מאמר שיטה

טומוגרפיה קוהרנטית אופטית מונחית תמונה להערכת שינויים מבניים ברשתית המכרסמים

DOI:

10.3791/64783

⸱

10 בפברואר 2023

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1State Key Laboratory of Ophthalmology, Optometry, and Vision Science, Eye Hospital, Wenzhou Medical University, 2Department of Ophthalmology, The First People's Hospital of Guiyang

* These authors contributed equally

במאמר זה

סיכום

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

הפרוטוקול המוצג כאן מפרט את נהלי איסוף הנתונים וניתוח הנתונים עבור טומוגרפיה קוהרנטית אופטית מונחית תמונה (OCT) ומדגים את יישומו במודלים מרובים של מכרסמים של מחלות עיניים.

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מחלות עיניים, כגון ניוון מקולרי הקשור לגיל, גלאוקומה, רטיניטיס פיגמנטוזה ואובאיטיס, מלוות תמיד בשינויים מבניים ברשתית. מחלות אלו הפוגעות בפונדוס מציגות תמיד חריגות אופייניות בסוגי תאים מסוימים ברשתית, כולל תאי קולטני אור, תאי גנגליון ברשתית, תאים בכלי הדם ברשתית ותאים בתאי כלי הדם הכורואידליים. טכניקות הדמיה לא פולשניות, יעילות ביותר וניתנות להתאמה נדרשות הן לתרגול קליני והן למחקר בסיסי. טומוגרפיה קוהרנטית אופטית מונחית תמונה (OCT) עונה על הדרישות הללו מכיוון שהיא משלבת צילום פונדוס ו-OCT ברזולוציה גבוהה, ומספקת אבחון מדויק של נגעים זעירים כמו גם שינויים חשובים בארכיטקטורת הרשתית. מחקר זה מפרט את הליכי איסוף הנתונים וניתוח הנתונים עבור OCT מונחה תמונה ומדגים את יישומו במודלים של מכרסמים של ניאו-וסקולריזציה כורואידית (CNV), ריסוק עצב הראייה (ONC), ניוון רשתית המושרה על ידי אור ואובאיטיס אוטואימונית ניסיונית (EAU). טכניקה זו מסייעת לחוקרים בתחום העיניים לזהות שינויים מבניים ברשתית של מכרסמים בצורה נוחה, אמינה וניתנת לביצוע.

מבוא

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

מחלות עיניים הפוגעות בפונדוס מציגות תמיד חריגות אופייניות בסוגי תאים מסוימים ברשתית, כגון תאי קולטני אור, תאי גנגליון ברשתית, תאים בכלי הדם ברשתית ותאים בכלי הדם הכורואידליים, אשר עשויים להשפיע לאחר מכן על חדות הראייה של חולים1. כדי למנוע ליקוי ראייה בלתי הפיך, נדרשים אבחונים בזמן וטיפולים מתאימים1. טומוגרפיה קוהרנטית אופטית (OCT) נמצאת בשימוש נרחב במרפאה להערכת מגוון מחלות עיניים, כולל ניוון מקולרי הקשור לגיל, רטיניטיס פיגמנטוזה, גלאוקומה, אובאיטיס והיפרדות רשתית, בין היתר 2,3,4. סוג זה של טכניקת הדמיה לא פולשנית, יעילה מאוד וניתנת להתאמה נחוץ גם להערכה בזמן של תנאי המחלה בחיות ניסוי 5,6,7,8,9,10.

טומוגרפיה קוהרנטית אופטית מונחית תמונה (OCT) משתמשת באינטרפרומטריה כדי לייצר תמונות חתך של רשתית בעלי חיים ברזולוציה אורכית של 1.8 מיקרומטר ורזולוציה צירית של 2 מיקרומטר. יש לו לפחות שלושה יתרונות בחקירת שינויים ארכיטקטוניים ברשתית 2,3,4,5,6,7,8,9,10. ראשית, זוהי טכניקה לא פולשנית המאפשרת לחוקרים לעקוב באופן דינמי אחר מיקום העניין באותה רשתית של בעל חיים 5,6,7,8,9,10. שנית, תכונה זו מפחיתה באופן משמעותי את גודל המדגם עבור כל ניסוי3. בינתיים, זה חוסך זמן ומאמץ ניכרים בפרויקטי מחקר 2,3,4,5,6,7,8,9,10. שלישית, OCT מונחה תמונה רוכש תמונות פונדוס צבעוניות תוך כדי לכידת תמונות OCT, ובכך מספק תוצאות מדויקות ואמינות למשתמשים.

כתב יד זה מתאר את ההליכים של איסוף תמונות וניתוח נתונים עבור OCT מונחה תמונה ומרחיב על יישומו במודלים של עכברים וחולדות של ניאו-וסקולריזציה כורואידית (CNV)11,12, ריסוק עצב הראייה (ONC)13,14,15,16, ניוון רשתית המושרה על ידי אור 17,18,19,20,21 ואובאיטיס אוטואימונית ניסיונית (EAU)22,23., בעזרת טכניקה רב-תכליתית זו, חוקרים יכולים לצלם תמונות OCT ברזולוציה גבוהה כמו גם תמונות פונדוס בנוחות וביעילות.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כל ההליכים בבעלי חיים תאמו את הצהרת האגודה לחקר הראייה ורפואת העיניים על השימוש בבעלי חיים במחקר עיניים וראייה ואושרו על ידי הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים של האוניברסיטה הרפואית וונג'ואו (WMU). לחולדות ולעכברים ניתנה גישה חופשית למים ולמזון עם עוצמת אור סביבתית של 18 לוקס במחזור חושך/אור של 12 שעות.

1. הכנת המודלים של חיות העיניים

  1. מודל ניאו-וסקולריזציה כורואידלי (CNV) המושרה על ידי לייזר עכבר11,12
    1. להרדים עכברים נקבות בנות 4 שבועות (רקע C57BL/6J) עם קטמין וקסילזין, ולהרחיב את האישונים עם טיפות עיניים טרופיקמיד פנילפרין לאחר שלב 3.2. קחו בחשבון שהעכבר מורדם כראוי כאשר לא מזוהה תנועה לאחר צביטת הבוהן.
    2. הפעל את תיבת מקור האור, התוכנה ותיבת הלייזר (אורך גל: 532 ננומטר), כאשר אנרגיית המוצא מותאמת ל-100 mW ומשך הזמן ל-100 אלפיות השנייה.
    3. הנח את העכבר על פלטפורמת הניסוי והתאם את מיקום העכבר והפלטפורמה עד שהנוף של פונדוס העכבר יהיה ברור.
    4. לחץ על כפתור Laser ON על המסך של תיבת הלייזר והתאם את המיקוד של נקודת הייחוס האדומה של הלייזר. הזז את נקודת הייחוס של הלייזר והתאם אותה לקוטר פפילרי אחד עד שניים הרחק מהדיסק האופטי. הפעל את דוושת כף הרגל כדי לגרום נזק ללייזר.
    5. ערכו בדיקה מיידית כדי לקבוע אם התרחשה בועת אידוי מיד לאחר הפגיעה, המהווה סימן לנזק לייזר מוצלח. צור שלוש עד חמש נקודות לייזר לכל עין.
  2. ריסוק עצב הראייה של עכבר (ONC) דגם 13,14,15,16
    1. להרדים עכברים נקבות (רקע C57BL/6J) ביום שלאחר הלידה (P) 21 עד P35 לאחר שלב 3.2. קחו בחשבון שהעכבר מורדם כראוי כאשר לא מזוהה תנועה לאחר צביטת הבוהן.
    2. הנח את העכבר מתחת למיקרוסקופ כירורגי, וחתך את הלחמית של עין אחת בעזרת מספריים קפיציים, וודא שגודל חתך הלחמית הוא כ-1 מ"מ.
    3. לחשוף את עצב הראייה התוך-אורביטלי, ולמעוך עם מלקחיים עדינים למשך 5 שניות במרחק של 0.5 מ"מ מהדיסק האופטי. תוך כדי כך, הסיטו בעדינות את שרירי המסלול ואת הרקמות האחרות, והניחו אותם בצד. הימנע מנזק לכלי דם בעין הניתוחית.
      הערה: היזהר, מכיוון שגלגל העין יתנדנד בעת נגיעה או מריטה של עצב הראייה הלבן.
    4. יש למרוח משחת עיניים לאחר הניתוח כדי למנוע יובש בקרנית.
  3. ניוון רשתית המושרה על ידי אור עכבר (LIRD) דגם 17,18,19,20,21
    1. הכנות לקראת הניסוי: סוגרים את כלובי העכברים (30 ס"מ על 18 ס"מ על 13 ס"מ) בנייר אלומיניום ומכסה רשת ברזל. הניחו כל כלוב בקופסת נייר (52 ס"מ על 35 ס"מ על 30 ס"מ) עם אור לבן בחלק העליון.
    2. הסתגלו לחושך עכברים זכרים בני 6 שבועות (BALB/c) למשך הלילה בחדר החשוך, ולאחר מכן הרחיבו את העיניים באמצעות טיפות עיניים טרופיקמיד פנילפרין בכל עין. הרחב את האישון במלואו עד ש -3/4 משטח הקרנית אינו מכוסה על ידי הקשתית; לעתים קרובות זה לוקח לא יותר מ -3 דקות.
    3. האירו את העכברים באור לבן של 10,000 לוקס למשך שעתיים. שמור את העכברים בחושך למשך הלילה לאחר הניתוח, ולאחר מכן חזור לסביבות כהות-אור רגילות. כדי להבטיח גירוי אור יעיל, שמור עכבר אחד בכלוב כל הזמן.
  4. מודל אובאיטיס אוטואימוני ניסיוני של חולדות (EAU)
    1. הכנות לפני הניסוי: מתחלב 2.5 מ"ג של hIRBP161-180 באדג'ובנט פרוינד שלם (משקל/נפח 1:1) עם 2.5 מ"ג/מ"ל Mycobacterium tuberculosis H37Ra 22,23.
    2. הזרקו 100 מיקרוליטר של תחליב תת עורי לכרית כף הרגל השמאלית של כל חולדה זכר לואיס (כ-180 גרם).

2. הגדרת מודול OCT

  1. חבר את הסיב האופטי ואת כבל בקרת ה-OCT בין ראש הסריקה OCT למנוע ה-OCT (איור 1A). יישר את החריץ על הסיב עם חריץ על המחבר, והכנס בעדינות את הקצה עד שהוא יושב (איור 1B).
    הערה: לפני חיבור כבל הבקרה, כבה את מתג ההפעלה של מנוע ה-OCT. הסיב האופטי שביר מאוד, לכן הימנעו משני הקצוות של קצה הסיב (איור 1C). יש להימנע מהרכבה ופירוק של ראש סריקת OCT והסיב/כבל אם מודול זה נמצא בשימוש תכוף.
  2. השחילו את עדשת האובייקט OCT של העכבר או החולדה לקדמת גוף המכונה (איור 1A). הנח את ראש סריקת ה-OCT על עדשת ה-OCT, כאשר מחוון המיקוד של ה-MR פונה הרחק מגוף המכונה (איור 1A).
  3. אבטח את ראש הסריקה OCT באמצעות שני ברגי אגודל: אחד על העדשה ואחד על גוף המצלמה. תקן את ראש הסריקה בחוזקה.
  4. הפעל את מתג ההפעלה הראשי, ואחריו את נורית המצלמה ולאחר מכן את תוכנת OCT.
    הערה: המצלמה זקוקה לזמן מה כדי לאתחל כדי שהמחשב ימצא אותה.

3. הכנת בעלי חיים לניסויי OCT

  1. 10 דקות לפני ניסויי ה-OCT, יש להחדיר טיפות עיניים טרופיקמיד פנילפרין לעיני החיה, ולנגב טיפות עיניים עודפות באמצעות מגבת נקייה.
  2. 5 דקות לפני הניסוי יש להזריק 200 מיקרוליטר מתמיסת ההרדמה לעכבר, ולהזריק 2.0 מ"ל לחולדה תוך צפקית. קחו בחשבון את העכבר/חולדה מורדמים כראוי כאשר לא מזוהה תנועה לאחר צביטת הבוהן.
    הערה: תמיסות ההרדמה היו מורכבות מקטמין (12 מ"ג/מ"ל) וקסילזין (1 מ"ג/מ"ל לעכבר ו-2 מ"ג/מ"ל לחולדה) במי מלח; בדרך כלל, מוחל 10 מיקרוליטר של תמיסת הרדמה לכל 1 גרם מסת גוף של בעלי חיים. התמיסות אוחסנו בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס למשך שבועיים לכל היותר.
  3. לאחר מתן ההרדמה, יש לשמן את הקרנית במשחת ג'ל כדי למנוע יובש במשטח העין.

4. הדמיית OCT מונחית תמונה

הערה: ממשק התוכנה חולק לשלושה חלקים: תמונת שדה בהיר, לשוניות בקרת OCT ותצוגת OCT (איור 2).

  1. בעת התבוננות בתמונת השדה הבהיר, הקלד את הביאור של המידע על בעלי החיים במידת הצורך.
  2. הפעל או כבה את פקדי מיקום האלומה באמצעות תיבת הסימון כדי ללכוד תמונת שדה בהיר עם או בלי שכבת-העל של הקו בתמונה.
  3. כדי למקם את אלומת הסריקה בצורה מדויקת יותר, השתמש בחיצי Position Nudge לשליטה עדינה כדי לכוון אותה למעלה, למטה, שמאלה או ימינה. בחר את ערכי העובי והצבע, ובחר זווית עבור האלומה המכוונת למיקום המעניין (לדוגמה, עבה, שחור ו-0). גרור את ערך הרווח ל- 14 db.
  4. עבור אל כרטיסיות הבקרה OCT. מהתפריט, בחר File/File_Settings ולאחר מכן צור נתיב למקום שבו יישמרו תמונות ה-OCT והפונדוס.
  5. ציין את הסוג, הגודל והחיה של הסריקה (חולדה או עכבר); בחר עין, שמאל או ימין, והדמיה Retina.
    הערה: OCT יכול ללכוד סוגי סריקה של קווים, עיגולים ונפח תלת-ממד בגדלים מלאים, חצי, רבע ושמינית.
  6. הגדר את פקדי התמונה. התאם את הערכים: 60 לניגודיות, 100 לגמא ו- 0 לבהירות.
  7. הנח את העכבר על פלטפורמת הניסוי והתאם את מיקום העכבר והפלטפורמה עד שהנוף של פונדוס העכבר יהיה ברור. כוונן את המיקום בעדינות כדי למקם את הדיסק האופטי במרכז.
  8. כוונן את זרוע הייחוס ל-850 עבור עכברים ו-830 עבור חולדות בהתחלה, ולאחר מכן כוונן את המיקום בעדינות על-ידי לחיצה על הלחצנים <-1 או +1>. כוונן את תמונת ה-OCT אופקית ולאחר מכן הזז את תמונת ה-OCT ל-1/3 העליון של התצוגה המלאה.
  9. הזז את מחוון הקיטוב כדי לכוונן את בהירות האות דרך הרשתית, במידת הצורך.
  10. לאחר התבוננות בתמונת OCT ברורה ויציבה כמו גם בתמונת הפונדוס, הגדר את מספר הפריימים (בדרך כלל 20, 50, 80 או 100) ולאחר מכן לחץ על ממוצע.
    הערה: לוקח מספר שניות ללכוד את תמונות ה-OCT. מספר גדול יותר של פריימים פירושו שלכידת התמונה נמשכת זמן רב יותר אך מייצרת תמונה שצולמה באיכות גבוהה יותר.
  11. לחץ על שמור כדי לשמור את תמונות ה-OCT והפונדוס, ולאחר מכן לחץ על הפעל מחדש כדי ללכוד דגימה נוספת.
    הערה: החיות הורשו להתאושש על צלחת חימום של 37 מעלות צלזיוס לפני שהתעוררו. החיות לא הושארו ללא השגחה עד שחזרו להכרה מספקת כדי לשמור על שכיבה על החזה. בעלי החיים שעברו טיפול לא הוחזרו למערכת הגידול של בעלי חיים אחרים עד שהחלימו לחלוטין.

5. מדידת עובי וניתוח כמותי

הערה: OCT זה כולל תוכנת ניתוח מובנית. ניתן לפלח ולנתח תמונות OCT באמצעות תוכנה זו (איור 3).

  1. פתח את תוכנת הניתוח ופתח תמונת OCT שיש לנתח.
  2. בחר את מספר השכבות ולאחר מכן לחץ על קבל שכבות ראשוניות (איור 3A). התוכנה תצייר את השכבות באופן אוטומטי.
  3. לחצו על סמל העיפרון ולאחר מכן הזיזו את הנקודות בשכבת היעד כדי להתאים את השכבה בעדינות (איור 3A, B). שנה את כל השכבות בזהירות אחת אחת.
    הערה: הוספת שכבות נוספות ניתנת לביצוע. לחץ על ועוד סמל, צייר מספר נקודות מעל תמונת ה-OCT ולאחר מכן לחץ על סמל טיק. תיווצר שכבה חדשה.
  4. לאחר השלמת התאמות עדינות של השכבות, ייצא את הערכים המפורטים (פורמט CSV) וסוגי תמונה שונים של ה-OCT המפולח (איור 3A).
    הערה: ניתן לייצא סוגי תמונות שונים, כולל שכבות, עובי, מפת עובי, שכבות ללא OCT וצילומי מסך. יש לנטוש את הערך באמצע החופף לעצב הראייה של כל תמונה ולהגדיר אותו כאפס מכיוון שאין שם שכבת רשתית.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ניתן להשתמש ב-OCT מונחה תמונה כדי לנטר את התפתחות נקודת הלייזר בניאו-וסקולריזציה כורואידית (CNV) המושרה על ידי לייזר בעכברים. כפי שמוצג באיור 1, כלי הדם של היילוד עברו דרך הממברנה של ברוך כמו גם שכבת אפיתל הפיגמנט ברשתית (RPE) ויצרו צלקת פיברוטית לאחר פגיעת לייזר11,12. ניתן ללכוד את נקודת הנגע הזו באמצעות סריקה בגודל מלא (איור 4A) או סריקה בגודל חצי (איור 4B). הסריקה בגודל ח...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

פרוטוקול זה מספק הוראות לאיסוף תמונות ומדידת עובי של OCT מונחה תמונה. על ידי הדגמת ארבעת המודלים הפופולריים ביותר של מכרסמים למחלות עיניים, החוקרים מצאו כי OCT מונחה תמונה סיפק ביצועים מצוינים בבחינת שינויים מבניים דרסטיים ברשתית. למעשה, בתמונות ברזולוציה גבוהה, ניתן למצוא נגעים זעירים בקלות גם בתמונות OCT. בעזרת OCT מונחה תמונה, קבוצה במעבדה מצאה גם כתמי היפר-רפלקטיביות חריגים בתוך ה-OPL במודל עכבר מיקרו-כבידה ובמודל עכבר מוטנטי Cacna1f24,25

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

לאף אחד מהמחברים אין ניגודי אינטרסים לחשוף.

תודות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

המחברים מודים לחברי מעבדת המפתח הממלכתית לרפואת עיניים, אופטומטריה ומדעי הראייה על תמיכתם הטכנית והערותיהם השימושיות בנוגע לכתב היד. עבודה זו נתמכה על ידי מענקים מהקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (82101169, 81800857, 81870690), קרן מדעי הטבע של מחוז ג'ג'יאנג של סין (LGD22H120001, LTGD23H120001, LTGC23H120001), התוכנית של לשכת המדע והטכנולוגיה של וונג'ואו של סין (Y20211159), פרויקט התמיכה במדע וטכנולוגיה של גוויג'ואו (Qiankehezhicheng [2020] 4Y146) והפרויקט של מעבדת המפתח הממלכתית לרפואת עיניים, אופטומטריה ומדעי הראייה (מס' K03-20220205).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
BALB / c עכברבייג'ינג מעבדת נהר חיוני טכנולוגיה טכנולוגיה ושות', בע"מתכשירים למודל בעלי חיים
C57BL / 6JNifdc עכברבייג'ינג מעבדת נהר חי טכנולוגיה לבעלי חיים ושות', בע"מתכשירים למודל בעלי חיים
Carbomer Eye GelFabrik GmbH חברת בת של Bausch & לומבלהרטיב את הקרנית 
פרוינד שלם" s אדג'ובנטסיגמא ניסוי F5881EAU
פלטפורמה ניסיוניתPhoenix Technology Groupתכשירים למודל בעלי חיים
hIRBP161-180שנחאי סנגון טכנולוגיה להנדסה ביולוגית & שירותים ושות', בע"מניסוי EAU
KetamineCeva Sante Animaleהרדמה כללית
קופסת לייזרHaag-Streit GroupMerilas 532αהכנות למודלים של בעלי חיים
חולדת לואיסבייג'ינג ויטל ריבר מעבדה לבעלי חיים טכנולוגיה ושות', בע"מתכשירים למודל בעלי חיים
Mycobacterium Tuberculosis H37RASigma 344289ניסוי EAU
Phoneix Micron IV עם OCT מונחה תמונה ולייזר מונחה תמונהPhoenix Technology Groupתכשירים למודל בעלי חיים
מלקחיים רקמותSuzhou Mingren Medical Instrument Co., LtdMR-F101A-5תכשירים למודל בעלי חיים
טיפות עיניים טרופיקמיד פנילפריןSANTEN OY, יפןמספריים
להרחבת עינייםSuzhou Mingren Medical Instrument Co., LtdMR-S121Aתכשירים לדגם בעלי חיים
XylazineCeva Sante Animaleהרדמה כללית

מקורות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Cen, L. -P., et al. Automatic detection of 39 fundus diseases and conditions in retinal photographs using deep neural networks. Nature Communications. 12, 4828(2021).
  2. Kashani, A. H., et al. Optical coherence tomography angiography: A comprehensive review of current methods and clinical applications. Progress in Retinal and Eye Research. 60, 66-100 (2017).
  3. Cheng, D., et al. Inner retinal microvasculature damage correlates with outer retinal disruption during remission in Behçet's posterior uveitis by optical coherence tomography angiography. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 59 (3), 1295-1304 (2018).
  4. Lin, R., et al. Relationship between cone loss and microvasculature change in retinitis pigmentosa. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 60 (14), 4520-4531 (2019).
  5. Dietrich, M., et al. Using optical coherence tomography and optokinetic response as structural and functional visual system readouts in mice and rats. Journal of Visualized Experiments. (143), e58571(2019).
  6. Jagodzinska, J., et al. Optical coherence tomography: Imaging mouse retinal ganglion cells in vivo. Journal of Visualized Experiments. (127), e55865(2017).
  7. Ye, Q., et al. In vivo methods to assess retinal ganglion cell and optic nerve function and structure in large animals. Journal of Visualized Experiments. (180), e62879(2022).
  8. Mai, X., Huang, S., Chen, W., Ng, T. K., Chen, H. Application of optical coherence tomography to a mouse model of retinopathy. Journal of Visualized Experiments. (179), e63421(2022).
  9. Allen, R. S., Bales, K., Feola, A., Pardue, M. T. In vivo structural assessments of ocular disease in rodent models using optical coherence tomography. Journal of Visualized Experiments. (161), e61588(2020).
  10. Kokona, D., Jovanovic, J., Ebneter, A., Zinkernagel, M. S. In vivo imaging of Cx3cr1gfp/gfp reporter mice with spectral-domain optical coherence tomography and scanning laser ophthalmoscopy. Journal of Visualized Experiments. (129), e55984(2017).
  11. Yan, M., Li, J., Yan, L., Li, X., Chen, J. -G. Transcription factor Foxp1 is essential for the induction of choroidal neovascularization. Eye and Vision. 9 (1), 10(2022).
  12. Wolf, A., Herb, M., Schramm, M., Langmann, T. The TSPO-NOX1 axis controls phagocyte-triggered pathological angiogenesis in the eye. Nature Communications. 11, 2709(2020).
  13. Li, L., et al. Longitudinal morphological and functional assessment of RGC neurodegeneration after optic nerve crush in mouse. Frontiers in Cellular Neuroscience. 14, 109(2020).
  14. Zhang, Y., et al. Elevating growth factor responsiveness and axon regeneration by modulating presynaptic inputs. Neuron. 103 (1), 39-51 (2019).
  15. Wang, J., et al. Robust myelination of regenerated axons induced by combined manipulations of GPR17 and microglia. Neuron. 108 (5), 876-886 (2020).
  16. Tian, F., et al. Core transcription programs controlling injury-induced neurodegeneration of retinal ganglion cells. Neuron. 110 (16), 2607-2624 (2022).
  17. Wu, K. -C., et al. Deletion of miR-182 leads to retinal dysfunction in mice. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 60 (4), 1265-1274 (2019).
  18. Rattner, A., Nathans, J. The genomic response to retinal disease and injury: Evidence for endothelin signaling from photoreceptors to glia. Journal of Neuroscience. 25 (18), 4540-4549 (2005).
  19. Rattner, A., Toulabi, L., Williams, J., Yu, H., Nathans, J. The genomic response of the retinal pigment epithelium to light damage and retinal detachment. Journal of Neuroscience. 28 (39), 9880-9889 (2008).
  20. Hahn, P., et al. Deficiency of Bax and Bak protects photoreceptors from light damage in vivo. Cell Death & Differentiation. 11 (11), 1192-1197 (2004).
  21. Fan, J., et al. Maturation arrest in early postnatal sensory receptors by deletion of the miR-183/96/182 cluster in mouse. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 114 (21), 4271-4280 (2017).
  22. Zhou, J., et al. A combination of inhibiting microglia activity and remodeling gut microenvironment suppresses the development and progression of experimental autoimmune uveitis. Biochemical Pharmacology. 180, 114108(2020).
  23. Okunuki, Y., et al. Retinal microglia initiate neuroinflammation in ocular autoimmunity. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 116 (20), 9989-9998 (2019).
  24. Dai, X., et al. Rodent retinal microcirculation and visual electrophysiology following simulated microgravity. Experimental Eye Research. 194, 108023(2020).
  25. Dai, X., et al. Photoreceptor degeneration in a new Cacna1f mutant mouse model. Experimental Eye Research. 179, 106-114 (2019).
  26. Liu, Y., et al. Mouse models of X-linked juvenile retinoschisis have an early onset phenotype, the severity of which varies with genotype. Human Molecular Genetics. 28 (18), 3072-3090 (2019).
  27. Ou, J., et al. Synaptic pathology and therapeutic repair in adult retinoschisis mouse by AAV-RS1 transfer. Journal of Clinic Investigation. 125 (7), 2891-2903 (2015).
  28. Xiang, L., et al. Depletion of miR-96 delays, but does not arrest, photoreceptor development in mice. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 63 (4), 24(2022).
  29. Huang, X. -F., et al. Functional characterization of CEP250 variant identified in nonsyndromic retinitis pigmentosa. Human Mutation. 40 (8), 1039-1045 (2019).
  30. Jonnal, R. S., et al. A review of adaptive optics optical coherence tomography: Technical advances, scientific applications, and the future. Investigative Ophthalmology & Visual Science. 57 (9), 51(2016).
  31. Dong, Z. M., Wollstein, G., Wang, B., Schuman, J. S. Adaptive optics optical coherence tomography in glaucoma. Progress in Retinal and Eye Research. 57, 76-88 (2017).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

הסרטון יגיע בקרוב

מאמרים קשורים