מאמר שיטה

הקמת מודל עכבר Xenograft שמקורו במטופל עם רקמות אוסטאוסרקומה אנושיות

2K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/66491

⸱

22 במרץ 2024

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Longhua Hospital, Shanghai University of Traditional Chinese Medicine, 2Key Laboratory of theory and therapy of muscles and bones, Ministry of Education

* These authors contributed equally

במאמר זה

סיכום

הפרוטוקול הנוכחי מתאר את השיטה לביסוס מודל עכבר קסנוגרפט (PDX) הנגזר ממטופל באמצעות רקמת אוסטאוסרקומה אנושית.

תקציר

אוסטאוסרקומה היא גידול העצם הממאיר הראשוני השכיח ביותר בקרב ילדים ובני נוער. למרות פיתוח תוכניות טיפול חדשות בשנים האחרונות, הפרוגנוזה של חולי אוסטאוסרקומה לא השתפרה באופן משמעותי. לכן, חיוני לבסס מודל פרה-קליני חזק עם נאמנות גבוהה. מודל הקסנוגרפט הנגזר מהמטופל (PDX) משמר נאמנה את המאפיינים הגנטיים, האפיגנטיים וההטרוגניים של ממאירויות אנושיות עבור כל מטופל. כתוצאה מכך, מודלים של PDX נחשבים למודלים אותנטיים in vivo לחקר סוגי סרטן שונים במחקרי טרנספורמציה. מאמר זה מציג פרוטוקול מקיף ליצירה ותחזוקה של מודל עכבר PDX המשקף במדויק את התכונות המורפולוגיות של אוסטאוסרקומה אנושית. זה כרוך בהשתלה מיידית של רקמת אוסטאוסרקומה אנושית שזה עתה נכרתה בעכברים מדוכאי חיסון, ואחריה עוברים רצופים. המודל המתואר משמש פלטפורמה לחקר הגידול, העמידות לתרופות, הישנות וגרורות של אוסטאוסרקומה. בנוסף, הוא מסייע בסינון טיפולי היעד ובהקמת תוכניות טיפול מותאמות אישית.

מבוא

אוסטאוסרקומה היא ממאירות עצם ראשונית שמקורה בתאי אונה אינטרוסוסית והיא שכיחה ביותר בקרב מתבגרים כמו גם ילדים. זה קורה לעתים קרובות באפיפיזה של דיאפיזה ארוכה ומאופיין ממאירות גבוהה, גרורות מוקדמות, פרוגנוזה ירודה 1,2. גרורות ריאה הן סיבת המוות העיקרית בחולי אוסטאוסרקומה. שיעור ההישרדות ל-5 שנים של חולים עם אוסטאוסרקומה לא גרורתית הוא 65%-70%3. עם זאת, במהלך 40 השנים האחרונות, שיעור ההישרדות של 5 שנים (רק 20%) מהחולים עם אוסטאוסרקומה גרורתית לא השתפר באופן משמעותי, ול -25% מחולי אוסטאוסרקומה יש גרורות בזמן האבחנה4. נכון לעכשיו, תרופות הקו הראשון לטיפול באוסטאוסרקומה הגיעו לקונצנזוס, אך עדיין קיימים הבדלים משמעותיים במשטר הכימותרפיה ובזמן הטיפול5. חשוב לבצע ניסויים פרה-קליניים המבוססים על מודלים מתאימים של בעלי חיים כדי להשיג משטרי כימותרפיה יעילים יותר.

כיום, מודלים המשמשים בדרך כלל לניסויים פרה-קליניים של אוסטאוסרקומה כוללים תרבית תאים מבוססת קו תאים במבחנה וקסנוגרפטים הנגזרים מתאי in vivo (CDX), כמו גם xenografts שמקורם במטופל (PDX)6,7.

קווי התאים נוחים לתרבית ולשימוש במחקרי מבחנה , או להשתלה בעכברים מדוכאי חיסון כדי לבסס מודלים של CDX8. עם זאת, קווי תאים בתרבית במבחנה עשויים שלא לשקף במדויק את ההטרוגניות של ממאירויות ואת המאפיינים האישיים של חולים עקב מוטציות פוטנציאליות המתרחשות כדי להסתגל לסביבת תרבית החוץ גופית במהלך מעברים חוזרים. בנוסף, הם חסרים את המיקרו-סביבה ואת מערכת החיסון הדרושים לצמיחת הגידול ולהתפתחותו in vivo. בעוד מודלים CDX מציעים כמה יתרונות על פני תרבית תאים במבחנה , הם עדיין לא משקפים באופן מלא את המאפיינים האישיים של חולי אוסטאוסרקומה, אם כי רקמות הגידול שהתקבלו מודלים CDX יש הטרוגניות intratumoral מוגבלת ייצוג המערכת החיסונית בהשוואה קווי תאים בתרבית במבחנה9. לכן, הקמת מודל פרה-קליני עם נאמנות גבוהה היא קריטית.

מודלים של PDX כוללים השתלה מיידית של רקמות סרטניות אנושיות שזה עתה נכרתו בעכברים מדוכאי חיסון. שיטה זו מאפשרת שימור נאמן של מאפיינים גנטיים, אפיגנטיים והטרוגניים של ממאירויות אנושיות לכל חולה, גם לאחר מעברים רצופים בעכברים. יתר על כן, מודלים של PDX ידועים כמנבאים במדויק תוצאות קליניות מאוחרות יותר10, מה שהופך אותם לכלים רבי ערך ליצירת טיפולים מותאמים אישית ולקידום מחקר רפואה מדויקת11.

עבודה זו מתארת את ההליך לביסוס מודל PDX בעכברים מדוכאי חיסון על ידי השתלת רקמת אוסטאוסרקומה אנושית. מודלים כאלה משמשים פלטפורמות לביצוע ניסויים פרה-קליניים לאוסטאוסרקומה.

פרוטוקול

כל המחקרים המערבים רקמות אנושיות אושרו על ידי ועדת האתיקה המוסדית של בית החולים Longhua, המסונף לאוניברסיטת שנגחאי לרפואה סינית מסורתית (שנחאי, סין) (2013LC52), והתקבלה הסכמה מדעת בכתב מהמטופלים בהתאם להצהרת הלסינקי. מספר IACUC עבור מחקר זה בבעלי חיים הוא PZSHUTCM221017013. עכברי CAnN.Cg-Foxn1nu/Crl זכרים בני ארבעה שבועות קיבלו דיאטת מכרסמים מוקרנת כפולה GB 14924.3 ומים סטריליים, ושוכנו בכלוב עכברי IVC עם חמישה עכברים בכל כלוב, בתנאי SPF עם מחזור אור/חושך של 12 שעות. טבלת החומרים כוללת מידע מפורט על כל החומרים, הריאגנטים והמכשירים המשמשים בפרוטוקול זה.

1. הכנת רקמת אוסטאוסרקומה אנושית

הערה: במחקר זה, רקמת אוסטאוסרקומה אנושית נכרתה12 מנגע עצם הירך של חולה אוסטאוסרקומה בן 15 לפני כימותרפיה.

  1. יש לאחסן מיד את רקמת האוסטאוסרקומה שזה עתה נכרתה בתמיסה המגנה על הרקמה כדי למקסם את שימור הפעלת תאי אוסטאוסרקומה לאחר שטיפה במי מלח פיזיולוגיים סטריליים.
    הערה: רקמות אוסטאוסרקומה שזה עתה נכרתו חייבות להיות מושתלות בעכברים בהקדם האפשרי. ניתן לאחסן אותם בתמיסת מגן הרקמה למשך 24 שעות לכל היותר לפני ההשתלה. רקמות אוסטאוסרקומה המשמשות לדוגמנות חייבות להיות מחולים שלא קיבלו כימותרפיה. פעילות תאי הגידול מחולים שקיבלו כימותרפיה תהיה ירודה, מה שיוביל לכישלון הקמת המודל ולאובדן נאמנות גבוהה.
  2. העבר את רקמות האוסטאוסרקומה הטריות המאוחסנות בתמיסת מגן הרקמה למעבדה בהקדם האפשרי.
  3. הכינו מכשירים וחומרים ניסיוניים לביסוס מודל PDX: אזמלים (איור 1A); פינצטה אופתלמית (איור 1B,C); מספריים אופתלמיים (איור 1D); מחט תפר (איור 1E); קו התפר (איור 1F); מחזיק מחט ישר (איור 1G); עט סימון (איור 1H).
    הערה: ודא שכל כלי הניתוח מעוקרים על ידי autoclaving לפני השימוש.
  4. שטפו את רקמות האוסטאוסרקומה פעמיים במי מלח פיזיולוגיים סטריליים מקוררים מראש במכסה מנוע סטרילי.
  5. הסר אזורים של רקמת אוסטאוסרקומה עם דימום ונמק.
  6. חותכים את רקמת האוסטאוסרקומה המנוקה ל-3 מ"מ3 חתיכות בעזרת אזמל בצלחת תרבית המכילה מלח פיזיולוגי סטרילי מקורר מראש ושומרים אותו על קרח.

2. הקמת מודלים של PDX על ידי השתלת רקמת אוסטאוסרקומה באזור אגף העכבר

  1. ניהול שיכוך כאבים טרום ניתוחי של meloxicam (5 מ"ג / ק"ג / 24 שעות) על ידי הזרקה תת עורית בעכברים ומניחים את העכברים העירומים על וילונות כירורגיים סטריליים. לספק תמיכה תרמית לאורך כל ההליך.
  2. השראת הרדמה בעכברים על ידי חשיפתם ל-3% איזופלורן ו-97% חמצן. לאחר שהעכברים מורדמים לחלוטין, מעבירים אותם לקונוס האף ושומרים על הרדמה עם 1.5% איזופלורן ו-98.5% חמצן.
  3. צבטו את אצבעות הרגליים כדי לוודא שהעכברים מורדמים לחלוטין, והמתינו זמן רב יותר אם עדיין יש עוויתות או תגובות עוויתיות.
    הערה: כל ההליכים חייבים להתבצע באמצעות ציוד סטרילי במכסה מנוע סטרילי. הימנע מיובש של עכברים במהלך הרדמה על ידי מריחת משחה אופתלמית על עיניהם.
  4. אבטחו את העכבר בתנוחת דקוביטוס צידית (איור 2A). יש לחטא צד אחד של אזור אגף העכבר להשתלת רקמת אוסטאוסרקומה 3 פעמים עם סבבים מתחלפים של יוד פובידון וכדורי צמר גפן מחטאים אתנול 70%.
    הערה: חיטוי כירורגי מתבצע בתבנית מעגלית, המתחילה במרכז ומסתחררת כלפי חוץ.
  5. סמן את אתר החתך הניתוחי על העור בעט טוש.
  6. בצעו חתך בקוטר 5 מ"מ מהעור לרקמות התת עוריות בעזרת אזמל (איור 2B).
  7. הרימו את העור הצדדי העליון של שולי החתך בעזרת פינצטה אופתלמית באמצעות יד שמאל, ובצעו דיסקציה קהה כלפי מעלה מתחת לדרמיס של העכברים עם מחזיק מחט ישר באמצעות יד ימין (איור 2C).
  8. החזיקו את העור הצדדי העליון של החתך עם הפינצטה האופתלמית באמצעות יד שמאל, והניחו את רקמת האוסטאוסרקומה מתחת לעור כ-5 מ"מ מעל שולי החתך בעזרת פינצטה אופתלמית באמצעות יד ימין להשתלת רקמת אוסטאוסרקומה (איור 2C).
    הערה: ודא שרקמת האוסטאוסרקומה מושתלת ממש מתחת לדרמיס של העור. דיסקציה קהה מבוצעת באמצעות מלקחיים ישרים וקהים, כגון מחזיק מחט ישר, כדי למנוע חדירה לחלל בית החזה של העכבר תוך מציאת שכבת הדרמיס של עור העכבר.
  9. תפרו את החתך באמצעות תפר נספג עם 2-3 תפרים לחתך של 5 מ"מ (איור 2D).
  10. החזירו את העכברים לכלובים נקיים והשגיחו עליהם עד שיתאוששו לחלוטין מההרדמה.
    הערה: PDX שנוצר על ידי השתלת רקמת אוסטאוסרקומה אנושית מסומן כמעבר 0 (P0), PDX שהוקם על ידי השתלת רקמת PDX ב-P0 מסומן כמעבר 1 (P1), ואחריו P2 ו-P3.

3. איסוף רקמות גידול PDX

  1. למדוד את נפח הגידול פעם בשבוע. כאשר גודל הגידול מגיע ל 1500 מ"מ3, הרדימו את העכברים בשיטת פריקת צוואר הרחם לאחר שאיפתCO2 . נקודות קצה אנושיות כוללות כיב גידול או בעיות בניידות הגפיים הקדמיות.
    הערה: מדוד את הקוטר הארוך (a) והקוטר הקצר (b) של הגידול באמצעות קליפר. חשב את נפח הגידול (V) באמצעות הנוסחה: V = 1/2 × a × b2.
  2. מקם את העכבר לרוחב כדי לחשוף את הגידול, ולחטא את העור באתר הגידול עם כדור צמר גפן ספוג אלכוהול.
  3. השתמש מספריים אופתלמיים כדי להפריד את הגידול כולו. שוקלים את מסת הגידול באמצעות סולם אלקטרוני.

4. בדיקה פתולוגית של רקמות גידול ראשוניות קליניות ו- PDX

  1. תקן את רקמות הגידול13 בצינור 50 מ"ל המכיל 30 מ"ל של תמיסת פורמלין חוצצת ניטרלית 10% למשך 24 שעות. שטפו היטב את רקמות הגידול במים זורמים כדי להסיר את הקיבוע.
  2. לייבש ולהטמיע את רקמות הגידול בפרפין14.
  3. פורסים את רקמות הגידול ומבצעים בדיקה היסטולוגית שגרתית15.

תוצאות

פרוטוקול זה מתאר את ההליך המפורט לביסוס מודל עכבר PDX, המשמר את התכונות המורפולוגיות של אוסטאוסרקומה אנושית לאחר השתלה מיידית של רקמת אוסטאוסרקומה אנושית שזה עתה נכרתה ומעברים עוקבים בעכברים. כאן, מודל עכבר PDX הוקם בהצלחה באמצעות רקמת אוסטאוסרקומה אנושית.

איור 3A מראה עכבר מייצג של PDX ב-P0, חודשיים לאחר השתלת רקמת אוסטאוסרקומה של עצם הירך ממטופל בן 15. איור 3B מתאר עכבר מייצג של PDX ב-P1, חודש לאחר השתלת רקמת PDX ב-P0. איור 3C מציג עכבר מייצג של PDX ב-P2, חודש לאחר השתלת רקמת PDX ב-P1. איור 3D מדגים עכבר מייצג של PDX ב-P3, חודש לאחר השתלת רקמת PDX ב-P2.

עכברים הוקרבו בשיטת פריקת צוואר הרחם לאחר שאיפתCO2 כאשר גודל הגידול הגיע ל -1,500 מ"מ3 כדי לאסוף את רקמות הגידול PDX. רקמות הגידול של חולים קליניים ועכברים הוטמעו בפרפין והיו חשופות לצביעת H&E. תמונה מייצגת של צביעת H&E של רקמת הגידול הקליני של המטופל מוצגת באיור 4A. תמונות מייצגות של צביעת H&E של רקמות גידול עכבר PDX ב-P0, P1 ו-P2 מוצגות באיור 4B,C,D. מאפייני האוסטאוסרקומה, המאופיינים בתאים קטנים עם גרעינים עגולים והיפרכרומטיים ברקמות הגידול של המטופל הקליני ההורי, נשמרו ב- PDX מבוסס ב- P0, P1 ו- P2.

figure-results-1
איור 1: כלי ניתוח. (A) אזמל. (ב,ג) פינצטה אופתלמית. (D) מספריים עיניים. (E) מחט תפר. (ו) קו התפרים. (G) מחזיק מחט ישר. (ח) עט סימון. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.

figure-results-2
איור 2: הקמת מודל PDX. (A) אתר השתלת רקמת אוסטאוסרקומה באזור צלע העכבר מסומן בעט סימון. (B) חתך באורך 5 מ"מ נחתך מהעור לרקמה התת עורית. (C) דיסקציה קהה והשתלת רקמת אוסטאוסרקומה. (D) חתך תפור. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.

figure-results-3
איור 3: גידול של PDX שהושתל במקור ברקמת אוסטאוסרקומה של עצם הירך ממטופל בן 15. (A) PDX שנוצר על ידי השתלת רקמת אוסטאוסרקומה אנושית (P0). (B) PDX שנוצר על ידי השתלת רקמת PDX ב-P0 (P1). (C) PDX שנוצר על ידי השתלת רקמת PDX ב-P1 (P2). (D) PDX שנוצר על ידי השתלת רקמת PDX ב-P2 (P3). אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.

figure-results-4
איור 4: צביעת Hematoxylin-Eosin (H&E) של חלקי רקמות מרקמות קליניות ראשוניות ורקמות PDX. צביעת H&E זיהתה מאפיינים היסטולוגיים של (A) אוסטאוסרקומה של עצם הירך מהמטופל בן ה-15, (B) PDX ב-P0, (C) PDX ב-P1, (D) PDX ב-P2. פסי קנה מידה: (A-D) 100 מיקרומטר; (E-H) 20 מיקרומטר. לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.

דיון

מודלי PDX יכולים לדמות את המאפיינים של סרטן אנושי ולשמור על דמיון רב יותר עם הגידול הראשוני, כולל שינויים גנטיים וגנומיים, היסטולוגיה, הטרוגניות ופרופיל ביטוי גנים 16,17,18,19. לכן, הם משמרים את הפנוטיפים המולקולריים והגנוטיפים של חולי סרטן, ומספקים גישות חדשניות לחקר ביולוגיה ולהערכת טיפולים פוטנציאליים. גישות אלה כוללות סינון פרה-קליני של תרופות אנטי-סרטניות חדשניות עם תגובות דומות מאוד לתגובות קליניות אמיתיות, זיהוי סמנים ביולוגיים של עמידות לתרופות, סינון תרופות רגישות בבחירת משטר טיפול קליני מותאם אישית, וחיזוי תוצאות חולים20. יתר על כן, תהליך ההקמה של דגמי PDX הוא פשוט יחסית ואינו דורש ציוד מיוחד.

מחקר זה ביסס בהצלחה מודל עכבר PDX באמצעות רקמות אוסטאוסרקומה אנושיות. נחשפו מספר היבטים מרכזיים של ביסוס מוצלח של מודל PDX עם רקמות אוסטאוסרקומה אנושיות. ראשית, יכולת ההשתלה של רקמות אוסטאוסרקומה אנושיות בעכברים אפשרית, ומאפשרת לחקור את הביולוגיה של אוסטאוסרקומה אנושית במערכת מורין. ניתן לייחס את שיעור היווצרות הגידול הגבוה לשימוש בעכברים מדוכאי חיסון חסרי מערכת חיסונית מתפקדת, המאפשרים לתאי אוסטאוסרקומה מושתלים להתרבות ללא דחייה. יתר על כן, מחקר זה הראה כי מודל PDX שמר על ההיסטולוגיה של רקמות אוסטאוסרקומה האנושיות המקוריות. המורפולוגיה של הגידול והמאפיינים ההיסטופתולוגיים היו דומים בין הגידול הראשוני של החולה לבין גידולי PDX. זה מצביע על כך שמודל PDX משחזר במדויק אוסטאוסרקומה, מה שהופך אותו לכלי רב ערך לחקר התקדמות אוסטאוסרקומה, גרורות ותגובה לטיפולים.

עם זאת, יש להתייחס למספר נקודות מפתח במהלך מידול PDX. ראשית, רקמות אוסטאוסרקומה אנושיות המשמשות להשתלה חייבות לעבור כריתה טרייה ויש לאחסן אותן בתמיסת הגנה על רקמות בהקדם האפשרי. עדיף להשלים את ההשתלה תוך 12 שעות לאחר הכריתה, אם כי פעילות תאי הגידול ברקמות אוסטאוסרקומה האנושיות המאוחסנות בתמיסת ההגנה על הרקמה יכולה להישמר למשך 24 שעותו-16 דקות לכל היותר. שנית, עדיף להשתמש ברקמות גידול מחולים שלא קיבלו כימותרפיה כדי לשמר באופן מקסימלי את הפנוטיפים המולקולריים והגנוטיפים של החולים, אם כי רקמות אוסטאוסרקומה אנושיות מחולים שקיבלו כימותרפיה פעם או פעמיים יכולות להשתיל בהצלחה בעכברים מדוכאי חיסון. יתר על כן, פעילות תאי הגידול תהיה ירודה אם המטופל יקבל כימותרפיות מרובות, מה שיוביל לכישלון מודל ההשתלה; עם זאת, רקמות אוסטאוסרקומה מחולים חוזרים עשויות להיות בעלות שיעור היווצרות גידול מוצלח יותר לאחר השתלתן בעכברים מדוכאי חיסון מאשר רקמות אוסטאוסרקומה מחולים שאובחנו בתחילה. שלישית, השתלת רקמות אוסטאוסרקומה ממש מתחת לדרמיס העור תשפר את קצב היווצרות הגידול בעכברים מדוכאי חיסון21.

חשוב להכיר במגבלות של מחקר זה. ראשית, מחזור ההקמה של מודל PDX הוא ארוך ולוקח 4-12 שבועות מההשתלה ועד היווצרות הגידול22. שנית, מידע הקשור לייזום הגידול ולאטיולוגיה עשוי להיעלם מכיוון שרקמות אוסטאוסרקומה של תאים סרטניים מפותחות מושתלות במלואן, ותת-שיבוטים נדירים או שינויים גנומיים עלולים ללכת לאיבוד במהלך תהליך ההשתלה. ריצוף גנום שלם של גידולי PDX והשוואה עם דגימות חולים יהיו בעלי ערך להערכת הנאמנות הגנטית של מודל23. שלישית, תאים מארחים של עכבר יכולים לחדור לגידולים, מה שעלול להשפיע על פעילות תאי הגידול9. רביעית, מודל PDX יש שיעור כישלון של כ 50% 24,25. לבסוף, במקרים מסוימים, גרורות סרטניות לא ניתן לחקור בשל היעדר גרורות תאי הגידול לאחר השתלתם בעכברים מדוכאי חיסון26.

לסיכום, מחקר זה מאמת את הביסוס המוצלח של מודל עכבר PDX באמצעות רקמות אוסטאוסרקומה אנושיות. מודל זה משחזר נאמנה את המאפיינים ההיסטופתולוגיים של הגידול המקורי, ומספק כלי רב ערך לחקר הביולוגיה של אוסטאוסרקומה ולבדיקת טיפולים פוטנציאליים. מחקרים נוספים המשתמשים במודל PDX זה ישפרו את הבנתנו את אוסטאוסרקומה ויובילו לפיתוח אסטרטגיות יעילות יותר עבור חולים אלה.

גילויים

המחברים מצהירים כי אין אינטרסים כלכליים מתחרים.

תודות

עבודה זו נתמכת על ידי מענקים מ (1) הקרן הלאומית למדעי הטבע (81973877 ו -82174408); (2) פרויקט הבנייה של מרכז המחקר בעדיפות עליונה בשנחאי (2022ZZ01009); (3) תוכנית המו"פ הלאומית של סין (2020YFE0201600); (4) מרכז שנגחאי לחדשנות שיתופית של טרנספורמציה תעשייתית של הכנת TCM בבית חולים ו (5) פרויקטי מחקר במסגרת התקציב של אוניברסיטת שנגחאי לרפואה סינית מסורתית (2021LK047).

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
10% פורמלין תמיסה ניטרליתווהאן Saiweier ביוטכנולוגיה ושות', בע"מG1101-500 מ"ללתקן את הרקמות
חיטוייפן Hiryama CompanyHVE-50מכשירים כירורגיים לעיקור
CAnN.Cg-Foxn1nu/Crlשנחאי SLAC מעבדה בעלי חיים ושות', בע"מ/קליפר בעלי חיים
Yantai גרין יער כלים ושות', בע"מ034180Aלמדוד את נפח הגידול
צלחת (60 מ"מ)שנחאי NianYue ביוטכנולוגיה ושות', בע"מ430166, קורנינגדגימה במהלך ההשתלה
כדורי כותנה מחטאיםשנחאי Honglong Industrial Co., Ltd.20230627לחטא את עורם של עכברים
כפפות סטריליות חד פעמיותGuilin Hengbao Health Protection Co., Ltd.YT21131פעולה סטרילית
אריה כפול מוקרן מכרסמים דיאטהSuzhou Shuangshi ניסיונית הזנת בעלי חיים טכנולוגיה ושות', בע"מGB 14924.3מזון לבעלי חיים
משקל אלקטרונישנחאי NianYue ביוטכנולוגיה ושות', בע"מ1-2000לשקול את משקל הגידול
Eosinשנחאי Gengyun ביוטכנולוגיה ושות', בע"מE4009-25Gהמטוקסילין אאוזין כתם
Hematoxylinשנחאי Gengyun ביוטכנולוגיה ושות', בע"מH3136-25Gהמטוקסילין אאוזין כתם
Isofluraneשנזן RWD חיים טכנולוגיה ושות', בע"מVETEASYעכבר הרדמה 
IVCs כלוב עכבריםSuzhou Monkey King בעלי חיים ציוד ניסיוני טכנולוגיה ושות', בע"מHH-MMB-2מחסום בעלי חיים
סימן עטזברה מסחר (שנזן) ושות', בע"מYYST5סמן את החתך הכירורגי
אולימפוס מיקרוסקופ אופטיאולימפוס יפניתBH20סריקת פרוסות רקמה
משחת עינייםשנחאי Gengyun ביוטכנולוגיה ושות', בע"מSOICOEYEGRLהימנע מיובש בעיניים של עכברים במהלך ההרדמה
מספריים עינייםשנחאי NianYue ביוטכנולוגיה ושות', בע"מY00030 JZלחתוך את העור
פינצטה עינייםשנחאי NianYue ביוטכנולוגיה ושות', בע"מBS-ZER-S-100 Biosharpלהחזיק רקמות אוסטאוסרקומה במהלך ההשתלה
פרפיןג'יאנגסו שיטאי ציוד ניסיוני ושות', בע"מ80200-0015פרפין רקמת אוסטאוסרקומה קבורה
Lyca Microsystem (שנחאי) מסחר ושות', בע"מRM2235מדור רקמות אוסטאוסרקומה מלוח
פיזיולוגיגואנגג'ואו Jinsheng ביוטכנולוגיה ושות', בע"מ605-004057שטיפה ואחסון זמני של רקמת אוסטאוסרקומה
אזמלמכשירים כירורגיים במפעל מכשירים כירורגיים של שנחאי מכשירים רפואיים (קבוצה) ושות', בע"מJ11010-10# JZהפרדת רקמת אוסטאוסרקומה וביצוע חתכים כירורגיים
מכסה מנוע סטריליThermo Fisher Technology (China) Co., Ltd.ECO0.9
וילונות כירורגיים סטרילייםהנאן Huayu ציוד רפואי ושות', בע"מ20160090לספק אזור ניתוח סטרילי
מחזיק מחט ישרשנחאי Gengyun ביוטכנולוגיה ושות', בע"מJ31050 JZלתפור את קו תפר הפצע
שנחאי Pudong Jinhuan מוצרים רפואיים ושות', בע"מF3124לתפור את הפצע
תפר מחטשנחאי Pudong Jinhuan מוצרים רפואיים ושות', בע"מF3124לתפור את הפצע
תמיסת מגן רקמותנאנג'ינג שנגהאנג ביוטכנולוגיה ושות', בע"מBC-CFM-03לשמור על הפעילות של תאי רקמה
צינור (50 מ"ל)שנחאי Baisai, ביוטכנולוגיה ושות', בע"מBLD-BL2002500התקן פתרון קיבוע פורמלין
חברת מכונת חיתוך לשולחן ניתוחים

מקורות

  1. Saraf, A. J., Fenger, J. M., Roberts, R. D. Osteosarcoma: accelerating progress makes for a hopeful future. Front Oncol. 8, 4(2018).
  2. Ligon, J. A., et al. Pathways of immune exclusion in metastatic osteosarcoma are associated with inferior patient outcomes. J Immunother Cancer. 9 (5), e001772(2021).
  3. Miwa, S., et al. Current and emerging targets in immunotherapy for osteosarcoma. J Oncol. 2019, 7035045(2019).
  4. Eaton, B. R., et al. Osteosarcoma. Pediatr Blood Cancer. 68 (2), e28352(2021).
  5. Ritter, J. Osteosarcoma. Ann Oncol. 21, 320-325 (2010).
  6. Lowery, C. D., et al. Broad spectrum activity of the checkpoint kinase 1 inhibitor prexasertib as a single agent or chemo potentiator across a range of preclinical pediatric tumor models. Clin Cancer Res. 25 (7), 2278-2289 (2019).
  7. Hingorani, P., et al. Trastuzumab deruxtecan, antibody-drug conjugate targeting Her2, is effective in pediatric malignancies: a report by the pediatric preclinical testing consortium. Mol Cancer Ther. 21 (8), 1318-1325 (2022).
  8. Brennecke, P., et al. CXCR4 antibody treatment suppresses metastatic spread to the lung of intratibial human osteosarcoma xenografts in mice. Clin Exp Metastasis. 31 (3), 339-349 (2014).
  9. Pan, B., Wei, X., Xu, X. Patient-derived xenograft models in hepatopancreatobiliary cancer. Cancer Cell Int. 22 (1), 41(2022).
  10. Tentler, J. J., et al. Patient-derived tumor xenografts as models for oncology drug development. Nat Rev Clin Oncol. 9 (6), 338-350 (2012).
  11. Yoshida, G. J. Applications of patient-derived tumor xenograft models and tumor organoids. J Hematol Oncol. 13 (1), 4(2020).
  12. Stitzlein, R. N., Wojcik, J., Sebro, R. A., Balamuth, N. J., Weber, K. L. Team approach: Osteosarcoma of the distal part of the femur in adolescents. JBJS Rev. 5 (12), 5(2017).
  13. Kai, K., et al. Formalin fixation on Her-2 and PD-l1 expression in gastric cancer: A pilot analysis using the same surgical specimens with different fixation times. World J Clin Cases. 7 (4), 419-430 (2019).
  14. Yang, T. S., et al. A practical protocol to prepare paraffin-embedded whole tick histology sections. Ticks Tick Borne Dis. 14 (4), 102162(2023).
  15. Chang, J., et al. Matrine inhibits prostate cancer via activation of the unfolded protein response/endoplasmic reticulum stress signaling and reversal of epithelial to mesenchymal transition. Mol Med Rep. 18 (1), 945-957 (2018).
  16. de Alava, E. Ewing sarcoma, an update on molecular pathology with therapeutic implications. Surg Pathol Clin. 10 (3), 575-585 (2017).
  17. Hidalgo, M., et al. Patient-derived xenograft models: An emerging platform for translational cancer research. Cancer Discov. 4 (9), 998-1013 (2014).
  18. Eoh, K. J., et al. Comparison of clinical features and outcomes in epithelial ovarian cancer according to tumorigenicity in patient-derived xenograft models. Cancer Res Treat. 50 (3), 956-963 (2018).
  19. Stewart, E. L., et al. Clinical utility of patient-derived xenografts to determine biomarkers of prognosis and map resistance pathways in EGFR-mutant lung adenocarcinoma. J Clin Oncol. 33 (22), 2472-2480 (2015).
  20. Kresse, S. H., Meza-Zepeda, L. A., Machado, I., Llombart-Bosch, A., Myklebost, O. Preclinical xenograft models of human sarcoma show nonrandom loss of aberrations. Cancer. 118 (2), 558-570 (2012).
  21. Dobrolecki, L. E., et al. Patient-derived xenograft (PDX) models in basic and translational breast cancer research. Cancer Metastasis Rev. 35 (4), 547-573 (2016).
  22. Abdolahi, S., et al. Patient-derived xenograft (PDX) models, applications and challenges in cancer research. J Transl Med. 20 (1), 206(2022).
  23. Deng, N., et al. Deep whole-genome sequencing identifies recurrent genomic alterations in commonly used breast cancer cell lines and patient-derived xenograft models. Breast Cancer Res. 24 (1), 63(2022).
  24. Chen, F., et al. Generation and characterization of patient-derived xenografts from patients with osteosarcoma. Tissue Cell. 79, 101911(2022).
  25. Fortuna-Costa, A., et al. An association between successful engraftment of osteosarcoma patient-derived xenografts and clinicopathological findings. Histol Histopathol. 35 (11), 1295-1307 (2020).
  26. Beck, J., et al. Canine and murine models of osteosarcoma. Vet Pathol. 59 (3), 399-414 (2022).

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

הקמת מודל עכבר Xenograft שמקורו במטופל עם רקמות אוסטאוסרקומה אנושיות
צור קשר
המלצה לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

2026 © זכויות יוצרים MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.