הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

מערכת תרבית אוטומטית לשמירה והתמיינות של תאי גזע פלוריפוטנטיים המושרים על ידי בני אדם

2.5K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/65672

⸱

26 בינואר 2024

 ,  , 
1Innovative Regenerative Medicine, Kansai Medical University Graduate School of Medicine

במאמר זה

סיכום

כאן, אנו מציגים פרוטוקול למערכת תרבית תאים אוטומטית. מערכת תרבית אוטומטית זו מפחיתה את העבודה ומועילה למשתמשים, כולל חוקרים שאינם בקיאים בטיפול בתאי גזע פלוריפוטנטיים מושרים (iPS), החל מתחזוקה של תאי iPS ועד התמיינות לסוגים שונים של תאים.

תקציר

תאי גזע פלוריפוטנטיים המושרים על ידי בני אדם (hiPSCs) עם יכולת אינסופית של התרבות עצמית צפויים להיות בעלי יישומים בתחומים רבים, כולל הבהרה של פתולוגיות של מחלות נדירות, פיתוח תרופות חדשות ורפואה רגנרטיבית שמטרתה לשקם איברים פגועים. למרות זאת, היישום החברתי של hiPSCs עדיין מוגבל. זאת, בין היתר, בשל הקושי לשחזר את הבידול בתרבות, אפילו עם ידע מתקדם וכישורים טכניים מתוחכמים, בשל הרגישות הגבוהה של תאי גזע פלוריפוטנטיים מושרים לשינויים סביבתיים זעירים. היישום של מערכת תרבות אוטומטית יכול לפתור בעיה זו. ניתן לצפות לניסויים בעלי יכולת שחזור גבוהה שאינה תלויה במיומנותו של החוקר על פי נוהל משותף בין מכונים שונים. למרות שמספר מערכות תרבות אוטומטיות המסוגלות לשמור על תרביות iPSC ולגרום לבידול פותחו בעבר, מערכות אלה הן כבדות, גדולות ויקרות מכיוון שהן עושות שימוש בזרועות רובוטיות אנושיות ורב-מפרקיות. כדי לשפר את הבעיות הנ"ל, פיתחנו מערכת חדשה באמצעות מערכת פשוטה של מסילות הזזה על ציר x-y-z, המאפשרת לה להיות קומפקטית יותר, קלה יותר וזולה יותר. יתר על כן, המשתמש יכול בקלות לשנות פרמטרים במערכת החדשה כדי לפתח משימות טיפול חדשות. לאחר קביעת משימה, כל שעל המשתמש לעשות הוא להכין את ה- iPSC, לספק מראש את הריאגנטים והחומרים המתכלים הדרושים למשימה הרצויה, לבחור את מספר המשימה ולציין את השעה. אישרנו כי המערכת יכולה לשמור על תאי גזע פלוריפוטנטיים מושרים במצב בלתי ממוין באמצעות מספר מעברים ללא תאי הזנה ולהתמיין לסוגי תאים שונים, כולל קרדיומיוציטים, הפטוציטים, אבות עצביים וקרטינוציטים. המערכת תאפשר ניסויים בעלי יכולת שחזור גבוהה בין מוסדות ללא צורך בחוקרים מיומנים ותקל על יישום חברתי של hiPSCs במגוון רחב יותר של תחומי מחקר על ידי הפחתת המכשולים לערכים חדשים.

מבוא

מאמר זה נועד לספק נהלי טיפול בפועל ומפורטים עבור מערכת תרבית אוטומטית עבור תאי גזע פלוריפוטנטיים המושרים על ידי בני אדם (iPSC), אשר ייצרנו על ידי שיתוף פעולה עם חברה, ולהציג תוצאות מייצגות.

מאז פרסום המאמר בשנת 2007, iPSC מושך תשומת לב בכל רחבי העולם1. בשל התכונה הגדולה ביותר של היכולת להתמיין לכל סוג של תא סומטי, הוא צפוי להיות מיושם בתחומים שונים כגון רפואה רגנרטיבית, להבהיר את הגורמים למחלות עקשניות, ופיתוח תרופות טיפוליות חדשות 2,3. בנוסף, שימוש בתאים סומטיים שמקורם בתאי גזע פלוריפוטנטיים מושרים בבני אדם עשוי להפחית ניסויים בבעלי חיים, הכפופים למגבלות אתיות משמעותיות. למרות שתאי גזע פלוריפוטנטיים מושרים הומוגניים רבים נדרשים כל הזמן לחקור שיטות חדשות עם iPSCs, זה מייגע מדי לנהל אותם. יתר על כן, הטיפול ב- iPSC קשה בגלל רגישותו הגבוהה, אפילו לשינויים תרבותיים וסביבתיים עדינים.

כדי לפתור בעיה זו, מערכות תרבות אוטומטיות צפויות לבצע משימות במקום בני אדם. קבוצות מסוימות פיתחו כמה מערכות אוטומטיות לתרבית תאי גזע פלוריפוטנטיות אנושיות לתחזוקה והתמיינות של תאים ופרסמו את הישגיהן 4,5,6. מערכות אלה מציידות זרועות רובוטיות רב-מפרקיות. לזרועות רובוטיות יש לא רק ערך בכך שהן מחקות מאוד תנועות זרוע אנושיות, אלא גם ראויות בכך שהן דורשות עלויות גבוהות יותר עבור הזרוע(ות), אריזות מערכת גדולות וכבדות יותר, ומאמצי חינוך גוזלי זמן על ידי המהנדסים כדי להשיג את התנועות המכוונות 7,8. על מנת להקל על החדרת המנגנון למתקני מחקר נוספים בנקודות של צריכת משאבים כלכליים, חלל ומשאבי אנוש, פיתחנו מערכת תרבית אוטומטית חדשנית לתחזוקה והתמיינות של iPSC לסוגי תאים שונים9.

הרציונל שלנו למערכת החדשה היה לאמץ מערכת מסילות ציר X-Y-Z במקום זרועות רובוטיות רב-מפרקיות9. כדי להחליף את הפונקציות המורכבות דמויות היד של זרועות רובוטיות, יישמנו רעיון חדש למערכת זו, אשר יכול לשנות באופן אוטומטי שלושה סוגים של קצוות זרוע פונקציונליים ספציפיים. כאן, אנו גם מציינים כיצד משתמשים יכולים בקלות לבצע לוחות זמנים של משימות עם הזמנות פשוטות בתוכנה בגלל היעדר דרישות לתרומות המהנדסים לאורך כל התהליך.

אחת ממערכות התרבית הרובוטיות הדגימה יצירת גופים עובריים באמצעות לוחות 96 בארות כצברי תאים תלת-ממדיים להתמיינות4. המערכת המדווחת כאן אינה יכולה להתמודד עם לוחות 96 בארות. אחד מהם השיג את הציון הנוכחי של תנאי ייצור נאותים (cGMP) באמצעות קו תאים, למרות שזה לא היה תא גזע פלוריפוטנטי אנושי5. מערכת התרביות האוטומטיות המפורטת כאן פותחה כעת במטרה ספציפית לסייע בניסויי מעבדה (איור 1). עם זאת, יש לו מספיק מערכות כדי לשמור על רמות נקיות שוות ערך לארון בטיחות ברמה IV.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

ועדת האתיקה של האוניברסיטה הרפואית של קנסאי אישרה את הייצור והשימוש בתאי גזע פלוריפוטנטיים פלוריפוטנטיים בריאים שמקורם במתנדבים בשם KMUR001 (אישור מס' 2020197). התורם, שגויס בגלוי, סיפק הסכמה רשמית מדעת והסכים לשימוש המדעי בתאים.

הערה: הממשק הנוכחי (התוכנה המיוחדת בשם "ccssHMI" הפועלת תחת מערכת ההפעלה Windows XP) הוא מסך הפעולה הבסיסי. תחת הממשק הנ"ל, סדרה של כרטיסיות מסודרות, המאפשר למשתמשים ליזום פעולות שונות.

1. פעולות טעינה

  1. לחץ על טען כפתור במסך העליון של התוכנה. לחץ על הלחצן Loading Preparation Start .
  2. הניחו את הצלחות או הצלחות שיוכנסו למכשיר במקומן במנגנון.
    הערה: המידע הדרוש לזיהוי צלחת צריך להיות כתוב על כל מכסה.
  3. סגור ידנית את חלון ההזזה הקדמי ולחץ על לחצן אישור הבטיחות המכאני.
  4. בחר את הסוג והכמות של הצלחות או הצלחות בתוכנה.
  5. לחץ על הלחצן טען הכנה הושלמה . לחץ על לחצן 'טען התחל '.
  6. לאחר העלאת צלחת למערכת, בחר את המידע על המנה, כגון עם תאי iPS או ללא תאי iPS, בתוכנה. רשום הערות על כל מנה בתוכנה.
  7. לחץ על לחצן רישום בסוף כדי להשלים את פעולת הטעינה.

2. פעולת פריקה

  1. לחץ על הלחצן Unload במסך העליון של התוכנה. בחר את המנות שברצונך להסיר בתוכנה.
  2. לאחר בחירת המנה, לחץ על הלחצן Unloading Preparation Start . לחץ על לחצן התחל פריקה .
  3. לאחר העברת הצלחות מהאינקובטור לשולחן העבודה במערכת, יש ללחוץ על כפתור הסרת הכלים .
  4. פתחו ידנית את חלון ההזזה הקדמי והוציאו את הכלים. סגור ידנית את חלון ההזזה הקדמי ולחץ על לחצן אישור הבטיחות המכאני.

3. תוספת של חומרים מתכלים: פיפטה, צינורות, בינוני

  1. כדי לחדש חומרים מתכלים כגון פיפטה, צינורות ומדיום, לחץ/י על הכפתור ״חומרים מתכלים״ במסך העליון של התוכנה ולאחר מכן בחר/י את הפריט לחידוש.
    1. פיפטות
      1. לחץ על לחצן פיפטה . בחר בלחצן חדש .
      2. בחר ארון תקשורת שהמשתמש רוצה לחדש בתוכנה. לחץ על הלחצן Relenish Start .
      3. לאחר אישור כי המכסה של אזור אחסון פיפטה על שולחן העבודה נפתח, לפתוח ידנית את חלון הזזה הקדמי ולחדש את פיפטות לפי הצורך.
      4. סגור ידנית את חלון ההזזה הקדמי ולחץ על לחצן אישור הבטיחות המכאני. לחץ על הלחצן חדש הושלם .
      5. לחץ/י על הכפתור ״ הגדרת חידוש ״ והזן/י את פרטי החידוש ולאחר מכן לחץ/י על הכפתור ״רישום ״.
      6. לחץ על הלחצן חדש הושלם .
    2. צינורות
      1. לחץ על הלחצן Tube . בחר בלחצן חדש .
      2. בחר ארון תקשורת שהמשתמש רוצה לחדש בתוכנה. לחץ על הלחצן Relenish Start .
      3. לאחר אישור שהמדף עבר לחלק העליון, לחץ על הלחצן חדש צינור .
      4. פתח ידנית את חלון ההזזה הקדמי וחדש את הצינורות לפי הצורך.
      5. סגור ידנית את חלון ההזזה הקדמי ולחץ על לחצן אישור הבטיחות המכאני.
      6. לחץ על הלחצן חדש הושלם .
      7. לחץ/י על הכפתור ״ הגדרת חידוש ״ והזן/י את פרטי החידוש ולאחר מכן לחץ/י על הכפתור ״רישום ״. לחץ על לחצן סגור .
    3. בינוני
      1. לחץ על הלחצן בינוני . בחר בלחצן חדש בתוכנה.
      2. בחר ארון תקשורת אחד מתוך שלושה שהמשתמשים רוצים לחדש. לחץ על הלחצן Relenish Start .
      3. לאחר אישור כי המכסה של אזור האחסון הבינוני נפתח, פתח ידנית את חלון ההזזה הקדמי וחדש את המדיום.
      4. סגור ידנית את חלון ההזזה הקדמי ולחץ על לחצן אישור הבטיחות המכאני.
      5. לחץ על הלחצן חדש הושלם .
      6. לחץ על הלחצן חדש והזן את המידע עבור המדיום, כולל השם והכמות של המדיום. הזן הערות נוספות במידת הצורך.
      7. לחץ על הלחצן הרשמה .
      8. לחץ על לחצן סגור .

4. בחירת משימות

  1. לחץ על לחצן משימה במסך העליון של התוכנה.
  2. בחר בלחצן הגדרת משימה . בחר את המשימה הרצויה מרשימת המשימות ולחץ על הלחצן השלב הבא .
  3. ציין את התאריך והשעה לביצוע המשימה ולאחר מכן לחץ על הלחצן הרשמה . בחר צלחת או צלחת לביצוע המשימה ולאחר מכן לחץ על לחצן הרשמה .
  4. לאחר אישור מחדש של המשימה שנבחרה, לחץ על לחצן הרשמה . ודא שהמשימה נרשמה במסך הבא.
  5. במידת הצורך, הגדר את המשימה הבאה באותו אופן.
  6. לחץ על לחצן התחל בסוף. לאחר מכן, המשימה תתחיל באופן אוטומטי בתאריך ובשעה שצוינו.
    הערה: מיד לאחר סיום כל משימה, אורות UV (הממוקמים משני צידי מכסה המנוע) נדלקים באופן אוטומטי, ולאחר 5-30 דקות, בהתאם להגדרת העזר, הם כבויים כדי לשמור על מכסה המנוע במצב אספטי. כדי לעצור, משתמשים יכולים ללחוץ על לחצן התחל .
  7. אם משתמשים רוצים לבטל משימה מתוזמנת מראש, לחץ על לחצן עצור .
  8. לאחר בחירת המשימה לביטול, לחץ על לחצן ערוך משימה .
  9. לחץ על לחצן ביטול משימה . אשר שהמשימה נמחקה במסך הבא.

5. בדוק תמונות סלולריות

  1. כל משימה כוללת תצפיות מיקרוסקופיות (צילום) לפני ואחרי עבודת המשימה. התבונן בהתקדמות תרבית התאים באופן צילומי על ידי שילוב משימת צילום מיקרוסקופית לפני או אחרי כל משימה.
  2. בחר תוכניות משימה מוגדרות מראש, כולל בחירת מיקומים ספציפיים מרובים של הצלחת או צלחת הבאר מראש לתצפית בנקודה קבועה כדי לפקח על אותו מיקום לאורך זמן.

6. מעבר ובידול

  1. בצע את השלבים בסעיפים 1-5 והגדר את המערכת האוטומטית לתרביות תאים לביצוע העברה והתמיינות. הגדרות המכשיר למעבר, התמיינות קרדיומיוציטים, התמיינות הפטוציטים, התמיינות תאים קודמנים עצביים והתמיינות קרטינוציטים מוצגות בטבלה 1, טבלה 2, טבלה 3, טבלה 4 וטבלה 5, בהתאמה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

תחזוקה של תאי גזע פלוריפוטנטיים המושרים על ידי אדם
השתמשנו בשלושה קווי hPSC (RIKEN-2F, 253G1 ו-KMUR001). ביצענו אופטימיזציה של פרוטוקול התחזוקה באמצעות ניסויים ידניים יומיים ואופטימיזציה נוספת של התוכניות המפורטות באמצעות שבעת הניסויים המקדימים שבוצעו על ידי המערכת. לדוגמה, לחצי גזירה הנגרמים על ידי מהירויות הנוזל של זרימת היריקה מפיפטים שונים המטופלים על ידי בני אדם והמערכת שונים למדי; לכן, ביצענו אופטימיזציה של משך הזמן של העיכול האנזימטי ומספר הפיפטינג לפיזור תאים על ידי המערכת.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

שלב קריטי בפרוטוקול הוא שאם משתמש מוצא תקלות כלשהן, לחץ על לחצן ביטול, עצירה או איפוס בכל עת והתחל מחדש מהצעד הראשון. התוכנה יכולה למנוע טעויות אנוש, כולל הזמנה כפולה, פתיחת דלתות בזמן שמשימות המערכת פעילות, וחוסר חידוש. נקודה קריטית נוספת להתמיינות מוצלחת ויעילה לתא הסומטי הרצוי היא בחירה נכונה של קווי תאי גזע פלוריפוטנטיים מכיוון שלכל תא גזע פלוריפוטנטי יש הטיה בלתי נשלטת בתכונות ההתמיינות שלו14,15.

מערכת תרבית אוטומטית זו עבור תאי ג...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

למחבר אין מה לחשוף.

תודות

מחקר זה נתמך על ידי מענק מהמרכז לקידום עסקים חדשים, Panasonic Production Engineering Co., Ltd., אוסקה, יפן.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
0.15% שבר אלבומין בסרום בקר VFuji Film Wako Chemical Inc., מיאזאקי, יפן9048-46-8
1% GlutaMAXThermo Fisher Scientific35050061
צלחות פלסטיק 10 ס"מ Corning Inc., NY, ארצות הברית430167
253G1RKEN Bioresource Research CenterHPS0002
2-mercaptoethanolThermo Fisher Scientific21985023
Actin  עכברAbcamab9465
Activin A Nacali Tesque18585-81
אדניןתרמו פישר מדעיA14906.30
אלבומין  ארנבDakoA0001
חומצה רטינואית All-transFuji Film Wako Chemical Inc. 186-01114
מערכת תרבית אוטומטיתPanasonic
B-27 תוסףתרמו פישר סיינטיפיק17504044
bFGFפוג'י פילם וואקו כימיקלים בע"מ 062-06661
BMP4 Thermo Fisher ScientificPHC9531
אלבומין סרום בקרMerck810037
CHIR-99021 MCE, ניו ג'רזי, ארצות הברית #HY-10182252917-06-9
מוגדר Keratinocyte-SFMThermo Fisher Scientific10744019מדיום קרטינוציטים אנושי
דקסמתזוןMerck266785
Dihexa TRC, אונטריו, קנדה13071-60-8rac-1,2-Dihexadecylglycerol
חד פעמי המוציטומטרCountessTM שקופיות תא ספירת תאים, Thermo Fisher ScientificC10228
DorsomorphinThermo Fisher Scientific1219168-18-9
Dulbecco' s שונה Eagle medium/F12 פוג'י פילם וואקו כימיקלים בע"מ
EGFFuji Film Wako Chemical Inc. 053-07751
חיוני 8 תרמו פישר סיינטיפיקA1517001מדיום תאי גזע פלוריפוטנטיים אנושיים
סרום בקר עוברי Biowest, FL, ארצות הבריתS140T
FGF-basic נקלאי טסק בע"מ19155-07
פורסקוליןתרמו פישר מדעיJ63292.
גלוטמיןתרמו פישר סיינטיפיק25030081תוסף גלוטמין
עז IgG (H + L) AlexaFluo546Thermo ScientificA11056
HNF-4A  עזסנטקרוז6556
הידרוקורטיזוןתרמו פישר סיינטיפיקA16292.06
הידרוקורטיזון 21-המיסוקסינטMerckH2882
iMatrix511 משי Nippi Inc., טוקיו, יפן892 021מטריצת תרבית תאים
אינסולין-טרנספרין-סלניוםתרמו פישר 41400045
מדעי קרטין 1  עכברסנטקרוז376224
קרטין 10  ארנבBioLegend19054
KMUR001האוניברסיטה הרפואית קנסאי iPSCs שמקורם במטופל 
תחליף סרום נוקאאוטThermo Fisher Scientific10828010
חומצה L-אסקורבית 2-פוספט A8960, MerckA8960
לייבוביץ' s L-15 בינוני פוג'י פילם וואקו כימיקלים בע"מ128-06075
מטריג'לקורנינג בע"מ
עכבר IgG (H + L) AlexaFluo488Thermo ScientificA21202
N-2 תוסףתרמו פישר סיינטיפיק17502048
עכבר נסטיןסנטקרוז23927
מדיום נוירובסאליתרמו פישר 21103049
מדעי נוירופילמנט  ארנבChemiconAB1987
NeutristemSartrius AG, Gö ttingen, גרמניה05-100-1Aמדיום תרבית תאים 
אוקטובר 3/4  עכברBD611202
PBS(-)Nacalai Tesque Inc., קיוטו, יפן14249-24
ארנב IgG(H+L) AlexaFluo488Thermo ScientificA21206
ארנב IgG(H+L) AlexaFluo546Thermo ScientificA10040
אלבומין אנושי רקומביננטי A0237, Merck, דרמשטאדט, גרמניהA9731
מעכב רו קינאזה, Y-27632 Sellec Inc., טוקיו, יפן129830-38-2
RIKEN 2FRKEN Bioresource Research CenterHPS0014hiPSCs לא מובחנים 
RPMI 1640 תרמו פישר סיינטיפיק #1187512633020
SB431542תרמו פישר סיינטיפיק301836-41-9
נתרן L-אסקורבטMerckA4034-100G
SSEA-4  עכברMilliporeMAB4304
StemFit AK02N Ajinomoto, טוקיו, יפןמדיום תרבית תאיםAK02
ארנב TnTAbcamab92546
TRA 1-81 עכברMilliporeMAB4381
TriiodothyronineThermo Fisher ScientificH34068.06
TripLETM אקספרס אנזים Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, ארצות הברית12604013
תמיסת טריפאן כחולה Nacalai Tesque, קיוטו, יפן20577-34
מרק פוספט טריפטוזMerckT8782-500G
Wnt-C59 ביו-טכנולוגיה, NB, בריטניה5148
β   figure-materials-1 Tublin  עכברPromegaG712A
12634010MF354277 

מקורות

  1. Okita, K., et al. A more efficient method to generate integration-free human iPS cells. Nature Methods. 8 (5), 409-412 (2011).
  2. Tanaka, T., et al. In vitro pharmacologic testing using human induced pluripotent stem cell-derived cardiomyocytes. Biochemical and Biophysical Research Communications. 385 (4), 497-502 (2009).
  3. Egashira, T., et al. Disease characterization using LQTS-specific induced pluripotent stem cells. Cardiovascular Research. 95 (4), 419-429 (2012).
  4. Sasamata, M., et al. Establishment of a robust platform for induced pluripotent stem cell research using Maholo LabDroid. SLAS technology. 26 (5), 441-453 (2021).
  5. Tristan, C. A., et al. Robotic high-throughput biomanufacturing and functional differentiation of human pluripotent stem cells. Stem Cell Reports. 16 (12), 3076-3092 (2021).
  6. Konagaya, S., Ando, T., Yamauchi, T., Suemori, H., Iwata, H. Long-term maintenance of human induced pluripotent stem cells by automated cell culture system. Scientific Reports. 5, 16647(2015).
  7. McClymont, D. W., Freemont, P. S. With all due respect to Maholo, lab automation isn't anthropomorphic. Nature Biotechnology. 35 (4), 312-314 (2017).
  8. Gonzalez, F., Zalewski, J. Teaching joint-level robot programming with a new robotics software tool. Robotics. 6 (4), 41(2017).
  9. Bando, K., Yamashita, H., Tsumori, M., Minoura, H., Okumura, K., Hattori, F. Compact automated culture system for human induced pluripotent stem cell maintenance and differentiation. Frontiers in Bioengineering and Biotechnology. 10, 1074990(2022).
  10. Tohyama, S., et al. Glutamine oxidation is indispensable for survival of human pluripotent stem cells. Cell Metabolism. 23 (4), 663-674 (2016).
  11. Yamashita, H., Fukuda, K., Hattori, F. Hepatocyte-like cells derived from human pluripotent stem cells can be enriched by a combination of mitochondrial content and activated leukocyte cell adhesion molecule. JMA journal. 2 (2), 174-183 (2019).
  12. Shimojo, D., et al. Rapid, efficient and simple motor neuron differentiation from human pluripotent stem cells. Molecular Brain. 8 (1), 79(2015).
  13. Nishimoto, R., Kodama, C., Yamashita, H., Hattori, F. Human induced pluripotent stem cell-derived keratinocyte-like cells for research on Protease-Activated Receptor 2 in nonhistaminergic cascades of atopic dermatitis. The Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 384 (2), 248-253 (2023).
  14. International Stem Cell Initiative. Screening ethnically diverse human embryonic stem cells identifies a chromosome 20 minimal amplicon conferring growth advantage. Nature Biotechnology. 29 (12), 1132-1144 (2011).
  15. Keller, A., et al. Genetic and epigenetic factors which modulate differentiation propensity in human pluripotent stem cells. Human Reproduction Update. 24 (2), 162-175 (2018).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

גלה מאמרים נוספים

תרבית תאים אוטומטיתהתמיינות תאי גזעתחזוקת תאיםמעבר תאיםאנליזה אימונוציטומטריתשיפוט תמונות מבוסס AIשגשוג תאיםשיתוף פעולה מחקרי גלובלי
מערכת תרבית אוטומטית לשמירה והתמיינות של תאי גזע פלוריפוטנטיים המושרים על ידי בני אדם
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.