הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

מודל עכבר של צמיחה קולטרלית כלילית באמצעות איסכמיה חוזרת

505 צפיות

⸱

DOI:

10.3791/66127

⸱

9 במאי 2025

 ,  ,  , 
1Department of Integrative Medical Sciences, Northeast Ohio Medical University, 2Department of Biological Sciences, Kent State University, 3College of Medicine, University of Arizona, Phoenix

במאמר זה

סיכום

מאמר זה מציג שיטה לחקר צמיחה כלילית לאחר הלידה הנגרמת על ידי איסכמיה חוזרת בעכברים, כולל השתלה כירורגית של אוטם פנאומטי בעורק היורד הקדמי השמאלי, מערכת ניפוח אוטומטית לפרוטוקול איסכמיה חוזרת, ושיטות פוטנציאליות להערכת צמיחה נלווית.

תקציר

בטחונות כליליים הם מעקף טבעי במחלות לב איסכמיות (IHD), ולכן במשך שנים רבות, גידול בטחונות כליליים (CCG) היה יעד טיפולי מבטיח ל-IHD, במיוחד בחולים עם סוכרת מסוג 2 או תסמונת מטבולית שבה CCG לקוי. עם זאת, תהליך זה אינו נחקר, בין היתר בשל היעדר מודלים של עכברים של CCG, אף על פי שמודלים אחרים של בעלי חיים, כגון חזירים, כלבים וחולדות, הוקמו. מודל עכבר יכול לנצל את השינויים הגנטיים הרבים הזמינים עבור המין, כולל מעקב אחר שושלת וויסות גנים (ביטוי יתר או נוק-אאוט), כדי להבהיר את התהליך והמנגנון של CCG, כולל המסלולים וסוגי התאים המעורבים. לכן, יצאנו לפתח מודל עכברי של CCG המושרה על ידי איסכמיה חוזרת (RI) באמצעות חולף, חסימה חוזרת של העורק היורד הקדמי השמאלי (LAD). כתב יד זה מספק פרטים על מודל CCG זה של עכבר, כולל ניתוח RI להשתלת אוטם פנאומטי על ה-LAD, מערכת הניפוח האוטומטית מבוססת הלחץ המשמשת לבקרת הלחץ והתזמון של הניפוח, והרצף של פרוטוקול RI. שיטה זו כבר יצרה פרסום אחד כדי להבהיר את תהליך ה-CCG המושרה על ידי RI, והראה כי אנגיוגנזה הנבטה מולידה עורקים כליליים בוגרים ב-CCG בלבבות עכברים בוגרים.

מבוא

מחלת לב איסכמית (IHD) היא הגורם המוביל לתמותה בארצות הברית, ויותר מ-200,000 ניתוחי מעקפים בעורקים הכליליים מבוצעים מדי שנה במאמץ לטפל במחלה1. בטחונות כליליים, אנסטומוזה בין ענפים של עץ העורקים הכליליים, הם מעקף טבעי שיכול לספק דם לרקמה איסכמית במורד הזרם של חסימה2; עם זאת, אנשים מציגים שונות רחבה בהיקף רשתות הביטחונות המקומיות שלהם 3,4. לחולים עם IHD שיש להם בטחונות כליליים נרחבים יותר יש תוצאות טובות יותר במהלך אירועים לבביים, כולל גודל אוטם מופחת ותמותה. לפיכך, צמיחת בטחונות כלילית (CCG) הייתה יעד טיפולי במשך למעלה מעשור 5,6,7. זה מעניין במיוחד עבור המספר ההולך וגדל של חולים עם תסמונת מטבולית8, המציגים בטחונות כלילים גרועים יותר9. עם זאת, עד שהתהליך והמנגנון של CCG יובנו טוב יותר, ניסיון לגרום ל-CCG לטיפול ב-IHD לא צפוי להיות פורה.

בטחונות כליליים נחקרו במודלים של בעלי חיים גדולים, וחסימות קצרות וחוזרות ונשנות של העורקים הכליליים העיקריים שימשו כדי לגרום ל-CCG בחזירים10, כלבים11 וחולדות12. למודל עכבר של CCG, לעומת זאת, יהיו יתרונות רבים יותר בחקר המנגנונים המולקולריים והתאים של CCG בגלל קווי העכבר המהונדסים גנטית הרבים הזמינים, כולל מעקב אחר שושלת, קווים טרנסגניים ונוקאאוט ספציפיים לגן או ספציפיים לתא. מעניין לציין שבניגוד לבני אדם, לעכברים מדווחים שאין בטחונות כליליים טבעיים13,14, מה שהופך אותם למודל אטרקטיבי לחקר היווצרות בטחונות כליליים. ואכן, דו"ח עדכני הראה כי בחולים עם מחלת עורקים חסימתית, כמעט מחצית (47%) לא היו בטוחות (דרגת רנטרופ 0)3; לפיכך, מודל עכבר של CCG יכול להיות רלוונטי מבחינה קלינית עבור חולים עם ביטחונות מקוריים מינימליים.

לכן פיתחנו מודל עכברי של CCG המושרה על ידי איסכמיה חוזרת, עם חוסם בלון מתנפח מעל העורק היורד הקדמי השמאלי (LAD) המשתמש במערכת ניפוח מבוססת לחץ אוטומטית עם טיימר. פרוטוקול האיסכמיה החוזרת על עצמו מסוגל לעורר צמיחה נלווית, כפי שמוצג בפרסום שפורסם לאחרונה14. מודל עכבר זה של CCG יספק תובנה חדשה לגבי תהליך CCG ברמה התאית והמולקולרית וניתן להשתמש בו כדי לאמת מטרות פוטנציאליות לקידום CCG.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

הניסויים המתוארים בבעלי חיים נערכו בהתאם למדריך לטיפול ושימוש בחיות מעבדה ואושרו על ידי הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים של האוניברסיטה הרפואית של צפון מזרח אוהיו.

1. הכנה כירורגית

הערה: עבור פרוטוקול RI, השתמש בעכברי C57BL/6 משני המינים במשקל של לפחות 25 גרם. השתמש בטכניקה אספטית לאורך כל הניתוח.

  1. ההתקנה
    1. עקר את כל הכלים בחיטוי או במעקר חרוזים. עקר חומרים ושתלים עדינים, כגון צינורות אוטם, קשירה ו-PE, עם תחמוצת אתילן (EtO).
    2. נקה את אזור הניתוח על ידי ניגוב כל האזורים עם 70% אתנול. הכן את האזור על ידי פריסת כל הכלים והאספקה על וילונות סטריליים. ראה טבלת חומרים לרשימה מלאה של אספקה.
  2. אינטובציה של עכבר
    1. להרדים בקצרה את העכבר עם 3% איזופלורן עם חמצן (קצב זרימה של 1 ליטר לדקה) עד לאובדן רפלקס היישור. לגלח את אזור החזה, מרכז הגב ומאחורי האוזן הימנית; הסר לחלוטין שיער פזור. יש להזריק גליקופירולאט תוך שרירי במינון של 0.01-0.02 מ"ג/ק"ג.
    2. יש להרדים שוב עם 3%-4% איזופלורן למשך 5 דקות. הניחו את העכבר על שיפוע, מרוסנים מהחותכות העליונות שלו, והשתמשו במלקחיים קהים כדי להזיז את הלשון הצידה. אינטובציה מהירה של העכבר עם אנגיוקט 20G באמצעות אור סיב אופטי ולרינגוסקופ מגדיל.
    3. הנח את העכבר על כרית כירורגית מחממת וחבר את צינור האינטובציה למכונת הנשמה של בעלי חיים קטנים עם 3% איזופלורן. אשר אינטובציה על ידי בדיקת עלייה דו-צדדית קצבית בחזה. אשר עומק הרדמה הולם על ידי היעדר תגובת צביטה בבוהן.
  3. הכנת השדה הכירורגי
    1. מרחו משחה עיניים על העיניים למניעת יובש.
    2. נקו את האזורים המגולחים עם בטדין ולאחר מכן 70% אתנול, נגבו פעם אחת בצורה חד כיוונית.
    3. מרחו קרם אלקטרודות על מגעי האלקטרוקרדיוגרמה (EKG) על משטח הניתוח והדביקו אליהם את גפיו של העכבר. עטוף גזה סטרילית מעל המחצית התחתונה של העכבר.
    4. עקוב אחר קצב הנשימה, הטמפרטורה ועומק ההרדמה במהלך הניתוח באמצעות ממשק התוכנה של כרית הניתוח.
  4. כריתת בית חזה שמאלי והשתלת אוטם
    1. הפחיתו את האיזופלורן ל-2%. בצעו חתך בקו האמצע של 2-3 ס"מ בעור בחזה באמצעות מספריים, ואז השתמשו במלקחיים מעוקלים כדי להפריד בעדינות את שכבות העור והשרירים בצד שמאל של החזה (איור 1A).
    2. בעזרת מלקחיים קהים, פתחו בעדינות פתח דרך דופן בית החזה כדי לחשוף את הלב, בדרך כלל בין ה-3ל-5.
    3. השתמש במחזר כדי לפזר בעדינות את הצלעות ולדמיין את הלב. בעזרת מלקחיים קהים, קרע את קרום הלב כדי לחשוף את הלב. אתר את האפרכסת השמאלית (איור 1B) ודמיין את החלק הבסיסי של העורק היורד הקדמי השמאלי (LAD), במידת האפשר.
    4. העבירו 8-0 תפר פוליפרופילן דרך שריר הלב מתחת ל-LAD.
      הערה: המרחק בין הכניסה ליציאה צריך להיות שווה בערך לרוחב האטם ובניצב ל-LAD.
    5. הסר מחזירים. בעזרת מלקחיים מחודדים, יש להוציא את קצה צינור החוסם דרך דופן החזה בחלל הבין-צלעי התחתון השני ולמשוך את צינור החוסם החוצה דרך דופן החזה עד שהאוטם ממוקם מעל הלב בחלל החזה.
    6. קשרו את החוסם היטב ללב באמצעות קשר מנתח (איור 1C) כך שהאוטם שוכב על הלב אך לא לוחץ לתוכו.
    7. נפחו לזמן קצר את האוטם (~10 שניות) ב- psi 10 באמצעות התקן ניפוח הכפתור (איור 2). בדוק את האק"ג כדי לאשר את העלאת ST במהלך הניפוח, ובמידת האפשר, אשר חזותית הלבנה של קודקוד הלב. התאם את המיקום או המתח של התפר לפי הצורך כדי לאשר איסכמיה.
  5. סגירת
    1. סגור את הצלעות הצדדיות עם תפר פוליפרופילן 6-0, הכנס את צינור החזה. פנה אוויר ודם מהחזה ולאחר מכן הסר את צינור החזה. מרחו 2% לידוקאין על החתך הסגור בדופן החזה.
    2. בעזרת מלקחיים מחודדים, מנהרה את צינור הסוגר מתחת לעור הכתף הימנית כדי להוציא את הצינור דרך העור מאחורי האוזן הימנית. החלף את שרירי החזה וסגור את העור עם תפר פוליגלקטין 6-0 (איור 1D).
    3. הפוך את העכבר למצב שכיבה. יש לתת קטופרופן תת עורי במינון של 3 מ"ג/ק"ג (באמצעות דילול של 1 מ"ג/מ"ל במי מלח סטריליים של 0.9%) לפחות 30 דקות לפני סיום הניתוח.
  6. השתלת קשירה
    1. בעזרת מספריים קטנים, בצע חתך קטן (1 ס"מ) על העור במרכז הגב והפריד בעדינות את העור מרקמת השומן והשריר התת עורי.
    2. מנהרה את צינור הסוגר לחתך במרכז הגב, הוצא אותו החוצה והשחיל אותו דרך הקשירה. השתמש בתפר 6-0 כדי לסגור את החור הקטן ליד האוזן.
    3. השתמש בתפרי פוליפרופילן 6-0 כדי לקבע את הקשירה לשרירי הגב (איור 1E). סגור את העור מעל כפתור הקשירה עם 6-0 תפרים.
  7. שחזור
    1. הסר את צינור האינטובציה ברגע שהעכבר יכול לנשום באופן עצמאי; הנח את העכבר בכלוב RI לאחר ניתוח (עבור חיה בודדת; איור 3) ברגע שתגובת צביטת הרגל חזרה. עקוב אחר העכבר ברציפות עד שהוא חזר להכרה מספקת כדי לשמור על שכיבה עצם החזה. הנח את הכלוב על כרית חום עד שהעכבר יחזור לניידות מלאה.
    2. למחרת, יש לתת מנה שנייה של קטופרופן תת עורית במינון של 3 מ"ג/ק"ג.
    3. אפשר לעכבר לנוח במשך 5-7 ימים לפני תחילת פרוטוקול RI. עקוב אחר עכברים מדי יום כדי לבדוק את תקינות המכשור והחלף את הכלובים לפי הצורך. ספק העשרה מתאימה לפי הצורך, מכיוון שעכברים נמצאים בבית יחיד למשך פרוטוקול RI.

2. איסכמיה חוזרת ונשנית

  1. בדוק את מיקום החוסם על ידי אקו לב ביום 0 של פרוטוקול RI, כפי שתואר קודם לכן15. שימו לב לירידה בתפקוד הלב במהלך ניפוח האוטם.
  2. חבר את צינורות הסוגר של העכבר למערכת ניפוח RI (איור 4). המערכת תנפח את האוטם ל-10 psi למשך 6 דקות, 4 פעמים ביום, עם הפסקה של 3 שעות בין כל אינפלציה (איור 5).
  3. לאחר 17 ימים של RI, בדוק שוב את תפקוד הלב כמו בשלב 2.1.

3. זלוף פולימרים וקצירת רקמות

  1. בזמן ההקרבה, יש להרדים את העכבר עם 3%-4% איזופלורן ולהזריק הפרין (500 U/kg) תוך צפק. השתמש בקונוס אף כדי להמשיך במתן איזופלורן ב-2% למשך 5 דקות לפחות, ולאחר מכן אשר את עומק ההרדמה המתאים על ידי היעדר תגובת צביטה בבוהן.
  2. פתח את חלל החזה כדי לחשוף את הלב ואת אבי העורקים החזי. קנולציה של אבי העורקים החזי היורד עם צינורות PE20 וחתוך את הווריד הנבוב התחתון (IVC) כדי לאפשר זרימה החוצה; יש להחדיר את הלב לאחור עם 1x PBS עד שהנוזל היוצא מה-IVC צלול, ואחריו 3 מ"ל של 1% לידוקאין, ואז 3 מ"ל של 4% פרפורמלדהיד (PFA) ב-PBS. בצע קשירה קבועה של ה-LAD במיקום המדויק של האוטם.
  3. לחלחל לאחור את הלב עם מגיב רדיואק עד למילוי המעגל העורקי. מהדקים את צינור PE20 עם המוסטטים ומאפשרים לפולימר להתרפא למשך 90 דקות. דמיינו את הלב תחת טווח ניתוח.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

מתוך 136 עכברי C57BL/6, כולל זכרים ונקבות כאחד, שיעור ההישרדות של ניתוח RI היה 93.4%, כאשר 80.9% מהעכברים שרדו לאורך כל פרוטוקול ה-RI בן 17 הימים.

פרוטוקול ה-RI של העכבר עבר אופטימיזציה בהתבסס על מודלים קודמים של RI בבעלי חיים12,16, שיש להם אפיזודות קצרות של איסכמיה ללא פגיעה קבועה בשריר הלב. במהלך הניתוח, הערכה תפקודית של החוסם יכולה להיעשות על ידי התבוננות בהלבנה נראית לעין של קודקוד ה-LV ועליית ST על ה-EKG במהלך ניפוח האוטם, ששניהם ...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

בטחונות כליליים הם מעקף טבעי לחולי IHD. לאחר הניסויים הקליניים הכושלים שהתמקדו באנגיוגנזה17, קידום פיתוח בטחונות כליליים עשוי להיות גישה טיפולית טובה יותר עבור חולים אלה. בשונה מנימים שמקורם באנגיוגנזה, שיש להם רק שכבה אחת של תאי אנדותל, בטחונות הם עורקים בוגרים עם כיסוי של תאי שריר חלק. ביטחונות מספקים מחדש את זרימת הדם לאזורי איסכמיה של שריר הלב הנגרמת על ידי עורקים חסימתיים. הבנת הרגולציה של CCG חיונית לפיתוח יעדים חדשים לטיפול ב-IHD.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

למחברים אין מה לחשוף.

תודות

המחברים מודים ל-Weiguo Wan, Cody Juguilon, Iyanuoluwa Ogunmiluyi ו-Devan Richardson על תרומתם לשיטות שנדונו כאן. עבודה זו נתמכה על ידי 1R15HL115540-01 ו-1 R01 HL137008-01A1.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
#5/45 מעלות מלקחייםFine Science Tools11251-35
1/4 אינץ' שסתום סולנואיד חשמלי פליז סגורארה"ב מוצקUSS2-00054מערכת ניפוח
1/4 אינץ' שסתום סולנואיד חשמלי פליז פתוחAceCrewמערכת ניפוח
1/4 אינץ' צינורות פנאומטיים‎ סין SNS פנאומטי ושות', בע"מ‎ מכשיר כפתור APU1 / 4-32.8ft
1/4 אינץ' מחברי דחיפהRuoFeng543Yמכשיר כפתור
1/8 אינץ' אביזרי פליזמערכת אינפלציהתעשייתית
2 מיקום שסתום סולנואיד חשמלי פנאומטי"ב מוצקUSS-מכשיר כפתור
PSV00033 20G אנגיוקטBD381703
45 מעלות מחזיקי מחטים של CastroviejoRobozRS-6421
6-0 תפרי פוליגלקטיןDemeTECHG176011B13M
6-0 תפרי פוליפרופילןAD SugicalXS-P618R11
70% אתנול
8-0 תפרי פוליפרופילןDemeTECHPM19800, 65G0P
Betadine Purdue מוצרים367618150085
מספריים עם אף קההPrecision Intruments500366
כלוב לאחר ניתוח פיר; חתוך ל -12.5 ס"מ
צמר גפן (3 אינץ')פוריטניים872 יחידות DBL
Curity (2x2)Cardinal Health2146
Dipsey שקעים מסתובביםגרמלין מיםכלוב לאחר ניתוח
קרם אלקטרודותSignacreme17-05
GlycopyrrolateWestward0143-9679-01
Hartman hemostatsFine Science Tools13003-10
IsofluraneCovetrus29404
Ketofen (ketoprofen)zoetis10004031
Lidocaine (2%)Covetrus14583
MICROFIL (צהוב)Flow TekMV-122
מיני כפתורInteractiviaE-SWC-PBM-PBS-105מכשיר כפתור
ווסת לחץ אוויר מיניאטוריPneumaticPlusPPR2-N02BG-4מכשיר כפתור
מפסק קפיץ Mini-ColibriFine Science Tools17000-01
מאוורר MiniVentהרווארד מנגנון73-0044
אוקלודרבהתאמה אישית
מתומן מטופל מלקחייםFine Science Tools11041-08
אוהאן מכרסם אינטובציהBMR אספקתOhan-201
תמיסת פרפורמלדהיד 4% בצינורות
PE20
PE50
מסתובב פלסטיק (ערוץ אחד)Instech375/25PSכלוב פוסט-ניתוחי
PBS מאגר PBS מעורבב מראש, 10xRoche11666789001מדולל ל-1x
מד לחץמד PIC102D-158D-10/32מכשיר כפתור
טיימר יציאה דיגיטלי לתכנותBN-LINK‎ BND-60/SU105מערכת ניפוח
Puralube Vet משחה אופטלמיתDechra17033-211-38
מחזירים עם 18200-07 אלסטומרFine Science Tools18200-10 ו-18200-11
מוניטור כירורגי מכרסמים +Scintica900-0053-01
מלקחיים לקשירת תפרים עם ידית עגולהFine Science Tools18026-10
נעילת הצמד מסתובב חבית (גודל 5)טופר נשר‎ 01032-005כלוב לאחר ניתוח
מחזיקי מחטים ישריםכלי מדע עדינים12060-01
קשירהInstechPS62
Edge ארה World חץ מסיבי פחמן ספוגי גזה PBS סנטה קרוז sc-281692 צינורות

מקורות

  1. Tsao, C. W., et al. Heart disease and stroke statistics-2023 update: A report from the American heart association. Circulation. 147 (8), e93-e621 (2023).
  2. Chilian, W. M., et al. Coronary collateral growth--back to the future. J Mol Cell Cardiol. 52 (4), 905-911 (2012).
  3. Liu, Z., et al. Coronary collateralization shows sex and racial-ethnic differences in obstructive artery disease patients. PLoS One. 12 (10), e0183836(2017).
  4. Kinnaird, T., Stabile, E., Zbinden, S., Burnett, M. S., Epstein, S. E. Cardiovascular risk factors impair native collateral development and may impair efficacy of therapeutic interventions. Cardiovasc Res. 78 (2), 257-264 (2008).
  5. Traupe, T., Gloekler, S., de Marchi, S. F., Werner, G. S., Seiler, C. Assessment of the human coronary collateral circulation. Circulation. 122 (12), 1210-1220 (2010).
  6. Schaper, W. Collateral vessels reduce mortality. Eur Heart J. 33 (5), 564-566 (2012).
  7. Meier, P., et al. The impact of the coronary collateral circulation on mortality: a meta-analysis. Eur Heart J. 33 (5), 614-621 (2012).
  8. Hirode, G., Wong, R. J. Trends in the prevalence of metabolic syndrome in the United States, 2011-2016. JAMA. 323 (24), 2526-2528 (2020).
  9. Turhan, H., et al. Impaired coronary collateral vessel development in patients with metabolic syndrome. Coron Artery Dis. 16 (5), 281-285 (2005).
  10. Ishikawa, K., et al. Development of a preclinical model of ischemic cardiomyopathy in swine. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 301 (2), H530-H537 (2011).
  11. Rys, R., et al. An automated coronary artery occlusion device for stimulating collateral development in vivo. J Pharmacol Toxicol Methods. 48 (2), 111-118 (2002).
  12. Toyota, E., et al. Vascular endothelial growth factor is required for coronary collateral growth in the rat. Circulation. 112 (14), 2108-2113 (2005).
  13. Zhang, H., Faber, J. E. De novo collateral formation following acute myocardial infarction: Dependence on CCR2⁺ bone marrow cells. J Mol Cell Cardiol. 87, 4-16 (2015).
  14. Jamaiyar, A., et al. The essential role for endothelial cell sprouting in coronary collateral growth. J Mol Cell Cardiol. 165, 158-171 (2022).
  15. Yin, L., et al. Induction of vascular progenitor cells from endothelial cells stimulates coronary collateral growth. Circ Res. 110 (2), 241-252 (2012).
  16. Lavine, K. J., Kovacs, A., Weinheimer, C., Mann, D. L. Repetitive myocardial ischemia promotes coronary growth in the adult mammalian heart. J Am Heart Assoc. 2 (5), e000343(2013).
  17. Simons, M., et al. Clinical trials in coronary angiogenesis: issues, problems, consensus: An expert panel summary. Circulation. 102 (11), E73-E86 (2000).
  18. Leavesley, S. J., Ledkins, W., Rocic, P. A device for performing automated balloon catheter inflation ischemia studies. PLoS One. 9 (4), e95823(2014).
  19. Aghajanian, A., et al. Decreased inspired oxygen stimulates de novo formation of coronary collaterals in adult heart. J Mol Cell Cardiol. 150, 1-11 (2021).
  20. He, L., et al. Genetic lineage tracing discloses arteriogenesis as the main mechanism for collateral growth in the mouse heart. Cardiovasc Res. 109 (3), 419-430 (2016).
  21. Das, S., et al. A unique collateral artery development program promotes neonatal heart regeneration. Cell. 176 (5), 1128-1142.e18 (2019).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

מחלה קרדיאלית איסכמיתקולטרליים קורונרייםהעורק היורד הקדמי השמאליסוגר פנאומטיאנגיוגנזהנשקיפת גןמעקב שושלת תאים

מאמר זה פורסם

הסרטון יגיע בקרוב

צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.