כאן, מוצג פרוטוקול להשתלת שתל כלי דם מהונדס רקמות בעורק הצוואר של העכבר בטכניקת השרוול, המספק מודל בעל חיים מתאים לחקירת מנגנוני התחדשות רקמות כלי הדם.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
השתלת שתל כלי דם מהונדס רקמות בעורק הצוואר של העכבר בטכניקת שרוול
במאמר זה
סיכום
תקציר
פיתוח שתלי כלי דם בקוטר קטן היה מאמץ עולמי, עם קבוצות מחקר רבות התורמות לתחום זה. ניסויים בבעלי חיים ממלאים תפקיד מרכזי בהערכת היעילות והבטיחות של שתלים בכלי דם, במיוחד בהיעדר יישומים קליניים. בהשוואה למודלים חלופיים של בעלי חיים, מודל השתלת העכברים מציע מספר יתרונות, כולל רקע גנטי מוגדר היטב, שיטה בוגרת לבניית מודל מחלה והליך כירורגי פשוט. בהתבסס על יתרונות אלה, המחקר הנוכחי המציא טכניקת שרוול פשוטה להשתלת שתלי כלי דם מהונדסים רקמות בעורק הצוואר של העכבר. טכניקה זו החלה בייצור שתלי כלי דם בקוטר קטן של פוליקפרולקטון (PCL) באמצעות ספינינג אלקטרוסטטי, ולאחר מכן זריעה של מקרופאגים על השתלים באמצעות ספיחת זלוף. לאחר מכן, שתלי כלי הדם המהונדסים ברקמות תאיות הושתלו בעורק הצוואר של העכבר בטכניקת השרוול כדי להעריך את הסבלנות ויכולת ההתחדשות. לאחר 30 יום של השתלה in vivo , הסבלנות של כלי הדם נמצאה משביעת רצון, עם עדות להתחדשות רקמות ניאו והיווצרות שכבת אנדותל בתוך לומן השתלים. כל הנתונים נותחו באמצעות תוכנות סטטיסטיות וגרפיות. מחקר זה ביסס בהצלחה מודל השתלת עורק הצוואר של עכבר שניתן להשתמש בו כדי לחקור את המקורות התאיים של התחדשות כלי הדם ואת מנגנוני הפעולה של חומרים פעילים. יתר על כן, הוא מספק תמיכה תיאורטית לפיתוח שתלי כלי דם חדשים בקוטר קטן.
מבוא
השכיחות והתמותה של מחלות לב וכלי דם עולות ברחבי העולם, ומייצגות דאגה משמעותית לבריאות הציבור1. השתלת מעקף כלי דם היא התערבות יעילה למחלת לב כלילית חמורה ומחלת כלי דם היקפיים2. השימוש בשתלי כלי דם מלאכותיים בקוטר העולה על 6 מ"מ תועד היטב במסגרות קליניות. לעומת זאת, בעלי קוטר מתחת ל -6 מ"מ נוטים לפקקת והיפרפלזיה אינטימית, מה שעלול להוביל לסיכון ניכר לרסטנוזיס3. למרות התקדמות משמעותית במחקר ופיתוח של שתלי כלי דם בקוטר קטן בשנים האחרונות, עם מספר מוצרים המתקרבים ליישום קליני, נותרו אתגרים מרובים 4,5. אלה כוללים שיעור סבלנות נמוך יחסית לטווח ארוך, התחדשות כלי דם מוגבלת והבנה לא מספקת של מנגנון ההתחדשות.
הערכה פרה-קלינית של שתלי כלי דם חדשים בקוטר קטן מסתמכת על השתלה in vivo במודלים שונים של בעלי חיים. המודלים הנפוצים ביותר כוללים את עורק הצוואר של הכבשים, עורק הירך של הכלב, עורק הצוואר של הארנב ודגמי השתלת עורק הבטן של חולדות 6,7,8,9. ניתן להעריך את הסבלנות של שתלי כלי דם בבעלי חיים בינוניים עד גדולים, כגון כבשים, חזירים וכלבים. עם זאת, מחקרים אלה כרוכים בעלויות משמעותיות בשל המומחיות והציוד הנדרשים. בנוסף, המורכבות הטכנית שלהם מציבה אתגר ליישום. לעומת זאת, במודלים של בעלי חיים קטנים כמו ארנבות וחולדות חסרים מינים טרנסגניים מבוססים היטב עם רקע גנטי מוגדר בבירור, מה שמהווה מכשול משמעותי בחקר מנגנוני התחדשות כלי הדם.
בהשוואה למודלים של בעלי חיים שהוזכרו לעיל, מודל העכבר מציע הליך כירורגי פשוט יחסית, מתודולוגיה מבוססת היטב ליצירת עכברים מהונדסים גנטית ורקע גנטי מוגדר בבירור. עם זאת, הקוטר הקטן של כלי הדם של העכברים הופך את האנסטומוזה מקצה לקצה בהשתלת כלי דם למורכבת מבחינה טכנית, הדורשת מומחיות משמעותית ומניבה אחוזי הצלחה נמוכים יחסית. כדי להפחית את מורכבות ההליך ולשפר את אחוזי ההצלחה של השתלת שתל כלי דם, המחקר הנוכחי השתמש בטכניקת השרוול במודל השתלת עורק הצוואר של עכבר.
לאחר השתלת in vivo , שתלים וסקולריים יכולים לגייס תאים אנדוגניים התורמים להתחדשות רקמות כלי הדם. נוכחותם של תאים אלה מקלה על אנדותליזציה והתחדשות של שכבת השריר החלק של השתלים. 10. עם זאת, מקור וסוג התאים המעורבים בהתחדשות רקמות כלי הדם נותרו לא ברורים, ותיאוריות מתחרות מרובות נחקרות11. בין אלה, המחקר התמקד בתפקידים של תאי דלקת ותאי גזע. ברויאר ועמיתיו זרעו מונוציטים שמקורם במח עצם אנושי (hBMCs) על שתלים וסקולריים ומצאו כי התאים הזרעים גייסו תאי מארח לדופן השתל באמצעות שחרור חלבון כימואטרקנטי מונוציטי-1 (MCP-1), ובכך קידמו את התחדשות רקמת כלי הדם12. במחקר זה, הוצעה שיטת זריעת תאים יעילה לספיחת זלוף ושימשה בהצלחה לזריעה של מקרופאגים על גבי שתלי כלי דם בקוטר קטן של פוליקפרולקטון (PCL). לאחר ההשתלה, תאים אלה הפגינו כדאיות מתמשכת.
מאמר זה מפרט את המתודולוגיה להכנת שתלי כלי דם מהונדסי רקמות ואת הליך השתלת עורק הצוואר בעכברים בטכניקת השרוול. התהליך מתחיל בייצור שתלי כלי דם בקוטר קטן PCL עם פרמטרים מוגדרים באמצעות ספינינג אלקטרוסטטי. לאחר מכן, שתלים הנחשבים מתאימים להשתלה עוברים בדיקות מכניות. לאחר מכן נזרעים מקרופאגים על שתלי כלי הדם בשיטת ספיחת הזלוף. לבסוף, שתלי כלי דם זרעי מקרופאגים מושתלים בעורק הצוואר של העכבר בטכניקת השרוול, ותכונות הסבלנות וההתחדשות מנותחות לאחר חודש של השתלת in vivo .
לטכניקה זו יש פוטנציאל לשפר את היעילות ושיעורי ההצלחה של השתלת כלי דם במודלים של עכברים. יתר על כן, ניתן להשתמש במודל כדי לחקור את המנגנונים העומדים בבסיס מקורות תאים, גנים מרכזיים וגורמים פעילים בהתחדשות כלי הדם, ולספק תמיכה תיאורטית ומתודולוגית לשינוי תפקודי ופיתוח של שתלי כלי דם חדשים בקוטר קטן.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול
כל ההליכים בבעלי חיים אושרו על ידי הוועדה האתית לניסויים בבעלי חיים של המכון לרפואת קרינה, האקדמיה הסינית למדעי הרפואה, ועמדו בהנחיות לטיפול ושימוש בחיות מעבדה. במחקר זה נעשה שימוש בעכברים זכרים C57BL/6, בני 6-8 שבועות, עם משקל גוף של 25-30 גרם. פרטים על הריאגנטים והציוד המשמשים במחקר זה מפורטים בטבלת החומרים.
1. ייצור שתלים וסקולריים בקוטר קטן
הערה: לייצר שתלי כלי דם PCL בקוטר קטן בטכניקת אלקטרו-ספינינג13.
- הכן תמיסות PCL ב-10%, 15% ו-20% (w/v) ב-hexafluoroisopropanol (HFIP) בטמפרטורת החדר (RT) למשך 12 שעות.
- טען את תמיסות ה-PCL למזרק של 10 מ"ל ומקם את המזרק עם מחט נירוסטה 21 גרם.
- הניחו ציר מפלדת טונגסטן (קוטר 0.7 מ"מ, אורך 20 ס"מ) על מכשיר האיסוף.
- לייצר תשע קבוצות של שתלי כלי דם PCL בטכניקת אלקטרו-ספינינג. חבר ספק כוח בעל מתח גבוה למחט. מקם מוט פלדת טונגסטן בקוטר פנימי של 0.7 מ"מ במרחק קבוע מול המחט כמכשיר קבלה.
הערה: התיאור של קבוצות השתלות כלי הדם מופיע בטבלה 1, והפרמטרים של שתלי כלי הדם מפורטים בטבלה 2. - הכפף את שתלי כלי הדם המפוברקים לתהליך פינוי. הכניסו את השתלים לכלי הדם לתנור לייבוש ואקום למשך 72 שעות כדי להסיר שאריות ממסים.
- עקר את השתלים על ידי טבילתם באלכוהול רפואי למשך 30 דקות וחשיפתם לאור UV למשך הלילה.
- התבוננו במורפולוגיה המיקרוסקופית של שתלי כלי הדם באמצעות מיקרוסקופ אלקטרונים סורק (SEM). חבר את שתלי כלי הדם לשלב דגימת ה-SEM עם דבק מוליך והנח אותם במכשיר התזת הזהב לציפוי.
- התבונן במבנה ובמורפולוגיה של הסיבים של שתלי כלי הדם באמצעות SEM במתח מאיץ של 15 קילו וולט. מדוד את קוטר הסיבים וגודל הנקבוביות מתמונות SEM (n = 5) באמצעות תוכנת ImageJ.
- להעריך את התכונות המכניות (תכונות מתיחה ואלסטיות) של השתלים בכלי הדם באמצעות מכונת בדיקת מתיחה. מהדקים את הקצוות העליונים והתחתונים של שתל כלי הדם בעזרת מהדקים קבועים המרוחקים 1 ס"מ זה מזה.
- מותחים את שתל כלי הדם בקצב של 10 מ"מ לדקה עד לקרע. אסוף את עקומת המתח-מתח ממכונת בדיקת המתיחה.
- חשב פרמטרים מכניים, כולל עומס מרבי (2-15 N), מתח בהפסקה (5-30 MPa), מתח בשבירה (200%-1500%) ומודול אלסטי (1-20 MPa)14.
- לבצע ניתוחים סטטיסטיים באמצעות תוכנות סטטיסטיות וגרפיות. בטא נתונים כממוצע ± סטיית תקן. לנתח ולהשוות הבדלים חד משתנים בין מספר קבוצות באמצעות מבחן הפוסט הוק של טוקי ב-ANOVA חד-כיווני. *P < 0.05, **P < 0.01, ***P < 0.001.
2. זריעת מקרופאגים על גבי שתלים וסקולריים
הערה: ודא שכל הפתרונות והחומרים סטריליים. בצע את כל הפעולות בחדר תרבית התאים.
- תרבית RAW264.7 (מקרופאג מונוציטים של עכבר) בצלוחיות בתנאים דביקים (איור 1A). הכן את מדיום תרבית התאים באמצעות מדיום הנשר המותאם (DMEM) של Dulbecco בתוספת 1% פניצילין-סטרפטומיצין ו-10% סרום בקר עוברי. מניחים את הצלוחיות באינקובטור של 37 מעלות צלזיוס המכיל 5% פחמן דו חמצני.
- אוספים מקרופאגים באמצעות מגרד תאים. השליכו את המדיום בעזרת פיפטה של 1 מ"ל ושטפו את התאים עם PBS.
- מוסיפים 2 מ"ל מדיום טרי לבקבוק התרבות ומגרדים בעדינות את פני השטח בעזרת מגרד תאים. העבירו את התאים שנאספו לצינור ולצנטריפוגה בטמפרטורה של 1,000 x גרם למשך 5 דקות בטמפרטורת החדר. השעו מחדש 5 × 106 תאים ב -100 מיקרוליטר של מדיום שלם.
- הנח שתל כלי דם PCL (באורך 1 ס"מ) בצינור של 15 מ"ל מלא ב-DMEM וצנטריפוגה ב-4,000 x גרם למשך 5 דקות. חזור על תהליך זה מספר פעמים עד שהשתל שוקע לתחתית הצינור, מה שמבטיח חדירה מלאה של החומר באמצעות DMEM.
- מכינים צלחת פטרי בגודל 10 ס"מ מרופדת בשכבת נייר פילטר. הנח את שתל כלי הדם PCL הרטוב על נייר הסינון וגלגל אותו כדי להסיר עודפי מדיום.
- קח 10 מיקרוליטר מתרחיף התא באמצעות פיפטה של 10 מיקרוליטר והזריק אותו לקצה אחד של שתל כלי הדם. סובב את שתל כלי הדם מעל נייר הסינון כדי להקל על פיזור אחיד של המתלה. יש להזריק כל קצה חמש פעמים ובסך הכל עשר זריקות (איור 1B,C).
- הנח את שתל כלי הדם העמוס במקרופאגים בצלחת של 24 בארות המכילה 1 מ"ל של מדיום שלם ודגר למשך שעתיים בחממת תרבית תאים לפני ההשתלה.
- קבע את התפלגות התאים בתוך דופן השתל. הטמע את שתל כלי הדם הטעון במקרופאגים בתרכובת טומוגרפיה קוהרנטית אופטית (OCT) להקפאה. צביעת גרעיני תאים עם 4',6-דיאמידינו-2-פנילינדול (DAPI) והתבוננות תחת מיקרוסקופ פלואורסצנטי.
3. מודל השתלת עורק הצוואר של עכבר
הערה: שמור על אזור כירורגי סטרילי להליכים בבעלי חיים. יש לעקר את כל המכשירים והכלים החד-פעמיים לפני הניתוח.
- בחר שלושה עכברי C57BL/6 זכרים בריאים, כל אחד במשקל 25-30 גרם. צמו את העכברים יום לפני הניתוח. השתלת שתל כלי דם אחד בכל בעל חיים, בסך הכל שלושה שתלים.
- בנו אזיקים מצינור ניילון (איור 2A) והציגו את התרשים הסכמטי של טכניקת שרוול כלי הדם באיור 2B.
- להרדים את העכברים על ידי הזרקה תוך-צפקית של נתרן פנטוברביטל בריכוז של 50 מ"ג/ק"ג (בהתאם לפרוטוקולים שאושרו על ידי המוסד). אשר הרדמה יעילה על ידי הקפדה על הרפיית שרירים ואפילו נשימה. מרחו משחת עיניים וזלין על העיניים כדי למנוע יובש בזמן ההרדמה.
- מקם את העכבר במצב שכיבה על שולחן הניתוחים והסר את שיער הצוואר. עקר את אזור הניתוח ביודופור. כסו את האזור הלא ניתוחי בגזה סטרילית כדי לשמור על סביבה סטרילית (איור 3A).
- השתמש במספריים עיניים כדי לבצע חתך בקו האמצע (אורך 1.5-2 ס"מ) מהלסת התחתונה לעצם החזה. הרם את בלוטות הרוק השמאליות וכרת את שריר הקלידומסטואיד השמאלי כדי להגדיל את שדה הראייה הכירורגי. חשפו את עורק הצוואר המשותף השמאלי באמצעות מיקרו פינצטה (איור 3B).
- בודדו את עורק הצוואר השמאלי באמצעות מיקרו-מלקחיים (איור 3C).
- קשרו את עורק הצוואר בשני מיקומים בחלק האמצעי באמצעות תפר 9-0. חצו את העורק בין שתי הקשרים באמצעות מספריים. העבירו את השרוול דרך העורקים בכל קצה ואבטחו את העורק ואת השרוול יחד באמצעות קליפסים עורקיים (איור 3D).
- סובב את העורק כלפי חוץ כדי לכסות את גוף השרוול ולהדק אותו לשרוול באמצעות תפר 9-0 עם מיקרו-מלקחיים (איור 3E).
- השתל שתל כלי דם בין שני הקצוות של עורק הצוואר על ידי החלקת קצות השתל מעל שרוול העורק ואבטחתם עם תפרים 9-0 (איור 3F).
הערה: הנתונים הממדיים של השרוול, עורק הצוואר ושתל כלי הדם מוצגים בטבלה 3. למרות שקוטר השתל והשרוול תואמים מאוד לאלה של עורקי הצוואר של העכבר, קיימת אי התאמה בין קוטר הלומן האנסטומוטי לקוטר השתל. קוטר הלומן האנטומוטי מחושב על ידי הפחתת פי שניים מעובי דופן עורק הצוואר (0.1 מ"מ) מהקוטר הפנימי של השרוול (0.5 מ"מ), וכתוצאה מכך קוטר לומן של 0.3 מ"מ. לשתל כלי הדם קוטר פנימי של 0.7 מ"מ, מה שמוביל לאי התאמה של כ -2.3 פעמים (0.7 מ"מ / 0.3 מ"מ = 2.3). - הסר את תפסי העורקים בשני הקצוות והשקה את מקום ההשתלה במי מלח. העריכו את הסבלנות של שתל כלי הדם על ידי התבוננות בפעימה העורקית הדיסטלית (איור 3G).
- מקם מחדש את בלוטת הרוק השמאלית וסגור את אתר הניתוח באמצעות 6-0 תפרים (איור 3H).
4. טיפול וניתוח לאחר ההליך
- העבירו את העכבר לאינקובטור של 37 מעלות צלזיוס ועקבו באופן רציף אחר הסימנים החיוניים שלו עד שיחזור להכרה.
- יש להזריק 5 מ"ג/ק"ג קרבינול לשיכוך כאבים לאחר הניתוח.
- עקוב אחר העכבר במהלך תקופת ההתאוששות ואל תחזיר אותו לדיור קבוצתי עד שהוא התאושש לחלוטין.
- להרדים את העכברים חודש לאחר ההשתלה ולקצור את דגימות השתל של כלי הדם לניתוח היסטולוגי9.
- בצע המתת חסד באמצעות חנק CO2 ואחריו פריקת צוואר הרחם בהתאם להנחיות אתיות.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תוצאות
שתלים וסקולריים בקוטר קטן עם פרמטרים שונים הוכנו בהצלחה באמצעות אלקטרו-ספינינג. תמונות SEM חשפו כי הסיבים היו מפוזרים באופן אחיד והציגו סידור לא סדיר בתוך דופן השתל, עם נוכחות של מבני נקבוביות (איור 4). ככל שריכוז ה-PCL גדל, גם קוטר הסיבים וגם גודל הנקבוביות גדלו. ערכים ספציפיים עבור כל קבוצת השתלות כלי דם מוצגים בטבלה 2. תוצאות הבדיקות המכניות הראו כי כל השתלים בכלי הדם עומדים בתקנים המכניים הנדרשים. העומס והמתח המקסימליים בעת השבירה גדלו עם ריכוזי PCL גבוהים יותר ...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
דיון
השימוש בטכניקת השרוול להשתלת שתלי כלי דם מהונדסים רקמות בעורק הצוואר של העכבר מייצג התקדמות משמעותית במחקר הלב וכלי הדם15. השלבים הקריטיים של טכניקה זו כוללים זריעת תאים והשתלת שתלים. מחקר זה השתמש בגישת ספיחת זלוף כדי לשפר את צפיפות הזריעה של מקרופאגים כדי לטפל בבעיות הקשורות לזריעת תאים לא אחידה וכדאיות תאים נמוכה. שיטה זו אפשרה למקרופאגים לחדור לדופן השתל של כלי הדם ולהפיץ אותו באופן שווה.
בכל הנוגע להשתלת כלי דם, טכניקת השרוול, בניג...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
גילויים
למחברים אין אינטרסים כלכליים מנוגדים.
תודות
המימון למחקר זה ניתן על ידי פרויקטים של הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (מס' 32101098, 32071356 ו-82272158) וקרן החדשנות CAMS למדעי הרפואה (מס' 2022-I2M-1-023).
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
חומרים
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| 1% פניצילין-סטרפטומיצין | Solarbio | P1400 | |
| 10% סרום בקר עוברי | Gibco | A5256701 | |
| 4% paraformaldehyde | Solarbio | P1110 | |
| 4',6-Diamidino-2-Phenylindole (DAPI) | SouthernBiotech | 0100-20 | |
| אלכוהול | טיאנג'ין כימיקלים Reaggent Company | 1083 | |
| נוגדן נגד עכבר CD31 ראשוני BD | Bioscience | 553370 | |
| קליפים עורקיים | RWD מדעי החיים | R31005-06 | |
| C57BL/6 עכברים | בייג'ינג מעבדת נהר חיוני חברת | ||
| מדיום הנשר השונה של Dulbecco (DMEM) | Gibco | 11966025 | |
| מכונת ספינינג אלקטרוסטטית | Yunfan Technology | DP30 | |
| עז נגד חולדות IgG (Alexa Fluor 555) | Invitrogen | A-21434 | |
| המטוקסילין ואאוזין (H& ה) | Solarbio | G1120 | |
| Hexafluoroisopropanol (HFIP) | McClean | H811026 | |
| יודופור | LIRCON | V273068 | |
| Microscissors | World Precision Instruments | 14124 | |
| מיקרוטוויזטורים | מכשירי דיוק עולמיים | 500338 | |
| סרום עיזים רגיל | Boster | AR0009 | |
| תמיסת מלח רגילה | Cisen חברת תרופות | H20113369 | |
| צינור ניילון לשרוול | Portex | ||
| תרכובת טמפרטורת חיתוך אופטימלית (OCT) | Sakara | 4583 | |
| Pentobarbital נתרן | Sigma | P3761 | |
| פוספט חוצץ מלח (PBS) | Solarbio | P1003 | |
| Poly(ε- כדורי קפרולקטון) (PCL) (Mn = 80,000) | סיגמא | 704067 | |
| RAW264.7 מקרופאגים | ביוטכנולוגיה | ||
| מיקרוסקופ אלקטרונים סורק (SEM) | Zeiss | PHENOM-XL-G2 | |
| תפרים כירורגיים 6-0 | מפעל מיקרו-מכשירים של Ningbo Chenghe | 220919 | |
| תפרים כירורגיים 9-0 | מפעל מיקרו-מכשירים Ningbo Chenghe | 221006 | |
| מזרק | צ'אנגצ'יאנג מכשור רפואי | 0197 | |
| מכונת בדיקת מתיחה | Instron | WDW-5D |
מקורות
- Adhikary, D., Barman, S., Ranjan, R., Stone, H. A systematic review of major cardiovascular risk factors: A growing global health concern. Cureus. 14 (10), e30119(2022).
- Alexander, J. H., Smith, P. K. Coronary-artery bypass grafting. N Engl J Med. 374 (20), 1954-1964 (2016).
- Jeong, Y., Yao, Y., Yim, E. K. F. Current understanding of intimal hyperplasia and effect of compliance in synthetic small diameter vascular grafts. Biomater Sci. 8 (16), 4383-4395 (2020).
- Lawson, J. H., et al. Bioengineered human acellular vessels for dialysis access in patients with end-stage renal disease: Two phase 2 single-arm trials. Lancet. 387 (10032), 2026-2034 (2016).
- Kirkton, R. D., et al. Bioengineered human acellular vessels recellularize and evolve into living blood vessels after human implantation. Sci Transl Med. 11 (485), eaau6934(2019).
- Wang, C., Li, Z., Zhang, L., Sun, W., Zhou, J. Long-term results of triple-layered small diameter vascular grafts in sheep carotid arteries. Med Eng Phys. 85, 1-6 (2020).
- Tanaka, T., et al. Evaluation of small-diameter silk vascular grafts implanted in dogs. JTCVS Open. 6, 148-156 (2021).
- Jin, X., et al. Preparation of small-diameter tissue-engineered vascular grafts electrospun from heparin end-capped PCL and evaluation in a rabbit carotid artery replacement model. Macromol Biosci. 19 (8), e1900114(2019).
- Xiao, Y., et al. Fabrication of small-diameter in situ tissue engineered vascular grafts with core/shell fibrous structure and a one-year evaluation via rat abdominal vessel replacement model. Biomater Adv. 165, 214018(2024).
- Wei, Y., Wang, F., Guo, Z., Zhao, Q. Tissue-engineered vascular grafts and regeneration mechanisms. J Mol Cell Cardiol. 165, 40-53 (2022).
- Cleary, M. A., et al. Vascular tissue engineering: The next generation. Trends Mol Med. 18 (7), 394-404 (2012).
- Roh, J. D., et al. Tissue-engineered vascular grafts transform into mature blood vessels via an inflammation-mediated process of vascular remodeling. Proc Natl Acad Sci U S A. 107 (10), 4669-4674 (2010).
- Wang, Z., et al. The effect of thick fibers and large pores of electrospun poly(ε-caprolactone) vascular grafts on macrophage polarization and arterial regeneration. Biomaterials. 35 (22), 5700-5710 (2014).
- Wu, Y., et al. Peptide-tethered vascular grafts enable blood vessel regeneration via endogenous cell recruitment and neovascularization. Compos B Eng. 252, 110504(2023).
- Hu, Y., Xu, Q. Vessel graft atherosclerosis in murine models. Curr Drug Targets. 9 (3), 239-250 (2008).
- Qin, K., et al. Implantation of electrospun vascular grafts with optimized structure in a rat model. J Vis Exp. (136), e57340(2018).
- Geelhoed, W. J., et al. A novel method for engineering autologous non-thrombogenic in situ tissue-engineered blood vessels for arteriovenous grafting. Biomaterials. 229, 119577(2020).
- Wu, P., et al. Construction of vascular graft with circumferentially oriented microchannels for improving artery regeneration. Biomaterials. 242, 119922(2020).
- Vasquez, E. C., Peotta, V. A., Gava, A. L., Pereira, T. M., Meyrelles, S. S. Cardiac and vascular phenotypes in the apolipoprotein e-deficient mouse. J Biomed Sci. 19 (1), 22(2012).
- Garcia, V., Sessa, W. C. Endothelial nos: Perspective and recent developments. Br J Pharmacol. 176 (2), 189-196 (2019).
- He, L., et al. Enhancing the precision of genetic lineage tracing using dual recombinases. Nat Med. 23 (12), 1488-1498 (2017).
- Wang, F., et al. Nitric oxide improves regeneration and prevents calcification in bio-hybrid vascular grafts via regulation of vascular stem/progenitor cells. Cell Rep. 39 (12), 110981(2022).
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
הדפסות חוזרות והרשאות
