$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
פרוטוקול זה מתמקד ב-SOP המשמש לתצפית על דמודקס בשולי העפעפיים עם IVCM (איור 1). מחקר זה אושר על ידי מועצת הביקורת המוסדית (IRB) של בית החולים לעיניים, האוניברסיטה הרפואית וונג'ואו (אישור IRB מס' H2023-022-K-20), והדרישה להסכמה פרטוספקטיבית לניתוח רטרוספקטיבי זה בוטלה בשל האופי הרטרוספקטיבי. הנהלים המתוארים כאן מתייחסים לתיאורים שדווחו בעבר 11,13,14,15,16.

איור 1: מכשיר הטומוגרפיה. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.
1. הכן את המכשיר ואת התוכנית
- הפעל את המחשב.
- לאחר הופעת שולחן העבודה, העבר את מתג הנדנדה בגב המכשיר מ-O ל-I. חפש את הזוהר הירוק של מתג הנדנדה המציין שהמכשיר מופעל לפני תחילת בדיקות כלשהן.
הערה: הפעלת ההתקן לפני הפעלת המחשב עלולה לגרום לכשל בקישוריות.
- הפעל את התוכנה והגדר את הגדרות התוכנית לפני הבדיקה. בתפריט הגדרה , בחר אפשרויות (קובץ משלים 1: איור משלים S1); לאחר מכן, סמן את הצג מספרי תמונות בתיבה כדי להציג את מספר התמונה עבור כל תמונה. בנוסף, סמן את התיבה הצג מידע ביציאה כדי למנוע כיבוי לא מכוון של התוכנה.
הערה: הצגת התמונות הממוזערות של התמונות כסמלים גדולים מאפשרת התבוננות ישירה בתוצאות. אל תשנה את ההגדרות לעתים קרובות.
- הכנות לקראת הבחינה
- נקה את העדשה עם מגבונים לניקוי עדשות. חטא את משענת הראש ואת משענת הסנטר בכדורי צמר גפן ספוגים באלכוהול כדי למנוע זיהומים הנובעים מחיידקים פתוגניים המועברים על ידי חלקי מכשיר מלוכלכים.
- כוונן את משענת הסנטר. ודא שהמיקום האופקי של משענת הסנטר נכון: לחץ יחד על שתי הידיות השחורות כדי למשוך את משענת הסנטר קדימה עד שהיא נתפסת.
- הזז את המצלמה אחורה. סובב את בורג הכוונון כדי לוודא שהוא מתרחק מהמטופל לפני הבדיקה.
- יש למרוח טיפה (כ-0.02 מ"ל) של ג'ל עיניים מבוסס קרבומר כג'ל מגע על המשטח הקדמי של עדשת המיקרוסקופ של המכשיר.
הערה: ודא שג'ל המגע נקי מבועות אוויר וכי נעשה שימוש בכמות קטנה בלבד. יותר מדי ג'ל מגע המונח על המשטח הקדמי של עדשת המיקרוסקופ של המכשיר יכול לזרום לתוך המטרה ולהיצמד לרכיבים המכניים, מה שמוביל לנזק למכשיר.
- הסר מכסה פולימתיל-מתאקרילט (PMMA) סטרילי וחד פעמי מכיסוי המגן שלו ולחץ את צידי הפקק בחוזקה על עדשת המיקרוסקופ של ההתקן מבלי לגעת במשטח הקדמי של המכסה (איור 2).
הערה: כדי להתאים את מכסה ה-PMMA בצורה נכונה, ודא שג'ל המגע נמצא במגע עם המשטח האחורי של המכסה ללא בועות אוויר. הפקקים מאוחסנים במיכל הייעודי למניעת נזק לאריזה הסטרילית. אין להשתמש בפקקים עם אריזה פגומה, העלולים לשאת את הסיכון לזיהומים במהלך הבדיקה.
- מרחו טיפה אחת של תחליף דמעות ג'ל על המשטח הקדמי של הפקק כגשר ג'ל בין הפקק לעפעף (איור 2).
הערה: כדי למנוע בלבול בין הג'לים, אנו משתמשים באותו ג'ל עיניים מבוסס קרבומר לשני היישומים: תחליף דמעות הג'ל והג'ל המשמש כחומר בין עדשת המיקרוסקופ למכסה.
- צור תיק מטופל חדש או בחר תיק מטופל קיים.

איור 2: ההתאמה הנכונה של מכסה ה-PMMA ומריחת הג'ל. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.
2. הכינו את המטופל
הערה: אל תבצע בדיקה זו אם שלמות הקרנית מוטלת בספק.
- כדי להשיג את שיתוף הפעולה של המטופל ולמזער סיכונים פוטנציאליים, הסבירו למטופל את הדברים הבאים:
- הבטיחו למטופל שהבדיקה עם המכשיר בטוחה למרות שהוא נוגע בעפעף. הודע למטופל כי עינו תורדם על ידי טיפת חומר הרדמה מקומי בשולי העפעף.
- בעת תחילת הבדיקה, בקש מהמטופל להניח את סנטרו על משענת הסנטר ולהשעין את מצחו על משענת המצח לאורך כל הליך הבדיקה לקבלת איכות התמונה הטובה ביותר.
- הודע למטופל שהמכשיר יועבר קרוב לעפעף שלו עד שמכסה ה-PMMA ייגע בו. הבטיחו להם שהם לא ירגישו כאב בזמן שהמכשיר נוגע בעפעף שלהם, אם כי הם ירגישו את המגע של כובע ה-PMMA. בקש מהם להודיע לקלינאי מיד אם הם חשים כאב כלשהו במהלך הבדיקה.
- הודע למטופל שעליו להחזיק את מבטו יציב בזמן שהקלינאי רוכש תמונות של שולי העפעף לצורך התבוננות בדמודקס. בקש מהמטופל ליידע את הקלינאי אם הוא מרגיש עייפות כלשהי; הם יורשו לשבת ולנוח זמן מה לפני המשך הבחינה. הם יקבלו הודעה לאחר סיום הבדיקה.
- עקוב אחר ההוראות שעל אריזת חומר ההרדמה המקומית ו/או ג'ל העיניים כדי למנוע התוויות נגד לתרופות. שאל את המטופל אם יש לו אלרגיות כלשהן כדי לאשר שהאלרגיות של המטופל אינן התוויות נגד של חומר ההרדמה המקומי ו/או ג'ל העיניים.
הערה: תגובות אלרגיות להרדמה מקומית ו/או לג'ל עיניים עלולות להתרחש כתוצאה מאלרגיות לא מזוהות.
- יש למרוח טיפה של פרופרקאין הידרוכלוריד, חומר הרדמה מקומי, בשולי העפעף לבדיקה.
הערה: אם מתרחשת תגובה אלרגית, יש לשטוף במי מלח מיד.
3. לבצע בדיקה
- התבונן תחילה בעין ימין. הזז את מצלמת הסריקה שמאלה מנקודת מבטו של המפעיל. OD ייבחר אוטומטית בקטע הגדרות על ידי הזיהוי הימני-שמאלי של המצלמה.
- הזז את מצלמת ה-CCD שמאלה. סובב את עדשת המטרה של מצלמת ה-CCD כדי להתאים את התמונה של מצלמת ה-CCD (תמונת הבקרה) בניצב לציר האופטי של מצלמת הלייזר של הסורק.
- התחל בחינה חדשה.
- שים לב לתיבת הדו-שיח נתוני בדיקה ובכרטיסייה נתוני בדיקה , בחר טומוגרף-קרנית רשתית היידלברג מהרשימה הנפתחת התקן (קובץ משלים 1: איור משלים S2), וצפה בתיבת הדו-שיח הגדרות מודול קרנית שמופיעה.
- בחר FOV 400 מהרשימה הנפתחת עדשת שדה ולחץ על אישור כדי לאשר (משלים file 1: איור משלים S3).
- המתן עד לפתיחת חלון הרכישה ; התמונה החיה של מצלמת הלייזר הסורקת ותמונת הבקרה מוצגות. אם תמונת הבקרה אינה מוצגת, ודא שכבל מצלמת ה-CCD מחובר כהלכה למצלמת ה-CCD ולאחר מכן הפעל מחדש את חלון הרכישה.
- הגדר את הגורמים בחלון הרכישה (קובץ משלים 1: איור משלים S4): בחר 1x מהרשימה הנפתחת CCD Zoom Factor כדי להגדיר את גודל תמונת הבקרה. סמן את התיבה בהירות אוטומטית ואת התיבה אוטומטי כדי לשלוט באופן אוטומטי בבהירות של התמונות החיות והבקרה. עם זאת, אם בקרת הבהירות האוטומטית מושבתת, השתמש במחוון כדי לשלוט בבהירות הפקד ובתמונות חיות. בדוק שסוג הסריקה של המקטע נבחר כך שתמונה בודדת נרכשת ומאוחסנת בכל פעם שלוחצים על מתג הרגליים.
- רכוש תמונת התייחסות.
- לפני שתתחיל ברכישה, כבה את בקרת הבהירות האוטומטית והזז את המחוון שמאלה כדי לכוונן את בהירות התמונה. כוונן את מישור המוקד עם סיכת הכוונון כך שההשתקפות הבהירה הראשונית תוצג בתמונה החיה של מצלמת הלייזר הסורקת לאחר החשיכה, המציינת את המשטח הקדמי של מכסה ה-PMMA.
הערה: המיקרוסקופ מאפשר התאמות מוקד של 10 מיקרומטר.
- לחץ על איפוס במקטע מיקום מיקוד [μm] והמתן עד שהערך מיקום מיקוד [μm] יהפוך ל-0; התמונה הנוכחית מסומנת כתמונת הייחוס. כבה את האיפוס האוטומטי וסמן את התיבה בהירות אוטומטית ; בהירות התמונה החיה תישלט אוטומטית.
- אם מוצגים קווים מקווקווים במקום ערכים בקטע מיקום מיקוד [מיקרומטר], או אם הערכים המוצגים אינם משתנים למרות התאמות למישור המוקד, ודא שכבל עדשת המיקרוסקופ מחובר כהלכה.
הערה: מיקום המיקוד [מיקרומטר] עבור פכימטריה מציג את מיקום מישור המוקד של התמונה המוצגת כעת במיקרונים. אם מישור המוקד מועבר לאחר מכן, מיקום מישור המוקד בפועל מחושב ביחס למיקום תמונת הייחוס.
- הרם או הורד את גובה שולחן הבדיקה עבור המטופל. הניחו את סנטרו של המטופל על משענת הסנטר ואת המצח כנגד משענת המצח (איור 3A,B). כוונן את גובה משענת הסנטר באמצעות בורג הכוונון השחור המיועד של המכשיר כך שהעפעפיים העליונים של המטופל יתיישרו עם הסימנים האדומים על עמוד משענת הראש.
- אמרו למטופל להסתכל למטה לפני מקור האור הקבוע של המצביע ולהחזיק את מבטו יציב (איור 3A,B).
הערה: תנועת עיניים במהלך איסוף התמונות עלולה לגרום לאיכות תמונה גרועה ולנזק למשטח העין.
- השתמשו במקלון צמר גפן כדי להפוך את העפעף העליון, ולחשוף באופן מלא את שורש הריסים ואת שולי הפלפברל. מקם את השתקפות קרן הלייזר בגובה העפעף העליון של המטופל על ידי סיבוב בורג הכוונון של המכשיר. הזיזו את מצלמת הלייזר הסורקת באיטיות לכיוון שולי העפעף העליון של המטופל עד שהיא נוגעת בעדינות במרכז מכסה ה-PMMA בצורה אנכית (איור 3C). אם המטופל מדווח על אי נוחות, עצור ובדוק את יישור מכסה ה-PMMA.
הערה: אל תפעיל לחץ רב מדי על העפעף של המטופל. מגע בין כובע ה-PMMA לעפעף של המטופל עקב גשר ג'ל לא מספיק, תנועת העיניים והראש של המטופל ו/או תנועת מצלמה חזקה מדי של המפעיל עלול לפגוע במשטח העין ובעפעף.
- סרוק את שורש הריסים מהצד הטמפורלי לכיוון צד האף של שולי העפעף בזהירות עם תנועות אופקיות זעירות של שולי הפלפברל, המאפשרים הערכה של הריסים וזקיקיהם. סרוק ורכוש תמונות על ידי סיבוב עדשת המיקרוסקופ של המכשיר בכיוון השעון או נגד כיוון השעון, שנה את מישור המיקוד בהדרגה כדי להתבונן בכל הזקיק ושורש הריסים, ורשום את העומקים השונים המוצגים בתמונה החיה של מצלמת הלייזר הסריקה. רכוש תמונות על ידי סריקת שישה עד עשרה זקיקי שיער ריסים לכל עין, כאשר הדגימה מפוזרת על פני האזורים הזמניים, האמצעיים והאף של שולי העפעפיים.
הערה: אם רפלקס קטן מוצג בתמונה החיה של מצלמת הלייזר הסורקת ונמשך בעת שינוי מיקום מישור המוקד, הדבר עשוי להצביע על נוכחות של בועות אוויר בג'ל המגע. כדי לפתור בעיה זו, חדש את ג'ל המגע.
- שמור את התמונות באופן ידני והקלט את כל התמונות החשודות של קרדית דמודקס על ידי לחיצה על דוושת כף הרגל. אפשר משוב שמע על הדוושה כדי לאמת רכישת תמונה מוצלחת. אם לא מוצגים מבני עפעפיים ורק שכבות גבול רפלקטיביות מאוד נראות בתמונה החיה של מצלמת הלייזר הסריקה, הדבר עשוי להצביע על כך שהמגע בין מכסה ה-PMMA לשולי העפעף של המטופל נקטע. כדי לפתור בעיה זו, יישר מחדש את המצלמה עד שמכסה ה-PMMA ייגע כראוי בשולי העפעף של המטופל.
- אם התמונה החיה נראית מטושטשת, מעוותת או אינה מציגה את מבנה זקיק השערה, בעיות אלו עשויות להצביע על כך שהמטופל מזיז את הראש או ממצמץ. הזכירו למטופל להתמקד באור הקיבוע כדי למזער את התנועה. במידת האפשר, כוונן את הבהירות, מישור המוקד ומיקום הסריקה כדי לשפר את איכות התמונה.
- אם יש צורך לכוונן את מצלמת הלייזר הסורקת או שהמטופל חווה עייפות או כאב כלשהו, בקש מהמטופל לשבת בחיבוק ידיים, להזיז את מצלמת הלייזר הסורקת לאחור ולהתאים מחדש את המצלמה. אם המטופל ממשיך לחוות אי נוחות במהלך הבדיקה ואינו מראה סימנים של הקלה בתסמינים לאחר מנוחה, הפסק ותזמן מחדש את ההליך כדי להבטיח את בטיחות המטופל.
- אם מטופל נבדק מספר פעמים במהלך היום, אחסן את כל התמונות באותה לשונית בדיקה בחלון הצגת התמונה.
- בדוק את העין השמאלית, הזז את המצלמה ימינה מנקודת המבט של המפעיל והמתן לבחירה אוטומטית של מערכת ההפעלה . הסר את מכסה ה-PMMA מהמכשיר, התקן מכסה PMMA חדש על עדשת המיקרוסקופ של המכשיר וחזור על השלבים הקודמים.

איור 3: מיקום המטופל. (א,ב) המטופל ממוקם. (C) המכסה מותאם כך שייגע בעפעף. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.
4. לאחר הבדיקה
- עזוב את הבדיקה; ודא שהתמונות של זקיקי הריסים מאוחסנות ושהתמונות שנרכשו מוצגות בחלון תצוגת התמונה. אם לא, ייתכן שרכישת התמונות נכשלה, או שהנתונים לא נשמרו. ראשית, שלל תקלות פוטנציאליות בציוד, כגון בעיות בחיבור תוכנה או כשל בדוושה. לאחר פתרון הבעיות, הסבירו למטופל את המצב וחזרו על הבדיקה.
- בקשו מהמטופל לא לשפשף את עיניו לאחר הבדיקה עד שהשפעת ההרדמה המקומית פחתה.
- הסר את מכסה ה-PMMA מהמכשיר.
- נקה את עדשת המיקרוסקופ עם מגבונים לניקוי עדשות.
- בחר מיין לפי זמן רכישה (מהיר) בתיבת הדו-שיח Options וצפה בתמונות שנרכשו של זקיקי הריסים המוצגים בסדר מהצד הטמפורלי לאף (קובץ משלים 1: איור משלים S5) - סדר הסריקה של שורש הריסים לאורך שולי העפעף. סקור את כל התמונות, בחר את התמונות באיכות גבוהה לניתוח (איור 4) ומחק תמונות באיכות נמוכה. בקש מהצופה להעריך את התמונות לנוכחות קרדית ולרשום את מספר זקיקי הריסים עם קרדית דמודקס בסך הכל עבור כל עין.
הערה: תמונות באיכות גבוהה מציגות מורפולוגיה ברורה של קרדית, והחלק המצולם של הקרדית צריך להיות גדול ככל האפשר, באופן אידיאלי גדול מ-100 מיקרומטר. אם תמונות באיכות גבוהה אינן זמינות, נדרשת הערכה עצמאית על ידי צופה שני. אם התוצאות של שני המשקיפים אינן עקביות, משקיף שלישי חייב לשפוט כדי לפתור את הפער ולקבוע את התוצאה הסופית להכללה בדו"ח.
- צור דוחות על-ידי הצבת התמונה האיכותית מהצד הזמני לצד האף לתוך תיבת האור של הדוח. מתבניות הדוח ותבניות ספירת הקרדית (ראה קובץ משלים 2), בחר תבנית דוח מתאימה לתיאור התוצאות על סמך ממצאי הבדיקה.

איור 4: דמודקס בתוך זקיק הריסים. (תמונות: 400 מיקרומטר x 400 מיקרומטר). (א)שלוש קרדיות דמודקס נצפות בתוך הזקיק (חץ צהוב), וריס בודד מסומן (חץ לבן). (B) חמש קרדיות דמודקס נצפות בתוך הזקיק (חץ צהוב), וריס בודד מסומן (חץ לבן). מכיוון שקרדית עשויה לנדוד דרך עומקים שונים, הדמיה במישור מוקד יחיד עשויה ללכוד חלקים מקוטעים של קרדית בודדת, ובכך לגרום לייצוג מורפולוגי לא שלם. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.
5. כבה את המכשיר לאחר העבודה כל יום
- לאחר סגירת כל תיבות הדו-שיח והחלונות, סגור את התוכנה.
- כבה את המחשב.
- כבה את המכשיר על ידי החלפת מתג הנדנדה בגב המכשיר מ- I ל- O. לביצועי מערכת ואבטחת נתונים מיטביים, כבה תחילה את התוכנה ולאחר מכן כבה את ההתקן.
הערה: אין להשאיר את המכשיר דולק ברציפות זמן רב מדי, במיוחד במשך יותר מיום שלם.
- שמור באופן קבוע על ספק הכוח האל-פסק (UPS) המחובר לציוד והבטח את פעולתו התקינה כדי למנוע אובדן נתונים או תקלה במכשיר הנגרמת כתוצאה מהפסקות חשמל פתאומיות.
- בצע גיבויים קבועים, כגון שימוש באחסון מצורף לרשת (NAS).