אנו מציגים פרוטוקול להקמת מודל חמצון ממברנה חוץ-גופית ער לטווח ארוך (ECMO) בכבשים. תשומת לב מיוחדת ניתנת לניהול והערכה של מערכת הקרישה במהלך מודל ה- ECMO.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
* These authors contributed equally
אנו מציגים פרוטוקול להקמת מודל חמצון ממברנה חוץ-גופית ער לטווח ארוך (ECMO) בכבשים. תשומת לב מיוחדת ניתנת לניהול והערכה של מערכת הקרישה במהלך מודל ה- ECMO.
מחקר זה נועד לחקור את ההשפעות של חמצון ממברנה חוץ-גופית ערה לטווח ארוך (ECMO) על מערכת הקרישה במודל כבשים. בסך הכל נכללו במחקר עשר כבשים בריאות, עם 5 כבשים בכל קבוצה. בקבוצת ECMO VENO-ARTERIAL (V-A ECMO), בוצעה קנולציה בעורק הצוואר הימני ובווריד הצוואר החיצוני הימני. בקבוצת ECMO (V-V ECMO) הוורידית, נעשה שימוש בצנתר בעל לומן כפול כדי להחדיר לווריד הצוואר החיצוני הימני. לאחר התחלת ECMO, הכבשים התאוששו מההרדמה ונשארו ערים במשך 7 ימים. יעד זמן הקרישה המופעל (ACT) נקבע ל-220-250 שניות. בשתי הקבוצות, ה-ACT בפועל נע סביב 250 שניות כאשר מינון הפרין עלה בהדרגה, והגיע לכמעט 60 IU/kg/min בסוף הניסויים. יתר על כן, ערכי זמן התרומבופלסטין החלקי המופעל (APTT) וזמן התרומבין (TT) היו גבוהים משמעותית בקבוצת V-A ECMO בהשוואה לקבוצת V-V ECMO, למרות קבלת אותם מינונים של הפרין. למרות שתוצאות בדיקות המעבדה נעו בטווח נורמלי וסביר, מוקדי אוטם בכליות נצפו בשתי הקבוצות בסוף המחקר.
חמצון ממברנה חוץ-גופית (ECMO) משמש כהתערבות מצילת חיים, ומספק תמיכה לב-ריאה לחולים קשים. הוא מסווג לשתי צורות עיקריות: ECMO VENO-ARKERIAL (V-A ECMO) ו-ECMO VENO-VEOUS (V-V ECMO)1,2. V-A ECMO משמש לחולים הסובלים מאי ספיקת מחזור הדם, ואילו V-V ECMO מועדף לאלו הסובלים מאי ספיקת נשימה אך ללא הפרעות חמורות בתפקוד הלב וכלי הדם 3,4.
פקקת ודימום הם סיבוכים נפוצים בחולי ECMO5. מעגל ה-ECMO חושף דם למשטחים מלאכותיים, ויוזם תגובות קרישה מורכבות6. תהליכים אלה עלולים להוביל לנזק לאנדותל ולהפרעות במיקרו-סירקולציה, וכתוצאה מכך לתפקוד לקוי של איברים חיוניים 7,8. כתוצאה מכך, ניהול יעיל של נוגדי קרישה מערכתיים נחשב חיוני עבור חולי ECMO. למרות זאת, עדיין חסרות ראיות להנחיית אסטרטגיות נוגדות קרישה במסגרות קליניות שונות הקשורות ל-ECMO.
הקמת מודל יציב של בעלי חיים ECMO יכולה לספק תובנות לגבי ההשפעה של ECMO על הגוף, לתרום באופן משמעותי לאופטימיזציה של אסטרטגיות ניהול ECMO, הפחתת סיבוכים הקשורים ל-ECMO ושיפור תוצאות המטופלים בפרקטיקה הקלינית. בעלי חיים גדולים, כמו כבשים וחזירים, הם הבחירות העיקריות להקמת מודלים של ECMO בשל הפרמטרים הפיזיולוגיים שלהם הדומים מאוד לאלה של בני אדם 9,10. עם זאת, למודלים קודמים של ECMO של בעלי חיים גדולים היה זמן תחזוקה של פחות מ-24 שעות, מה שמקשה על הערכה מקיפה של ההשפעה של ECMO על מערכת הקרישה11. לכן, יש צורך להקים מודלים ארוכי טווח של בעלי חיים גדולים של ECMO כדי לחקור ביסודיות את המנגנונים הפתופיזיולוגיים של ECMO. שימוש במודלים ארוכי טווח של בעלי חיים גדולים כדי לחקור את ההשפעות של ECMO על מערכת הקרישה יכול לספק ראיות חזקות יותר לפרקטיקה קלינית.
מחקר זה נועד לבסס מודל V-A ו-V-V ECMO ער לטווח ארוך (7 ימים) בכבשים בריאות. המוקד המרכזי של כל הקמת המודל והערכתו הוא ניהול נוגדי קרישה.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול ניסיוני זה קיבל אישור מהוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים של בית החולים פוואי (מס' 0101-2-20-HX(X)). כל הנהלים עמדו בהנחיות המפורטות במדריך של המכונים הלאומיים לבריאות לשימוש וטיפול בחיות מעבדה. הניסוי נערך במעבדת המפתח של בייג'ינג למחקר פרה-קליני והערכה של חומרי שתלים קרדיווסקולריים, מרכז הניסויים בבעלי חיים של בית החולים פוואי (מס' רישום. CNAS LA0009). במחקר נעשה שימוש בכבשים בריאות שעמדו בתקני ההסגר הנדרשים במרכז הניסויים לבעלי חיים של בית החולים פוואי. יתר על כן, מחקר זה עקב אחר הנחיות מחקר בבעלי חיים: דיווח על ניסויים in vivo . כבשי האן זכרים עם טווח משקל של 50-65 ק"ג וטווח גילאים של 12-24 חודשים (ראה טבלת חומרים) שוכנו בסביבה ספציפית נטולת פתוגנים עם גישה חופשית למזון ומים לפחות שבוע לפני הניתוח. הכבשים חולקו באופן אקראי לשתי קבוצות, כל אחת מורכבת מ-5 פרטים: קבוצת ECMO VENO-ARTERIAL (V-A ECMO) וקבוצת ECMO VENO-VENUOUS (V-V ECMO). הבחירה בכבשים בריאות הייתה מוצדקת על ידי הצורך להעריך במדויק את ההשפעות של תמיכת ECMO על האורגניזם. הציוד והריאגנטים המשמשים במחקר מפורטים בטבלת החומרים.
1. הכנת בעלי חיים
2. קנולציה
3. ייזום ECMO
4. ניהול וניטור לאחר הניתוח
5. המתת חסד
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
בסך הכל הוערכו עשר כבשים במהלך הניסוי כולו, עם חמש כבשים בכל קבוצה (טבלה 1). לאחר התחלת ה-ECMO, כל הכבשים התאוששו מההרדמה ונשארו ערים במשך 7 ימים. בשתי הקבוצות, זרימת ECMO עלתה על 1.8 ליטר לדקה. בקבוצת V-V ECMO, הזרימה נעה סביב 1.8 ליטר לדקה, בעוד שבקבוצת V-A ECMO היא נעה בין 2.3 ליטר לדקה ל-1.8 ליטר לדקה (איור 1A). הסימנים החיוניים של כל כבשה נותרו יציבים. רמת חומצת החלב בדם הייתה מתחת ל-1 ממול/ליטר בין 60 שעות ל-180 שעות אחרי ההתעוררות בשתי הקבוצות (אי...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
מחקר זה מתאר את ההליך להקמת מודלים חזקים וארוכי טווח של הישרדות עבור V-V ו-V-A ECMO בכבשים. כל בעלי החיים ששרדו הראו סימנים חיוניים יציבים, ולא התרחשו אירועי דימום או קרישה חמורים. זרימת ECMO וביצועי החמצון נותרו יציבים, ללא פגיעות פתולוגיות משמעותיות. המחקר מספק מידע מפורט על ניהול נוגדי קרישה.
ניהול נוגדי קרישה ממלא תפקיד מכריע בטיפול פרי-ניתוחי ECMO. בתחילה, בהתבסס על מחקרים קודמים, היעד ACT נקבע על 180-220 שניות 14,15,16,17.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
למחברים אין מה לחשוף.
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| מנתח ACT | Hemochron, ארה"ב | ג'וניור מכונת | |
| Drager, גרמניה | פרימוס | ||
| Edwards Lifescience, ארה"ב | 18-Fr | ספק גישה חוזרת לעורק עבור | |
| מנתח הכימיה של הדם | מעבדות IDEXX, ארה"ב | מנתח | |
| Abbott, ארה"ב | Abbott i-STAT1 | ||
| משאבה צנטריפוגלית | Jiangsu STMed Technologies, סין | STM CP-24 I | |
| כונן משאבה צנטריפוגלי וקונסולה | ג'יאנגסו STMed Technologies, סין | OASSIST STM001 | |
| מנתח בדיקת קרישה | בייג'ינג Succeeder Technology, סין | SF-8050 | |
| מנתח ספירת דם שלם | סימנס בריאות, גרמניה | ADVIA 2120i | |
| משאבת מיקרו הזרקה דו-ערוצית | Zhejiang Smith Medical Instrument, סין | WZS-50F6 | |
| קטטר לומן כפול | MAQUET Avalon Elite, גרמניה | 23-Fr | לספק גישות החזרה וניקוז לווריד הצוואר החיצוני הימני עבור VV-ECMO |
| Flurbiprofen | Beijing Tide Pharmaceutical Co., Ltd., סין | 5 מ"ל: תוכנת GraphPad 50 מ"ג | |
| תוכנת GraphPad, ארה"ב | GraphPad Prism v9.0 | ניתוח סטטיסטי | |
| Heparin | שנחאי Shangyao No.1 Biochemical Pharmaceutical Co., Ltd., סין | 2 מ"ל: 12500IU | |
| אלקטרו-כירורגי בתדר גבוה | COVIDIEN, ארה"ב | Force F | |
| מוניטור רפואי רב פרמטרי | פיליפס, הולנד | MP60 | |
| Medos, גרמניה | Hilite 7000LT | ||
| ערכת חמצן | Maquet, גרמניה | BE-PLS 2050 | |
| פרופופול | שי' ליבאנג פרמצבטיקה בע"מ, סין | 20 מ"ל: 0.2 גרם | |
| קטטר ורידי מרכזי בעל לומן יחיד | TuoRen, סין | 18Fr | הכנס בעורק הצוואר השמאלי לניטור המודינמי ודגימת דם. |
| כבשי האן זנב קטן | Jinyutongfeng Commercial and Trade Co. Ltd, סין | משקל: 50-65 ק"ג, גיל: 12-24 חודשים | |
| קטטר ורידי מרכזי בעל שלושה לומן | TuoRen, סין | 7Fr | הכנס לווריד הצוואר השמאלי למתן נוזלים תוך ורידי, הזרקת תרופות ודגימת דם. |
| מכונת אולטרסאונד | GE, ארה"ב | צנתר ורידי E9 | |
| Edwards Lifescience, ארה"ב | 24-Fr | לספק את גישת הניקוז לווריד עבור מאוורר VA-ECMO | |
| Drager, גרמניה | סבינה |
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
מאמר זה פורסם
הסרטון יגיע בקרוב