הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

הקמת מודל אורתודונטי מקסילרי מורין

2K צפיות

DOI:

10.3791/66033

27 באוקטובר 2023

במאמר זה

סיכום

כאן אנו מדגימים שלב אחר שלב פרוטוקול תנועת שיניים אורתודונטי הניתן לניהול המופעל על פי מודל מקסילרי מורין. עם הסבר מפורש של כל שלב והדגמה חזותית, החוקרים יכולים לשלוט במודל זה וליישם אותו על צרכי הניסוי שלהם עם כמה שינויים.

תקציר

בשל היעדר פרוטוקולים הניתנים לשחזור להקמת מודל אורתודונטי מקסילרי מורין, אנו מציגים פרוטוקול אמין וניתן לשחזור כדי לספק לחוקרים כלי אפשרי לניתוח עיצוב מחדש של עצם הקשור לעומס מכני. מחקר זה מציג תרשים זרימה מפורט בנוסף לסוגים שונים של דיאגרמות סכמטיות, תמונות פעולה וסרטוני וידאו. ביצענו את הפרוטוקול הזה על 11 עכברים בוגרים מסוג C57/B6J רחב ואספנו דגימות בימים 3, 8 ו-14 לאחר הניתוח. מיקרו-CT ונתונים היסטופתולוגיים הוכיחו את ההצלחה של תנועות שיניים יחד עם עיצוב מחדש של העצם באמצעות פרוטוקול זה. יתר על כן, על פי תוצאות המיקרו-CT בימים 3, 8 ו-14, חילקנו את מידול העצם לשלושה שלבים: שלב ההכנה, שלב ספיגת העצם ושלב היווצרות העצם. שלבים אלה צפויים לסייע לחוקרים העוסקים בשלבים שונים לקבוע זמן איסוף דגימה סביר. פרוטוקול זה יכול לצייד חוקרים בכלי לביצוע ניתוח רגנרטיבי של עיצוב מחדש של עצם.

מבוא

עצם היא רקמה משוחזרת פעילה מאוד המתאימה את גודלה, צורתה ותכונותיה לאורך חייו של הפרט 1,2. בנוסף להורמונים, הזדקנות, תזונה וגורמים ביולוגיים או ביוכימיים אחרים3, הרעיון שעומס מכני הוא הגורם הקובע ביותר זכה להסכמה כללית 4,5. בנסיבות מסוימות עם עומס מכני חריג, חוסר האיזון בין ספיגת עצם לבין היווצרות עצם עלול להוביל לעיצוב מחדש לא תקין של העצם והפרעות עצם. מחלות עצם כגון חוסר שימוש, אוסטאופורוזיס ואובדן עצם במהלך מנוחה ארוכת טווח במיטה, או בנוכחות מיקרו-כבידה בטיסה לחלל, יש קשר הדוק עם עומס מכני חריג 6,7,8.

עומס מכני שימש גם לטיפול במחלות הקשורות לעצם כגון טיפול בהסחת דעת וטיפול אורתודונטי. טיפול בהסחת דעת שימש במחלות התפתחותיות כגון קרניוסינוסטוזיס והיפופלזיה מנדיבולרית 9,10, בעוד שטיפול אורתודונטי נמצא בשימוש נרחב לתיקון מיקום שיניים לא תקין וכל חסימה11. ליבת הטיפול האורתודונטי היא גם ניהול עומס מכני. כאשר רקמת העצם נתונה לעומס מכני, תהליך שיפוץ עצם מתואם מאוד נגרם על ידי צימוד של ספיגת עצם ואחריו היווצרות עצם, אשר יכול להזיז שיניים כדי להשיג את המטרה האורתודונטית12,13.

למרות שטיפול אורתודונטי יושם באופן נרחב בפרקטיקה הקלינית, מכיוון שהידע שלנו על ההשפעות הביולוגיות של עומס מכני מוגבל, תוצאות הטיפול האורתודונטי אינן ניתנות לשליטה. כדי להתגבר על מגבלות אלה, הוקמו מספר מודלים של בעלי חיים כגון עכבר, חולדה, ארנבת, חתול, כלב, קוף וחזיר כדי לחקור את המנגנון הבסיסי של עיצוב מחדש של עצם הנגרמת על ידי עומס מכני (טבלה 1)14,15,16,17,18,19,20,21,22,23,24, 25,26,27,28,29,30,31,32. לבעלי חיים גדולים כמו כלבים, קופים וחזירים יש כמה יתרונות על פני בעלי חיים קטנים בניתוח אורתודונטי - יש להם שיניים ושיניים דומות יותר לבני אדם, כך שקל לשכפל את ההליך הכירורגי בבני אדם. בנוסף, ראייה רחבה יכולה להפחית את קושי הניתוח ולאפשר ליישם מגוון תוכניות אורתודונטיות33,34. עם זאת, בעלי חיים גדולים קשים להשגה, מה שמוביל לאתגרים הקשורים לגודל המדגם, והם כפופים למגבלות אתיות35. יתר על כן, הליכי חילוץ שגרתיים ומכשירים מורכבים מקשים על ביצוע הניסויים שבגללם נעשה שימוש נדיר בבעלי חיים גדולים.

בנסיבות כאלה, מכרסמים משמשים בעיקר כדי להקים מודלים אורתודונטיים. בין המודלים הללו, לחולדות ולארנבים יש קושי פעולה נמוך יותר ויותר סכמות תנועת שיניים בהשוואה לעכברים. עם זאת, למודל מורין יש יתרון ייחודי בכך שיש מספר רב של עכברים מהונדסים גנטית זמינים, וזה חיוני במיוחד לחקר המנגנונים הבסיסיים36. עם זאת, מודל מורין הוא המודל הקשה ביותר למניפולציה בגלל גודלו הקטן. בסקירת השיטות הנוכחיות, הזזת הטוחנת הראשונה לכיוון המסיאלי היא השיטה המעשית היחידה למודל אורתודונטי. שני מכשירים משמשים בעיקר להזזת קפיץ סליל השן והרצועה האלסטית. השימוש ברצועה אלסטית קל יותר, אך הכוח האורתודונטי משתנה מאוד, מה שמקשה על השגת תוצאות יציבות.

שו ואחרים 15 הקימו מודל מורין עם קפיץ סליל על הלסת התחתונה. עם זאת, בשל הניידות של הלסת התחתונה ואת האופי החסימתי של הלשון, פעולה על מקסילה היא תמיד הבחירה הראשונה הן בתוך הניתוח והן לאחר הניתוח. Taddei et al.16 תיארו פרוטוקול מפורט יותר על מקסילה מורין לפני 10 שנים ויש להוסיף פרטים חזותיים וצלולים יותר. לסיכום, פרוטוקול זה תיאר באופן שיטתי פרוטוקול מפורט של תנועות שיניים אורתודונטיות במודל מקסילרי מורין כדי לסייע לחוקרים לשלוט בשיטת המידול בצורה סטנדרטית ולאפשר הערכה השוואתית בין מחקרים שונים.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

נהלי בעלי החיים במחקר זה נבדקו ואושרו על ידי הוועדה האתית של בית הספר לסטומטולוגיה של מערב סין, אוניברסיטת סצ'ואן (WCHSIRB-D-2017-041). במחקר זה נעשה שימוש בעכברי C57BL/6 בוגרים (ראו טבלת חומרים). פרוטוקול זה מוסיף עומס מכני לטוחנת הראשונה המקסילרית הימנית (M1) עבור תנועה מזיאלית, שבה תהליך עיצוב מחדש של עצם מתואם מאוד נגרם על-ידי צימוד של ספיגת עצם והיווצרות עצם (איור 1).

1. הכנה טרום ניתוחית

  1. פריטים כירורגיים
    1. הכינו את הפריטים הכירורגיים הבאים לניתוח: פלטפורמה כירורגית (איור 2A), מהדק (איור 2B), כלי ניתוח (איור 2C ואיור משלים S1), ציוד אורתודונטי (איור 2C) וציוד לשיקום שיניים (איור 2D).
      הערה: קפיץ הסליל המותאם אישית מיוצר בהתאמה אישית ומספק כוח של 10cN כאשר הוא נמתח עד 10 מ"מ.
  2. עיקור
    1. לעקר את כלי הניתוח על ידי autoclaving ואת כל הפריטים הכירורגיים עם קרינה אולטרה סגולה לפחות 30 דקות.
  3. הרדמה
    1. מרדימים את העכבר על ידי מתן קטמין (100 מ"ג / ק"ג) ודיאזפם (5 מ"ג / ק"ג) על ידי הזרקה intraperitoneal.
    2. יש למרוח משחה וטרינרית על עיני המורין עם צמר גפן כדי למנוע יובש בעיניים.
    3. המשך בניתוח רק כאשר העכבר אינו מגיב כאשר אצבעות רגליו נצבטות במלקחיים.

2. תהליך כירורגי

  1. מורחים ומהדביקים את גפיו של העכבר המורדם במצב שכיבה למשטח הניתוח באמצעות סרט הדבקה.
  2. הצמידו מחט 27G מכל צד מעל הראש ועוד מחט 27G מכל צד מתחת לבית השחי.
  3. סובב גומייה סביב שתי המחטים הנ"ל והחותכות העליונות ועוד אחת סביב עוד שתי מחטים והחותכות התחתונות. שנו את מיקומי המחטים כדי לשלוט במידת הפתיחה ובכיוון הפה (איור 3A).
    הערה: עבור ניתוח תנועות שיניים אורתודונטי, יש לשמור על פה פתוח במידה המקסימלית לפני שהבוצ'ינטור הופך להיות הדוק לחלוטין. יש למשוך את הלשון לכיוון הצד הלא ניתוחי כדי לחשוף את שדה הניתוח ולמנוע איסכמיה.
  4. כופפו את הקצה בקוטר 1.5 מ"מ של חוט נירוסטה בקוטר 304 ס"מ ודחפו את הקצה הכפוף דרך החלל הבין-פרוקסימטי שבין M1 לטוחנת השנייה המקסילרית (M2) מהצד הבוקאלי בעזרת פינצטה אופתלמית מעוקלת (איור 3B). כאשר רואים את קצה החיך של חוט הליגטורה מהצד הפלטאלי, משכו אותו החוצה עד כמחצית מאורכו והעבירו אותו דרך קצה אחד של קפיץ הסליל המותאם אישית.
  5. קשרו קשר מרובע עם שני הקצוות של חוט הליגטורה בכיוון המזיאלי של M1 המקסילרי עד שהקפיץ מקובע היטב לשן (איור 3C). החסר את החוט העודף.
  6. באופן דומה, נקב חוט נירוסטה נוסף בגודל 3 ס"מ 304 דרך הקצה השני של קפיץ הסליל.
  7. נקו וייבשו את משטחי החותכות בעזרת כדורי צמר גפן. מרחו דבקים על כל המשטחים האלה עם מקלות צמר גפן ומרפאים אותם באור.
  8. דחפו את חוט הנירוסטה השני דרך החלל הקרוב בין החותכות המקסילריות וקשרו קשר החלקה בכיוון השפתיים (איור 3D). הפחת את החוט העודף והפוך את שאר החוט קרוב לפני השטח של השן.
  9. להזריק שרף נרפא אור כדי לכסות את הקשר ואת החותכות; מרפאים באור את השרף (איור 3E).

3. ניהול לאחר הניתוח

  1. לאחר הניתוח, להזריק את העכברים עם 0.05 מ"ג / ק"ג buprenorphine intraperitoneally עבור שיכוך כאבים לאחר הניתוח.
  2. הניחו את העכבר המורדם על שמיכה חשמלית תרמוסטטית בטמפרטורה של 37°C. כאשר המורין חוזר להכרה עם אמבולציה, להחזיר אותו לכלוב דיור נפרד.
  3. בשל תפקודן המוגבל של החותכות לאחר הניתוח, יש להחליף את המספוא הקשה הרגיל בתזונה רכה בלבד.
  4. בדוק את המכשירים האורתודונטיים מדי יום. אם נצפה מצב כלשהו במהלך הבדיקה המשפיע על הולכת הכוח האורתודונטי, כגון עיוות קפיץ, התרופפות קפיץ ונפילת המכשיר, יש להוציא את העכבר מהניסוי.
  5. על מנת לשמור על השוואת הניסויים, להעריך את משקל העכברים מדי יום לאחר הניתוח. כל עכבר המציג ירידה במשקל העולה על 30% ממשקלם לפני הניתוח חייב להיות מחוץ לניסוי.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

ביצענו את ניתוח OTM ב-11 עכברים זכרים בוגרים (C57/BL6, בני 3 חודשים). הם הומתו לקבלת תוצאות בימים 3, 8 ו-14 לאחר הניתוח. בניסויים אלה, הצד המקסילרי הימני הוא צד הניתוח, ואילו הצד המקסילרי השמאלי הוא צד הבקרה. המיקרו-CT הראה שהייתה עלייה רצופה זמנית במרחק בין M1 ל-M2: 30 מיקרומטר, 70 מיקרומטר ו-110 מיקרומטר בימים 3, 8 ו-14 לאחר הניתוח, בהתאמה (איור 4). רצועת החניכיים בצפיפות נמוכה הראתה התרחבות בצד הדיסטלי והיצרות בצד המזיאלי של השורשים כתוצאה מהעומס המכני (איור 5

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

במאמר זה, ניסינו לתאר את פרוטוקול תנועת השיניים האורתודונטי הפשוט ביותר במודל מקסילרי מורין צעד אחר צעד כדי לחקור את המנגנונים הסמויים של עיצוב מחדש של עצם הנגרמת על ידי עומס מכני. מלבד מחקר על עיצוב מחדש של עצם, ישנם כמה יישומים נפוצים אחרים של שיטה זו: 1) מחקר מתודולוגי על האצת תנועת שיניים אורתודונטית; 2) מחקר על ספיגת שורשים אורתודונטית; 3) מנגנונים ביולוגיים של תנועת שיניים אורתודונטית וכאב; 4) מחקר על המודל המהונדס.

בהשוואה לטיפולים אחרים הקשורים להעמסה מכנית כגון אוסטאוגנזה

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים מצהירים כי אין ניגודי עניינים.

תודות

עבודה זו נתמכה על ידי הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין 82100982 מענק ל- F.L.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
<מודלים ניסיוניים חזקים>: קווי עכבר
C57/B6J חברת Gempharmatech לחיות ניסוי C57/B6J
<מבחנים מסחריים חזקים>קריטיים
ערכת כתמי המטוקסילין ואאוזיןBiosharpBL700B
Masson' s Trichrome Stain KitSolarbioG1340
<חזק>מכשירים
27 G מחטצ'נגדו Xinjin Shifeng מכשירים רפואיים & אינסטרומנטס בע"מSB1-074 (IV)
דבקיםמינסוטה כרייה וייצור ושות', בע"מ41282
CorkboardDELI Group Co., Ltd.8705
כדורי כותנהHaishi Hainuo קבוצה ושות',   בע"מ
20120047 מקלות כותנהLakong מכשירים רפואיים ושות', בע"מM6500R
קפיץ סליל מותאם אישיתצ'נגדו Mingxing אביב ושות', בע"מ1109-02
מלקחייםצ'נגדו שיפנג ושות', בע"מאף אחד שרף
נוזלי מרפא אורShofu Dental Trading (SHANGHAI) Co., Ltd.
מרפא אורליאנג יה ציוד שיניים ושות', בע"מLY-A180
nbsp;Haishi Hainuo קבוצה ושות',   בע"מ0008-2014
בד לא ארוג רפואיהנאן יאדו תעשייתי ושות', בע"מ
מחזיקי מחטצ'נגדו Shifeng ושות', בע"מאף אחד
גומיותHaishi Hainuo קבוצה ושות',   בע"ממספריים כירורגיים 32X1
צ'נגדו Shifeng ושות', בע"מאף אחד
פינצטהצ'נגדו שיפנג ושות', בע"מללא
518785סרטי הדבקה רפואיים &01011500018

מקורות

  1. Kenkre, J. S., Bassett, J. The bone remodeling cycle. Annals of Clinical Biochemistry. 55 (3), 308-327 (2018).
  2. Feng, X., McDonald, J. M. Disorders of bone remodeling. Annual Review of Pathology. 6 (1), 121-145 (2011).
  3. Alliston, T. Biological regulation of bone quality. Current Osteoporosis Reports. 12 (3), 366-375 (2014).
  4. Duncan, R. L., Turner, C. H. Mechanotransduction and the functional response of bone to mechanical strain. Calcified Tissue International. 57 (5), 344-358 (1995).
  5. García-Aznar, J. M., Nasello, G., Hervas-Raluy, S., Pérez, M. Á, Gómez-Benito, M. J. Multiscale modeling of bone tissue mechanobiology. Bone. 151 (10), 1-12 (2021).
  6. Rolvien, T., Amling, M. Disuse osteoporosis: clinical and mechanistic insights. Calcified Tissue International. 110 (5), 592-604 (2022).
  7. Vico, L., Hargens, A. Skeletal changes during and after spaceflight. Nature Reviews Rheumatology. 14 (4), 229-245 (2018).
  8. Iwaniec, U. T., Turner, R. T. Influence of body weight on bone mass, architecture and turnover. Journal of Endocrinology. 230 (3), R115-R130 (2016).
  9. Governale, L. S. Craniosynostosis. Pediatric Neurology. 53 (5), 394-401 (2015).
  10. Sahoo, N. K., Issar, Y., Thakral, A. Mandibular Distraction osteogenesis. Journal of Craniofacial Surgery. 30 (8), e743-e746 (2019).
  11. Roberts-Harry, D., Sandy, J. Orthodontics. Part 1: Who needs orthodontics. British Dental Journal. 195 (8), 433-437 (2003).
  12. Li, Y., Jacox, L. A., Little, S. H., Ko, C. C. Orthodontic tooth movement: The biology and clinical implications. Kaohsiung Journal of Medical Sciences. 34 (4), 207-214 (2018).
  13. Will, L. A. Orthodontic tooth movement: a historic prospective. Frontiers of Oral Biology. 18, 46-55 (2016).
  14. Xu, H., Lee, A., Sun, L., Naveh, G. R. S. 3D Imaging of PDL collagen fibers during orthodontic tooth movement in mandibular murine model. Journal of Visualized Experiments. (170), e62149(2021).
  15. Taddei, S. R., et al. Experimental model of tooth movement in mice: a standardized protocol for studying bone remodeling under compression and tensile strains. Journal of Biomechanics. 45 (16), 2729-2735 (2012).
  16. Deguchi, T., Takeshita, N., Balam, T. A., Fujiyoshi, Y., Takano-Yamamoto, T. Galanin-immunoreactive nerve fibers in the periodontal ligament during experimental tooth movement. Journal of Dental Research. 82 (9), 677-681 (2003).
  17. Gudhimella, S., et al. A rodent model using skeletal anchorage and low forces for orthodontic tooth movement. American Journal of Orthodontics and Dentofacial Orthopedics. 155 (2), 254-263 (2019).
  18. Lira Dos Santos, E. J., et al. Orthodontic tooth movement alters cementocyte ultrastructure and cellular cementum proteome signature. Bone. 153 (12), 116-139 (2021).
  19. Danz, J. C., Bibby, B. M., Katsaros, C., Stavropoulos, A. Effects of facial tooth movement on the periodontium in rats: a comparison between conventional and low force. Journal of Clinical Periodontology. 43 (3), 229-237 (2016).
  20. Kohno, T., Matsumoto, Y., Kanno, Z., Warita, H., Soma, K. Experimental tooth movement under light orthodontic forces: rates of tooth movement and changes of the periodontium. Journal of Orthodontics. 29 (2), 129-135 (2002).
  21. Gad, A. M., Soliman, S. O. Evaluation of systemic Omega-3 PUFAs effect on orthodontic tooth movement in a rabbit model: RCT. Angle Orthodontist. 93 (4), 476-481 (2023).
  22. Huang, C. Y., et al. Comparison of tooth movement and biological response resulting from different force magnitudes combined with osteoperforation in rabbits. Journal of Applied Oral Science. 29 (2), 20200734(2021).
  23. Alhasyimi, A. A., Pudyani, P. P., Asmara, W., Ana, I. D. Enhancement of post-orthodontic tooth stability by carbonated hydroxyapatite-incorporated advanced platelet-rich fibrin in rabbits. Orthodontics & Craniofacial Research. 21 (2), 112-118 (2018).
  24. Elkattan, A. E., et al. Effects of Different Parameters of Diode Laser on Acceleration of Orthodontic Tooth Movement and Its Effect on Relapse: An Experimental Animal Study. Open Access Macedonian Journal of Medical Sciences. 7 (3), 412-420 (2019).
  25. von Böhl, M., Maltha, J. C., Von Den Hoff, J. W., Kuijpers-Jagtman, A. M. Focal hyalinization during experimental tooth movement in beagle dogs. American Journal of Orthodontics and Dentofacial Orthopedics. 125 (5), 615-623 (2004).
  26. Machibya, F. M., et al. Effects of bone regeneration materials and tooth movement timing on canine experimental orthodontic treatment. Angle Orthodontist. 88 (2), 171-178 (2018).
  27. Deguchi, T., et al. Histomorphometric evaluation of alveolar bone turnover between the maxilla and the mandible during experimental tooth movement in dogs. American Journal of Orthodontics and Dentofacial Orthopedics. 133 (6), 889-897 (2008).
  28. Tanimoto, K., et al. Experimental tooth movement into new bone area regenerated by use of bone marrow-derived mesenchymal stem cells. Cleft Palate-craniofacial Journal. 52 (4), 386-394 (2015).
  29. Oltramari, P. V., et al. Orthodontic movement in bone defects filled with xenogenic graft: an experimental study in minipigs. American Journal of Orthodontics and Dentofacial Orthopedics. 131 (3), e10-e17 (2007).
  30. Verna, C., Dalstra, M., Lee, T. C., Melsen, B. Microdamage in porcine alveolar bone due to functional and orthodontic loading. European Journal of Morphology. 42 (1-2), 3-11 (2005).
  31. Steiner, G. G., Pearson, J. K., Ainamo, J. Changes of the marginal periodontium as a result of labial tooth movement in monkeys. Journal of Periodontology. 52 (6), 314-320 (1981).
  32. Celebi, A. A., Demirer, S., Catalbas, B., Arikan, S. Effect of ovarian activity on orthodontic tooth movement and gingival crevicular fluid levels of interleukin-1β and prostaglandin E(2) in cats. Angle Orthodontist. 83 (2), 70-75 (2013).
  33. Holmes, H. D., Tennant, M., Goonewardene, M. S. Augmentation of faciolingual gingival dimensions with free connective tissue grafts before labial orthodontic tooth movement: an experimental study with a canine model. American Journal of Orthodontics and Dentofacial Orthopedics. 127 (5), 562-572 (2005).
  34. Wennström, J. L., Lindhe, J., Sinclair, F., Thilander, B. Some periodontal tissue reactions to orthodontic tooth movement in monkeys. Journal of Clinical Periodontology. 14 (3), 121-129 (1987).
  35. Ibrahim, A. Y., Gudhimella, S., Pandruvada, S. N., Huja, S. S. Resolving differences between animal models for expedited orthodontic tooth movement. Orthodontics & Craniofacial Research. 20, 72-76 (2017).
  36. Kirschneck, C., Bauer, M., Gubernator, J., Proof, P., Schröder, A. Comparative assessment of mouse models for experimental orthodontic tooth movement. Scientific Reports. 10 (1), 1-12 (2020).
  37. Ransom, R. C., et al. Mechanoresponsive stem cells acquire neural crest fate in jaw regeneration. Nature. 563 (7732), 514-521 (2018).
  38. Mardas, N., et al. Experimental model for bone regeneration in oral and cranio-maxillo-facial surgery. Journal of Investigative Surgery. 27 (1), 32-49 (2014).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

מודל אורתודונטי בעכבריםעיצוב מחדש של העצםטעינה מכניתתזוזת שינייםאנליזת Micro-CTספיגת עצםבניית עצםאנליזה היסטופתולוגיתאנליזה רגנרטיבית