הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

חשיפה כרונית לאדי אתנול לסירוגין בשילוב עם בחירה בשני בקבוקים למודל הפרעת שימוש באלכוהול

2.2K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/65320

⸱

23 ביוני 2023

 ,  ,  ,  , 
1Department of Basic Medical Sciences, College of Veterinary Medicine, Purdue University, 2The Scripps Research Institute, 3Purdue Institute for Integrative Neuroscience, 4Weldon School of Biomedical Engineering, Purdue University, 5Purdue Institute of Inflammation, Immunology, and Infectious Disease

במאמר זה

סיכום

מוצג כאן פרוטוקול למודל 2BC/CIE של תלות באלכוהול בעכברים לחקר הפרעת שימוש באלכוהול.

תקציר

הפרעת שימוש באלכוהול (AUD) היא הפרעה כרונית הקשורה לאלכוהול המופיעה בדרך כלל כשתייה בלתי מבוקרת ועיסוק באלכוהול. מרכיב מרכזי במחקר AUD הוא שימוש במודלים פרה-קליניים רלוונטיים לתרגום. במהלך העשורים האחרונים, נעשה שימוש במגוון מודלים של בעלי חיים כדי לחקור AUD. מודל בולט אחד של AUD הוא מודל החשיפה הכרונית לאדי אתנול לסירוגין (CIE), שהיא גישה מבוססת היטב להשראת תלות באלכוהול במכרסמים באמצעות מחזורים חוזרים ונשנים של חשיפה לאתנול באמצעות שאיפה. כדי לדגמן AUD בעכברים, החשיפה ל-CIE משולבת עם בחירה מרצון של שני בקבוקים (2BC) של שתיית אלכוהול ומים כדי למדוד את ההסלמה של שתיית אלכוהול. הליך 2BC/CIE כולל שבועות לסירוגין של שתיית 2BC ו-CIE, שחוזרים על עצמם עד להשגת הסלמה של שתיית אלכוהול. במחקר הנוכחי, אנו מתארים את הנהלים לביצוע 2BC/CIE, כולל שימוש יומיומי בתא האדים CIE, ומספקים דוגמה לשתיית אלכוהול מוגברת בעכברי C57BL/6J באמצעות גישה זו.

מבוא

הפרעת שימוש באלכוהול (AUD), הכוללת צריכת אלכוהול מופרזת כרונית, היא אחת ההפרעות הפסיכיאטריות הנפוצות ביותר ומהווה בעיה עולמית. תסמיני AUD כוללים מחזורים חוזרים ונשנים של שיכרון, גמילה והשתוקקות ומאופיינים בצריכה מתמדת של אלכוהול ללא התחשבות בהשלכות החברתיות, התעסוקתיות והבריאותיות1,2,3,4,5,6,7. הפרעת שימוש באלכוהול מתרחשת לעתים קרובות בשילוב עם הפרעות נפשיות נפוצות, מתמשכות ופוגעות אחרות8, כגון ADHD9, anxiety10, או depression11 ואחראית לכ-88,000 מקרי מוות מדי שנה בארצות הברית לבדה2. שימוש מופרז או תכוף באלכוהול יכול להשפיע על מצב העבודה והקשרים החברתיים של אדם12 ועלול להוביל לאלימות מוגברת13. מבחינה פיזית, גמילה חריפה מאלכוהול עלולה לגרום לחרדה, עצבנות, רעד, הזעת יתר, שינוי תודעה והזיות14,15. יתר על כן, אנשים עשויים להרגיש תסמיני גמילה בעת הפחתת או הפסקת השתייה ולהיות עצבניים או עצבניים16. בנוסף, צריכת אלכוהול כרונית עלולה לגרום לאובדן זיכרון17 ועלולה לגרום למחסור בתיאמין, הידוע גם בשם תסמונת ורניקה-קורסאקוף (WKS), התורם באופן משמעותי לדמנציה18.

כדי לקדם עוד יותר את מחקר ה-AUD, יש צורך במודלים רלוונטיים של המחלה בבעלי חיים. המודל הנפוץ ביותר של AUD במכרסמים הוא חשיפה כרונית לאדי אתנול לסירוגין (CIE), שהיא גישה מבוססת היטב להשראת תלות באלכוהול באמצעות שאיפה חוזרת ונשנית של אלכוהול vapor4,19,20,21,22,23,24,25,26,27,28,29,30. הליכי CIE של מכרסמים גורמים לתסמיני גמילה כגון עוויתות הנגרמות על ידי טיפול31, ריגוש יתר, התנהגות דמוית עצבנות, התנהגות דמוית חרדה והפרעות שינה וגורמים להסלמה של שתיית אלכוהול22,32,33,34,35. יתר על כן, CIE מוביל להסלמה משמעותית בצריכת אלכוהול מרצון, המשקפת את הצריכה הכפייתית שנצפתה ב-AUD36. במהלך שלבי השיכרון, עכברים מציגים סימנים התנהגותיים ופיזיולוגיים התואמים לשיכרון אלכוהול בבני אדם, כולל אטקסיה, טשטוש ופגיעה בהיפותרמיה37,38,39. תוצאות אלו מדגישות את התועלת של מודל CIE בלכידת ההיבטים הנוירוביולוגיים וההתנהגותיים של תלות באלכוהול, מה שהופך אותו לכלי רב ערך להבהרת מנגנוני AUD ובדיקת התערבויות טיפוליות פוטנציאליות. במודלים פרה-קליניים של AUD, כגון חשיפה כרונית לאתנול לסירוגין (CIE), עכברים מציגים סימנים התנהגותיים ופיזיולוגיים המקבילים לשיכרון ותלות באלכוהול אנושי. במהלך שלבי השיכרון, עכברים עשויים להראות סימנים הכוללים אטקסיה, טשטוש, ירידה בהתנהגות חקר ופגיעה ברפלקס הימני. בהתחשב בסיכונים אלה, בעלי חיים היו במעקב צמוד במהלך ואחרי חשיפה לאדי אתנול כדי לזהות סימנים של שיכרון חמור או הידרדרות בריאותית.

בחולדות, מודל CIE כולל לעתים קרובות מתן עצמי אופרנטי של אלכוהול כדי למדוד את ההסלמה של הצריכה40,41,42, בעוד שמודל העכבר כולל CIE ובחירה של שני בקבוקים (2BC) שתייה43,44. מודלים פרה-קליניים של תלות באלכוהול הראו באופן עקבי שבעלי חיים מגדילים את צריכת האתנול שלהם לאחר חשיפה כרונית לאדי אתנול23,45,46,47. בעכברים ספציפית, מחזורים חוזרים ונשנים של CIE הוכחו כמסלימים את צריכת האתנול מרצון3,21,48,49,50. בסך הכל, מחקרים קודמים מראים כי מודל CIE מספיק כדי להגדיל את צריכת האתנול ולדגמן AUD במכרסמים.

מחקר זה נועד להדגיש את שיטת CIE לחקר AUD וליתר דיוק, להתמקד במודל העכבר 2BC/CIE. אנו עוברים תהליך מפורט של השלבים הדרושים לביצוע 2BC/CIE ומציגים דוגמה להסלמה של שתיית אלכוהול לאחר CIE.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

כל ההליכים אושרו על ידי הוועדה לטיפול ושימוש בבעלי חיים של אוניברסיטת פרדו. המחקר הנוכחי השתמש בעכברי C57BL/6J בני 8 שבועות. בקבוצת CIE היו 5 עכברים (3 זכרים, 2 נקבות), ובקבוצת האוויר היו 10 עכברים (5 זכרים ו-5 נקבות). בעלי החיים הושגו ממקור מסחרי (ראו טבלת חומרים) ושוכנו בקבוצה במחזור של 12 שעות אור-חושך עם גישה למזון. משקל הגוף של העכברים נמדד פעם בשבוע במהלך הניסוי.

1. תכנון ניסוי כללי

הערה: בחירה בשני בקבוקים (2BC)/חשיפה כרונית לאדי אתנול לסירוגין (CIE) היא מודל עכברי פרה-קליני לחקר תלות באתנול51.

  1. במהלך שבועות 2 לפנה"ס, ודאו שלעכברים יש גישה לבקבוק המכיל אתנול (15% משקל/נפח) ולבקבוק המכיל מים למשך שעתיים ביום (שני עד שישי), החל משעתיים לתוך מחזור החשיכה.
  2. בהתחלה, אפשר לעכברים לפחות שבועיים של שתייה בסיסית של 2BC עד שתגיע לרמה יציבה של צריכת אתנול. בהתאם לצרכי הניסוי, חלקו את העכברים לשתי קבוצות (קבוצת CIE וקבוצת Air) או יותר אם נכללים טיפולים נוספים על סמך צריכת האתנול הממוצעת בבסיס.
  3. לאחר שבועות הבסיס של 2BC, חשוף את העכברים מקבוצת CIE לאדי אתנול (CIE) במשך ארבעה ימים רצופים (שני עד חמישי) עם 16 שעות רצופות של אדים ו-8 שעות רצופות של אדים. כדי להבטיח ריכוזי אתנול יציבים ומתמשכים לאורך כל תקופת החשיפה, פיראזול ניתן במקביל כמעכב אלכוהול דהידרוגנאז, ובכך מנע חילוף חומרים מהיר של אתנול וקידם רמות אתנול מערכתיות עקביות.
    הערה: כדי לשלוט במשתנים פוטנציאליים ספציפיים לתא כגון תאורה, רעידות, רעש וטמפרטורה, עכברים בקבוצת האוויר שוכנו בתא זהה באותם תנאים סביבתיים כמו קבוצת CIE, אך ללא חשיפה לאדי אלכוהול.
  4. במהלך שבוע CIE/Air, ודא ש-2BC לא יתרחש. לאחר שבוע אחד של CIE/Air, המשיכו את העכברים ב-2BC בימים שני עד שישי הבאים.
  5. אפשר לעכברים שבועות לסירוגין של CIE/Air ו-2BC למשך שארית ההליך עד להסלמה של שתיית אלכוהול בעכברי CIE. אסוף דם מהעכברים לפחות פעם בשבוע של CIE כדי לקבוע את ריכוז האתנול בדם שלהם (BEC)52.

2. הכנה לניסויים

  1. רכשו את כל האספקה הבאה לפני תחילת המחקר: עכברים, כלובים/כלובי מתכת, בקבוקי שתייה שיתאימו לשניים בכל כלוב זה לצד זה, מצעים, מזון, משקל, תא אדים לסירוגין כרוני ומכונת אנלוקס או שיטה אחרת לניתוח ה-BECs (ראה טבלת חומרים).
  2. ודא שכל הכימיקלים הנדרשים מוכנים לניסוי: מי שתייה, 95% אתנול, פירזול, הפרין ותמיסת מלח סטרילית.

3. הרגלת בעלי חיים

  1. אם העכברים עדיין לא שוכנים באותו מיקום כמו הניסויים, אפשר להם לפחות שבוע אחד להתאקלם לסביבה החדשה.
    הערה: במהלך תקופה זו, יש להרגיל עכברים גם לטיפול עדין כדי למזער בלבול הקשור ללחץ ולשפר את רווחת בעלי החיים. מפגשי הטיפול נערכו פעם ביום במשך חמישה ימים רצופים, כל אחד נמשך כ-2-3 דקות לכל בעל חיים. עכברים הונחו או הונחו בעדינות לתוך ידיו של הנסיין מבלי להרים את הזנב, מה שאפשר להם לחקור מרצונם את ידו של המטפל. טכניקה זו מאפשרת אינטראקציה שגרתית, מפחיתה מתח במהלך הליכי ניסוי עוקבים ומבטיחה נתונים התנהגותיים אמינים יותר. בנוסף, בעלי חיים הועברו לאזור הניסוי למשך 30 דקות מדי יום כדי להתאקלם עוד יותר בסביבת הניסוי.
  2. ודא שהעכברים מקבלים שבוע אחד של בחירה של שני בקבוקים כאשר שני הבקבוקים מלאים במים כדי לאפשר להם להסתגל למערך הכלוב השונה ולהכניס אותם לכלוב בודד לשתייה.

4. שני בקבוקים לבחירה עם 15% משקל אתנול ומים

  1. הרגל לבחירה בשני בקבוקים
    1. פרדיגמת בדיקת בחירת שני בקבוקים זהה לאורך כל השבוע של בחירת שני בקבוקים עם מים והבדיקה המאוחרת יותר עם מים ואתנול. העבירו את העכברים בקבוצה לכלובי השתייה האישיים שלהם 30 דקות לפני כיבוי האורות, ולאחר מכן אפשרו לעכברים לשתות במשך שעתיים.
    2. רשום את הנפחים של כל בקבוק שתייה לפני ואחרי תקופת השתייה של שעתיים. כל קבוצה עוברת 2BC למשך 5 ימים, מיום שני עד שישי.
      הערה: מטרת שבוע ההרגלה היא לאפשר לבעלי החיים להסתגל לשני בקבוקים שנמצאים בכלוב כדי למזער כל הטיה הנגרמת על ידי מיקום הצד הטבעי של בקבוק בודד. במהלך השבוע הזה, שני הבקבוקים מלאים במים. אם מיכל המתכת המצורף נועד להכיל בקבוק אחד בלבד, השתמש בזהירות ברווח בין הסורגים שלו הסמוך לבקבוק הראשון כדי ליצור מקום לבקבוק השני. הבקבוקים המשמשים לניסויי שתייה מיוצרים בהתאמה אישית באמצעות פיפטות של 10 מ"ל ו-25 מ"ל עם קצוות חתוכים כדי לאפשר הכנסת לגימה ישרה עם מיסב כדורי לעכברים לשתות ממנו. שימוש בקליפסים קלסר כדי להצמיד את הבקבוקים למכסה החוט יבטיח שהבקבוקים לא יזוזו במהלך תקופת השתייה (איור משלים 1 ואיור משלים 2).
  2. בחירה בסיסית של שני בקבוקים
    1. לאחר ההתרגלות, אפשר לעכברים לעבור לפחות שבועיים של שתיית בסיס 2BC כדי לבסס צריכת אתנול יציבה. במהלך השתייה הבסיסית, בדקו את העכברים במשך שעתיים ביום ו-5 ימים בשבוע (שני עד שישי) עם בקבוק מים אחד ובקבוק שני עם 15% משקל/נפח אתנול. רשום את הנפחים של כל בקבוק שתייה לפני ואחרי תקופת השתייה של שעתיים.
      הערה: כדי לקבוע קו בסיס יציב של צריכת אתנול, חזור על השבועות של 2BC עד שלכל עכבר יש שונות של פחות מ-15% בצריכה בין הימים.
    2. לאחר שהעכברים משיגים קו בסיס יציב של צריכת אתנול, חלקו את העכברים באופן שווה על סמך צריכת האתנול שלהם לקבוצות שאינן תלויות באתנול (טיפול באוויר) ותלויות באתנול (טיפול CIE). לאחר שנקבעה צריכת האתנול הבסיסית, העכברים עוברים CIE (או חשיפה לאוויר) בשבוע שלאחר מכן.
      הערה: לא כל הניסויים דורשים הכללה של קבוצה שאינה תלויה, ויש לקבוע זאת על סמך מיקוד המחקר. לדוגמה, עכברים תלויי אתנול עם ובלי טיפול ספציפי עשויים להיות השוואה רלוונטית יותר.
  3. שני בקבוקים לבחירה (2BC)
    1. המשך את הליך 2BC כפי שבוצע במהלך השתייה הבסיסית לאחר השבוע הראשון של CIE.
      הערה: נוסחת שתיית העכבר לבחירת שני בקבוקים היא תערובת אתנול של 15% w/v (1 ליטר): 95% אתנול (195 מ"ל) ומי שתייה של עכברים (805 מ"ל).

5. חשיפה כרונית לאדי אתנול לסירוגין (CIE)

  1. סדרו את החומרים הבאים: תאי אדים CIE בהתאמה אישית (איור משלים 3), 95% אתנול, תמיסת אתנול-פירזול (68.1 מ"ג/ק"ג פירזול מעורבב ב-20% אתנול), תמיסת מלח-פירזול (68.1 מ"ג/ק"ג פירזול מעורבב במי מלח), מזרקים (1 מ"ל) ומחטים.
  2. הליך אדי אתנול כרוני לסירוגין (CIE).
    1. לפני הכנסתם לתאי האדים עבור CIE, יש להזריק לעכברים תמיסת אתנול-פירזול (0.0075 מ"ל/גרם), המשמשת ליצירת שיכרון אתנול ראשוני, עיכוב אתנול דהידרוגנאז וחסימת חילוף החומרים של אתנול53.
    2. הזריק את כל בקרות האוויר וקבוצות אחרות עם אותו מינון פיראזול מעורבב עם מי מלח (0.0075 מ"ל/גרם) במקום אתנול. מומלץ לתת חצי מנה (0.00375 מ"ל/גרם) של תמיסות פירזול ביום הראשון וביום האחרון של CIE בכל שבוע.
    3. לאחר הזריקות, החזירו את עכברי האוויר/בקרה לכלובי הבית שלהם, והניחו את הכלובים של קבוצת ה-CIE בתוך תא האדים.
      הערה: בהתחשב בסיכונים הבריאותיים הפוטנציאליים הקשורים לחשיפה כרונית לאדי אתנול, בעלי חיים היו במעקב צמוד לאורך כל הפרוטוקול כדי להבטיח את רווחתם ולזהות תופעות לוואי כלשהן. עכברים נשקלו לפחות פעמיים בשבוע, והערכות הבריאות כללו תצפית על סימני מצוקה קליניים. בעלי חיים שהפגינו ירידה במשקל הגוף העולה על 20% מנקודת ההתחלה או הראו סימנים כגון יציבה כפופה, עייפות, זקפה או פרווה לא מטופחת נחשבו כמי שהגיעו לנקודות קצה הומאניות והוסרו מיד מהמחקר בהתאם להנחיות מוסדיות מאושרות לטיפול ושימוש בבעלי חיים. במהלך CIE, עכברים רגישים ביותר לתוצאות בריאותיות גרועות לקראת סוף השבוע, כאשר הם נכנסים לתקופת גמילה ממושכת לאחר הפסקת החשיפה לאתנול. כדי למזער את חומרת הגמילה, חצי מנה של פירזול ניתנת ביום האחרון של החשיפה לאדים בכל שבוע. בנוסף, חצי מנה ניתנת בתחילת כל מחזור CIE חדש כדי להקל על בעלי החיים בחזרה לחשיפה לאתנול. פיראזול, מעכב אלכוהול דהידרוגנאז, משמש לייצוב והארכת ריכוזי האתנול בדם; המינונים נעים בדרך כלל בין 0.00375 מ"ל/גרם ל-0.0075 מ"ל/גרם וניתן להתאים אותם כדי להשיג את ריכוז האתנול הרצוי בדם.
    4. לאחר הכנסת העכברים לתאי האדים, נעל את הדלתות והגדר את המשאבה לרמת האדים המתאימה (למשל, 1-3). הגדר את זמן הריצה של הניסוי. במחקר הנוכחי, הניסוי החל בשעה 17:00 והסתיים בשעה 09:00 בבוקר, ונעשה שימוש בהגדרת משאבה של 1-2 (בשימוש לאורך כל הדרך).
    5. לאחר מכן, לחץ על כפתור התחל במסך הבקרה של תא האדים של CIE כדי להתחיל את הניסוי.
      הערה: שלב זה עשוי להשתנות בהתאם לתא בו נעשה שימוש ולהבדלים בהגדרה. כאן, לאחר שכל העכברים מוזרקים ומכניסים לתא האתנול, התא צריך להתחיל לשאוב 95% אתנול לבקבוק זכוכית ולחמם את האתנול הנוזלי לאדים. האדים זורמים דרך החדר שבו העכברים מוחזקים במשך 16 שעות ביום במשך 4 ימים (שני בערב עד שישי בבוקר). בכל יום, העכברים חווים 8 שעות של כביית אדים. לאחר מכן העכברים מוציאים מהתא בסוף היום הרביעי (יום שישי בבוקר) ומתחילים בשעה 2 לפני הספירה ביום שני שלאחר מכן. בהתאם למערכת תא האדים וההגדרה הספציפית, ייתכנו שינויים ב-BECs הנגרמות על ידי ההגדרות/רמות האדים השונות. גורמים שונים, כגון הבדלים קלים ברכיבי המערכת, זרימת אוויר, פליטה וכו', יכולים לגרום לכך. התאמת רמת אדי האתנול במקום מינון הפירזול מתאימה לשמירה על BEC בטווח היעד. ככל שהסובלנות מתפתחת, ה-BECs עשויים להיות נמוכים מדי, וייתכן שיהיה צורך להתאים את רמת האדים. אם השיפוע בין רמות האדים תלול מדי להגדלת ה-BECs, מומלץ להתאים את מינון הפירזול בהתאם כדי לשנות את ה-BECs.
    6. מדוד את ה-BECs (ראה שלב 5.3) של העכברים לפחות פעם בשבוע במהלך CIE. בצע איסוף דם 30 דקות לפני שהאדים מפסיקים כדי לוודא שה-BECs לא התחילו לרדת.
      הערה: ייתכן שיהיה צורך להתאים את רמת האדים במהלך הניסוי מכיוון שסובלנות האתנול מצטברת במהלך מספר שבועות. יש לבדוק BECs לפני ואחרי התאמת הגדרות האדים.
    7. החזר את העכברים לבדיקת 2BC בשבוע שלאחר ה-CIE. חזור על שלב 4 ושלב 5. שמור את העכברים לסירוגין בין CIE ל-2BC במשך ארבעה עד שמונה מחזורים (8-16 שבועות) עד שיש להם הסלמה משמעותית בצריכת האתנול בהשוואה לנפח השתייה הבסיסי שלהם.
  3. מדידות דם
    1. סדר את החומרים הבאים: ציוד למדידת BECs, כגון מערכת אנלוקס, להב, צינור (0.2 מ"ל), הפרין/EDTA וצנטריפוגה (ראה טבלת חומרים).
    2. גזור את הזנב של עכברי CIE פעם אחת במהלך שבוע ה-CIE, 30 דקות לפני כיבוי מערכת האדים, כדי לאסוף דם לקביעת ה-BEC. ניתן לבצע את איסוף הדם במספר שיטות בהתאם להעדפות המעבדה54.
      הערה: הדם נאסף לתוך צינורות של 0.5 מ"ל שעברו הפרין או מצופים EDTA (ראה טבלת חומרים).
    3. שמור על דגימות הדם שנאספו בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס עד לעיבוד.
    4. כדי לעבד את הדגימות, צנטריפוגה ראשונה ב-208 x גרם למשך 10 דקות ב-4 מעלות צלזיוס כדי להפריד את הפלזמה.
    5. קבע את ריכוזי האתנול בדם באמצעות מנתח אתנול בקצב חמצן (ראה טבלת חומרים) או מערכות אחרות המסוגלות לקבוע BECs.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

במחקר מייצג זה, צריכת אתנול (g/kg) במהלך 2BC מדווחת במהלך השתייה הבסיסית ולאחר שבועות של CIE (פוסט-אידוי). בקצרה, כפי שמתואר בפרוטוקול, במהלך 2BC, לעכברים הייתה גישה לשני בקבוקים: אחד הכיל מים והשני הכיל אתנול 15% (w/v). לאחר שנקבעו כמויות הצריכה הבסיסיות, חולקו הנבדקים והוקצו באופן שווה לקבוצת ה-CIE או לקבוצת האוויר (Air). צריכת האתנול הבסיסית הראשונית במהלך תקופה של 3 שבועות התייצבה על 2.00 g/kg ± 0.21 g/kg (n = 15) לפני ה-CIE (איור 1A,B).

בבחינ...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

הפרעת שימוש באלכוהול מייצגת בעיה עולמית של בריאות הציבור עם שכיחות גבוהה ועלות גבוהה לחברה56. כדי לחקור AUD במודלים פרה-קליניים של בעלי חיים, שיטה נפוצה בעכברים היא2BC/CIE 20,34,43,44,51,57,58,59. כאן, נעשה שימוש במודל מבוסס זה של תל...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

מאורי קול הוא הבעלים והמפעיל של La Jolla Alcohol Research Inc.

תודות

עבודה זו נתמכה על ידי מענקים של המכונים הלאומיים לבריאות (NIH) AA027301 ו-AA029985.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
500 Eppendorf TubesEppendorfL203896J
95% אתנולDecon מעבדות2816
Analox מכונהAnalox מכשיריםAnalox-AM1
בעלי חיים שקילה סולםקנטמדעי SCL-4000
קלסר קליפיםOffice Depot560394
C57BL/6J עכברים מעבדת ג'קסון000664
צנטריפוגהEppendorf5418R
תא אדים לסירוגיןכרוני La Jolla Alcohol Research Incחומרים בהתאמה אישית
Heparin/EDTASagent PharmaceuticalsTS/DRUGS/2/2015
מצעי עכברBed-o' Cobs8Bמילוי עם בקבוק
שתייה עכברחומרים בהתאמה אישית
PyrazoleSigma-Aldrichbccc6397
Teklad גלובלי 18% חלבון (מזון עכבר)Teklad globalEnvigo 2018
עמוק 1/8 אינץ'

מקורות

  1. Koob, G. F., Volkow, N. D. Neurobiology of addiction: A neurocircuitry analysis. Lancet Psychiatry. 3 (8), 760-773 (2016).
  2. Witkiewitz, K., Litten, R. Z., Leggio, L. Advances in the science and treatment of alcohol use disorder. Science Advances. 5 (9), 4043(2019).
  3. Becker, H. C. Alcohol dependence, withdrawal, and relapse. Alcohol Research and Health. 31 (4), 348-361 (2008).
  4. Becker, H. C. Effects of alcohol dependence and withdrawal on stress responsiveness and alcohol consumption. Alcohol Research. 34 (4), 448-458 (2012).
  5. Erickson, E. K., Grantham, E. K., Warden, A. S., Harris, R. A. Neuroimmune signaling in alcohol use disorder. Pharmacology, Biochemistry, and Behavior. 177, 34-60 (2019).
  6. Aalsma, M., et al. Adolescent suicide assessment and management in primary care. BMC Pediatrics. 22 (1), 389(2022).
  7. Grant, B. F., et al. Epidemiology of DSM-5 alcohol use disorder: Results from the National Epidemiologic Survey on Alcohol and Related Conditions III. JAMA Psychiatry. 72 (8), 757-766 (2015).
  8. Helle, A. C., Watts, A. L., Trull, T. J., Sher, K. J. Alcohol use disorder and antisocial and borderline personality disorders. Alcohol Research. 40 (1), (2019).
  9. Luderer, M., Ramos Quiroga, J. A., Faraone, S. V., Zhang James, Y., Reif, A. Alcohol use disorders and ADHD. Neuroscience and Biobehavioral Reviews. 128, 648-660 (2021).
  10. Ribadier, A., Varescon, I. Anxiety and depression in alcohol use disorder individuals: The role of personality and coping strategies. Substance Use and Misuse. 54 (9), 1475-1484 (2019).
  11. McHugh, R. K., Weiss, R. D. Alcohol use disorder and depressive disorders. Alcohol Research. 40 (1), (2019).
  12. Le Berre, A. P. Emotional processing and social cognition in alcohol use disorder. Neuropsychology. 33 (6), 808-821 (2019).
  13. Sontate, K. V., et al. Alcohol, aggression, and violence: From public health to neuroscience. Frontiers in Psychology. 12, 699726(2021).
  14. Prescrire International. Alcohol withdrawal syndrome: how to predict, prevent, diagnose and treat it. Prescrire International. 16 (87), 24-31 (2007).
  15. Mendelson, J. H. The effect of Alcohol on the nervous system. Alcohol Health and Research World. 19 (1), 28-29 (1995).
  16. Murray, T. D., Berger, A. Alcohol withdrawal. Virginia Medical Quarterly. 124 (3), 184-187 (1997).
  17. Fama, R., et al. Memory impairment in alcohol use disorder is associated with regional frontal brain volumes. Drug and Alcohol Dependence. 228, 109058(2021).
  18. Kopelman, M. D. The Korsakoff syndrome. British Journal of Psychiatry. 166 (2), 154-173 (1995).
  19. Griffin, W. C. Alcohol dependence and free-choice drinking in mice. Alcohol. 48 (3), 287-293 (2014).
  20. Griffin, W. C., Lopez, M. F., Yanke, A. B., Middaugh, L. D., Becker, H. C. Repeated cycles of chronic intermittent ethanol exposure in mice increases voluntary ethanol drinking and ethanol concentrations in the nucleus accumbens. Psychopharmacology. 201 (4), 569-580 (2009).
  21. Kimbrough, A., et al. CRF(1) receptor-dependent increases in irritability-like behavior during abstinence from chronic intermittent ethanol vapor exposure. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 41 (11), 1886-1895 (2017).
  22. Kimbrough, A., et al. Brain-wide functional architecture remodeling by alcohol dependence and abstinence. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 117 (4), 2149-2159 (2020).
  23. O'Dell, L. E., Roberts, A. J., Smith, R. T., Koob, G. F. Enhanced alcohol self-administration after intermittent versus continuous alcohol vapor exposure. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 28 (11), 1676-1682 (2004).
  24. Pleil, K. E., et al. Effects of chronic ethanol exposure on neuronal function in the prefrontal cortex and extended amygdala. Neuropharmacology. 99, 735-749 (2015).
  25. Warden, A. S., et al. Microglia control escalation of drinking in alcohol-dependent mice: Genomic and synaptic drivers. Biological Psychiatry. 88 (12), 910-921 (2020).
  26. Gilpin, N. W., Koob, G. F. Neurobiology of alcohol dependence: Focus on motivational mechanisms. Alcohol Research and Health. 31 (3), 185-195 (2008).
  27. Kreifeldt, M., et al. Central amygdala corticotropin-releasing factor neurons promote hyponeophagia but do not control alcohol drinking in mice. Molecular Psychiatry. 27 (5), 2502-2513 (2022).
  28. Sidhu, H., Kreifeldt, M., Contet, C. Affective disturbances during withdrawal from chronic intermittent ethanol inhalation in C57BL/6J and DBA/2J male mice. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 42 (7), 1281-1290 (2018).
  29. Kononoff, J., et al. Systemic and intra-habenular activation of the orphan G protein-coupled receptor GPR139 decreases compulsive-like alcohol drinking and hyperalgesia in alcohol-dependent rats. eNeuro. 5 (3), (2018).
  30. Avegno, E. M., et al. Central amygdala circuits mediate hyperalgesia in alcohol-dependent rats. Journal of Neuroscience. 38 (36), 7761-7773 (2018).
  31. de Guglielmo, G., et al. Recruitment of a neuronal ensemble in the central nucleus of the amygdala is required for alcohol dependence. Journal of Neuroscience. 36 (36), 9446-9453 (2016).
  32. Liang, J., et al. Chronic intermittent ethanol-induced switch of ethanol actions from extrasynaptic to synaptic hippocampal GABAA receptors. Journal of Neuroscience. 26 (6), 1749-1758 (2006).
  33. Becker, H. C. Animal models of alcohol withdrawal. Alcohol Research and Health. 24 (2), 105-113 (2000).
  34. Kimbrough, A., Kim, S., Cole, M., Brennan, M., George, O. Intermittent access to ethanol drinking facilitates the transition to excessive drinking after chronic intermittent ethanol vapor exposure. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 41 (8), 1502-1509 (2017).
  35. Koob, G. F., Colrain, I. M. Alcohol use disorder and sleep disturbances: A feed-forward allostatic framework. Neuropsychopharmacology. 45 (1), 141-165 (2020).
  36. Becker, H. C., Lopez, M. F. An animal model of alcohol dependence to screen medications for treating alcoholism. International review of neurobiology. 126, 157-177 (2016).
  37. Sharpe, A. L., Tsivkovskaia, N. O., Ryabinin, A. E. Ataxia and c-Fos Expression in Mice Drinking Ethanol in a Limited Access Session. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 29, 1419-1426 (2005).
  38. Koob, G. F. Alcoholism: allostasis and beyond. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 27 (2), 232-243 (2003).
  39. Chen, Y. C., Holmes, A. Effects of Topiramate and Other Anti-Glutamatergic Drugs on the Acute Intoxicating Actions of Ethanol in Mice: Modulation by Genetic Strain and Stress. Neuropsychopharmacol. 34, 1454-1466 (2009).
  40. Risher, M. L., et al. Long-term effects of chronic intermittent ethanol exposure in adolescent and adult rats: Radial-arm maze performance and operant food reinforced responding. PLoS One. 8 (5), e62940(2013).
  41. Van Skike, C. E., Novier, A., Diaz-Granados, J. L., Matthews, D. B. The effect of chronic intermittent ethanol exposure on spatial memory in adolescent rats: The dissociation of metabolic and cognitive tolerances. Brain Research. 1453, 34-39 (2012).
  42. Ho, A. M., et al. Chronic intermittent ethanol exposure alters behavioral flexibility in aged rats compared to adult rats and modifies protein and protein pathways related to Alzheimer's disease. ACS Omega. 7 (50), 46260-46276 (2022).
  43. Piggott, V. M., Lloyd, S. C., Perrine, S. A., Conti, A. C. Chronic intermittent ethanol exposure increases ethanol consumption following traumatic stress exposure in mice. Frontiers in Behavioral Neuroscience. 14, 114(2020).
  44. Quijano Carde, N. A., De Biasi, M. Behavioral characterization of withdrawal following chronic voluntary ethanol consumption via intermittent two-bottle choice points to different susceptibility categories. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 46 (4), 614-627 (2022).
  45. Rimondini, R., Arlinde, C., Sommer, W., Heilig, M. Long-lasting increase in voluntary ethanol consumption and transcriptional regulation in the rat brain after intermittent exposure to alcohol. FASEB Journal. 16 (1), 27-35 (2002).
  46. Becker, H. C. Influence of stress associated with chronic alcohol exposure on drinking. Neuropharmacology. 122, 115-126 (2017).
  47. Zhao, Y., Weiss, F., Zorrilla, E. P. Remission and resurgence of anxiety-like behavior across protracted withdrawal stages in ethanol-dependent rats. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 31 (9), 1505-1515 (2007).
  48. Becker, H. C., Lopez, M. F. Increased ethanol drinking after repeated chronic ethanol exposure and withdrawal experience in C57BL/6 mice. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 28 (12), 1829-1838 (2004).
  49. Kreifeldt, M., Le, D., Treistman, S. N., Koob, G. F., Contet, C. BK channel beta1 and beta4 auxiliary subunits exert opposite influences on escalated ethanol drinking in dependent mice. Frontiers in Integrative Neuroscience. 7, 105(2013).
  50. Pringuey, D., et al. Comorbidity of affective disorders and alcohol use disorder. Encephale. 40, S3-S7 (2014).
  51. Okhuarobo, A., et al. A novel mouse model for vulnerability to alcohol dependence induced by early-life adversity. Neurobiology of Stress. 13, 100269(2020).
  52. Dilley, J. E., Nicholson, E. R., Fischer, S. M., Zimmer, R., Froehlich, J. C. Alcohol drinking and blood alcohol concentration revisited. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 42 (2), 260-269 (2018).
  53. Feierman, D. E., Cederbaum, A. I. Oxidation of the alcohol dehydrogenase inhibitor pyrazole to 4-hydroxypyrazole by microsomes. Effect of cytochrome P-450 inducing agents. Drug Metabolism and Disposition. 15 (5), 634-639 (1987).
  54. Parasuraman, S., Raveendran, R., Kesavan, R. Blood sample collection in small laboratory animals. Journal of Pharmacology and Pharmacotherapeutics. 1 (2), 87-93 (2010).
  55. Armstrong, R. A. When to use the Bonferroni correction. Ophthalmic and Physiological Optics. 34 (5), 502-508 (2014).
  56. Rehm, J., et al. Alcohol use disorders in primary health care: What do we know and where do we go. Alcohol and Alcoholism. 51 (4), 422-427 (2016).
  57. Gorini, G., Roberts, A. J., Mayfield, R. D. Neurobiological signatures of alcohol dependence revealed by protein profiling. PLoS One. 8 (12), e82656(2013).
  58. Frie, J. A., Khokhar, J. Y. An open source automated two-bottle choice test apparatus for rats. HardwareX. 5, 00061(2019).
  59. Smith, R. J., et al. Dynamic c-Fos changes in mouse brain during acute and protracted withdrawal from chronic intermittent ethanol exposure and relapse drinking. Addiction Biology. 25 (6), e12804(2020).
  60. Sachdeva, A., Choudhary, M., Chandra, M. Alcohol withdrawal syndrome: Benzodiazepines and beyond. Journal of Clinical and Diagnostic Research. 9 (9), (2015).
  61. Huitron-Resendiz, S., et al. Effects of withdrawal from chronic intermittent ethanol exposure on sleep characteristics of female and male mice. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 42 (3), 540-550 (2018).
  62. Gatch, M. B., Lal, H. Effects of ethanol and ethanol withdrawal on nociception in rats. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 23 (2), 328-333 (1999).
  63. Saitz, R. Introduction to alcohol withdrawal. Alcohol Health and Research World. 22 (1), 5-12 (1998).
  64. Emmerson, R. Y., Dustman, R. E., Shearer, D. E., Chamberlin, H. M. EEG, visually evoked and event related potentials in young abstinent alcoholics. Alcohol. 4 (4), 241-248 (1987).
  65. Gauvin, D. V., Youngblood, B. D., Holloway, F. A. The discriminative stimulus properties of acute ethanol withdrawal (hangover) in rats. Alcoholism: Clinical and Experimental Research. 16 (2), 336-341 (1992).
  66. George, O., Le Moal, M., Koob, G. F. Allostasis and addiction: Role of the dopamine and corticotropin-releasing factor systems. Physiology and Behavior. 106 (1), 58-64 (2012).
  67. Koob, G. F., Le Moal, M. Addiction and the brain antireward system. Annual Review of Psychology. 59, 29-53 (2008).
  68. Koob, G. F., Le Moal, M. Drug addiction, dysregulation of reward, and allostasis. Neuropsychopharmacology. 24 (2), 97-129 (2001).
  69. Nieto, S. J., Grodin, E. N., Aguirre, C. G., Izquierdo, A., Ray, L. A. Translational opportunities in animal and human models to study alcohol use disorder. Translational Psychiatry. 11 (1), 496(2021).
  70. Kuhns, L., Kroon, E., Lesscher, H., Mies, G., Cousijn, J. Age-related differences in the effect of chronic alcohol on cognition and the brain: A systematic review. Translational Psychiatry. 12 (1), 345(2022).
  71. Becker, H. C., Mulholland, P. J. Neurochemical mechanisms of alcohol withdrawal. Handbook of Clinical Neurology. 125, 133-156 (2014).
  72. Chen, M. M., et al. Intoxication by intraperitoneal injection or oral gavage equally potentiates postburn organ damage and inflammation. Mediators of Inflammation. , 971481(2013).
  73. Livy, D. J., Parnell, S. E., West, J. R. Blood ethanol concentration profiles: A comparison between rats and mice. Alcohol. 29 (3), 165-171 (2003).
  74. Jin, L., Batra, S., Jeyaseelan, S. Diminished neutrophil extracellular trap (NET) formation is a novel innate immune deficiency induced by acute ethanol exposure in polymicrobial sepsis, which can be rescued by CXCL1. PLoS Pathogens. 13 (9), e1006637(2017).
  75. Crabbe, J. C., Harris, R. A., Koob, G. F. Preclinical studies of alcohol binge drinking. Annals of the New York Academy of Sciences. 1216, 24-40 (2011).
  76. Blomstrand, R., et al. Pyrazoles as inhibitors of alcohol oxidation and as important tools in alcohol research: An approach to therapy against methanol poisoning. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 76 (7), 3499-3503 (1979).
  77. Domi, A., Stopponi, S., Domi, E., Ciccocioppo, R., Cannella, N. Sub-dimensions of alcohol use disorder in alcohol preferring and non-preferring rats, a comparative study. Frontiers in Behavioral Neuroscience. 13, 3(2019).
  78. de Guglielmo, G., et al. Voluntary and forced exposure to ethanol vapor produces similar escalation of alcohol drinking but differential recruitment of brain regions related to stress, habit, and reward in male rats. Neuropharmacology. 222, 109309(2023).
  79. Haggerty, D. L., et al. The role of anterior insular cortex inputs to dorsolateral striatum in binge alcohol drinking. Elife. 11, 77411(2022).
  80. Slivicki, R. A., et al. Oral oxycodone self-administration leads to features of opioid misuse in male and female mice. Addiction Biology. 28 (1), e13253(2023).
  81. Godynyuk, E., Bluitt, M. N., Tooley, J. R., Kravitz, A. V., Creed, M. C. An open-source, automated home-cage sipper device for monitoring liquid ingestive behavior in rodents. eNeuro. 6 (5), (2019).
  82. Simpson, S., et al. The hidden brain: Uncovering previously overlooked brain regions by employing novel preclinical unbiased network approaches. Frontiers in Systems Neuroscience. 15, 595507(2021).
  83. Smith, L. C., Kimbrough, A. Leveraging neural networks in preclinical alcohol research. Brain Sciences. 10 (9), 578(2020).
  84. Hwa, L., Besheer, J., Kash, T. Glutamate plasticity woven through the progression to alcohol use disorder: A multi-circuit perspective. F1000Research. 6, 298(2017).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

CIEAUD
חשיפה כרונית לאדי אתנול לסירוגין בשילוב עם בחירה בשני בקבוקים למודל הפרעת שימוש באלכוהול
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.