ניתוח מעקף תריסריון-ג'ג'ונל (DJB) יכול לשפר את חילוף החומרים של גלוקוז ולהפחית את התנגודת לאינסולין. כאן, אנו מציגים פרוטוקול להקמת מודל עכבר יציב ואמין של DJB.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
* These authors contributed equally
ניתוח מעקף תריסריון-ג'ג'ונל (DJB) יכול לשפר את חילוף החומרים של גלוקוז ולהפחית את התנגודת לאינסולין. כאן, אנו מציגים פרוטוקול להקמת מודל עכבר יציב ואמין של DJB.
השכיחות של השמנת יתר וסוכרת מסוג 2 היא דאגה בריאותית עולמית רצינית. השמנת יתר היא גורם פתוגני מרכזי בסוכרת מסוג 2, מחלות לב וכלי דם וסוגי סרטן מסוימים. ניתוח בריאטרי מציע אפשרות טיפול ארוכת טווח ויעילה הן בהשמנת יתר והן בסוכרת. כריתת קיבה בשרוול (SG) ומעקף קיבה Roux-en-Y (RYGB) מוכרים באופן נרחב כניתוחים בריאטריים הפופולריים ביותר. בנוסף, מספר ניתוחים בריאטריים גישוש הדגימו השפעות טיפוליות מבטיחות. מעקף התריסריון-ג'ג'ונל (DJB), המותאם במיוחד לחולי סוכרת עם מדד מסת גוף נמוך, הראה תוצאות מטבוליות מועילות. עם זאת, היתרונות המטבוליים הבלתי תלויים במשקל שלו אינם מובנים במלואם בשל מודלים מוגבלים של בעלי חיים. במאמר זה, אנו מתארים את פרוטוקולי הטיפול הממוטבים ואת הטכניקות הכירורגיות לביצוע ניתוח DJB בעכברים סוכרתיים הסובלים מהשמנת יתר הנגרמת על ידי דיאטה (DIO). שימוש במודל עכבר תורם להבנה טובה יותר של אופי השינויים הנגרמים על ידי ניתוח DJB תוך הקלה על פרקטיקה קלינית קשורה.
השמנת יתר וסוכרת מסוג 2 הן המחלות הכרוניות הנפוצות ביותר בעולם, ושכיחותן עולה בקרב צעירים1. ניתוח בריאטרי הוא הטיפול היעיל ביותר בהשמנת יתר וסוכרת, המאפשר יציבות גלוקוז בדם לטווח ארוך תוך שיפור הסיבוכים הקשורים להשמנת יתר 2,3. ישנם מספר סוגים של ניתוחים בריאטריים, מסווגים לפי האם הם מפחיתים נפח קיבה או ספיגת מעיים; אלה כוללים הגבלה, malabsorptive, ושילוב 4,5.
מעקף התריסריון-ג'ג'ונל (DJB) פותח לראשונה על ידי רובינו ומרסקו, שהראו כי ניתן להקל על סוכרת מסוג 2 על ידי חיבור התריסריון והג'ג'ונום במקום על ידי הפחתת נפח הקיבה 6,7. DJB משמר את כל הקיבה ועוקף את התריסריון כולו ואת הג'ג'ונום הפרוקסימלי. המעי מחולק biliopancreatic, העיכול, ואת הגפיים הנפוצות 6,8. DJB חולק כמה קווי דמיון עם ניתוחים בריאטריים, כולל מעקף קיבה Roux-en-Y (RYGB), מיני מעקף קיבה, מעקף biliopancreatic, הסחת התריסריון, ו DJB בתוספת שרוול gastrectomy9. בהשוואה ל- RYGB, DJB אינו דורש אנסטומוזה במערכת העיכול, המפחיתה את זמן הניתוח ומשפרת את שיעור ההצלחה של ההליך. DJB דומה ל- RYGB בשיפור חילוף החומרים של גלוקוז אך אינו משפיע על משקל הגוף10. לאחר ניתוח DJB, אספקת מזון מהירה למעי הדק הדיסטלי מעוררת את הפרשת פפטיד דמוי גלוקגון-1 (GLP-1), וכתוצאה מכך מטבוליזם גלוקוז משופר11,12.
השימוש במודלים של בעלי חיים חיוני להבנת המסלולים המטבוליים, התאיים והמולקולריים. מודלים של ניתוחים בריאטריים בבעלי חיים תרמו להבנתנו את המנגנונים הפוטנציאליים העומדים בבסיס השמנת יתר וסוכרת13,14. עם זאת, בשל ההבדלים הפיזיולוגיים בין המינים, אי אפשר לשכפל באופן מושלם מחלות אנושיות במודלים של בעלי חיים15. בין מודלים שונים של בעלי חיים הזמינים למטרות מחקר, מודל העכבר להשמנת יתר הנגרמת על ידי דיאטה (DIO) דומה ביותר להשמנת יתר אנושית ולתסמונת מטבולית16. עכברים נבחרו לניתוח DJB כדי לקבוע את היתכנות הניתוח ולספק טכניקות למחקר נוסף. כתב יד זה מספק סיכום מקיף הן של היבטים טכניים והן של פרטים ניסיוניים של ניתוח DJB.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
כל צעדי הפרוטוקול המתוארים להלן פועלים בהתאם להנחיות הוועדה לטיפול ושימוש בבעלי חיים של בית החולים הכללי של פיקוד הזירה הדרומית תחת מספר האישור 2020112501.
1. הכנה כללית לפני הניתוח
הערה: נרכשו 30 עכברי C57BL/6 זכרים בני 6 שבועות. עכברים שוכנו במעבדה ספציפית נטולת פתוגן (SPF) תחת מחזור אור/חושך של 12 שעות; טמפרטורה, 22 ± 2 °C (75 °F); ולחות, 55-65%. עכברים קיבלו גישה חופשית למים והוזנו בתזונה של 60% שומן קק"ל במשך 6 שבועות כדי לגרום להשמנת יתר. זריקה תוך צפקית של סטרפטוזוטוצין 40 מ"ג/ק"ג ניתנה במשך 5 ימים לגרימת סוכרת17. בין שלושים העכברים, עשרים ושניים עכברים נבדקו לגלוקוז אקראי בדם > 300 מ"ג / ד"ל וחולקו באופן אקראי לקבוצות DJB (n = 15) וניתוחי דמה (n = 7). שמונה עכברים לא נכללו בניסוי בשל רמת גלוקוז נמוכה בדם.
2. מעקף התריסריון: הליך כירורגי

איור 1: הליך מעקף תריסריון-ג'ג'ונל. (A) מיקום הג'ג'ונום 5 ס"מ דיסטלי לרצועה של טרייץ. (B) לקשור פעמיים את הג'ג'ונום עם משי 6-0, לחתוך דרך אמצע הליגטורה. (C) אנסטומוזה ג'ג'ונלית-ג'ג'ונלית. (D) לבצע חתך של 0.5-0.6 ס"מ, ולתפור את הדופן האחורית. (ה-ו) אנסטומוזה ג'ג'ונלית-ג'ג'ונלית מלאה. (G) משכו את הג'ג'ונל הדיסטלי לתריסריון 1 ס"מ מתחת לפילורוס. (H) אנסטומוזה תריסריון-ג'ג'ונלית. (I) לחתוך את האנסטומוזה התריסריון-ג'ג'ונל בחתך של 0.5-0.6 ס"מ ולתפור את הדופן האחורית בתפר רציף פשוט. (י-ק) אנסטומוזה מלאה של התריסריון. (L) במרחק של 2 מ"מ מהדיסטלי לאנסטומוזה התריסריון-ג'ג'ונלי, יש לקשור את התריסריון במשי 6-0 ולחתוך דרך אמצע הליגטורה. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.
3. טיפול כללי לאחר הניתוח

איור 2: התרשים של ניתוח DJB. (A) אנסטומוזה תריסריון-ג'ג'ונל. (B) אנסטומוזה ג'ג'ונלית-ג'ג'ונלית. (C) איבר ביליו-לבלבלב. (D) איבר העיכול. (ה) איבר משותף. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.

איור 3: אנטומיה של ניתוחי DJB. (A) אנסטומוזה תריסריון-ג'ג'ונלית. (B) אנסטומוזה ג'ג'ונלית-ג'ג'ונלית. (C) איבר ביליו-לבלבלב. (D) איבר העיכול. (ה) איבר משותף. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.
4. הערכה לאחר הניתוח של פרמטרים מטבוליים
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תנאים כלליים
זמן הניתוח הממוצע של הליך DJB היה 84.5 ± 2.6 דקות. 15 עכברים עברו ניתוח DJB, תשעה עכברים שרדו. כפי שניתן לראות בטבלה 1, רוב מקרי המוות התרחשו במהלך הניתוח או ב-7 הימים שלאחריו. הגורמים למוות לאחר הניתוח היו דימום (n=2) ביום 1 לאחר הניתוח, דליפה אנסטומוטית (n=1) ביום 4 שלאחר הניתוח, חסימה אנסטומוטית (n=2) ביום 7 לאחר הניתוח, וסיבה לא ידועה (n=1) שלושה שבועות לאחר הניתוח.
במשך 8 שבועות לפני הניסוי הזה, ביצענו ניתוח DJB על 10 עכברים בשבוע כניסוי מ...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
בשנת 1953 ביצעו Varco et al.18 את המעקף הג'ג'ונו-איליאלי הראשון כתחילת הניתוח הבריאטרי. מאז, ניתוחים בריאטריים רבים בוצעו על ידי מנתחים. ניתוחים אלה הביאו לירידה במשקל ושיפרו את הסיבוכים המטבוליים 4,19,20. יתר על כן, בשנת 1967, מייסון ואיטו21 ביצעו את מעקף הקיבה הראשון Roux-en-Y (RYGB), אשר יכול להפחית ביעילות משקל ולשפר את התסמונת המטבולית. בדומה ...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
המחברים מצהירים כי אין ניגודי עניינים.
מחקר זה נתמך על ידי מענק מפרויקט תכנון המדע והטכנולוגיה של מחוז גואנגדונג בסין (מס '202002020069).
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| מפסק בטן | FST | 17000-03 | מפסק קוליברי -3 ס"מ, טווח מפסק 1.5 ס"מ/3 ס"מ אורך |
| 1% תמיסת נתרן פנטוברביטל | מפעל ריאגנטים כימיים גואנגג'ואו | / | מומס 500 מ"ג של אבקת נתרן פנטוברביטל ב-50 מ"ל של מי מלח רגילים כדי להשיג תמיסת נתרן פנטוברביטל 1%. |
| נתרן בנזיל פניצילין להזרקה | חברת התרופות צפון סין בע"מ | F2062121 פניצילין | |
| בופרנורפין | גואנגג'ואו כימי ריאגנט מפעל | / | משכך כאבים |
| בופרנורפין | גואנגג'ואו אוטסוקה פרמצבטיקה ושות', בע"מ | / | משכך כאבים |
| חומצת לימון-נתרן ציטראט מאגר | LEAGENE | R00522 | תמיסת חיץ |
| ניצני כותנה | HaoZheng רפואי | 60220610 | צמר גפן |
| משחת אפילציה | Veet | AAPR-S222 | קרם להסרת שיער |
| תג אוזן | ZEYA | SUS304 | שמיכה חשמלית סימן אוזן |
| ZOSEN | ZS-CWDRT | כרית חום | |
| משקל אלקטרוני | WETTLER TOLEDO | 20060902-6 | למדוד את המשקל |
| אבקה תזונתית אנטרלית | מעבדות אבוט | אבקת | תזונה |
| עין משחה | גואנגג'ואו אוטסוקה פרמצבטיקה ושות', בע"מ | / | הגנה על העיניים |
| גלוקומטר | רוש | 6993788001 | להעריך את רמת הגלוקוז בדם |
| Graphpad פריזמה גרסה 9.4.1 | GraphPad תוכנה | 9.4.1 | תוכנה לניתוח סטטיסטי |
| דיאטה עתירת שומן (דיאטת מכרסמים מטוהרת [60FDC] דיאטת מכרסמים מטוהרת) | Dyets | 112252 | 60kcal% דיאטה עתירת שומן |
| מיקרו מלקחיים | Jinzhong רפואי | 18-1140 | מיקרו מלקחיים |
| מחזיק מחט | מיקרו Jinzhong רפואי | EMT-160-Z | מחזיק מחט |
| מיקרו מספריים | Jinzhong רפואי | YBC010 | מיקרו מספריים |
| מצלמת מיקרוסקופ | LAPSUN | E 2000 | וידאו |
| מספריים עיניים | Jinzhong רפואי | Y00030 | מספריים כירורגיים |
| פנטוברביטל | גואנגג'ואו כימי ריאגנט מפעל | / | נרקוזה |
| נתרן כלורי הזרקת | גואנגג'ואו אוטסוקה פרמצבטיקה ושות', בע"מ | B21L0301 | NaCl 0.9% |
| מיקרוסקופ סטריאו | ZEISS | Stemi 305 | סטריאומיקרוסקופ משקפת |
| סטרפטוזוטוצין | סיגמא | S110910-1 גרם | STZ |
| קו תפרים | LINGQIAO SUTURE | ZS-LQPMRZ5/ 0 | פרולן 6/0, פרולן 10/0 |
| מלקחיים | כירורגיים | Jinzhong Medical | H1701 |
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.