מאמר שיטה

חיסון תוך עורי של Mycobacterium avium באוזן העכבר

2.3K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/67675

⸱

3 ביולי 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Center for Global Infectious Disease Research, Seattle Children's Research Institute, 2Department of Pediatrics, University of Washington School of Medicine, 3Department of Global Health, University of Washington

במאמר זה

סיכום

כאן אנו מציגים פרוטוקול לביצוע חיסון תוך-עורי במינון נמוך של Mycobacterium avium באוזן עכבר כדי לשקף תנאים דמויי חשיפה.

תקציר

בניגוד לחשיפות מיקובקטריאליות טבעיות שאינן שחפתיות (NTM) או זיהומים שהפתולוגיה שלהם מבוססת על אורגניזם המשתכפל לאט, זיהום התרסיס במודל עכבר יכול לגרום לשגשוג מוגבר של צמיחת חיידקים בריאות. ניתן לטפל באירוסול כרוני ובזיהומים מערכתיים באמצעות תרופות אנטי-מיקובקטריאליות, שיכולות לשקף גם חשיפה קודמת, אך הליכים אלה ארוכים ופחות מייצגים חשיפות טבעיות. מטרת פרוטוקול זה היא לפתח מודל עכברי פחות פולשני של מצבים דמויי חשיפה ל-NTM שהם יותר תרגומיים. כאן, אנו מתארים שיטה לאתגר תוך עורי עכברים פרה-קליניים דרך רקמת האוזן באמצעות Mycobacterium avium (M. avium) כדי לחקות חשיפה ולאפשר תגובות חיסוניות לחיידקים ללא מחלה ברורה. במאמר זה, אנו מתארים את שיטת הזרקת האוזן התוך-עורית ומאשרים נוכחות של זיהום מיקובקטריאלי מתמשך ומוכל, המספק הזדמנויות נוספות לחקור את התגובות החיסוניות במודל in vivo זה.

מבוא

מיקובקטריות שאינן שחפתיות (NTM) הן רשימה מתרחבת של מינים הכוללים תת-קבוצה של חיידקים פתוגניים שלעתים קרובות קשה לטפל בהם 1,2. ניתן למצוא NTM במקורות סביבתיים כגון אדמה, מים ואירוסולי מים 3,4,5. למרות המגמות המדווחות המצביעות על עלייה בזיהומי NTM, כקבוצה, הם מדווחים באופן שגרתי בפחות מ-20 מדינות ברחבי ארה"ב. אנשים עם מחלות נלוות ספציפיות, כולל אנשים עם סיסטיק פיברוזיס או אנשים הנוטלים תרופות מדכאות חיסון, נמצאים בסיכון מוגבר לזיהום פרודוקטיבי עם מיני NTM פתוגניים2. עם זאת, ההנחה היא שלאנשים בריאים יש חשיפה חוזרת ומתמשכת ל-NTM דרך מקורות סביבתיים מבלי להוביל לזיהומים חזקים או כרוניים. ישנן עדויות לכך שחשיפה ל-NTM עשויה 'להתנות מראש' את התגובה החיסונית הכוללת לאנטיגנים מיקובקטריאליים בחיסונים8, תוצאות לאחר חשיפה למיקובקטריות אחרות ובדיקות אבחון9, אך עד כה, מודלים פרה-קליניים של חשיפה מסוג זה היו קשים.

זיהומים ריאתיים כרוניים10 וטיפולים הממונפים למחקרי יעילות חיסונים ספציפיים לפתוגן אינם מייצגים חשיפות סביבתיות תמימות יחסית, ואת התגובות החיסוניות השונות לכאורה. זיהומים כרוניים, למשל, יכולים לגרום לרקמות פגועות קשות ולמחלה מפושטת10. לאחרונה היה מומנטום לטפל בפער מחקרי זה, כולל מודל עכבר המספק חשיפה ל-NTM באמצעות מי שתייה, ממעבדת הנאו-טמאיו11, שם התגובה החיסונית לחשיפה זו נחקרה באריכות. שחפת סמויה (TB) היא מצב מחלה נוסף של זיהום מיקובקטריאלי שהיה קשה למודל בבעלי חיים פרה-קליניים. מעבדת קאופמן הייתה חלוצה בדלקות אוזניים תוך עוריות עם M. tuberculosis בעכברים C57BL/612 ו-NOS2-/-13 כדי לחקות זיהום שחפת סמוי, הפעלה מחדש ולאפיין את המנגנונים של גרנולומות היפוקסיות. Nemeth ואחרים מינפו את מודל האוזן התוך-עורית הכלול כדי לחקות חשיפה קודמת ל-M. tuberculosis, תוך אפיון תגובות חיסוניות מובהקות, על מנת לקבוע כיצד זה השפיע על תוצאות האתגר הבאות14. מודל האוזן התוך-עורית דווח בהצלחה באמצעות 10יחידות יוצרות מושבה (CFU) של זני M. tuberculosis H37Rv ו-Erdman, אך עד כה הוא לא נבדק באמצעות מבודדי NTM.

המטרה הכוללת של שיטה זו היא לבסס מודל אתגר אוזניים NTM הניתן לשחזור המגביל את המחלה הנגרמת על ידי נתיבי אתגר אחרים, שניתן לחקור עוד יותר ביחס לתגובה החיסונית לחשיפה. חשיפת עכברי C57BL/6 רגישים למינונים גבוהים של M. avium במי שתייה גורמת למצבים דמויי זיהום יותר מאשר חשיפה11. לכן, הרציונל לפיתוח טכניקה זו כולל הצלחה קודמת בשימוש ב-M. tuberculosis כאורגניזם אתגר לדרמיס האוזן עם מינון אתגר גבוה יחסית 12,13,14. כאן, מטרתנו הייתה להעריך אם ניתן להתאים את המודל בהצלחה לבידוד M. avium במחצית מריכוז החיידקים שדווח בעבר 12,13,14 (10,2 CFU). אנו מצפים שקידום מודלים חדשים של חשיפה ל-NTM, ולא זיהום, יעזור לענות על שאלות ביולוגיות בולטות לגבי השפעה זו על הבריאות ועל דינמיקת הזיהום/חיסון העתידית.

פרוטוקול

נקבות C57BL/6 נרכשו ממעבדת אספקת מודלים מחקריים בגיל 6-7 שבועות. העכברים שוכנו במתקן בעלי חיים ברמת בטיחות ביולוגית 2 (BSL-2) של מכון המחקר לילדים בסיאטל (SCRI) בתנאים נטולי פתוגנים וטופלו בהתאם לפרוטוקולים ניסיוניים שאושרו על ידי הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים (IACUC). כל השיטות בוצעו בהתאם להנחיות ולתקנות הרלוונטיות ביחס לרווחת בעלי חיים. המכון פועל תחת תעודת USDA #91-R-0061 ו-PHS Assurance #A4337-01. פרטי הריאגנטים והציוד ששימשו במחקר מפורטים בטבלת החומרים.

1. הכנת מלאי חיידקים לחיסון

  1. בארון בטיחות ביולוגית התורם לעבודה חיידקית, הסר בקבוקון מלאי של Mycobacterium avium (ATCC 25291) מאחסון של -80 מעלות צלזיוס והפשיר בטמפרטורת החדר.
    הערה: ריכוזי המלאי של M. avium נקבעים מראש, כשיטת עבודה מומלצת עם כל חומרי המלאי, על ידי ציפוי דילולים סדרתיים על לוחות אגר 7H10 וספירת יחידות יוצרות מושבה (CFU).
  2. בעזרת מחט קהה בגודל 26 גרם, השעו מחדש את דגימת המלאי על ידי העברת הנוזל למעלה ולמטה במזרק 1.0 מ"ל פי 10 או יותר כדי ליצור מתלה אחיד.
  3. בדוק את ריכוז M . avium על ידי ציפוי של 100 מיקרוליטר של דילול סדרתי של 1:10 של המתלה על לוחות אגר 7H10. דגרו את הצלחות למשך 3 שבועות בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס וספרו מושבות כדי להבטיח שריכוזי החיסון מדויקים.
  4. התאם את ריכוז M . avium למינון המועדף על ידי דילול הדגימה ב-PBS סטרילי. שומרים בטמפרטורת החדר עד שמוכן לשימוש.
    הערה: בניסוי זה נעשה שימוש ב-102 CFU לכל מנה של 10 מיקרוליטר.

2. הכנה והרדמה של בעלי חיים

  1. לפני מתן הרדמה, הכינו משטח חם, כגון כרית חימום, עליו ניתן לשמור את הכלובים של עכברים מחוסנים במאמץ לווסת את טמפרטורת גופם במהלך ההחלמה.
  2. להזריק קטמין (100 מ"ג/מ"ל) וקסילזין (20 מ"ג/מ"ל) לעכברים דרך המסלול התוך-צפק.
  3. לאחר ההרדמה, בצע צביטה בבוהן כדי לוודא שעכברים מורדמים מספיק למניפולציות בהליך.
  4. יש למרוח את חומר הסיכה לעיניים באופן דו-צדדי.

3. פלטפורמת חיסון והכנת חומרים

  1. השתמש בלוח קצף כדי ליצור מדף שעליו העכבר יכול להתייצב תוך כדי מניפולציה.
    הערה: סרט דו צדדי יעזור להחזיק את האוזן על הפלטפורמה בכיוון שטוח. אסור שהדבק יהיה חזק מדי כדי לשמור על בריאות רקמת האוזן.
  2. סדר זכוכית מגדלת מוארת כדי לראות את הפלטפורמה.
  3. אסוף מזרק סטרילי של המילטון ותכשיר M. avium עובד בקרבת מקום.

4. חיסון דרמיס אוזניים

  1. הנח את העכבר במצב שכיבה על גבי המדף בצורה כזו שניתן יהיה למקם את האוזן על סרט דו צדדי.
  2. השתמש בלחץ עדין כדי לשטח את האוזן על הסרט ולהבטיח שהאוזן לא תזוז.
    הערה: ניתן להשתמש במגבוני אלכוהול על האוזניים לפני ההזרקה כדי לסייע בהגבלת זיהום צולב וזיהום בעור לאחר ההדבקה. עם זאת, זיהומים כאלה לא נצפו במחקרי פיילוט ללא שימוש במגבוני אלכוהול.
  3. הכניסו 10 מיקרוליטר של תכשיר M. avium המכיל 100 CFU לתוך מזרק המילטון הסטרילי.
    הערה: סובב את תרחיף M. avium לפני עריכת נפח של 10 מיקרוליטר כדי להבטיח שהוא הומוגני.
  4. החזק את הפלטפורמה ביד אחת ואת מזרק המילטון ביד השנייה, וודא שהצד המשופע של המחט מופנה כלפי מעלה (איור 1).
  5. מקם את מזרק המילטון מתחת לדרמיס האוזן באמצעות לחץ קל מאוד. ודא שהמחט לא עוברת לגמרי דרך רקמת האוזן הדקה.
  6. לאחר שהמחט נמצאת במקומה, לחץ על בוכנת המזרק בקצב הדרגתי ואיטי.
  7. שימו לב לצבע האוזן במהלך המתן.
    הערה: מתן מוצלח יופיע כגובה אטום במקום ההזרקה, כמו בועה.
  8. לאחר מתן המינון במלואו, בדוק את אוזן העכבר והסרט לאיתור סימני דליפה.
    הערה: אם אכן מתרחשת דליפה, ניתן לתת מינון אבוד משוער לאוזן הנגדית. לכל הפחות, יש לסמן את בעל החיים ולרשום אותו כמי שאולי קיבל מינון נמוך מהיעד.
  9. כאשר המינון מצליח, ודא שהעכבר מוחזר לכלוב הביתי שלו כדי להיחשף למשטח החם תוך כדי מעקב עד שהוא מתעורר בהצלחה מההרדמה.

5. הערכת נטל חיידקים

  1. המתת חסד של בעלי חיים על פי פרוטוקולים שאושרו על ידי הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים.
    1. כאן, המתת חסד מסתיימת במינימום של שתי שיטות לכל קורבן. עבור הליך זה, שתי השיטות שנבחרו הן שימוש בחנק CO2 ופריקת צוואר הרחם.
    2. ראשית, האריכו צינור כדי להוציא גזCO2 לכלוב הביתי של העכברים ותנו את הגז עד שלא יהיו יותר סימני תנועה מהעכברים. היזהר להשתמש בכלוב שלא יאפשר לגז לדלוף החוצה.
    3. לאחר מכן, נקע את חוליות צוואר הרחם באמצעות מניפולציה ידנית.
  2. לנתח את האוזניים מבעלי חיים מאותגרים של M. avium ארבעה שבועות לאחר החשיפה (28 ימים, תואם למחקרים קודמים12). נתח את אוזניהם של 2 עכברים בעזרת כלים סטריליים. הכנס את האוזניים לצינורות חרוטיים המכילים מאגר CFU (PBS + 0.05% Tween80) והשתמש בהומוגנייזר רקמות כדי להומוגניזציה עד שנוצר תרחיף אחיד. אוזניים בלתי מאותגרות מעובדות גם הן ומשמשות כבקרות.
    הערה: ניתן להשתמש בכל נקודות זמן ואיברים מעניינים לאחר החשיפה. לצורך ניסוי זה נאספו גם הריאות, הטחול, בלוטות הלימפה המנקזות ואיברי המוח.
  3. הוסף 100 מיקרוליטר של הומוגנאט ל-700 מיקרוליטר של מאגר CFU בבלוק באר עמוק כדילול של פי 1/8. חזור על פני הבלוק כך שייווצרו מינימום של 5 דילולים סדרתיים. הוסף 50-100 מיקרוליטר של דילולים הומוגניים או סדרתיים מסודרים (דילולים 0 עד 5 משמשים כאן) לשלוש צלחות אגר 7H10, מורחים באופן שווה באמצעות מפזרי T, ודוגרים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם 5% CO2 למשך 2-3 שבועות.
  4. ספרו את היחידות היוצרות מושבה (CFU) והפכו אותן ל-log10 למטרות ניתוח בתוכנת גיליון אלקטרוני.

תוצאות

השתמשנו בפרוטוקול המפורט לעיל כדי לקבוע אם ניתן לבסס מודל אתגר NTM הניתן לשחזור המשתמש בדרמיס האוזן כדרך זיהום או חשיפה. אוזניים נאספו משני בעלי חיים בנקודת זמן של 28 יום לאחר האתגר, הומוגניות ומצופות כמתואר במדיה הסלקטיבית של מיקובקטריה. ראינו כי M. avium החזיק מעמד עד 28 ימים באוזניים שאותגרו תוך עורית והיעדר M. avium באוזן הבלתי מעורערת (איור 2).

בעוד שלא ראינו התפשטות לאוזן הבלתי מאותגרת עד 28 ימים לאחר ההדבקה, אחרים המשתמשים במודל זה של דרמיס אוזניים למודלים של שחפת סמויה הבחינו בהתפשטות לאתרי איברים מרוחקים אחרים14. שיערנו כי מינון נמוך יותר של אתגר ושימוש בבידוד M. avium עשויים להפחית את ההפצה לנקודות זמן מאוחרות יותר שעשויות לשקף טוב יותר חשיפה לעומת זיהום כרוני. לכן, המתת חסד בוצעה בקבוצות של n=5 M. avium מאותגרים בעכברים 28, 56, 90 ו-132 ימים לאחר ההדבקה. האיברים הבאים הומוגניים באותו פרוטוקול המתואר עבור רקמות האוזן: ריאות, טחול, בלוטת לימפה מנקזת (DLN) ומוח. מסלול אתגר זה הביא להתפשטות ספורדית לאורך זמן, כאשר פחות ממחצית מבעלי החיים הראו CFU שניתן לספור באיברים שנבדקו 56 או 90 יום לאחר ההדבקה (טבלה 1). עד 132 ימים לאחר האתגר, לכל העכברים היה M. avium שניתן לזהות בטחול שלהם (n = 5/5 בעלי חיים שהוערכו) אך נראה שהם מכילים חיידקים מינימליים (n = 1/5 ב-DLN) או ללא חיידקים (n = 0/5 בריאות או במוח) באיברים אחרים עד לנקודת זמן זו (טבלה 1).

figure-results-1
איור 1: כיוון של מחט כשהצד המשופע כלפי מעלה. לפני החדרת המחט, הצד המשופע חייב להיות פונה כלפי מעלה כדי לנהל כראוי את החיסון. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.

figure-results-2
איור 2: קולוניזציה של רקמת האוזן על ידי M. avium 28 ימים לאחר האתגר. נקבות עכברי C57BL/6 אותגרו באוזן עם 102 CFU של Mycobacterium avium. האוזן המאותגרת (+) הושוותה לאוזן הבלתי מאותגרת (-) לאחר 28 ימים, n=2 חיות בודדות מניסוי יחיד שהוצגו, כאשר כל חיה בצבע וסמל שונים. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.

שעה (יום)יומן איברים10 יחידות יוצרות מושבה
ריאהטחולנמל התעופה דל.ל.ןמוח
283.08, ND, ND, ND, ND2.81, ND, ND, ND, NDND, ND, ND, ND, ND0.78, 0.90, ND, ND, ND
562.30, ND, ND, ND, ND1.53, 3.43, ND, ND, ND2.78, ND, ND, ND, ND1.20, ND, ND, ND, ND
90ND, ND, ND, ND, ND0.60, 3.35, 3.26, ND, NDND, ND, ND, ND, ND0.60, ND, ND, ND, ND
132ND, ND, ND, ND, ND4.03, 3.58, 3.58, 4.03, 3.692.41, ND, ND, ND, NDND, ND, ND, ND, ND
DLN = בלוטת לימפה מנקזת, ND = לא זוהה

טבלה 1: התפשטות של M. avium מהאוזן לאורך זמן לאחר האתגר. ריאות, טחול, בלוטות לימפה מנקזות (DLN) ומוח נאספו מ-n=5 עכברים לנקודת זמן לאחר האתגר. רקמות הומוגניות צופו והוערכו לצמיחת חיידקים. איבר CFU שהוצג כ-log10 ערכי טרנספורמציה שבהם חיידקים נספרו ולא זוהו (ND) כאשר לא נצפו CFU בשום ריכוז מצופה. נתוני מהלך הזמן מייצגים ניסוי אחד.

דיון

כאן הדגמנו כיצד לאתגר עכברים עם מיקובקטריות במודל אוזן תוך-עורית מוכל. חיוני, בעת ביצוע הליך זה, להקפיד על אמצעי זהירות סטריליים ולהימנע מפציעות דקירות מחט. בשיטת חיסון זו, קריטי שתהיה תחנת התקנה מתאימה ותאורה טובה כדי להבטיח שחלל הדרמיס ממוקד ולא מנוקב לחלוטין דרך האוזן. אם זה יקרה, בהתאם למחקר, ניתן לבצע ניסיון שני באוזן השנייה. אוזניים לא מטופלות באותו עכבר יכולות לשמש גם כשליטה לכל עכבר. שיטה זו צריכה להיות נגישה לחוקרים עם צרכים מינימליים לציוד או זמן. הקדשת עכברים וזמן לאימונים עוזרת לשיעור ההצלחה של החיסון בפרוטוקול. השגיאות הנפוצות ביותר בטכניקה זו הן אי כניסה לחלל התוך עורי עם המזרק (וניקוב דרך האוזן) או לחיצה מהירה מדי על המזרק, מה שגורם לאספקה לא עקבית או להחלקה של המחט מהחלל התוך-עורי. תאורה והגדלה טובים יכולים לעזור במיקום נכון של המחט לחיסון.

אנו ממנפים את המתודולוגיה לתנאים 'דמויי חשיפה' של NTM. הרוב המכריע של M. avium כלול באוזן או ב-DLN. עם זאת, מגבלה של מתודולוגיה זו היא שהתפשטות לאיברים מערכתיים, כלומר הטחול, נצפתה בכל בעלי החיים שהוערכו עד 132 ימים לאחר האתגר. ייתכן שיש סף של חיסון חיידקים שיכול להפחית את כמות או תדירות ההפצה, מה שניתן להשיג באמצעות מחקר טיטרציה. הליך זה ניתן לשינוי הן של האורגניזם, למשל, מינים אחרים של NTM, והן של המינון שנמסר, בהתאם לשאלת המחקר.

התנהגות אנושית (היעדר טיפול מתאים במי שתייה, זיהום, עישון), עלייה במספר האנשים עם הידרדרות בריאותית עקב גיל15 ומחלות נלוות אחרות, היעדר בדיקות אבחון מתאימות ושינויי אקלים16 עשויים לשחק תפקיד בעלייה בשיעורי זיהומי NTM, ומגמה זו צפויה לעלות בעתיד הקרוב. אנו מציעים שמודלים כמו העברת רירית דרך מי שתייה11 או דלקות אוזניים תוך עוריות עם NTM בעכברים מספקים הזדמנות לקבוע איזו השפעה תהיה לחשיפה המוגברת הזו על החיסון ויעילות החיסון לאחר מכן. למרות שאימצנו מתודולוגיה זו של מודל אוזן מוכלת עבור M. avium, אנו מציעים שניתן להשתמש בה בהצלחה עבור מינים אחרים של NTM כטכניקת חשיפה.

גילויים

המחברים מצהירים שאין להם ניגודי אינטרסים.

תודות

המחברים מביעים את תודתם לצוות הוויווריום המסור על טיפולם יוצא הדופן בבעלי החיים לאורך מחקר זה. המחברים רוצים גם להודות למעבדת הנאו-טמאיו באוניברסיטת קולורדו סטייט על שיתוף זן M. avium ששימש במחקר זה. המחברים רוצים להודות לחברי מעבדות Aderem ו-Urdahl במכון המחקר לילדים בסיאטל על ההכשרה במתודולוגיה המקורית. פרויקט זה מומן כולו או בחלקו במימון פדרלי מהמכון הלאומי לאלרגיה ומחלות זיהומיות, המכונים הלאומיים לבריאות, מחלקת הבריאות ושירותי האנוש, תחת חוזה מס' 75N93021C00029 (ל-RNC), ומענקים R01AI125160 ו-R01AI183642 (ל-RNC ו-SLB).

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
0.05% Tween80SigmaP6224
מזרק 1 מ"לפישר15-823-434
7H10 אגר triplatesMoltox21-40S234
26G מחט קההפישרNC0981254
קבינט בטיחות ביולוגיתNuaireNU-543-400
CO2 חממהפישר סיינטיפיק15-103-0513
קלטת דו צדדיתסקוטש3136
המילטון 701N מזרק מיקרוליטרפישר14-824-16
רקמות קשות אומני טיפיםפישר15-340-102
כרית חימוםקנט סיינטיפיקHTP-1500
מחט אינסוליןפישרNC1551333
קטמיןפטרסון וטרינרי07-890-8598
זכוכית מגדלת מוארתBrightechB07MMZ27QK
PBSThermoFisher10010072
הומוגנייזר רקמותOmniTH115
מעמד הומוגנייזר רקמותOmniS1000
קסילזיןפטרסון וטרינרי07-808-1947

מקורות

  1. Abdelaal, H. F. M., et al. Mycobacterium abscessus: It's Complex. Microorganisms. 10 (7), (2022).
  2. Baldwin, S. L., et al. The complexities and challenges of preventing and treating nontuberculous mycobacterial diseases. PLoS Negl Trop Dis. 13 (2), p. e0007083(2019).
  3. Falkinham, J. O. 3rd Environmental sources of nontuberculous mycobacteria. Clin Chest Med. 36 (1), 35-41 (2015).
  4. Honda, J. R. Environmental sources and transmission of nontuberculous mycobacteria. Clin Chest Med. 44 (4), 661-674 (2023).
  5. Pfaller, S., et al. Occurrence revisited: Mycobacterium avium and Mycobacterium intracellulare in potable water in the USA. Appl Microbiol Biotechnol. 106 (7), 2715-2727 (2022).
  6. Mercaldo, R. A., et al. Environmental risk of nontuberculous mycobacterial infection: Strategies for advancing methodology. Tuberculosis (Edinb). 139, 102305(2023).
  7. Marshall, J. E., et al. Nontuberculous mycobacteria testing and culture positivity in the United States. BMC Infect Dis. 24 (1), 288(2024).
  8. Ghasemi, F., et al. Effects of non-tuberculous mycobacteria on BCG vaccine efficacy: A narrative review. J Clin Tuberc Other Mycobact Dis. 36, 00451(2024).
  9. Njagi, L. N., et al. Attenuated tuberculin skin test responses associated with Mycobacterium intracellulare sputum colonization in an adolescent TB prevalence survey in Western Kenya. Tuberculosis (Edinb). 147, 102514(2024).
  10. Larsen, S. E., et al. Subunit vaccine protects against a clinical isolate of Mycobacterium avium in wild type and immunocompromised mouse models. Scientific Reports. 11 (1), 9040-9040 (2021).
  11. Dutt, T. S., et al. Mucosal exposure to non-tuberculous mycobacteria elicits B cell-mediated immunity against pulmonary tuberculosis. Cell Rep. 41 (11), 111783(2022).
  12. Kupz, A., et al. A Mouse Model of Latent Tuberculosis Infection to Study Intervention Strategies to Prevent Reactivation. PLoS One. 11 (7), e0158849(2016).
  13. Reece, S. T., et al. Serine protease activity contributes to control of Mycobacterium tuberculosis in hypoxic lung granulomas in mice. J Clin Invest. 120 (9), 3365-3376 (2010).
  14. Nemeth, J., et al. Contained Mycobacterium tuberculosis infection induces concomitant and heterologous protection. PLoS Pathogens. 16 (7), e1008655(2020).
  15. Jarchow-MacDonald, A., et al. Changing Incidence and Characteristics of Nontuberculous Mycobacterial Infections in Scotland and Comparison With Mycobacterium tuberculosis Complex Incidence (2011 to 2019). Open Forum Infect Dis. 10 (1), ofac665(2023).
  16. Thomson, R. M., et al. Influence of climate variables on the rising incidence of nontuberculous mycobacterial (NTM) infections in Queensland, Australia 2001-2016. Sci Total Environ. 740, 139796(2020).

הדפסות חוזרות והרשאות

גלה מאמרים נוספים

מודל אוזן של עכברמיקובקטריות שאינן שחפתשיטת הזרקה לאוזןניתוח תגובה חיסוניתזריעה בדילול סדרתיהומוגניזציה של רקמותיחידות יוצרות מושבותזיהום מיקובקטריאלי כרוני
חיסון תוך עורי של Mycobacterium avium באוזן העכבר
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.