הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

הקמת מודל עכברי פיסטולה אורונזלית

2.3K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/65578

⸱

8 בספטמבר 2023

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 

במאמר זה

סיכום

מאמר זה מתאר הליך שלב אחר שלב להקמת מודל עכברים עם פיסטולה אורונזאלית. הפיסטולה האורונזאלית נוצרה על ידי שימוש בצריבה אופתלמולוגית מחוממת כדי לפגוע בחלק קו האמצע של החיך הקשה, וכתוצאה מכך נוצר פתח בין חלל הפה והאף.

תקציר

מחקר זה מציג שיטה המשתמשת בצריבה אופתלמולוגית מחוממת לפיתוח מודל בר קיימא לחקר פיסטולות אורונזאליות. עכברי C57BL/6 שימשו לביסוס מודל הפיסטולה האורונזאלית (ONF). כדי ליצור את ONF, העכברים הורדמו, שותקו, והחיך הקשה שלהם נחשף. במהלך ההליך הכירורגי נגרמה פגיעה ברירית בעובי מלא של 2.0 x 1.5 מ"מ בקו האמצע של החיך הקשה באמצעות צריבה אופתלמולוגית. היה חיוני לשלוט בגודל ה-ONF ולמזער דימום כדי להבטיח את הצלחת הניסוי. אימות יעילות מודל ONF נערך ביום השביעי שלאחר הניתוח, וכלל הערכות אנטומיות ותפקודיות כאחד. נוכחותה של מחיצת האף בתוך חלל הפה ויציאת המים הסטריליים מהנחיריים עם הזרקתם לחלל הפה אישרו את הקמתו המוצלחת של מודל ONF. המודל הדגים פיסטולה אורונזאלית מעשית ומוצלחת, המאופיינת בשיעור תמותה נמוך, שינויים משמעותיים במשקל ושונות מינימלית בגודל ONF. מחקרים עתידיים עשויים לשקול לאמץ מתודולוגיה זו כדי להבהיר את מנגנוני ריפוי פצעי החיך ולחקור טיפולים חדשניים לפיסטולות אורונזאליות.

מבוא

פיסטולה אורונזאלית (ONF), פתח לא תקין בין חלל הפה והאף, מתבטאת קלינית בפגם באזור מבני מתהליך הנאדיות ועד האובולה, המתרחש בדרך כלל כסיבוך לאחר תיקון חיך שסוע1. חולים עם ONF חווים ריפלוקס מזון, הפרעות ביטוי ותפקוד וולופרינגיאלי לקוי, המשפיעים באופן משמעותי על איכות חייהם 2,3,4. שיעור ONF לאחר הניתוח נע בין 2.4% ל -55% בשל גורמים כגון רוחב שסוע, סוג Veau ושיטה כירורגית 5,6,7,8. בנוסף, שיעור ההישנות לאחר תיקון ONF גבוה, ונע בין 0....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

כל ההליכים בבעלי חיים במחקר זה נבדקו ואושרו על ידי הוועדה האתית של בית הספר לסטומטולוגיה של מערב סין, אוניברסיטת סצ'ואן. עכברי C57BL/6 בוגרים (נקבה) שימשו במחקר הנוכחי.

1. הכנה כירורגית

  1. אספו את כלי הניתוח הדרושים להליך: נביטה, צריבה אופתלמולוגית, מספריים מיקרו-כירורגיים, פינצטה מיקרו-כירורגית, מזרקים ומחטים (26 גרם x 0.63 אינץ') (איור 1A,B) (ראו טבלת חומרים).
    הערה: לפני ההליך הכירורגי, autoclave את כלי הניתוח, כולל צריבה אופתלמולוגית, פינצטה microsurgical ומספריים microsurgical , ב 102.9 kPa (1.05 ק"ג / ס"מ2) ו 121 ° C במשך 20 דקות.
  2. ....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

כדי להעריך את ההיתכנות והיציבות של שיטה ניסיונית זו, בוצע אותו הליך על עשרה עכברים, ונעשו תצפיות לגבי תמותה, שינויים בגודל הפצע, משקל הגוף וניתוח היסטולוגי. העכברים הומתו ביום השביעי.

ההליך הציג שיעור תמותה נמוך. הצריבה האופטלמולוגית והנביט, המתוארים באיור 1A-C, היו מכשירי המפתח שבהם נעשה שימוש בניסוי הזה. מודל ONF נוצר על פי הפרוטוקול שסופק. מבין עשרת העכברים שנותחו, רק אחד פג ביום השביעי שלאחר הניתוח. שיעור התמותה הכולל לאורך הנ.......

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

חוקרים חקרו חומרים שונים, תרופות וטכניקות חדשניות לטיפול ב- ONF 10,11,12,13,14,15,16,17. עם התקדמות בהליכים כירורגיים, השכיחות וההישנות של ONF הופחתו. עם זאת, בשל המאפיינים הייחודיים של המחלה, מספר חולי ONF במרפאה מוגבל, מה שמחייב מודל סטנדרטי לחקר טיפולים .......

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

למחברים אין מה לחשוף.

תודות

עבודה זו נתמכה על ידי תוכנית המחקר והפיתוח, בית החולים לסטומטולוגיה של מערב סין, אוניברסיטת סצ'ואן (RD-02-202107), תוכנית התמיכה במדע וטכנולוגיה של מחוז סצ'ואן (2022NSFSC0743), ומענק הקרן למדע פוסט-דוקטורט בסצ'ואן (TB2022005) לה. הואנג.

....

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
מיקרוסקופיה אלקטרוניתשל נביטה66118-20ציוד חימום וחיטוי
כפפות לטקסAllmedאו אורות דומים
OlympusA1813
MeloxicamMedChemExpressHY-B0261כתוש; 5 מ"ג/ק"ג
מכשירים מיקרוכירורגיים (מספריים ופינצטה)ג'יאנגסו Tonghui Medical Devices Co.M-Y-0087מכשיר כירורגי
צריבה אופטלמולוגיתSuqian Wenchong ציוד רפואי ושות '1.00234E+13מכשיר כירורגי
כותנה סטרילית,Yancheng Begu Technology Co.או
רדיד מתכת סטריליBiosharpאו
יריעות סטריליות3MXH003801129או
וילונות כירורגייםYancheng Begu Technology Co.או מזרקים דומים
Yancheng Begu Technology Co.S-015301או קלטת דומה
Bkmamlabאו
מכשיר דומה לתחזוקת טמפרטורהמכשיר הרווארד LE-13-2104
Zoletil50Virbac80 מ"ג/ק"ג
מדעי   דומה דומות דומים

מקורות

  1. Alonso, V., et al. Three-layered repair with a collagen membrane and a mucosal rotational flap reinforced with fibrine for palatal fistula closure in children. International Journal of Pediatric Otorhinolaryngology. 127, 109679(2019).
  2. Garg, R., Shah, S., Uppal, S., Mittal, R. K.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

גלה מאמרים נוספים

פגיעה בחך קשיחכויית עינייםריפוי פצעי החךפגיעה ריריתעכברי C57BL/6אנליזה היסטולוגיתתגובה דלקתיתטכניקה כירורגית