הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

הערכת פגוציטוזיס מיקרוגליאלי של פסולת מיאלין במבחנה תחת גירוי מגנטי חוזר

1.6K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/67642

⸱

17 ביוני 2025

 ,  ,  ,  , 
1Department of Rehabilitation Medicine, The Affiliated Suzhou Hospital of Nanjing Medical University, 2Rehabilitation Medicine Center, The First Affiliated Hospital of Nanjing Medical University, 3Department of Children's Rehabilitation, Linyi People's Hospital, 4Department of Endocrinology, People's Hospital of Dongxihu District, 5Department of Rehabilitation, Hengyang Medical School, The First Affiliated Hospital, University of South China

במאמר זה

סיכום

הפרוטוקול הנוכחי תוכנן כדי להעריך את ההשפעה של גירוי מגנטי חוזר על יכולתה של מיקרוגליה לפגוציטוזה של פסולת מיאלין. מערכת תרבית משותפת של מיקרוגליה ופסולת מיאלין במבחנה הוקמה לשם כך.

תקציר

מיקרוגליה, הפגוציטים המקומיים של מערכת העצבים המרכזית (CNS), ממלאים תפקיד מרכזי בשמירה על שלמות מערכת העצבים המרכזית וההומאוסטזיס על ידי הסרת תאים פגומים, פסולת תאית ושאריות מיאלין. הצטברות פסולת מיאלין מעורבת במגוון הפרעות במערכת העצבים המרכזית, כולל טרשת נפוצה, מחלת אלצהיימר, פגיעה מוחית טראומטית ופגיעה בחוט השדרה. נוכחותם של פסולת מיאלין לא רק מחמירה דלקת עצבית אלא גם פוגעת בפוטנציאל ההתחדשות של המיאלין. לכן, שיפור היכולת של מיקרוגליה לפנות פסולת מיאלין באמצעות פגוציטוזיס מייצג אסטרטגיה טיפולית מבטיחה. גירוי מגנטי התגלה כשיטת טיפול חדשנית למחלות מערכת העצבים המרכזית, עם עדויות הולכות וגדלות המצביעות על הפוטנציאל שלו לקדם פגוציטוזיס מיקרוגליאלי ולתמוך בהתאוששות מערכת העצבים המרכזית. כדי להבהיר עוד יותר את ההשפעות של גירוי מגנטי על פינוי מיקרוגליה של פסולת מיאלין, תכננו ניסוי במבחנה הכולל תרבית משותפת של מיקרוגליה ופסולת מיאלין. התרבות המשותפת הייתה נתונה לגירוי מגנטי חוזר ונשנה כדי להעריך את השפעתו על הפעילות הפגוציטית של מיקרוגליה בהקשר של פתולוגיה של מערכת העצבים המרכזית.

מבוא

מיאלין הוא מבנה ממברנה צינורי יציב המקיף אקסונים המיוצרים על ידי אוליגודנדרוציטים במערכת העצבים המרכזית (CNS). מעטפת מיאלין זו ממלאת תפקיד קריטי בהקלה על התפשטות מהירה ויעילה של פוטנציאל פעולה1. אולם הפרעות נוירולוגיות שונות, כמו למשל טרשת נפוצה (MS), שבץ ופגיעות טראומטיות, כולל פגיעה בחוט השדרה (SCI) ופגיעה מוחית טראומטית (TBI), יכולות להוביל לאובדן שלמות המיאלין. התוצאה היא יצירת פסולת מיאלין עקב שיבוש מעטפת המיאלין ונזק ישיר למבני המיאלין 2,3,4. הצטברות פסולת מיאלין לא רק מעכבת רמיאלינציה והתאוששות תפקודית, אלא גם מחמירה דלקת עצבית 5,6. לכן, פינוי יעיל של פסולת מיאלין חיוני לפתרון דלקת עצבית, קידום התחדשות אקסונלית ושיקום הומאוסטזיס במערכת העצבים לאחר מחלות נוירולוגיות.

פסולת מיאלין מנוקה בעיקר על ידי פגוציטים, כגון מקרופאגים ומיקרוגליה במערכת העצבים המרכזית (CNS). מיקרוגליה, תאי החיסון המקומיים של מערכת העצבים המרכזית, סוקרים כל הזמן את סביבתם לאיומים פוטנציאליים ומגנים על מערכת העצבים המרכזית על ידי הסרת מיאלין ופסולת מיאלין פגומים. יתר על כן, פגוציטוזיס מיקרוגליאלי ממלאת תפקיד מכריע בקידום נוירוגנזה באמצעות פינוי פסולת 7,8. עדויות הולכות וגדלות מצביעות על כך ששיפור פגוציטוזיס במיקרוגליה של פסולת מיאלין יכול להפחית את ההשפעות המזיקות של דלקת, להפחית את הנזק למערכת העצבים המרכזית ולקדם התחדשות אקסונלית לאחר פגיעה עצבית. 4,9,10.

טיפול בגירוי מגנטי, טכניקת נוירומודולציה לא פולשנית, זכה לשימוש נרחב בטיפול בהפרעות נוירולוגיות שונות11. יש לציין כי גירוי מגנטי טרנס-גולגולתי חוזר (rTMS) הראה הבטחה כגישה טיפולית למחלת אלצהיימר (AD), פגיעה מוחית ושבץמוחי 12,13,14. מחקר שנערך לאחרונה הראה כי rTMS יכול לשפר פגוציטוזיס מיקרוגליאלי של עמילואיד-בטא (Aβ) ואפוליפופרוטאין E (ApoE), ובכך לעכב את ההתקדמות הפתולוגית של אלצהיימר במודלים של בעלי חיים15. באופן דומה, עבודתנו האחרונה מצאה כי גירוי מגנטי חוצה עמוד השדרה (rTSMS) מקדם פגוציטוזיס מיקרוגליאלי של פסולת מיאלין בעקבות פגיעה בחוט השדרה בחולדות16.

עם זאת, ההשפעה של גירוי מגנטי חוזר על מיקרוגליה הוכחה בעיקר באמצעות מודלים ניסיוניים בבעלי חיים 17,18,19. ואכן, גירוי מגנטי הוכח כמווסת את הריגוש העצבי באמצעות אינדוקציה של זרמים20. כתוצאה מכך, לא ניתן להתעלם מכך שהאינטראקציה בין נוירונים למיקרוגליה עשויה להשפיע על תפקוד המיקרוגליה. כתוצאה מכך, יש צורך בניסויים במבחנה כדי לוודא אם ההשפעה של גירוי מגנטי על מיקרוגליה אינה תלויה בשינוי בריגוש העצבי. מחקרים אחרונים זיהו השפעה מווסתת של גירוי מגנטי חוזר על מיקרוגליה במודלים ניסיוניים. כמה מחקרים הראו שגירוי מגנטי חוזר יכול לקדם קיטוב מיקרוגליה לכיוון M219,21. עם זאת, חקירה נוספת של תפקוד המיקרוגליה שלו עדיין לא הובהרה. יש לציין כי אמלי אייכלר ועמיתיו התערבו בפרוסות רקמת מוח במבחנה באמצעות גירוי מגנטי של 10 הרץ ומצאו כי גירוי מגנטי של 10 הרץ הצליח לקדם שחרור ציטוקינים ממיקרוגליה כדי להשפיע על ריגוש עצבי ופלסטיות22. בעוד שמחקר זה הרחיב את ההבנה של השפעות הגירוי המגנטי על מיקרוגליה, יש צורך בחקירה נוספת ברמה התאית כדי להבהיר באופן מלא את המנגנונים שלו.

לפיכך, יצרנו פרוטוקול כדי לוודא אם גירוי מגנטי יכול לקדם את הפגוציטוזה של פסולת מיאלין במבחנה. בניגוד לפסולת מיאלין אחרי מחלה או נזק לרקמות, שהיא תוצר של פציעה, פסולת המיאלין ששימשה בניסוי הזה היא צורת מעטפת המיאלין אחרי שהיא מתפרקת. בנוסף, הרעיון של פסולת מיאלין הוא תוצר של התפוררות מיאלין. כתאים הפגוציטים העיקריים של המוח, מיקרוגליה ממלאת תפקיד מרכזי בפינוי תאים פגומים ופסולת מיאלין23, הקשור למחלות כמו טרשת נפוצה ואלצהיימר 24,25. הצטברות פסולת מיאלין הוכחה כמחמירה דלקת עצבית ומעכבת התחדשות26. מטרת המחקר היא לחקור את הפוטנציאל של גירוי מגנטי להגביר את פגוציטוזיס המיקרוגליה של פסולת מיאלין, ובכך להפחית דלקת עצבית ולתמוך בהתאוששות מערכת העצבים המרכזית במצבים ניווניים וטראומטיים. לסיכום, המחקר משתמש בגישת קו-תרבות, לפיה מיקרוגליה עוברת תרבית משותפת עם פסולת מיאלין ומבוצע גירוי מגנטי חוזר על מנת לאמת את ההשפעה של גירוי מגנטי חוזר על היכולת הפגוציטית של מיקרוגליה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

כאן, שלוש חולדות נקבות SD (בגילאי 2-3 שבועות) שימשו לחילוץ פסולת מיאלין על ידי צנטריפוגה בשיפוע סוכרוז. כל החולדות נרכשו ממתקן הליבה לבעלי חיים של האוניברסיטה הרפואית נאנג'ינג, נאנג'ינג, סין (רישיון בעלי חיים: SYXK (Su) 2021-0023). כל החולדות גודלו בתנאי ביקורת (טמפרטורה 22 ± 2 מעלות צלזיוס, תקופת אור / חושך של 12 שעות / 12 שעות, 55% ± 5% לחות יחסית). כל הניסויים בבעלי חיים אושרו על ידי הוועדה לטיפול ושימוש בבעלי חיים של האוניברסיטה הרפואית של נאנג'ינג (No. IACUC-1903031 ומס' IACUC-2005001) ומטרתן הייתה למזער את הסבל ואת מספר בעלי החיים שנעשה בהם שימוש.

1. בידוד מיאלין

הערה: פסולת המיאלין חולצה כמתואר קודם לכן, וכמה שינויים נעשו27. ודא שכל השלבים בוצעו ב-4 מעלות צלזיוס ובתנאים סטריליים.

  1. בידוד של מיאלין גולמי
    1. מיצוי רקמת מוח
      1. לאחר הרדמה עם פנטוברביטל (50 מ"ג/ק"ג, הזרקה תוך צפקית), העריכו את עומק ההרדמה על ידי תגובת צביטה בבוהן. ערפו את ראשי החולדות הנקבות. נתחו את כל הראש על קרח וחתכו את הגולגולת במספריים כדי לחשוף את המוח במלואו ולהקל על הסרת המוח השלם.
      2. כרתו את הממברנות, המוח הקטן וההיפוקמפוס בעזרת מספריים ומלקחיים בצורה קפדנית ואספטית כדי למנוע זיהום של תערובת הסוכרוז של רקמת המוח. נקה את המוח פי 3 עם PBS כדי להסיר שאריות דם או רקמות.
      3. העבירו את המוחות הנקיים ל-10 מ"ל של תמיסת סוכרוז סטרילית של 0.32 M וחתכו את רקמת המוח עם המספריים המיקרו-כירורגיים ל-5 מ"מ 3 חתיכות כדי לקבל תערובת סוכרוז של רקמת מוח.
    2. הומוגניזציה של רקמת המוח
      1. העבירו את תערובת הסוכרוז של רקמת המוח להומוגניזטור סטרילי של 50 מ"ל והוסיפו 30 מ"ל של תמיסת סוכרוז סטרילית של 0.32 M. השתמש בהומוגנייזר זכוכית של 50 מ"ל כדי להומוגניזציה למשך 2 דקות כדי לקבל רקמת מוח הומוגנית חלקה.
      2. מדללים את רקמת המוח הומוגנית ל-90 מ"ל עם תמיסת סוכרוז סטרילית של 0.32 M, מערבבים ומחלקים לאט לחלק העליון של שישה צינורות אולטרה-צנטריפוגה סטריליים של 38.5 מ"ל פוליפרופילן דק דופן המכילים 20 מ"ל של תמיסת סוכרוז סטרילית 0.83 M. הוסף 15 מ"ל הומוגנט לכל צינור צנטריפוגה ולאחר מכן יישר עם תמיסת סוכרוז סטרילית של 0.32 M.
    3. איסוף פסולת מיאלין גולמי
      1. יש לקרר מראש רוטור אולטרה-צנטריפוגה בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס, ולצנטריפוגה את הדגימה ב-75,000 x גרם למשך 45 דקות. לאחר תהליך הצנטריפוגה, יש לאסוף את פסולת המיאלין מהממשק בין שתי צפיפויות הסוכרוז באמצעות שפופרת פסטר סטרילית.
        הערה: חובה במהלך תהליך האיסוף לנקוט משנה זהירות ולהימנע מאיסוף בטעות של רכיבים אחרים של הדגימה המזוהמת.
  2. הפרדה וטיהור איזוטוני ראשון
    1. העבירו את תמיסת פסולת המיאלין שנאספה לצינור צנטריפוגה של 50 מ"ל והתאימו את הנפח ל-35 מ"ל עם מאגר מלח סטרילי מקורר מראש (PBS). העבירו את התמיסה להומוגניזטור סטרילי חדש של 50 מ"ל והומוגניזציה למשך 2 דקות לקבלת הומוגנט.
    2. פזרו את פסולת המיאלין באופן שווה בשישה צינורות אולטרה-צנטריפוגה סטריליים של 38.5 מ"ל מפוליפרופילן דק דופן, והוסיפו מאגר PBS סטרילי. הכניסו את הצינורות לצנטריפוגה ב-75,000 x גרם למשך 45 דקות ב-4 מעלות צלזיוס.
  3. הפרדה וטיהור איזוטוני שני
    1. לאחר צנטריפוגה, השליכו את הסופרנטנט והשעו מחדש את הגלולה הלבנה המוצקה ב-10 מ"ל של מאגר PBS סטרילי מקורר מראש על מנת להשיג תרחיף פסולת מיאלין. מחלקים את המתלה באופן שווה בשני צינורות אולטרה-צנטריפוגה סטריליים של 38.5 מ"ל מפוליפרופילן דק דופן, כאשר הנפח מאוזן על ידי תוספת של מאגר PBS סטרילי.
    2. צנטריפוגה את הדגימות ב-4 מעלות צלזיוס ב-75,000 x גרם למשך 45 דקות.
  4. אוסף מיאלין מטוהר
    1. לאחר צנטריפוגה, השליכו את הסופרנטנט והשעו מחדש את הגלולה הלבנה המוצקה ב-6 מ"ל של מאגר PBS סטרילי. חלקו את תרחיף פסולת המיאלין לשישה צינורות צנטריפוגה של 1.5 מ"ל ולאחר מכן כפפו לצנטריפוגה ב-4 מעלות צלזיוס ו-12,000 x גרם למשך 10 דקות.
    2. לאחר צנטריפוגה, השליכו את הסופרנטנט והשעו מחדש את הגלולה הלבנה המוצקה ב-100 מיקרוליטר של מי מלח סטריליים מקוררים מראש (PBS).
  5. כימות פסולת מיאלין
    1. קח 3 מיקרוליטר מתרחיף פסולת המיאלין לכימות תכולת החלבון באמצעות ערכת כימות חלבון BCA. אחסן את מתלה פסולת המיאלין הנותר בטמפרטורה של -80 מעלות צלזיוס.

2. תיוג פלואורסצנטי של פסולת מיאלין

  1. דגירה של Carboxyfluorescein diacetate N-succinimidyl ester
    1. הפשירו את פסולת המיאלין הנדרשת ב-4 מעלות צלזיוס או מי קרח וצנטריפוגה ב-12,000 x גרם למשך 10 דקות ב-4 מעלות צלזיוס. השליכו את הסופרנטנט והשעו מחדש את פסולת המיאלין ב-200 מיקרוליטר של תמיסת אסטר N-succinimidyl (CFSE; 50 מיקרומטר).
    2. דוגרים בטמפרטורת החדר בחושך למשך 30 דקות. לאחר תקופת הדגירה, צנטריפוגה ב-12,000 x גרם למשך 10 דקות ב-4 מעלות צלזיוס.
    3. השליכו את הסופרנטנט ושטפו את הדגימות פי 3 עם 500 מיקרוליטר של מאגר PBS סטרילי. לאחר תהליך הכביסה, השעו מחדש את פסולת המיאלין ב-100 מיקרוליטר של מאגר PBS סטרילי מקורר מראש על מנת לקבל תרחיף של פסולת מיאלין עם תווית פלואורסצנטית, שניתן לאחסן בטמפרטורה של -80 מעלות צלזיוס.

3. תרבות מיקרוגליה

  1. תרבית תאי BV-2 ב-5% CO2 בלחות ב-37 מעלות צלזיוס במדיום הנשר המותאם (DMEM) של Dulbecco בתוספת 10% (v/v) FBS, פניצילין (100 U/mL) וסטרפטומיצין (100 U/mL). זרע כמעט 50% תאי Bv-2 בצלחת 12 בארות וצלחת 24 בארות לבדיקות נוספות.

4. גירוי מגנטי חוזר במבחנה

  1. בצע את ההתערבות בגירוי מגנטי חוזר במבחנה עם ההגדרה הבאה: תדר טיפול של 20 הרץ, עוצמת טיפול של 1% מעוצמת הפלט המקסימלית (כלומר, 0.035 טסלה), זמן גירוי של 5 שניות, תקופת מנוחה של 20 שניות. יש לתת 600 פולסים עם זמן טיפול יחיד של 2.5 דקות.
  2. במהלך גירוי מגנטי, מקם את מרכז הסליל ביישור עם מרכז לוחית התרבית וודא שהסליל מתאים היטב לתחתית לוחית התרבית.
    1. קבע מראש את הפרמטרים של גירוי מגנטי וקבע את כיוון סליל הגירוי המגנטי כך שיהיה מאונך לקרקע ומכוון כלפי מעלה. עקר את סליל הגירוי המגנטי באלכוהול כדי למנוע זיהום מהתאים.
    2. לאחר מכן, שלף את לוחית תרבית התאים מהאינקובטור ומקם אותה מעל סליל הגירוי המגנטי לגירוי מגנטי. עקרו את הצלחת על ידי ריסוס אלכוהול עליה ואז החזירו אותה לחממה. שמור על הצלחת מכוסה לאורך כל התהליך.

5. בדיקת פגוציטוזיס מיקרוגליאלי של פסולת מיאלין

  1. טיפול בגירוי מגנטי חוזר לקבוצת LPS+rMS
    1. השתמש ב-CFSE (50 מיקרומטר) כדי לתייג פסולת מיאלין כדי להעריך פגוציטוזיס. צלחת 1 x 104 תאי BV-2 בצלחות של 24 בארות למשך הלילה. שנה את המדיום למדיום נטול סרום וטפל בתאים עם ליפופוליסכריד (LPS; 1 מיקרוגרם/מ"ל) למשך 12 שעות. שאפו בעדינות את המדיום הישן בעזרת פיפטה ולאחר מכן הוסיפו את המדיום החדש נטול הסרום מיד באמצעות הפיפטה.
    2. לאחר תקופה של 12 שעות של התערבות LPS, הוסף את פסולת המיאלין (100 מיקרוגרם/מ"ל) למדיום לתרבית משותפת בתנאי חושך. לחשוף את התאים להתערבויות חוזרות ונשנות של גירוי מגנטי כמתואר בשלב 4.2.
  2. אימונופלואורסצנציה והדמיה
    1. שטפו בעדינות את שאריות המיאלין שאינן נספגות עם PBS וקבעו את התאים עם 4% PFA למשך 15 דקות. יש לחסום את התאים עם PBS המכיל 10% אלבומין בסרום חמור ו-0.3% טריטון X-100 למשך שעה בטמפרטורת החדר, ולאחר מכן לשטוף עם PBS ולדגור עם נוגדן ראשוני (IBA-1, 1:200) בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס למשך הלילה.
    2. דגרו על התאים עם נוגדנים משניים (1: 300, עכבר) למשך שעתיים בטמפרטורת החדר. צלם תמונות באמצעות מיקרוסקופ קונפוקלי ב-40x ו-20x.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

במחקר זה, הזנו בתחילה תאי מיקרוגליה BV-2 במבחנה על ידי חילוץ פסולת מיאלין שמקורה במוח ושימוש בגירוי מגנטי חוזר ונשנה כדי לשפר את היכולת הפגוציטית שלהם. לאחר מכן, תאי מיקרוגליה BV-2 עברו תרבית ועברו התערבות LPS לפני גירוי מגנטי, ובכך חיקו את מצב המיקרוגליה in vivo תחת אימות נוירולוגי קפדני. לאחר מכן, התערבות rMS יושמה בעקבות גירוי LPS. כדי לאמת את הפגוציטוזה של תאים, נעשה שימוש באימונופלואורסצנטיות, תוך שימוש ב-IBA-1 כדי לסמן מיקרוגליה ו-CFSE כדי לסמן פסולת מיאלין (איור 1). ...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

גירוי מגנטי חוזר (rMS) היא טכניקת גירוי עצבי לא פולשנית שיושמה באופן נרחב בטיפול בהפרעות נוירולוגיות ופסיכיאטריות שונות, כולל ליקויים קוגניטיביים, מחלת אלצהיימר (AD), שבץ מוחי, פגיעה מוחית ופגיעה בחוט השדרה (SCI). rMS משתמש בשדה מגנטי פועם כדי לווסת את פוטנציאל הממברנה של נוירונים, ומשפיע באופן סלקטיבי על ריגוש עצבי בתוך מערכת העצבים11. בנוסף להשפעותיו על נוירונים, הוכח כי rMS מווסת את תפקוד המיקרוגליה, מדכא דלקת עצבית ומשפר את המיקרו-סביבה של מערכת העצבים

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

למחברים אין מה לחשוף.

תודות

עבודה זו נתמכה על ידי מענקים מהקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (82302877, 82172541), הקרן למדעי הטבע של מחוז הונאן (2023JJ30549).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
מדיום הרכבה נגד דהייה עם DAPIBeyotime, סיןP0131
ערכת BCAThermoFisher Scientific, אמריקה23227
תא Bv-2ATCCCBP60922
תרבית תאים 12 בארות צלחותביופיל, סין
תרבית תאים 24 בארות צלחותביופיל, סין
סריקת לייזר קונפוקלית מיקרוסקופזייס, גרמניה800
חממת טמפרטורה קבועהThermoFisher Scientific, אמריקה
CFSEMedChemExpress, אמריקהHY-158820
DMEM-Culture בינוניKeyGen, סיןKGL1202-500
FBSGibco, אמריקה16250078
Iba1Abcam, אמריקהab48004
מנגנון גירוי מגנטיYiruide, סיןCCY-IA
סליל גירוי מגנטיYiruide, סין
ParaformaldehydeBioSharp, סין
PBSKeyGen, סיןKGL2210-500
פניצילין-סטרפטומיציןGibco, אמריקה15140-122
סוכרוזMedChemExpress, אמריקהHY-B1779
TrypsinKeyGen, סיןKGL2107-100
Ultracentrifugeבקמן, אמריקהL-100XP

מקורות

  1. Osso, L. A., Hughes, E. G. Dynamics of mature myelin. Nat Neurosci. 27 (8), 1449-1461 (2024).
  2. Gao, R., et al. Myelin debris phagocytosis in demyelinating disease. Glia. 72 (11), 1934-1954 (2024).
  3. Kopper, T. J., Gensel, J. C. Myelin as an inflammatory mediator: Myelin interactions with complement, macrophages, and microglia in spinal cord injury. J Neurosci Res. 96 (6), 969-977 (2018).
  4. Yu, F., et al. Phagocytic microglia and macrophages in brain injury and repair. CNS Neurosci Ther. 28 (9), 1279-1293 (2022).
  5. Filbin, M. T. Myelin-associated inhibitors of axonal regeneration in the adult mammalian CNS. Nat Rev Neurosci. 4 (9), 703-713 (2003).
  6. Sen, M. K., Mahns, D. A., Coorssen, J. R., Shortland, P. J. The roles of microglia and astrocytes in phagocytosis and myelination: Insights from the cuprizone model of multiple sclerosis. Glia. 70 (7), 1215-1250 (2022).
  7. Jia, J., et al. The role of microglial phagocytosis in ischemic stroke. Front Immunol. 12, 790201(2021).
  8. Kettenmann, H., Hanisch, U. K., Noda, M., Verkhratsky, A. Physiology of microglia. Physiol Rev. 91 (2), 461-553 (2011).
  9. Shen, S., et al. Neutrophil nanovesicle protects against experimental autoimmune encephalomyelitis through enhancing myelin clearance by microglia. ACS. 16 (11), 18886-18897 (2022).
  10. Cignarella, F., et al. TREM2 activation on microglia promotes myelin debris clearance and remyelination in a model of multiple sclerosis. Acta Neuropathol. 140 (4), 513-534 (2020).
  11. Dufor, T., Lohof, A. M., Sherrard, R. M. Magnetic stimulation as a therapeutic approach for brain modulation and repair: Underlying molecular and cellular mechanisms. Int J Mol Sci. 24 (22), 16456(2023).
  12. Martin, D. M., McClintock, S. M., Forster, J. J., Lo, T. Y., Loo, C. K. Cognitive enhancing effects of rTMS administered to the prefrontal cortex in patients with depression: A systematic review and meta-analysis of individual task effects. Depress Anxiety. 34 (11), 1029-1039 (2017).
  13. Kamo, T., et al. Repetitive peripheral magnetic stimulation for impairment and disability in people after stroke. Cochrane Database Syst Rev. 9 (9), CD011968(2022).
  14. Wang, Y., Wang, L., Ni, X., Jiang, M., Zhao, L. Efficacy of repetitive transcranial magnetic stimulation with different application parameters for post-stroke cognitive impairment: A systematic review. Fron Neurosci. 18, 1309736(2024).
  15. Chu, F., et al. Transcranial magneto-acoustic stimulation attenuates synaptic plasticity impairment through the activation of Piezo1 in alzheimer's disease mouse model. Research. 6, 0130(2023).
  16. Zhai, C., et al. Repeated trans-spinal magnetic stimulation promotes microglial phagocytosis of myelin debris after spinal cord injury through LRP-1. Exp Neurol. 379, 114844(2024).
  17. Qin, T., et al. Repetitive transcranial magnetic stimulation ameliorates cognitive deficits in mice with radiation-induced brain injury by attenuating microglial pyroptosis and promoting neurogenesis via BDNF pathway. Cell Comm Signal. 22 (1), 216(2024).
  18. Qian, F., et al. Microglia and astrocytes responses contribute to alleviating inflammatory damage by repetitive transcranial magnetic stimulation in rats with traumatic brain injury. Neurochem Res. 49 (9), 2636-2651 (2024).
  19. Luo, J., et al. Repetitive transcranial magnetic stimulation improves neurological function and promotes the anti-inflammatory polarization of microglia in ischemic rats. Front Cell Neurosci. 16, 878345(2022).
  20. Jannati, A., Oberman, L. M., Rotenberg, A., Pascual-Leone, A. Assessing the mechanisms of brain plasticity by transcranial magnetic stimulation. Neuropsychopharmacol. 48 (1), 191-208 (2023).
  21. Luo, L., et al. Intermittent theta-burst stimulation improves motor function by inhibiting neuronal pyroptosis and regulating microglial polarization via TLR4/NFκB/NLRP3 signaling pathway in cerebral ischemic mice. J Neuroinflammat. 19 (1), 141(2022).
  22. Eichler, A., et al. Microglial cytokines mediate plasticity induced by 10 Hz repetitive magnetic stimulation. J Neurosci. 43 (17), 3042-3060 (2023).
  23. Kent, S. A., Miron, V. E. Microglia regulation of central nervous system myelin health and regeneration. Nat Rev Immunol. 24 (1), 49-63 (2024).
  24. Yong, V. W. Microglia in multiple sclerosis: Protectors turn destroyers. Neuron. 110 (21), 3534-3548 (2022).
  25. Sarlus, H., Heneka, M. T. Microglia in Alzheimer's disease. J Clin Invest. 127 (9), 3240-3249 (2017).
  26. Cantuti-Castelvetri, L., et al. Defective cholesterol clearance limits remyelination in the aged central nervous system. Science. 359 (6376), 684-688 (2018).
  27. Norton, W. T., Poduslo, S. E. Myelination in rat brain: Method of myelin isolation. J Neurochem. 21 (4), 749-757 (1973).
  28. Gordon, S. Phagocytosis: An immunobiologic process. Immunity. 44 (3), 463-475 (2016).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

תירבות משותפת (Co-Culture) במעבדהמערכת העצבים המרכזיתמיקרוגליה BV-2מיקרוסקופיה קונפוקליתטיפול בליפופוליסכרידבידוד פסד myelinדלקת נוירוגנית
הערכת פגוציטוזיס מיקרוגליאלי של פסולת מיאלין במבחנה תחת גירוי מגנטי חוזר
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.