הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

שיטת צינור צנטריפוגה כפולה פשוטה להשגת פלזמה עשירה בטסיות דם מדם סוסים

2.4K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/67985

⸱

15 באוגוסט 2025

 ,  , 
1Grupo de Investigación Terapia Regenerativa, Departamento de Salud Animal, Universidad de Caldas, 2Grupo de Investigación Patología Clínica Veterinaria, Departamento de Salud Animal, Universidad de Caldas, 3Grupo de Investigación DICOVI, Departamento de Diseño, Universidad de Caldas

במאמר זה

סיכום

פלזמה עשירה בטסיות דם (PRP) משמשת לטיפול בהפרעות שרירים ושלד בסוסים. טכניקות שונות מניבות PRP עם ריכוזי טסיות דם ולויקוציטים משתנים. מאמר זה מתאר שיטה להשגת PRP מדם סוסים.

תקציר

פלזמה עשירה בטסיות דם (PRP) נמצאת בשימוש נרחב כטיפול שגרתי במצבי שרירים ושלד כרוניים בסוסים, כגון דלקת מפרקים ניוונית, גידים ודסמופתיות. יעילות זו נובעת מהריכוז הגבוה של גורמי גדילה וציטוקינים אנטי דלקתיים המשתחררים עם הפעלת חומר אורתוביולוגי זה, בין אם מופעל באופן אנדוגני או אקסוגני. למרות הפופולריות הגוברת שלו, יש היעדר בולט של סרטוני הדרכה המדגימים את הטכניקות להשגת PRP בסוסים.

מחקר זה בוחן שיטת צינור צנטריפוגה כפולה להשגת PRP בסוסים. דם מלא משישה סוסים נאסף בצינורות נתרן ציטראט וצנטריפוגה פעמיים ב-120 × גרם למשך 5 דקות ו-240 × גרם למשך 5 דקות. ריכוז הטסיות הממוצע ל-PRP היה 360.95 ±-56.31 טסיות דם (PLT) ×-103/μL, בעוד שריכוז הלויקוציטים הממוצע היה 3.05 ±-1.53 תאים ×-103/μL. ספירת הטסיות ב-PRP הייתה גבוהה פי 2.41 מאשר בדם מלא, בעוד שריכוז הלויקוציטים ב-PRP היה נמוך פי 0.44. יעילות האיסוף של PLT ב-PRP הייתה 17%, בעוד שיעילות האיסוף של לויקוציטים ב-PRP הייתה 3.1%. הריכוזים הממוצעים של גורם הגדילה המשתנה בטא 1 וגורם הגדילה שמקורו בטסיות הדם BB ב-PRP היו 2601.82 (רווח בר-סמך 95%): 2358.88-2844.76) pg/mL ו-1208.05 (95% CI: 1051.09-1365.02) pg/mL, בהתאמה. תוצאות אלו מצביעות על כך שניתן להשיג PRP ביעילות ובשחזור באמצעות שיטה פשוטה וחסכונית המתאימה לשימוש על ידי מתרגלי סוסים.

מבוא

פלזמה עשירה בטסיות דם (PRP) היא מוצר אורתוביולוגי המשמש בדרך כלל לטיפול במצבי שרירים ושלד כרוניים של סוסים כגון גידים, דסמופתיה, דלקת מפרקים ניוונית ולמיניטיס 1,2,3. זה יעיל גם בטיפול בפצעים בגפיים ומחלות פני העין 4,5. הרציונל לשימוש בו מבוסס על הריכוזים הגבוהים של גורמי גדילה (GFs) המשתחררים בעיקר על ידי טסיות6. לויקוציטים תורמים גם על ידי שחרור ציטוקינים רגולטוריים ואנטי דלקתיים7. GFs כגון גורם גדילה טרנספורמטיבי בטא 1 (TGF-β1) וגורם גדילה שמקורו בטסיות BB (PDGF-BB) מפעילים השפעות אנבוליות, שגשוגיות, אנגיוגניות ואנטי דלקתיות חזקות8. עם הפעלה אקסוגנית או אנדוגנית, PRP מתפלמר לג'ל עשיר בטסיות, מה שמקל על סחר בתאים, עיגון והתמיינות 6,9. באופן זה, ה- PRP משמש כפיגום חי מורכב ולא רק כמיכל ל- GFs וציטוקינים10.

מספר מערכות מסווגות מוצרי PRP המשמשים הן בבני אדם והן בסוסים 6,11,12. אחת המערכות הפשוטות והנפוצות ביותר מסווגת את רכיבי ההמו הללו על סמך ריכוז הלויקוציטים11,12. על פי סיווג זה, מוצרי PRP עם ריכוזי לויקוציטים נמוכים עד זניחים וריכוזי טסיות נמוכים עד בינוניים - יחסית לרמות בדם המלא של הסוס - מכונים PRP טהור (P-PRP)6,11,12. לעומת זאת, מוצרי PRP עם ריכוזי לויקוציטים גבוהים לזיהוי וריכוזי טסיות בינוניים עד גבוהים מכונים פלזמה עשירה בלויקוציטים וטסיות דם (L-PRP)6,11,12.

מוצרי P-PRP מתקבלים בדרך כלל על ידי צנטריפוגה מצינור לצינור שבה נאסף דם מלא מסוסים בצינורות המכילים נוגדי קרישה כגון נתרן ציטראט וציטראט, פוספט ודקסטרוז13. הדם עובר צנטריפוגה פעמיים כדי להפריד טסיות דם ממרכיבים אחרים14. לעומת זאת, מוצרי L-PRP מיוצרים בעיקר באמצעות ערכות חצי אוטומטיות המיועדות לדם אנושי, שחלקן אומתו לשימוש בסוסים 6,15. ערכות חצי אוטומטיות אלה דורשות בדרך כלל צנטריפוגות מיוחדות ומגיעות בעלות גבוהה יותר16, כמו גם חששות פוטנציאליים לגבי טיפול אספטי, מה שעלול לסבך את השימוש המעשי בהן במסגרות קליניות17. בנוסף, ערכות אלו עלולות לגרום לריכוז לא רצוי של עודף לויקוציטים או כדוריות דם אדומות, מה שעלול להזיק במצבים קליניים מסוימים18. לדוגמה, ספירת לויקוציטים מוגברת עלולה לעורר דלקת מוגזמת, ושפע יתר של כדוריות דם אדומות עלול להפריע לתהליך הריפוי או להוביל לסיבוכים כגון גירוי או דחייה של רקמות15; עם זאת, שיטה נפוצה לייצור L-PRP של סוסים כרוכה בתהליך כבידה שאינו דורש ציוד מיוחד19.

לאור מגבלות אלו, רצויות מאוד חלופות פשוטות וחסכוניות יותר להכנת PRP. מחקרי מבחנה שונים, מודלים ניסיוניים של מחלות שרירים ושלד ותצפיות בסוסים הראו כי גם למוצרי P-PRP וגם למוצרי L-PRP יש השפעות מועילות על תאים ורקמות מטופלים 1,2,20. מוצרים אלה מקדמים ריפוי, מפחיתים דלקת ומשפרים את התחדשות הרקמות6. עם זאת, ההחלטה להשתמש ב-P-PRP או L-PRP לטיפול בסוס יכולה להיות מושפעת מגורמים טכניים וכלכליים.

לדברי המחברים, אין מחקרים שפורסמו המתארים ומדגימים באופן מלא הליך צעד אחר צעד מתוקף נרחב להשגת מוצר PRP מדם סוסים. מאמר זה מתאר את ההליכים הדרושים לאיסוף בטוח של דם מלא מסוסים ולייצר מוצר PRP המתאים לשימוש ניסיוני וקליני כאחד. זה כולל גם אימות של אורתוביולוגי זה על ידי כימות טסיות דם ולויקוציטים וקביעת ריכוז TGF-β1 ו-PDGF-BB, שהם חלק בלתי נפרד מההשפעות הטיפוליות שלו. על ידי סטנדרטיזציה של התהליך והדגמת יעילות המוצר, מחקר זה מבקש לספק שיטה אמינה ונגישה לעוסקים בסוסים להכין PRP בביטחון ובדייקנות.

למרות ששיטת הצנטריפוגה הכפולה לייצור PRP של סוסים תוארה לראשונה על ידי Argüelles et al.14 בשנת 2006, זו הפעם הראשונה שהפרוטוקול הוצג במלואו בסרטון. סרטון זה נועד לשמש משאב מעשי לעוסקים בסוסים המתמודדים עם מגבלות טכניות ואילוצי תקציב המונעים מהם להשתמש בערכות PRP מתוחכמות ויקרות יותר לסוסים עם הפרעות שרירים ושלד.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

מחקר זה נערך בהתאם לפרוטוקולים הפנימיים להכנה ושימוש ב-PRP בסוסים בבית החולים הווטרינרי של אוניברסיטת קלדס, מניזאלס, קולומביה. מחקר זה לא דרש אישור של הוועדה הפנימית לטיפול בבעלי חיים מכיוון שהנתונים התקבלו מסוסים צולעים שטופלו קלינית במוסד שלנו. נתונים משישה סוסים קריאוליים קולומביאניים, שלוש סוסות ושלושה סוסים, עם גיל ממוצע של 7.4 (± 2.6) שנים שימשו לפיתוח פרוטוקול זה. בעלי הסוסים עודכנו על אופי המחקר וחתמו על טופס הסכמה מדעת. כל הסוסים שנכללו במחקר היו בריאים מבחינה קלינית למעט בעיית השרירים והשלד שטופלה. נכללו רק בעלי חיים עם ספירת טסיות בסיס גדולה מ-100 ×-103/מ"ל של דם מלא. חשוב לציין שסוסים עם ריכוזי טסיות נמוכים יותר עשויים להיחשב טרומבוציטופניים14. בנוסף, בעלי חיים אלה הפגינו ספירת דם תקינה, פרמטרים ביוכימיים קליניים של כבד וכליות וערכי ניתוח שתן בטווח הנורמלי עבור מיני הסוסים.

1. הגבלת סוסים וחיטוי עור

  1. למען בטיחותם של הסוס והווטרינר, רסנו את הסוס (Eqqus caballus) בצורה מאובטחת במצנח בדיקה קלינית או עם רסן (איור 1A), כתלות בהתנהגות החיה. לאחר מכן, גזוז אזור שיער בגודל 5 ס"מ על 5 ס"מ עם מכונת גילוח חשמלית באמצע השליש של צד אחד של הצוואר, מעל וריד הצוואר.
    הערה: חלק מהבעלים מעדיפים שהסוס לא ייחתך. מחקר מצביע על כך שגזירת שיער באתר ניקור הוורידים אינה הכרחית כדי למנוע זיהום חיידקי של P-PRP21. לכן, הליך זה נתון לשיקול דעתו של הווטרינר.
  2. בצע תכשיר עור לא סטרילי ראשוני על האזור הקצוץ של וריד הצוואר למשך 10 ס"מ לפחות באמצעות גזה לא סטרילית וכפפות למשך כ-3 דקות. מרחו כמה חתיכות גזה ספוגות בקצף חיטוי בתבנית מעגלית (איור 1B).
  3. הכן את אתר ניקור הוורידים באופן אספטי באמצעות כפפות סטריליות וגזה ספוגה בחומר חיטוי. שפשפו את העור באזור הצוואר בתנועות סיבוביות למשך כ-5 דקות. נקו את האזור עם גזה סטרילית ספוגה באלכוהול אתילי 95%.

2. איסוף דם אספטי

  1. מניחים 16 צינורות נתרן ציטראט בנפח 4.5 מ"ל, שנוקו בעבר בגזה ספוגה באלכוהול אתילי 95%, ברשת פלסטיק נקייה. הספגו את מכסי הגומי של צינורות הוואקום ב-95% אלכוהול אתילי, במיוחד בשקע לצימוד המחט.
    הערה: באופן כללי, נדרשים שמונה צינורות נתרן ציטראט של 4.5 מ"ל כדי להשיג 2.5 מ"ל PRP. מספר הצינורות המשמשים במקרה מסוים יהיה תלוי ברקמות הרכות או במפרק הספציפי המטופל.
  2. הכניסו באופן סטרילי מחט פרפר לתוך אתר הצוואר המחוטא (איור 2A) והצמידו צינורות נתרן ציטראט בנפח 4.5 מ"ל למחזיק (איור 2B). מנערים בעדינות את הצינורות ומניחים אותם ברשת פלסטיק.
    הערה: צינור נתרן ציטראט בנפח 4.5 מ"ל משמש להמוגרפיה אוטומטית ולהכנת פלזמה לאחר צנטריפוגה ספין קשה. פלזמה זו משמשת לאחר מכן כבקרה שלילית להשוואת גורם גדילה והעשרת ציטוקינים עם PRP.

3. רכש פלזמה עשירה בטסיות דם

  1. הנח את צינורות הנתרן ציטראט בנפח 4.5 מ"ל המכילים דם מלא לתוך רוטור מתנדנד בעל ארבעה מקומות בזווית של 90 מעלות בצנטריפוגה ספסל. צנטריפוגה את הצינורות בחום של 120 × גרם למשך 5 דקות בטמפרטורת החדר. לאחר צנטריפוגה, מקם את הצינורות של 4.5 מ"ל המכילים דם ציטראט ושני צינורות רגילים נוספים של 10 מ"ל במתלה והנח את המתלה בצד היד הלא דומיננטי של המפעיל בתוך מכסה זרימה למינרי מסוג II מעל וילון סטרילי ואטום.
    הערה: מחקר אחד מצביע על כך שקולט אדים מסוג II אינו חיוני למניעת זיהום חיידקי במהלך רכישת PRP21. במקום זאת, ניתן להכין PRP בחדר נקי ללא זרמי אוויר ואבק. בתרחיש זה, ניתן להניח את מתלה צינור הדם על שולחן מכוסה בווילון סטרילי ואטום.
  2. צנטריפוגה ראשונה: לבישת מסכת פנים וכפפות סטריליות, הנח מזרק לואר סטרילי של 10 מ"ל יחד עם מחט סטרילית (21 G 5/8 אינץ') בצד היד הדומיננטי בחלק הפנימי של מכסה המנוע הלמינר.
    הערה: מרגע זה ואילך, היד הדומיננטית עם הכפפה תמיד נשארת סטרילית, בעוד שיש להסיר את מכסי הגומי של צינורות הנתרן ציטראט באמצעות היד הלא דומיננטית עם הכפפה.
  3. הכניסו את המחט הסטרילית לכל צינור דם מצויט צנטריפוגה 3 מ"מ מעל מעיל האפי (איור 3A) ושאבו בעדינות 50% מחלק הפלזמה, תוך הימנעות ממערבולות נוזלים ושאיבת דם. לאחר שנשאבים 10 מ"ל פלזמה מארבעה צינורות של 4.5 מ"ל, מחלקים אותה בצינורות רגילים סטריליים של 5-10 מ"ל (איור 3B).
    הערה: הסר את מכסי הגומי של צינורות אלה ביד הלא דומיננטית והנח אותם מעל אתר סטרילי של הווילון או החזק אותם כדי למנוע זיהום חיידקי.
  4. צנטריפוגה שנייה: סגור שוב את הצינורות עם פקקי הגומי והנח אותם במצב מאוזן ברוטור מתנדנד בעל ארבעה מקומות בזווית של 90 מעלות בצנטריפוגה העליונה וסובב את הצינורות הללו ב -240 × גרם למשך 5 דקות בטמפרטורת החדר.
    הערה: הבחירה בכוח הצנטריפוגה היחסי (RCF או g) מבוססת על מחקר מכונן14 שתיאר לראשונה שיטה זו להשגת PRP מדם סוסים. יתר על כן, שיטה זו הוערכה לשחזור על ידי מחברים אחרים22.
  5. הנח את הצינורות במתלה ומקם אותם בצד הלא דומיננטי בתוך מכסה הזרימה הלמינרי מסוג II, על גבי הווילון הסטרילי והאטום שהונח בעבר.
  6. השתמשו ביד הלא דומיננטית כדי להסיר את מכסי הגומי וביד הדומיננטית הסטרילית כדי לשאוב לאט את 75% הראשונים של הפלזמה באמצעות מחט עמוד שדרה 18 G ו-90 מ"מ שמחוברת למזרק סטרילי של 10 מ"ל (איור 3C). השליכו מזרק זה או שמרו אותו לשימושים ניסיוניים או קליניים אחרים מכיוון שהוא מכיל פלזמה דלה בטסיות דם (PPP). לאחר מכן, חבר את מחט עמוד השדרה הסטרילית ששימשה בעבר למזרק סטרילי של 5 או 10 מ"ל כדי לשאוב את הפלזמה שנותרה (25%) מהצינור הסטרילי הרגיל של 5-10 מ"ל. המקטע הזה ידוע בשם P-PRP (איור 3D).
    הערה: בתנאים קליניים וניסיוניים מסוימים, כמות של 0.5-1 מ"ל PRP משמשת להמוגרפיה אוטומטית ואחריה ניתוח גורם גדילה (TGF-β1 ו-PDGF-BB) על ידי בדיקת אימונוסורבנט מקושר לאנזים. מדידת מתווכים אלה עשויה להתבצע 3 שעות לאחר הפעלת P-PRP עם מלחי סידן או טרומבין23 או לאחר גרימת נזק לתאים על ידי שינוי טמפרטורה או תוספת של חומרי ניקוי לא יוניים24.
  7. עטפו את מזרק הלואר הסטרילי המכיל PRP בווילון סטרילי קטן ואטום עם מחט או מכסה סטרילי מחוברים כדי למנוע זיהום חיידקי של המוצר האורתוביולוגי (איור 4A).
    הערה: יש להכין את המבנה האנטומי של הסוס המיועד לטיפול להזרקה אספטית כמתואר בסעיף 1 לפרוטוקול זה. יש לרסן את הסוס ולהרגיע אותו כראוי כדי למזער את אי הנוחות ולהבטיח את שלומם של הסוס והווטרינר. יש לטפל במוצר ה-PRP באמצעות כפפות ומחטים סטריליות וניתן להפעיל אותו או לא על סמך העדפת המטפל (איור 4B).

4. ניתוח סטטיסטי

  1. אסוף נתונים על ספירת טסיות הלויקוציטים בדם מלא וב-PRP. הערכת נתוני נורמליות באמצעות מבחן קולמוגורוב-סמירנוב. אם הנתונים מופצים בדרך כלל (P > 0.05), השווה ונתח את נתוני התא באמצעות מבחן t. אם נתוני ריכוז טסיות הדם והלויקוציטים אינם מופצים בדרך כלל (P < 0.05), השווה ונתח נתונים באמצעות בדיקת Wilcoxon.
  2. קבע את ריכוז יעילות הטסיות והלויקוציטים ב-P-PRP לפי הנוסחאות הבאות25:
    יעילות איסוף טסיות = figure-protocol-1 × 100
    יעילות איסוף לויקוציטים = figure-protocol-2 × 100
  3. אסוף נתונים מריכוזי TGF-β1 ו-PDGF-BB בסופרנטנטים PRP בפלזמה (בקרה שלילית) (לאחר 3 שעות של הפעלה עם סידן גלוקונאט), וליזטים של PRP המתקבלים על ידי הוספת תמיסת דטרגנט לא יונית.
  4. השתמש במודל מעורב ליניארי כללי כדי להשוות את ריכוזי גורמי הגדילה בין פלזמה, סופרנטנטים PRP וליזאט PRP. במקרה של הבדלים סטטיסטיים משמעותיים, יש ליישם את מבחן הפוסט-הוק של Tukey.
  5. שקול את p < ערכי 0.05 מובהקים סטטיסטית עבור כל הבדיקות.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

ספירת הטסיות הממוצעת (טסיות דם × 103/μL) הייתה גבוהה משמעותית ב-PRP מאשר בדם מלא (p < 0.001). לעומת זאת, ריכוז הלויקוציטים הממוצע (לויקוציטים ×10 3/μL) ב-PRP היה נמוך משמעותית מזה שבדם מלא (p < 0.001) (טבלה 1). באופן ספציפי, ספירת הטסיות ב-PRP הייתה גבוהה פי 2.41 מאשר בדם מלא, בעוד שריכוז הלויקוציטים ב-PRP היה נמוך פי 0.44. יעילות האיסוף עבור PLT ב-PRP הייתה 17%, בעוד שיעילות איסוף הלויקוציטים ב-PRP הייתה 3.1%.

ריכוזי TGF-β1 היו שונים באו...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

השימוש ב-PRP ברפואה אנושית ווטרינרית לטיפול בהפרעות שרירים ושלד כרוניות גדל ב-1,8,26,27. עם זאת, ביקורת מרכזית על יישומי PRP במסגרות ניסיוניות וקליניות היא היעדר נתונים בסיסיים על הטכניקות והפרוטוקולים המשמשים להכנת רכיבי המו אלה28. בנוסף, אין מספיק מידע על הרכב התאים - בפרט, ריכוזי טסיות הדם והלויקוציטים - ותכולת גורמי הגדילה של מוצר ה-...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

למחברים אין ניגודי אינטרסים לחשוף.

תודות

אנו מודים למשנה למחקר ולפוסטגראדוס של אוניברסיטת קלדס, מניזאלס, קולומביה על תמיכתם הכספית בפרסום מאמר זה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
10 מ"ל צינורות איסוף דם ורידי רגיל BD Vacutainer, פרנקלין לייקס, ניו ג'רזי, ארה"במספר סימוכין למוצר 366430זו רק דוגמה, ניתן להשתמש בצינורות של מותגים אחרים.
4.5 מ"ל צינורות נתרן ציטראט (105 M/3. 2%) BD Vacutainer, פרנקלין לייקס, ניו ג'רזי, ארה"ב107451זו רק דוגמה, ניתן להשתמש בצינורות של מותגים אחרים.
צנטריפוגת ספסלRotofix 32A, Hettich GmbH, טוטלינגן, גרמניהניתן להשתמש בצנטריפוגות ספסל אחרות.
מחט פרפר (21 גרם ופעמים; 0.75 אינץ') עם 12 אינץ'. צינורות ומחזיק מחובר מראש סט איסוף דם Safety-Lok, שואב אבק BD, פרנקלין לייקס, ניו ג'רזי, ארה"בסימוכין 367296זו רק דוגמה, ניתן להשתמש במחטי פרפר של מותגים אחרים.
תמיסת קצף כלורהקסידין בריכוז של 2.3-4% המותג או השמות המסחריים של מוצרים אלה עשויים להשתנות ממדינה למדינה.
קולט אדים למינרי Class IIתרמו פישר סיינטיפיק, וולת'אם, מסצ'וסטס, ארה"בניתן להשתמש בקולטי אדים למינאריים אחרים מסוג II
קוראת ELISAתרמו פישר סיינטיפיק, וולת'אם, מסצ'וסטס, ארה"ב
אלכוהול אתילי ב-95%המותג או השמות המסחריים של מוצרים אלה עשויים להשתנות ממדינה למדינה.
PDGF-BB דואוסט אנושי ELISAמו"פ D Systems, Inc, מקינלי פלייס, מינסוטה, ארה"בDY220
TGF-בטא אנושי 1 DouSet ELISAמו"פ D Systems, Inc, מקינלי פלייס, מינסוטה, ארה"בDY240
תמיסת קצף יוד פובידון ב-4-10% המותג או השמות המסחריים של מוצרים אלה עשויים להשתנות ממדינה למדינה.
תוכנת SPSS 25.0IBM Corp, SPSS, ניו יורק, ארה"ב
מזרקי לואר סטריליים בנפחים שונים Discardit Syringe, BD Vacutainer, פרנקלין לייקס, ניו ג'רזי, ארה"בזו רק דוגמה, ניתן להשתמש במזרקים של מותגים אחרים.
מחט עמוד שדרה סטרילית (18 גרם ופעמים; 90 מ"מ) BD Quincke Spinel Needle, פרנקלין לייקס, ניו ג'רזי, ארה"בזו רק דוגמה, ניתן להשתמש במחטי עמוד שדרה של מותגים אחרים.

מקורות

  1. Pérez Fraile, A., González-Cubero, E., Martínez-Flórez, S., Olivera, E. R., Villar-Suárez, V. Regenerative medicine applied to musculoskeletal diseases in equines: a systematic review. Vet Sci. 10 (12), 666(2023).
  2. Boone, L., Peroni, J. Introduction to equine biologic and regenerative therapies. Vet Clin North Am Equine Pract. 39 (3), 419-427 (2023).
  3. Carmona, J. U., Gómez, W. A., López, C. Could platelet-rich plasma be a clinical treatment for horses with laminitis. J Equine Vet Sci. 61, 46-57 (2018).
  4. Gilger, B. C. Use of biologics and stem cells in equine ophthalmology. Vet Clin North Am Equine Pract. 39 (3), 541-552 (2023).
  5. Pereira, R., et al. Evaluation of three methods of platelet-rich plasma for treatment of equine distal limb skin wounds. J Equine Vet Sci. 72, 1-7 (2019).
  6. Camargo Garbin, L., Lopez, C., Carmona, J. U. A critical overview of the use of platelet-rich plasma in equine medicine over the last decade. Front Vet Sci. 8, 641818(2021).
  7. Jiménez-Aristizabal, R. F., et al. Long-term cytokine and growth factor release from equine platelet-rich fibrin clots obtained with two different centrifugation protocols. Cytokine. 97, 149-155 (2017).
  8. McCarrel, T. M. Equine platelet-rich plasma. Vet Clin North Am Equine Pract. 39 (3), 429-442 (2023).
  9. Garbin, L. C., Olver, C. S. Platelet-rich products and their application to osteoarthritis. J Equine Vet Sci. 86, 102820(2020).
  10. Anitua, E., et al. Advances in platelet rich plasma-derived extracellular vesicles for regenerative medicine: a systematic-narrative review. Int J Mol Sci. 24 (17), 13043(2023).
  11. Dohan Ehrenfest, D. M., Rasmusson, L., Albrektsson, T. Classification of platelet concentrates: from pure platelet-rich plasma (P-PRP) to leucocyte- and platelet-rich fibrin (L-PRF). Trends Biotechnol. 27 (3), 158-167 (2009).
  12. Dohan Ehrenfest, D. M., et al. Classification of platelet concentrates (platelet-rich plasma-PRP, platelet-rich fibrin-PRF) for topical and infiltrative use in orthopedic and sports medicine: current consensus, clinical implications and perspectives. Muscles Ligaments Tendons J. 4 (1), 3-9 (2014).
  13. Giraldo, C. E., Álvarez, M. E., Carmona, J. U. Effects of sodium citrate and acid citrate dextrose solutions on cell counts and growth factor release from equine pure-platelet rich plasma and pure-platelet rich gel. BMC Vet Res. 11, 60(2015).
  14. Argüelles, D., et al. Evaluation of single and double centrifugation tube methods for concentrating equine platelets. Res Vet Sci. 81 (2), 237-245 (2006).
  15. Carmona, J. U., López, C., Sandoval, J. A. Review of the currently available systems to obtain platelet related products to treat equine musculoskeletal injuries. Recent Patents on Regenerative Medicine. 3 (2), 148-159 (2013).
  16. Jildeh, T. R., Su, C. A., Vopat, M. L., Brown, J. R., Huard, J. A review of commercially available point-of-care devices to concentrate platelet-rich plasma. Cureus. 14 (8), e28498(2022).
  17. Arita, A., Tobita, M. Adverse events related to platelet-rich plasma therapy and future issues to be resolved. Regen Ther. 26, 496-501 (2024).
  18. Sutter, W. W., Kaneps, A. J., Bertone, A. L. Comparison of hematologic values and transforming growth factor-beta and insulin-like growth factor concentrations in platelet concentrates obtained by use of buffy coat and apheresis methods from equine blood. Am J Vet Res. 65 (7), 924-930 (2004).
  19. Mirza, M. H., et al. Gait changes vary among horses with naturally occurring osteoarthritis following intra-articular administration of autologous platelet-rich plasma. Front Vet Sci. 3, 29(2016).
  20. Peng, C., Yang, L., Labens, R., Gao, Y., Zhu, Y., Li, J. A systematic review and meta-analysis of the efficacy of platelet-rich plasma products for treatment of equine joint disease. Equine Vet J. 56 (5), 858-869 (2024).
  21. Alvarez, M. E., Giraldo, C. E., Carmona, J. U. Monitoring bacterial contamination in equine platelet concentrates obtained by the tube method in a clean laboratory environment under three different technical conditions. Equine Vet J. 42 (1), 63-67 (2010).
  22. Pereira, R. C. dF., et al. Avaliação de sete protocolos para obtenção de plasma rico em plaquetas na espécie equina. Ciência Rural. (6), (2013).
  23. Giraldo, C. E., Álvarez, M. E., Carmona, J. U. Influence of calcium salts and bovine thrombin on growth factor release from equine platelet-rich gel supernatants. Vet Comp Orthop Traumatol. 30 (1), 1-7 (2017).
  24. Carmona, J. U., López, C., Ceballos-Márquez, A. Temporal release and denature of several mediators in pure platelet-rich plasma and temperature-induced platelet lysates derived from a similar bovine platelet concentrate. Vet Med Int. 2022, 2609508(2022).
  25. Weibrich, G., Kleis, W. K., Hitzler, W. E., Hafner, G. Comparison of the platelet concentrate collection system with the plasma-rich-in-growth-factors kit to produce platelet-rich plasma: a technical report. Int J Oral Maxillofac Implants. 20 (1), 118-123 (2005).
  26. Cecerska-Heryć, E., Goszka, M., Serwin, N., et al. Applications of the regenerative capacity of platelets in modern medicine. Cytokine Growth Factor Rev. 64, 84-94 (2022).
  27. Bahadir, B., Sarikaya, B. Platelet-rich plasma in the management of rotator cuff tendinopathy. Jt Dis Relat Surg. 35 (2), 462-467 (2024).
  28. Harrison, P., Alsousou, J. Studies on platelet rich plasma - new editorial policy for "platelets". Platelets. 31 (3), 281-282 (2020).
  29. Chahla, J., et al. A call for standardization in platelet-rich plasma preparation protocols and composition reporting: a systematic review of the clinical orthopaedic literature. J Bone Joint Surg Am. 99 (20), 1769-1779 (2017).
  30. Ríos, D. L., López, C., Álvarez, M. E., Samudio, I. J., Carmona, J. U. Effects over time of two platelet gel supernatants on growth factor, cytokine and hyaluronan concentrations in normal synovial membrane explants challenged with lipopolysaccharide. BMC Musculoskelet Disord. 16, 153(2015).
  31. Carmona, J. U., et al. In vitro effects of platelet-rich gel supernatants on histology and chondrocyte apoptosis scores, hyaluronan release and gene expression of equine cartilage explants challenged with lipopolysaccharide. BMC Vet Res. 12 (1), 135(2016).
  32. Castillo-Franz, C., López, C., Carmona, J. U. Evaluation of the catabolic and anabolic gene expression effects and histology changes induced by platelet-rich gel supernatants in equine suspensory ligament explants challenged with lipopolysaccharide. MLTJ-Muscles Ligaments and Tendons. 11 (1), 1-14 (2021).
  33. Argüelles, D., Carmona, J. U., Climent, F., Muñoz, E., Prades, M. Autologous platelet concentrates as a treatment for musculoskeletal lesions in five horses. Vet Rec. 162 (7), 208-211 (2008).
  34. Carmona, J. U., Argüelles, D., Climent, F., Prades, M. Autologous platelet concentrates as a treatment of horses with osteoarthritis: a preliminary pilot clinical study. J Equine Vet Sci. 27 (4), 167-170 (2007).
  35. Dejnek, M., et al. Content of blood cell components, inflammatory cytokines and growth factors in autologous platelet-rich plasma obtained by various methods. World J Orthop. 13 (6), 587-602 (2022).
  36. Giraldo, C. E., et al. Effects of the breed, sex and age on cellular content and growth factor release from equine pure-platelet rich plasma and pure-platelet rich gel. BMC Vet Res. 9, 29(2013).
  37. Zimmermann, R., et al. Sample preparation technique and white cell content influence the detectable levels of growth factors in platelet concentrates. Vox Sang. 85 (4), 283-289 (2003).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

PRPh t
שיטת צינור צנטריפוגה כפולה פשוטה להשגת פלזמה עשירה בטסיות דם מדם סוסים
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.