הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

ב Vivo מיקרוסקופיה קונפוקלית: נוהל הפעלה סטנדרטי לזיהוי קרדית דמודקס בשולי העפעפיים

1.5K צפיות

⸱

DOI:

10.3791/68534

⸱

3 ביולי 2025

 ,  , 
1National Clinical Research Center for Ocular Diseases, Eye Hospital, Wenzhou Medical University, 2Eye Hospital of Wenzhou Medical University at Hangzhou

במאמר זה

סיכום

מיקרוסקופיה קונפוקלית in vivo היא טכניקת הדמיה מבטיחה ברזולוציה גבוהה. אנו מציגים את ההליך הבא לרופאים לזיהוי דמודקס בשולי העפעף in vivo.

תקציר

התפשטות קרדית דמודקס עלולה לגרום לדלקת בשולי העפעפיים, ודמודקס בלפריטיס עלולה לגרום לסדרה של מצבים עיניים במקרים קליניים. רופאים רבים מאבחנים נגיעות עיניים של קרדית דמודקס באמצעות אפילציה של ריסים ותצפית על ריסים במיקרוסקופ אור במבחנה. עם זאת, נוכחות של קרדית שיורית לאחר הסרת ריסים והכאב הקשור להליך הם מגבלות של טיפול קליני סטנדרטי.

מיקרוסקופיה קונפוקלית in vivo (IVCM) היא טכניקת הדמיה לא פולשנית המאפשרת לרופאים לצפות בקרדית דמודקס בשולי העפעף בפירוט ללא אפילציה. טכניקה זו מאפשרת ניתוח ללא כאבים שניתן להשלים תוך <30 דקות. למרות תשומת הלב הגוברת המוקדשת לבדיקה זו, היא עשויה להיות בלתי נגישה לרופאי עיניים רבים ללא ניסיון רב. מאמר זה מציג נוהל פעולה סטנדרטי להדמיה של קרדית דמודקס בשולי העפעפיים עם IVCM כדי לקדם אימוץ מוגבר של שיטה זו בעבודה קלינית.

מבוא

בלפריטיס היא אחת מאבחנות העיניים הנפוצות ביותר בפרקטיקה הקלינית. עדויות מצביעות על קשר משמעותי בין נוכחות קרדית דמודקס לבלפריטיס1. התפשטות הקרדית כרוכה הן בנזק הישיר שנגרם על ידי דמודקס2 והן בתגובות חיסוניות המופעלות על ידי הפרשותיו, שעשויות לשמש כווקטור לחיידקים ופוטנציאלית לתרום להתפתחות בלפריטיס3. דמודקס בלפריטיס (DB) גורם לספקטרום של אירועים לא מספקים, כולל נזק לקרנית ולמשטח העין1, המשפיעים לרעה על איכות חייו של המטופל 4,5.

דמודקס הוא קרדית טפילית המאכלסת את זקיקי השיער ובלוטות החלב, כמו גם את האזורים הסמוכים להם6. זיהוי דמודקס בתוך או סביב זקיקי הריסים יכול לסייע באבחון DB7. האבחנה הקלינית של DB כוללת אפילציה של ריסים ותצפית על דמודקס במיקרוסקופ אור. עם זאת, ידוע כי קרדיות רבות השוכנות עמוק בתוך הזקיק עשויות להישאר בפתח לאחר הסרת ריסים 8,9,10, מה שעלול להוביל להערכת חסר של ספירת הקרדית. מיקרוסקופיה קונפוקלית in vivo (IVCM), כלי הדמיה לא פולשני ברפואת עיניים, מציעה גישה חלופית להדמיית דמודקס בתוך או סביב זקיקי ריסים in vivo11. טכניקה זו מספקת תובנה לגבי מיקרו-מבנים של פני העין והעפעפיים ברזולוציה דמוית היסטולוגיה11. ניתן לזהות קרדית חזותית על סמך המורפולוגיה והתנועתיות האופייניות להן. עם זאת, IVCM עשוי להוות אתגרים טכניים לרופאי עיניים חסרי ניסיון רב בשיטת הדמיה זו12.

כדי להקל על אימוץ IVCM ביישומים קליניים שגרתיים, כולל אבחנה מבדלת ומעקב אחר עפעפיים בריאים כמו גם DB, אנו מציעים נוהל הפעלה סטנדרטי (SOP) לתצפית על קרדית דמודקס בשולי העפעפיים. פרוטוקול זה מספק לרופאים גישה שיטתית לזיהוי קרדית in vivo.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

פרוטוקול זה מתמקד ב-SOP המשמש לתצפית על דמודקס בשולי העפעפיים עם IVCM (איור 1). מחקר זה אושר על ידי מועצת הביקורת המוסדית (IRB) של בית החולים לעיניים, האוניברסיטה הרפואית וונג'ואו (אישור IRB מס' H2023-022-K-20), והדרישה להסכמה פרטוספקטיבית לניתוח רטרוספקטיבי זה בוטלה בשל האופי הרטרוספקטיבי. הנהלים המתוארים כאן מתייחסים לתיאורים שדווחו בעבר 11,13,14,15,16.

figure-protocol-1
איור 1: מכשיר הטומוגרפיה. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.

1. הכן את המכשיר ואת התוכנית

  1. הפעל את המחשב.
    1. לאחר הופעת שולחן העבודה, העבר את מתג הנדנדה בגב המכשיר מ-O ל-I. חפש את הזוהר הירוק של מתג הנדנדה המציין שהמכשיר מופעל לפני תחילת בדיקות כלשהן.
      הערה: הפעלת ההתקן לפני הפעלת המחשב עלולה לגרום לכשל בקישוריות.
    2. הפעל את התוכנה והגדר את הגדרות התוכנית לפני הבדיקה. בתפריט הגדרה , בחר אפשרויות (קובץ משלים 1: איור משלים S1); לאחר מכן, סמן את הצג מספרי תמונות בתיבה כדי להציג את מספר התמונה עבור כל תמונה. בנוסף, סמן את התיבה הצג מידע ביציאה כדי למנוע כיבוי לא מכוון של התוכנה.
      הערה: הצגת התמונות הממוזערות של התמונות כסמלים גדולים מאפשרת התבוננות ישירה בתוצאות. אל תשנה את ההגדרות לעתים קרובות.
  2. הכנות לקראת הבחינה
    1. נקה את העדשה עם מגבונים לניקוי עדשות. חטא את משענת הראש ואת משענת הסנטר בכדורי צמר גפן ספוגים באלכוהול כדי למנוע זיהומים הנובעים מחיידקים פתוגניים המועברים על ידי חלקי מכשיר מלוכלכים.
    2. כוונן את משענת הסנטר. ודא שהמיקום האופקי של משענת הסנטר נכון: לחץ יחד על שתי הידיות השחורות כדי למשוך את משענת הסנטר קדימה עד שהיא נתפסת.
    3. הזז את המצלמה אחורה. סובב את בורג הכוונון כדי לוודא שהוא מתרחק מהמטופל לפני הבדיקה.
    4. יש למרוח טיפה (כ-0.02 מ"ל) של ג'ל עיניים מבוסס קרבומר כג'ל מגע על המשטח הקדמי של עדשת המיקרוסקופ של המכשיר.
      הערה: ודא שג'ל המגע נקי מבועות אוויר וכי נעשה שימוש בכמות קטנה בלבד. יותר מדי ג'ל מגע המונח על המשטח הקדמי של עדשת המיקרוסקופ של המכשיר יכול לזרום לתוך המטרה ולהיצמד לרכיבים המכניים, מה שמוביל לנזק למכשיר.
    5. הסר מכסה פולימתיל-מתאקרילט (PMMA) סטרילי וחד פעמי מכיסוי המגן שלו ולחץ את צידי הפקק בחוזקה על עדשת המיקרוסקופ של ההתקן מבלי לגעת במשטח הקדמי של המכסה (איור 2).
      הערה: כדי להתאים את מכסה ה-PMMA בצורה נכונה, ודא שג'ל המגע נמצא במגע עם המשטח האחורי של המכסה ללא בועות אוויר. הפקקים מאוחסנים במיכל הייעודי למניעת נזק לאריזה הסטרילית. אין להשתמש בפקקים עם אריזה פגומה, העלולים לשאת את הסיכון לזיהומים במהלך הבדיקה.
    6. מרחו טיפה אחת של תחליף דמעות ג'ל על המשטח הקדמי של הפקק כגשר ג'ל בין הפקק לעפעף (איור 2).
      הערה: כדי למנוע בלבול בין הג'לים, אנו משתמשים באותו ג'ל עיניים מבוסס קרבומר לשני היישומים: תחליף דמעות הג'ל והג'ל המשמש כחומר בין עדשת המיקרוסקופ למכסה.
    7. צור תיק מטופל חדש או בחר תיק מטופל קיים.

figure-protocol-2
איור 2: ההתאמה הנכונה של מכסה ה-PMMA ומריחת הג'ל. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.

2. הכינו את המטופל

הערה: אל תבצע בדיקה זו אם שלמות הקרנית מוטלת בספק.

  1. כדי להשיג את שיתוף הפעולה של המטופל ולמזער סיכונים פוטנציאליים, הסבירו למטופל את הדברים הבאים:
    1. הבטיחו למטופל שהבדיקה עם המכשיר בטוחה למרות שהוא נוגע בעפעף. הודע למטופל כי עינו תורדם על ידי טיפת חומר הרדמה מקומי בשולי העפעף.
    2. בעת תחילת הבדיקה, בקש מהמטופל להניח את סנטרו על משענת הסנטר ולהשעין את מצחו על משענת המצח לאורך כל הליך הבדיקה לקבלת איכות התמונה הטובה ביותר.
    3. הודע למטופל שהמכשיר יועבר קרוב לעפעף שלו עד שמכסה ה-PMMA ייגע בו. הבטיחו להם שהם לא ירגישו כאב בזמן שהמכשיר נוגע בעפעף שלהם, אם כי הם ירגישו את המגע של כובע ה-PMMA. בקש מהם להודיע לקלינאי מיד אם הם חשים כאב כלשהו במהלך הבדיקה.
    4. הודע למטופל שעליו להחזיק את מבטו יציב בזמן שהקלינאי רוכש תמונות של שולי העפעף לצורך התבוננות בדמודקס. בקש מהמטופל ליידע את הקלינאי אם הוא מרגיש עייפות כלשהי; הם יורשו לשבת ולנוח זמן מה לפני המשך הבחינה. הם יקבלו הודעה לאחר סיום הבדיקה.
  2. עקוב אחר ההוראות שעל אריזת חומר ההרדמה המקומית ו/או ג'ל העיניים כדי למנוע התוויות נגד לתרופות. שאל את המטופל אם יש לו אלרגיות כלשהן כדי לאשר שהאלרגיות של המטופל אינן התוויות נגד של חומר ההרדמה המקומי ו/או ג'ל העיניים.
    הערה: תגובות אלרגיות להרדמה מקומית ו/או לג'ל עיניים עלולות להתרחש כתוצאה מאלרגיות לא מזוהות.
  3. יש למרוח טיפה של פרופרקאין הידרוכלוריד, חומר הרדמה מקומי, בשולי העפעף לבדיקה.
    הערה: אם מתרחשת תגובה אלרגית, יש לשטוף במי מלח מיד.

3. לבצע בדיקה

  1. התבונן תחילה בעין ימין. הזז את מצלמת הסריקה שמאלה מנקודת מבטו של המפעיל. OD ייבחר אוטומטית בקטע הגדרות על ידי הזיהוי הימני-שמאלי של המצלמה.
  2. הזז את מצלמת ה-CCD שמאלה. סובב את עדשת המטרה של מצלמת ה-CCD כדי להתאים את התמונה של מצלמת ה-CCD (תמונת הבקרה) בניצב לציר האופטי של מצלמת הלייזר של הסורק.
  3. התחל בחינה חדשה.
    1. שים לב לתיבת הדו-שיח נתוני בדיקה ובכרטיסייה נתוני בדיקה , בחר טומוגרף-קרנית רשתית היידלברג מהרשימה הנפתחת התקן (קובץ משלים 1: איור משלים S2), וצפה בתיבת הדו-שיח הגדרות מודול קרנית שמופיעה.
    2. בחר FOV 400 מהרשימה הנפתחת עדשת שדה ולחץ על אישור כדי לאשר (משלים file 1: איור משלים S3).
    3. המתן עד לפתיחת חלון הרכישה ; התמונה החיה של מצלמת הלייזר הסורקת ותמונת הבקרה מוצגות. אם תמונת הבקרה אינה מוצגת, ודא שכבל מצלמת ה-CCD מחובר כהלכה למצלמת ה-CCD ולאחר מכן הפעל מחדש את חלון הרכישה.
  4. הגדר את הגורמים בחלון הרכישה (קובץ משלים 1: איור משלים S4): בחר 1x מהרשימה הנפתחת CCD Zoom Factor כדי להגדיר את גודל תמונת הבקרה. סמן את התיבה בהירות אוטומטית ואת התיבה אוטומטי כדי לשלוט באופן אוטומטי בבהירות של התמונות החיות והבקרה. עם זאת, אם בקרת הבהירות האוטומטית מושבתת, השתמש במחוון כדי לשלוט בבהירות הפקד ובתמונות חיות. בדוק שסוג הסריקה של המקטע נבחר כך שתמונה בודדת נרכשת ומאוחסנת בכל פעם שלוחצים על מתג הרגליים.
  5. רכוש תמונת התייחסות.
    1. לפני שתתחיל ברכישה, כבה את בקרת הבהירות האוטומטית והזז את המחוון שמאלה כדי לכוונן את בהירות התמונה. כוונן את מישור המוקד עם סיכת הכוונון כך שההשתקפות הבהירה הראשונית תוצג בתמונה החיה של מצלמת הלייזר הסורקת לאחר החשיכה, המציינת את המשטח הקדמי של מכסה ה-PMMA.
      הערה: המיקרוסקופ מאפשר התאמות מוקד של 10 מיקרומטר.
    2. לחץ על איפוס במקטע מיקום מיקוד [μm] והמתן עד שהערך מיקום מיקוד [μm] יהפוך ל-0; התמונה הנוכחית מסומנת כתמונת הייחוס. כבה את האיפוס האוטומטי וסמן את התיבה בהירות אוטומטית ; בהירות התמונה החיה תישלט אוטומטית.
    3. אם מוצגים קווים מקווקווים במקום ערכים בקטע מיקום מיקוד [מיקרומטר], או אם הערכים המוצגים אינם משתנים למרות התאמות למישור המוקד, ודא שכבל עדשת המיקרוסקופ מחובר כהלכה.
      הערה: מיקום המיקוד [מיקרומטר] עבור פכימטריה מציג את מיקום מישור המוקד של התמונה המוצגת כעת במיקרונים. אם מישור המוקד מועבר לאחר מכן, מיקום מישור המוקד בפועל מחושב ביחס למיקום תמונת הייחוס.
  6. הרם או הורד את גובה שולחן הבדיקה עבור המטופל. הניחו את סנטרו של המטופל על משענת הסנטר ואת המצח כנגד משענת המצח (איור 3A,B). כוונן את גובה משענת הסנטר באמצעות בורג הכוונון השחור המיועד של המכשיר כך שהעפעפיים העליונים של המטופל יתיישרו עם הסימנים האדומים על עמוד משענת הראש.
  7. אמרו למטופל להסתכל למטה לפני מקור האור הקבוע של המצביע ולהחזיק את מבטו יציב (איור 3A,B).
    הערה: תנועת עיניים במהלך איסוף התמונות עלולה לגרום לאיכות תמונה גרועה ולנזק למשטח העין.
  8. השתמשו במקלון צמר גפן כדי להפוך את העפעף העליון, ולחשוף באופן מלא את שורש הריסים ואת שולי הפלפברל. מקם את השתקפות קרן הלייזר בגובה העפעף העליון של המטופל על ידי סיבוב בורג הכוונון של המכשיר. הזיזו את מצלמת הלייזר הסורקת באיטיות לכיוון שולי העפעף העליון של המטופל עד שהיא נוגעת בעדינות במרכז מכסה ה-PMMA בצורה אנכית (איור 3C). אם המטופל מדווח על אי נוחות, עצור ובדוק את יישור מכסה ה-PMMA.
    הערה: אל תפעיל לחץ רב מדי על העפעף של המטופל. מגע בין כובע ה-PMMA לעפעף של המטופל עקב גשר ג'ל לא מספיק, תנועת העיניים והראש של המטופל ו/או תנועת מצלמה חזקה מדי של המפעיל עלול לפגוע במשטח העין ובעפעף.
  9. סרוק את שורש הריסים מהצד הטמפורלי לכיוון צד האף של שולי העפעף בזהירות עם תנועות אופקיות זעירות של שולי הפלפברל, המאפשרים הערכה של הריסים וזקיקיהם. סרוק ורכוש תמונות על ידי סיבוב עדשת המיקרוסקופ של המכשיר בכיוון השעון או נגד כיוון השעון, שנה את מישור המיקוד בהדרגה כדי להתבונן בכל הזקיק ושורש הריסים, ורשום את העומקים השונים המוצגים בתמונה החיה של מצלמת הלייזר הסריקה. רכוש תמונות על ידי סריקת שישה עד עשרה זקיקי שיער ריסים לכל עין, כאשר הדגימה מפוזרת על פני האזורים הזמניים, האמצעיים והאף של שולי העפעפיים.
    הערה: אם רפלקס קטן מוצג בתמונה החיה של מצלמת הלייזר הסורקת ונמשך בעת שינוי מיקום מישור המוקד, הדבר עשוי להצביע על נוכחות של בועות אוויר בג'ל המגע. כדי לפתור בעיה זו, חדש את ג'ל המגע.
  10. שמור את התמונות באופן ידני והקלט את כל התמונות החשודות של קרדית דמודקס על ידי לחיצה על דוושת כף הרגל. אפשר משוב שמע על הדוושה כדי לאמת רכישת תמונה מוצלחת. אם לא מוצגים מבני עפעפיים ורק שכבות גבול רפלקטיביות מאוד נראות בתמונה החיה של מצלמת הלייזר הסריקה, הדבר עשוי להצביע על כך שהמגע בין מכסה ה-PMMA לשולי העפעף של המטופל נקטע. כדי לפתור בעיה זו, יישר מחדש את המצלמה עד שמכסה ה-PMMA ייגע כראוי בשולי העפעף של המטופל.
  11. אם התמונה החיה נראית מטושטשת, מעוותת או אינה מציגה את מבנה זקיק השערה, בעיות אלו עשויות להצביע על כך שהמטופל מזיז את הראש או ממצמץ. הזכירו למטופל להתמקד באור הקיבוע כדי למזער את התנועה. במידת האפשר, כוונן את הבהירות, מישור המוקד ומיקום הסריקה כדי לשפר את איכות התמונה.
  12. אם יש צורך לכוונן את מצלמת הלייזר הסורקת או שהמטופל חווה עייפות או כאב כלשהו, בקש מהמטופל לשבת בחיבוק ידיים, להזיז את מצלמת הלייזר הסורקת לאחור ולהתאים מחדש את המצלמה. אם המטופל ממשיך לחוות אי נוחות במהלך הבדיקה ואינו מראה סימנים של הקלה בתסמינים לאחר מנוחה, הפסק ותזמן מחדש את ההליך כדי להבטיח את בטיחות המטופל.
  13. אם מטופל נבדק מספר פעמים במהלך היום, אחסן את כל התמונות באותה לשונית בדיקה בחלון הצגת התמונה.
  14. בדוק את העין השמאלית, הזז את המצלמה ימינה מנקודת המבט של המפעיל והמתן לבחירה אוטומטית של מערכת ההפעלה . הסר את מכסה ה-PMMA מהמכשיר, התקן מכסה PMMA חדש על עדשת המיקרוסקופ של המכשיר וחזור על השלבים הקודמים.

figure-protocol-3
איור 3: מיקום המטופל. (א,ב) המטופל ממוקם. (C) המכסה מותאם כך שייגע בעפעף. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.

4. לאחר הבדיקה

  1. עזוב את הבדיקה; ודא שהתמונות של זקיקי הריסים מאוחסנות ושהתמונות שנרכשו מוצגות בחלון תצוגת התמונה. אם לא, ייתכן שרכישת התמונות נכשלה, או שהנתונים לא נשמרו. ראשית, שלל תקלות פוטנציאליות בציוד, כגון בעיות בחיבור תוכנה או כשל בדוושה. לאחר פתרון הבעיות, הסבירו למטופל את המצב וחזרו על הבדיקה.
  2. בקשו מהמטופל לא לשפשף את עיניו לאחר הבדיקה עד שהשפעת ההרדמה המקומית פחתה.
  3. הסר את מכסה ה-PMMA מהמכשיר.
  4. נקה את עדשת המיקרוסקופ עם מגבונים לניקוי עדשות.
  5. בחר מיין לפי זמן רכישה (מהיר) בתיבת הדו-שיח Options וצפה בתמונות שנרכשו של זקיקי הריסים המוצגים בסדר מהצד הטמפורלי לאף (קובץ משלים 1: איור משלים S5) - סדר הסריקה של שורש הריסים לאורך שולי העפעף. סקור את כל התמונות, בחר את התמונות באיכות גבוהה לניתוח (איור 4) ומחק תמונות באיכות נמוכה. בקש מהצופה להעריך את התמונות לנוכחות קרדית ולרשום את מספר זקיקי הריסים עם קרדית דמודקס בסך הכל עבור כל עין.
    הערה: תמונות באיכות גבוהה מציגות מורפולוגיה ברורה של קרדית, והחלק המצולם של הקרדית צריך להיות גדול ככל האפשר, באופן אידיאלי גדול מ-100 מיקרומטר. אם תמונות באיכות גבוהה אינן זמינות, נדרשת הערכה עצמאית על ידי צופה שני. אם התוצאות של שני המשקיפים אינן עקביות, משקיף שלישי חייב לשפוט כדי לפתור את הפער ולקבוע את התוצאה הסופית להכללה בדו"ח.
  6. צור דוחות על-ידי הצבת התמונה האיכותית מהצד הזמני לצד האף לתוך תיבת האור של הדוח. מתבניות הדוח ותבניות ספירת הקרדית (ראה קובץ משלים 2), בחר תבנית דוח מתאימה לתיאור התוצאות על סמך ממצאי הבדיקה.

figure-protocol-4
איור 4: דמודקס בתוך זקיק הריסים. (תמונות: 400 מיקרומטר x 400 מיקרומטר). (א)שלוש קרדיות דמודקס נצפות בתוך הזקיק (חץ צהוב), וריס בודד מסומן (חץ לבן). (B) חמש קרדיות דמודקס נצפות בתוך הזקיק (חץ צהוב), וריס בודד מסומן (חץ לבן). מכיוון שקרדית עשויה לנדוד דרך עומקים שונים, הדמיה במישור מוקד יחיד עשויה ללכוד חלקים מקוטעים של קרדית בודדת, ובכך לגרום לייצוג מורפולוגי לא שלם. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.

5. כבה את המכשיר לאחר העבודה כל יום

  1. לאחר סגירת כל תיבות הדו-שיח והחלונות, סגור את התוכנה.
  2. כבה את המחשב.
  3. כבה את המכשיר על ידי החלפת מתג הנדנדה בגב המכשיר מ- I ל- O. לביצועי מערכת ואבטחת נתונים מיטביים, כבה תחילה את התוכנה ולאחר מכן כבה את ההתקן.
    הערה: אין להשאיר את המכשיר דולק ברציפות זמן רב מדי, במיוחד במשך יותר מיום שלם.
  4. שמור באופן קבוע על ספק הכוח האל-פסק (UPS) המחובר לציוד והבטח את פעולתו התקינה כדי למנוע אובדן נתונים או תקלה במכשיר הנגרמת כתוצאה מהפסקות חשמל פתאומיות.
  5. בצע גיבויים קבועים, כגון שימוש באחסון מצורף לרשת (NAS).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

בעקבות ה-SOP שתואר לעיל, בדקנו חולים עם חשד להתפשטות דמודקס בשנת 2024. בנוסף, השווינו את הנתונים משנת 2023 כאשר נוהל זה לא יושם. כפי שמוצג באיור 5, מספר המטופלים שעברו IVCM לגילוי דמודקס בשנת 2024 גבוה משמעותית מהשנה הקודמת. נוהל זה מאפשר בדיקה של מטופלים בגילאים שונים, מגיל 4 שנים ועד גיל 92.

figure-results-1
איור 5...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

הטפיל החיצוני דמודקס הוא אחד הטפילים הנפוצים ביותר בבני אדם. קרדיות אלו חיות בזקיקי הריסים, בבלוטות המייבומיאן (MGs) ובבלוטות החלב והן שקופות, מוארכות בצורתן ואורכן 0.15-0.4 מ"מ17. IVCM המבוצע באמצעות המכשיר מספק תמונות בזמן אמת של 400 מיקרומטר x 400 מיקרומטר עם רזולוציה רוחבית של 1 מיקרומטר/פיקסל והגדלה של פי 800. באמצעות IVCM, ניתן לרכוש תמונות מפורטות של דמודקס בזקיקי הריסים; ניתן גם לעקוב אחר שינויים בתגובת המטופל לטיפול בשולי העפעפיים

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

למחברים אין ניגודי אינטרסים לחשוף.

תודות

מחקר זה נתמך על ידי מענק מהמינהל הלאומי לרפואה סינית מסורתית, המחלקה למדע וטכנולוגיה - המינהל המחוזי של ג'ג'יאנג לרפואה סינית מסורתית, תוכנית מדע וטכנולוגיה לבנייה משותפת (GZY-ZJ-KJ-23086). מיקרוסקופיה קונפוקלית in vivo בוצעה באמצעות טומוגרף רשתית היידלברג III בתוספת מודול הקרנית של רוסטוק. המחברים מבקשים להביע תודה להיידלברג Engineering GmbH, לכל המשתתפים ולאנשים העובדים על נוהל הפעלה סטנדרטי זה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
ג'ל עיניים על בסיס קרבומר, Vidisic  באוש ולומב, ברלין, גרמניה8187195
תוכנת סייר העיניים של היידלברג  Heidelberg Engineering GmbH, היידלברג, גרמניהגירסה 1.3.3.0
טומוגרף רשתית היידלברג III  Heidelberg Engineering GmbH, היידלברג, גרמניהHRT3-08398
פרופרקאין הידרוכלורידמעבדות אלקון, פורט וורת', טקסס, ארה"ב8387271
טומוקאפ (TomoCap)  Heidelberg Engineering GmbH, היידלברג, גרמניה18829מכסה PMMA

מקורות

  1. Cheng, A. M., Sheha, H., Tseng, S. C. Recent advances on ocular Demodex infestation. Curr Opin Ophthalmol. 26 (4), 295-300 (2015).
  2. Czepita, D., Kuźna-Grygiel, W., Czepita, M., Grobelny, A. Demodex folliculorum and Demodex brevis as a cause of chronic marginal blepharitis. Ann Acad Med Stetin. 53 (1), discussion 67 63-67 (2007).
  3. Clifford, C. W., Fulk, G. W. Association of diabetes, lash loss, and Staphylococcus aureus with infestation of eyelids by Demodex folliculorum (acari: Demodicidae). J Med Entomol. 27 (4), 467-470 (1990).
  4. O'Dell, L., et al. Psychosocial impact of Demodex blepharitis. Clin Ophthalmol. 16, 2979-2987 (2022).
  5. Yeu, E., Holdbrook, M. J., Baba, S. N., Gomes, P. J. Psychosocial impact of Demodex blepharitis. Invest Ophthalmol Vis Sci. 62 (8), 1261-1261 (2021).
  6. Wu, M., Wang, X., Han, J., Shao, T., Wang, Y. Evaluation of the ocular surface characteristics and Demodex infestation in paediatric and adult blepharokeratoconjunctivitis. BMC Ophthalmol. 19 (1), 67(2019).
  7. Zou, D., et al. Characteristics of bacterial community in eyelashes of patients with Demodex blepharitis. Parasit Vectors. 17 (1), 64(2024).
  8. Coston, T. O. Demodex folliculorum blepharitis. Trans Am Ophthalmol Soc. 65, 361-392 (1967).
  9. Mastrota, K. M. Method to identify Demodex in the eyelash follicle without epilation. Optom Vis Sci. 90 (6), e172-e174 (2013).
  10. Gao, Y. Y., et al. High prevalence of demodex in eyelashes with cylindrical dandruff. Invest Ophthalmol Vis Sci. 46 (9), 3089-3094 (2005).
  11. Randon, M., et al. In vivo confocal microscopy as a novel and reliable tool for the diagnosis of Demodex eyelid infestation. Br J Ophthalmol. 99 (3), 336-341 (2015).
  12. Muntz, A., Purslow, C., Wolffsohn, J. S., Craig, J. P. Improved Demodex diagnosis in the clinical setting using a novel in situ technique. Cont Lens Anterior Eye. 43 (4), 345-349 (2020).
  13. Kojima, T., et al. In vivo evaluation of ocular demodicosis using laser scanning confocal microscopy. Invest Ophthalmol Vis Sci. 52 (1), 565-569 (2011).
  14. Tas, A. Y. Interobserver and intraobserver agreements of the detection of Demodex infestation by in vivo confocal microscopy. Beyoglu Eye J. 7 (3), 173-180 (2022).
  15. Wang, Y. -J., Ke, M., Chen, X. -M. Prospective study of the diagnostic accuracy of the in vivo laser scanning confocal microscopy for ocular demodicosis. Am J Ophthalmol. 203, 46-52 (2019).
  16. hrt3 rostock cornea module user manual v. 1.5 english. , Heidelberg Engineering GmbH. http://www.HeidelbergEngineering.com (2025).
  17. Lee, S. H., Chun, Y. S., Kim, J. H., Kim, E. S., Kim, J. C. The relationship between Demodex and ocular discomfort. Invest Ophthalmol Vis Sci. 51 (6), 2906-2911 (2010).
  18. Sattler, E. C., et al. Noninvasive in vivo detection and quantification of Demodex mites by confocal laser scanning microscopy. Br J Dermatol. 167 (5), 1042-1047 (2012).
  19. Duncan, N., Sood, P., Khandelwal, S. Demodex blepharitis: Its role and treatment in ocular surface disease. Curr Ophthalmol Rep. 10 (4), 107-113 (2022).
  20. Luo, X., Li, J., Chen, C., Tseng, S., Liang, L. Ocular demodicosis as a potential cause of ocular surface inflammation. Cornea. 36 Suppl 1 (Suppl 1), S9-S14 (2017).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

זיהוי Demodexדימוג לא פולשנישורש הריסג'ל אופתלמישולי העפעף
ב Vivo מיקרוסקופיה קונפוקלית: נוהל הפעלה סטנדרטי לזיהוי קרדית דמודקס בשולי העפעפיים
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.