מאמר שיטה

משימות התנהגותיות לבחינת זיהוי זהות בעכברים

DOI:

10.3791/67547

⸱

7 בפברואר 2025

 ,  ,  , 
1Integrated Program in Neuroscience, McGill University, 2Neuroscience Division, Douglas Research Centre, 3Department of Psychiatry, McGill University

* These authors contributed equally

במאמר זה

סיכום

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

על ידי זיווג חוויות בעלות ערך שלילי או חיובי עם מטרות חברתיות בודדות, פיתחנו משימות התנהגות לבחינת זיהוי הזהות של עכברי C57BL/6. משימות אלה מאפשרות לחקור מנגנוני זיכרון חברתי של מטרות חברתיות בודדות במודלים של עכברים בריאים וקשורים למחלות עם קוגניציה חברתית לקויה.

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

בעלי חיים חברתיים, כמו מכרסמים, מסוגלים לזהות ולהבדיל בין זהותם של פרטים מוכרים. הכרה בזהותם של אנשים מוכרים חשובה לפיתוח מבנים חברתיים כגון היררכיה, קרבה ומשפחה. עם זאת, המנגנונים העומדים בבסיס ההכרה בזהות חברתית נותרו לא ברורים. רוב מחקרי המכרסמים על הכרה חברתית מבוססים על נטייתם של מכרסמים לקיים אינטראקציה עם מטרה חברתית חדשה, תופעה המכונה חידוש חברתי. עם זאת, משימות התנהגותיות לבחינת חידוש חברתי אינן יכולות לחשוף את ההכרה בפרטים מוכרים על סמך זהותם. מוצגות כאן משימות התנהגותיות המאפשרות לבחון זיהוי זהות בעכברי C57BL/6 על ידי שיוך שני עכברים מוכרים עם או בלי חוויה ערכית. לנבדקים היו אינטראקציות עם שני עכברים ללא (ניטרלי) או עם חוויה ערכית (שלילית או חיובית) והכירו את העכברים הללו. העכבר בעל הערך השלילי היה קשור לזעזועים, בעוד שהעכבר בעל הערך החיובי היה קשור לתגמול מזון. לאחר האימון, ניתן לחשוף את הזיהוי של זהותם של העכברים המוכרים הללו במבחן אפליה חברתית, המיוצג כהעדפה לעכבר בעל הערך החיובי והימנעות מהעכבר בעל הערך השלילי בהשוואה לעכבר הנייטרלי. משימות התנהגותיות לזיהוי זהות יכולות להיות שימושיות בחקירת מנגנוני זיכרון חברתי ופתופיזיולוגיה של הפרעות עם קוגניציה חברתית לקויה, כגון הפרעת הספקטרום האוטיסטי או סכיזופרניה.

מבוא

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

זיהוי זהות, או היכולת לזהות אנשים מוכרים על סמך חוויות קודמות, הוא קריטי להישרדותם של בעלי חיים חברתיים1. במכרסמים, היררכיה חברתית, זיהוי בני זוג וצאצאים, הגנה טריטוריאלית והקמה ותחזוקה של קבוצות הן התנהגויות הנדרשות להכרה מוצלחתבזהות 2,3. ההבנה הנוכחית של זיכרון חברתי מבוססת על מחקרי מכרסמים המושרשים ביכולת לזהות פרטים חדשים לעומת מוכרים. המטלות האלה היו שימושיות לחשיפת אזורים במוח שנחשבים כמתווכים זיכרון חברתי, כמו למשל ההיפוקמפוס CA24 ואזורי CA1 הגחון5. עם זאת, מחקרים כאלה נותרים מוגבלים בהבהרת המנגנונים העומדים בבסיס זיהוי הזהות מכיוון שהם מוגבלים להכרה קטגורית בחידוש חברתי.

זיהוי זהות הוכח באופן עצמאי מחידוש חברתי באמצעות פרדיגמות למידה אסוציאטיביות שבהן חוויות בולטות קשורות לאחד משני יעדים חברתיים מוכרים (או יותר). משימות אלה מבוססות על הרעיון שאינטראקציות חברתיות קשורות לעתים קרובות למשמעות רגשית, כאשר חוויות שליליות גורמות להתנהגויות מונעות קונפליקטים, בעוד שאינטראקציות משחקיות או מטפחות הן בדרך כלל מתגמלות. ההשפעה הרגשית הקשורה לאינטראקציות נקראת ערכיות חברתית. אוגרים זהובים זכרים הצליחו להבחין בין שתי מטרות ספציפיות מוכרות כאשר אחד מהם תקף אותם בעבר6. זיכרון הכרה של חולדות וויסטאר זכרים בודדים היה חשוב גם לביסוס מעמדחברתי 7.

לאחרונה, זיהוי זהות נבדק בעכברי C57BL/6, זן העכברים הנפוץ ביותר במחקר מדעי המוח, על ידי שיוך עכברי C57BL/6 בודדים עם או בלי גירוי תיאבון8. גישה זו השתמשה בעכברים קבועי ראש כדי לעבור מאות ניסויי אימון, שהגבילו את השימוש בה לבחינת התנהגויות נטורליסטיות בעכברים הנעים בחופשיות. במחקרים אחרים, זיהוי זהות של עכברי C57BL/6 נתמך על ידי העדפה של קונפרטים הניתנים באתנול 9,10. עם זאת, מתן חומרים עלול לגרום לבלבול. לבסוף, מעטים מהמחקרים הללו שימשו לבחינת זיהוי זהות במכרסמים משני המינים. שיטה הניתנת לאימוץ בקלות הניתנת ליישום על עכברי C57BL/6 זכרים ונקבות כאחד היא כלי חיוני לקידום המחקר של זיהוי זהות.

מוצגות כאן פרדיגמות זיהוי זהות שניתן להשתמש בהן בעכברים זכרים ונקבות כאחד. כדי לחקור זהות ללא תלות בהשפעות של חידוש, נעשה שימוש בשתי מטרות חברתיות מוכרות, ואחת מהן קשורה לחוויה רגשית בולטת שמניחים שהיא משפיעה על התנהגות אינטראקציה. עבור אסוציאציה של ערכיות חברתית שלילית, גישה דומה להתניה של פחד חברתי הותאמה כדי לעורר הימנעות לעבר יעד חברתי ספציפי11. אם ערכיות חברתית שלילית, כגון הלם כף רגל מרתיע, קשורה לאדם, צפויה ירידה באינטראקציה עם המטרה החברתית. לעומת זאת, אם ערכיות חברתית חיובית, כגון תגמול מעורר תיאבון, קשורה לאדם ספציפי, צפויה אינטראקציה מוגברת עם עכבר זה בבדיקות הבאות. יחד, ניתן ליישם בקלות את המשימות ההתנהגותיות המתוארות ברוב המעבדות לחקר זיהוי זהות בעכברי C57BL/6 וזני עכברים אחרים.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

במחקר זה נעשה שימוש בעכברים זכרים בוגרים C57BL/6 (בני 8-10 שבועות; משקל גוף: 18-25 גרם). עכברים ששימשו כמטרות חברתיות הושגו ממקור אחר (ראו טבלת חומרים) כדי לוודא שהם הגיעו מהמלטות שונות ולא היו מוכרים קודם לכן לעכברי הנבדק. כל הפרוטוקולים אושרו על ידי הוועדה לטיפול בבעלי חיים במרכז המחקר דאגלס ועקבו אחר הנחיות המועצה הקנדית לטיפול בבעלי חיים (פרוטוקול מס': DOUG-5935).

1. חומרים (ראה איור 1)

  1. הגדר כלוב שקוף גדול (24 ס"מ על 36 ס"מ על 19.5 ס"מ) כדי להיות ההקשר הניטרלי בניסוי הערכיות החברתית השלילית
  2. השתמש בקופסת זעזועים משולשת בעלת קירות שחורים (אורך כל צד = 46 ס"מ; גובה = 29 ס"מ) כהקשר הערכיות השלילי. ודא שרצפת תיבת ההלם מורכבת מרשתות מתכת המחוברות לגנרטור זרם רשת מקושקשת.
  3. השתמש בכלוב שקוף גדול (26 ס"מ על 47 ס"מ על 21 ס"מ) כהקשר להרגלת מזון בניסוי הערכיות החברתית החיובית.
  4. השתמש בכלוב גדול בעל קירות שחורים (24 ס"מ x 36 ס"מ x 19.5 ס"מ) כהקשר ניטרלי בניסוי הערכיות החברתית החיובית.
  5. השתמש בכלוב גדול עם קירות לבנים (24 ס"מ x 36 ס"מ x 19.5 ס"מ) עם יציאת מזון כהקשר הערכיות החברתית החיובית. כיציאת המזון, השתמש בצינור פלסטיק (קוטר 0.5 ס"מ) העובר דרך צד אחד של הקיר והנח צלחת פלסטיק לבנה מתחת לצינור.
  6. ניירות כרית כן ציור לבנים חתוכים מראש לשימוש כרצפה של ההקשר הנייטרלי (אימון ניטרלי בניסויי ערכיות חברתית שלילית וחיובית כאחד) והקשרי ערכיות חברתית חיוביים. חתוך את המשטח מעט קטן יותר מהמשטח התחתון של ההקשר כדי למנוע מהעכבר הנושא להתחפר מתחת לנייר. החלף את רפידות כן הציור בין עכברי נושא הצילום.
  7. השתמש בכדוריות מדויקות ללא אבק (20 מ"ג, טעם שוקולד) כאות תגמול באינטראקציה עם היעד החברתי בעל הערך החיובי.
  8. השתמש במשקל לשקילת עכברים נבדקים מדי יום למשך ניסויי הערכיות החברתית החיובית.
  9. השתמש בקופסה בת שלושה חדרים (81 ס"מ על 23 ס"מ על 23 ס"מ), עם פתחים בתא האמצעי המתחברים לתא השמאלי והימני, לבדיקת אפליה חברתית. השתמש בדלתות תא נשלפות כדי להכיל את עכבר הנבדק בתא האמצעי בין הפגישות, ולמנוע מתח טיפול.
  10. השתמש בשני מארזי פרספקס מלבניים זהים (10 ס"מ על 5 ס"מ על 30 ס"מ) לאימון ערכיות חברתית שלילית וחיובית כאחד.
  11. השתמש בארבע כוסות תיל עגולות (8 ס"מ x 8 ס"מ x 10 ס"מ) לבדיקת אפליה חברתית. שמור שתי כוסות תיל ריקות במהלך מפגש 1 של מבחן האפליה החברתית. במפגש 2, מקם את המטרות החברתיות המשמשות באימון ערכיות חברתית חיובית או שלילית בשתי כוסות התיל האחרות.
    הערה: סמן את כוסות החוט (למשל, באמצעות סרט) כדי להבדיל בין כוסות תיל זהות. בתוך ניסוי, השתמש בכוסות החוט לאותה מטרה לאורך כל הניסוי. אם יש צורך להציב מטרה חברתית אחרת בתוך התיל, נקו היטב את התיל עם סבון, מים וחומר חיטוי מהיר פעולה על בסיס מי חמצן.
  12. הניחו שני בקבוקי זכוכית על גבי כוסות התיל ההפוכות במהלך בדיקת אפליה חברתית כדי למנוע מהעכברים הנבדקים לטפס על גבי כוסות התיל.
  13. ודא שלמארזים באימונים יש רצפות של חומר לא מוליך לניסויי ערכיות חברתית שלילית. לדוגמה, השתמש בפלסטיק או בקרטון מכוסה בסרט חשמלי כדי להבטיח שהיעד החברתי בעל הערך השלילי לא יקבל זעזועים במהלך האימון.
  14. השתמש בטיימר שקט כדי להימנע מרמזים חיצוניים שעלולים להתערב בהתנהגויות של בעלי חיים.
  15. השתמש במצלמת אינטרנט ברזולוציה גבוהה (1,080 p/30 fps) המחוברת למחשב נייד כדי ללכוד את התנהגות העכבר במהלך האימון ומבחן ההבחנה החברתית.
  16. השתמש במחולל רעש לבן המייצר רעש לבן סטטי ב-60 dB הנמדד במרכז ההקשר.
    הערה: יש לבצע את כל ההליכים ההתנהגותיים עם רעש לבן סטטי ב-60 dB הנמדד במרכז ההקשר כדי להסוות קולות סביבתיים שעלולים להשפיע על התנהגות בעלי החיים.
  17. השתמש במנורות אור אדומות לכל ההליכים ההתנהגותיים.
    הערה: זה מספק תנאים סביבתיים חשוכים, המעודדים חקר בעכברים ומאפשרים הדמיה של התנהגות בעלי חיים בהקלטות וידאו.
  18. נקו מארזים, ריקים ומכילים בעלי חיים, בין עכברים נבדקים עם 70% אתנול, המתייבש במהירות. הקשרי אימון ובדיקה נקיים בין עכברי נבדק עם חומר חיטוי מהיר הפועל על בסיס מי חמצן כדי למנוע השפעות פוטנציאליות על התנהגות הנובעות מרמזי ריח מעכברי נבדק קודמים.

2. נהלים התנהגותיים

  1. ערכיות חברתית שלילית
    1. הרגלת הקשר
      1. ציידו את חדר הניסוי ברעש לבן ובאור אדום סביבתי למשך הניסוי.
      2. הכן את תיבת ההלם על ידי הנחת מארז פרספקס ריק עם רצפה לא מוליכה במרכז.
      3. הנח את עכבר הנושא בפינה של תיבת ההלם ואפשר לעכבר לחקור בחופשיות במשך 5 דקות.
      4. החזר את עכבר הנבדק לכלוב הבית שלו.
      5. חזור על הרגלת תיבת ההלם עם העכברים הנותרים.
      6. לפחות שעה לאחר מכן, חזור על נוהל ההתרגלות בהקשר (שלבים 2.1.1.1-2.1.1.5) בהקשר הנייטרלי.
    2. אימון ערכיות שלילית
      1. התחל אימון ערכיות שלילית לפחות שעה אחת לאחר ההתרגלות לשני ההקשרים.
      2. הכן את תיבת ההלם על ידי הגדרת הזרם ל-0.3 mA.
        הערה: ההגדרה הנוכחית המומלצת מבוססת על תיבת ההלם בה השתמשנו ועל העיצוב הניסיוני שלנו (3 ימי אימון). ניתן לשנות הגדרה זו כך שתתאים לעיצובים ניסיוניים אחרים (למשל, ניתן להשתמש בזרם חזק יותר עם עיצובים של פחות ניסויי אימון).
      3. הנח את המטרה החברתית בעלת הערך השלילי במארז הפרספקס עם תחתית לא מוליכה במרכז תיבת ההלם.
      4. התחל להקליט וידאו והנח את עכבר הנושא בפינה של תיבת ההלם.
      5. הפעל את הטיימר ואפשר לעכבר הנושא לחקור בחופשיות.
      6. לאחר 4 ו-4.5 דקות, ספק שוק חשמלי באורך 1 שניות.
        הערה: זה מאפשר זמן אינטראקציה מספיק בין העכבר הנבדק למטרה החברתית לפני שחווים זעזועים מרתיעים.
      7. הסר את עכבר הנושא לאחר 5 דקות והפסק את ההקלטה והטיימר.
      8. החזר את עכבר הנבדק לכלוב הבית שלו.
      9. יש לחטא את תיבת ההלם ולחזור על אימון ערכיות שלילית עם העכברים הנותרים.
    3. אימון ניטרלי
      1. התחל אימון ניטרלי לפחות שעתיים לאחר אימון ערכיות שלילית.
      2. מקם את המטרה החברתית הניטרלית במתחם עם תחתית לא מוליכה במרכז ההקשר.
        הערה: תחתית לא מוליכה משמשת כדי להבטיח שלהקשרים השליליים והנייטרליים יש רמזי הקשר זהים. שום הלם לא מועבר באימונים ניטרליים.
      3. התחל הקלטת וידאו ומקם את עכבר הנושא בפינה של ההקשר הנייטרלי.
      4. הפעל את הטיימר ואפשר לעכבר הנושא לחקור בחופשיות.
      5. הסר את עכבר הנושא לאחר 5 דקות והפסק את ההקלטה והטיימר.
      6. החזר את עכבר הנבדק לכלוב הבית שלו.
    4. סדר האימונים
      1. יום 1: לאחר ההתרגלות של שני ההקשרים (שלב 2.1.1), בצע את האימון הנייטרלי (שלב 2.1.3) שעתיים לאחר אימון הערכיות השלילית (שלב 2.1.2).
      2. יום 2: חזור על אימון ביום 2 עם סדר אימונים הפוך (שלבים 2.1.3 ואז 2.1.2; כלומר, בצע אימון ניטרלי ולאחר מכן, אימון ערכיות שלילית שעתיים לאחר מכן).
      3. יום 3: חזור על האימון ביום השלישי עם סדר אימונים הפוך (שלבים 2.1.2 ואז 2.1.3; כלומר, אימון ערכיות שלילית ואחריו אימון ניטרלי שעתיים לאחר מכן).
  2. ערכיות חברתית חיובית
    1. מניעת מזון
      1. שקלו כל עכבר נבדק מדי יום למשך הניסוי.
        הערה: אם בשלב כלשהו, עכבר נבדק מאבד יותר מ-15% ממשקל גופו המקורי, יש להפסיק את מניעת המזון, ולהשליך את העכבר מניסויים נוספים.
      2. ספק 1 גרם ממזון העכברים הרגיל לכל עכבר נבדק בכלוב הביתי.
        הערה: עכברים נבדקים מאוחסנים בקבוצה עם 1 גרם מזון זמין לכל עכבר. לדוגמא, אם ארבעה עכברים שוכנים בקבוצה, אז 4 גרם מזון מונחים בכלוב הביתי.
      3. חזור על חסך מזון מדי יום למשך ניסוי הערכיות החברתית החיובית (כלומר, לאחר כל יום של הרגלת כדורי מזון, הרגלת הקשר ואימון ערכיות חיובית).
    2. הרגל כדורי מזון סוכרוז
      1. התחל בהרגל כדורי מזון 12 שעות לאחר תחילת המחסור במזון.
      2. ציידו את חדר הניסוי ברעש לבן ובאור אדום סביבתי למשך הניסוי.
      3. מקם את עכבר הנושא בפינה של הקשר הרגל המזון.
      4. הפעל את הטיימר וספק 1 כדור מזון סוכרוז לדקה במהלך 10 דקות.
      5. הסר את הנושא לאחר 10 דקות והחזר את העכבר לכלוב הביתי שלו.
      6. רשום את מספר כדורי המזון של סוכרוז הנצרך על ידי העכבר הנבדק.
      7. חזור על הרגל כדורי מזון סוכרוז למשך 3 ימים בסך הכל.
        הערה: ניתן להוסיף ימי הרגלה נוספים אם עכברים לא צורכים כדורי מזון סוכרוז לאחר 3 ימים.
      8. הסר מהמחקר נבדקים שאינם צורכים כדורי מזון סוכרוז במהלך הרגלת כדורי המזון.
    3. הרגלת הקשר
      1. יום אחד לאחר הרגלת כדורי מזון סוכרוז (יום 4), הכינו את הקשר הערכיות החיובי על ידי הצבת מארז פרספקס ריק בפינת ההקשר.
      2. מקם את עכבר הנושא בפינה של הקשר הערכיות החיובית ואפשר לעכבר לחקור בחופשיות במשך 10 דקות.
      3. החזר את עכבר הנבדק לכלוב הבית שלו.
      4. חזור על הרגלת הקשר ערכיות חיובית עם העכברים הנותרים.
      5. לפחות שעה אחת לאחר מכן, חזור על נוהל ההתרגלות בהקשר הנייטרלי.
    4. אימון ערכיות חיובית
      1. התחל אימון ערכיות חיובית לפחות שעה אחת לאחר ההתרגלות לשני ההקשרים.
      2. מקם את היעד החברתי בעל הערך החיובי במתחם במרכז הקשר הערכיות החיובית.
      3. התחל הקלטת וידאו ומקם את עכבר הנושא בפינה של הקשר הערכיות החיובית.
      4. הפעל את הטיימר ואפשר לעכבר הנושא לחקור בחופשיות במשך 10 דקות.
      5. בכל התקף אינטראקציה עם היעד החברתי שהוא >2 שניות, ספק כדור מזון סוכרוז אחד דרך יציאת המזון. אינטראקציה מוגדרת כתקופות שבהן אפו של העכבר הנבדק נמצא במרחק של <2 ס"מ מהפריפריה של מארז הפרספקס. יש למקם את זווית הראש של הנושא לכיוון המארז.
        הערה: חיטוט באף ורחרוח עלולים להתרחש אך אינם נחוצים למשלוח כדורי מזון סוכרוז.
      6. הסר את עכבר הנושא לאחר 10 דקות והפסק את ההקלטה והטיימר.
      7. החזר את עכבר הנבדק לכלוב הבית שלו.
      8. רשום את מספר כדורי המזון של סוכרוז המועברים דרך נמל המזון ואת מספר הכדורים שנצרכו על ידי העכבר הנבדק.
      9. החלף את רצפת כרית כן הציור, חטא את ההקשר החיובי וחזור על אימון ערכיות חיובי עם העכברים הנותרים.
    5. אימון ניטרלי
      1. התחל אימון ניטרלי לפחות שעתיים לאחר אימון ערכיות חיובית.
      2. מקם את המטרה החברתית הניטרלית במתחם בפינה של ההקשר הנייטרלי.
      3. התחל הקלטת וידאו ומקם את עכבר הנושא בפינה של ההקשר הנייטרלי.
      4. הפעל את הטיימר ואפשר לעכבר הנושא לחקור בחופשיות במשך 10 דקות.
      5. הסר את עכבר הנושא לאחר 10 דקות והפסק את ההקלטה והטיימר.
      6. החזר את עכבר הנבדק לכלוב הבית שלו.
      7. החלף את רצפת כרית כן הציור, חטא את הציוד וחזור על אימון ניטרלי עם העכברים הנותרים.
    6. סדר האימונים
      1. ימים 1-3: בצע הרגלת כדורי מזון (שלב 2.2.2).
      2. יום 4: לאחר ההתרגלות של שני ההקשרים (שלב 2.2.3), בצע תחילה אימון ערכיות חיובי (שלב 2.2.4) ולאחר מכן אימון ניטרלי (שלב 2.2.5) שעתיים לאחר מכן.
      3. יום 5: חזור על האימון ביום 5 עם סדר אימונים הפוך (שלבים 2.2.5 ואז 2.2.4; כלומר, אימון ניטרלי ואחריו אימון ערכיות חיובית שעתיים לאחר מכן).
  3. מבחן אפליה חברתית
    1. ציידו את חדר הניסוי ברעש לבן ובאור אדום סביבתי.
    2. העבירו את הנבדקים לחדר הניסוי ואפשרו התרגלות ללא הפרעה לחדר למשך שעה לפחות.
      הערה: ודא שהמטרות החברתיות נשארות מחוץ לחדר הניסוי במהלך תקופת ההתרגלות.
    3. במפגש הראשון, הניחו שתי כוסות תיל ריקות בפינות הנגדיות של החדר השמאלי והימני של תיבת האפליה החברתית בת שלושת החדרים.
      הערה: חפצים גדולים ומשוקללים זהים (למשל, בקבוקי זכוכית) מונחים על גבי כוסות החוט כדי להבטיח שהעכבר הנבדק לא יטפס על גבי החוט.
    4. התחל את הקלטת הווידאו, הנח את עכבר הנושא במרכז החדר האמצעי והפעל את הטיימר.
      הערה: במידת האפשר, צא מהחדר כדי למזער את הפרעות הנסיין בעכברים הנבדקים.
    5. לאחר 8 דקות, חזור לחדר הבדיקה ומבלי לגעת בעכבר הנבדק, השתמש בדלתות החדר כדי לסגור את הנבדק בתא האמצעי.
    6. החליפו את כוסות התיל הריקות בסט זהה אך שונה של כוסות המכילות את המטרות החברתיות.
      הערה: המטרות החברתיות הן אלה המשמשות באימון ערכיות חברתית שלילית או חיובית.
    7. הסר את דלתות החדר והפעל את הטיימר בזמן שעכבר הנושא חוקר במפגש 2.
    8. לאחר 8 דקות, עצור את ההקלטה והחזר את עכבר הנושא והמטרות החברתיות לכלובים הביתיים שלהם.
    9. נקו את הכוסות עם 70% אתנול ונקו את הזירה עם חומר חיטוי.
    10. חזור על בדיקת אפליה חברתית (שלבים 2.3.3-2.3.9) עם העכברים הנותרים.
    11. לאחר שמחצית מהקבוצה סיימה את הבדיקה, אזן את מיקום החוט.
      הערה: יש להזיז מטרות חברתיות עם כוסות התיל המתאימות להם כדי למנוע רמזים סותרים של חוש הריח.
    12. נקו את כל כוסות החוט עם סבון, מים וחומר חיטוי. נקו את קופסת האפליה החברתית בת שלושת החדרים עם חומר חיטוי.

3. ניתוח התנהגותי

  1. הדרכה
    1. נתחו את זמן האינטראקציה עם כל יעד חברתי וציינו את מספר התקפי האינטראקציה.
      הערה: ניתן לנקד את הניתוח באופן ידני (ראש בעל חיים <במרחק של 2 ס"מ מהיקף המתחם וזווית הראש של 180°) או באמצעות תוכנית אוטומטית.
    2. רשום את מספר כדורי המזון שנצרכו במהלך אימון ערכיות חברתית חיובית כדי להבטיח ששינויים בהתנהגויות חברתיות אינם נובעים מהבדלים במוטיבציה לצרוך תגמולי מזון.
  2. מבחן אפליה חברתית
    1. מדוד את משך הזמן שהעכבר הנבדק חוקר כל. משך רצוף של 8 דקות של הבדיקה מתחיל ברגע שהנסיין עוזב את החדר.
      הערה: ניתן לנקד את הניתוח באופן ידני (ראש בעל חיים <במרחק של 2 ס"מ מהפריפריה של החוט וזווית הראש של 180°) או באמצעות תוכנית אוטומטית.
    2. חשב ניתוחים זוגיים כדי ללכוד טוב יותר שינויים בודדים במהלך מפגשי הבדיקה. בנוסף, בצע מדידות חוזרות דו-כיווניות ANOVA (עם הגורמים של מפגש וכוס) כדי לזהות הבדלים בין מפגשים בחקירה.

תוצאות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

השתמשנו במטלות הערכיות החברתית החיובית והשלילית כדי להעריך זיהוי זהות בעכברי C57BL/6 (איור 2). בהשוואה ליום הראשון של התרגלות כדורי מזון סוכרוז (H1, איור 2B), רוב העכברים צרכו את כל הכדוריות שניתנו עד היום האחרון של התרגלות המזון (H3). במהלך אימונים (T1 ו-T2), העכברים הנבדקים הכירו שני עכברי CD1: ניטרלי (Neu) ועכבר הקשור לערכיות חיובית (PV) על ידי אינטראקציה איתם בנפרד בהקשרים שונים. תגמולי מזון ניתנו לעכברים הנבדקים רק לאחר האינטראקציה עם PV של עכברים. במהלך מטלת ההבחנה החברתית, מצאנו שעכברים מאומנים העדיפו אינטראקציה עם עכבר ה-PV בהשוואה לעכבר הנייטרלי (* p < 0.05, מבחן t מזווג של סטודנט). היחס בין המפגשים של זמן האינטראקציה של מפגש 2 לעומת אינטראקציה של מפגש 1 חשף גם העדפה לעכבר ה-PV (* p < 0.05, מבחן t זוגי של סטודנט).

השתמשנו גם במטלת הערכיות החברתית השלילית כדי לבחון זיהוי זיהוי (איור 2C). העכברים הנבדקים הכירו שני עכברי CD1: עכבר Neu ועכבר הקשור לערכיות שלילית (NV) על ידי אינטראקציה איתם בנפרד בהקשרים שונים. שני מכות חשמל ניתנו לקראת סוף מפגש האינטראקציה עם העכבר NV, בעוד שלא ניתנו מכות חשמל לאחר האינטראקציה עם עכבר ה-Neu. לא מצאנו הבדלים בזמני האינטראקציה בין עכברי הנבדקים לעכברי Neu או NV בכל יום אימון. עם זאת, מצאנו שעכברי הנבדק הפחיתו את זמן האינטראקציה עם עכבר NV במהלך מבחן האפליה החברתית (* p < 0.05, מבחן t מזווג של סטודנט). היחס בין המפגשים של זמן האינטראקציה של מפגש 2 לעומת אינטראקציה של מפגש 1 חשף גם העדפה לעכבר Neu (* p < 0.05, מבחן t מזווג של סטודנט).

figure-results-1
איור 1: מנגנון למשימות זיהוי זהות. (A) הקשר ערכיות ניטרלי לבדיקת ערכיות חברתית שלילית. נייר פנקס כן ציור לבן מונח בתחתית ההקשר. (ב) הקשר של ערכיות חברתית חיובית. שימו לב ליציאת המזון (חץ) בחלק התחתון האמצעי של הקופסה. (ג) הקשר ערכיות ניטרלי לבדיקת ערכיות חברתית חיובית. (ד) הקשר של הרגלת מזון. יציאת משלוח מזון מותקנת בצד ימין של הקופסה, כפי שמוצג ב-E (עיגול מקווקו) ו-F (מוגדל). (ז) תיבת הלם. (ח) מארז פרספקס. (I) תיל. (י) תיבת אפליה חברתית בת שלושה בתים למבחן האפליה החברתית. דלתות תא נשלפות להכיל את העכבר הנושא בתא המרכזי מוצגות ב-K (ראשי חצים). אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.

figure-results-2
איור 2: תכנון ותוצאות צפויות של משימות זיהוי זהות. (A) דיאגרמות סכמטיות של גרסאות ערכיות חברתיות חיוביות (למעלה) ושליליות של מטלות זיהוי זהות (למטה). עכברי C57BL/6 אומנו לקיים אינטראקציה יומיומית עם המטרות החברתיות הנייטרליות (Neu של העכבר) והקשורות לערכיות (PV או NV של עכבר). יום אחד לאחר האימון, עכברי הנבדק הוכנסו למנגנון בן שלושה חדרים למבחן האפליה החברתית. אנו מצפים שלאחר אימון ערכיות חברתית חיובית ושלילית, עכברי הנבדק יציגו העדפה והימנעות כלפי עכברים בעלי ערך חיובי (ירוק, PV עכבר) ועכברים בעלי ערך שלילי (אדום, עכבר NV), בהתאמה. (B) נתונים מייצגים מניסוי אימון ערכיות חברתית חיובית. עכברי הנבדקים אומנו לקיים אינטראקציה עם העכבר בעל הערך החיובי (עכבר PV) והעכבר הנייטרלי (עכבר Neu) מדי יום במשך יומיים. סדר האינטראקציה התהפך ביום השני. משמאל: היסטוגרמות מראות את אחוז כדורי הסוכרוז שנצרכו במהלך ההתרגלות (H1-3 שמייצגים את ימי ההתרגלות 1-3) ואימון (T1-2 שמייצגים את ימי האימון 1-2) עם PV של עכברים. מימין: היסטוגרמות מראות את העלייה בזמן האינטראקציה החברתית עם PV של העכבר בעל הערך החיובי במהלך מבחן האפליה החברתית. יחס בין הפעלות (זמן אינטראקציה של מפגש 2/זמן אינטראקציה של מפגש 1) חשף את ההעדפה ל-PV של העכבר בעל הערך החיובי. * p < 0.05, מבחן t זוגי של סטודנט. (C) נתונים מייצגים מניסוי אימון ערכיות חברתית שלילית. עכברים נבדקים אומנו לקיים אינטראקציה עם העכבר בעל הערך השלילי (עכבר NV) והעכבר הנייטרלי (עכבר Neu) מדי יום במשך 3 ימים. סדר האינטראקציה התהפך מדי יום. משמאל: היסטוגרמות מציגות את זמן האינטראקציה עם עכבר Neu ו-NV במהלך ימי אימון שונים. מימין: היסטוגרמות מראות את הירידה בזמן האינטראקציה החברתית עם העכבר בעל הערך השלילי NV במהלך מבחן האפליה החברתית. יחס בין הפגישות חשף את ההימנעות של NV העכבר בעל הערך השלילי. * p < 0.05, מבחן t של סטודנט מזווג. קיצורים: Neu = ניטרלי; PV = ערכיות חיובית; NV = ערכיות שלילית; H = התרגלות; T = אימון. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.

דיון

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

פרדיגמות זיהוי הזהות תוכננו להיות מיושמות בקלות במעבדות עם ציוד מיוחד מינימלי ומעט מפגשי הדרכה תוך שבוע. ניתן להשתמש בחוויות אלטרנטיביות בהתאם למשאבים הזמינים ולשאלת המחקר הרצויה. לדוגמה, זיהוי זהות בעל ערך שלילי בעקבות התקפות ממטרה חברתית תוקפנית תואר לראשונה באוגרים זהובים והותאם לעכברים במודל 6,12 שלנו.

לפרדיגמות זיהוי הזהות הערכיות יכולים להיות יישומים רחבים יותר בתחום הזיכרון החברתי. לא רק שניתן להשתמש במטלות אלה כדי לחקור עוד יותר זיכרון חברתי או מנגנוני ערכיות חברתית, אלא שהן יכולות גם לסייע בחקר מודלים של מחלות הידועות כבעלי ליקויי זיהוי חברתי. ליקויים בזיהוי זהות עומדים בבסיס ליקויים בהתנהגות חברתית בהפרעות כמו סכיזופרניה13,14,15 והפרעת הספקטרום האוטיסטי 16,17,18, שם מוערך כי שליש מהמבוגרים עם אוטיזם מתקשים להתמודד עם זיהוי זהות אינדיבידואלית 19. לדוגמה, עכברי נוקאאוט Shank3 ו-Df(16)A+/- הם מודלים של הפרעת הספקטרום האוטיסטי ועכברי סכיזופרניה הידועים כמציגים קוגניציה חברתית לקויה 20,21,22. הפרדיגמות החדשות שלנו עשויות לסכם ליקויים בזיכרון חברתי ולהיות מאומצות לאפיון מודלים של מחלות וזיהוי מניפולציות או טיפולים המשפרים ליקויים בהתנהגות חברתית. ניתן לחקור אובייקטים דוממים גם כתחליף למטרות חברתיות כדי לנתח עוד יותר את המנגנונים התומכים באובייקט, בהשוואה להכרה חברתית12.

המטרות החברתיות המשמשות באיור 1 הן עכברי זן CD1 מאותו המין, אך השגנו זיהוי זהות ערכי דומה באמצעות מטרות C57BL/6 מאותו הזן. לפיכך, פיתחנו שיטה הניתנת לאימוץ בקלות, שניתן להשתמש בה להמשך מחקר של עיבוד ערכיות חברתית, זהות חברתית וליקויים של תפקודים קוגניטיביים חברתיים אלה במודלים של מחלות מוח בבעלי חיים.

פרדיגמות זיהוי זהות בוחנות זיכרון עבור אנשים ספציפיים. בתכנון הניסויים, יש לדאוג לכך שמפגשי ההכשרה והבדיקה שונים לחלוטין ושהרמז היחיד שנשמר קבוע הוא זהות המטרות החברתיות. לדוגמה, החדרים שבהם מתבצעות הדרכה ובדיקות, המתחמים שמכילים את המטרות החברתיות והרמזים הקשורים להקשרי ההכשרה והמבחנים חייבים להיות שונים.

ארבע כוסות התיל חייבות להיות זהות זו לזו, אך שונות ככל האפשר ממארזי הפרספקס. כוסות החוט והמארזים חייבים להיות שונים מבחינת החומר (למשל, פרספקס לעומת מתכת), צורה (למשל, מלבני לעומת עגול) וצבע (למשל, שקוף לעומת זהב ורוד). זה נעשה כדי להבטיח שהרמז היחיד המודיע על התנהגות חקרנית במהלך הבדיקה הוא זהות המטרות החברתיות.

הרגלת ההקשר מתבצעת ביום הראשון של ההכשרה. זה נעשה כדי לעודד חקר מטרות חברתיות במהלך האימון ולא את ההקשר, שכבר יהיה ידוע לעכבר הנבדק. יתר על כן, מומלץ לפחות שעתיים של זמן המתנה בין אימונים מוערכים לניטרליים. מתן זמן לעכברי הנבדק בין מפגשי האימון נחשב כמפחית הכללה, מכיוון שחוויות שהוקצו קרוב יותר בזמן נוטות יותר להיות קשורות23. מאותה סיבה, האימונים חוזרים על עצמם, אך מאוזנים לפי הסדר, בימים שלאחר מכן. החזרה נחשבת כמעודדת את המשך האסוציאציה של החוויה עם המטרה החברתית המתאימה. באופן אידיאלי, יותר זמן בין מפגשי האימון עשוי לאפשר לעכברי הנבדק ללמוד לשייך את המטרה החברתית לחוויה הערכית שלהם. למטרות מעשיות, הוחלט שתקופת ההמתנה תהיה שעתיים מכיוון שהיא אפשרה גם אימונים ניטרליים וגם אימונים מוערכים להתקיים ביום אחד בקבוצה של 8-12 עכברים. לדוגמה, אימון של 12 עכברים עשוי להימשך כשעתיים, ואז העכבר הנבדק שאומן ראשון יהיה מוכן להתחיל את האימון הבא. כמובן, הגדלת תקופת ההמתנה עשויה לשפר את ביצועי העכברים הנבדקים, אך תיקח זמן רב יותר עבור הנסיין.

עכברים נבדקים ומטרות חברתיות צריכים להגיע למתקן בעלי החיים לפחות 7 ימים לפני תחילת האימון ההתנהגותי כדי למזער את ההשפעה של לחץ תחבורתי. מטרות חברתיות צריכות להיות מבודדות מכיוון שרמזי ריח מקמטים עלולים לפגוע בזיהוי הזהות. ניתן להשתמש באותם שני יעדים חברתיים עבור קבוצה של עד 12 עכברי נבדק. חשוב לציין, יש להחזיר את המטרות החברתיות לכלוב הביתי שלהם במהלך כל תקופת ניקוי והתקנה בין עכברים נבדקים. חשוב להחזיר את המטרות החברתיות לכלובים הביתיים שלהם מכיוון שכליאה ממושכת במתחמים עלולה לשנות את התנהגותם וכתוצאה מכך להשפיע על החלטתם של העכברים הנבדקים לקיים אינטראקציה.

עכברים נבדקים ומטרות חברתיות יכולים להיות ספציפיים של אותם זנים או שונים. אם משתמשים במטרות חברתיות מאותו זן, זה קריטי שהם לא יהיו מאותה המלטה כמו העכברים הנבדקים והמטרות החברתיות חייבות להיות לא מוכרות זו לזו. ניתן להבטיח זאת על ידי הזמנת עכברים נבדקים ומטרות חברתיות מספקים שונים של בעלי חיים או הזמנת בעלי חיים בגילאים מעט שונים (כלומר, עכברי נבדק בני 8 שבועות ומטרות חברתיות בנות 7 שבועות). אם נדרשים הליכי תיוג אוזניים, יש לבצע אותם לפחות 24 שעות לפני תחילת האימון ההתנהגותי. זאת כדי למזער את ההשפעה של גורמי לחץ חיצוניים על התנהגות העכברים הנבדקים. לכל האימונים והבדיקות ההתנהגותיות, מומלץ לעבוד עם עכבר נושא אחד בכל פעם. למרות שאימון ובדיקה בו-זמנית של עכברים מרובים עשויים לחסוך זמן, הם גם מגבירים את רמזי הריח בחדר הניסוי שעשויים להשפיע על הקידוד או ההיזכרות בזיהוי זהות. ככזה, אנו ממליצים על קבוצות של 8-12 עכברי נבדק. לניסויי ערכיות חברתית חיובית, מומלץ לטפל בבעלי החיים מדי יום לפני האימון כדי למזער את ההתמודדות עם לחץ, מה שעלול להרתיע צריכת מזון חדש. כמו כן, מומלץ להניח 2-3 כדורי מזון סוכרוז לכל עכבר בכלוב הביתי למשך 3 ימים לפני ההתרגלות כדי להקל על תהליך ההתרגלות.

למרות שהנתונים המוצגים נמדדו באופן ידני, קיימות אפשרויות ידידותיות למשתמש ואוטומטיות לניתוח התנהגותי וניתן ליישם אותן לניקוד יעיל יותר של אינטראקציות חברתיות בסרטוני הדרכה ובדיקה. לדוגמה, DeepLabCut היא תוכנה המשתמשת ברשתות עצביות מאומנות על ידי המשתמש לביאור חסר סמנים של מיקום בעלי חיים ועשויה להיות מותאמת לזיהוי מדויק של מסגרות המספקות התנהגות חקירה24.

ניתן להשתמש בניסויי בקרה נוספים כדי לוודא שהושגו פרוטוקולי זיהוי זהות מוצלחים12. היפוך סדר האימונים צריך להמשיך לעורר זיהוי זהות ולאשר שהתוצאות אינן נובעות מסדר ההכשרה הערכתי והנייטרלי. ניתן גם לבצע אימון כמתואר, אך בדיקות יכולות להתבצע עם המטרה הנייטרלית והחברתית החדשה, כאשר אינטראקציה מוגברת עם המטרה החדשה תציע כי לעכברי הנבדק יש זיכרון חברתי עבור המטרה הנייטרלית וזיהו שהיא מוכרת. באופן דומה, ניתן לבצע בדיקה עם שני עכברים חדשים כדי לאשר שהתנהגויות הימנעות או גישה הן, למעשה, ספציפיות למטרות החברתיות השליליות והחיוביות, בהתאמה. למרות שכרגע לא נבדק אם אותו עכבר יכול לעבור אימון ערכיות חברתית שלילי וחיובי כאחד, אנו מאמינים שזה אפשרי אם לנסיינים יש גישה למספר זני מטרה חברתיים או הקשרי אימון. שימוש באותו זן של מטרות חברתיות לניסויי ערכיות חיוביים ושליליים עלול לסבך את הקשר של זן עם ערכיות מסוימת. במידת האפשר, שימוש בזני מטרה חברתיים שונים עשוי לעודד חקירה ולהימנע מהכללה בין חוויות חיוביות ושליליות. באופן דומה, שימוש חוזר באותם הקשרי הכשרה יגביר את ההכללה בין חוויות בעלות ערך הפוך וימוזער עם שימוש בהקשרים מובחנים לאימון. אם ציר הזמן של הניסוי מאפשר, מומלץ גם להפריד בין ניסויי הערכיות החיובית והשלילית בכמה שבועות.

במקרה שיש קשיים בהקמת פרוטוקולי זיהוי זהות, אנו מציעים פתרונות לבעיות נפוצות בהן נתקלנו. עכברי נושא דיור קבוצתי עשויים לתפקד כאימון הכחדה מכיוון שהערכיות הקשורה למטרה חברתית נכחדת בעקבות אינטראקציה קגמלית רגילה25 אך היא הכרחית מכיוון שבידוד חברתי פוגע בזיכרון החברתי ומשנה התנהגות חברתית26,27. למעשה, מצאנו כי דיור יחיד לא עורר זיהוי זהות בעכברים זכרים. עם זאת, ייתכן שיידרש דיור יחיד אם בעלי חיים מתאוששים מניתוחים סטריאוטקסיים או שיש להם שתלים תוך גולגולתיים שעלולים להיות רגישים לניתוק. במקרים כאלה, שיכנו בהצלחה עכברים בכלובים גדולים, מופרדים על ידי מחיצה מחוררת, ושכפלנו את זיהוי הזהות במצב זה12.

עבור משימת הערכיות החברתית החיובית, מקובל שעכברים מראים היסוס לצרוך כדורי סוכרוז חדשים. כדי לפתור בעיה זו, כדאי להגדיל את זמן מניעת המזון או להכיר לעכברים את הכדורים על ידי הכנסת כמה כדורים לכלוב הביתי שלהם למשך 2-3 ימים לפני מפגש ההתרגלות. במצבים מסוימים שבהם רוב העכברים אינם צורכים כדורי מזון, זה עשוי להיות מועיל גם להגדיל את מספר מפגשי ההתרגלות. למרות ששמנו לב שעכברים זכרים בדרך כלל אכלו פחות במהלך ההתרגלות לכדורי מזון מאשר עכברים נקבות, זה לא משפיע על יכולתם לזהות את המטרה החברתית בעלת הערך החיובי.

לבסוף, ניתן לשנות את הפרמטרים של משימות זיהוי הזהות כדי להפחית או לשפר את הקושי של המשימה. לדוגמה, כדי לחשוף את ההשפעה העדינה של גורמים ביולוגיים על זיהוי זהות, ניתן להפחית את זמן האימון ואת מספר האימונים כדי להגביר את הקושי של המשימה.

המשימות ההתנהגותיות שהצגנו בפרוטוקול זה הן פשוטות, קלות להגדרה וניתנות להתאמה לעכברים זכרים ונקבות לחקר זיהוי זהות. השימוש הגמיש בגירויים מעוררי תיאבון או מרתיעים במשימות אלה מאפשר גם לבחון את תפקיד הערכיות החברתית בזיהוי זהות. משימות אלה יהיו שימושיות לחקר מנגנונים ביולוגיים של זיהוי זהות בעכברים בריאים, או ליקויים במנגנונים אלה במודלים של עכברים הקשורים למחלות המציגים ליקוי חברתי.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

המחברים מצהירים שאין ניגודי אינטרסים.

תודות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ברצוננו להודות לגב' אליס וונג על התמיכה הטכנית, ולד"ר ג'יי קווין לי על בניית מנגנון ההלם. אנו מודים ומודים למקורות המימון שלנו: מועצת המחקר למדעי הטבע וההנדסה של קנדה (RGPIN-2021-03739), המכונים הקנדיים לחקר הבריאות (PJ8 179866) ו-Fonds de recherche du Québec – Nature et technologies (326838).

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
70% אתנול
כלוב שחור דופן (24 ס"מ x 36 ס"מ x 19.5 ס"מ) הקשר ניטרלי, ניסוי
C57BL/6 עכברים צ'ארלס ריבר, מעבדת ג'קסוןיעדים חברתיים ממעבדת ג'קסון
בקבוקי זכוכית (2)
חומר
פלסטיק או קרטון חומר לא מוליך לרצפת המתחם
מארזי פרספקס מלבניים (2, 10 ס"מ x 5 ס"מ x 30 ס"מ)  זהה
(משולשת, אורך כל צד = 46 ס"מ; גובה = 29 ס"מ)
טיימר שקט 
פלט יחיד מקושקש בעלי חיים מקושקשLafayette מכשיר HSCK100AP
קופסה תלת-תאית (81 ס"מ x 23 ס"מ x 23 ס"מ), עם פתחים בתא האמצעי המתחברים לחדר השמאלי והימניבדיקת
כלוב שקוף (24 ס"מ x 36 ס"מ x 19.5 ס"מ)  ערכיות חברתית שלילית 
כלוב שקוף (26 ס"מ x 47 ס"מ x 21 ס"מ)  הרגלת מזון (ערכיות חברתית חיובית)
מצלמת אינטרנטLogitechC920x
משקל שקילה 
ניירות פנקס כן ציור לבן רצפת ההקשר הנייטרלי 
מחולל רעש לבן 60 dB
צלחת
כלוב בעל דופן לבנה (24 ס"מ x 36 ס"מ x 19.5 ס"מ) עם צינור פלסטיק בקוטר 1 ס"מ כנמל מזון ערכיות חברתית חיובית
כוסות תיל (עגולות, ארבע, 8 ס"מ x 8 ס"מ x 10 ס"מ) 
ערכיות חברתית חיוביתכדורי דיוק ללא אבק BioServ F05301 20 מ"ג, בטעם שוקולד סרט חשמלי חיטוי על בסיס מי חמצן קופסת זעזועים אפליה חברתיתפלסטיק לבנההקשר

מקורות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Van Der Kooij, M. A., Sandi, C. Social memories in rodents: Methods, mechanisms and modulation by stress. Neurosci Biobehav Rev. 36 (7), 1763-1772 (2012).
  2. Ferguson, J. N., Young, L. J., Insel, T. R. The neuroendocrine basis of social recognition. Front Neuroendocrinol. 23 (2), 200-224 (2002).
  3. Tibbetts, E. A., Dale, J. Individual recognition: It is good to be different. Trends Ecol Evol. 22 (10), 529-537 (2007).
  4. Hitti, F. L., Siegelbaum, S. A. The hippocampal ca2 region is essential for social memory. Nature. 508 (7494), 88-92 (2014).
  5. Okuyama, T., Kitamura, T., Roy, D. S., Itohara, S., Tonegawa, S. Ventral ca1 neurons store social memory. Science. 353 (6307), 1536-1541 (2016).
  6. Lai, W. S., Ramiro, L. L., Yu, H. A., Johnston, R. E. Recognition of familiar individuals in golden hamsters: A new method and functional neuroanatomy. J Neurosci. 25 (49), 11239-11247 (2005).
  7. Cordero, M. I., Sandi, C. Stress amplifies memory for social hierarchy. Front Neurosci. 1 (1), 175-184 (2007).
  8. Kong, E., Lee, K. H., Do, J., Kim, P., Lee, D. Dynamic and stable hippocampal representations of social identity and reward expectation support associative social memory in male mice. Nat Commun. 14 (1), 2597(2023).
  9. Kent, K., Butler, K., Wood, R. I. Ethanol induces conditioned social preference in male mice. Alcohol Clin Exp Res. 38 (4), 1184-1192 (2014).
  10. Wood, R. I., Rice, R. Ethanol-induced conditioned partner preference in female mice. Behav Brain Res. 243, 273-277 (2013).
  11. Toth, I., Neumann, I. D., Slattery, D. A. Social fear conditioning: A novel and specific animal model to study social anxiety disorder. Neuropsychopharmacology. 37 (6), 1433-1443 (2012).
  12. Larosa, A., et al. Social valence dictates sex differences in identity recognition. bioRxiv. , (2024).
  13. Marwick, K., Hall, J. Social cognition in schizophrenia: A review of face processing. Br Med Bull. 88 (1), 43-58 (2008).
  14. Sachs, G., Steger-Wuchse, D., Kryspin-Exner, I., Gur, R. C., Katschnig, H. Facial recognition deficits and cognition in schizophrenia. Schizophr Res. 68 (1), 27-35 (2004).
  15. Whittaker, J. F., Deakin, J. F., Tomenson, B. Face processing in schizophrenia: Defining the deficit. Psychol Med. 31 (3), 499-507 (2001).
  16. Griffin, J. W., Bauer, R., Scherf, K. S. A quantitative meta-analysis of face recognition deficits in autism: 40 years of research. Psychol Bull. 147 (3), 268-292 (2021).
  17. Carver, L. J., Dawson, G. Development and neural bases of face recognition in autism. Mol Psychiatry. 7 Suppl 2, S18-S20 (2002).
  18. Klin, A., et al. A normed study of face recognition in autism and related disorders. J Autism Dev Disord. 29 (6), 499-508 (1999).
  19. Minio-Paluello, I., Porciello, G., Pascual-Leone, A., Baron-Cohen, S. Face individual identity recognition: A potential endophenotype in autism. Mol Autism. 11 (1), 81(2020).
  20. Peca, J., et al. Shank3 mutant mice display autistic-like behaviours and striatal dysfunction. Nature. 472 (7344), 437-442 (2011).
  21. Piskorowski, R. A., et al. Age-dependent specific changes in area ca2 of the hippocampus and social memory deficit in a mouse model of the 22q11.2 deletion syndrome. Neuron. 89 (1), 163-176 (2016).
  22. Xu, Q. W., Larosa, A., Wong, T. P. Roles of ampa receptors in social behaviors. Front Synaptic Neurosci. 16, 1405510(2024).
  23. Cai, D. J., et al. A shared neural ensemble links distinct contextual memories encoded close in time. Nature. 534 (7605), 115-118 (2016).
  24. Mathis, A., et al. Deeplabcut: Markerless pose estimation of user-defined body parts with deep learning. Nat Neurosci. 21 (9), 1281-1289 (2018).
  25. Zoicas, I., Slattery, D. A., Neumann, I. D. Brain oxytocin in social fear conditioning and its extinction: Involvement of the lateral septum. Neuropsychopharmacology. 39 (13), 3027-3035 (2014).
  26. Ieraci, A., Mallei, A., Popoli, M. Social isolation stress induces anxious-depressive-like behavior and alterations of neuroplasticity-related genes in adult male mice. Neural Plast. 2016, 6212983(2016).
  27. Kogan, J. H., Frankland, P. W., Silva, A. J. Long-term memory underlying hippocampus-dependent social recognition in mice. Hippocampus. 10 (1), 47-56 (2000).

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

C57BL 6

מאמרים קשורים