$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
המטרה העיקרית של האוסף הנוכחי היא לספק לקוראים ידע עדכני על המתודולוגיה החדשה לחקר מחלות כלי דם ברמות התא, החלבון וה-mRNA, הן in vivo והן in vitro, בבני אדם או במודל של עכבר. זה כולל שיטות הדמיה ובינה מלאכותית חדשות, כמו גם ניתוח היסטופתולוגי המורחב לאחזור רקמות קשות1, כמו עורקים מסויידים. האוסף מציג ארבע שיטות העונות באופן מלא על שאלות אלה, ומספקות רמזים מעניינים מאוד כיצד לגשת לסוגיות ישנות בפרספקטיבה מודרנית וטכנולוגית, המציגות התפתחות טכנית מהירה בתחום זה.
פגיעה באיסכמיה-רפרפוזיה (IRI) היא גורם סיכון עיקרי לפגיעה כלייתית חריפה (AKI)2. לא נקבעו סמנים ביולוגיים אבחנתיים ספציפיים, אם כי miRNAs הם מועמדים מצוינים3. Aomatsu et al.4 פיתח מודל עכבר AKI מעניין, מטהר ומכמת miRNAs על ידי qRT-PCR. הם זיהו 17 miRNAs מווסתים עם AKI, הנגרמים על ידי נזק איסכמיה-רפרפוזיה. השיטה מאפשרת לחקור את הפרופיל של miRNAs בכליות AKI עם טווח דינמי, כימות מדויק וסגוליות גבוהה. בנוסף, המודל מקל על מתן תרופות לפני ואחרי IRI. הפרוטוקול גם מתאר לקורא את הנקודות הקריטיות שיש להיות מודע אליהן ואת התגובות הלא ספציפיות לאחר PCR. כמה נקודות מפתח הן הומוגניזציה, בחירת הבקרה האנדוגנית ואיכות ה-miRNAs המטוהרים. שיטה זו שימושית מאוד מכיוון שהיא מספקת מודל חייתי של AKI לחקר IRI בכליה האנושית, מה שעשוי להיות אפשרי למחקרים נוספים מעבר ל-miRNAs.
באואר ואחרים הקימו שיטה אוטומטית למחצה למיצוי DNA מכמות קטנה של פלאק טרשת עורקים קבוע בפורמלין (FFPE). זהו נושא מעניין נוסף, מכיוון שהוא עשוי לספק שיטה סטנדרטית לחקר הפתוביולוגיה של רקמה קשה מאוד, כגון אתרומות מסויידותמפוזרות 1. זה מקשה על אחזור רקמות, מכיוון שהוא כולל שימוש בפרוטוקולי הסרת אבדן המשנים חומצות גרעין ותכולת תאים אחרת1. המחברים השיגו ריכוז DNA גבוה יותר ואיכות DNA טובה יותר (יציבות ושחזור) בהשוואה לשתי שיטות ידניות מבוססות עמודות, ללא הבדלים משמעותיים בפיצול ה-DNA. שינויים חשובים בפרוטוקול כוללים את שלב הדגירה לדפראפיניזציה (פחות רעילות של ריאגנטים), עיכול פרוטאז K בלילה, זמן דגירה נוסף לאחר הוספת מאגר ליזה ב-65 מעלות צלזיוס, והגדלת נפח הפליטה. הפרוטוקול בהחלט מבטיח לניתוחים עתידיים בעלי תפוקה גבוהה.
Suarez-Cuenca et al.6 הציגו פרוטוקול לכימות של תאי אב חד-גרעיניים (MPCs) במחזור מכלי הדם הקרובים לאתר האנגיופלסטיקה, על מנת לחזות את הסיכון לקטיעת גפיים בחולים עם איסכמיה קריטית של הגפיים (CLI). זהו נושא מעניין נוסף, מכיוון שהסיכון לקטיעה ב-CLI בימינו עדיין גבוה מאוד7, ויש מחסור משמעותי במודלים חיזויים זמינים8. האפשרות לזהות סמנים ביולוגיים במחזור מבטיחה מאוד בפרקטיקה הקלינית, ומציעה פרספקטיבה אפשרית לשינוי ההיסטוריה והניהול של חולים עם CLI.
בעבודתם של Zoli et al.9, נעשה שימוש בטכניקת ההדמיה טרקטוגרפיה כדי לחקור את הרחבת גידולי יותרת המוח-מוח ובסיס הגולגולת. הערכת הדמיה מוחית לפני הניתוח היא חיונית לפני ניתוח מבוסס גולגולת, וטרקטוגרפיה אומצה לעתים רחוקות בניתוחי בסיס גולגולת עד כה בגלל בעיות טכניות10. בנוסף ליישום פרוטוקול MRI לניהול גידולים אלה, מטרת המחברים הייתה גם לתאר את שיתוף הפעולה התרגומי בין נוירוכירורגים לצוות ההדמיה המוחית. שיתוף פעולה זה מציע פרוטוקול רב-תחומי לגישה רב-צירית משולבת יעילה לחולים אלה. הפרוטוקול המיושם כלל רצפים מהירים (סריקות קידוד הפוכות פאזה לתמונות משוקללות דיפוזיה) כגישה חדשה לתיקון מתקדם לאחר עיבוד. זה פותח נתיב לגישות חדשות למחקר טרום ניתוחי של גידולים קשים אלה.
מחלות עורקים וסקולריות הן עדיין בעיה בריאותית מרכזית ברחבי העולם, ושיטות חדשות נדרשות יותר ויותר על מנת לחקור חולים אלה ברמות שונות, מהדמיה ודם ועד רקמות. אוסף זה חושף טיפים להתגברות על כמה בעיות בחקר מחלות כלי דם, ומבין: (1) שיטות חדשות לחקר תאי פלאק, חלבון ותכולת mRNA, (2) ניתוח היסטופתולוגי המורחב לאחזור רקמות קשות (למשל, אזורים מסויידים), ו-(3) כימות אנגיוגנזה. אין ספק, הפיתוח והחשיפה של גישות חדשות הנוגעות לניתוח רקמות רלוונטיות למגוון עצום של פתולוגיות ועלולות להשפיע על ההנחיות הקליניות לאבחון בכל הרמות.