מאמר שיטה

מאפייני שינויי כאב בחולדות עם פגיעה עצבית תוך 24 שעות לאחר התערבות חד פעמית בטווינה

1.4K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/65593

⸱

26 בינואר 2024

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1School of Acupuncture-Moxibustion and Tuina, Beijing University of Chinese Medicine, 2Beijing Hospital

במאמר זה

סיכום

אנו מציגים פרוטוקול המשתמש בסימולטור מניפולציה של טווינה כדי לבצע את הטיפול בטווינה "שלוש מניפולציות ושלוש נקודות דיקור" עבור חולדות עם פציעות כרוניות קלות של התכווצות, ולהעריך את נקודות הזמן היעילות לשיכוך כאבים של טווינה תוך 24 שעות על ידי בדיקת שינויים בכאב באמצעות ניתוח התנהגותי ושינויים בביטוי גורמים דלקתיים באמצעות בדיקת אימונוסורבנט המקושרת לאנזים.

תקציר

טווינה, כשיטת טיפול חיצונית של הרפואה הסינית המסורתית, הוכחה כבעלת השפעה משככת כאבים על כאב נוירופתי היקפי (pNP) במחקר קליני ובסיסי. עם זאת, נקודת הזמן האופטימלית עבור אפקט משכך כאבים של tuina עשוי להשתנות בהתאם לתחושות פציעה שונות, המשפיעים על חקירת מנגנון החניכה של שיכוך כאבים tuina.

המחקר השתמש בחולדות מודל של פגיעת התכווצות כרונית קלה (CCI מינורי) כדי לדמות pNP והשתמש בסימולטור מניפולציה אינטליגנטי של טווינה כדי לדמות את שלוש השיטות (לחיצה נקודתית, מריטה ולישה) ושלוש נקודות דיקור (Yinmen BL37, Chengshan BL57 ו- Yanglingquan GB34) לביצוע טיפול בטווינה. המחקר העריך את השינויים בכאב תוך 24 שעות ואת נקודת הזמן האופטימלית ליעילות של שיכוך כאבים בחולדות עם מודלים קלים של CCI על ידי בדיקת סף רגישות לקור (CST), סף נסיגה מכני (MWT) וחביון נסיגה תרמית (TWL). יתר על כן, המחקר העריך את שינויי הביטוי IL-10 ו- TNF-α באמצעות זיהוי אליסה. התוצאות מראות כי tuina יש השפעות משככי כאבים מיידיים ומתמשכים. עבור שלושת ספי הרגישות השונים לפציעה של CST, MWT, TWL ושני ציטוקינים של IL-10 ו- TNF-α, יעילות משככי הכאבים של טווינה תוך 24 שעות לאחר ההתערבות שונה באופן משמעותי בנקודות זמן שונות.

מבוא

כאב נוירופתי היקפי (pNP) מתייחס לכאב הנגרם על ידי נגע או מחלה של מערכת העצבים הסומטוסנסורית ההיקפית, המתבטאת כסדרה של סימפטומים וסימנים, עם hyperalgesia כאחד הסימפטומים העיקריים 1,2. שיכוך כאבים הוא חוויה מוגברת של כאב הנגרם על ידי גירוי מזיק, כולל דקירת סיכה, קור וחום3. נערכו מחקרים אפידמיולוגיים גדולים, המראים כי pNP הוא הנפוץ ביותר, עם שיעור שכיחות של 6.9%-10% בכאב נוירופתי4. pNP יכול להיגרם על ידי מחלות מרובות, כולל פגיעה בעצב, נוירלגיה פוסט-הרפטית, פולינוירופתיה סוכרתית כואבת, טרשת נפוצה, שבץ, סרטן וכו '.5. כיום, השיטה העיקרית לטיפול pNP היא תרופות, אבל ההשפעה אינה אידיאלית; ותופעות הלוואי משמעותיות, וזו הסיבה העיקרית לנטל הכלכלי הגבוה על הפרט והחברה6.

טווינה היא שיטת טיפול חיצונית ירוקה, חסכונית, בטוחה ויעילה של הרפואה הסינית המסורתית7. מחקרים קליניים רבים הוכיחו את ההשפעה משככת הכאבים של טווינה על pNP, ומחקרים בסיסיים אימתו את ההשפעות המיידיות והמצטברות של tuina 8,9. מנגנון משכך הכאבים המצטבר העיקרי של טווינה הוא להפחית את רמות הגורמים הדלקתיים ולעכב את ההפעלה של תאי גלייה10,11. המחקר הקודם אישר את ההשפעה המצטברת של משכך כאבים של טווינה ומצא גנים המבוטאים באופן דיפרנציאלי (DEGs) בגרעיני השורש הגבי (DRG) ובקרן עמוד השדרה הגבי (SDH) של חולדות עם פגיעה עצבית סיאטית לאחר 20 פעמים של טיפול בטווינה, הקשורים בעיקר לקשירת חלבונים, תגובת לחץ והקרנה עצבית12. במחקרים אחרונים, אושר כי tuina יש אפקט משכך כאבים מיידי וכי התערבות tuina חד פעמית יכול להקל על hyperalgesia של חולדות CCI קטין ובמיוחד להקל על hyperalgesia תרמי יעיל יותר13. עם זאת, נקודת הזמן האופטימלית עבור אפקט משכך כאבים של tuina עשוי להשתנות בהתאם לתחושת הפציעה (קר, חום, מכני), המשפיעים על חקירת מנגנון החניכה של שיכוך כאבים tuina.

מתווכי דלקת יכולים לגרום לרגישות והפעלה של קולטני כאב, מה שמוביל לירידה בספי ההפרשות וההפרשות החוץ רחמיות, ובכך לתרום לרגישות היקפית14,15. לאחר פגיעה עצבית היקפית, TNF-α הוא יוזם התגובה הדלקתית, אשר יכול לקדם את הסינתזה של גורמים דלקתיים כגון IL-10 ו- IL-1β, גרימת פגיעה דלקתית ישירה ברקמות, גירוי קצות עצבים מקומיים, וגרימת כאב 16,17,18. Tuina יכול להשיג השפעות משככי כאבים על ידי הפחתת הביטוי של גורמים דלקתיים כגון TNF-α, IL-10, IL-6, ו- IL-1β 19,20,21. המחקר בחר חולדות מודל CCI מינוריות כדי לדמות pNP קליני ובחר נקודות זמן שונות לבדיקה התנהגותית של כאב גירוי קר, תרמי ומכני לאחר התערבות טווינא חד פעמית על ידי סף רגישות לקור (CST), סף נסיגה מכני (MWT), חביון נסיגה תרמית (TWL), ובחר IL-10 ו- TNF-α בסרום על ידי בדיקת אימונוסורבנט מקושרת אנזים (ELISA), על מנת לבחור את נקודת הזמן שבה ההשפעה משכך כאבים של טווינה היא משמעותית, מתן בסיס לחקר מנגנון החניכה של שיכוך כאבים טווינה בשלב מאוחר יותר.

פרוטוקול

הוועדה להגנה על בעלי חיים ושימוש באוניברסיטת בייג'ינג לרפואה סינית (BUCM-4-2022082605-3043) אישרה את כל ההליכים המשמשים במחקר זה.

1. בעלי חיים ועיצוב המחקר

  1. השג 49 חולדות Sprague-Dawley (SD) זכר בן 8 שבועות, במשקל 200 ± 10 גרם.
  2. באמצעות שיטת טבלת מספרים אקראיים, חלקו את החולדות לקבוצת פעולת דמה (n = 7), קבוצת מודל (n = 7), ומיד לאחר קבוצת טווינה (n = 7), 6 שעות לאחר קבוצת טווינה (n = 7), 12 שעות לאחר קבוצת טווינה (n = 7), 18 שעות לאחר קבוצת טווינה (n = 7), ו- 24 שעות לאחר קבוצת טווינה (n = 7).

2. הקמת מודל חולדה של CCI מינורי (איור 1)

הערה: שיטת מידול CCI קטין הייתה כפי שתוארה במחקרים קודמים 22,23,24.

  1. אפשר הזנה אדפטיבית של חולדת SD למשך 7 ימים. תנו לחולדה לצום במשך 2-3 שעות לפני הדוגמנות.
  2. הכניסו את החולדה לקופסה מלאה באיזופלורן 3-5% להרדמה על ידי מכונת הרדמה. לאחר ההרדמה, יש למרוח משחה אופתלמית על שתי העיניים כדי למנוע התייבשות.
  3. תקנו את החולדה בתנוחה נוטה על שולחן, גלחו את הפרווה של אזור מפרק הירך הימני וחיטאו את האזור ביוד (איור 1B).
  4. לאשר את המישור הכירורגי של הרדמה על ידי צביטת בוהן. בצעו חתך עורי של כ-0.5-1 ס"מ לאורך כיוון ההליכה של העצב הסיאטי, הפרידו בבוטות את שכבת השריר וחשפו באופן מלא את הקצה התחתון של שריר הפיריפורמיס (איור 1C).
  5. קשרו באופן רופף תפר מעי כרום נספג (סוג 4-0) סביב העצב מבלי להפריע לזרימת הדם של כלי הדם החוץ-עצביים. חשפו את העצב הסיאטי של חולדות מקבוצת הדמה במשך 3 דקות ללא קשירה (איור 1A,D,E).
  6. השתמש מזרק ללא מחט כדי להחיל טיפה אחת של 0.9% נתרן כלורי פתרון על עצב sciatic כדי לעזור לאפס אותו. תפרו שכבה אחר שכבה, תנו כמות מתאימה של תרופות אנטי דלקתיות כמו אבקת אמוקסיצילין, תפרו את שכבת השריר בתפר אחד, ותפרו את העור עם 2 תפרים (איור 1F).
    הערה: משלב 2.3 עד שלב 2.6, יש לשמור על זרימת איזופלורן של 2%-3% לפיות ולאף של החולדות כדי לשמור על הרדמה.
  7. שמרו על חום הגוף של החולדה וחכו שהיא תתעורר. החזירו את החולדות לחדר הרבייה.

3. התערבות אינטליגנטית בסימולטור מניפולציה של טווינה (איור 2)

הערה: הטיפול החל ביוםהשביעי לאחר הקמת המודל.

  1. התאם את פרמטרי המכשיר לכוח גירוי של 4 N, תדירות גירוי של 60 פעמים לדקה וטמפרטורה של 36 ° C בממשק פעולת המחשב. הכניסו את החולדה למתקן קיבוע החולדות וחשפו את המיקום של נקודות הדיקור של הגפה האחורית (איור 2A, מכונה שפותחה בעצמה, פטנט מס'. ZL 2023 20511277.5)25.
  2. הפעל את המכשיר כדי לבצע את שיטות הלחיצה, המריטה והלישה (טבלה 1). לחצו על נקודות לחיצה, מריטה ולישה שמוצגות על מסך המחשב ברצף של נקודות Yinmen (BL37), Chengshan (BL57) ו-Yanglingquan (GB34) (טבלה 2) בצד המודל של החולדה מקבוצת הטווינא (איור 2B, C)26.
    1. עבור קבוצת הטווינה, בצע התערבות אחת פעם ביום במשך יום אחד, בכוח של 4 N, תדירות של 60 פעמים לדקה, ובסך הכל 9 דקות לנקודה לכל שיטה.
    2. יש לרסן את קבוצות הדמה והמודל למשך 9 דקות, עם אותו מספר פעמים כמו קבוצת הטווינה.

4. מדידה התנהגותית

הערה: לאחר ההתערבות, סף רגישות לקור (CST), סף משיכה מכני (MWT) והשהיית משיכה תרמית (TWL) נבדקו בחמש תת-קבוצות טווינה, קבוצת מודל וקבוצת פעולת דמה, בהתאמה. זמן הבדיקה של קבוצות המודל וההונאה זהה לזה של קבוצת הטווינה (כלומר, 24 שעות).

  1. סף רגישות לקור (CST)
    1. הניחו את החולדה על גלאי כאב חכם עם פלטה קרה ופלטה חמה עם טמפרטורת פני שטח של 4 ± 1 מעלות צלזיוס (לחצו על START > SET), וכסו אותה בכלוב פלסטיק שקוף.
    2. צפו בפעילות הגישוש של החולדות במשך 5 דקות עד שהן התאקלמו בכלוב הפלסטיק השקוף.
    3. שימו לב ותיעדו את מספר הרמות הרגליים בצד הניתוחי של הגפה האחורית במהלך 5 הדקות הבאות.
      הערה: מספר הרמות הרגליים הנגרמות כתוצאה משינויים בפעילות או ביציבה של החולדה אינו נכלל.
  2. סף משיכה מכני (MWT)
    1. הניחו את החולדה על המשטח התחתון כרשת (0.5 ס"מ × 0.5 ס"מ) בקופסת בדיקה למשך 15-30 דקות לפני הבדיקה.
    2. הזיזו את בדיקת הכאב (מסוג EVF 5) למרכז האזור הפלנטרי האחורי הימני של החולדה, הגבירו באופן ליניארי את הלחץ ביד, ותיעדו את הסף המוצג על מסך המכשיר כאשר החולדה מרימה ומלקקת את רגליה. מדדו ברציפות 5 פעמים, עם מרווח מדידה של 10 דקות כל אחת.
  3. השהיית משיכה תרמית (TWL)
    1. הניחו את החולדה בקופסת בדיקה עם משטח תחתון מזכוכית ואפשרו לה להסתגל במשך 15 דקות לפני תחילת הבדיקה.
      הערה: התקופה הסמויה של רפלקס כף הרגל של כיווץ תרמי זוהתה באמצעות מכשיר כאב לגירוי תרמי (מסוג PL200).
    2. הגדרת פרמטרים: זמן הבדיקה המרבי הוא 30 שניות, והעוצמה היא 50%. לחץ על הלחצנים START ו- DIRECTION .
    3. העבר את הגשושית האינפרא אדומה למרכז האזור הפלנטרי האחורי הימני של החולדה והתחל את האיתור.
    4. תעד את ההשהיה של רפלקס נסיגת כף הרגל כאשר החולדה מרימה ומלקקת את רגליה. מדוד את ההשהיה ברציפות 5 פעמים, עם מרווח של 10 דקות בין כל מדידה.

5. אליסה

  1. יש להרדים את החולדה במינון של 35 מ"ל/100 גרם של הידרט כלור 4% להרדמה תוך צפקית בהזרקה לאחר בדיקה התנהגותית. חתכו את העור והשרירים לאורך אמצע בטנה של החולדה כדי לחשוף את איבריה הפנימיים.
  2. השתמש נטל ומחזיק מחט להפרדה טהורה, לזהות את אבי העורקים הבטן, לקחת דם טרי, ולשמור דגימה לבדיקה. השתמשו בצינור הפרדה כדי להפריד את הסרום. קח את דגימת הסרום לזיהוי מיידי, או לארוז אותו בנפרד ולאחסן אותו במקרר ב -80 ° C.
    הערה: לפני הפרידה, יש לאפשר לדגימת הדם להצטבר למשך 30 דקות.
  3. הכינו את נסיוב החולדות לתהליך הבדיקה ואחסנו אותן בטמפרטורת החדר (RT) למשך 30 דקות לפחות.
  4. הגדר בארות ריקות ובארות מדגם סטנדרטיות לבדיקת הדגימה. הוסף סך של 50 μL של הדגימות הסטנדרטיות לצלחת המקושרת לאנזים. הוסף תחילה 40 μL של מדלל ולאחר מכן הוסף 10 μL של דגימה למדגם היטב כדי להיבדק.
    הערה: בעת הוספת דגימות, יש צורך להוסיף אותן לתחתית האנזים המסומן היטב, להבטיח שהן לא נוגעות בדופן הבאר ככל האפשר, ולנער בעדינות ולערבב היטב. הבאר הריקה אינה מכילה דגימות או ריאגנטים המסומנים באנזימים, והשלבים האחרים זהים. הדילול הסופי של המדגם הוא 5 פעמים.
  5. לאחר איטום הצלחת עם סרט איטום, מניחים אותה באינקובטור של 37 מעלות צלזיוס למשך 30 דקות.
  6. מדללים פי 30 מתמיסת הכביסה המרוכזת במים מזוקקים ומניחים בצד.
  7. מוציאים את סרט האיטום, יוצקים את הנוזל מהבאר ומנערים אותו לייבוש. ממלאים כל באר עם נוזל כביסה, לתת לו לעמוד במשך 30 s, ולאחר מכן לשפוך אותו החוצה. חזור על שלב זה 5 פעמים, ולבסוף, לנער אותו יבש.
  8. הוסיפו אבידין עם תווית פרוקסידז של חזרת (100 מיקרוליטר לבאר).
  9. הוסיפו 50 μL של מפתח צבע A לכל באר, ולאחר מכן הוסיפו 50 μL של מפתח הצבע B. נערו וערבבו בעדינות, והניחו בסביבה של 37°C למשך 10 דקות בחושך.
  10. הוסף 50 μL של תמיסת עצירה לכל באר כדי לסיים את התגובה.
    הערה: בשלב זה, הצבע הכחול יהפוך לצהוב.
  11. אפס את הבארות הריקות ומדידת הצפיפות האופטית (ערך OD) של כל באר ברצף באורך גל של 450 ננומטר.

תוצאות

CST: בהשוואה לקבוצת המודל, מספר הרמות הרגליים בקבוצה 6 שעות לאחר טווינא הופחת באופן משמעותי, וההבדל היה מובהק סטטיסטית (P < 0.05). בהשוואה לקבוצת הדמה, מספר הרמות הרגליים בקבוצת המודל גדל באופן משמעותי, וההבדל היה מובהק סטטיסטית (P < 0.05) (טבלה 3, תרשים 3).

MWT: בהשוואה לקבוצת המודל, ה-MWT של כל תת-קבוצה של טווינה היה גבוה משמעותית מזה של קבוצת המודל למעט 18 שעות אחרי טווינה, וה-MWT של 24 שעות אחרי טווינה היה גבוה משמעותית מזה של קבוצת המודל, עם הבדל מובהק סטטיסטית (P < 0.05). בהשוואה לקבוצת ניתוח הדמה, ה-MWT בקבוצת המודל היה נמוך משמעותית, עם הבדל מובהק סטטיסטית (P < 0.01) (טבלה 3, איור 4).

TWL:
בהשוואה לקבוצת המודל, הייתה עלייה משמעותית מיד לאחר טווינה, 6 שעות לאחר טווינה, ו -18 שעות לאחר טווינה, עם הבדל מובהק סטטיסטית. בהשוואה לקבוצת הפעולה המזויפת, קבוצת המודל ירדה באופן משמעותי, עם הבדל מובהק סטטיסטית (P < 0.01) (טבלה 3, איור 5)

אליסה
IL-10: בהשוואה לקבוצת המודל, חלה ירידה משמעותית של 6 שעות ו-24 שעות לאחר הטווינה, עם הבדל מובהק סטטיסטית (P < 0.01) (טבלה 4, איור 6).

TNF-α: בהשוואה לקבוצת המודל, הייתה ירידה משמעותית מיד לאחר tuina (**P < 0.01), 6 שעות לאחר tuina (**P < 0.01), ו-24 שעות לאחר tuina (**P < 0.05), עם הבדל מובהק סטטיסטית (טבלה 4, איור 6)

figure-results-1
איור 1: ביסוס מודל חולדה של CCI מינורי. (A) תפר מעי כרומי (4-0). (ב) הכנת העור. (ג) חתך. (D) חשיפת העצב הסיאטי. (E) תפר מעי כרומי נספג (סוג 4-0) סביב העצב. (F) תפירת שכבת השריר והעור. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.

figure-results-2
איור 2: טיפול בסימולטור מניפולציה אינטליגנטי של טווינה. (A) סימולטור מניפולציה Intelligent Tuina (פטנט מס'. ZL ZL 2023 20511277.5). (B) עמדותיהם של Yinmen (BL37), Chengshan (BL57) ו-Yanglingquan (GB34). (ג) גירוי יינמן (BL37). אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.

figure-results-3
איור 3: תוצאות של סף רגישות לקור (CST) של חולדות בכל קבוצה. *P < 0.05, בהשוואה לקבוצת המודל, #P <0.05, בהשוואה לקבוצת הדמה. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.

figure-results-4
איור 4: תוצאות סף נסיגה מכני (MWT) של חולדות בכל קבוצה. *P <0.05, בהשוואה לקבוצת המודל, #P < 0.05, בהשוואה לקבוצת הדמה. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.

figure-results-5
איור 5: תוצאות של חביון נסיגה תרמית (TWL) של חולדות בכל קבוצה. *P < 0.05, **P < 0.01, בהשוואה לקבוצת המודל; #P <0.05, ##P < 0.01, בהשוואה לקבוצת הדמה. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.

figure-results-6
איור 6: שינויים ברמות IL-10 ו-TNF-α בסרום של חולדות בכל קבוצה (ממוצע ± SD, n = 7), "*P<0.05, **P<0.01, בהשוואה לקבוצת המודל. לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.

שלוש שיטותשיטותסיווגיםפונקציות
לחיצה נקודתיתחימום ופתיחת חסימותחימום מרידיאנים ושחרור בטחונות חסומים
קטיףהרפיהפעולה על תא המטען העצבי וטיפול בחוסר תחושה או כאב בגפיים
לישההרפיההקלה על התכווצויות שרירים

טבלה 1: שלוש שיטות לגירוי.

שלוש נקודות דיקורנקודות דיקורהמרידיאניםהעצביםהשרירים
יינמן (BL37)מרידיאן שלפוחית השתן של כף הרגל-טאי-יאנגגזע עצב סיאטישריר הירך (Biceps femoris)
צ'נגשאן(BL57)עצב טיביאלישריר Gastrocnemius
Yanglingquan(GB34)מרידיאן כיס המרה של כף הרגל-שאויאנגעצב פרוניאלי משותףשרירים טיביאליים קדמיים

טבלה 2: שלוש נקודות דיקור ששימשו במחקר זה.

שאםמודלטווינה
0 שעות6 שעות12 שעות18 שעות24 שעות
CST12.6 ± 2.3825 ± 5.15#19.6 ± 10.9913.2 ± 2.49*16.4 ± 8.4117 ± 5.5719 ± 8.34
MWT69.47 ± 10.3540.63 ± 9.65##44.19 ± 10.7246.58 ± 9.4742.83 ± 11.4164.5 ± 5.5948.33 ± 8.7*
TWL12.06 ± 3.458.16 ± 2.09##12.09 ± 3.86**10.07 ± 2.7*9.44 ± 2.5210.42 ± 2.49**9.72 ± 2.29

טבלה 3: תוצאות CST, MWT ו-TWL של חולדות בכל קבוצה (ממוצע ± SD, n = 7). *P<0.05, **P<0.01, בהשוואה לקבוצת הדגמים; #P<0.05, ##P<0.01, בהשוואה לקבוצת הדמה.

שאםמודלטווינה
0 שעות6 שעות12 שעות18 שעות24 שעות
IL-1055.10 ± 1.37**70.27 ± 6.2267.28 ± 1.2861.41 ± 3.36**67.98 ± 1.8569.03 ± 6.2957.16 ± 1.30**
TNF-α311.52 ± 13.45**339.33 ± 24.50309.47 ± 8.37**309.99 ± 14.95**334.62 ± 21.85319.22 ± 10.38316.24 ± 8.72*

טבלה 4: שינויים ברמות IL-10 ו-TNF-α בסרום של חולדות בכל קבוצה (ממוצע ± SD, n = 7, pg/mL). *P < 0.05, **P < 0.01, בהשוואה למודל הקבוצה (*P < 0.05, **P < 0.01.)

דיון

המחקר השתמש במודל CCI מינורי כדי לדמות pNP הנגרם על ידי פגיעה קלינית בעצב הסיאטי. מודל CCI המינורי כולל דחיסה וריסון מתמשך וכרוני של גזע העצב באמצעות קשירה, מלווה בנפיחות הדרגתית של הליגטורה, וכתוצאה מכך בצקת בתוך העצב הסיאטי ויצירת כאב כרוני יציב תוך 3-5 ימים27,28. במחקר הראשוני, קבוצת המחקר מצאה כי קבוצת המודל המינורית CCI הייתה יציבה יותר מקבוצת המודל הקלאסיביום השביעי לאחר המידול, מה שהופך אותה למתאימה יותר לתכנון ניסויי לטווח קצר. לכן, בחרנו בנקודת זמן זו להתערבות טווינה.

המחקר הקודם אישר כי סימולטור מניפולציה אינטליגנטי tuina (חיה) יכול להקל ביעילות על כאב בחולדות עם פגיעה עצבית סיאטית לאחר 20 מפגשים של טיפול tuina באמצעות "שלוש שיטות ושלוש אקופוינט"29,30,31. יתר על כן, קבוצת המחקר מצאה כי טווינה פעם אחת יכולה להקל ביעילות על תסמיני רגישות יתר לכאב של חולדות CCI קלות, במיוחד היפראלגזיה תרמית13. המחקר מאמץ את שיטות הלחיצה, המריטה והלישה כשלוש שיטות הטיפול. שיטת לחיצה נקודתית היא טכניקת חימום ושחרור חסימה שיש לה את הפונקציה של חימום מרידיאנים ושחרור בטחונות חוסמים. שיטת המריטה היא טכניקת הרפיה הפועלת על גזע העצב ויכולה לטפל בחוסר תחושה או כאב בגפיים. שיטת הלישה היא טכניקת הרפיה שיכולה להקל על התכווצויות שרירים, להעלים עייפות ולהקל על כאבים באזור הפגוע (טבלה 1). המחקר בוחר את Yinmen (BL37), Chengshan (BL57) ו-Yanglingquan (GB34) כשלוש נקודות הדיקור לטיפול (טבלה 2). על פי עקרון בחירת נקודות הדיקור לאורך מרידיאנים ובאופן מקומי בדיקור ומוקסיביסטיה, שלוש נקודות דיקור שייכות למרידיאן שלפוחית השתן של כף הרגל-טאייאנג ולמרידיאן כיס המרה של כף הרגל-שאויאנג. על פי לוקליזציה אנטומית של העצבים, Yinmen (BL37) ממוקם על העצב הסיאטי וענפיו, Chengshan (BL57) ממוקם על העצב הטיביאלי, ו- Yanglingquan (GB34) ממוקם על העצב הפרונאלי המשותף. על פי מיקום השריר האנטומי, שלוש נקודות הדיקור ממוקמות סביב שריר הירך הדו-ראשי, שריר הגסטרוקנמיוס ושרירי הטיביה הקדמיים (טבלה 2). לכן, באמצעות התערבות של שלוש שיטות ושלוש נקודות דיקור, ניתן לגרות את האזורים הרלוונטיים של אקופוינט-עצב-שריר. במחקר זה, לאחר יצירת כאב כרוני יציב והתערבות אחת עם טווינה, זוהו שינויים התנהגותיים בכאב, מה שווידא עוד יותר כי לטווינה יש אפקט משכך כאבים מיידי ויש לו נקודות זמן שונות של משמעות טיפולית עבור קולטני פציעה שונים, מה שמספק תמיכה טיפולית לשלב הבא בחקר מנגנון התחלת שיכוך כאבים של טווינה.

המחקר השתמש ב-CST, MWT ו-TWL כאינדיקטורים כדי לחקור את היעילות של טווינה עבור תחושות פציעה שונות. הביטויים הקליניים של כאב המושרה ב- pNP כוללים בעיקר היפראלגזיה ואלודיניה, כלומר, כאב המושרה על ידי גירוי קר וחם וכאב מכני המושרה על ידי מישוש4. נכון לעכשיו, מדדי המחקר ההתנהגותיים הכמותיים הקלאסיים עבור שתי תחושות כאב אלה הם CST, MWT ו- TWL. בבדיקת CST, מבחן הצלחת הקרה, בודק הכאב החכם ZH-6C של פלטות קרות וחמות המשמש בניסוי זה, הוא אובייקטיבי יחסית, פחות מושפע מגורמים סביבתיים סביבתיים, יש לו טמפרטורה קבועה, ויש לו דיוק גבוה32,33. במחקר בסיסי, חוטי פון פריי משמשים בדרך כלל להערכת MWT, שהוא אחד המדדים הקלאסיים להערכת כאב נוירופתי. הוא מכוון בעיקר לכאבי דיקור הנגרמים על ידי גירוי מכני כדי להעריך כאב מכני המושרה על ידי מישוש במכרסמים34,35. בדיקת Hargreaves משתמשת בממריץ כאב תרמי כדי לזהות ולהעריך את התגובה של מכרסמים לרגישות לכאב תרמי ומשמשת להערכת התאוששות של רגישות לכאב או תגובת כאב תרמית לאחר פגיעה עצבית כדי לבחון אם לכפותיו האחוריות של החיה יש תגובת התכווצות עקב חום. המכשיר מזהה את תנועת הכפות האחוריות36 של החיה, והבקר יכבה אוטומטית את טיימר עצירת האינפרא אדום34, הידוע בשם TWL. ניסויים מראים שהרגישות של חולדות מודל CCI מינוריות ל-TWL היא אופטימלית38. לכן, שיטת המחקר הכמותית להתנהגותן של חולדות מודל CCI מינוריות הפעם היא להשתמש בניסוי צלחת קרה, מכשיר דקירה מכני אלקטרוני ומנגנון דקירה תרמי כדי לזהות.

נקודות הזמן המשמעותיות של השפעות מרפא על תחושות nociceptive שונות לאחר התערבות מוקדמת tuina הם שונים. נכון לעכשיו, מחקר ראשוני נערך על היעילות הקלינית והמנגנון של שיכוך כאבים tuina. המחקר הקודם שלנו התמקד בעיקר במנגנון משכך כאבים לאחר מספר מסוים של טווינה. בשנתיים האחרונות נערך מחקר על מנגנון משככי הכאבים בשלב הראשוני של טווינה כדי לחקור כיצד מתחילים שיכוך כאבים טווינה. במחקר זה, "שלוש שיטות ושלוש נקודות דיקור" שימשו להתערבות בחולדות מודל CCI מינוריות פעם אחת. לאחר מכן נבחרו 5 נקודות זמן לזיהוי CST, MWT ו-TWL כדי לבחון את השינויים בטמפרטורה ובתחושת המישוש המכנית של חולדות מודל CCI קלות. מחקר זה השתמש ב- ELISA כדי לזהות שינויים ברמות IL-10 ו- TNF-α בסרום של חולדות לאחר בדיקות התנהגותיות. התוצאות הראו כי לאחר התערבות אחת עם טווינה, בהשוואה לקבוצת המודל, שניהם השתפרו באופן מיידי. זה שוב אישר את תוצאות המחקר הקודם כי טווינה היתה השפעה משכך כאבים מיידי. עם זאת, עבור סוגים שונים של תחושות כאב, נקודות הזמן שבהן אפקט משכך כאבים הוא משמעותי אינם זהים. במונחים של CST, הייתה מובהקות סטטיסטית 6 שעות לאחר tuina; במונחים של MWT, הייתה מובהקות סטטיסטית 24 שעות לאחר tuina; במונחים של TWL, הייתה מובהקות סטטיסטית משמעותית 6 שעות אחרי tuina, ומובהקות סטטיסטית משמעותית מיד ו-18 שעות אחרי tuina; במונחים של רמת IL-10 בסרום, הייתה ירידה משמעותית 6 שעות לאחר tuina, ו 24 שעות לאחר tuina, עם הבדל מובהק סטטיסטית. מבחינת רמת TNF-α בסרום, הייתה ירידה משמעותית מיד לאחר טווינה, 6 שעות לאחר טווינה ו-24 שעות לאחר טווינה, עם הבדל מובהק סטטיסטית. הוא מצביע על כך שבעוד שההשפעה משככת הכאבים של טווינה יכולה להימשך, קיים עיכוב משמעותי בנקודת הזמן של יעילות הכאב המושרה על ידי גירוי קר וכאב מכני הנגרם על ידי מישוש, והוא יעיל באופן מיידי ובעל יעילות משמעותית ומתמשכת יותר לכאב הנגרם על ידי גירוי תרמי. המעבדה שלנו ממשיכה לחקור את השינויים בחלבונים ובגנים הקשורים לחלבונים ולגנים בעלי פוטנציאל קולטן חולף (TRP) הקשורים לרגישות לקור, חום ומכניקה, כמו גם גורמים דלקתיים אחרים כגון TGF-β ו- IL-6, כדי לחקור עוד יותר את מנגנון החניכה המשכך כאבים של טווינה.

לסיכום, בהתבסס על תוצאות מחקר זה, ניתן להסיק כי נקודות הזמן שבהן החלבונים או המסלולים המושפעים על ידי tuina עשויים לתפקד עשויים להיות שונים, וכתוצאה מכך נקודות זמן שונות עבור השפעות משככי כאבים משמעותיים. מחקר מעמיק נוסף נדרש כדי לחקור את מנגנון החניכה של שיכוך כאבים tuina ולספק בסיס למחקר יעילות קלינית של tuina.

גילויים

לא מוצהרים ניגודי עניינים, כספיים או אחרים, על ידי המחברים.

תודות

המחברים קיבלו מימון למחקר, כתיבה ופרסום של מאמר זה מהקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (מס' 82074573 ו-82274675) ומהקרן למדעי הטבע בבייג'ינג (מס' 7232278).

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
מכונת הרדמהRuiwode Life Technology Co., Ltd., שנזן, סיןR500ציוד הקשור להרדמה נשימתית של בעלי חיים
תפר מעיים כרומישאנדונג בודה מוצרים רפואיים ושות', בע"מ, סיןBD210903תפר כירורגי נספג העשוי בעיקר מחלבון קולגן המעובד מהמעיים של עזים צעירות ובריאות
מכשיר אלקטרוני פון פרייביוסב, ארה"בBIO-EVF5מכשיר לאיתור סף נסיגה מכני
גלאי כאב אינטליגנטי של פלטה קרה וחמהAnhui Zhenghua Biological Instrument Equipment Co., Ltd, סין.ZH-6Cמכשיר לזיהוי סף רגישות לקור
IsofluraneRuiwode Life Technology Co., Ltd., שנזן, סיןR510-22-10הרדמה
קורא מיקרו-פלטות באורך גל מלאMolecular Devices (Shanghai) Co., Ltd.SpectraMax M2מכשיר לזיהוי צפיפות אופטית (OD)
מכשיר לשיכוך כאבים תרמיChengdu Techman Software Co., Ltd., סיןPL-200מכשיר לזיהוי חביון נסיגה תרמית
חומר רב תכליתי

מקורות

  1. IASP taxonomy. ISAP. , Available from: https://www.iasp-pain.org/resources/terminology/#.2022 (2022).
  2. Baron, R., Binder, A., Wasner, G. Neuropathic pain: diagnosis, pathophysiological mechanisms, and treatment. Lancet Neurol. 9 (8), 807-819 (2010).
  3. Colloca, L., et al. Neuropathic pain. Nat Rev Dis Primers. 3, 17002(2017).
  4. Liu, Z., et al. A review on the mechanism of tuina promoting the recovery of peripheral nerve injury. Evid Based Complement Alternat Med. 2021, 6652099(2021).
  5. Scholz, J., et al. The IASP classification of chronic pain for ICD-11: chronic neuropathic pain. Pain. 160 (1), 53-59 (2019).
  6. Finnerup, N. B., et al. Pharmacotherapy for neuropathic pain in adults: a systematic review and meta-analysis. Lancet Neurol. 14 (2), 162-173 (2015).
  7. Field, T. Massage therapy research review. Complement. Ther Clin Pract. 24, 19-31 (2016).
  8. Gok Metin, Z., et al. Aromatherapy massage for neuropathic pain and quality of life in diabetic patients. J Nurs Scholarsh. 49, 379-388 (2017).
  9. Izgu, N., et al. Effect of aromatherapy massage on chemotherapy-induced peripheral neuropathic pain and fatigue in patients receiving oxaliplatin: An open label quasi-randomized controlled pilot study. Cancer Nurs. 42, 139-147 (2019).
  10. Li, Y., et al. Mild mechanic stimulate on acupoints regulation of CGRP-positive cells and microglia morphology in spinal cord of sciatic nerve injured rats. Front Integr Neurosci. 13, 58(2019).
  11. Liu, Z. F., et al. Tuina for peripherally-induced neuropathic pain: A review of analgesic mechanism. Front Neurosci. 16, 1096734(2022).
  12. Lv, T., et al. Using RNA-seq to explore the repair mechanism of the three methods and three-acupoint technique on DRGs in sciatic nerve injured rats. Pain Res Manag. 2020, 7531409(2020).
  13. Xing, F., et al. MZF1 in the dorsal root ganglia contributes to the development and maintenance of neuropathic pain via regulation of TRPV1. Neural Plast. 2019, 2782417(2019).
  14. Cohen, S. P., Mao, J. Neuropathic pain: mechanisms and their clinical implications. BMJ. 348, 7656(2014).
  15. Tao, Y., et al. Effect of Bo'fa method on the expression of IL-1β in peripheral serum and 5-HT2A in spinal cord of CCI model rats. Global Traditional Chinese Medicine. 10, 905-909 (2017).
  16. Yang, J., et al. Study on curative effect of Duhuo Jisheng decoction combined with Tuina in patients with lumbar disc herniation and changes of TXB2, TNF-α and IL-1β. Chin Arch Tradit Chin Med. 38, 44-46 (2020).
  17. Yao, C., et al. Effects of acupressure at 'Shenshu' (BL 23)on lumbar intervertebral disc degeneration and related pain in aging rats. Chin J Tradit Chin Med Pharm. 37, 4360-4365 (2022).
  18. Wang, H., et al. Exploring the mechanism of immediate analgesic effect of 1-time tuina intervention in minor chronic constriction injury rats using RNA-seq. Front Neurosci. 16, 1007432(2022).
  19. Yao, C., et al. Exploring the mechanism of tuina-induced central analgesia in rats with lumbar disc herniation based on the p38MAPK signaling pathway. Chin J Tradit Chin Med Pharm. 38 (07), 3348-3352 (2023).
  20. Li, P. Study on the effects of modified Chuanqianghuo Decoction combined with tuina and physiotherapy on shoulder joint function and inflammation in patients with shoulder joint pain. New Chinese Medicine. 54 (13), 93-97 (2022).
  21. Ding, C., et al. Clinical efficacy of acupuncture and moxibustion, tuina and external application of traditional Chinese medicine on lumbar disc herniation and serum TXB2, IL-1β, Comparison of IL-10 levels. Advances in Modern Biomedicine. 21 (14), 2730-2734 (2021).
  22. Bennett, G. J., Xie, Y. K. A peripheral mononeuropathy in rat that produces disorders of pain sensation like those seen in man. Pain. 33, 87-107 (1988).
  23. Grace, P. M., et al. A novel animal model of graded neuropathic pain: Utility to investigate mechanisms of population heterogeneity. J Neurosci Methods. 193, 47-53 (2010).
  24. Wang, H., et al. Comparison of the characteristics of minor and classic CCI models. J Chin J Comp Med. 32 (10), 1-7 (2022).
  25. Zhang, Y., et al. An intelligent massage and tuina technique simulator. , Beijing. CN219398169U,19393681 (2023).
  26. Jia, D. Effects of three methods and three points stimulation on sensory function in rats with sciatic nerve injury. , Available from: https://kns.cnki.net (2017).
  27. Grace, P. M., et al. Adoptive transfer of peripheral immune cells potentiates allodynia in a graded chronic constriction injury model of neuropathic pain. Brain Behav Immun. 25 (3), 503-513 (2011).
  28. MacDonald, D. I., et al. Silent cold-sensing neurons contribute to cold allodynia in neuropathic. Brain. 144 (6), 1711-1726 (2021).
  29. Pan, F., et al. Chinese tuina downregulates the elevated levels of tissue plasminogen activator in sciatic nerve injured Sprague-Dawley rats. Chinese J Integr Med. 23 (8), 617-624 (2017).
  30. Lv, T., et al. An investigation into the rehabilitative mechanism of tuina in the treatment of sciatic nerve injury. Evid Based Complement Alternat Med. 2020, 5859298(2020).
  31. Lv, T., et al. Applying RNA sequencing technology to explore repair mechanism of Tuina on gastrocnemius muscle in sciatic nerve injury rats. Chin Med J. 135 (19), 2378-2379 (2022).
  32. Ruan, Y., et al. An effective and concise device for detecting cold allodynia in mice. Sci Rep. 8 (1), 14002(2018).
  33. Kim, S. O., Kim, H. J. Berberine ameliorates cold and mechanical allodynia in a rat model of diabetic neuropathy. J Med Food. 16 (6), 511-517 (2013).
  34. Deuis, J. R., Dvorakova, L. S., Vetter, I. Methods used to evaluate pain behaviors in rodents. Front Mol Neurosci. 10, 284(2017).
  35. Ruscheweyh, R., et al. Long-term potentiation in spinal nociceptive pathways as a novel target for pain therapy. Mol Pain. 7, 20(2011).
  36. Hargreaves, K., et al. A new and sensitive method for measuring thermal nociception in cutaneous hyperalgesia. Pain. 32 (1), 77-88 (1988).
  37. Cheah, M., et al. Assesment of thermal pain sensation in rats and mice using the hargreaves test. Bio Protoc. 7 (16), 2506(2017).
  38. Challa, S. R. Surgical animal models of neuropathic pain: pros and cons. Int J Neurosci. 125 (3), 170-174 (2015).

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

pijn
מאפייני שינויי כאב בחולדות עם פגיעה עצבית תוך 24 שעות לאחר התערבות חד פעמית בטווינה
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.