כאן, אנו מציגים מודל כאב דלקתי שונה עם הזרקת קרגינן שתי כפות אחוריות כדי להעריך את אפקט משכך הכאבים.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
מודל כאב דלקתי שונה כדי ללמוד את אפקט משכך כאבים בעכברים
במאמר זה
סיכום
תקציר
בדיקת צלחת חמה נמצאת בשימוש נרחב כדי להעריך השפעות משככי כאבים על כאב דלקתי בעכברים. מודל נפוץ של כאב דלקתי נגרם על ידי הזרקה intraplantar של carrageenan בכפה אחורית אחת. עם זאת, הממצאים מהמעבדה שלנו הראו כי עכברים עם הזרקת קרגינן בכפה אחורית אחת הרימו את כפותיהם כדי למנוע רעש תרמי במהלך בדיקת הפלטה החשמלית. בגלל תגובה זו, שיטת ההזרקה הקודמת אינה יכולה לשקף במדויק את סף הכאב התרמי. לכן, חקרנו שיטה חדשה כדי למנוע בעיה זו. במחקר הנוכחי, שינינו את השיטה הקודמת על ידי הזרקת קרגינן לשתי הכפות האחוריות כדי לבסס את המודל של כאב דלקתי. התוצאות הראו כי הזרקת שתי כפות אחוריות עם קרגינן הייתה רגישה ושיטה טובה יותר לגרום לכאב דלקתי בעת שימוש במבחן פלטה חמה מאשר הזרקת כף אחורית יחידה. על בסיס ממצאים אלה, תכננו ניסויים נוספים שבהם עכברים עם הזרקת קרגינן של שתי כפות אחוריות או כפות אחוריות בודדות של קרגינן טופלו באופן תוך-גסטרי בסלקוקסיב (30 מ"ג/ק"ג). תוצאות בדיקת הפלטה החמה הראו כי סלקוקסיב הגדיל את סף הכאב התרמי בעכברים עם הזרקת קרגינן בשתי כפות הרגליים האחוריות, אך לא בעכברים עם הזרקת קרגינן בכפה אחורית אחת. לסיכום, פיתחנו שיטה מעולה להשראת מודל של כאב דלקתי להערכת אפקט משכך כאבים.
מבוא
כאב הוא בעיה של בריאות הציבור ברחבי העולם. הוא מופעל על ידי גירוי תרמי, מכני או כימי מזיק. קשה לבצע מחקרי כאב בבני אדם בגלל חששות אתיים. לכן, שימוש במודלים של כאב בבעלי חיים הוא גישה מרכזית להבנת מנגנוני כאב וטיפולים מחקריים1. בדיקת צלחת חמה כבר בשימוש נרחב להערכה של nociception תרמי hyperalgesia2. נכון לעכשיו, המודל של כאב דלקתי המשמש לבדיקת צלחת חמה מושרה עם הזרקה intraplantar של carrageenan בכפה אחורית אחת. לדוגמה, כדי לחקור את ההשפעה האנטינוסיצפטיבית של מיקרוספרות עמוסות רוטיגוטין, מודל חייתי של כאב דלקתי הוכן על ידי הזרקת כף אחורית אחת3. כדי להעריך את ההשפעות....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול
פרוטוקול הניסוי אושר על ידי הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים באוניברסיטת יאנטאי (No. YTDX20220425). הנהלים פעלו בהתאם להנחיות המכונים הלאומיים לבריאות לשימוש בחיות מעבדה.
1. בעלי חיים
- השתמשו בנקבות עכברי ICR במשקל 20-25 גרם לצורך הניסויים.
- אפשרו לבעלי החיים להתאקלם בסביבת חדר הניסויים במשך 3 ימים לפני תחילת הניסויים.
- שמרו על חדר הניסויים עם מחזור אור-חושך של 12 שעות, וספקו לעכברים גישה חופשית למים ולצ'או.
2. הכנת תמיסת קרגינן
- שוקלים 0.1 גרם של carrageenan. הוסף 10 מ"ל של מלוחים רגילים מעוקרים ל....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות
סף הכאב במודלים של כאב דלקתי
סף הכאב של מודל הכאב הדלקתי עם הזרקת קרגינן בכפה אחורית אחת היה 32.23 ±-11.11 שניות, בעוד שסף הכאב של קבוצת הביקורת היה 27.73 ±-7.08 שניות. בהשוואה לקבוצת הביקורת, סף הכאב של מודל הזרקת כף אחורית אחת לא הראה ירידה משמעותית (p > 0.05, איור 1A). סף הכאב של מודל הכאב הדלקתי עם הזרקת קרגינן בשתי כפות הרגליים האחוריות היה 21.84 ±-5.63 שניות, בעוד שסף הכאב של קבוצת הביקורת היה 28.21 ±-8.61 שניות. בהשוואה לזה של קבוצת הביקורת, סף הכאב של מודל הזרק.......
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
כאב הוא תגובת הגנה המופעלת על ידי נזק לרקמות או פציעה. עם זאת, יש לה גם השפעה שלילית על איכות החיים10. לכן, פיתוח משככי כאבים יעילים וחקר מנגנוני כאב נשארים תחומי מחקר פעילים. השיטות להערכת כאב ממלאות תפקיד מפתח בפיתוח תרופות משככי כאבים. הזרקת קרגינן בכפה אחורית אחת היא שיטה קלאסית לבדיקת פלטה חמה. המודל השונה המושרה על ידי הזרקת קרגינן בשתי כפות הרגליים האחוריות שאנו מציגים כאן מספק דרך אמינה לחקור את יעילותם של סוכנים טיפוליים פוטנציאליים להקלה על הכאב.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
למחברים אין אינטרסים מנוגדים פוטנציאליים לחשוף.
תודות
אנו מודים ללסלי מקולום, PhD, מליוואן ביאנג'י (אדנז) (www.liwenbianji.cn), על עריכת הטקסט באנגלית של טיוטה של כתב יד זה.
....הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| AL204 איזון אלקטרוני | Yuheng סוללה ושות', בע"מ | YH-400A | |
| קרבוקסימתיל צלולוז | טיאנג'ין כימית ושות', בע"מ | ||
| Carrageenan | Sigma, MO, ארה"ב | 29H0715 | |
| Celecoxib | Pfizer Inc. | ||
| פלטה חמה | UGO בע"מ ושות', איטליה | PB-200 | |
| עכברים נקבות ICR | ג'ינאן פנגיו ושות', בע"מ | ||
| תמיסת מלח רגילה | קלון פרמצבטיקה ושות', בע"מ |
מקורות
- Deuis, J. R., Dvorakova, L. S., Vetter, I. Methods used to evaluate pain behaviors in rodents. Front Mol Neurosci. 10, 284(2017).
- Menéndez, L., Lastra, A., Hidalgo, A., Baamonde, A. Unilateral hot plate test: a simple and sensitive method ....
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
