הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

מידול והערכה של מודל קרדיומיופתיה סוכרתית בעכברים

2.2K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/67189

⸱

29 בנובמבר 2024

 ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Cardiology, West China Hospital, Sichuan University, 2Laboratory of Cardiac Structure and Function, Institute of Cardiovascular Diseases, West China Hospital, Sichuan University, 3Cardiac Structure and Function Research Key Laboratory of Sichuan Province, West China Hospital, Sichuan University

* These authors contributed equally

במאמר זה

סיכום

פרוטוקול זה מתאר שיטה להשראת קרדיומיופתיה סוכרתית באמצעות שילוב של האכלה בתזונה עתירת שומן והזרקת סטרפטוזוטוצין. גישה זו שואפת לספק מסגרת אמינה לחקירה מדעית של קרדיומיופתיה סוכרתית ולחקור דרכים פוטנציאליות ליישומי טיפול קליני.

תקציר

המנגנונים הפתופיזיולוגיים הבסיסיים של קרדיומיופתיה סוכרתית (DbCM), גורם מוביל לתמותה בקרב חולים עם סוכרת מסוג 2 (T2DM), נותרו לא מובנים היטב. רעילות שריר הלב הקשורה לסוכרת מסוג 2 מיוחסת לגורמים כמו רעילות ליפוטוקסיות, גלוקוטוקסיות, מתח חמצוני, יעילות לב מופחתת וליפואפופטוזיס. בהשוואה לחולדות, עכברים מציעים נגישות רבה יותר, עלות-תועלת וישימות רחבה יותר לניסויים בבעלי חיים. תנגודת לאינסולין ופגיעה בהפרשת אינסולין הם גורמים מכריעים בפתופיזיולוגיה של סוכרת מסוג 2. אנו מציגים מודל עכברי לא גנטי חדש המשחזר את התקדמות ה-DbCM האנושי המושרה על ידי שילוב של תזונה עתירת שומן (HFD) והזרקת סטרפטוזוטוצין (STZ). במחקר זה, השתמשנו בעכברי C57BL/6J מסוג פרא, וניהלנו משטר HFD במשך 12 שבועות, ולאחר מכן הזרקות תוך-צפקיות של STZ למשך 12 שבועות נוספים כדי לגרום לביטויים אופייניים של T2DM. ביצענו בדיקות סבילות לגלוקוז דרך הפה ומדדנו את ריכוזי האינסולין בסרום כדי לאשר התפתחות של תנגודת לאינסולין והפרשת אינסולין לא מספקת. מבנה ותפקוד הלב הוערכו בקפדנות באמצעות אקו לב טרנס-חזה לא פולשני. המאפיינים הפתולוגיים הוערכו באמצעות צביעת הטריכרום של מאסון וצביעה אגלוטינין נבט חיטה (WGA), וחשפו מאפיינים פתולוגיים הקשורים ל-DbCM. לכן, אנו מספקים שיטה חזקה ורב-תכליתית לביסוס מודל עכברי לא גנטי של DbCM.

מבוא

סוכרת מסוג 2 (T2DM) היא דאגה בריאותית עולמית שהולכת ומסלימה, ועומדת כגורם מוביל לתחלואה ותמותה בקרב אנשים שנפגעו. השכיחות של T2DM קשורה קשר הדוק למגיפה הגוברת של השמנת יתר 1,2. יותר משליש מהחולים עם T2DM מציגים פנוטיפ קרדיווסקולרי מובהק הנקרא קרדיומיופתיה סוכרתית (DbCM), המאופיין בתפקוד לקוי של שריר הלב המתרחש ללא תלות במחלת עורקים כליליים, יתר לחץ דם ומחלת לב מסתמית3. עדויות חדשות מצביעות על כך שכ-20% מחולי הסוכרת נוטים לפתח אי ספיקת לב3, מצב הקשור קשר הדוק לפרוגנוזה שלהם4. הוצעו מספר מנגנונים פתופיזיולוגיים של DbCM, כולל דלקת5, שיפוץ לב ותפקוד לקוי6, תפקוד לקוי של המיטוכונדריה7, מתח חמצוני8 והפרעות מטבוליות9. למרות מחקר מקיף, הספקטרום המלא של המנגנונים ותרומתם האישית ל-DbCM נותרו לא מובנים לחלוטין10. לכן, מודלים פרה-קליניים מבוססים של בעלי חיים חיוניים לקידום המחקר של מצב זה.

סוכרת מסוג 2 מאופיינת בתנגודת לאינסולין ואי ספיקת אינסולין מתקדמת11, כאשר רובם סובלים מעודף משקל או השמנת יתר12. במחקר זה, אנו מבססים מודל עכברי יציב ושונה של DbCM המבוסס על מחקרים קודמים, המשלב האכלה בתזונה עתירת שומן (HFD) והזרקת סטרפטוזוטוצין (STZ). בסוכרת מסוג 2, תנגודת לאינסולין והרס תאי β בלבלב תורמים לפתופיזיולוגיה של המחלה12. מודל זה ממנף שני גורמי סיכון בולטים של T2DM. באופן ספציפי, עכברים שניזונו מ-HFD מפתחים עמידות לאינסולין, וזריקות STZ שלאחר מכן פוגעות עוד יותר בתפקוד תאי β של אי הלבלב, מה שמוביל באופן משמעותי להתקדמות של פתופיזיולוגיה דמוית T2DM. STZ, שבודד מ-Streptomyces achromogenes, תואר לראשונה בשנת 1963 בשל ההרס הסלקטיבי של תאי β באי הלבלב ותכונותיו הסוכרתיות13. ישנם שני מודלים לטיפול ב-STZ: מתן מינון גבוה יחסית של STZ מביא למודל קרדיומיופתיה לטווח קצר, בעוד זריקות STZ חוזרות ונשנות במינון נמוך גורמות למודל T2DM שמתקדם באופן טבעי ל-DbCM. כתוצאה מהשיטה האחרונה, בעלי חיים מפתחים היפרגליקמיה, פולידיפסיה ופוליאוריה, כולם מאפיינים של סוכרת מסוג 2 אנושית ומפתחים DbCM באופן טבעי.

מחקר זה מצא כי עכברי C57BL/6J מסוג פרא שהוזנו ב-HFD ואחריהם זריקות STZ תוך צפקיות (30 מ"ג/ק"ג) הפגינו תפקוד לבבי, מורפולוגיה והיסטולוגיה התואמים את המאפיינים של DbCM עד סוף הניסוי. גישה זו מספקת שיטה יעילה להקמת מודל DbCM של עכברים.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

כל ההליכים פעלו בהתאם להנחיות המוסדיות למחקר בבעלי חיים בהתאם למדריך לטיפול ושימוש בחיות מעבדה שהותוו על ידי המכונים הלאומיים לבריאות בארה"ב (פרסום NIH מס' 85-23, תוקן ב-1996). כל הניסויים בבעלי חיים אושרו על ידי ועדת האתיקה לטיפול בבעלי חיים וועדת האתיקה של אוניברסיטת סצ'ואן. עכברי C57BL/6J זכרים נרכשו מחברת Beijing Vital River Laboratory Animal Technology Co. (סין). לאורך כל תקופת הניסוי, העכברים שוכנו בתנאים מבוקרים של 24 מעלות צלזיוס ומחזור אור/חושך מוסדר של 12 שעות, עם גישה אד-ליביטום למזון ומים.

figure-protocol-1
איור 1: ציר זמן סכמטי של ניסויים. העכברים ששימשו בקבוצות HFD/STZ ו-ND היו שניהם בגיל 7-8 שבועות בערך. משקל הגוף ורמת הגלוקוז האקראית בדם של כל עכבר נרשמו על בסיס שבועי. במרווחי האכלה של 12 שבועות ו-24 שבועות, הפנוטיפ המטבולי של עכברים הוערך על ידי בדיקת סבילות לגלוקוז דרך הפה (OGTT) ומדידת רמת אינסולין בסרום. בנוסף, אקו לב הוערך בנקודת ההתחלה (שבוע 0), 12 שבועות ו-24 שבועות. לאחר תקופת האכלה של 24 שבועות, העכברים הורדמו. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.

1. האכלת HFD

  1. האכילו עכברים זכרים C57BL/6J (בני 7-8 שבועות) בתזונה רגילה (ND) או HFD (60% קק"ל שומן) במשך 24 שבועות כדי לגרום להשמנה.
  2. רשום את משקל הגוף של כל עכבר כל 4 שבועות. ודא שעקומת המשקל מציגה דפוס דומה כלפי מעלה לפני 12 שבועות, עם שיפוע תלול יותר שנצפה בקבוצת HFD.

2. הכנה והזרקה של תמיסת STZ

הערה: אחסן STZ בטמפרטורה של -20 מעלות צלזיוס כדי למנוע השפלה עקב חוסר היציבות הגבוה שלו בטמפרטורת החדר (RT). יש לערבב STZ עם חוצץ ציטראט מיד תוך 5 דקות לפני ההזרקה.

  1. הכן מאגר ציטראט. שוקלים 2.1 גרם חומצת לימון (משקל מולקולרי יחסי: 210.14) וממיסים אותה היטב ב-100 מ"ל מים מזוקקים להכנת תמיסה A; שוקלים 2.94 גרם נתרן ציטראט (משקל מולקולרי יחסי: 294.10) וממיסים אותו היטב ב-100 מ"ל מים מזוקקים להכנת תמיסה B. מערבבים תמיסה A ו-B ביחס של 1: 1.32 כדי לקבל את תמיסת העבודה של חומצת הלימון. סנן זיהומים באמצעות קרום פילטר של 0.45 מיקרומטר.
  2. שוקלים 1 גרם STZ וממיסים אותו היטב ב 100 מ"ל מתמיסת העבודה של חומצת לימון מעורבת מוכנה. אחסן את תמיסת STZ שהתקבלה ב-4 מעלות צלזיוס. ודא שהזרקת תמיסת STZ מתרחשת תוך 30 דקות במידת האפשר.
  3. באמצעות מזרק של 1 מ"ל, יש לתת זריקות תוך-צפקיות של תמיסה המכילה 30 מ"ג/ק"ג STZ מדי יום במשך 7 ימים רצופים לעכברים בקבוצת HFD/STZ תוך מתן נפח שווה של חוצץ ציטראט (0.1 ממול/ליטר, pH = 4.5) לעכברים בקבוצת ה-ND.
  4. בדוק את רמות הגלוקוז בדם שבוע לאחר ההזרקה האחרונה. סווג עכברים המציגים ריכוזי גלוקוז אקראיים בדם העולים על 16.7 ממול/ליטר כעכברי T2DM.
    1. מקם בזהירות את העכבר על התקן ריסון, וודא שזנבו משתרע במלואו החוצה.
    2. לפני איסוף הדם, יש לחטא היטב את מקום איסוף הדם של הזנב עם ספוגית אלכוהול של 70%, תוך שמירה על סטריליות וניקיון.
    3. בעזרת מחט חדה, הכנס אותה לווריד הזנב, והתקדם מהקצה לכיוון הבסיס בעומק של 3-4 מ"מ. לאחר שהמחט נמצאת היטב במקומה, לחץ בעדינות על החלק העליון של הזנב כדי לעודד את זרימת הדם.
    4. אסוף כ-10 מיקרוליטר דם מעכבר והחל בזהירות את הדם שנאסף על רצועת הבדיקה הייעודית. לאחר ספיגת הדם, מד הסוכר יציג מיד את קריאת הגלוקוז בדם.

3. בדיקת סבילות לגלוקוז דרך הפה (OGTT)14

  1. לפני OGTT, צום כל עכבר למשך הלילה למשך 14 שעות, בזמן שיש לו גישה בלתי מוגבלת למים.
  2. הכן כ -10 מ"ל של תמיסת גלוקוז של 20%. יש לתת מינון של 1 גרם/ק"ג גלוקוז דרך הפה לכל עכבר במהלך ה-OGTT.
  3. עקוב אחר רמות הגלוקוז בדם במספר נקודות זמן: מיד (0 דקות), 15 דקות, 30 דקות, 60 דקות ו-120 דקות לאחר מתן התרומה.

4. הערכת אקו לב של תפקוד הלב

  1. בצע אקו לב על כל עכבר בנקודת ההתחלה (0 שבועות), 12 שבועות ו-24 שבועות לאחר האכלה ב-HFD או ב-ND.
  2. לפני אקו לב, יש להרדים את העכבר באמצעות שאיפה של 3% איזופלורן הניתנת עם 100% חמצן באמצעות מכונת הרדמה. ודא שהעכבר אינו מראה תגובה לצביטה בעור באמצעות פינצטה עם שיניים או גירוי של אצבעות הרגליים והזנב. מרחו משחה וטרינרית על העיניים למניעת יובש בזמן ההרדמה.
  3. מקם את העכבר על כרית חימום כדי לשמור על טמפרטורת הגוף, והדק את טפריו לאלקטרודה כדי להבטיח תנוחת שכיבה יציבה. התאם את ריכוז האיזופלורן בין 1%-2% להרדמה תחזוקתית כדי לשמור על קצב לב יעד של כ-450 פעימות לדקה.
  4. הסר את פרוות העכבר באמצעות קרם אפילציה ומרח ג'ל קולי על חזהו. הסר את קרם האפילציה והג'ל האולטראסוני עם מי מלח סטריליים לאחר אקו לב.
  5. הערך את תפקוד הלב והפרמטרים המבניים באמצעות בדיקה של 50 מגה-הרץ.
    1. כדי להשיג מבט אופטימלי על ציר ארוך של החדר השמאלי (LV), מקם את הגשושית בצד שמאל של החזה של החיה.
    2. בהתאם לאנטומיה האישית, סובב את הגשושית נגד כיוון השעון בין 15° ל-45° ביחס לקו הפרסטרנלי השמאלי, כאשר החריץ מופנה לכיוון כתפו הימנית. כוונן את ציר ה-x וציר ה-y תחת מצב B15.
      הערה: תצוגה מתאימה של ציר ארוך LV צריכה לכלול (i) את המסתם האאורטלי ושורש אבי העורקים; (ii) תא ה-LV ממוקם במרכז התצוגה; (iii) ציר הבסיס לקודקוד צריך להיות מקביל למתמר16.
    3. לחץ על מצב M 2x כדי להציג את קו המדידה. מקם קו זה בגובה השריר הפפילרי. לאחר מכן, בצע מדידות של לפחות שלוש פעימות לב רצופות כדי להבטיח דיוק. הקישו על 'שמור קליפ ' כדי לשמור את לולאת הקולנוע בסדרה.
    4. זהה את הממד הסיסטולי הסופי כשלב שחפף לגל ה-ECG T, וקבע את הממד הדיאסטולי הסופי כשלב המתאים לגל ה-ECG R.
    5. הטה את משטח הניתוח, וודא שהפינה השמאלית העליונה היא הנמוכה ביותר והפינה הימנית התחתונה היא הגבוהה ביותר. כוונן את הגשושית כך שתחדור לאורך כיוון קודקוד הלב של העכבר, במקביל לציר הארוך של הלב, כדי לקבל תצוגה טרנסאפיקלית של ארבעה חדרים.
    6. בחר ברציפות במצבי C (דופלר צבעוני) ו-PW (PW דופלר), מקם את נפח הדגימה בנקודת המהירות הגבוהה ביותר, התאם את כיוון הדגימה כך שיתאים לכיוון זרימת הדם, ורשום מידע המודינמי של המסתם המיטרלי (גל E ו-A)16. הקישו על 'שמור קליפ ' כדי לשמור את לולאת הקולנוע בסדרה.
  6. עצור את שאיפת האיזופלורן כדי לאפשר לעכברים לחזור להכרה. החזירו את בעלי החיים לכלובים שלהם, השוכנים בסביבה מבוקרת עם מחזור אור/חושך של 12 שעות בסימני 0 ו-12 שבועות. לאחר הערכת אקו לב של 24 שבועות, המתת חסד אנושית של העכברים באמצעות פריקת צוואר הרחם לאחר שאיפת איזופלורן.
  7. בצע את הניתוח של מקטע הפליטה (EF), קיצור השבר (FS), הדופן האחורית של החדר השמאלי (LVPW), הקוטר הפנימי של החדר השמאלי (LVID), המחיצה הבין חדרית (IVS) ויחס E/A באמצעות דונגל תחנת העבודה.

5. צביעה היסטולוגית

  1. לאחר השלמת הניתוח האקו-קרדיוגרפי בסימן 24 שבועות, המתת חסד של העכבר על ידי פריקת חוט השדרה לאחר שאיפת איזופלורן.
  2. נתח את העכבר בעזרת מספריים ופינצטה לעיניים. חתכו את הצלעות בזהירות כדי להבטיח חשיפה מלאה של הלב.
  3. לחלחל את הלב דרך הקודקוד במי מלח עד שהכבד הופך חיוור, מה שמעיד על זלוף מוצלח. הסר את הלב ושטוף אותו היטב במי מלח כדי להבטיח הסרת דם מלאה.
  4. בצע הטמעת פרפין17.
    1. תקן את הלב עם פורמלין 4% ב-RT למשך 24 שעות לפחות.
    2. הנח את קופסת ההתייבשות המכילה את הלב במייבש כדי לעבור תהליך התייבשות הדרגתי הכולל אלכוהול שיפוע ושטיפת שעווה ב-65 מעלות צלזיוס.
  5. הכן קטעי רקמה17.
    1. מניחים את גוש השעווה הקצוץ המכיל שריר פפילרי למיקרוטום לחיתוך, בעובי של 4 מיקרומטר, ומאחסנים ב-RT לצביעה פתולוגית.
  6. בצע צביעה באמצעות צביעת טריכרום18 ונבט חיטה אגלוטינין (WGA)19 של Masson.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

מחקר זה כלל הקצאה אקראית של עכברים לשתי קבוצות: קבוצת ND וקבוצת HFD/STZ, עם 6 עכברים בכל קבוצה. לאחר בדיקות האקו-לב ובדיקות ה-OGTT הסופיות 24 שבועות לאחר ההאכלה, העכברים הורדמו כדי לקצור את רקמות הלב שלהם להערכה היסטולוגית.

HFD/STZ גרם לעלייה ברורה במשקל הגוף, שהגיע לשיא תוך 12 שבועות, והיה גבוה משמעותית בהשוואה לקבוצת ה-ND. לאחר מתן STZ, נצפתה ירידה ניכרת במשקל הגוף בקרב העכברים בקבוצת HFD/STZ. לעומת זאת, העכברים בקבוצת ה-ND שמרו על עלייה קבועה במשקל הגוף שלהם במהלך 12 השבועות שלאחר מכן (

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

בהתחשב בשכיחות הנרחבת של סוכרת והסיבוכים הקרדיווסקולריים הנלווים אליה ברחבי העולם, יש צורך דחוף לחשוף את המנגנונים המולקולריים הבסיסיים ולפתח אסטרטגיות מניעה וטיפול למצב זה20. הפתוגנזה של DbCM, אחד הסיבוכים הקרדיווסקולריים לחולי T2DM, נותרה לא ברורה, ללא גישות יעילות למניעה וטיפול21. היעדר מודלים פרה-קליניים אמינים המחקים במדויק את התהליכים הפתופיזיולוגיים של הלב האנושי מדגיש את החשיבות של פיתוח מודל יציב ויעיל שתוכנן במיוחד לחקור מנגנוני D...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

למחברים אין מה לחשוף.

תודות

עבודה זו נתמכה על ידי הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (מספרי מענקים: U23A20395, 81900258 ו-82170375); פרויקט המחקר והפיתוח המרכזי של מחלקת המדע והטכנולוגיה של מחוז סצ'ואן (2022ZDZX0020); פרויקט קרן מיוחדת למחקר קליני של ענף הלב וכלי הדם של האגודה הרפואית הסינית (CSC) (CSCF2020B04); 1· 3· פרויקט 5 של בית החולים מערב סין, אוניברסיטת סצ'ואן (ZYGD23021). תודה לצ'ינג יאנג (מתקני ליבה להדמיית בעלי חיים, בית החולים מערב סין, אוניברסיטת סצ'ואן) על עזרתם באולטרסאונד של בעלי חיים קטנים.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
מערכת אולטרוסאונד של בעלי חייםFujifilm Visual SonicsVEVO 3100אקו לב
גלוקומטר דםYuwellGU100להעריך את רמת הגלוקוז בדם
חומצת לימוןSigma-Aldrich251275
IsofluraneRWD מדעי החייםR510-22הרדמה
וופורייזר איזופלורןRWD מדעי החייםR500הרדמה
אינסולין עכבר (INS) ELISA KitWuhan Feiyue Biotechnology Co., LtdFY-EM14029הערכת רמת האינסולין בסרום
קרם להסרת שיערNair255gהסר את הפרווה של
דיאטת מכרסמים עכבר עם 60% קק"ל שומןמחקר דיאטות בע"מD12492דיאטה עתירת שומן האכלה
נתרן ציטראטSigma-AldrichS4641
מסנן סטריליMerck MilliporeSLHV033N
סטרפטוזוציןSolarbioS8050
אולטרסאונד ג'לקפלרKL-250אקו לב
תחנת עבודה דונגלFujifilm Visual SonicsVevo LABניתוח נתונים אקו לב

מקורות

  1. Defronzo, R. A., et al. Type 2 diabetes mellitus. Nat Rev Dis Primers. 1, 15019(2015).
  2. Htay, T., et al. Mortality and cardiovascular disease in type 1 and type 2 diabetes. Curr Cardiol Rep. 21 (6), (2019).
  3. Jia, G., Hill, M. A., Sowers, J. R. Diabetic cardiomyopathy: An update of mechanisms contributing to this clinical entity. Circ Res. 122 (4), 624-638 (2018).
  4. Kenny, H. C., Abel, E. D. Heart failure in type 2 diabetes mellitus. Circ Res. 124 (1), 121-141 (2019).
  5. Biernacka, A., et al. Smad3 signaling promotes fibrosis while preserving cardiac and aortic geometry in obese diabetic mice. Circ Heart Fail. 8 (4), 788-798 (2015).
  6. Van Linthout, S., et al. Reduced MMP-2 activity contributes to cardiac fibrosis in experimental diabetic cardiomyopathy. Basic Res Cardiol. 103 (4), 319-327 (2008).
  7. Ni, R., et al. Therapeutic inhibition of mitochondrial reactive oxygen species with mito-tempo reduces diabetic cardiomyopathy. Free Radic Biol Med. 90, 12-23 (2016).
  8. Tan, Y., et al. Diabetic downregulation of Nrf2 activity via erk contributes to oxidative stress-induced insulin resistance in cardiac cells in vitro and in vivo. Diabetes. 60 (2), 625-633 (2011).
  9. Maack, C., et al. Heart failure and diabetes: Metabolic alterations and therapeutic interventions: A state-of-the-art review from the translational research committee of the heart failure association-european society of cardiology. Eur Heart J. 39 (48), 4243-4254 (2018).
  10. Ho, K. L., et al. structural and biochemical changes in diabetes and the development of heart failure. Diabetologia. 65 (3), 411-423 (2022).
  11. Saisho, Y. Beta-cell dysfunction: Its critical role in prevention and management of type 2 diabetes. World J Diabetes. 6 (1), 109-124 (2015).
  12. Galicia-Garcia, U., et al. Pathophysiology of type 2 diabetes mellitus. Int J Mol Sci. 21 (17), 6275(2020).
  13. Junod, A., et al. Studies of the diabetogenic action of streptozotocin. Proc Soc Exp Biol Med. 126 (1), 201-205 (1967).
  14. Einwallner, E., Nagy, C. Study of in vivo glucose metabolism in high-fat diet-fed mice using oral glucose tolerance test (OGTT) and insulin tolerance test (ITT). J Vis Exp. (131), e56672(2018).
  15. Wang, Q., et al. Induction of right ventricular failure by pulmonary artery constriction and evaluation of right ventricular function in mice. J Vis Exp. (147), e59431(2019).
  16. Zacchigna, S., et al. Towards standardization of echocardiography for the evaluation of left ventricular function in adult rodents: A position paper of the ESC working group on myocardial function. Cardiovasc Res. 117 (1), 43-59 (2021).
  17. Paraffin sides experiment report. , Servicebio. At https://www.servicebio.com/data-detail?id=5556&code=BLZPSYBG (2022).
  18. staining experiment report. , Servicebio. At https://www.servicebio.com/data-detail?id=5588&code=RSSYBG (2022).
  19. Paraffin WGA staining protocol. , Servicebio. At https://www.servicebio.com/data-detail?id=5041&code=MYYGSYBG (2022).
  20. Guariguata, L., et al. Global estimates of diabetes prevalence for 2013 and projections for 2035. Diabetes Res Clin Pract. 103 (2), 137-149 (2014).
  21. Tan, Y., et al. Mechanisms of diabetic cardiomyopathy and potential therapeutic strategies: Preclinical and clinical evidence. Nat Rev Cardiol. 17 (9), 585-607 (2020).
  22. Prasad, M., et al. A comprehensive review on high -fat diet-induced diabetes mellitus: An epigenetic view. J Nutr Biochem. 107, 109037(2022).
  23. Zhang, Y., et al. Positional cloning of the mouse obese gene and its human homologue. Nature. 372 (6505), 425-432 (1994).
  24. Adingupu, D. D., et al. Sglt2 inhibition with empagliflozin improves coronary microvascular function and cardiac contractility in prediabetic ob/ob(-/-) mice. Cardiovasc Diabetol. 18 (1), 16(2019).
  25. Huynh, K., et al. Coenzyme q10 attenuates diastolic dysfunction, cardiomyocyte hypertrophy and cardiac fibrosis in the db/db mouse model of type 2 diabetes. Diabetologia. 55 (5), 1544-1553 (2012).
  26. Moellmann, J., et al. Empagliflozin improves left ventricular diastolic function of db/db mice. Biochim Biophys Acta Mol Basis Dis. 1866 (8), 165807(2020).
  27. Ramirez, E., et al. Eplerenone attenuated cardiac steatosis, apoptosis and diastolic dysfunction in experimental type-ii diabetes. Cardiovasc Diabetol. 12, 172(2013).
  28. Fuentes-Antras, J., et al. Updating experimental models of diabetic cardiomyopathy. J Diabetes Res. 2015, 656795(2015).
  29. Riehle, C., Bauersachs, J. Of mice and men: Models and mechanisms of diabetic cardiomyopathy. Basic Res Cardiol. 114 (1), 2(2018).
  30. Zhao, S., Kusminski, C. M., Scherer, P. E. Adiponectin, leptin and cardiovascular disorders. Circ Res. 128 (1), 136-149 (2021).
  31. Parilla, J. H., Willard, J. R., Barrow, B. M., Zraika, S. A mouse model of beta-cell dysfunction as seen in human type 2 diabetes. J Diabetes Res. 2018, 6106051(2018).
  32. Wang, B., Chandrasekera, P. C., Pippin, J. J. Leptin- and leptin receptor-deficient rodent models: Relevance for human type 2 diabetes. Curr Diabetes Rev. 10 (2), 131-145 (2014).
  33. Vasanji, Z., Cantor, E. J., Juric, D., Moyen, M., Netticadan, T. Alterations in cardiac contractile performance and sarcoplasmic reticulum function in sucrose-fed rats is associated with insulin resistance. Am J Physiol Cell Physiol. 291 (4), C772-C780 (2006).
  34. Wright, J. J., et al. Mechanisms for increased myocardial fatty acid utilization following short-term high-fat feeding. Cardiovasc Res. 82 (2), 351-360 (2009).
  35. Flister, K. F. T., et al. Long-term exposure to high-sucrose diet down-regulates hepatic endoplasmic reticulum-stress adaptive pathways and potentiates de novo lipogenesis in weaned male mice. J Nutr Biochem. 62, 155-166 (2018).
  36. Kanwal, A., Pillai, V. B., Samant, S., Gupta, M., Gupta, M. P. The nuclear and mitochondrial sirtuins, sirt6 and sirt3, regulate each other's activity and protect the heart from developing obesity-mediated diabetic cardiomyopathy. FASEB J. 33 (10), 10872-10888 (2019).
  37. Winzell, M. S., Ahren, B. The high-fat diet-fed mouse: A model for studying mechanisms and treatment of impaired glucose tolerance and type 2 diabetes. Diabetes. 53 Suppl 3, S215-S219 (2004).
  38. Poucher, S. M., et al. Effects of saxagliptin and sitagliptin on glycaemic control and pancreatic beta-cell mass in a streptozotocin-induced mouse model of type 2 diabetes. Diabetes Obes Metab. 14 (10), 918-926 (2012).
  39. Islam, M. S., Loots Du, T. Experimental rodent models of type 2 diabetes: A review. Methods Find Exp Clin Pharmacol. 31 (4), 249-261 (2009).
  40. Heydemann, A. An overview of murine high fat diet as a model for type 2 diabetes mellitus. J Diabetes Res. 2016, 2902351(2016).
  41. Surwit, R. S., Kuhn, C. M., Cochrane, C., Mccubbin, J. A., Feinglos, M. N. Diet-induced type ii diabetes in c57bl/6j mice. Diabetes. 37 (9), 1163-1167 (1988).
  42. Clee, S. M., Attie, A. D. The genetic landscape of type 2 diabetes in mice. Endocr Rev. 28 (1), 48-83 (2007).
  43. Lee, J. Y., Kim, M. J., Moon, C. K., Chung, J. H. Degradation products of streptozotocin do not induce hyperglycemia in rats. Biochem Pharmacol. 46 (11), 2111-2113 (1993).
  44. Ozturk, N., Uslu, S., Ozdemir, S. Diabetes-induced changes in cardiac voltage-gated ion channels. World J Diabetes. 12 (1), 1-18 (2021).
  45. Bohne, L. J., Johnson, D., Rose, R. A., Wilton, S. B., Gillis, A. M. The association between diabetes mellitus and atrial fibrillation: Clinical and mechanistic insights. Front Physiol. 10, 135(2019).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

מודל עכבריתזונה עשירה בשומןהזרקת סטפטוזוטוצין (Streptozotocin)עמידות לאינסוליןסבילות לגלוקוז במתן פהאקו-לב טרנס-תורקליתפקוד לבבי לקויצביעת מסון טריכרום (Masson's Trichrome)אינסולין בנסיוב
מידול והערכה של מודל קרדיומיופתיה סוכרתית בעכברים
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.