כאן, אנו מציגים פרוטוקול שיכול להפוך רקמת שומן אוטולוגית לחומרים מרכיבי שומן שונים בעלי תכונות ותפקודים פיזיקוכימיים שונים.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר שיטה
כאן, אנו מציגים פרוטוקול שיכול להפוך רקמת שומן אוטולוגית לחומרים מרכיבי שומן שונים בעלי תכונות ותפקודים פיזיקוכימיים שונים.
השתלת רקמת שומן אוטולוגית מסורתית משמשת בדרך כלל להגדלת נפח והתחדשות רקמות. עם זאת, התכונות הפיזיקליות והביולוגיות האחידות של שתלי שומן מובילות לרוב לביצועים לא אופטימליים בתרחישים מגוונים של מטופלים ודרישות מרובות פנים. בהרחבה על היסודות של השתלת שומן אוטולוגית, אנו מציגים גישה חלוצית הנקראת השתלת רכיבי שומן אוטולוגיים. תפיסה חדשנית זו משלבת פרוטוקול שתוכנן בקפידה שמטרתו להמיר רקמת שומן אוטולוגית למערך מגוון של רכיבי שומן, שכל אחד מהם מאופיין בתכונות פיזיקוכימיות ייחודיות המותאמות ליישומים ספציפיים בהקשרים קליניים מגוונים. באמצעות סדרה של שיטות פיזיקליות, ניתן להפוך את רקמת השומן לקומפלקס מטריצת שומן (AMC) המספק תמיכה קשיחה מספקת, שומן בצפיפות גבוהה (HDF) למילוי נוסף, ג'ל Stromal Vascular Fraction (SVF) להזרקות קטנות ו/או מדויקות, ושבר קולגן שומני (ACF) לקמטים עדינים ו/או צרכי הצערת פנים. לרכיבי השומן המובהקים הללו יש מאפיינים אינהרנטיים המתאימים לאסטרטגיות השתלה מדויקות וממוקדות, הנותנות מענה לדרישות הניואנסים של צרכי המטופל האישיים. פרוטוקול הפיצול החדשני של רקמת השומן מראה פוטנציאל גדול במהפכה בהשתלת רקמת שומן. הוא מציע פרספקטיבה ומתודולוגיה חדשה להשתלה מעודנת ומותאמת יותר.
השתלת רקמת שומן אוטולוגית היא טכניקה בשימוש נרחב לשיפור נפח והתחדשות רקמות, המונעת על ידי התקדמות בהכנת אתר תורם, מיצוי שומן, עיבוד והשתלה 1,2,3,4. עם זאת, התכונות הפיזיקליות והביולוגיות האחידות של שתלי שומן מסורתיים מגבילות לעתים קרובות את יעילותן במתן מענה לצרכים קליניים מגוונים5. כדי להתגבר על מגבלות אלה, צוות המחקר שלנו פיתח פרוטוקול חדשני לפיצול רקמת שומן, ההופך שומן אוטולוגי לרכיבים מיוחדים בעלי תכונות ותפקודים פיזיקוכימיים מובחנים.
המטרה העיקרית של הפרוטוקול היא לפרק רקמת שומן אוטולוגית לרכיבים מיוחדים - קומפלקס מטריצת שומן (AMC), ג'ל שבר כלי דם סטרומלי (SVF) ושבר קולגן שומני (ACF), כל אחד מהם נועד להתמודד עם אתגרים קליניים ספציפיים. על ידי מתן רכיבים בעלי תכונות ייחודיות, כגון קשיחות משופרת, צפיפות תאים גבוהה ותכשירים עשירים בקולגן, הפרוטוקול מאפשר אסטרטגיות השתלה מדויקות וממוקדות 6,7,8,9,10,11.
השתלת שומן מסורתית, למרות שהיא יעילה להגדלת נפח, לרוב לא מצליחה לעמוד בדרישות הניואנסים של תרחישים קליניים מורכבים. ספיגת השומן הבלתי צפויה שלו מובילה לשיקום נפח לא יציב. יתרה מכך, בשל התכונות הפיזיקליות והביולוגיות האחידות של שתלי שומן מסורתיים, הם אינם יכולים לספק מילוי ממוקד לאזורים עם דרישות השתלה ספציפיות, כגון תמיכה מבנית, ביצוע הזרקות מדויקות לשטח קטן והשגת גירוי קולגן ממוקד. בעיות אלו מחייבות לעתים קרובות ניתוחים מרובים, ובכך מגבירות את הכאב והנטל הכלכלי של המטופלים 1,2,5. פרוטוקול פיצול זה מטפל במגבלות אלו על ידי העשרת רקמת השומן באופן ספציפי בתוכן בעל ערך מיוחד מרקמת השומן המסורתית. באמצעות תהליך זה, אנו יוצרים רכיבי רקמת שומן בעלי תכונות מותאמות אישית, ובכך מציעים לרופאים ערכת כלים רב-תכליתית לטיפול מותאם אישית. בהשוואה לחומרי מילוי סינתטיים או השתלת שומן מסורתית, הגישה משתמשת ברקמות אוטולוגיות, מבטלת את הסיכון לדחייה חיסונית ומבטיחה תאימות ביולוגית3. בנוסף, תהליך הפיצול יוצר רכיבים בעלי תכונות ייחודיות, כגון AMC, המספק תמיכה מבנית וכולל קצב ספיגה נמוך; SVF-gel, המספק זריקות מדויקות ומאופיין בצפיפות גבוהה של תאי שבר כלי דם סטרומליים; ו-ACF, פיגום חלבון קולגן המסוגל לשחרור מבוקר של גורמי שומן, המראה פוטנציאל ליישומים קליניים בהצערת העור 7,9,11. גישה זו גם מפחיתה את הצורך בפרוצדורות חוזרות על ידי שיפור שימור השתלים ושביעות רצון המטופלים10,12.
הרעיון של פיצול רקמות ביולוגיות כדי לייעל את התוצאות הטיפוליות מבוסס היטב, כפי שניתן לראות בהפרדת הדם לפלזמה, כדוריות דם אדומות וטסיות דם ליישומים רפואיים ממוקדים. בשנים האחרונות, המחקר והיישומים הקליניים של רכיבי רקמת השומן מתקדמים בהדרגה 13,14,15,16,17,18. פרוטוקול פיצול שומן זה מתבסס על עיקרון זה, ומבודד רכיבים בעלי תכונות ייחודיות לשימוש קליני מותאם אישית. רופאים יכולים לקבוע את ההתאמה של שיטה זו על ידי התחשבות בצרכים האנטומיים של המטופל, התוצאות הרצויות (למשל, הגדלת נפח, תמיכה מבנית או הצערת העור) והציוד הזמין. פרוטוקול זה יעיל במיוחד למקרים הדורשים בקרה מדויקת על תכונות השתל, כגון הצערת פנים, תיקון צלקות או הליכי שחזור מורכבים 7,10,12.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
מחקר זה אושר על ידי מועצת הביקורת האתית בבית החולים Nanfang, גואנגג'ואו, סין. רקמת השומן נאספה מתורמים בריאים שנתנו הסכמה מדעת בכתב להשתתף במחקר. כל הניסויים בבעלי חיים אושרו על ידי הוועדה המוסדית לטיפול ושימוש בבעלי חיים של בית החולים נאנפאנג ובוצעו בהתאם להנחיות המועצה הלאומית לבריאות ומחקר רפואי (סין).
1. הכנת שומן
2. מיצוי רכיבים
3. בדיקת מרכיבי שומן
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
באמצעות פרוצדורות מכניות שונות שבוצעו במהלך התהליך הכירורגי, הפכנו בהצלחה רקמת שומן לרכיבי שומן מובהקים בעלי מאפיינים שונים. הם, ברצף, ה-AMC שמספק תמיכה חזקה בשפע (איור 1A), ה-HDF למילוי נוסף (איור 1B), ה-SVF-gel להזרקות מדויקות באזורים קטנים (איור 1C), וה-ACF לטיפול בקמטים עדינים או בצורכי שיקום פנים (איור 1D). המאפיינים והיעילות של החומרים המרכיבים את השומן AMC, SVF-gal ו-ACF נבדקו ביסודיות.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
פרוטוקול פיצול רקמת שומן זה כולל מספר שלבים קריטיים המבטיחים בידוד מוצלח של רכיבים מיוחדים. ראשית, הצנטריפוגה של רקמת השומן שנקטפה מפרידה אותה לשומן בצפיפות גבוהה (HDF) ושומן בצפיפות נמוכה (LDF), כל אחד עם הרכבים מובהקים של מטריצה תאית וחוץ-תאית (ECM)23,24. HDF, עשיר בתאי שומן ברי קיימא ותאי שבר כלי דם סטרומלי (SVF), מעובד עוד יותר כדי להשיג את קומפלקס מטריצת השומן (AMC), המספק תמיכה מבנית בשל תכולת הקולגן הגבוהה שלו
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
המחברים מצהירים שאין להם ניגוד אינטרסים.
עבודה זו נתמכה על ידי הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (מענקים 81801932, 81901976, 81971852, 81772101 ו-81901975).
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| 0.001% אפינפרין | סיגמא-אולדריץ' | E4375 | |
| 0.06% לידוקאין | סיגמא-אולדריץ' | L5647 | |
| 3 מ"מ Multiport Cannola | Tulip Medical Products, סן דייגו, קליפורניה, ארה"ב | / | |
| 50 מ"ל צינורות צנטריפוגה | קורנינג | 430829 | |
| BOSE ElectroForce מכשיר לבדיקת עומס | Bose Corporation | / | |
| קולגנאז | וורת'ינגטון ביוכימי | LS004176 | |
| נקבה לנקבה Luer-Lok Connector | BD Biosciences | 309628 | |
| מכשיר סינון עם שרוול ומסננות | בהתאמה אישית (שנחאי Tiangong Instruments Co., Ltd.) | / | |
| Gauze | Medline Industries | MDS093944 | |
| ערכת צביעה המטוקסילין/אאוזין ערכת צביעה | סיגמא-אולדריץ' | HT110116 | |
| Masson's Trichrome | ' | HT15 | |
| עכברים עירומים | Southern Mdical | / | |
| מלח פוספט-חוצץ (PBS) | Thermo Fisher Scientific | ||
| מסך מסנן נירוסטה עגול עגול 10010023 (0.15 מ"מ) | שנחאי Tiangong מכשירים ושות', בע"מ | / | |
| מסך מסנן נירוסטה עגול (0.25 מ"מ) | שנחאי Tiangong מכשירים ושות', בע"מ | / | |
| מעוקר 100 רשת תיק סינון | שנחאי Tiangong מכשירים ושות', בע"מ | / | |
| שבר כלי דם סטרומלי (SVF)-מחלץ ג'ל | שנחאי Tiangong מכשירים ושות', בע"מ | / | |
| Trypsin | Thermo Fisher Scientific | 25200056 | |
| ערכת ניתוח כתמים מערביים | Bio-Rad | 1705061 |
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.