כאן אנו מעריכים את ההשפעות של ביו-פחם שמקורו בפסולת משאריות קפה, כשות משומשת, עץ אשוח ובדלי סיגריות על בריאות הקרקע, מעריכים פעילות מיקרוביאלית, צמיחת צמחים ורעילות אקולוגית פוטנציאלית של חסרי חוליות.
מאמר מחקר
כאן אנו מעריכים את ההשפעות של ביו-פחם שמקורו בפסולת משאריות קפה, כשות משומשת, עץ אשוח ובדלי סיגריות על בריאות הקרקע, מעריכים פעילות מיקרוביאלית, צמיחת צמחים ורעילות אקולוגית פוטנציאלית של חסרי חוליות.
ביו-פחם הוא המוצר המתקבל על ידי חימום ביומסה באמצעות פירוליזה בטמפרטורות גבוהות והתגלה כתיקון קרקע נפוץ המבוסס על הפוטנציאל שלו לשפר את תכונות הקרקע כגון אגירת מים, pH וזמינות חומרים מזינים. עם זאת, ביו-פחם המוכן מחומרי פסולת מסוימים יכול להפעיל השפעות אקוטוקסיקולוגיות שליליות על ביוטה בקרקע. המטרה הכוללת של מחקר זה הייתה להעריך את ההשפעה של ביו-פחם נבחרים שמקורם בקפה טחון, כשות משומשת, עץ אשוח ובדלי סיגריות על בריאות הקרקע, תוך התמקדות בפעילות מיקרוביאלית, צמיחת צמחים ורעילות אקולוגית פוטנציאלית. קרקעות מתוקנות ביו-פחם הודגרו במשך 15 יום בסך הכל, ובוצעה סדרה של בדיקות, כולל פעילות דהידרוגנאז, כימות חיידקים, בדיקה ביולוגית של פיטוטוקסיות באמצעות זרעי סינאפיס אלבה, ובדיקת רעילות אקולוגית באמצעות Enchytraeus albidus. תיקוני ביו-פחם יכולים לשנות את ה-pH של הקרקע ולהשפיע על אגירת המים. ביו-פחם של בדלי סיגריות הראה את הגירוי הגבוה ביותר של מושבות חיידקים, עם ספירות שהגיעו עד 1.00 ×-106 CFU/mL בהשוואה ל-8.47 ×-10 4 CFU/mL על פני שכפולי ביקורת, בעוד שביו-פחם טחון קפה הגביר את פעילות הדהידרוגנאז (3.53 ×-10-3 mU/g), מה שמרמז על יכולת מטבולית מיקרוביאלית גבוהה יותר. בדיקות פיטוטוקסיות הצביעו על כך שצמיחת הצמחים הוגברה על ידי כשות (162.96%) וביו-פחם מעץ אשוח (206.66%), בעוד ששיעורי יישום גבוהים יותר של ביו-פחם בדלי סיגריות דיכאו את צמיחת השתילים (עיכוב של 62.36%). בדיקת הרעילות האקולוגית עם Enchytraeus albidus הצביעה על כך שלכל הביוצ'ארים הייתה השפעה מזיקה למעט הביוצ'אר של בדל הסיגריה (גירוי של 33%). ממצאי מחקר זה מדגישים כי השפעת הביו-פחם על בריאות הקרקע תלויה במקור, עם השלכות חשובות על ניהול הקרקע. המחקר חושף את הצורך בהתאמות יישום ביו-פחם המבוססות על ריכוז וסוג כדי למקסם את יתרונותיו תוך מזעור הסכנות הפוטנציאליות למערכות הקרקע.
בשנים האחרונות, ביו-פחם התגלה כתיקון קרקע רב תכליתי וידידותי לסביבה המיושם בחקלאות1, וכאמצעי להפחתת ההתחממות הגלובלית2. בעוד העולם מתמודד עם השפלת קרקעות, ירידה בפריון היבולים ופליטת פחמן מוגברת, ביו-פחם התגלה כחלופה ירוקה לדשנים קונבנציונליים3 וגישות קיבוע פחמן4. בניגוד לדשנים סינתטיים, ביו-פחם מטבעו מגביר את פוריות הקרקע5, מפחית את אובדן החומרים המזינים6 ומגביר את אגירת המים7, מה שהופך אותו לשימושי מאוד באזורים עם קרקעות מושפלות או בעלות פוריות נמוכה. בנוסף, ביו-פחם משפר את תפקוד החיידקים על ידי מתן בית גידול יציב ומקור פחמן למיקרואורגניזמים מועילים בקרקע, החשובים לפירוק חומר אורגני ולמחזור חומרים מזינים8.
מלבד חקלאות, ביו-פחם משמש גם כפתרון ירוק לסילוק פסולת מכיוון שהוא ממיר שאריות ביומסה כגון שאריות חקלאיות, שאריות יער ופסולת מזון לחומר פחמן ארוך טווח9. זה לא רק מגביל את הצטברות הפסולת אלא גם מקזז גזי חממה באמצעות לכידת פחמן, שאחרת היה בורח כפחמן דו חמצני (CO2) או מתאן (CH4). בהשוואה למנגנונים אחרים לקיבוע פחמן, ביו-פחם מציע אסטרטגיית קרקע משולבת לטווח ארוך המפחיתה אתה-CO2 האטמוספרי ותומכת בקרקעות בריאות כמו גם בתשואות גבוהות10.
למרות היתרונות המוכרים שלו - כגון שיפור פוריות הקרקע, יכולת החזקת מים ותכונות מעוררות מיקרוביאליות - ישנם חששות מתמשכים לגבי השפעות אקוטוקסיקולוגיות פוטנציאליות על ביוטה11 בקרקע. בעוד שביו-פחם חיובי בדרך כלל לפעילות מיקרוביאלית ומגוון, חומרי הזנה או תנאי עיבוד מסוימים יכולים לייצר תרכובות רעילות הפוגעות במיקרואורגניזמים בקרקע ובתפקודם האקולוגי12.
כדי להעריך את הסיכונים הפוטנציאליים של ביו-פחם, יש צורך בהערכות אקוטוקסיקולוגיות. חיידקים (מפרקים), צמחים (יצרנים) וחסרי חוליות (צרכנים) הם בין הקבוצות הטקסונומיות המשמשות במחקר על רעילות אקולוגית של קרקע ומשקעים. טקסונים אלה מייצגים סביבות יבשתיות ומימיותכאחד 13.
הפונקציה המשלימה של Enchytraeids עם תולעי אדמה בתפקוד המערכת האקולוגית של הקרקע היא הבסיס לפיתוח בדיקות ביולוגיות עבור אורגניזמים אלה. במבחנים ביולוגיים, אנכיטראידים משמשים כמודלים ביולוגיים יבשתיים לחקירת ההשפעות של כימיקלים כמו חומרי הדברה (למשל, דימתואט, אטרזין, קרבנדזים) ומתכות קורט (למשל, עופרת, אבץ, נחושת, קדמיום)14.
בנוסף למבחנים מבוססי אורגניזם, פעילות אנזימים מיקרוביאלית היא דרך נוספת להעריך את בריאות הקרקע. פעילות דהידרוגנאז בקרקע היא אינדיקטור לפעילות חמצונית מיקרוביאלית15. בדיקת דהידרוגנאז בתערובות אדמה-ביו-פחם יעילה לכימות פעילות מיקרוביאלית ובריאות הקרקע הכללית. מכיוון שאנזימי דהידרוגנאז מעורבים בנשימה מיקרוביאלית, פעילותם משקפת עד כמה האדמה פעילה מבחינה ביולוגית. זה שימושי להערכת איכות הקרקע, פוריות והשפעת הביוצ'אר על חיידקים. הבדיקה מודדת את ההפחתה של טריפנילטטרזוליום כלוריד (TTC) לטריפניל פורמזאן (TPF), אשר נקבעת באופן ספקטרופוטומטרי. ייצור TPF גבוה יותר הוא אינדיקטור לפעילות מיקרוביאלית גבוהה יותר.
אנו מצפים שלביו-פחם המיוצר מחומרי גלם שונים יהיו השפעות ייחודיות על בריאות הקרקע. השפעות אלו יהיו תלויות במאפיינים הכימיים והפיזיקליים שלהם, שעשויים לשנות את הפרמטרים הפיזיקוכימיים של הקרקע, ובכך להשפיע על פעילות מיקרוביאלית, צמיחת צמחים ורעילות אורגניזמים בקרקע.
במחקר זה, אנו מעריכים את ההשפעות של ביו-פחם שמקורו בפסולת על מדדי בריאות קרקע מרובים, כולל pH, פעילות מיקרוביאלית, גדילת צמחים והישרדות חסרי חוליות (איור 1). שלושה ריכוזים (1%, 5%, 10% w/w) של ארבעה ביו-פחמים שונים שמקורם בפסולת עורבבו עם אדמת הגן והוערכו עבור ההשפעות שהוזכרו לעיל. תכולת הלחות, ה-pH ובחירת אורגניזמי הבדיקה נשלטו בקפידה כדי להבטיח את הרלוונטיות האקולוגית של המחקר.
1. הכנת ביו-פחם
הערה: עיין בטבלת החומרים לפרטים על הביוצ'ארים המשמשים כאן כחומרי בדיקה. תנאי פירוליזה, הרכב יסודות ונתוני ניתוח קרובים סופקו על ידי היצרנים (טבלה 1).
זהירות: בצע תמיד פירוליזה במעבדה מאווררת היטב עם מערכת פליטה או אדים מתאימה. ללבוש כפפות עמידות בחום, מעיל מעבדה, משקפי מגן וללבוש מגן פנים במידת הצורך.
טבלה 1: מאפיינים בסיסיים של הביוצ'ארים שנבדקו. אנא לחץ כאן להורדת טבלה זו.
2. אפיון כימי של ביו-פחם
3. הכנת תערובות אדמה-ביו-פחם
4. מדידת pH של תערובות אדמה-ביו-פחם
5. מבחן רעילות Enchytraeus albidus

6. מבחן פיטוטוקסיות

7. כימות מושבת חיידקים

8. קביעת חומר יבש (DM)
הערה: השתמש בכפפות עמידות בחום בעת טיפול בקערות חמות.

9. בדיקת פעילות דהידרוגנאז (DHA).


איור 1: ייצוג סכמטי של תהליכי עבודה ניסיוניים. אנא לחץ כאן כדי להציג גרסה גדולה יותר של איור זה.
אפיון כימי
הביוצ'ארים הראו הבדלים משמעותיים בהרכב היסודות (טבלה 2). סידן (Ca) ואשלגן (K) היו הגבוהים ביותר בביו-פחם של בדלי סיגריות וכשות. ביו-פחם מעץ אשוח הכיל הכי הרבה אלומיניום (Al) וברזל (Fe). נחושת (Cu) ומגנזיום (Mg) הועשרו מאוד בביו-פחם כשות. עופרת (Pb), קדמיום (Cd) ומתכות קורט אחרות נמצאו בכמויות נמוכות בכל הדגימות.
טבלה 2: ההרכב הכימי של הביוצ'ארים. תכולת היסוד העיקרית של הביוצ'ארים השונים ששימשו במחקר. אנא לחץ כאן להורדת טבלה זו.
שונות ב-pH לאורך תקופת הדגירה
בכל הטיפולים, ה-pH של תערובות אדמה-ביו-פחם נטה לעלות מעט עם הזמן (איור 2). ערך ה-pH הגבוה ביותר נרשם עבור התערובת עם ביו-פחם בדלי סיגריות ב-10% w/w, והגיע ל-9.48 ביום ה-15; טיפול זה הציג את העלייה הגדולה ביותר לאורך זמן. ביו-פחם טחון קפה ייצר גם הוא עלייה הדרגתית, עם pH מקסימלי של 8.94 ב-10% w/w ביום 15. ביו-פחם כשות העלה את ה-pH ב-16.57%, עם מקסימום של 9.20 ב-10% w/w. לעומת זאת, תערובת הביוצ'אר מעץ אשוח הגיעה ל-pH של 8.56 ב-10% w/w. הביקורת הראתה את ה-pH הנמוך ביותר, שנע בין 6.57 ל-7.66 עם שינוי מינימלי לאורך זמן.

איור 2: pH משתנה לאורך זמן בתערובות אדמה-ביו-פחם. pH הקרקע נמדד ביום 0, 10 ו-15 עבור כל תיקון ביו-פחם ב-1%, 5% ו-10% w/w. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של נתון זה.
אגירת מים וירידה במשקל
יכולת אגירת המים בכל סוגי הביוצ'אר הייתה נמוכה יותר מאדמת הביקורת ללא ביו-פחם (איור 3). הביקורת איבדה 3.67% ממשקלה במשך 15 ימים, מה שמצביע על אגירת המים הגבוהה ביותר. מבין הביו-פחמים, לטיפול בבדל הסיגריות היה איבוד המים הנמוך ביותר, ירידה של 5.89% לעומת הדגירה, ולכן השמירה הגדולה ביותר בקרב ביו-פחם. דפוס דומה אך מתון יותר נצפה עם ביו-פחם כשות (ירידה כוללת של 9.22% במשקל, עם הפסדים גדולים יותר בריכוזים גבוהים יותר). ביו-פחם טחון קפה הראה את הירידה הגדולה ביותר במשקל (עד 16.56%), מה שמצביע על אגירת המים הנמוכה ביותר. תערובת עץ האשוח איבדה בממוצע 10.22%.

איור 3: ירידה במשקל של תערובות אדמה-ביו-פחם במהלך הדגירה. שינוי משקל כאינדיקטור לאגירת מים במשך 15 יום עבור כל הביו-פחם והריכוזים. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.
E. בדיקת רעילות ורבייה של אלבידוס
הרבייה של E. albidus ב-5% w/w biochar הראתה תלות ניכרת בחומרי הזנה. בבקרת הקרקע ב-OECD, האוכלוסייה גדלה מ-15 ל-24 (עלייה של 60%, איור 4). ביו-פחם מעץ אשוח הביא ל-7 שורדים בלבד (עיכוב של 53%, איור 5). כשות וביו-פחם טחון קפה הניבו כל אחד 12 שורדים (20% עיכוב, איור 5). ביו-פחם של בדלי סיגריות עורר רבייה ב-33%, עם סך של 20 תולעים, כולל צאצאים.

איור 4: שינוי אוכלוסייה נטו של E. albidus באדמה שטופלה בביו-פחם. ספירת תולעים ראשונית וסופית לאחר 5 ימים. נבדק ריכוז של 5% w/w של כל ביו-פחם. הנתונים מייצגים ממוצע ± סטיית תקן (n = 3). אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.

איור 5: השפעות רעילות או ממריצות על E. albidus. השפעה נטו על התולעים בהשוואה לביקורת. ערכים חיוביים מראים עיכוב; ערכים שליליים מראים גירוי. הנתונים מייצגים סטיית תקן ממוצעת ±. אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.
פיטוטוקסיות
התארכות השורשים ב-S. alba נמדדה לאחר דגירה של 10 ימים ב-1%, 5% ו-10% w/w (איור 6). בקרקע לא מתוקנת, אורך השורש הממוצע היה 237 מ"מ. ביו-פחם טחון קפה ב-1% w/w ייצר גירוי של 79.16%; ריכוזים גבוהים יותר גרמו לעיכוב, עד 47.08% ב-5% משקל/לבן. ביו-פחם מעץ אשוח עורר צמיחה בכל הריכוזים, והגיע לשיא של 206.66% ב-10% w/w. ביו-פחם בדל סיגריות הניב גירוי של 41.01% ב-1% w/w, אך עיכב צמיחה ב-5% ו-10% w/w, והגיע ל-62.36% עיכוב ב-10% w/w. ביו-פחם כשות עורר צמיחה בכל השיעורים (38.97%, 31.75% ו-162.96% ב-1%, 5% ו-10% w/w, בהתאמה).

איור 6: השפעות פיטוטוקסיות על סינאפיס אלבה. עיכוב או גירוי של צמיחת שורשים ביחס לבקרה לאחר 10 ימי צמיחה בכל טיפולי הביוצ'אר. ערכים חיוביים מראים עיכוב; ערכים שליליים מראים גירוי. הנתונים מייצגים ממוצע ± סטיית תקן (n = 3). אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.
כימות מושבת חיידקים
ספירת מושבות החיידקים הוערכה לאחר 10 ימים (איור 7). הביקורת הייתה בממוצע 8.47 × 104 CFU/mL. ביו-פחם קפה הניב 7.33 ×10 4 CFU/mL ב-1% w/w ועלה ל-1.18 ×-105 ו-1.50 ×-105 CFU/mL ב-5% ו-10% w/w, בהתאמה. ביו-פחם מעץ אשוח נתן 1.97 ×10 5 CFU/mL ב-1% w/w, ירד ל-9.73 ×-104 ו-4.93 ×-104 CFU/mL ב-5% ו-10% w/w. ביו-פחם בדלי סיגריות ייצר 5.40 ×10 4 CFU/mL ב-1% w/w והגירוי הגבוה ביותר ב-10% w/w (1.00 ×-106 CFU/mL). ביו-פחם כשות הראה גירוי קל בכל הריכוזים, והגיע לשיא של 1.07 ×-105 CFU/mL ב-5% w/w.

איור 7: גידול חיידקים באדמה שטופלה בביו-פחם. CFU/מ"ל חיידקי לאחר 10 ימי דגירה לכל הטיפולים והריכוזים. בקרה כלולה להשוואה. הנתונים מייצגים ממוצע ± סטיית תקן (n = 3). אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.
פעילות דהידרוגנאז
ביו-פחם טחון קפה ייצר את פעילות הדהידרוגנאז הגבוהה ביותר על פני ריכוזים, שהגיעה לשיא של 1% w/w (3.53 ×-10-3 mU/g) ונותרה דומה ב-5% ו-10% w/w (2.38 ×-10-3 ו-2.62 ×-10-3 mU/g) (ראה איור 8). ביו-פחם כשות שיפר את הפעילות ב-1% w/w (2.39 ×-10-3 mU/g) אך ירד ב-5% (6.34 ×-10-4 mU/g) והפך שלילי ב-10% w/w (-8.30 ×-10-4 mU/g). ביו-פחם בדל סיגריות היה חיובי ב-1% w/w (1.29 ×-10-3 mU/g) וירד ל-7.26 ×-10-4 ו-8.53 ×-10-4 mU/g ב-5% ו-10% w/w. ביו-פחם מעץ אשוח היה שלילי בכל הריכוזים (-5.53 ×-10-4 ו-5.19 ×-10-4 mU/g ב-1% ו-5% w/w; -3.11 ×-10-4 mU/g ב-10% w/w), ונותר נמוך מקבוצת הביקורת.

איור 8: פעילות דהידרוגנאז באדמה מתוקנת בביו-פחם. פעילות אנזימים מיקרוביאלית בכל סוגי הביוצ'אר והריכוזים. הערכים הם יחסיים לאדמת בקרה ללא תוספת ביו-פחם. ערכים חיוביים מצביעים על פעילות אנזימים גבוהה יותר בהשוואה לקבוצת הביקורת, וערכים שליליים מצביעים על פעילות אנזימים נמוכה יותר מזו של קבוצת הביקורת. הנתונים מייצגים ממוצע ± סטיית תקן (n = 3). אנא לחץ כאן לצפייה בגרסה גדולה יותר של איור זה.
ראה טבלה 3 וטבלה 4 לסיכום התוצאות.
טבלה 3: השפעות ביו-פחם על pH הקרקע ואגירת מים. מציג ערכי pH ראשוניים וסופיים, ΔpH ו-% אובדן מים במהלך הדגירה. אנא לחץ כאן להורדת טבלה זו.
טבלה 4: סיכום ההשפעות הביולוגיות ותוצאות DHA. נתונים משולבים על רביית תולעים, פיטוטוקסיות, ספירת חיידקים ופעילות אנזימים עבור כל הטיפולים.
מצביע על גירוי ומעיד
על עיכוב. עבור תוצאות DHA, ערכים חיוביים מצביעים על פעילות אנזימים גבוהה יותר בהשוואה לביקורת וערכים שליליים מצביעים על פעילות אנזימים נמוכה יותר מאשר קבוצת הביקורת. אנא לחץ כאן להורדת טבלה זו.
זמינות נתונים:
הנתונים יועלו למאגר הציבורי: DOI/URL: https://doi.org/10.6084/m9.figshare.30128803.v1
התערובת של אדמה וביו-פחם טחון קפה משומש הראתה בסיסיות גבוהה, עם pH של 8.94, התואם ל-pH שדווח בעבר של 9.419. הביוצ'אר גם הציג את העלייה הגבוהה ביותר בירידה במשקל בהשוואה לדגימת הביקורת, מה שמעיד על יכולת שימור לחות נמוכה, אשר ככל הנראה נובעת משטח הפנים הנמוך שלו, מה שמגביל את נטיית ספיחת המים20,21. תכונות פיזיקליות אלה יצרו תנאים לא נוחים ל-E. albidus, וגרמו לעיכוב של 20% בהישרדות וברבייה של תולעים.
בבדיקות פיטוטוקסיות, S. alba הראה גירוי של 79.16% בריכוז של 1% w/w, בעוד שבריכוזים גבוהים יותר, למשל, 5% w/w, הביוצ'אר עיכב את התארכות השורשים ב-47.08%. זה עולה בקנה אחד עם דיווחים22 שההשפעות הפיטוטוקסיות של ביו-פחם טחון קפה על Lactuca sativa נגרמו על ידי חומצות קרבוקסיליות. יתר על כן, מחקרים הראו כי פנולים מסיסים וחומצות קרבוקסיליות משבשים גם את הובלת האוקסין, מה שמביא לסף פיטוטוקסי23.
ספירת מושבות החיידקים גדלה עם עלייה בריכוז הביוצ'אר של הקפה (1.50 ×-10-5 CFU/mL בריכוז של 10% משקל/לילה), מה שמצביע על כך שביו-פחם זה סיפק תנאים נוחים לחיידקים הניתנים לגידול. ביו-פחם קפה הראה גם את פעילות ה-DHA הגבוהה ביותר (3.53 ×-10-3 mU/g), מה שמצביע על כך שהוא עורר אוכלוסיות חיידקים ניתנות לגידול ולא ניתנות לגידולים. זה נתמך עוד על ידי מחקרים24 שצפו בהשפעות המועילות של ביו-פחם קפה על הפעילות האנזימטית בקרקע.
ביו-פחם כשות גרם לעלייה באלקליות הקרקע ולירידה ממוצעת מתונה במשקל (10%). בבדיקות פיטוטוקסיות, הביוצ'אר הועיל לגירוי התארכות שורשים, במיוחד בריכוזים גבוהים יותר (גירוי של 162.96%). לגבי פעילות מיקרוביאלית, ביו-פחם כשות לא הראה שינוי יוצא דופן בספירת החיידקים (עד 1.00 ×-10-5 CFU/mL), מה שעשוי לנבוע מאיזון בהרכבו הכימי. בעוד שביו-פחם כשות הכיל את הכמות הגבוהה ביותר של נחושת (Cu), שעלולה להיות רעילה לחיידקים מכיוון שהיא מעכבת מערכות אנזימים חיידקיים25, היא הכילה גם רמות גבוהות יותר של יסודות כמו אשלגן (K) וזרחן (P), שאמורים לתמוך בצמיחה מיקרוביאלית על ידי שיפור סינתזת הכלורופיל בשתילים26. פעילות DHA שיקפה גם את ההשפעה הניטרלית הזו, מה שמצביע על תגובה יציבה עם השפעה ביולוגית מוגבלת.
הביו-פחם של בדלי הסיגריות הביא לעלייה באלקליות הקרקע לאורך זמן (עד pH 9.48). הוא הופק בטמפרטורת פירוליזה גבוהה יותר (700 מעלות צלזיוס), מה שהביא לביו-פחם בסיסי יותר שתמך בצמיחת חיידקים. תצפית זו עולה בקנה אחד עם מחקרים קודמים27, שדיווחו כי ביו-פחם משפר את ה-pH בקרקע, ובכך משפר את תנאי בית הגידול. מבין כל הטיפולים, הביו-פחם של בדלי הסיגריות שמר על תכולת הלחות הגבוהה ביותר (עד 94%), מה שיכול להסביר גם את ההשפעה הממריצה על ההישרדות והרבייה של E. albidus . ניתן לקשר שימור לחות גבוה לשינויים מיקרו-מבניים ב-700 מעלות צלזיוס, ומייצרים מיקרו-נקבוביות הלוכדות סרטי מים28. סיבה נוספת לאפקט הממריץ יכולה לנבוע מהתכולה הגבוהה של סידן (Ca), P ו-K בביו-פחם של בדלי הסיגריות, שהם מרכיבים מועילים להישרדות ורבייה של תולעים.
בהערכות מיקרוביאליות, הביו-פחם של בדלי הסיגריות הראה את הגירוי החיידקי הגבוה ביותר בריכוזים גבוהים יותר שהגיעו לכ-1.00 ×-10-6 CFU/mL, בניגוד לפעילות DHA שלא הראתה את אותה רמת עלייה. ממצא זה מצביע על גירוי סלקטיבי של חיידקים הניתנים לגידול ולא על כל הקהילה המיקרוביאלית.
התערובת של אדמה וביו-פחם מעץ אשוח גרמה לעלייה קלה בלבד ב-pH, שצוינה גם במחקרים29, שדיווחו על pH של 7.87 עבור ביו-פחם שמקורו במחטניים. טמפרטורת הייצור שלו הייתה הנמוכה ביותר (600 מעלות צלזיוס) מבין כל הביו-פחמים ששימשו במחקר זה. יכולתו של הביוצ'אר לאגור מים הייתה מתונה בהשוואה לסוגי ביו-פחם אחרים, מכיוון שהוא לא הראה ירידה קיצונית במשקל.
עם זאת, במקרה של הישרדות ורבייה של Eisenia foetida , הביוצ'אר מעץ האשוח הראה את הרעילות הגבוהה ביותר (53% השפעה קטלנית). אחד הגורמים האפשריים יכול להיות רמות גבוהות של יסודות כמו אלומיניום (Al), ברזל (Fe) ומנגן (Mn), הידועים כרעילים לתולעי אדמה מכיוון שהם מפריעים לוויסות ה-pH של המעיים שלהם וגורמים למתח חמצוני30. ממצאים דומים דווחו במחקרים שבהם Eisenia foetida סבלה מירידה ניכרת בביומסה עקב רעילות מתכות כבדות בקרקע משימוש מופרז בכימיקלים חקלאיים31.
ביו-פחם מעץ אשוח גרם לגירוי התארכות השורשים הגדול ביותר במבחן פיטוטוקסיות (גירוי של עד 206%). זה מצביע על כך שבניגוד לרגישות לתולעים, ריכוזים גבוהים של מתכות יכולים לשמש כמיקרו-נוטריינטים חיוניים למיני צמחים כמו S. alba. ריכוזים נמוכים של ביו-פחם זה עוררו מושבות חיידקים; עם זאת, ספירת המושבות ירדה עם עליית הריכוז. השפעה זו מצביעה על רגישות חיידקית לרמות נמוכות של K ו-P ותכולת יסודות רעילים גבוהה (Al, Fe, Mn). תצפית זו עולה בקנה אחד עם פעילות ה-DHA שנמדדה, שהייתה נמוכה יותר מאדמת הביקורת, אולי בגלל יחס מימן לפחמן (H/C) נמוך, מה שהופך את הפחמן לבלתי זמין32. ממצאים אלה מצביעים על כך שביו-פחם מעץ אשוח אינו תומך בצמיחה מיקרוביאלית עקב תכולת חומרים מזינים ירודה או תרכובות מעכבות.
הביוצ'ארים הושגו כחומרי בדיקה ממעבדות חיצוניות ויוצרו בתנאים המיושמים באופן שגרתי על ידי כל ספק, שכללו טמפרטורות פירוליזה שונות. מטרתנו הייתה להעריך ביו-פחם מייצג שמקורו בפסולת כפי שסופק, ולא לבודד את השפעת הטמפרטורה על פני חומרי הזנה; לכן, לא ניתן לנתק לחלוטין את השפעות הטמפרטורה מהשפעות חומרי הזנה במחקר זה. פרמטרי ייצור מפורטים כגון קצב חימום, אווירת גז וזמן שהייה לא היו זמינים מהספקים; רק הטמפרטורות שסופקו ומאפייני היסוד דווחו (ראה טבלה 1 וטבלה 2).
בהתחשב בממצאים ממחקר זה, ניתן להסיק כי לביו-פחם הכשות הייתה השפעה מאוזנת כוללת עם תופעות לוואי סביבתיות מתונות. הוא תמך בגידול צמחים בכל הריכוזים, הראה שינוי pH מתון ויכולת אגירת מים, ויתרה מכך, לא הייתה לו השפעה דרסטית על חיידקי קרקע ותולעים בהשוואה לביו-פחמים אחרים שנבדקו.
תוצאות אלו מדגימות עד כמה חיוני לבחור סוג ביו-פחם מתאים יחד עם ריכוזיו המתאימים לתיקוני קרקע כדי להבטיח שיפור בפועל של איכות הקרקע וצמיחת הצמח, מבלי לגרום לתופעות לוואי שליליות.
למספר שלבים בפרוטוקול, כולל טמפרטורת פירוליזה וקצב יישום ביו-פחם, הייתה השפעה ניכרת על תוצאות מחקר זה. טמפרטורות פירוליזה גבוהות יותר הביאו לבסיסיות גבוהה יותר של הביוצ'אר והשפיעו על הגירוי ברבייה של תולעים וצמיחת חיידקים, כפי שניתן לראות בביו-פחם של בדל הסיגריה. לעומת זאת, טמפרטורות פירוליזה נמוכות יותר הביאו לפחות ביו-פחם אלקליין והיו קשורות לרעילות התולעים הגבוהה ביותר ולהפחתת הפעילות המיקרוביאלית, כמו במקרה של ביו-פחם מעץ אשוחית. השפעת קצב היישום הייתה תלויה בסוג הביוצ'אר ובאורגניזם שנבדק. ריכוזים נמוכים יותר של ביו-פחם טחון קפה הובילו להשפעה ממריצה על התארכות השורשים ופעילות DHA גבוהה, בעוד שריכוזים גבוהים של ביו-פחם של בדלי סיגריות הביאו לצמיחת החיידקים הגבוהה ביותר שניתן לגדל.
התאמות מסוימות נעשו בשיטת המחקר כדי לפתור בעיות נפוצות כמו ספירת מושבות לא עקבית. זה כולל מתן אפשרות להומוגניזציה של שעתיים של תרחיפי קרקע ושימוש בדילול סדרתי של 10-2 כדי להשיג ספירת מושבות אופטימלית וניתנת להשוואה. בנוסף, הנחיית ה-OECD, בדיקה מס' 220 נועדה להעריך את ההשפעה של כימיקלים לבדיקה על תולעים אנכיטראידיות. הוא מציע לחשב את הריכוז הקטלני 50 (LC50) הנגזר ממגוון ריכוזים כימיים שנבדקו במבחן מציאת הטווח. במחקר זה, המטרה הייתה להעריך את ההשפעה הרעילה הכוללת של ביו-פחם שמקורו בפסולת על ההישרדות והרבייה של התולעים; לכן, ההשפעה הקטלנית נקבעה על ידי אחוז השינוי במספר התולעים מתחילת הבדיקה ועד סופה ודווחה כאפקט קטלני.
פרוטוקול זה ניתן לשחזור בתנאי מעבדה ובקנה מידה קטן (למשל, דגימות של 100 גרם). עם זאת, הרחבה לנפחי קרקע גדולים יותר עלולה לגרום להבדלים בתוצאות. ניתן לשלוט בכך על ידי ערבוב מכני נכון של האדמה והביו-פחם המשומש, יחד עם מערכת השקיה מבוקרת לשמירה על רמות לחות קבועות. בנוסף, השפעות הביוצ'אר השתנו מאוד בהתאם לסוג חומר ההזנה וטמפרטורת הפירוליזה, מה שמרמז על מחקר עתידי לאפיין כל חומר בנפרד לפני היישום.
הפרוטוקול שונה מטכניקות אחרות להערכת בריאות הקרקע בכך שהוא מציע שילוב של פרמטרים פיזיקו-כימיים כמו pH ושימור לחות, ותגובות ביולוגיות לתיקון הקרקע עם סוגים שונים של ביו-פחם. הכללת ניתוח פעילות האנזים יחד עם ספירת מושבות מיקרוביאליות מסורתיות מספקת תובנה לגבי תפקוד מיקרוביאלי שאינו ניתן לעיבוד. יתר על כן, המחקר התבסס על חומרי גלם שונים של ביו-פחם בריכוזים מרובים, מה שמוסיף רלוונטיות מעשית לאסטרטגיות תיקון קרקע בעולם האמיתי.
מחקר עתידי עשוי לכלול בדיקת חומרי גלם נוספים, כגון זבל, קליפת אורז או בוצת ביוב, כדי להשוות את השפעותיהם על מערכות אקולוגיות בקרקע. ניתן להתאים ניסויי שדה ארוכי טווח גם כדי להעריך את ההשפעות העונתיות ותוצאות היבול. מחקר זה מראה השפעות תלויות חומרי הזנה וריכוז של ביו-פחם שמקורו בפסולת על בריאות הקרקע. ביו-פחמים מסוימים עוררו פעילות מיקרוביאלית וצמיחת צמחים, בעוד שאחרים יצרו תגובות מעכבות או רעילות באורגניזמים באדמה. בחירת סוגי ביו-פחם ושיעורי יישום מתאימים חיונית כדי למקסם את היתרונות תוך מזעור סיכונים בניהול קרקע.
המחברים מצהירים שאין להם ניגודי אינטרסים.
העבודה המוצגת מומנה על ידי הפרויקט BIOCIRKL (מס' תקנה. TN02000044), בתמיכת תוכנית ההתאוששות הצ'כית והסוכנות הטכנולוגית של הרפובליקה הצ'כית במסגרת תוכנית מרכזי הכשירות הלאומיים בשנים 2023-2028.
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| 1,3,5- טריפנילטטרזוליום פורמזן | סיגמא-אלדריץ', צ'כיה | 93145 | |
| 2,3,5- טריפנילטרזוליום כלוריד | סיגמא-אלדריץ', צ'כיה | T8877 | |
| אוטוקלב CertoClav Classic | צ'רטוקלאב, אוסטריה | 8510174 | |
| פחמת סידן | סיגמא-אלדריץ', צ'כיה | 239216 | |
| צנטריפוגה MPW-251 | MPW Med. Instrument, פולין | 10251 | |
| ביו-פחם של בדלי סיגריות | אוניברסיטת הוהניים, גרמניה | מיוצר ב-700 & מדרגה C | |
| מונה מושבות CC-200 | קול-פרמר | 14212-04 | |
| Enchytraeus albidus | אינביטל אקווה S.R.O. | ||
| אתנול | פנטה, צ'כיה | 70390-11003 | |
| ביו-מסה של כשות | המעבדה של האקדמיה למדעים של צ'כיה | מיוצר ב-650 & דרגה; C | |
| תא Q של החממה | פול-לאב, פולין | ||
| מיקרוגל | אנטון פאר, Multiwave PRO | ||
| מחשב נייד DELL Latitude 3510 | Dell Products, אירלנד | ||
| חומרים מזינים של אגר מדיה | OXOID, צ'כיה | CM0003B | |
| קרקע OECD | מיקרוביוטס, בלגיה | ||
| מד pH WTW inoLab pH 7110 | זילם אנליטיקס, גרמניה | 1AA112 | |
| זרעי Sinapis alba | מיקרוביוטס, בלגיה | ||
| ספקטרופוטומטר M4 ספקטרופומטר UV-Visible | VWR | 76520-716 | |
| ביו-פחם של שאריות קפה משומשות | המעבדה של האקדמיה למדעים של צ'כיה | מיוצר ב-650 & דרגה; C | |
| ביו-פחם מעץ אשוח | אולסניצה, צ'כיה | יוצר ב-600 ומעלה; C | |
| סטריאומיקרוסקופ MSZ5000-T-IL-TL | א. קרוס אופטרוניק, גרמניה | MSZ5000-T-IL-TL | |
| טריס בייס | סיגמא-אלדריץ', צ'כיה | 252859 | |
| עינית וידאו VOPC93 USB 2.0 | א. קרוס אופטרוניק, גרמניה | VOPC93 | |
| משקל KERN EMB | קרן, גרמניה |