מאמר שיטה

מודל עכבר של מתן לחץ אוויר חיובי רציף לתינוקות ושיטת פרוסת ריאות מדויקת למדידת כיווץ דרכי הנשימה

DOI:

10.3791/68643

⸱

13 במרץ 2026

 ,  ,  ,  , 
1Department of Pediatrics, UH Rainbow Babies & Children's Hospital, 2Department of Pediatrics, Case Western Reserve University School of Medicin, 3Department of Anesthesiology & Perioperative Medicine, Mayo Clinic, 4Department of Physiology and Biomedical Engineering, Mayo Clinic

במאמר זה

סיכום

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

אנו מראים שיטה לא פולשנית למתן רמות שונות של CPAP לעכברים יילודים לא מורדמים. הטכניקה מיועדת לחקות חלקית את מתן CPAP עבור תינוקות פגים רבים, כדי להעריך את השפעותיו על התפתחות הריאות. אנו גם מדגימו את השפעות ה-CPAP על כיווץ דרכי הנשימה באמצעות שיטת חיתוך ריאות מדויק.

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כוחות מכניים הקשורים לתמיכה נשימתית בלחץ חיובי המשמשים בטיפול נמרץ בתינוקות פגים עלולים לגרום להשלכות חיוביות ובלתי מכוונות על התפתחות הריאות. תמיכה בלחץ חיובי משפרת את חילופי גזי הריאות, מגבילה אטלקטסיס ומשפרת את החמצון המערכתית, אך גם ההשפעות המזיקות של שיטות פולשניות, כגון הנשמה מכנית, על התפתחות הריאות ידועות היטב. עם זאת, קיימים פערים משמעותיים בהבנתנו את ההשפעות השליליות של צורות אוורור פחות פולשניות. כאן, לחץ אוויר חיובי רציף (CPAP) הוא אחד מאמצעי התמיכה הנשימתיים הנפוצים ביותר, ומייצג את הלחץ החיובי הפחות פולשני. מגבלה מרכזית בחקר התפתחות דרכי הנשימה האנושית היא היעדר מודלים מתאימים לגיל והיכולת לתת CPAP לבעלי חיים קטנים יילודים. פתרנו את הבעיה הזו על ידי פיתוח מודל עכבר של CPAP יילודים שנמסר מדי יום לעכברים ערים שטרם עברו הרדמה – מודל המשתמש ברמות CPAP רלוונטיות קלינית בשלב התפתחות ריאות העכברים התואם לתינוקות פגים כאשר סביר שיקבלו CPAP בטיפול נמרץ. כאן, אנו מדגימה את מודל ה-CPAP שלנו, הכולל מערכת נוחה ומותאמת אישית שיכולה לספק CPAP באופן לא פולשני לתינוק שאינו מורדם עם רמות שניתן לכוונן בקלות. אנו גם מציגים הדגמה של שיטת חיתוך מדויק של חיתוך ריאות למדידת היפרריאקטיביות של דרכי הנשימה מחוץ לחיים. ה-PCLS מתואר כאן משום שהוא מספק קריאה פונקציונלית נוחה של מערכת הריאות, דבר שיכול להיות מאתגר טכנית במודלים של בעלי חיים קטנים (יילודים), ויש לו גם יישום רחב למודלים אחרים שאינם קשורים ל-CPAP. אנו מציגים נתונים המראים כי CPAP מעורר היפרריאקטיביות בדרכי הנשימה, מה שעשוי להיות בעל השלכות קליניות חשובות על בחירת שיטת תמיכה נשימתית בטיפול נמרץ בתינוקות פגים.

מבוא

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

בעיות הקשורות לנשימה, כמו דום נשימה ומצוקה נשימתית, עבור תינוקות פגים רבים, דורשות אמצעי תמיכה נשימתיים מצילי חיים, אשר, למרבה הצער, תורמים לתחלואה אצל תינוקות ולשהייה ממושכת בבית החולים. תמימיO2 ותמיכה נשימתית בלחץ חיובי, כולל הנשמה מכנית (MV) ו-CPAP פחות פולשני, הם שיטות נפוצות לתמיכה נשימתית. עם זאת, הבעיה המרכזית לטווח הקצר והארוך עבור שורדי התקופה הקריטית של הלידה המוקדמת נותרת מחלת דרכי הנשימה כרונית 1,2,3,4, המתבטאת בצפצופים/אסתמה לאורך כל החיים, תפקוד ריאתי לקוי וירידה ביכולת הפעילות. למרות שההשפעות המזיקות של תוספיO 2 ו-MV היו מעורבות נרחבת בפתוגנזה של דיספלזיה ברונכופולמונרית (BPD) ותחלואה נשימתית ארוכת טווח במשך עשרות שנים 5,6,7,8, יש עדויות שמצביעות על כך שצורות לא פולשניות של תמיכה נשימתית, כגון CPAP, עשויות גם הן לגרום להשפעות לא מכוונות על הריאה המתפתחת 6,9,10,11, 12. עם זאת, ידוע מעט מאוד על תופעות הלוואי של CPAP, בעיקר בשל האתגרים הטכניים הכרוכים במתן ה-CPAP באופן לא פולשני לבעלי חיים יילודים.

בהינתן שיעור העלייה הכולל של אסתמה בילדים13, ושיעורי ההישרדות המוגברים של תינוקות פגים מעבר לשהות ב-NICU, הבנת המנגנונים שגורמים לשינויים מבניים ותפקודיים שליליים בדרכי הנשימה טרכאובונכיאליות הלא בשלות וכיצד הן תורמות להפרעות ריאתיות ארוכות טווח באופן עצמאי מ-O2 משלים הוא צורך קליני ומחקרי חשוב שלא נענה. עדויות מתחדשות מצביעות על כך ש-CPAP יילודים עלול לגרום להשפעות לוואי ארוכות טווח על תפקוד דרכי הנשימה ולתרום להפרעות צפצופים, דבר משמעותי שכן CPAP הפך לאמצעי התמיכה הנשימתית המועדף במאמצים למנוע רעילות חמצן2 כתוצאה מתוספת חמצן2. האתגרים הטכניים הקשורים במתן CPAP לבעלי חיים קטנים ומותאמים לגילם עיכבו את ההתקדמות שלנו בהבנת השפעות ה-CPAP (בין אם מועילים ובין אם מזיקים) על התפתחות הריאות. פתרנו את הבעיה הזו על ידי פיתוח מודל העכבר הניאונטלי הראשון של CPAP 10,11,12,14,15 שנמסר מדי יום (עם רמות שונות של CPAP למשך 3 שעות ליום) לעכברים ערים ולא מורדמים מהלידה ואילך, ובכך אפשרנו מחקר של רמות קליניות רלוונטיות של CPAP בשלב התפתחות ריאות הדומה לתינוקות פגים מאוד (~24-28 שבועות) שסביר שיקבלו CPAP 16, 17. ביצענו סריקות MRI במודל העכבר הניאונטלי ואישרנו ש-CPAP גורם לניפוח ריאות11 ושה-CPAP בשבוע הראשון לאחר הלידה גורם לעלייה ארוכת טווח (גיל 3 שבועות) בתגובתיות דרכי הנשימה (כלומר, שבועיים לאחר CPAP)10,11,12,14, מה שמתיישב עם צפצופים בפעוטות (3-4 שנים). כאן, אנו מציגים הדגמה מפורטת של מערכת ה-CPAP המותאמת אישית שלנו לעכברים שזה עתה נולדו ומתארים שיטה נוחה להערכת כיווץ דרכי הנשימה באמצעות שיטת ex vivo precision Lung Slice (PCLS).

ה-PCLS מספק הזדמנות מצוינת ונוחה לחקור מנגנוני היפר-ריאקטיביות בדרכי הנשימה והמסלולים המתאימים להם. באמצעות שיטת PCLS, דרכי הנשימה הבודדות מצומצמות בזמן אמת כדי למדוד את היצרות דרכי הנשימה בתגובה לכיווץ סימפונות כמו מתכולין, לאחר טיפול מוקדם בדרכי האוויר עם מעכבי קולטנים/תעלות ספציפיים. מחקרים אלו חשובים להבנת ההשלכות הפתופיזיולוגיות של CPAP בלידה מוקדמת, כדי לספק התערבויות ממוקדות ומעשיות המאפשרות אופטימיזציה של טיפול קליני נדרש תוך הפחתת השלכות פוטנציאליות לכל החיים.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ניסויים מבוצעים על עכברים בהריון בזמן, והם מנוטרים מדי יום כדי לקבוע את יום הלידה. עכברים מטופלים עם או בלי CPAP ב-21% מעלותל-2 בשבוע הראשון לחיים שלאחר הלידה. בדרך כלל הריאות מוסרות כהכנה למדידת תגובתיות AW באמצעות שיטת ה-PCLS המדויקת (PCLS) שבועיים לאחר CPAP, אם כי מדידות כאלה אפשריות כבר בימי P8 (מיד לאחר CPAP) או בבגרות. כל ההליכים בוצעו בהתאם להנחיות המכון הלאומי לבריאות (NIH) לטיפול ושימוש בבעלי חיים במעבדה, ואושרו על ידי ועדת הטיפול והשימוש בבעלי חיים באוניברסיטת קייס ווסטרן ריזרב.

1. הרכבת מסכת CPAP

  1. בנו מסכה בודדת מהקצה החתוך של מזרק באורך 5 מ"ל המכיל את מקטע נעילת לואר לחיבור הצינור כדי לאפשר העברת זרימת אוויר ולחץ חיובי לדרכי האוויר של העכבר (איור 1A).
  2. קדחו מראש את רכיב המזרק במסכה כדי להכיל לואר-לוק מושחל שמחובר למרפק, חיבור קוצים של Luer לצינור, וצינור אקווריום סטנדרטי (קוטר 3/8 אינץ').
  3. השתמש בצינור הצד כדי לאפשר זרימת אוויר אקסטרנטית לעבור דרך דליפה מתכווננת במורד הזרם כדי לקבוע את הלחץ הנגדי לריאות העכבר, ובמנומטר מותאם אישית למעקב אחר רמת ה-CPAP בזמן אמת.

2. עיצוב צווארון

  1. בנה את הקולר מחלקים חתוכים בקצות האצבעות של כפפות מעבדה סטנדרטיות קטנות. השתמש בו כדי לחבר את העכבר ליחידת המסכה.
  2. השתמש בחור-חור (1/4 אינץ') כדי ליצור חור בקצה קצה האצבע החתוכה, שיוצר פתח אחיד ואחיד בגודל כדי להתאים לפנים ולראש העכבר.
    הערה: החור-חור מבטיח גודל מסכה עקבי, אך נדרשים מנקבים גדולים יותר סביב P4 כדי להתאים לצמיחת העכבר.

3. בניית המנומטר

  1. בנו מנומטר משני פיפטות סרולוגיות חד-פעמיות המחוברות באמצעות צינורות אקווריום מעוקלים (איור 1A). ודא שהמנומטר מלא למחצה במים המכילים טיפה של צבע צבעוני כדי לסייע בהמחשת רמת ה-CPAP.
  2. חבר את המנומטר בטור ועם בקר זרימה (קצב זרימה ~600-700 מ"ל לדקה) והמסכה.

4. התקנת הקולר והמסכה על העכבר

  1. כדי להניח את הקולר על העכבר (בן יום אחד), קודם כל מקם אותו על קצה המסכה הפתוח, שצריך למתוח אותו בעקבות תמרון זהיר כדי להתאים לפנים ולראש העכבר.
  2. הכנס את פני העכבר דרך פתח הצווארון, שמרפה בעדינות ממצב המתיחה מעל הפנים/הראש. בגיל ~4 ימים, חתכו חריצים קטנים בפתח הקולר כדי לאפשר גדילה וראש העכבר הגדול יותר, אם כי מומלץ גם מכה גדולה יותר.

5. מתן CPAP למספר עכברים בו-זמנית

  1. יצר מערכת שתוכל לספק CPAP למספר (עד 10) עכברים יילודים באמצעות סדרת בקרי זרימה ומנומטרים (איור 1B). ספק את זרימת האוויר במעלה הזרם על ידי מיכל אוויר רגיל עם רגולטור סטנדרטי והעבר אותו דרך בקר זרימה שמספק את הזרימה הכוללת לכל מכשירי ה-CPAP ויחידות המסכה/צווארון.
  2. בובע את האוויר במאגר מים ללחות לפני שמעביר אותו ישירות ליחידות ה-CPAP, ונתן CPAP לכל בעל חיים באופן עצמאי.
    הערה: עכבר בקרה מקבל מסכה, אותה זרימת אוויר, אך ללא לחץ אחורי או CPAP.
  3. בצע את כל הניסויים על משטח חימום עם מים ממוחזרים בטמפרטורה ~38 מעלותצלזיוס כדי לשמור על טמפרטורת גוף יציבה.

6. ציר זמן

  1. עוקבים אחרי עכברים בהריון מדי יום כדי לקבוע את תאריך הלידה ולאחר מכן לבצע את סשן ה-CPAP הראשוני ביום הבא (P1 Days) למשך שעתיים (איור 2) כדי למזער את הזמן שבו הגורים רחוקים מסכר ההניקה.
  2. בימים הבאים (P2-P7), יש לבצע כל מפגש CPAP למשך 3 שעות. יש לבצע CPAP ליותר מ-7 ימים, במידת הצורך, ובכל רמת CPAP, אם כי 7 ימים של CPAP ב-6 ס"מ H2O משמשים באופן שגרתי.
  3. לאחר מכן, העריכו את בעלי החיים להשפעות CPAP על תגובתיות דרכי הנשימה, בין אם מיד לאחר (P8) סיום ה-CPAP (P7) או השפעות ארוכות טווח (למשל, P21 או בגרות), באמצעות הכנת חיתוך ריאה מדויק (סעיף 8).

7. קצירת רקמות והתכווצות דרכי הנשימה

  1. קציר ריאות לטכניקות מולקולריות או פיזיולוגיות (למשל, תגובת שרשרת פולימראז (PCR), Western Blots, אימונוהיסטוכימיה, RNASeq, פרוטאומיקה, מטבולומיקה וכו').
    הערה: הדגש העיקרי הוא על השפעות CPAP על כיווץ דרכי הנשימה, שניתן להעריך אותן ב-vivo (הרדמה ומאוורר מכנית, P21 ימים ומעלה) למכניקת מערכת נשימתית או אקס-ויבו באמצעות PCLS (P8 ימים ומעלה). לאחרון יש יתרונות משמעותיים בחקר תרכובות או סוכנים שמכוונים למסלולים ספציפיים שעשויים לא להתאים לשימוש במחקרי חיות .

8. חילוץ/הכנה מהריאה השלמה לשיטת פרוסת ריאה מדויקת (PCLS)

  1. הורד את העכבר באמצעות מנת יתר של הרדמה (הזרקה תוך-פריטוניאלית של תערובת קטמין/קסילאזין; 100 מ"ג/ק"ג/10 מ"ג/ק"ג, בהתאמה) כדי להכין את הריאות למדידות אקס-ביבו של תגובת דרכי הנשימה למתכולין שהוחל באמבטיה.
  2. הניחו את העכבר על הגב לקנולציה של קנה הנשימה באמצעות מזרק ממולא באגרוז. הכניסו את הקנולה דרך חתך קטן בצוואר התחתון והתקדמו ~3 מ"מ לפני שאתם מאובטחים בתפירה.
  3. הזריקו בעדינות אגרוז נוזלי (40 מעלות צלזיוס) לניפוח הריאות (0.4 מ"ל לעכברי P8; 0.8 מ"ל לעכברי P21) והניחו את העכבר במקרר למשך 30 דקות כדי לאפשר לאגרוז להתקרר ולהתגשם.

9. חתך ריאות בשיטת PCLS

  1. לאחר שהאגרוז התקרר, יש להטמיע אונה ריאה (המועדפת) באגרוז 2%, להניח אותו על ויברטום, לחתוך למקטעים של 300 מיקרון, ולטבול בתמיסת DMEM + Pen/Strep לדגירה לילית (5% CO2, 37°C).
  2. למחרת, שטוף את פרוסות הריאה ב-HBSS והתקן אותן בתא הקלטה להדמיה חיה של תגובות דרכי הנשימה לאתגר מתכולין.
    הערה: התוצאות המוצגות מייצגות טיפול נאיבי (ביקורת, כלומר, ללא CPAP) וטיפול ב-CPAP בלבד, ואין שימוש באגוניסטים או אנטגוניסטים/מעכבים.
    1. בצע הדמיית דרכי אוויר.
      1. מניחים את פרוסות הריאה על תא פרפוזיה מותאם אישית וכסו אותן בשכבת רשת דקה וקלה וכיסוי, שמוחזקים במקומם עם שומן סיליקון.
      2. לאחר מכן, התקן את תא ההקלטה המכיל את הפרוסה על מיקרוסקופ ופרפיוז (7 מ"ל לדקה) ברציפות עם HBSS בטמפרטורת החדר באמצעות משאבת פרפוזיה.
      3. השתמש במיקרוסקופ המותקן עם מצלמה כדי לזהות דרכי נשימה בודדות. לאחר תקופה ראשונית של 3 דקות של הקלטה בסיסית, יש לפרפיוז את התא בריכוזים הולכים וגדלים של מתכולין (2 דקות בכל ריכוז) ולרשום שינויים באזור לומן דרכי הנשימה באופן רציף.
    2. כמת את גודל דרכי הנשימה.
      1. זהה תמונה אחת (תוכנת ImageJ) של נתיב אוויר עבור ריכוז נתון של מתכולין (וקו בסיס) וכימות את אזור הלומן על ידי בחירת סף ההתאמה כדי להבטיח שהאזור תופס במלואו (איור 3A).
      2. לאחר מכן, יש להחיל את ההגדרות הללו על תמונות נוספות של אותו נתיב אוויר בריכוזים שונים (כלומר, אותו סף משמש עבור נתיב נשימה מסוים).
      3. לאחר מכן, בחרו את אזור הלומן למדידה באמצעות כלי מעקב השרביט (איור 3B), ולחצו על Ctrl + M (איור 3C) כדי לכמת אוטומטית את שטח הלומן בפיקסלים. חזור על כך עבור כל ריכוז מתכולין; הנתונים זמינים מספרית לייצוג גרפי עם תגובת דרכי האוויר המובעת כחלק מגודל הלומן הבסיסי (איור 3).
    3. גודל מדגם
      1. בחרו דרכי נשימה באקראי, וביצעו את התגובה למתכולין על אזור AW/ריאה אחד, אם כי בדרך כלל ניתן להעריך מספר מקטעים לכל בעל חיים. לכן, קבוצות הטיפול יכולות לכלול מספר דרכי נשימה/בעלי חיים ממספר גורים.
      2. סווגו את דרכי האוויר לגדולות (>0.05 מ"מ 2) או קטנות (<0.05 מ"מ 2), שכן כבר נקבע ש-CPAP משפיע על דרכי אוויר בגדלים שונים.

10. משלוח סמים

  1. לנתח באמצעות חתכים שנחשפו (או מודגרים עם) מסלולים ספציפיים של siRNA במשך 48 שעות לאחר הכריתה והחתכה.
    הערה: אגוניסטים ואנטגוניסטים המיועדים לקולטנים שונים יכולים גם להיות מיושמים בנוחות על חלקי הריאה באופן חד, מה שמוביל ליתרון אם תרכובות אלו אינן מתאימות או בטוחות למתן בתוך החיים .
  2. חלופה נוספת היא שניתן לקבוע את ניפוח הריאות (פורמלין) בלחצים סטנדרטיים של נפיחה (25 ס"מ H2O), לשמרן, ולהכין אותן לאימונוהיסטוכימיה וצביעה לניתוח מאוחר יותר באמצעות מיקרוסקופיה קונפוקלית.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ניתוח MRI של נפח הריאות במהלך CPAP יילודים
ניתוח MRI שימש להמחשת שינויים בנפח הריאות בעכברים בני 3 ימים, ללא הרדמה ונושמים ספונטנית (n = 4 עכברים). נפח הריאות גדל עם עליית לחצי האינפלציה (כלומר, CPAP) עד 9 ס"מ H2O (איור 4A). תמונות מייצגות של עכבר בן 3 ימים עם CPAP 2 O בגודל 0 ו-6 ס"מ H מוצגות גם (איור 4B,C). מטרת הניתוח הייתה לוודא ש-CPAP מנפח את הריאות, לא את אזור הבטן...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

CPAP הוא אמצעי תמיכה נשימתית הכרחי לתינוקות פגים עם מצוקה נשימתית. CPAP מונח על נשימה ספונטנית ומשפר את החמצון המערכתי על ידי שמירה על נפח הריאות גבוה ומונע קריסה אלוואולרית ואטלקזיס. לכן, קיימים יתרונות מצילי חיים משמעותיים ל-CPAP, והוכח כי הוא משפר את התפתחות האלוואולרים, אם כי היתרונות עשויים להיות תלויים בחומרת ובמשך ה-CPAP 6,18,19,20. עם זאת, בשנים האחרונ...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

למחברים אין מה לחשוף.

תודות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

המחקרים מומנו ממענקים מהמכון הלאומי לבריאות R01 HL177837 ו-R01 HL056470.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
מזרק 5 מ"לפישר סיינטיפיק149556458
מזרק 1 מ"לפישר סיינטיפיק309659להזריק אגרוז דרך קנולה
חור 1/4 אינץ'מקמאסטר קאר3427A57
תבניות הטמעה בגודל 22 x 22 x 20פישר סיינטיפיק22-19
מחטי 23 Gפישר סיינטיפיק305193כדי לחבר קנולה למזרק, יידרשו גדלים אחרים לגילאים אחרים מלבד P21 
פיפטות סרולוגיות של 2 מ"לפישר סיינטיפיק13-678-12cליצירת מואנומטר
שסתומי דליפה מתכוונניםכל חנות חיות מחמדhttps://www.petco.com/shop/
en/petcostore/product/imagi
שסתום בקרת אוויר טריום
צינורות אקווריוםכל חנות חיות מחמדhttps://www.petsmart.com/fish/
מסננים ומשאבות/אוויר-מים
-משאבות/טופ-פינ-אקווריום-איירליי
-tubing-5291863.html
מצלמהאמסקופMU300
צינור קנולהפישר סיינטיפיק427411לעכברים P21. יידרשו גדלים נוספים לגילאים אחרים.   הצינור צריך להתאים היטב בקנה הנשימה
כיסויי כיסויפישר סיינטיפיק12-541-01418 מ"מ x 18 מ"מ
DMEM:F12Invitrogen11039-021
בקרי זרימהכלי מפתחGS10510AVBלזרימת אוויר לעכברים בודדים
מד זרימהאוונטורMFLX68560-04לזרימת אוויר לכל המערכת
Gaymar T Pumpבריינטרי סיינטיפיקTP-700למדידת טמפרטורת גוף במהלך CPAP
תמיסת מלח מאוזנת של הנקספישר סיינטיפיקMT-20023CVלדלל ל-1x לשימוש
ImageJNIHהורדה חופשיתhttps://imagej.net/ij/download.html
מידה קטנה של כפפות לטקספישר סיינטיפיקMF-300-Sלייצור מסכות CPAP
נקודת מטלינג נמוכה אגרוזInvitrogen165200-100
רשתאמזוןhttps://www.amazon.com/Top-
גזירה-פוליאסטר-שיער סוס
-מוכר/dp/B01AC93LJ0/ref=sr
_1_fkmr2_1?keywords=dritz%2
Bpolyester%2Bhorsehair%2Bbr
aid& qid=1562072725& S=GateW
AY& sr=8-1-fkmr2& th=1
מתכוליןמיליפורA2251
מיקרוסקופלייקהDMLFS
עט/סטרפטוקוקInvitrogen15140-148
משאבת פרפוזיהמנגנון הרווארד70-2027
תא הקלטותוורנר אינסטרומנטסRC-27או משהו דומה
כרית חימום רב-פעמיתבריינטרי סיינטיפיקTP-Rלשימוש עם משאבת T גיימאר
גריז סיליקון (Molykote111)אמזוןhttps://www.amazon.com/Molykote
-רכיבי סיכה-עמידים-
נדידה/dp/B0DYDFLXGZ/ref=sr_1
_1_sspa?crid=2D4LQC7SRX07P&
dib=eyJ2IjoiMSJ9.HcWWXlt8ThxcB
eGCZ6iH5jwumyClyFGkW141klcjnn
OH3hc60r0hy53Ji-9HDW0TtH33nJ-
7UmalEzJGg59qB2gzsGNzFMelwG< br/> aBpsTElSrogzwQv27amBxERmXW
P3eedvi9rAYS1oy_HNesZTAxjTbqku
6PxkC7t24srDUq8mHRpDFor4I0iiRM
j6Ij2TWdlQf07ccTIMJ1l4n90nHxPop
9Nwh77ufMeWY2vu5B3to.. 0mfWIF
3_PrmciPZhO1EAE6RGiNj16v7l-v
CH1cqec1Y& dib_tag=se& מילת מפתח
s=molykote+111& qid=1743607899
& sprefix=molykote+111%2Caps%2
C102& sr=8-1-spons& sp_csd=d2lkZ
2V0TmFtZT1zcF9hdGY& psc=1
לוחות 6 בארות סטרילייםפישר סיינטיפיק3516לגידול פרוסות
חוט תפר 3-0פישר סיינטיפיקSP117לקשור את הקנולה לקנה הנשימה
אביזרי צינורותמנגנון הרווארד72-1406
ויברטום (מקל פלקו)טד פלה11000או שווה ערך

מקורות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Hibbs, A. M., et al. One-year respiratory outcomes of preterm infants enrolled in the nitric oxide (to prevent) chronic lung disease trial. J Pediatr. 153 (4), 525-529 (2008).
  2. Holditch-Davis, D., Merrill, P., Schwartz, T., Scher, M. Predictors of wheezing in prematurely born children. J Obstet Gynecol Neonatal Nurs. 37 (3), 262-273 (2008).
  3. Kwinta, P., Pietrzyk, J. J. Preterm birth and respiratory disease in later life. Expert Rev Respir Med. 4 (5), 593-604 (2010).
  4. Martin, R. J., Fanaroff, A. A. The preterm lung and airway: Past, present, and future. Pediatr Neonatol. 54 (4), 228-234 (2013).
  5. Attar, M. A., Donn, S. M. Mechanisms of ventilator-induced lung injury in premature infants. Semin Neonatol. 7 (5), 353-360 (2002).
  6. Doyle, L. W., et al. Ventilation in extremely preterm infants and respiratory function at 8 years. N Engl J Med. 377 (4), 329-337 (2017).
  7. Sahni, M., Bhandari, V. Invasive and noninvasive ventilatory strategies for early and evolving bronchopulmonary dysplasia. Semin Perinatol. 47 (6), 151815(2023).
  8. Williams, E. E., Greenough, A. Lung protection during mechanical ventilation in the premature infant. Clin Perinatol. 48 (4), 869-880 (2021).
  9. Gustafson, B., Britt, R. D. Jr, Eisner, M., Narayanan, D., Grayson, M. H. Predictors of recurrent wheezing in late preterm infants. Pediatr Pulmonol. 59 (1), 181-188 (2024).
  10. Macfarlane, P. M., et al. Cpap protects against hyperoxia-induced increase in airway reactivity in neonatal mice. Pediatr Res. 90 (1), 52-57 (2021).
  11. Mayer, C. A., et al. CPAP-induced airway hyper-reactivity in mice is modulated by hyaluronan synthase-3. Pediatr Res. 92 (3), 685-693 (2022).
  12. Mayer, C. A., Martin, R. J., Macfarlane, P. M. Increased airway reactivity in a neonatal mouse model of continuous positive airway pressure. Pediatr Res. 78 (2), 145-151 (2015).
  13. Loftus, P. A., Wise, S. K. Epidemiology and economic burden of asthma. Int Forum Allergy Rhinol. 5 Suppl 1, S7-S10 (2015).
  14. Mayer, C. A., et al. Calcium-sensing receptor and CPAP-induced neonatal airway hyperreactivity in mice. Pediatr Res. 91 (6), 1391-1398 (2021).
  15. Reyburn, B., et al. The effect of continuous positive airway pressure in a mouse model of hyperoxic neonatal lung injury. Neonatology. 109 (1), 6-13 (2016).
  16. Amy, R. W., Bowes, D., Burri, P. H., Haines, J., Thurlbeck, W. M. Postnatal growth of the mouse lung. J Anat. 124 (Pt 1), 131-151 (1977).
  17. Berger, J., Bhandari, V. Animal models of bronchopulmonary dysplasia. The term mouse models. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 307 (12), L936-L947 (2014).
  18. Mamidi, R. R., Mcevoy, C. T. Extending CPAP in stable preterm infants to increase lung growth and development as measured by pulmonary function testing. Semin Perinatol. 49 (5), 152059(2025).
  19. Mcevoy, C. T., et al. Extended continuous positive airway pressure in preterm infants increases lung growth at 6 months: A randomized controlled trial. Am J Respir Crit Care Med. 211 (4), 610-618 (2025).
  20. Mcevoy, C. T., et al. Nasal CPAP increases alveolar number in a rhesus monkey model of moderate prematurity. Eur Respir J. 65 (4), 2400727(2025).
  21. Kollareth, D. J. M., Sharma, A. K. Precision cut lung slices: An innovative tool for lung transplant research. Front Immunol. 15, 1504421(2024).
  22. Koziol-White, C., Gebski, E., Cao, G., Panettieri, R. A. Jr Precision cut lung slices: An integrated ex vivo model for studying lung physiology, pharmacology, disease pathogenesis and drug discovery. Respir Res. 25 (1), 231(2024).
  23. Studley, W. R., Lamanna, E., Nold-Petry, C. A., Qin, C. X., Bourke, J. E. Insights from precision-cut lung slices-investigating mechanisms and therapeutics for pulmonary hypertension. Respir Res. 26 (1), 220(2025).
  24. Belik, J., Jankov, R. P., Pan, J., Tanswell, A. K. Chronic O2 exposure enhances vascular and airway smooth muscle contraction in the newborn but not adult rat. J Appl Physiol (1985). 94 (6), 2303-2312 (2003).
  25. Kuper-Sassé, M. E., et al. Prenatal maternal lipopolysaccharide and mild newborn hyperoxia increase intrapulmonary airway but not vessel reactivity in a mouse model. Children (Basel). 8 (3), 195(2021).
  26. Wang, H., et al. Severity of neonatal hyperoxia determines structural and functional changes in developing mouse airway. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 307 (4), L295-L301 (2014).
  27. Onugha, H., et al. Airway hyperreactivity is delayed after mild neonatal hyperoxic exposure. Neonatology. 108 (1), 65-72 (2015).
  28. Ragionieri, L., et al. Preterm rabbit-derived precision cut lung slices as alternative model of bronchopulmonary dysplasia in preclinical study: A morphological fine-tuning approach. Ann Anat. 246, 152039(2023).
  29. Ressmeyer, A. R., et al. Characterisation of guinea pig precision-cut lung slices: Comparison with human tissues. Eur Respir J. 28 (3), 603-611 (2006).
  30. Lambermont, V. A., et al. Comparison of airway responses in sheep of different age in precision-cut lung slices (pcls). PLoS One. 9 (9), e97610(2014).
  31. Barton, A. K., Niedorf, F., Gruber, A. D., Kietzmann, M., Ohnesorge, B. Pharmacological studies of bronchial constriction inhibited by parasympatholytics and cilomilast using equine precision-cut lung slices. Berl Munch Tierarztl Wochenschr. 123 (5-6), 229-235 (2010).
  32. Vietmeier, J., et al. Reactivity of equine airways--a study on precision-cut lung slices. Vet Res Commun. 31 (5), 611-619 (2007).
  33. Seehase, S., et al. LPS-induced lung inflammation in marmoset monkeys - an acute model for anti-inflammatory drug testing. PLoS One. 7 (8), e43709(2012).
  34. Seehase, S., et al. Bronchoconstriction in nonhuman primates: A species comparison. J Appl Physiol (1985). 111 (3), 791-798 (2011).
  35. Wohlsen, A., et al. The early allergic response in small airways of human precision-cut lung slices. Eur Respir J. 21 (6), 1024-1032 (2003).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

CPAP
הסרטון יגיע בקרוב

מאמרים קשורים