
  7. Villanueva, T. Avoiding lymphedema. Nature Reviews Clinical Oncology. 11 (3), 121(2014).
  8. Clavin, N. W., et al. TGF-β 1 is a negative regulator of lymphatic regeneration during wound repair. American Journal of Physiology. Heart and Circulatory Physiology. 295 (5), 2113-2127 (2008).
  9. Schulte-Merker, S., Sabine, A., Petrova, T. V. Lymphatic vascular morphogenesis in development, physiology, and disease. The Journal of Cell Biology. 193 (4), 607-618 (2011).
  10. Padberg, Y., Schulte-Merker, S., Van Impel, A. The lymphatic vasculature revisited—new developments in the zebrafish. Methods in Cell Biology. 138, 221-238 (2017).
  11. Cornelissen, A. J. M., et al. Outcomes of vascularized versus non-vascularized lymph node transplant in animal models for lymphedema. Review of the literature. Journal of Surgical Oncology. 115 (1), 32-36 (2017).
  12. Hadamitzky, C., Pabst, R. Acquired lymphedema: An urgent need for adequate animal models. Cancer Research. 68 (2), 343-345 (2008).
  13. Shin, W. S., Szuba, A., Rockson, S. G. Animal models for the study of lymphatic insufficiency. Lymphatic Research and Biology. 1 (2), 159-169 (2003).
  14. Soto-Miranda, M. A., Suami, H., Chang, D. W. Mapping superficial lymphatic territories in the rabbit. Anatomical Record. 296 (6), 965-970 (2013).
  15. Bach, C., Lewis, G. P. Lymph flow and lymph protein concentration in the skin and muscle of the rabbit hind limb. The Journal of Physiology. 235 (2), 477-492 (1973).
  16. Mayer, J. Use of behavior analysis to recognize pain in small mammals. Lab Animal. 36 (6), 43-48 (2007).
  17. Jones-Bolin, S. Guidelines for the care and use of laboratory animals in biomedical research. Current Protocols in Pharmacology. 59 (1), 4(2012).
  18. Hawkins, P. Recognizing and assessing pain, suffering and distress in laboratory animals: a survey of current practice in the UK with recommendations. Laboratory Animals. 36 (4), 378-395 (2002).
  19. Kohn, D. F., et al. Public statement: Guidelines for the assessment and management of pain in rodents and rabbits. Journal of the American Association for Laboratory Animal Science. 46 (2), 97-108 (2007).
  20. Wolfe, J. H., Rutt, D., Kinmonth, J. B. Lymphatic obstruction and lymph node changes–a study of the rabbit popliteal node. Lymphology. 16 (1), 19-26 (1983).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

Patent Blue VDermal Backflow
הסרטון יגיע בקרוב

מאמרים קשורים