הרפואה הסינית המסורתית היא אוצר עשיר של אפשרויות טיפול טבעיות, ויש לה תפקיד חשוב במתן מענה לצרכים בריאותיים מגוונים בכל רחבי העולם. מחקר זה מציג חקירה ניסויית מקיפה על המיצוי, ההפרדה והתכונות הפיזיקוכימיות של רוטין, המרכיב הפעיל העיקרי של Flos sophorae immaturus.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
מיצוי ואפיון הפלבנואיד רוטין מהרפואה הסינית המסורתית Flos sophorae immaturus
במאמר זה
סיכום
תקציר
הרפואה הסינית המסורתית (TCM) משמשת זה מכבר כמאגר עשיר של פתרונות טיפוליים טבעיים, וממלאת תפקיד מרכזי במתן מענה לצרכים רפואיים מגוונים ברחבי העולם. בין צמחי המרפא השונים המשמשים ברפואה הסינית המסורתית, סופורה ידועה במגוון הרחב של סגולות המרפא שלה. היישום שלו מתוארך לפני מאות שנים וממשיך להיות מוערך מאוד ברפואה המודרנית, במיוחד בשל היתרונות הטיפוליים שלו בטיפול במחלות לב וכלי דם. רוטין, תרכובת פלבנואידים ביו-אקטיבית, מופצת באופן נרחב ברחבי ממלכת הצמחים, כאשר הריכוז הגבוה ביותר נמצא ב-Flos sophorae immaturus. דווח כי רוטין מפחית חדירות ושבריריות נימית חריגה ופועל כחומר מגן על כלי הדם וכלי הדם במוח. מחקר זה מציג פרוטוקול ניסוי מפורט למיצוי, הפרדה ואפיון של התכונות הפיזיקוכימיות של רוטין שמקורו ב-Flos sophorae immaturus. בנוסף, מוצג ומתואר הפרוטוקול למיצוי פלבנואידים מהרפואה הסינית המסורתית בשיטת מיצוי אלקלי ומשקעים חומציים.
מבוא
Flos sophorae immaturus (FSI), ניצן הפרחים המיובשים של Sophora japonica L., היה אבן פינה ברפואה הסינית המסורתית (TCM) במשך מאות שנים. המרכיבים הפעילים העיקריים שלו כוללים רוטין, איזוקוורציטרין, Sophorae Flos ופלבנואידים וספונינים אחרים. מרכיבים אלה מעניקים ביחד מגוון השפעות פרמקולוגיות, כגון פינוי חום וניקוי רעלים, קירור דם והמוסטזיס והורדת לחץ הדם. בפרקטיקה הקלינית, FSI מוערך בעיקר בשל יכולתו להגן על חדירות הנימים1, לשמור על תפקוד מערכת הלב וכלי הדם2, לקרר דם, לעצור דימום ולווסת אש בכבד3. תכונותיו הטיפוליות מיוחסות לריכוז גבוה של רוטין (קוורצטין-3-רוטינוזיד), פלבנואיד ביו-אקטיבי המהווה עד 20%-30% ממשקלו היבש4.
רוטין הוא פלבנואיד המופץ באופן נרחב בצמחים. שמו הכימי הוא Que-3-O-rutin (C27H30O16) (איור 1). בטמפרטורת החדר, רוטין מופיע כאבקה גבישית צהובה בהירה עד צהובה-ירוקה. נקודת ההיתוך שלו משתנה בהתאם לצורת הגביש והטוהר, בדרך כלל נעה בין 125 מעלות צלזיוס ל-195 מעלות צלזיוס. רוטין מציג מאפיינים קוטביים בולטים: הוא מסיס מעט במים קרים, מסיס מאוד בממיסים אורגניים קוטביים כגון אתנול ומתנול, וכמעט בלתי מסיס בממיסים לא קוטביים כמו אתר וכלורופורם. בנוסף, מסיסותו רגישה ל-pH ועולה משמעותית בתנאים אלקליין עקב דיסוציאציה של קבוצות הידרוקסיל פנוליות היוצרות מלחי נתרן או אשלגן. תכונות פיזיקליות אלו קשורות קשר הדוק לקבוצות הפוליהידרוקסיל והגליקוזיד במבנה המולקולרי שלו5, ומשפיעות ישירות על תהליך המיצוי שלו ועל יישומיו ברפואה, מזון ותעשיות אחרות6. רוטין, למרות שהוא נמצא בכל מקום בצמחים, הוא נפוץ ביותר ב-FSI ומציג פעילויות פרמקולוגיות מרובות, כולל ייצוב נימים7, אנטי דלקתי, נוגד חמצון8, אנטי-מיקרוביאלי9 והשפעות ויסות מטבוליות10.
למרות הפוטנציאל הקליני שלו11, המסיסות המימית והיציבות המימית הירודה של רוטין מהווים אתגרים למיצוי וניסוח5. כדי להתמודד עם מגבלות אלו, שיטת משקעי חומצה אלקלית (AEAP) התגלתה כחלופה יעילה, הממנפת את ההתנהגות התלויה ב-pH של קבוצות ההידרוקסיל הפנוליות שלה.
בהתבסס על התכונות הפיזיקליות של רוטין, שיטת AEAP הפכה לטכניקה סטנדרטית לבידוד רוטין מ-FSI, תוך ניצול מסיסותו בתמיסות אלקליין והתגבשות לאחר מכן בתנאים חומציים12. AEAP מנצל את היינון הניתן להחלפת pH של קבוצות הידרוקסיל פנולי כדי לשפר את התפוקה ולהשיג מיצוי רוטין בטוהר גבוה מ-FSI. בתנאים אלקליין (pH >10), קבוצות -OH פנוליות מתפרקות ליצירת יוני -O- הידרופיליים, מה שמאפשר מסיסות מלאה מרקמות הצמח תוך מזעור פירוק חמצוני. החמצה ל-pH 2-3 הופכת את היינון הזה, ומזרזת את פנולי המטרה עם משקעים משותפים מינימליים של זיהומים קוטביים. כפוליפנול בעל מסיסות תלויה ב-pH, רוטין מתמוסס בקלות בתמיסות אלקליין (למשל, נתרן הידרוקסיד) אך משקע בתנאים חומציים עקב פרוטונציה של קבוצת הידרוקסיל. AEAP מספקת אלטרנטיבה חסכונית, ניתנת להרחבה וידידותית לסביבה, המיישרת קו עם עקרונות הכימיה הירוקה על ידי הימנעות מממיסים רעילים13. זה משקף מגמה רחבה יותר בכימיה של מוצרים טבעיים המעדיפה טכניקות הפרדה מונעות pH14. משתמשים בשיטות דומות כדי לבודד כורכומין (מכורכום) וברברין ( מ-Coptis chinensis), תוך ניצול שינויי מסיסות בערכי pH ספציפיים למיצוי סלקטיבי. שיטת AEAP אידיאלית לייצור רוטין בעל תפוקה גבוהה ממקורות עשירים בפלבנואידים כמו FSI, הדורש רק ציוד מעבדה בסיסי (למשל, מדי pH, צנטריפוגות). עבור מטריצות צמחיות עם תכולת רוטין נמוכה או תרכובות מפריעות מורכבות, ניתן לשקול בעתיד טיפול מקדים בהידרוליזה אנזימטית כדי לשפר את יעילות המיצוי.
לסיכום, AEAP מייצג גישה נוחה למיצוי רוטין, איזון יעילות, בטיחות ומדרגיות. תפקידה במודרניזציה של הרפואה הסינית המסורתית מדגיש את הפוטנציאל שלה לגשר בין פרקטיקות מסורתיות לסטנדרטים פרמצבטיים עכשוויים.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול
רוטין הוא פלבנואיד המכיל מספר קבוצות הידרוקסיל פנוליות והוא מסיס בתמיסות אלקליין חמות, ולאחר מכן החמצה ומשקעים. ניתן לחלץ אותו באמצעות תהליך מיצוי אלקלי-חומצה משקעים. הריאגנטים והציוד המשמשים במחקר זה מפורטים בטבלת החומרים.
1. הכנה לניסויים
- השג את החומרים הבאים: Flos sophorae immaturus (20 גרם), בורקס (0.8 גרם), מספר כוסות, אבקת סיד (1.5 גרם), חומצה הידרוכלורית מרוכזת, מדחום ורצועות בדיקת pH. ראה איור 2 לגרסה גדולה יותר של תמונה זו.
2. מיצוי רוטין
הערה: השתמש ביחס בורקס למים של 0.8 גרם בורקס ל-200 מ"ל מים. השתמש ביחס חלב ליים של 1.5 גרם אבקת ליים ל -10 מ"ל מים. התאם את ה-pH במהירות ובדייקנות. מלאו את המים שאבדו לפי הצורך.
- מיצוי אלקלי
הערה: סנן באמצעות נייר סינון עגול בגודל 6 ס"מ.- הוסף 250 מ"ל מים ו -0.8 גרם בורקס לכוס של 500 מ"ל. מחממים לרתיחה, ואז מוסיפים 20 גרם של Flos sophorae immaturus. המשיכו להרתיח במשך 2-3 דקות.
- לאחר הרתיחה יש להתאים את ה- pH ל 8-9 עם חלב ליים מתחת לערבוב. המשך לחמם למשך 20 דקות. מסננים דרך גזה כשהיא חמה לקבלת תסנין צהוב-חום.
- מיצוי משקעים חומציים
- התאם את התמצית ל-pH 2-3 באמצעות חומצה הידרוכלורית מרוכזת ואפשר לה להתייצב. שינוי מתמיסה צהובה-חומה שקופה לתמיסה עכורה, יחד עם היווצרות הדרגתית של משקעים פלוקולנטים כתומים-צהובים בתחתית המיכל, מעידים על הפרדת רוטין יעילה.
- לאחר עמידה של 6 שעות, חשף את המשקעים לסינון יניקה בלחץ אטמוספרי. אוספים ומייבשים לקבלת רוטין גולמי.
הערה: חותכים את סרט המסנן לפי גודל משפך ברינל המשמש (קוטר 150 מ"מ). - שוטפים את המשקעים במים עד שהם ניטרליים במהלך סינון יניקה בלחץ אטמוספרי.
3. זיקוק רוטין
- לאחר שקילה גסה, יש לגבש מחדש את הרוטין באמצעות מים חמים ביחס מסיסות של 1:200. מרתיחים את התמיסה המימית למשך 30 דקות ומסננים כשהיא חמה. ודא שהנפח הסופי של תמיסת הרוטין הוא 210 מ"ל.
- מסננים את השאריות. הניחו למסנן לעמוד ללא הפרעה, ולאחר מכן סננו שוב וייבשו בוואקום בתנור בטמפרטורה של 60-70 מעלות צלזיוס לקבלת רוטין מעודן (איור 3).
הערה: חותכים את סרט המסנן לפי גודל משפך ברינל המשמש (קוטר 150 מ"מ).
4. זיהוי פיזיקוכימי של רוטין
- תגובת מלח הידרוכלוריד-מגנזיום - זיהוי גרעיני אב פלבנואידים
- ממיסים 1-2 מ"ל מהדגימה במתנול ומוסיפים 50 מ"ג אבקת מגנזיום.
- הוסף כמה טיפות של חומצה הידרוכלורית מרוכזת. יש לנער בעדינות. התמיסה אמורה להפוך לאדומה (איור 4).
- תגובת מוליש - זיהוי תרכובות סוכר
- מוסיפים תמיסת אתנול 10% של α-נפתול ומנערים. הטה את המבחנה והוסף בזהירות חומצה גופרתית מרוכזת לאורך הקיר הפנימי.
- שימו לב להיווצרות טבעת חומה בממשק (איור 5).
- ירוק תגובת זירקוניה-חומצת לימון
- הוסף 1-2 מ"ל של תמיסת α-naphthol של 10% לתמיסת האתנול של הדגימה. יש לנער היטב. יש להוסיף לאט 10 טיפות של H2SO4 מרוכז לאורך דופן הצינור מבלי לנער.
- הוסף תמיסת מתנול חומצת לימון 2%. צבע התמיסה אמור להתבהר (איור 6).
- אפליית שכבה דקה
- השתמש גם בתקן רוטין וגם בתקן רוטין.
- השתמש בכלורופורם: מתנול: חומצה פורמית (15: 5: 1) כחומר המתפתח, ובתמיסת אתנול 1% של AlCl3 כחומר כרומוגני. התבונן בפלואורסצנטיות מתחת למנורת UV במהירות של 365 ננומטר.
5. בדיקת TLC של רוטין
הערה: נעשה שימוש בשיטת כרומטוגרפיה בשכבה דקה (TLC) כדי להעריך את טוהר הרוטין. צלחת סיליקה ג'ל שימשה כשלב הנייח.
- אתר את דגימת הרוטין המזוקקת ותקן הרוטין (1 מ"ג/מ"ל במתנול) על הצלחת. לפתח את הצלחת בשלב נייד המורכב מאתיל-אצטט:חומצה פורמית:מים (8:1:1, v/v/v).
- לאחר הייבוש, דמיינו את הצלחת תחת אור UV ב-254 ננומטר.
- חשב את מקדם השמירה (Rf) של נקודת הדגימה והשווה אותו לתקן.
הערה: נקודה בודדת עם ערך Rf זהה (כ-0.35-0.50 בתנאים אלה) מעידה על טוהר גבוה, בעוד כתמים נוספים מצביעים על נוכחות של זיהומים.
6. קביעת טוהר רוטין על ידי HPLC
הערה: טוהר הרוטין נותח כמותית על ידי כרומטוגרפיה נוזלית בעלת ביצועים גבוהים (HPLC). תנאי הניתוח היו כדלקמן: עמודה כרומטוגרפית- (250 מ"מ × 4.6 מ"מ, 5 מיקרומטר); פאזה ניידת-אצטוניטריל (A) ותמיסה מימית של חומצה אצטית 0.2% (B). תוכנית שיפוע ליניארית: 0-15 דקות, 20%-30% A; 15-30 דקות, 30%-60% A. קצב זרימה -1 מ"ל/דקה. נפח הזרקה-10 מיקרוליטר. אורך גל גילוי-355 ננומטר. טמפרטורת עמודה -40 מעלות צלזיוס.
- שוקלים במדויק 0.1 גרם אבקת דגימת רוטין ומעבירים אותה לצינור צנטריפוגה של 10 מ"ל. הוסף 5.0 מ"ל של תמיסת אתנול 60% ונער היטב.
- הגדר את אמבט המים או תנור העמודים בטמפרטורה קבועה ל-30 מעלות צלזיוס ועשה אולטרסאונד את הדגימה למשך 30 דקות.
- צנטריפוגה הדגימה ב-55,900 × גרם למשך 10 דקות בטמפרטורת החדר. השתמש ב-supernatant כפתרון הבדיקה לניתוח HPLC.
7. קביעת רוטין על ידי LC-MS
הערה: התרכובות המבודדות זוהו על ידי כרומטוגרפיה נוזלית-ספקטרומטריית מסה (LC-MS). תנאי LC תאמו את שיטת HPLC. ספקטרומטריית מסה בוצעה באמצעות יינון אלקטרו-ספריי (ESI) במצב יונים שליליים עם מתח נימי של 3.5 קילו וולט. טמפרטורת פירוק -350 מעלות צלזיוס; טווח סריקת מסה-M/Z 100-1000.
- שקלו 10 מ"ג של דגימת רוטין מטוהרת והעבירו אותה לצינור מיקרו-צנטריפוגה של 2 מ"ל. הוסף 0.6 מ"ל של DMSO מפורק באמצעות פיפטה עד להמסה מלאה של הדגימה. הכן פתרונות סטנדרטיים של רוטין באותו הליך.
- לנתח את הדגימות והסטנדרטים המטופלים באמצעות ספקטרוסקופיה של תהודה מגנטית גרעינית של פרוטון (1H NMR).
- עבד את הנתונים הספקטרליים באמצעות תוכנה תואמת15.
- השווה את הנתונים הספקטרליים עם ספרות או הפניות למסד נתונים כגון NIST או PubChem לצורך אימות.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות
בניסוי הזיהוי הפיזיקוכימי של רוטין, התמיסה הפכה לאדומה לאחר תוספת של אבקת מגנזיום וכמות קטנה של חומצה הידרוכלורית מרוכזת, ואחריה טלטול, מה שמעיד על נוכחות של גרעין אב פלבנואידי. בתגובת מוליש נוצרה טבעת סגולה בממשק, המצביעה על תוצאה חיובית ונוכחות של חלקיקי סוכר במבנה המולקולרי. תמיסת הדגימה הפכה לצהובה בהירה עם תוספת של מגיב כלורו-חמצון 2% במתנול, מה שמרמז על נוכחות של מבני פלבון המכילים קבוצות 3-OH או 5-OH. עם הוספה של 2% חומצת לימון במתנול, צבע התמיסה הפך בהיר יותר, מה שמעיד על נוכחות של 5-OH בלבד.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
מיצוי הרוטין מבוסס בעיקרעל שיטת מיצוי אלקלי-חומצה (AEAP) 6, המציעה את היתרונות של דרישות ציוד פשוטות, קלות תפעול, יעילות גבוהה ועלות נמוכה. טכניקה זו מתווספת לרוב על ידי מיצוי בעזרת מיקרוגל (MAE)7 ומיצוי בסיוע אולטרסאונד (UAE)8, המפחיתים את צריכת הריאגנטים, מאיצים את זמן המיצוי ומשפרים את התשואה הכוללת.
מחקרים הראו כי pH משפיע באופן משמעותי הן על קצב מיצוי המוצקים והן על תכולת הקוורצטין במ...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
מחברי מאמר זה מצהירים בזאת כי חשפו כל ניגוד אינטרסים שעלול להתעורר במהלך ביצוע מחקר זה וכתיבת מאמר זה. אנו מאשרים כי אין לנו קשרים פיננסיים, אישיים או מקצועיים העלולים להטות את הפרשנות שלנו לתוצאות או למסקנות המוצגות בעבודה זו. באופן ספציפי, אין לנו קשרים לחברות תרופות, מוסדות מחקר או גופים אחרים שיכולים להפיק תועלת מהממצאים המדווחים כאן. לבסוף, אנו מאשרים כי הממצאים והמסקנות שלנו מבוססים אך ורק על הנתונים והניתוחים המוצגים במאמר זה ואינם מושפעים מגורמים חיצוניים כלשהם. אנו נשארים מחויבים לסטנדרטים הגבוהים ביותר של יושרה אקדמית והתנהגות אתית בכל פעילויות המחקר שלנו.
תודות
ברצוננו להביע את תודתנו העמוקה למעבדה לכימיה פרמצבטית באוניברסיטת בייג'ינג לרפואה סינית על מתן הפלטפורמה הניסיונית. התמיכה והמשאבים שלהם לא יסולא בפז בביצוע המחקר והניסויים שלנו. אנו מעריכים מאוד את מסירותם למצוינות מדעית ואת מחויבותם לטפח את התפתחותם של חוקרים צעירים.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| 1-נפתול | מקלין | C16245764 | |
| חומצה אצטית | מקלין | C12662811 | |
| אצטוניטריל | מקלין | C16129374 | |
| כלוריד אלומיניום | מקלין | C16485922 | |
| חומצה ציטרית | מקלין | C16429480 | |
| DMSO | פוצ'ן (טיאנג'ין) תגובת כימיקלים בע"מ | 20230306 | |
| אתנול | פוצ'ן (טיאנג'ין) תגובת כימיקלים בע"מ | 20250102 | |
| אתיל אצטט | פוצ'ן (טיאנג'ין) תגובת כימיקלים בע"מ | 20240318 | |
| Flos sophorae immaturus | בייג'ינג טונגרטאנג | 10092026329782 | |
| חומצה פורמית | פוצ'ן (טיאנג'ין) תגובת כימיקלים בע"מ | 20150402 | |
| MestReNova | מחקר מסטרלאב | / | |
| מתנול | אינוהם | C16365684 | |
| סיליקה ג'ל 60F254 | סטימה | 20210222 | |
| אקסקליבר | תרמו פישר סיינטיפיק | / | |
| זירקוניל כלוריד אוקטהידרט | מקלין | C15350627 |
מקורות
- Drew, A. K., et al. Chinese herbal medicine toxicology database: Monograph on Radix Sophorae Flavescentis, "ku shen". J Toxicol Clin Toxicol. 40 (2), 173-176 (2002).
- Chua, L. S. A review on plant-based rutin extraction methods and its pharmacological activities. J Ethnopharmacol. 150 (3), 805-817 (2013).
- Huang, R., et al. Evaluation of the synergetic effect of Yupingfeng San and Flos Sophorae Immaturus based on free radical scavenging capacity. Biomed Pharmacother. 128, 110265(2020).
- Li, R., Wang, C., Lei, P., Huang, L., Yuan, S. Chemical constituents in Flos sophorae carbonisatus. Zhongguo Zhong Yao Za Zhi. 35 (5), 607-609 (2010).
- Ghorbani, A. Mechanisms of antidiabetic effects of flavonoid rutin. Biomed Pharmacother. 96, 305-312 (2017).
- Calabrese, E. J., et al. Rutin, a widely consumed flavonoid, that commonly induces hormetic effects. Food Chem Toxicol. 187, 114626(2024).
- Li, R. R., Yuan, S. T., Li, Z. H., Qin, H. L. Studies on chemical constituents in Flos sophorae carbonisatus. Zhongguo Zhong Yao Za Zhi. 30 (16), 1255-1257 (2005).
- Nikfarjam, B. A., Adineh, M., Hajiali, F., Nassiri-Asl, M. Treatment with rutin - a therapeutic strategy for neutrophil-mediated inflammatory and autoimmune diseases: Anti-inflammatory effects of rutin on neutrophils. J Pharmacopuncture. 20 (1), 52-56 (2017).
- Singh, S., et al. Rutin protects t-butyl hydroperoxide-induced oxidative impairment via modulating the Nrf2 and iNOS activity. Phytomedicine. 55, 92-104 (2019).
- Cushnie, T. P., Lamb, A. J. Antimicrobial activity of flavonoids. Int J Antimicrob Agents. 26 (5), 343-356 (2005).
- Budzynska, B., et al. Rutin as neuroprotective agent: From bench to bedside. Curr Med Chem. 26 (27), 5152-5164 (2019).
- Tan, Y. Q., et al. Pharmacological properties of total flavonoids in Scutellaria baicalensis for the treatment of cardiovascular diseases. Phytomedicine. 107, 154458(2022).
- Tobar-Delgado, E., Mejía-España, D., Osorio-Mora, O., Serna-Cock, L. Rutin: Family farming products' extraction sources, industrial applications and current trends in biological activity protection. Molecules. 28 (15), 5864(2023).
- Wang, S., et al. Effect of combined ultrasonic and enzymatic extraction technique on the quality of noni (Morinda citrifolia L.) juice. Ultrason Sonochem. 92, 106231(2023).
- Dos Santos Dantas, T., et al. Phytochemical profile analysis by LC-ESI-MS(n) and LC-HR-ESI-MS and validated HPLC method for quantification of rutin in herbal drug and products from leaves of Croton blanchetianus. Biomed Chromatogr. 37 (9), e5665(2023).
- Santiago, M., Strobel, S. Thin layer chromatography. Methods Enzymol. 533, 303-324 (2013).
- Ravber, M., et al. Hydrothermal degradation of rutin: Identification of degradation products and kinetics study. J Agric Food Chem. 64 (48), 9196-9202 (2016).
- Zhang, Z., et al. Effect of pH regulation on the components and functional properties of proteins isolated from cold-pressed rapeseed meal through alkaline extraction and acid precipitation. Food Chem. 327, 126998(2020).
- Lv, H., et al. Extraction and separation of vitisin D, ampelopsin B and cis-vitisin A from Iris lactea Pall. var. chinensis (Fisch.) Koidz by alkaline extraction-acid precipitation and high-speed counter-current chromatography. J Chromatogr Sci. 54 (5), 744-751 (2016).
- Yang, Y., Chu, X., Li, Y., Meng, H., Qin, L. Alkali-extracted rhamnogalactoarabinan from Chaetomorpha linum: Characterisation and anti-type 2 diabetic effect. Carbohydr Polym. 356, 123388(2025).
- Gao, S., et al. Unveiling polysaccharides of Houttuynia cordata Thunb.: Extraction, purification, structure, bioactivities, and structure-activity relationships. Phytomedicine. 138, 156436(2025).
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
תגיות
