מאמר שיטה

מודל חסימתי של דלקת לבלב כרונית שהוקם באמצעות אלקטרו-קואגולציה

DOI:

10.3791/67061

⸱

31 באוקטובר 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Gastroenterology, Changhai Hospital, Naval Medical University, 2National Key Laboratory of Immunity and Inflammation, Naval Medical University, 3College of Basic Medical Science, Naval Medical University, 4Department of Gastroenterology, Shanghai Pudong New Area Gongli Hospital Shanghai, 5Department of Gastroenterology. Affiliated Yueqing Hospital, Wenzhou Medical University

* These authors contributed equally

במאמר זה

סיכום

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

הפרוטוקול הנוכחי מתאר גישה חדשה למידול דלקת לבלב חסימתית כרונית, הכוללת הדמיה של צינור הלבלב ואלקטרו-קואגולציה של צינור הלבלב כדי לגרום לחסימת צינור הלבלב.

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

דלקת לבלב כרונית (CP) היא מצב דלקתי חמור שעלול להרוס את הלבלב, להוביל לסוכרת ולהגביר את הסיכון לסרטן הלבלב, ולהשפיע קשות על איכות החיים של החולים. טיפול ב-CP הוא מוקד מחקר קריטי בגסטרואנטרולוגיה. פיתחנו מודל חדש של בעלי חיים כדי להתגבר על המגבלות של הקיימים, תוך שימוש בעכברים זכרים בני 8 שבועות C57BL/6.

לאחר שחשפנו את הלבלב באמצעות ניתוח בטן בעכברים מורדמים, הידקנו את צינור המרה המשותף ליד הכבד כדי למנוע מתילן כחול להיכנס אליו. נימים הוכנסו לצינור המרה כדי להזריק את הצבע, ולאחר שצינור הלבלב הוכתם. לאחר הדמיית צינור הלבלב, הלבלב נבחר לקרישה חשמלית ב-2/3 האמצעי והתחתון של המיקום בין צינור המרה המשותף לעורק הלבלב העליון. קרישה חשמלית הופסקה כאשר לא ניתן היה לזהות את תמיסת הצביעה הכחולה. לאחר מכן הבטן נסגרה, והעכברים הורמו בדרך כלל. ב-7, 14, 21 ו-28 ימים לאחר הניתוח, הלבלב נבדק באמצעות צביעת HE, צביעת מאסון ואימונוהיסטוכימיה, וסרום הדם נותח לפרמטרים ביוכימיים. הפתולוגיה לאחר 14 יום תאמה מאוד את המאפיינים של דלקת לבלב כרונית, וכך גם הפרמטרים הביוכימיים בסרום.

מבוא

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

דלקת לבלב כרונית (CP) היא הפרעה דלקתית מתקדמת חמורה, המובילה להרס הלבלב ומתבטאת בכאבי בטן והפרעות עיכול. עם הזמן, זה יכול לגרום לסוכרת ולהגביר את הסיכון לסרטן הלבלב. לפיכך, ביסוס המודל החייתי של שיתוק מוחין ופיתוח אסטרטגיות טיפוליות יעילות הוא קריטי.

תאי אצינאר אקסוקריניים בלבלב מייצרים ומפרישים מספר רב של אנזימי עיכול. כאשר אברונים ויסות הומאוסטזיס של חלבונים מופרעים, זה יכול להוביל להפעלה לא נכונה של טריפסינוגן תוך תאי, מה שמוביל בסופו של דבר לנזק לתאי אצינאר ולהתפתחות דלקת לבלב1.

מחקרים קודמים הראו כי מודלים של עכברים, במיוחד אלה המושרים על ידי זריקות סרולין חוזרות ונשנות2 וקשירה כירורגית של צינורות הלבלב 3,4, היו חיוניים בחקר CP. סרולאין יכול לגרום לדלקת לבלב חריפה שעלולה לעבור למצב כרוני, אך היעדר חסימה ספציפית של צינור הלבלב מגביל את המשמעות הקלינית שלו בהדמיית דלקת לבלב חסימתית. למרות שקשירה כירורגית מחקה טוב יותר את האופי החסימתי של CP אנושי, היא פולשנית מאוד, קשה לביצוע, ולעתים קרובות מובילה להשפעות מערכתיות חמורות, מה שמפריע לחקר פתולוגיות צינוריות מקומיות.

בהתמודדות עם מגבלות אלה, הוצע מודל CP חסימתי חדש באמצעות אלקטרו-קואגולציה. בדומה לעיקרון של קשירת צינורות הלבלב, הוא חוסם את צינור הלבלב אך קל יותר לביצוע ובעל אחוזי הצלחה גבוהים יותר. חוקרים הציעו כי אבלציה בגלי רדיו בצינור הלבלב הראשי של חזירים היא שיטה בטוחה ויעילה לגרימת ניוון לבלב5, מה שמצביע גם על כך שניתוק צינור הלבלב הראשי עם אלקטרו-קואגולציה בתדר גבוה עשוי לייצר השפעות דומות. טכניקה זו כוללת ניקוב צינור הלבלב לאחור והזרקת תמיסת מתילן כחולה לצביעה צינורית, ואחריה אלקטרו-קואגולציה כדי לגרום לחסימת צינור מקומית (איור 1). גישה זו מזרזת דלקת ופיברוזיס המחקה CP חסימתי אנושי תוך הימנעות מתגובה דלקתית נרחבת וסיבוכים מערכתיים. בהשוואה למודלים קונבנציונליים, מודל האלקטרו-קרישה מציע מספר יתרונות: הוא מכוון במיוחד לצינור הלבלב, מפחית את השונות ומפחית סיבוכים מערכתיים. הוא מספק גישה ספציפית יותר למחלה, ניתנת לשחזור ורב-תכליתית להבנת המנגנונים העומדים בבסיס חסימת צינורות ב-CP ותפקידה בהתקדמות המחלה.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כל הניסויים בבעלי חיים שתוארו אושרו על ידי הוועדה לשימוש וטיפול בבעלי חיים של האוניברסיטה הרפואית של הצי. ודא שכל חומרי הניתוח סטריליים.

1. לפרוטומיה

  1. יש לתת תערובת של קטמין (80 מ"ג/ק"ג) וקסילזין (10 מ"ג/ק"ג) באמצעות הזרקה תוך-צפקית לזירוז הרדמה. עקוב אחר עומק ההרדמה על ידי הערכת אובדן רפלקס הדוושה ורפלקס הקרנית. לספק מינונים נוספים (20% מהמינון הראשוני) לפי הצורך כדי לשמור על הרדמה נאותה במהלך ההליך. אשר עומק הרדמה הולם על ידי צביטה של אצבעות הרגליים. הנח את החיה על כרית חימום כדי לשמור על טמפרטורת הגוף.
  2. השתמש בגוזם כדי לגלח את השיער (~2 ס"מ2) בין החזה לבטן התחתונה. יש לחטא את אזור הניתוח פי 3 עם סבבים לסירוגין של כלורהקסידין/יוד ואלכוהול.
  3. מקבעים את העכברים לצלחת הניתוח באמצעות סרט כירורגי ומורחים וילונות סטריליים.
  4. השתמש במספריים כדי לבצע חתך באורך 2 ס"מ במרכז הבטן, ואחריו חתך של 1 ס"מ בין הבטן העליונה לתהליך ה-xiphoid.

2. איתור וחשיפת הלבלב

  1. בעזרת מרחיב בטן, אתר את אזור הלבלב בו תבוצע קרישה חשמלית.
  2. בעזרת צמר גפן סטרילי, זהה את התריסריון מהחלק האחורי של הבטן העליונה השמאלית, וסובב את התריסריון כדי לדמיין את צינור המרה השקוף המחבר את הכבד.

3. מעקב אחר אתר הניתוח

  1. השתמש בקליפ מיקרו-וסקולרי כדי לחסום זמנית את צינור המרה המשותף הפרוקסימלי ולמנוע דליפה של עירוי לאחור לכבד.
  2. חבר את צינור הפוליאתילן בקוטר פנימי של 0.25 מ"מ וקוטר חיצוני של 0.35 מ"מ למחט בקוטר חיצוני של 0.25 מ"מ. השתמש במכשיר זה כדי להכניס אותו סביב האמפולה. כוונו אל הפפילה העיקרית של התריסריון והכניסו לתוכה את הצינור. הכנס את הקטטר לתוך צינור המרה באמצע הדרך ועצור את ההחדרה.
  3. הפעל את משאבת העירוי, ומיקרו-משאבה תמיסת מתילן כחולה 0.2% (מדוללת ב-0.9% מי מלח) במינון של 50 מיקרוליטר / 10 גרם למשך 2 דקות בקצב של 50 מיקרוליטר לדקה. צינור הלבלב יהפוך בהדרגה לכחול.
  4. בסוף הפגישה, משוך את צינור הפוליאתילן החוצה והסר את הקליפ המיקרו-וסקולרי.

4. אינדוקציה של הליך אלקטרו-קואגולציה

  1. בעזרת צמר גפן סטרילי, יש לתקן את הלבלב ולכוון את סכין האלקטרו-קואגולציה לחלק הכחול לצורך קרישה חשמלית. אתר האלקטרו-קואגולציה נמצא באמצע והתחתון 2/3 בין צינור המרה המשותף לעורק הלבלב העליון בתריסריון.
    1. כדי לעקוב אחר מחקר זה, השתמש בפרמטרי ההפעלה הבאים של קרישה חשמלית: מתח : 220 וולט; חומר אלקטרודה: נחושת טהורה; זמן הטיפול: טיפול במיקום הלבלב הימנעות מכלי דם למשך 2-3 שניות, עד להחלפת המיקום המסומן בכחול מתילן בצהוב או חום לאחר קרישה חשמלית; גודל אזור פעולה: בהתאם לעכברים, אזור האלקטרו-קרישה ממוקם בחלק האחורי של הלבלב. בחר את המיקום בין צינור המרה המשותף לעורק הלבלב העליון הקדמי; טמפרטורה: 300 מעלות צלזיוס.
  2. הפסק את הקרישה החשמלית כאשר תמיסת הצביעה הכחולה אינה נראית.
  3. סגור את הבטן עם 4-0 תפרים נספגים ואת העור עם 4-0 תפרי פוליפרופילן מונופילמנטים שאינם סופגים. אין לקחת יותר מ-20 דקות בין לפרוטומיה לתפירה.
  4. יש לטפל בקבוצת הביקורת באותו אופן כמו בעכברי הניסוי, אך לוודא כי מרכיבי העירוי מורכבים ממתילן כחול בלבד. בקבוצת הביקורת (Sham), יש לתת את זריקת המתילן הכחול, אך לא לבצע ניתוח אלקטרו-קואגולציה.

5. שמירה על בעלי חיים

  1. לטיפול בפצע לאחר הניתוח בעכבר לאחר ניתוח בטן, יש לבחון את החתך מדי יום לאיתור דימום או אדמומיות: אם מתרחש דימום, יש להפעיל לחץ עדין עם גזה סטרילית כדי לעצור אותו ואז להחליף את התחבושת, ואם יש אדמומיות, למרוח משחת אריתרומיצין פעם ביום, תוך נקיטת אמצעים למניעת כרסום הפצע על ידי העכבר. לגבי משככי כאבים, יש לתת קרפרופן (5 מ"ג/ק"ג) באמצעות הזרקה תוך צפקית מיד לאחר הניתוח, ולאחר מכן אחת ל-24 שעות למשך 3 ימים רצופים.

6. שיטות לאנליזה

  1. למדוד אינדקסים ביוכימיים בסרום ולהתבונן בשינויים פתולוגיים ברקמת הלבלב בימים ה-7, ה-14,ה-21 וה-28 של קרישה חשמלית.
  2. להרדים את בעל החיים בתערובת של קטמין (80 מ"ג/ק"ג) וקסילזין (10 מ"ג/ק"ג) באמצעות הזרקה תוך-צפקית ולאסוף כ-500 מיקרוליטר דם דרך מקלעת המסלול.
  3. יש להחזיק בעדינות את העור מאחור כדי להקל על בליטה קלה של גלגל העין.
  4. הניחו את קצה הנימים בזווית העין והכניסו אותו בעדינות מתחת לגלגל העין בזווית של כ-30°-45°. סובב את הנימים עד שהדם מתחיל לזרום.
  5. בתום הקולקציה יש לשמור על העפעפיים סגורים על ידי הפעלת לחץ עדין עם גזה.
  6. צנטריפוגה את הסרום (1,200 × גרם, 15 דקות) והסר את הסופרנטנט לקביעת עמילאז, בילירובין וחומצה היאלורונית (שלב 6.10).
  7. להרדים עכברים עם קטמין-קסילזין, לוודא שהם במצב הרדמה עמוקה (ללא רפלקס דוושה או רפלקס קרנית), ואז לבצע פריקת צוואר הרחם להמתת חסד.
  8. הניחו את העכברים המומתים על שולחן הניתוחים בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס, והשתמשו במספריים ובמלקחיים כדי לבצע חתך "V" בדופן הבטן כדי לחשוף את חלל הבטן. הסר את הלבלב של העכברים וחלק את האיבר לשלושה חלקים לצביעה.
  9. עבדו את הלבלב על ידי קיבועו בתמיסת פוליפורמלדהיד 4% והטמיעו אותו בפרפין. חותכים גושי פרפין של הלבלב לחלקים בעובי 0.5 מ"מ ומכתימים אותם בהמטוקסילין ואאוזין (HE) וכן את הכתם של מאסון להדמיה במיקרוסקופ אור. השתמש ברקמת הלבלב המשובצת בפרפין לניתוח אימונוהיסטוכימי.
  10. מדוד עמילאז (U/dL), בילירובין (mmol/L) וחומצה היאלורונית (μg/L) באמצעות ערכות זמינות מסחרית בהתאם להמלצות היצרנים.

תוצאות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

החיות חולקו לקבוצת ביקורת (רק הזרקה של מתילן כחול לקרישה חשמלית) וקבוצת קרישה חשמלית, בסך הכל 20 עכברים בכל קבוצה. שיעור התמותה היה 0% בקבוצת הביקורת ו-15% בקבוצת הקרישה החשמלית; אחוזי ההצלחה של בניית המודל (מספר עכברי המודל החיים) עמדו על 71%. בכל קבוצה נבחרו תריסר בעלי חיים להערכה פתולוגית. שלושה עכברים בכל קבוצה נבחרו באופן אקראי ביום ה-7, ה-14,ה-21 וה-28 לצביעה HE, מאסון ואימונוהיסטוכימיה. תהליך המידול מוצג באיור 1. לאחר מעקב עם מתילן כחול, קרשנו את המיקום בין צינור המרה המשותף לעורק הלבלב העליון הקדמי על הלבלב של עכברים. אם אזור הקרישה החשמלית נבחר בחלק האמצעי והתחתון של המיקום עם שטח של פחות משליש, סביר להניח שההשפעה לא תעמוד בציפיות. עם זאת, אם הוא עולה על 2/3, סביר להניח שהעכברים ימותו תוך 72 שעות מרגע הקרישה החשמלית, מה שככל הנראה נובע מדלקת לבלב חריפה חמורה המתרחשת לאחר חסימה מוחלטת של צינור הלבלב.

מכאן אנו מסיקים כי ביום ה -14 לאחר קרישה חשמלית, ניתן להבחין בתמונה היסטולוגית של דלקת לבלב כרונית בלבלב של עכברים (כפי שמוצג באיור 1), שאינו חסום לחלוטין אלא נוצר לאחר חסימה חלקית של צינור הלבלב. הרקמה ביום השביעי הראתה בצקת קלה ברקמות, והרקמה לא הראתה עדות לדלקת לבלב כרונית. ביום ה-14, צביעת HE של רקמת הלבלב הראתה שתאי אצינר בלבלב התפזרו. ביום ה -21 התאוששה בהדרגה מידת הדלקת של תאי האצינר ברקמת הלבלב. היו סימנים של היפוך השינויים הפתולוגיים ברקמה ביום ה-28 (איור 2). זה יכול לנבוע מחוסר קרישה לא מספקת של צינור הלבלב במהלך תהליך האלקטרו-קואגולציה, כמו גם מההשפעה המפצה של צינור הלבלב שנותר לאחר חסימה חלקית של צינור הלבלב.

צביעת מאסון הראתה כי מידת הפיברוזיס בקבוצת הניתוח הייתה חמורה משמעותית מזו בקבוצת הניתוח המדומה. הציונים האימונוהיסטוכימיים לצביעה של col-1 ו-SMA (אלפא-שריר חלק) היו גבוהים יותר (איור 3). נוכחות של דלקת לבלב כרונית ברקמת הלבלב נצפתה על ידי ניתוח פתולוגי ביום 14, והשינויים לפני ואחרי הושוו על ידי צביעת HE רק בניתוח פתולוגי לאחר מכן. באמצעות ניתוח האינדיקטורים הביוכימיים בסרום, ריכוזי עמילאז, בילירובין וחומצה היאלורונית בסרום נמצאו גבוהים יותר בקבוצת הקרישה החשמלית מאשר בקבוצת הביקורת, מה שמעיד על התחלה של דלקת לבלב כרונית (איור 4).

figure-results-1
איור 1: המחשה סכמטית של דלקת לבלב כרונית חסימתית הנגרמת באמצעות אלקטרו-קואגולציה בעכברים. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.

figure-results-2
איור 2: צביעת המטוקסילין-אאוזין של רקמות הלבלב לאורך זמן. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.

figure-results-3
איור 3: צביעת המטוקסילין-אאוזין ומאסון ואימונוהיסטוכימיה של הלבלב. קיצורים: Col-1 = אלפא-1 סוג 1 קולגן; SMA = אקטין שריר חלק אלפא. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.

figure-results-4
איור 4: תוצאות מייצגות של מדדים ביוכימיים בסרום של עכברים בתקופות שונות. (A) ריכוז חומצה היאלורונית בסרום (מק"ג/ליטר). (B) ריכוז בילירובין בסרום (mmol/L). (C) ריכוז עמילאז בסרום (U/dL). אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.

דיון

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

הסיכון והחומרה של דלקת הלבלב נקבעים עלידי גורמים גנטיים וסביבתיים כאחד. ריפוי מלא של דלקת לבלב קלינית הוא מטרה בגסטרואנטרולוגיה, כאשר יצירת מודלים של בעלי חיים היא הצעד הראשון. קיימות שיטות שונות להקמת מודלים אלה, כל אחת עם היתרונות והחסרונות שלה 7,8,9,10,11.

מנתחים השתמשו באלקטרו-קואגולציה בתדר גבוה כדי לבצע אבלציה תרמית אנדולומינלית (ETHA) בצינור הלבלב הראשי כדי להפחית את הפרשת הלבלב החיצונית, ובכך להפחית את השכיחות של פיסטולה בלבלב לאחר הניתוח (POPF) לאחר כריתת הלבלב (PD)12. זה מצביע על כך ששיטת האבלציה התרמית הגורמת לניוון הלבלב יושמה בפרקטיקה הקלינית. פיתחנו מודל חדש של דלקת לבלב חסימתית על ידי שימוש במתילן כחול כדי לדמיין את צינור הלבלב וקרישה מדויקת שלו.

C57BL/6 עכברים זכרים בני 8 שבועות נבחרו לניסוי זה. לעכברים נקבות יש מחזור רבייה, ולרמות ההורמונים בגוף עשויה להיות השפעה על נתוני הניסוי. בגיל 8 שבועות, העכברים היו בשיא חייהם עם איברי גוף בוגרים ומדד בריאות לחיים טובים, והעכברים הזכרים באותו גיל היו חזקים יותר בגודלם. בחודש התצפית שלאחר הניתוח, דגמנו לבלב עכברים ב-7, 14, 21 ו-28 ימים; התוצאות המתקבלות לאחר 14 יום תואמות ביותר את המאפיינים הפתולוגיים של דלקת הלבלב.

ישנן מספר אזהרות לגישה זו. ראשית, יש להדק את צינור המרה המשותף קרוב ככל האפשר להילום הכבד כדי להקל על הזרקת הצבע לצינור הלבלב. שנית, יש לשים לב למהירות וזמן הזרקת צבע כחול מתילן לצינור הלבלב. לא ניתן לראות את צינור הלבלב עם מעט מדי תמיסת צבע, ויותר מדי תמיסת צבע תפריע לזיהוי מיקום צינור הלבלב הראשי בשדה הניתוח. שלישית, קרישה חשמלית הופסקה כאשר לא ניתן היה לראות את תמיסת הצביעה הכחולה. בניסויים אלה מבוצע ניתוח באזור המצוין על ידי כתם המתילן הכחול, מכיוון שאזור הלבלב של העכבר שנקרש יהיה שונה, וזו הסיבה שהכתם הכחול מתילן משמש למעקב אחר צינור הלבלב. רביעית, יש להפסיק מיד כל דימום בלבלב במהלך הניתוח. במקביל, יש להשתמש בסכין האלקטרו-קואגולציה לחיתוך הלבלב. אם סכין האלקטרו-קואגולציה דבוקה ללבלב מכל סיבה שהיא, יש להאריך את זמן האלקטרו-קואגולציה. זוהי הדרך הנפוצה ביותר למנוע התרחשות של סיבוכים חמורים לאחר הניתוח הנגרמים כתוצאה מדליפת לבלב.

עם זאת, ישנם חסרונות לשיטה זו. מיומנות המפעיל משפיעה ישירות על תוצאת הניסוי, ואחידות הניתוח בין עכברים שונים משפיעה על אחוזי ההצלחה של המודל. מודל זה מדמה את ההשפעות של אבני מרה או חסימת צינור הלבלב, מה שמוביל להתקפים חוזרים ונשנים של דלקת לבלב חריפה, שבסופו של דבר גורמת לדלקת לבלב כרונית. זה יכול להסביר את רמות הבילירובין הגבוהות. לכן, ניתן לפתח מודל זה גם כמודל דלקת לבלב חריפה המבוסס על מידת הקרישה החשמלית. ניסויים מוקדמים בלבלב של עכברים 3 ימים לאחר קרישה חשמלית הראו מאפיינים של דלקת לבלב חריפה, אך סיבוכים לאחר הניתוח הורידו את שיעור ההצלחה של המודל לדלקת לבלב חריפה. עם זאת, לא ניתן לשלול כי ייתכן שהחום שנוצר על ידי האלקטרו-קאווטרציה במהלך תהליך האלקטרו-קואגולציה התפשט לצינור המרה הראשי. כדאי לחקור את השאלה כיצד לגרום ביציבות לדלקת לבלב חריפה באמצעות אלקטרו-קואגולציה.

בהשוואה לשיטת הזרקת הסרולין המסורתית, הדורשת זריקות חוזרות ונשנות לאורך מספר שבועות, שיטת האלקטרו-קרישה חוסכת זמן ונוחה יותר. בעוד שהזרקת סרולין מדגימה יציבות מצוינת וקלות פעולה, קרישה חשמלית אורכת ~20 דקות וחוסכת זמן ניסוי לאחר מכן.

פיתוח מודלים חדשים נועד לחקור את ההיסטוריה הטבעית של המחלה ולפתח טיפולים ממוקדים. המודל החדש שלנו מסייע בהדמיית דלקת לבלב כרונית הנגרמת על ידי חסימת צינור הלבלב בעכברים, כולל דלקת לבלב כולנגיופנקראטוגרפיה פוסט-אנדוסקופית (ERCP)13.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

המחברים מצהירים שאין להם ניגודי אינטרסים.

תודות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

עבודה זו נתמכה על ידי התוכנית הכללית של הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (מענק מס' 81770642), התוכנית הכללית של הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (מענק מס' 82170657), פרויקט של ועדת הבריאות פודונג של שנחאי (מענק מס. PWYgf2021-08), וקרן מדעי הטבע של מחוז ג'ג'יאנג (LGF22H030014). הצבעים מולאו בעזרת BioRender.com.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
קליפס מיקרווסקולרי 16 מ"מסטרונגר, נינגבו, סין
תפר נספגמפעל המכשור הרפואי יאנגג'ואו ג'ינחואן4-0-
קרפרופןשנחאי מקלין ביוכימיה בע"מ.C830557-5 גרם-
צינור קפילריטייגון, ארה"ב  AAQ(AAD)040910.25 x 0.3 מ"מ
סכין אלקטרוקואגולציהשון יה ציוד רפואי בע"מ, נינגבו, סיןשון יה BDDD-יה-DF-1
מספריים לעיניים
הזרקת הידרוכלוריד קטמין (Ketaset CIII)זוטיס בע"מ.S5564-
תמיסת צביעת מתילן כחולהסולארביו, שנגחאי, סין  G1303
תפר פוליפרופילן מונופילמנט 4-0 לא סופגג'ינחואן, שנגחאי, סין
מיקרוסקופ תפעולימורזידר, גואנגדונג, סיןMSD203
מלקחיים עיניים
מטוש ראש עגולאולגה שרר, חואקסימדיקל, סין
מחט מזרקמינאנק, ג'ג'יאנג, סין0.25 מ"מ
מלקחיים רקמתיים
מספריים לרקמותתאגיד טכנולוגיית הכלים של שנגחאי פוקסין
הזרקת הידרוכלוריד קסילזיןBayer Animal HealthXYL-50-20-

מקורות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Ding, W. -X., Ma, X., Kim, S., Wang, S., Ni, H. -M. Recent insights about autophagy in pancreatitis. eGastroenterology. 2 (2), e100057(2024).
  2. Van Laethem, J. L., Robberecht, P., Resibois, A., Deviere, J. Transforming growth factor beta promotes development of fibrosis after repeated courses of acute pancreatitis in mice. Gastroenterology. 110 (2), 576-582 (1996).
  3. Watanabe, S., Abe, K., Anbo, Y., Katoh, H. Changes in the mouse exocrine pancreas after pancreatic duct ligation: a qualitative and quantitative histological study. Arch Histol Cytol. 58 (3), 365-374 (1995).
  4. Cáceres, M., et al. Pancreatic duct ligation reduces premalignant pancreatic lesions in a Kras model of pancreatic adenocarcinoma in mice. Sci. Rep. 10 (1), 18344(2020).
  5. Andaluz, A., et al. Endoluminal radiofrequency ablation of the main pancreatic duct is a secure and effective method to produce pancreatic atrophy and to achieve stump closure. Sci Rep. 9 (1), 5928(2019).
  6. Lerch, M. M., Gorelick, F. S. Models of Acute and Chronic Pancreatitis. Gastroenterology. 144 (6), 1180-1193 (2013).
  7. Zhang, D. Y., et al. Methods of a new chronic pancreatitis and spontaneous pancreatic cancer mouse model using retrograde pancreatic duct injection of dibutyltin dichloride. Front Oncol. 12, 947133(2022).
  8. Tian, C. Y., Zhao, J., Xiong, Q. Q., Yu, H., Du, H. H. Secondary iron overload induces chronic pancreatitis and ferroptosis of acinar cells in mice. Int J Mol Med. 51 (1), 9(2023).
  9. Samuel, I., et al. A novel model of severe gallstone pancreatitis: Murine pancreatic duct ligation results in systemic inflammation and substantial mortality. Pancreatology. 10 (5), 536-544 (2010).
  10. Peng, C., et al. Murine chronic pancreatitis model induced by partial ligation of the pancreatic duct encapsulates the profile of macrophage in human chronic pancreatitis. Front Immunol. 13, 840887(2022).
  11. Chetty, U., Gilmour, H. M., Taylor, T. V. Experimental acute pancreatitis in the rat--a new model. Gut. 21 (2), 115-117 (1980).
  12. Ielpo, B., et al. Clinical case report: endoluminal thermal ablation of main pancreatic duct for patients at high risk of postoperative pancreatic fistula after pancreaticoduodenectomy. International Journal of Hyperthermia. 38 (1), 755-759 (2021).
  13. Gorelick, F. S., Lerch, M. M. Do animal models of acute pancreatitis reproduce human disease. Cell Mol Gastroenterol Hepatol. 4 (2), 251-262 (2017).

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

Chronic PancreatitisElectrocoagulation ModelPancreatic DuctAnimal ModelC57BL 6 MiceAbdominal SurgeryBile Duct ClampingMasson StainingImmunohistochemistryPancreatic Fibrosis

מאמרים קשורים