Method Article

אופטימיזציה של טכנולוגיית עיבוד שמן כבש Epimedii Folium ובדיקת השפעתה על התפתחות עוברית של דגי זברה

DOI:

10.3791/65096

⸱

March 17th, 2023

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Chongqing Academy of Chinese Materia Medica, 2Bioengineering College of Chongqing University

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

בפרוטוקול זה, טכנולוגיית עיבוד שמן הכבש של Epimedii folium (EF) עברה אופטימיזציה על ידי יישום מתודולוגיית תכנון-תגובה ניסיונית של Box-Behnken, וההשפעה של EF גולמי וממוטב המופק במים על התפתחות עוברית של דגי זברה נחקרה באופן ראשוני.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כרפואה סינית מסורתית (TCM), ל- Epimedii folium (EF) יש היסטוריה ברפואה ובמזון בת > 2,000 שנה. מבחינה קלינית, EF מעובד עם שמן כבש משמש לעתים קרובות כתרופה. בשנים האחרונות התרבו בהדרגה הדיווחים על סיכוני בטיחות ותגובות שליליות של מוצרים המשתמשים ב-EF כחומר גלם. עיבוד יכול לשפר ביעילות את הבטיחות של TCM. על פי תיאוריית TCM, עיבוד שמן כבש יכול להפחית את הרעילות של EF ולשפר את ההשפעה המחזקת שלו על הכליות. עם זאת, קיים מחסור במחקר שיטתי והערכה של טכנולוגיית עיבוד שמן כבש EF. במחקר זה, השתמשנו במתודולוגיית משטח התכנון-תגובה הניסיונית Box-Behnken כדי למטב את הפרמטרים העיקריים של טכנולוגיית העיבוד על ידי הערכת התוכן של רכיבים מרובים. התוצאות הראו כי הטכנולוגיה האופטימלית לעיבוד שמן כבש של EF הייתה כדלקמן: חימום שמן הכבש ב 120 ° C ± 10 ° C, הוספת EF גולמי, מוקפץ אותו בעדינות ל 189 ° C ± 10 ° C עד שהוא מבריק באופן שווה, ולאחר מכן להסיר אותו מגניב. על כל 100 ק"ג של EF, יש להשתמש ב-15 ק"ג שמן כבש. הרעילות והטרטוגניות של תמצית מימית של EF מעובד של שמן גולמי ושמן כבש הושוו במודל התפתחותי של עוברים של דגי זברה. התוצאות הראו כי קבוצת העשבים הגולמי הייתה בעלת סיכוי גבוה יותר לגרום לעיוותים בדגי זברה, וריכוז ה-EF הקטלני החצי מקסימלי שלה היה נמוך יותר. לסיכום, טכנולוגיית עיבוד שמן הכבש האופטימלית הייתה יציבה ואמינה, עם חזרתיות טובה. במינון מסוים, התמצית המימית של EF הייתה רעילה להתפתחות עוברים של דגי זברה, והרעילות הייתה חזקה יותר עבור התרופה הגולמית מאשר עבור התרופה המעובדת. התוצאות הראו כי עיבוד שמן כבש הפחית את הרעילות של EF גולמי. ממצאים אלה יכולים לשמש לשיפור האיכות, האחידות והבטיחות הקלינית של EF מעובד בשמן כבש.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Epimedii folium (EF) הוא העלים המיובשים של Epimedium brevicornu Maxim., Epimedium sagittatum (Sieb. et Zucc.) Maxim., Epimedium pubescens Maxim., או Epimedium koreanum Nakai. EF יכול לשמש לטיפול אוסטאופורוזיס, תסמונת גיל המעבר, גושים בשד, יתר לחץ דם, מחלת לב כלילית, ומחלות אחרות1. כרפואה סינית מסורתית (TCM), ל-EF יש היסטוריה ברפואה ובמזון של יותר מ-2,000 שנה. בשל מחירו הנמוך והשפעתו יוצאת הדופן של חיטוב הכליות, הוא נמצא בשימוש נרחב בתרופות ובמזון בריאות. EF מעובד על ידי הקפצה עם שמן כבש, תהליך שתואר לראשונה בתורת עיבוד ליי גונג שנכתבה על ידי ליי שיאו בתקופת ליו סונג2. היעילות של EF גול....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כל הניסויים הקשורים בבעלי חיים נערכו באישור ועדת האתיקה של הניסויים של מכון צ'ונגצ'ינג לרפואה סינית מסורתית (מספר תעודת סקירת אתיקה של חיות מעבדה: ZJS2022-03).

1. קביעת המרכיבים הביו-אקטיביים

הערה: המין ששימש במחקר זה היה Epimedium sagittatum, והדגימות נאספו במחוז פנגדו, צ'ונגצ'ינג. הדגימה זוהתה כחלק יבש מעל פני הקרקע של E. sagittatum (Sieb. et Zucc.) מקסים. על ידי חוקרי המכון לרפואה ביולוגית, מכון צ'ונגצ'ינג לרפואה סינית מסורתית.

  1. הכן את פתרון מוצר הבקרה על ידי שקילה מדויקת של הכמות המתאימה של כל חומר ייחוס, כלומר, icariin, epimedin A (EA), epimedin B (EB), epimedin C ....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

תוצאות חקירה מתודולוגית
נצפה קשר ליניארי בין ריכוז איקרין, EA, EB, EC, BI ואזורי שיא כרומטוגרפיים (ראה טבלה 3). ערכי ה-RSD% (n = 6) של אזורי השיא הכרומטוגרפיים של icariin, EA, EB, EC ו-BI היו 0.28%, 1.22%, 0.65%, 1.67% ו-1.06%, בהתאמה, מה שמצביע על כך שהדיוק של מדידות HPLC היה טוב. ערכי RSD% (n = 6) של התוכן של icariin, EA, EB, EC ו- BI היו 1.59%, 1.46%, 1.86%, 2.29% ו- 0.98%, בהתאמה, מה שמצביע על כך שלשיטה הייתה יכולת חזרה טובה. ערכי ה-RSD% (n = 6) של אזורי השיא של icariin, EA, EB, E.......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

משתנים בלתי תלויים וקביעת רמתם
טכנולוגיית עיבוד EF מתוארת רק במהדורת 2020 של הפרמקופיאה הסינית ובמפרטי עיבוד הרפואה הסינית המקומיים שפורסמו על ידי 26 מחוזות, עיריות ואזורים אוטונומיים ברחבי המדינה1. התיאור כולל את השלבים הבאים: לקיחת שמן כבש וחימום להמסתו, הוספת שברי EF, הקפצה באש איטית עד שהוא אחיד ומבריק, הוצאתו ונתונה לו להתקרר. בנוסף, 20 ק"ג (מקוצר כמו 20%) של שמן כבש (מזוקק) משמש עבור כל 100 ק"ג של אפימדיום. עם זאת, הפרמטרים של תהליך העיבוד של EF אינם מוגדרים. בין המשתנים .......

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

המחברים מצהירים כי אין ניגודי עניינים.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

עבודה זו נתמכת על ידי פרויקט המחקר המדעי הבסיסי של האקדמיה לרפואה סינית מסורתית של צ'ונגצ'ינג (מספר פרויקט: jbky20200013), פרויקט הנחיית תמריץ ביצועים של מוסדות המחקר המדעי של צ'ונגצ'ינג (מספר פרויקט: cstc2021jxjl 130025), ופרויקט בניית משמעת מפתח של ועדת הבריאות העירונית של צ'ונגצ'ינג של עיבוד Materia Medica הסיני.

....

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
AcetonitrileFisher197164
Baohuoside figure-materials-1 (Bfigure-materials-2 ) צ'נגדו מנסט ביוטכנולוגיה ושות', בע"מMUST-20042402
עמודה כרומטוגרפיתתאגיד ווטרססימטריה C18
Design מומחה תוכנהStat- Ease Inc., מיניאפוליס, מינסוטהגרסת ניסוי8.0.6.1
גלאיווטרס תאגיד2998
מפרקHefei Rongshida Small Household Appliance Co., Ltd.S-FS553
איזון אנליטי אלקטרונימטלר-טולדו אינטרנשיונל בע"מ
Epimedin A (EA)צ'נגדו מנסט ביוטכנולוגיה ושות', בע"מMUST-21112118
Epimedin B (EB)צ'נגדו מנסט ביוטכנולוגיה ושות', בע"מMUST-20080403
Epimedin C (EC)צ'נגדו מנסט ביוטכנולוגיה ושות', בע"מMUST-20080310
אתנולצ'ונגצ'ינג צ'ואנדונג כימיקלים (קבוצה) ושות', בע"מ
תוכנת Graphpad GraphPadSoftware Inc., סן דייגו, קליפורניה, ארה"ב6.02
כרומטוגרפיה נוזלית בעלת ביצועים גבוהים (HPLC)Waters Corporation2695
IcariinChengdu Glip Biotechnology Co., Ltd.
מתנולצ'ונגצ'ינג צ'ואנדונג כימיקלים (קבוצה) ושות', בע"מ
ממברנה מיקרופוריתטיאנג'ין Jinteng ציוד ניסיוני ושות', בע"מ0.22μ m
שמן כבשKuoshan Zhiniu חנות מזון טרי20211106
תוכנת Office Excel MicrosoftOffice Excel 2021
מסננת פרמקופיאהShaoxing Shangyu Huafeng Hardware Instrument Co., Ltd.R40/3
מכונת מים טהוריםצ'ונגצ'ינג אנדרסן ציוד להגנת הסביבה ושות', בע"מAT Sro 10A
נייר סינון איכותישנחאי Leigu Instrument Co., Ltd.18 ס"מ
סטריאומיקרוסקופקארל זייס, אוברקוכן, גרמניהסטמי 2000
מנקה אולטרסאונדברנסון אולטרסאונד (שנחאי) ושות', בע"מBUG25-12
מרכז משאבי דג הזברה בסין (CZRC)זן
MS205DU201808012109140120171101 AB

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Chinese Pharmacopoeia Commission. Chinese Pharmacopoeia. Volume I. , China Medical Science and Technology Press. Beijing, China. (2020).
  2. Wang, X. T. Collection of Traditional Chinese Medicine Processing Methods. , Nanchang Science and Technology Press. Jiangxi, China. (1998).
  3. Chen, L. L., Jia, X. B., Jia, D. S.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Epimedii FoliumMutton Oil ProcessingResponse Surface MethodBox Behnken DesignZebrafish Embryo DevelopmentHPLC AnalysisToxicity AssessmentChinese Medicine PreparationIcariin ContentTeratogenicity Testing

Related Articles