מאמר שיטה

סינתזה של חרוזים טעונים בשמן קצח, על בסיס אלגינט, רגישים ל-pH בטכניקת ריסוס חשמלי

928 צפיות

⸱

DOI:

10.3791/66958

⸱

18 באוקטובר 2024

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Faculty of Pharmacy, University College of MAIWP International, 2Faculty of Pharmacy, MAHSA University, 3Department of Parasitology and Medical Entomology, Faculty of Medicine, Universiti Kebangsaan Malaysia, 4Department of Medical Sciences, School of Medical and Life Sciences, Sunway University, 5Department of Biology, College of Science, Princess Nourah bint Abdulrahman University, 6Department of Zoology, College of Science, King Saud University, 7Department of Medicine and Infectious Diseases, Faculty of Veterinary Medicine, Cairo University, 8Department of Pharmaceutical Sciences, Pharmacy Program, Batterjee Medical College, 9Pharmacology Department, Faculty of Veterinary Medicine, Suez Canal University, 10Department of Pharmacy, Pharmaceutical Technology and Physical-Chemistry, Faculty of Pharmacy and Food Sciences, University of Barcelona, 11Research and Development, Sabrena Experience, 12Alphastar Lab Systems

במאמר זה

סיכום

מוצגת טכניקה המשתמשת במתח חשמלי גבוה ותחליב ממוקד ועמוס בחומרים פעילים לייצור מיקרו-חרוזים אחידים ומגיבים ל-pH.

תקציר

שמן קצח (BSO), המופק מזרעי צמח Nigella sativa , זכה לתשומת לב בשל תכונותיו האנטי-סרטניות הפוטנציאליות, במיוחד בהקשר של סרטן המעי הגס. התרכובת הפעילה שלו, תימוקינון, עשויה לעזור לעכב צמיחת תאי סרטן ולגרום לאפופטוזיס בתאי סרטן המעי הגס. נוסף על כך, השפעתו נוגדת הדלקת ונוגדת החמצון של שמן קצח תרבותי עשויה לתרום לסביבת מעיים בריאה יותר, מה שעשוי להפחית את הסיכון לסרטן. לכן, מחקר זה סינתז חרוזי אלגינט רגישים ל-pH כדי להעביר BSO למעי הגס בצורה מבוקרת מבלי לשחרר את התרופה ב-pH 1.2 (קיבה), ובכך לספק דפוס שחרור מוגדר היטב ב-pH 6.8. השימוש בטכנולוגיית אלקטרוספריי משפר את ביצועי התהליך בכך שהוא מקל על ניסוח חרוזים קטנים והומוגניים עם שיעור נפיחות ודיפוזיה גבוה יותר במדיום מערכת העיכול.

החרוזים המנוסחים אופיינו בבדיקת חוזק רירית ex-vivo , גודל חרוז, גורם כדוריות (SF), יעילות אנקפסולציה (EE), מיקרוסקופ אלקטרונים סורק (SEM), התנהגות נפיחות במבחנה (SB) ושחרור תרופות במבחנה במדיה חומצית ובופר. כל החרוזים המיוצרים הללו הדגימו גדלים צנועים של 0.58 ± 0.01 מ"מ וצורה כדורית של 0.03 ± 0.00 מ"מ בבדיקה זו. הפורמולה הראתה תכונות צפות ומשחררות מבטיחות במבחנה. עם אחוז מצטבר נמוך מאוד של חרוזים, ה-EE של השמן של 90.13% ±-0.93% היה גבוה, ומחקר השחרור הראה יותר מ-90% ב-pH 6.8 עם אופי צף טוב בקיבה. בנוסף, החרוזים היו מרווחים באופן שווה בכל המעי. גישת הריסוס החשמלי המשמשת בפרוטוקול זה ניתנת לשחזור, ומניבה תוצאות עקביות. לכן, פרוטוקול זה יכול לשמש לייצור בקנה מידה גדול למטרות מסחור.

מבוא

קצח, ובמיוחד BSO, שימש זה עידנים לריפוי מגוון רחב של מחלות בשל סגולותיו הרפואיות המבוססות. תימוקינון הוא אולי אחד הפיטוכימיקלים החשובים ביותר המצויים ב-BSO1. בשנים האחרונות, חוקרים חקרו את היתרונות הטיפוליים הפוטנציאליים של תימוקינון in vivo ו-in vitro, והפיקו ראיות אמפיריות התומכות בשימוש ב-BSO. תכונות נוגדות יתר לחץ דם, אנטיבקטריאליות, אנטי-היסטמיניות, אנטי פטרייתיות, משככות כאבים, נוגדות סוכרת, הורדת שומנים ואנטי דלקתיות הודגמו כולן על ידי מחקרים אלה עבור BSO, אשר עשוי לשמש לטיפול בתסמינים כגון אקזמה, לחץ דם גבוה, אסטמה, שיעול, כאבי ראש, שפעת, חום, אנטי סרטן, סחרחורת ופעילותגופנית 2,3.

מריחת כיסויים דקים יחסית על טיפות קטנות של נוזלים ופיזורים, או חלקיקים של חומר מוצק, ידועה בשם מיקרו-אנקפסולציה. כשמדובר בשמן, שמן מיקרו-קפסולות הוא בדרך כלל בעל ערך רב מכיוון שצורות מסוימות של שמן, כמו BSO, נחשבות למזונות מזינים ומציעות יתרונות רפואיים4. עם זאת, הוספת שמנים ישירות למטריצת המזון עלולה להוביל לנידוף, מה שעלול לגרום במהירות להעלמת פעילויות כתוצאה מחשיפה לחמצן ולאור UV5. יתר על כן, חוסר השליטה על קצב שחרור השמנים מביא להשפעה מיידית וחולפת. יצירת ציפוי פולימרי סביב השמן האתרי על ידי מיקרו-אנקפסולציה או מיקרוספריפציה היא שיטה אחת להתגבר על החסרונות הללו6.

מיקרו-קפסולות, הידועות גם בשם מיקרוספרות, מגנות על השמנים מפני תנאי סביבה מזיקים7. תהליך זה נמצא בשימוש נרחב כדי להגביר את יעילות התרופות, לשמר את תכולת התרופות, לאפשר טבליות בשחרור מושהה, לשפר את מיסוך הטעם, להפחית את אובדן הטעם במהלך חיי המדף של המוצר, להאריך את תחושת הפה ולהפריד מרכיבים לא תואמים במינון יחיד8. מיקרו-אנקפסולציה מסייעת גם בשמירה על ספיגה מטבולית, שליטה בקצב שחרור השמן ושמירה על הריכוזים המתאימים כדי להניב את התוצאה המיועדת במיקום מסוים9.

אנקפסולציה אלקטרו-הידרודינמית היא שיטה פשוטה וניתנת להתאמה. החומר הפעיל שוכן בליבה הפנימית של מיקרו-קפסולה, המורכבת ממעטפת חיצונית. בהקשר זה, הוא כולל מטריצה חזקה למדי כדי להבטיח שניתן יהיה להפיץ את הרכיב הפעיל בצורה יעילה יותר במקום גרעין מוגדר בבירור. לפני הספריציקלציה, יש לשלב את החומר הפעיל ותמיסת הפולימר כדי לייצר את המיקרוספירות9. מצד שני, מכיוון ששמן הוא נדיף, מיקרו-אנקפסולציה שלו יכולה להיות קשה ביותר ודורשת בקרת טמפרטורה קפדנית.

ישנן שיטות שונות לעטיפת שמנים. לדוגמה, שמנים מסוימים צריכים להיות עטופים בטמפרטורות נמוכות כדי למנוע פירוק או נידוף של הרכיבים הביו-אקטיביים שלהם. כדי ליצור מבנים בגודל מיקרו וננו, אטומיזציה אלקטרוהידרודינמית (EHDA) נחקרה בהרחבה על ידי חוקרים10. במובן זה, תנאי העיבוד, הכוללים קצב זרימה, מתח מופעל וגודל זרבובית, כמו גם תכונות מרחק האיסוף של התמיסה הפולימרית, הם שני הגורמים העיקריים שיש לקחת בחשבון כדי לייצר את גודל החלקיקים או המורפולוגיה הרצויים11,12.

במחקר זה, נעשה שימוש באלגינטים - סוג של פוליסכרידים טבעיים המתאימים לבליעה דרך הפה - כדי לעטוף את ה-BSO. אצות חומות מכילות אלגינט, פולימר אניוני המופיע באופן טבעי. הוא מורכב משני מבנים מונומריים: α-L-guluronic (G) וחומצה 1-4βD-mannuronic (M)13. הפולימר שלו אינו רעיל14, בעל רמה גבוהה של תאימות ביולוגית, הוא זול ומתכלה ביעילות15. לכן, הוא משמש לעתים קרובות במגזרי הביוטכנולוגיה וההנדסה.

אלגינטים הם החומר הנבחר לאנקפסולציה על ידי ג'לציה יונית מכיוון שהם עשויים ליצור מבנה צולב בין קבוצות G של שרשראות אלגינט שונות על ידי יצירת קשרים יוניים עם קטיונים דו-ערכיים כמו יונים Sr2+, Ca2+ או Zn2+. ניתן לאפיין את תהליך הג'לציה כראוי על ידי מודל קופסת הביצים, המגביל את הקטיון הדו-ערכי לשתי קבוצות קרבוקסיל על מולקולות האלגינט זו לצד זו. הוצע כי מאפייני ההידרוג'ל של חרוזי נתרן אלגינט עשויים לווסת את שחרור המקרומולקולות והמולקולות הקטנות. חרוזי הנתרן אלגינט עשויים להיצמד לרירית המעי למשך זמן ממושך בשל איכויות הדבק הריריות שלהם. יתר על כן, אלגינט מציע מגן שעשוי להגן על שמנים מפני אלמנטים חיצוניים כגון מדיה חומצית16 ומעביר שמנים לתעלות האספקה של מערכת העיכול17. מאז הוא שימש במחקר כדי לסייע במתן תרופות ספציפיות לאתר לרקמות ריריות18,19.

הגישה האלקטרו-הידרודינמית שימשה במחקר זה כדי לחקור את הכדאיות של תחליב שמנים מסחריים ליצירת כמוסות20. כאן, הגישה האלקטרו-הידרודינמית שימשה ליצירה וניתוח מיקרוספירות טעונות אלגינט-BSO20. מחקר זה העריך מספר גורמים אחרים, כולל תכונות ה-SF, ex-vivo, הדבק הרירי, EE%, המראה הפיזי, התפלגות הגודל ופוטנציאל הזטה; ספקטרוסקופיה מוחלשת של השתקפות כוללת-אינפרא אדום טרנספורמציה פורייה (ATR-FTIR) שימשה לבדיקת תאימות כימית20.

פרוטוקול

1. הכנת תחליב אלגינט-BSO

  1. יש לפזר 10% w/v BSO בתמיסת נתרן אלגינט 1% w/v המכילה 1, 3 ו-5% w/v לציטין בכוס של 50 מ"ל.
  2. השג ננו-אמולסיה באמצעות הומוגנייזר קולי. הגדר את רמת ההספק ל-20%. הפעל את ההומוגנייזר למשך 55 שניות על ידי לחיצה על כפתור ההתחלה כדי להשלים את התהליך.

2. אפיון תחליב אלגינט-BSO

  1. לנתח את פוטנציאל הזטה והתפלגות גודל החלקיקים
    1. קח 0.1 מ"ל מהתחליב הטרי שהוכן בכוס זכוכית של 25 מ"ל ודלל אותו ב -9.9 מ"ל מים מזוקקים.
    2. קח 2.5 מ"ל מהתמיסה המדוללת הזו לקובט קוורץ של 3 מ"ל והנח את הקובט בתא מדידה.
    3. פתח את המכסה והנח את הקובט בתוך המכשיר, וודא שהקובטה מכוונת נכון ביחס לנתיב אלומת האור. לחץ על סמל המדידה .
    4. הוצא את הקובטה. אחזר את הדגימה או השלך אותה כראוי.
    5. שמור את הנתונים כקובץ pdf בתיקייה אישית לשימוש נוסף.
  2. קביעת יציבות אמולסיה (ES)
    1. קח 5 מ"ל תחליב טרי שהוכן בצינורות צנטריפוגה של 10 מ"ל. צנטריפוגה את האמולסיות (n = 3) למשך 5 דקות ב-894 × גרם.
    2. באמצעות משוואה (1), קבע את ה-ES על סמך מיקום ממשק הפרדת הפאזה.
      figure-protocol-1(1)
      כאשר Vemul הוא נפח האמולסיה שנותרה לאחר צנטריפוגה ו-Vinitial הוא נפח האמולסיה הראשונית.
  3. הכנת חרוזים
    1. חרוזי אלגינט BSO
      1. הכן חרוזי אלגינט BSO בטכניקת אלקטרוספריי הנקראת EHDA. השתמש בתחליב BSO לפי נפח (w/v) המורכב מ-10% BSO, 1% נתרן אלגינט ו-3% תמיסת לציטין).
      2. בעזרת משאבת מזרק לוויסות קצב הזרימה, טען את האמולסיה למזרק פלסטיק של 10 מ"ל ודחף אותו דרך מחט של 22 גרם. חבר את קצה המחט לאלקטרודה החיובית של ספק כוח במתח גבוה.
      3. כאספן, השתמש בכוס מקורקעת עם 50 מ"ל של 1% w/w סידן כלורי (אמבט ג'ל) בתוכה. החלף את קצב זרימת הטפטוף בין 1 מ"ל/דקה ל-3 מ"ל/דקה במתחים של 3, 5 ו-7 קילו וולט תוך שמירה על מרחק של 10 ס"מ מעל פני השטח של תמיסת הסידן הכלורי.
      4. כדי לאשר ג'לציה מלאה, השאירו את החרוזים באמבט הג'ל למשך 30 דקות תוך כדי ערבובם. השתמש במסנן נירוסטה כדי להסיר את החרוזים מאמבט הג'ל ולשטוף את החרוזים שנאספו במים מזוקקים טהורים במיוחד.
      5. הניחו לחרוזים להתייבש במשך 16 שעות בטמפרטורת החדר על ספסל מעבדה. השתמש במשוואה (2) כדי לחשב את אחוז התפוקה של חרוזים.
        figure-protocol-2 (2)
    2. חרוזי אלגינט ללא BSO
      1. הכן תמיסה של 1% w/v של נתרן אלגינט. הוסף לציטין בריכוזים של 1%, 3% ו-5% משקל/נפח לתמיסה. מערבבים היטב את התמיסה עד שהלציטין נמס לחלוטין.
      2. השתמש בפתרון משלב 2.3.2.1 כדי להכין חרוזי אלגינט נטולי BSO כמתואר בשלבים 2.3.1.2-2.3.1.5. חשב את התשואה באמצעות משוואה (2).

3. אפיון חרוזים

  1. קביעת גודל וצורה
    1. כדי לברר את גודל וצורת החרוזים, השתמש במנתח תמונות. צלם תמונות באמצעות מצלמה דיגיטלית של החרוזים הרטובים והיבשים.
    2. לאחר מכן, מדוד את קוטר החרוזים באמצעות מוט קנה המידה המותקן מראש של המכשיר. באמצעות ערכי הקוטר, חשב את ה-SF מערכי הקוטר המתקבלים באמצעות משוואה (3):
      SF = figure-protocol-3 (3)
      כאשר Dmax מייצג את הקוטר הגדול ביותר שעובר במרכז החרוז (במ"מ), בעוד Dper מתייחס לקוטר הניצב ל-Dmax ועובר דרך מרכז החרוז (במ"מ).
      הערה: SF של אפס מציין חרוז כדורי אידיאלי, כאשר ערכי SF הולכים וגדלים מסמלים סטייה גדולה יותר מצורה כדורית. יתר על כן, חרוזים נחשבים כדוריים אם ה-SF שלהם הוא 0.05 ומטה.

4. קביעת EE%

  1. לפרק את החרוזים במי מלח עם חוצץ פוספט (PBS) כדי להחזיר אותם לאמולסיה. מדוד את הספיגה של האמולסיה המתקבלת ב-600 ננומטר באמצעות ספקטרופוטומטר UV-vis.
  2. השתמש בערך הספיגה כדי לייצג את עכירות האמולסיה. צור עקומה סטנדרטית באמצעות כמות ידועה של BSO באמולסיה.
  3. חשב את ה-EE% באמצעות משוואה (4):
    figure-protocol-4(4)

5. מיקרוסקופ אלקטרונים סורק (SEM)

הערה: השתמש ב-SEM כדי להתבונן במיקרו-מבנה ובמורפולוגיה של פני השטח של חרוזי האלגינט של BSO.

  1. כדי לבדוק את החלק הפנימי של החרוזים המיובשים, חותכים כמה מהם. זהו את החרוזים החתוכים על גבי דפי אלומיניום והדביקו אותם באמצעות סרטי דבק פחמן.
  2. מצפים את החרוזים במודול מקרטע פחמן במאייד ואקום באווירת ארגון. מרחו עובי של 100 Å ו-50 Å לציפוי הפחמן.
  3. רכוש תמונות של החרוזים המצופים בוואקום גבוה עם מאיץ מתח בין 10 קילו וולט ל -15 קילו וולט.

6. קבע אינטראקציה בין תרופות באמצעות ATR-FTIR

  1. הגדר את מספרי גלי המכשיר בין 4,000 ס"מ-1 ל-400 ס"מ-1 תוך שימוש באוויר הסביבה כרקע ורזולוציה של 1 ס"מ-1. ראה קובץ משלים 1.
  2. רשום ספקטרום של BSO, נתרן אלגינט, לציטין, סידן כלורי, חרוזים ללא BSO, חרוזי אלגינט-BSO ותערובת פיזית של חומרים פעילים וחומרי עזר (נתרן אלגינט, לציטין, סידן כלורי ו-BSO) בנפרד.
    1. הנח את הדגימה (5-10 מ"ג) על אזור הדגימה. התאם 20 סריקות, רזולוציה 4, כוח מד 80, זרוע לחץ עם קצה שטוח. ודא שההפרש הקבוע האוטומטי נשאר מוגדר לאפשרות ריק כך שהספקטרום יאוחסן אוטומטית בתיקייה הרצויה.
    2. כדי להתחיל במדידת הדגימה, לחץ על הלחצן [דוגמה]. לאחר בחירת [מדגם], מכיוון שאין תקופת המתנה, הקפד להכין את הדגימה ולהפחית את מהדק הלחץ. נתח את כל הדגימות בנפרד. נתח בנפרד את כל הספקטרום המוקלט באמצעות תוכנת ספקטרוסקופיה.

7. קלורימטריית סריקה דיפרנציאלית (DSC)

הערה: המאפיינים התרמיים והתאימות של החרוזים הטעונים ב-BSO נחקרו באמצעות DSC (קובץ משלים 1).

  1. חרוזי חותם במשקל ~3.20 מ"ג במחבת אלומיניום רגילה. מחממים את הדגימות בקצב של 10 מעלות צלזיוס לדקה תוך ניתוח בטווח טמפרטורות של 50-350 מעלות צלזיוס תחת זרם חנקן הזורם בקצב של 20 ליטר לדקה.

8. מאפייני נפיחות של חרוזים

  1. הכינו 100 מ"ג חרוזי אלגינט-BSO מיובשים.
  2. הכן נוזל מעיים מדומה (SIF) ונוזל קיבה מדומה (SGF) בכלי ערבוב נקי ויבש בגודל מתאים -6 ליטר, 10 ליטר או 25 ליטר. הוסף מים מטוהרים לכ-33% מהנפח הנדרש -2 ליטר, 3 ליטר או 8 ליטר, והעביר את תכולת בקבוק התרכיז לכלי. שטפו את הבקבוק במים מטוהרים והוסיפו את השטיפות והמים המטוהרים לכלי הערבוב כדי להשיג את הנפח הנדרש; מערבבים היטב. מדוד את ה-pH והמשך אם במסגרת המפרט; התאם את ה- pH במידת הצורך.
  3. טבלו את החרוזים ב-50 מ"ל של מדיה המכילה נוזל מעיים מדומה (SIF) ונוזל קיבה מדומה (SGF). שמור על התנאים למשך שעתיים בטמפרטורה של 37 ± 0.5 מעלות צלזיוס.
    1. הסר את החרוזים המנופחים וסנן אותם דרך רשת מתכת במרווחים מוגדרים מראש של 0, 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110 ו-120 דקות או יותר. השתמש במגבת נייר כדי להסיר נוזלים מיותרים מהחרוזים הנפוחים.
    2. מדוד את משקל החרוזים המנוגבים באמצעות איזון אנליטי אלקטרוני. קבע את אחוז מדד הנפיחות (%SI) באמצעות משוואה (5):
      figure-protocol-5 (5)

תוצאות

הכנת מיקרו-חרוזי אלגינט טעוני BSO
איור 1 מייצג את המערך הניסויי להכנת מיקרו-חרוזי אלגינט טעוני BSO. לכמות הלציטין שנוצלה הייתה השפעה ניכרת על יציבות תחליב ה-BSO. תחליבים שיוצרו עם כל שלושת ריכוזי הלציטין היו יציבים יחסית. שיטת הצנטריפוגה (894 × גרם, 5 דקות) שימשה בניסוי זה כדי להעריך את יציבות האמולסיה20. התוצאות אימתו כי לפעילי שטח, ולא לצנטריפוגה, הייתה השפעה גדולה יותר על יציבות תחליב BSO. פוטנציאל הזטה והתפלגות גודל החלקיקים של האמולסיה אופיינו כפי שמוצג בטבלה 1 ובאיור 2.

אפיון חרוזים

גודל, צורה ו-EE
הגודל, הצורה וה-EE של המיקרו-חרוזים המנוסחים מסוכמים בטבלה 2. מידות החרוזים המיובשים נעו בין 1.86 ±-0.02 מ"מ (F2 ו-F3) ל-0.58 ±-0.01 מ"מ (F8), והחרוזים הרטובים היו בין 4.76 ±-0.01 מ"מ (F3) ל-1.50 ±-0.02 מ"מ (F8). המתח החשמלי וקצב זרימת האמולסיה היו שניים מהפרמטרים העיקריים שהשפיעו על גודל החרוזים וכדוריותם. גם ה-SF וגם גודל החרוזים גדלו עם קצב זרימה מוגבר, בעוד שמשתנים אלה פחתו עם עלייה במתח החשמלי. עם זאת, גודל ה-SF והחרוזים לא ירדו בנקודה מסוימת כאשר המתח החשמלי וקצב הזרימה גדלו באופן פרופורציונלי. מחקר זה מצא כי חרוזים המיוצרים בקצב זרימה של 2 מ"ל לדקה ומתח חשמלי של 7 קילו וולט הם באופן עקבי באותו גודל, צורה ומשקל. החוקרים מדדו את גודל החרוז ומצאו שהוא 0.58 ± 0.01 מ"מ. עבור פורמולציות חרוזים רטובות ויבשות כאחד, ה-EE נע בין 67.20 ±-1.46% (F1) ל-104.50 ±-4.04% (F8) ובין 59.92 ±-0.90% (F1) ל-90.13 ±-0.93% (F8), בסדר זה. שיעור ה-EE עלה יחד עם המתח וקצב הזרימה, מה שעשוי להיות מוסבר על ידי המתח הגבוה, שהגדיל את קשירת הקישור הצולב לתמיסת הג'ל CaCl2 וייצר חללים נוספים עבור קישור צולב יוני. כתוצאה מכך, יותר נפט נלכד ונמנעה דליפת שמן ממטריצת הפולימר.

אחידות משקל חרוזים
מקדמי שינוי המשקל של חרוזי אלגינט טעונים ב-BSO נעו בין 1.37% ל-3.93%. על פי המחקר האחרון, המשקל הממוצע של כל החרוזים העמוסים ב- BSO לא היה שונה ביותר מ -5%.

ATR-FTIR
כדי לקבוע את האינטראקציה בתוך המרכיבים, בוצע ATR-FTIR (איור 3). נתרן אלגינט הציג פסים ספקטרליים אופייניים ב-3400 ס"מ-1 עבור מתיחת O-H וב-1595 ו-1408 ס"מ-1 עבור קבוצות C=O ו-C-C כתוצאה מרטט מתיחה. שתי רצועות נפרדות נמצאו גם ב-1600 ו-1405 ס"מ-1 במחקר קודם, שהיו קשורות לתנודות המתיחה הסימטריות והאסימטריות של קבוצות -COOH, בהתאמה. בנוסף, קבוצת C-H הייתה אחראית לרצועות שנראו בספקטרום הנתרן אלגינט ב-1316 ו-1025 ס"מ-1. לעומת זאת, ספקטרום הלציטין חשף שלוש רצועות ב-2922, 2853 ו-1465 ס"מ-1, המקבילות לקבוצות C=O, C-H ו-C-C. פסגות ה-BSO שבלטו ביותר נמצאו ב-2953 ו-2853 ס"מ-1 (C-H ב-CH2 ו-C=C-H, בהתאמה). יתר על כן, מכיוון ששרשראות פחמן נפוצות בחומצות שומן, הרצועות שהופיעו ב-1,753, 1,653 ו-1,453 ס"מ-1 הציעו C=O, C=C ו-C-H, בהתאמה.

DSC
ניתוח DSC שימש לקביעת התנהגות הטמפרטורה של חרוזי אלגינט טעונים ב-BSO והאינטראקציות שלהם עם מיצוי אחרים במהלך תהליך ההכנה והפיתוח. פירוק פוליאלקטרוליטים נגרם על ידי תהליכי דה-פולימריזציה והתייבשות, ככל הנראה תגובות חמצון פוליאלקטרוליטים ודקרבוקסילציה חלקית של קבוצות הקרבוקסיליות הפרוטונים (איור 4).

SEM
באמצעות SEM, תמונות של פני השטח של החרוזים המיובשים שעברו אופטימיזציה עם טעינת BSO צולמו במצלמה. זה הראה שלחרוזים היה משטח חלק, צורתם כדורית, והיו להם נקבוביות ותעלות רבות על פני השכבה החיצונית שלהם (איור 5).

התנהגות נפיחות חרוזים
נפיחות חרוזים היא התנהגות משמעותית המשפיעה על דפוס שחרור התרופות של חומרים פולימריים21. כדי להעריך את ה-SB, חרוזים המכילים BSO נבדקו ב-SGF (0.1 N HCl, pH 1.2) וב-SIF (pH 6.8) (איור 6).

התכווצות אלגינט ב-pH חומצי עשויה להסביר את הירידה הראשונה באינדקס הנפיחות של פורמולציות חרוזים F1 עד F9 ב-SGF בהשוואה ל-SIF, מה שמעיד על SB רגיש ל-pH. כתוצאה מכך, החרוזים הראו אחוז גבוה יותר של SI ב-SIF לאחר 30-90 דקות. ניתן להסביר את ה-SB של החרוזים ב-pH אלקליין על ידי חילופי יוני סידן, לפיהם נוכחותם של יוני פוספט מבודדי סידן קושרת את הקבוצות הקרבוקסיליות של מטריצת הלציטין המקושרת צולבת ליוני הנתרן במאגר הפוספט. בנוסף, חרוזי האלגינט המנופחים הטעונים ב-BSO התפרקו ונשחקו תוך 100-110 דקות, ותוך 120 דקות, כל התכשירים נשחקו לחלוטין.

המטרה העיקרית של מחקר זה היא לסנתז חרוזים עמוסים בשמן קצח, מבוססי אלגינט ורגישים ל-pH באמצעות טכניקת ריסוס חשמלי כדי לשחרר את התרופה במקום שבו היא נספגת בדרך כלל - במעי. ב-pH חומצי של 1.2, החרוזים התכווצו או שמרו על צורתם המקורית, מה שהפחית את נטייתם להתפורר. בניגוד לכך, חרוזי אלגינט טעוני BSO התנפחו במהירות כאשר נחשפו ל-SIF (pH 6.8). לאחר 120 דקות, כל תשעת התכשירים (F1-F9) התמוססו לחלוטין ב-SIF. זה נבע מנוכחותם של יוני פוספט במדיום, מה שהגביר את המסיסות של קומפלקס הנתרן אלגינט ברמות pH גבוהות יותר. הניתוק של אלגינט-נתרן והתמוטטות הג'ל לאחר מכן במאגר הפוספט נגרמו על ידי הזיקה הגבוהה יותר של יוני הפוספט ל-Ca2+ מאשר ליוני אלגינט.

figure-results-1
איור 1: מערך ניסיוני של טכניקת אטומיזציה אלקטרוהידרודינמית לייצור מיקרו-חרוזי אלגינט. הגדרה בזמן אמת לייצור חרוזים וחרוזים רטובים טריים. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.

figure-results-2
איור 2: התפלגות גודל החלקיקים ופוטנציאל הזטה של תחליב טעון שמן קצח. (A) התפלגות גודל ו- (B) התפלגות פוטנציאל זטה. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.

figure-results-3
איור 3: ספקטרום אינפרה-אדום טרנספורמציה של החזר כולל מוחלש .(A) BSO, (B) נתרן אלגינט, (C) לציטין, (D) סידן כלורי, (E) חרוזים ללא BSO, (F) חרוזי אלגינט-BSO, ו-(G) תערובת פיזית של חומרים פעילים וחומרי עזר (נתרן אלגינט, לציטין, סידן כלורי ו-BSO). קיצור: BSO = שמן קצח. נתון זה שונה מ-Azad et al.20. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.

figure-results-4
איור 4: תרמוגרמה של קלורימטריית סריקה דיפרנציאלית (DSC). (A) חרוזים נטולי BSO ו-(B) חרוזים טעוני BSO. נתון זה שונה מ-Azad et al.20. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.

figure-results-5
איור 5: מיקרו-תצלומי אלקטרונים סורקים. (A, B) חרוזים מיובשים של אלגינט-BSO שמראים מורפולוגיה של פני שטח חלקים (25x ו-100x); נוכחות של נקבוביות ותעלות הנראות בפרוסת החרוז המיובש בהגדלה של (C) 100x ו-(D) 500x. פסי קנה מידה = 100 מיקרומטר (A-C), 20 מיקרומטר (D). נתון זה שונה מ-Azad et al.20. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.

figure-results-6
איור 6: התנהגות נפיחות של חרוזי אלגינט ממוטבים טעונים בשמן קצח. (A) מדיה חומצית (pH 1.2) ו-(B) אמצעי חיץ (pH 6.8) [ממוצע ± SD, n = 3]. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.

% לציטין conc.גודל חלקיקים (ננומטר)PDIפוטנציאל זטה (mV)ES (%)
לפנילאחר צנטריפוגהלפנילאחר צנטריפוגהלפנילאחר צנטריפוגה
1253.32±4.65282.93±14.110.392±.030.333±.06-43.1±.36-37.6±2.292.50±0.23
3334.51±12.82347.44±15.140.315±.040.358±.12-46.9±2.26-43.5±1.3294.83±0.42
5430.13±14.23463.23±8.910.422±.040.548±.11-51.4±2.75-45±1.0196.50±0.40

טבלה 1: התפלגות גודל החלקיקים וניתוח פוטנציאל זטה של תחליב טעון שמן קצח. *(n = 3, ממוצע ± SD). קיצורים: PDI = מדד פוליפיזור; ES = יציבות אמולסיה.

קודמתח (kV)קצב זרימה (מ"ל/דקה)גודל חרוזa (מ"מ)גורם כדוריותA (מ"מ)יעילות אנקפסולציהa (%)
רטוביבשרטוביבשרטוביבש
פורמולה 1314.47±0.011.82±0.010.02±0.000.04±0.0020.67.±1.4659.92±0.90
F2324.52±0.031.86±0.020.01±0.000.03±0.0068.22±3.0965.89±1.57
F3334.76±0.011.86±0.010.02±0.010.04±0.0070.76±0.8666.34±1.89
F4513.12±0.010.99±0.040.02±0.010.01±0.0170.11±0.5170.11±0.51
F5522.83±0.050.80±0.020.02±0.010.02±0.0286.89±1.6786.89±1.67
F6533.30±0.010.90±0.020.03±0.010.01±0.0186.63±0.8386.12±0.15
F7711.86±0.020.72±0.010.01±0.000.04±0.0082.16±2.5078.67±0.90
F8721.50±0.020.58±0.010.02±0.000.03±0.00104.50±4.0490.13±0.93
F9732.58±0.050.93±0.010.02±0.000.03±0.0196.04±3.6189.82±154

טבלה 2: השפעת מתח (kV) וקצב זרימה (מ"ל/דקה) על גודל החרוז, גורם הכדוריות ויעילות האנקפסולציה. n = 3, ממוצע ± S.D. טבלה זו שונתה מ-Azad et al.20.

קובץ משלים 1: מדידת גודל ופיזור חלקיקים, ATR-FTIR ו-DSC. אנא לחץ כאן להורדת קובץ זה.

דיון

באמצעות תהליך EHDA נוצרו מיקרו-חרוזי אלגינט טעוני BSO כנשא רגיש ל-pH. רשת החרוזים הראתה נפיחות תלוית pH והתנהגות שחרור תרופות עקב הנוכחות השופעת של קבוצות חומצה קרבוקסילית. קשר המימן הבין-מולקולרי החזק בין שרשראות הפולימר התגלה כסיבה מאחורי הירידה באופי הנפיחות של חרוזים טעוני BSO ב-pH 1.2. חרוזים טעוני BSO עשויים להפיק תועלת מה-SB המופחת הזה למתן תרופות רגישות ל-pH. ל-pH הייתה השפעה על ה-BSO שהשתחרר מהחרוזים המכילים BSO. ממצאים אלה מצביעים על כך שחרוזים טעוני BSO עשויים לספק שיטת מתן תרופות דרך הפה בטוחה למתן תרופות טוב יותר וממוקד למעי.

גודל החלקיקים של האמולסיה גדל עם עלייה בריכוז הלציטין. ניתן לייחס תופעה זו לעלייה בצמיגות הקשורה לרמות לציטין גבוהות יותר, מה שעלול להשפיע על יכולות הקטנת הגודל של ההומוגנייזר האולטראסוני. יתר על כן, ריכוזי לציטין מוגברים תורמים לשכבת פעילי שטח צפופה יותר סביב טיפות השמן, וכתוצאה מכך גדלי חלקיקים גדולים יותר. המראה המיקרוסקופי של האמולסיה מצביע על כך שהאמולסיות שמרו היטב על יציבותן. ריכוז הלציטין יכול להשפיע על התפלגות גודל החלקיקים ופוטנציאל הזטה20. האמולסיות הראו התפלגות גודל חלקיקים לא הומוגנית, שעשויה לנבוע מהליך הסוניקציה הידני. לפוטנציאל זטה יש תפקיד מפתח בשמירה על יציבותן של מערכות קולואידיות21. הטיפות בתוך האמולסיה הראו מטען שלילי משמעותי, אותו ניתן לייחס למטען השלילי של האלגינט הנובע מהקבוצות הפונקציונליות הידרוקסיל והקרבוקסיל בתוך המבנה המולקולרי שלו22.

באפיון המיקרו-חרוזים, גודל, צורה ו-EE הם פרמטרים משמעותיים המושפעים מתנאי העיבוד. הקשר בין המתח החשמלי, קצב זרימת האמולסיה ומאפייני המיקרו-חרוזים המתקבלים מצביע על משחק גומלין מורכב הקובע את המאפיינים הסופיים של החרוזים. כאשר מגדילים את קצב הזרימה, גם גודל החרוז וה-SF גדלים. מצד שני, הגדלת המתח החשמלי מקטינה את גודל החרוז ואת ה-SF אך מגדילה את EE. עם זאת, אם המתח החשמלי וקצב הזרימה גדלים באופן יחסי, גודל החרוז וה-SF אינם יורדים בנקודה מסוימת20. היכולת לקישור צולב בחלק החיצוני של חרוזי האלגינט ממלאת גם תפקיד חשוב בשיפור ה-EE עבור שמנים בתוך אלגינט. מחקר קודם הראה EE אופטימלי של 98.30% לשמן פשתן עטוף בחרוזי אלגינט שיובשו בתנור, עם גדלי חרוזים שנעים בין 1.90 מ"מ ל-2.94 מ"מ ו-SF בין 0.044 ל-0.168. למרות יעילות האנקפסולציה הגבוהה הללו, שחרור התרופה לאתר המיועד במערכת העיכול נמצא רק 83%23. מחקר אחר הניב EE דומה של 98.7%, עם גדלי חרוזים של 2.13 מ"מ ו-SF של 0.08 מ"מ. לעומת זאת, חרוזי האלגינט היבשים שרוססו ב-BSO במחקר זה הראו EE של 90.13 ±-0.93%, כאשר למעלה מ-90% מהחומר שוחרר בהצלחה באתר המיועד ב-SIF, על פי מחקר השחרור שלנו. זה מצביע על כך שחרוזי האלגינט שלנו הצליחו לעטוף ולשחרר כמעט לחלוטין את BSO במיקום הרצוי24.

על פי הסטנדרטים שנקבעו על ידי הפרמקופיאה של USP, כל התכשירים (F1-F9) עמדו בדרישות לאחידות משקל25. אחידות זו במשקל משקפת עטיפה עקבית של BSO בתוך חרוזי האלגינט, המתאפשרת על ידי שימוש בטכניקות אלקטרוהידרודינמיות. גודל וצורת החרוז האופטימליים, המתאימים למתן דרך הפה, הושגו בתנאים ספציפיים, מה שחושף את החשיבות של תהליכי ייצור מבוקרים במדויק. יתר על כן, ה-EE, שהשתנה עם המתח וקצב הזרימה, מציע שניתן לכוונן את פרמטרי התהליך כדי למקסם את אנקפסולציית ה-BSO. יש לכך השלכות משמעותיות על הזמינות הביולוגית והיעילות של התרכובת העטופה, כאשר יעילות אנקפסולציה גבוהה יותר עשויה להוביל לתוצאות טיפוליות טובות יותר.

האחידות במשקל החרוזים, יחד עם ניתוחי ATR-FTIR ו-SEM, מספקת תובנה לגבי העקביות והשלמות הכימית של חרוזי האלגינט26,27. ניתוח ATR-FTIR אישר את נוכחותן של קבוצות פונקציונליות מרכזיות ואת השילוב המוצלח של BSO בתוך מטריצת האלגינט28, בעוד שתמונות SEM המחישו את הצורה הכדורית והמשטח החלק של החרוזים, החיוניים להתנהגות שחרור עקבית. מחקר SB הדגים את תכונות הנפיחות הרגישות ל-pH של החרוזים, שהיא משמעותית לשחרור תרופות ממוקדות במעי, מה שמבטיח ש-BSO משתחרר במקום שבו הוא יכול להיספג בצורה היעילה ביותר29. התנהגות מגיבה ל-pH זו מדגימה את הפוטנציאל של מיקרו-חרוזים מבוססי אלגינט כמערכת אספקה מבטיחה עבור BSO, המאפשרת שחרור ממוקד ומבוקר במערכת העיכול.

כתוצאה מהפיתוח המוצלח של המחקר של חרוזי אלגינט רגישים ל-pH לשחרור מוסדר של שמן קצח, מודגשת אספקת תימוקינון לטיפול בסרטן המעי הגס. ייצור חרוזים בגודל אחיד עם תכונות נפיחות רצויות ויעילות אנקפסולציה טובה נעשה קל יותר על ידי יישום טכנולוגיית אלקטרו-ספריי. חרוזים אלה הראו תכונות צפות טובות, כפי שניתן לראות על ידי קצב שחרור של יותר מ-90% בסביבת pH 6.8, מה שמבטיח אספקה ממוקדת בתוך מערכת העיכול. הממצאים מצביעים על אסטרטגיה אפשרית להגברת הזמינות הביולוגית של שמן קצח תרבותי תוך הפחתת שחרורו המוקדם בקיבה. לטכניקה זו יש פוטנציאל רב לייצור בקנה מידה גדול, מה שפותח את הדלת למסחור פוטנציאלי של טיפולים בסרטן בעתיד.

גילויים

למחברים אין ניגודי אינטרסים לחשוף.

תודות

מחקר זה נתמך על ידי חוקרים תומכים בפרויקט מספר (PNURSP2024R30) של אוניברסיטת הנסיכה נורה בינת עבד אל-רחמן, ריאד, ערב הסעודית. מחקר זה מומן על ידי מספר פרויקט תומכי חוקרים (RSPD2024R811), אוניברסיטת המלך סעוד, ריאד, ערב הסעודית.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
צינורות צנטריפוגה 10 מ"לגלובוס סיינטיפיק 22-171-624
22 מחטG סיגמא-אולדריץ' (סנט לואיס, מיזורי, ארה"ב). 
3 מ"ל קוורץ-קובטסיגמא-אולדריץ' (סנט לואיס, מיזורי, ארה"ב). 
בדלי אלומיניום 
מאזן
ATR-FTIRBruker Malaysia Sdn Bhd, Kawasan Perindustrian Temasya, 40150 Shah Alam, Selangor, Malaysia.
שמן קצח         IKOP Pharmaceutical Ltd. (IKOP, הפקולטה לרוקחות, IIUM, 25200 Kuantan, Pahang, MalaysiaB182111חומר פעיל
סידן כלוריד מיובש, CaCl2 · 2H2O סיגמא-אולדריץ' (סנט לואיס, מיזורי, ארה"ב). 21074חומר ג'ל
סרטי
צנטריפוגה
קלורימטריית סריקה דיפרנציאלית 
דיגיטל    מצלמה 
מקורקעת 
תכולת חומצה גולורונית גבוהה נתרן אלגינט (mw. 97,000) עם צמיגות בינונית (40 – 100 mPa s)סיגמא-אולדריץ' (סנט לואיס, מיזורי, ארה"ב). W201502
פולימר ספק כוח
איזופרופיל אלכוהולסיגמא-אולדריץ' (סנט לואיס, מיזורי, ארה"ב).   W292912מטרת ניקוי ATR-FTIR
LecithinSigma-Aldrich (סנט לואיס, מיזורי, ארה"ב). P7568פעילי שטח 
מגבת נייר מיקרוסקופ
 
מיקרוסקופ
קיבה מדומהסיגמא-אולדריץ' (סנט לואיס, מיזורי, ארה"ב). 1651מדיית שחרור ואמצעי נפיחות
מדומים נוזל מעיים מדומה סיגמא-אולדריץ' (סנט לואיס, מיזורי, ארה"ב). 84082-64-4מדיית שחרור ומדיה מתנפחת
ספקטרוסקופיה
מסנן פלדת אל-חלד 
משאבת מזרק SEN JIN SDN BHD Malaysia, Taman Desaria, 46150 Petaling Jaya, Selangor Darul Ehsan מלזיה
מים מזוקקים Ultrapure  מסופק על ידי מעבדה
הומוגנייזר אולטראסוניSEN JIN SDN BHD Malaysia, Taman Desaria, 46150 Petaling Jaya, Selangor Darul Ehsan Malaysia
ספקטרופוטומטר UV-vis.
מאייד ואקום SEN JIN SDN BHD Malaysia, Taman Desaria, 46150 Petaling Jaya, Selangor Darul Ehsan Malaysia
מאיץ מתח SEN JIN SDN BHD Malaysia, Taman Desaria, 46150 Petaling Jaya, Selangor Darul Ehsan Malaysia
Zetasizer Nano-ZS(Malvern Zetasizer Nano series Nano-S ו-Nano-Z, Malvern Instruments Ltd., Worcestershire, UK)
CAD4172Z27666950 מ"לאנליטי אלקטרונידבק פחמןמתח גבוהאלקטרונים סורק נוזל תוכנת מוסדית

מקורות

  1. Benavides, S., Cortés, P., Parada, J., Franco, W. Development of alginate microspheres containing thyme essential oil using ionic gelation. Food Chem. 204 (8), 77-83 (2016).
  2. Agbaria, R., Gabarin, A., Dahan, A., Ben-Shabat, S. Anticancer activity of Nigella sativa (black seed) and its relationship with the thermal processing and quinone composition of the seed. Drug Des Devel Ther. 9 (1), 3119(2015).
  3. Wang, D., Qiao, J., Zhao, X., Chen, T., Guan, D. Thymoquinone inhibits IL-1β-induced inflammation in human osteoarthritis chondrocytes by suppressing NF-κB and MAPKs signaling pathway. Inflammation. 38 (7), 2235-2241 (2015).
  4. Beyki, M., et al. Encapsulation of Mentha piperita essential oils in chitosan-cinnamic acid nanogel with enhanced antimicrobial activity against Aspergillus flavus. Ind Crop Prod. 54 (3), 310-319 (2014).
  5. Hosseini, S. M., et al. Incorporation of essential oil in alginate microparticles by multiple emulsion/ionic gelation process. Inter J Biol Macromol. 62 (11), 582-588 (2013).
  6. Banerjee, S., et al. Influence of process variables on essential oil microcapsule properties by carbohydrate polymer-protein blends. Carbohydr Polym. 93 (2), 691-697 (2013).
  7. Sebe, I., Szabó, E., Zelkó, R. Advances in drug delivery via electrospun and electrosprayed formulations. In Emerging Drug Delivery and Biomedical Engineering Technologies. , CRC Press. 71-104 (2023).
  8. Akram, N., et al. Fabrication and characterization of PVA-WPI based nanofiber mats for improved viability of Lactobacillus rhamnosus GG. Foods. 12 (21), 3904(2023).
  9. Azad, A. K., Sinan, M. A. A., John, F. K., Bappaditya, C., Hriday, B. Electro-hydrodynamic assisted synthesis of lecithin-stabilized peppermint oil-loaded alginate microbeads for intestinal drug delivery. Int J Biol Macromol. 185 (8), 861-875 (2021).
  10. Chan, E. S. Preparation of Ca-alginate beads containing high oil content: Influence of process variables on encapsulation efficiency and bead properties. Carbohydr Polym. 84 (4), 1267-1275 (2011).
  11. Xie, J., Jiang, J., Davoodi, P., Srinivasan, M. P., Wang, C. H. Electrohydrodynamic atomization: A two-decade effort to produce and process micro-/nanoparticulate materials. Chem Eng Sci. 125 (3), 32-57 (2015).
  12. Zamani, M., Prabhakaran, M. P., Ramakrishna, S. Advances in drug delivery via electrospun and electrosprayed nanomaterials. Int J Nanomed. 8 (8), 2997(2013).
  13. Husain, O., Lau, W., Edirisinghe, M., Parhizkar, M. Investigating the particle to fibre transition threshold during electrohydrodynamic atomization of a polymer solution. Mater Sci Eng. C. 65 (8), 240-250 (2016).
  14. Wan, L. Q. Calcium concentration effects on the mechanical and biochemical properties of chondrocyte-alginate constructs. Cell Mol Bioeng. 1 (3), 93-102 (2008).
  15. Baimark, Y., Srisuwan, Y. Preparation of alginate microspheres by water-in-oil emulsion method for drug delivery: Effect of Ca2+ post-cross-linking. Adv Powder Technol. 25 (5), 1541-1546 (2014).
  16. Paques, J. P., Sagis, L. M. C., van Rijn, C. J. M., van der Linden, E. Nanospheres of alginate prepared through w/o emulsification and internal gelation with nanoparticles of CaCO3. Food Hydrocoll. 40 (10), 182-188 (2014).
  17. Suksamran, T. Biodegradable alginate microparticles developed by electrohydrodynamic spraying techniques for oral delivery of protein. J Microencapsul. 26 (7), 563-570 (2009).
  18. Wang, H., et al. Characterization, release, and antioxidant activity of curcumin-loaded sodium alginate/ZnO hydrogel beads. Int J Biol Macromol. 121 (1), 1118-1125 (2019).
  19. Bera, H., Boddupalli, S., Nayak, A. K. Mucoadhesive-floating zinc-pectinate-sterculia gum interpenetrating polymer network beads encapsulating ziprasidone HCl. Carbohydr Polym. 131 (10), 108-118 (2015).
  20. Azad, A. K., et al. Encapsulation of black seed oil in alginate beads as a pH-sensitive carrier for intestine-targeted drug delivery: In vitro, in vivo and ex vivo study. Pharmaceutics. 12 (3), 219(2020).
  21. Azad, A. K., et al. A dataset of microstructure features of electro-hydrodynamic assisted 5-fluorouracil-grafted alginate microbeads and physicochemical properties for effective colon targeted carriers drug delivery. Data in Brief. 53 (4), 110202(2024).
  22. Danaei, M., et al. Impact of particle size and polydispersity index on the clinical applications of lipidic nanocarrier systems. Pharmaceutics. 10 (2), 57(2018).
  23. Piornos, J. A., Burgos-Díaz, C., Morales, E., Rubilar, M., Acevedo, F. Highly efficient encapsulation of linseed oil into alginate/lupin protein beads: Optimization of the emulsion formulation. Food Hydrocoll. 63 (2), 139-148 (2017).
  24. Morales, E. Alginate/Shellac beads developed by external gelation as a highly efficient model system for oil encapsulation with intestinal delivery. Food Hydrocoll. 70 (9), 321-328 (2017).
  25. Nikoo, A. M., Kadkhodaee, R., Ghorani, B., Razzaq, H., Tucker, N. Electrospray-assisted encapsulation of caffeine in alginate microhydrogels. Int J Biol Macromol. 116 (9), 208-216 (2018).
  26. Shao, L., et al. Effect of cold-spray parameters on surface roughness, thickness and adhesion of copper-based composite coating on aluminum alloy 6061 T6 substrate. Processes. 11 (3), 959(2023).
  27. Li, W., et al. Effects of spraying parameters and heat treatment temperature on microstructure and properties of single-pass and single-layer cold-sprayed Cu coatings on Al alloy substrate. Surf Coat Technol. 30 (490), 131184(2024).
  28. US Pharmacopoeia National Formulary, USP 23/NF 18. , States Pharmacopoeia Convention Inc. Rockville, MD, USA. (2000).
  29. Chen, Y. -C., Ho, H. -O., Liu, D. -Z., Siow, W. -S., Sheu, M. -T. Swelling/floating capability and drug release characterizations of gastroretentive drug delivery system based on a combination of hydroxyethyl cellulose and sodium carboxymethyl cellulose. PLoS One. 10 (1), e0116914(2015).

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

In Vitro
הסרטון יגיע בקרוב
צור קשר
המלצה לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

2026 © זכויות יוצרים MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.