הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר מחקר

חוסר ויסות מתח-דלקת ודינמיקה של סמנים ביולוגיים בדלקת ריאות מיקופלזמה בילדים

468 צפיות

⸱

DOI:

10.3791/69153

⸱

24 באוקטובר 2025

 ,  ,  ,  , 
1Department of Pediatrics, The Second Affiliated Hospital of Anhui Medical University, 2Department of Pediatric Respiratory Disease, Anhui Provincial Children's Hospital, 3Department of Pediatric Psychology, Anhui Provincial Children's Hospital

במאמר זה

סיכום

רמות LDH ו-D-dimer גבוהות בדלקת ריאות Mycoplasma pneumoniae בילדים נקשרו לדלקת מערכתית, מתח פסיכולוגי ותוצאות פרוגנוסטיות. עומסי MP-DNA גבוהים ניבאו אשפוז ארוך יותר. הממצאים מדגישים LDH ו-D-dimer כסמנים ביולוגיים בעלי ערך לריבוד סיכון מוקדם, המאפשרים ניהול קליני משופר וזיהוי של חולים ילדים בסיכון גבוה.

תקציר

Mycoplasma pneumoniae pneumonia (MPP) הוא זיהום שכיח בילדים המלווה לעתים קרובות בדלקת מערכתית ומתח פסיכולוגי; עם זאת, הקשר הדו-כיווני הפוטנציאלי שלו נותר מוגדר בצורה גרועה. ניתחנו רטרוספקטיבית 120 ילדים מאושפזים בגילאי 5-12 שנים באמצעות שאלון הלחץ של הילד (CSQ), מתווכים דלקתיים (CRP, IL-6) ושלושה סמנים ביולוגיים קליניים (LDH, D-dimer, עומס MP-DNA). LDH ו-D-dimer גבוהים היו קשורים באופן מובהק לציונים גבוהים יותר של CSQ (r = 0.67, p < 0.01) ולתגובות דלקתיות חמורות יותר. לילדים עם מחלה ממושכת (>7 ימים) ועומס גבוה של MP-DNA היו ציוני מתח גבוהים יותר באופן ניכר (ממוצע 38 לעומת 25, עמ ' < 0.01). LDH ≥ 450 U/L ניבאו באופן עצמאי אשפוז ממושך (OR = 2.1, 95% CI: 1.2-3.7), וניתוח ROC הראה כוח הבחנה חזק לסיבוכים חמורים (AUC = 0.89, 95% CI: 0.83-0.95; רגישות = 82%, ספציפיות = 81%). ממצאים אלה תומכים בקשר דו-כיווני בין לחץ פסיכולוגי לחוסר ויסות חיסוני ב-MPP בילדים ומדגישים LDH ו-D-dimer כסמנים ביולוגיים מעשיים לזיהוי מוקדם של ילדים בסיכון גבוה.

מבוא

מיקופלזמה פנאומוניה (MP) היא בין הגורמים השכיחים ביותר לדלקת ריאות נרכשת בקהילה בילדים, ומהווה חלק ניכר מהאשפוזים הנשימתיים ברחבי העולם 1,2. מעבר למעורבות ריאתית, זיהום MP מעורר לעתים קרובות תגובות חיסוניות מערכתיות שעלולות לגרום לסיבוכים חוץ-ריאתיים ולעיכוב בהחלמה3. באוכלוסיות ילדים, תפקוד מערכת החיסון קשור קשר הדוק לרווחה פסיכולוגית, שכן מחלה חריפה ואשפוז עלולים לעורר תגובות לחץ כרוניות המשבשות את האיזון האנדוקריני-חיסוני 4,5. הפעלת ציר ההיפותלמוס-יותרת המוח-יותרת הכליה (HPA) עשויה לדכא את ההגנות החיסוניות או להגביר את האיתות הפרו-דלקתי, מה שמרמז על כך שדלקת ומתח פסיכולוגי הם תהליכים המחזקים זה את זה. ראיות נוספות מדגישות גם את התפקיד המתווך של ציר המעי-מוח, שבו שינויים במיקרוביום הנגרמים על ידי מתח וחדירות מעיים מוגברת יכולים לקדם דלקת מערכתית 6,7, מה שמסביר חלקית את התסמינים הכבדיים או הלבביים הלא פרופורציונליים הנצפים לפעמים בילדים עם דלקת ריאות MP 8,9.

מבחינה קלינית, חולים מסוימים חווים התאוששות או הידרדרות איטית יותר למרות טיפול בזמן, ולעתים קרובות מראים MP-DNA מתמשך בדגימות נשימה יחד עם סמנים מוגברים של נזק לרקמות או קרישה10,11 וציוני מתח מוגברים. דפוסים אלה מעלים את האפשרות של לולאה המקיימת את עצמה בין מתח לדלקת. עם זאת, ההנחיות הקליניות הנוכחיות נותרו ממוקדות בעיקר בפתוגן, עם שילוב מועט של דינמיקה פסיכולוגית ודלקתית בקבלת החלטות12. סמנים קונבנציונליים כגון חלבון מגיב C (CRP) ואינטרלוקין-6 (IL-6) הם אינפורמטיביים אך לא ספציפיים 3,14.

לעומת זאת, לקטט דהידרוגנאז (LDH) ו-D-dimer ניתנים למדידה מהירה, נגישים קלינית ורלוונטיים מבחינה מכנית: LDH משקף פגיעה ברקמות והיפוקסיה, בעוד D-dimer מאותת על חוסר איזון קרישה ומתח כלי דם15,16. תצפיות קודמות מצביעות על כך שרמות LDH ≥ 450 U/L ורמות D-dimer > 0.5 מ"ג/ליטר מייצגות סף רלוונטי מבחינה קלינית הקשור לאשפוז ממושך, מה שמדגיש את התועלת הפרוגנוסטית שלהן17. באופן דומה, עומס MP-DNA, למרות שהוא בעיקר אבחנתי, עשוי לספק תובנה ישירה לגבי עומס הפתוגן והקשר שלו עם תגובות המארח18. בהשוואה לסמנים קונבנציונליים כגון CRP ו-IL-6, LDH ו-D-dimer מספקים אותות ספציפיים מכנית וניתנים לפירוש קליני, בעוד שעומס MP-DNA מציע מדד ישיר לעומס הפתוגן, ובכך משלים ומרחיב את כלי האבחון הקיימים19.

לכן מחקר זה נועד לבחון האם עומס LDH, D-dimer ו-MP-DNA יכולים לחזות באופן אמין את חומרת המחלה בדלקת ריאות MP בילדים ולחקור כיצד סמנים ביולוגיים אלה קשורים ללחץ פסיכולוגי, במטרה לשפר את ריבוד הסיכון והניהול הקליני באוכלוסייה זו.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

מחקר זה אושר על ידי ועדת האתיקה המוסדית של בית החולים לילדים במחוז אנהוי. הסכמה מדעת בכתב התקבלה מההורים או האפוטרופוסים החוקיים של כל המשתתפים לפני איסוף הנתונים. כל ההליכים הכוללים דגימות מטופלים נערכו בהתאם לתקנות הבטיחות הביולוגית המוסדיות ולתקנים אתיים מוכרים בינלאומיים. הציוד והתוכנה המשמשים מפורטים בטבלת החומרים.

1. תכנון המחקר

מחקר עוקבה רטרוספקטיבי זה גייס ילדים בגילאי 5-12 שנים עם דלקת ריאות מאומתת Mycoplasma pneumoniae (MP) בין יוני 2021 לדצמבר 2024 במרכז ילדים שלישוני. האבחנה אושרה על ידי זיהוי PCR של MP-DNA ממקלוני גרון או נוזל שטיפת סימפונות (BALF)20,21. ילדים עם כשל חיסוני ידוע, מחלת ריאות כרונית (למשל, אסטמה) או רשומות קליניות לא שלמות לא נכללו22.

2. איסוף נתונים קליניים

טמפרטורת בית השחי נרשמה פעמיים ביום (07:00 ו-19:00), עם אירועי חום נוספים שתועדו בזמן התרחשותם. ריווי החמצן ההיקפי הבסיסי הוערך באמצעות אוקסימטר דופק. דגימות דם ורידיות נאספו תוך 24 שעות מהקבלה לניתוח סמנים ביולוגיים דלקתיים23,24. דם מלא וסרום אוחסנו בטמפרטורה של 2-8 מעלות צלזיוס ועובדו תוך שעתיים מרגע האיסוף; לאחר מכן הוקפאו מנות סרום/פלזמה בטמפרטורה של -80 מעלות צלזיוס עד לניתוח.

3. ברונכוסקופיה ואיסוף דגימות

ברונכוסקופיה גמישה עם שטיפה בוצעה תחת טשטוש באמצעות ברונכוסקופ פיבראופטי לילדים. ריווי החמצן וקצב הלב נוטרו באופן רציף במהלך ההליך25. לחץ היניקה נשמר על 100-120 מ"מ כספית עם תעלת עבודה של 2.0 מ"מ. שלושה עד חמישה מיליליטר של מי מלח סטריליים הוחדרו לכל מקטע, ואיכות השטיפה נחשבה נאותה כאשר נפח ההתאוששות הגיע לפחות ל-50% ממי המלח המוחדרים. BALF הונח מיד על קרח, צנטריפוגה ב-1,500 גרם למשך 10 דקות כדי להסיר תאים ופסולת, וסופרנטנטים אוחסנו ב-80 מעלות צלזיוס עד לבדיקת MP-DNA ומדידות ציטוקינים.

4. בדיקות סמנים ביולוגיים דלקתיים

CRP נותח באמצעות שיפור חלקיקים. IL-6 כומת על ידי בדיקה חיסונית כימית. פעילות LDH נקבעה באופן ספקטרופוטומטרי על ידי המרת פירובט ללקטט26. D-dimer נמדד באמצעות אימונוטורבידימטריה משופרת לטקס. זמני הדגירה, הכיול ובקרות האיכות הפנימיות שהומלצו על ידי היצרן נשמרו בקפדנות; הערכת איכות חיצונית בוצעה בהתאם ללוח הזמנים של ההסמכה של המעבדה. היחידות דווחו כ-mg/L (CRP), pg/mL (IL-6), U/L (LDH) ו-mg/L FEU (D-dimer), ו-MP-DNA כעותקים/מיקרוליטר.

5. אבחון פסיכומטרי

הלחץ הפסיכולוגי הוערך באמצעות שאלון הלחץ של הילד שדווח על ידי ההורים תוך 72 שעות מרגע הקבלה. טווח הציונים הכולל היה 0-80, וציונים ≥30 פורשו כלחץ בינוני עד חמור. אחיות מיומנות סיפקו הנחיות סטנדרטיות ודוגמאות ברמת הפריט כדי למזער את הטיית הזיכרון, ושאלונים לא מלאים נבדקו מחדש באותו יום כדי להבטיח את שלמות הנתונים.

6. שיקולי בטיחות

כל דגימות הדם וה-BALF טופלו בארון בטיחות ביולוגית מוסמך Class II עם ציוד מגן אישי מתאים (כפפות, חלוק, מסכה/מכונת הנשמה והגנה על העיניים). חפצים חדים הושלכו למיכלים עמידים בפני פנצ'ר. פסולת ביולוגית נוזלית טופלה מראש באקונומיקה של 10% למשך 30 דקות לפני השלכתה. המשטחים טוהרו לאחר כל מפגש, וכל הנהלים עמדו בתקנות המוסדיות והלאומיות (למשל, מדריך הבטיחות הביולוגית של מעבדת ארגון הבריאות העולמי; BMBL).

7. ניתוח סטטיסטי

הניתוחים נערכו באמצעות IBM SPSS Statistics. תקינות הנתונים נבדקה באמצעות מבחן שפירו-וילק. משתנים רציפים בוטאו כממוצע ± סטיית תקן או חציון עם טווח בין-רבעוני, בעוד שמשתנים קטגוריים סוכמו כספירה ואחוזים (טבלה 1). קשרים בין ציוני CSQ, מתווכים דלקתיים ואינדיקטורים קליניים נבדקו באמצעות מתאמים של פירסון או ספירמן. רגרסיה לוגיסטית שימשה להערכת מנבאים של אשפוז ממושך (>7 ימים) ודלקת ריאות חמורה, המוגדרת כאיחוד ריאות, תפליט פלאורלי, אטלקטזיס או אי ספיקת נשימה27. עקומות ROC נבנו כדי להעריך אפליית מודל, דיווח AUC, רגישות, ספציפיות ו-95% CI. אימות צולב פי עשרה יושם כדי להעריך חוסן. נתונים חסרים (<5%) טופלו על ידי חישוב חציוני. ערכי הסמנים הביולוגיים תוקננו לציון z לפני המודל. המובהקות הסטטיסטית נקבעה על p < 0.05 (דו צדדי) (טבלה 2).

8. תוצאות חזותיות ונקודות ביקורת לשחזור

BALF הולם הוגדר כ-≥50% התאוששות של מי מלח מוחדרים עם מראה נקי ולא מדמם. ניהול CSQ מקובל הוגדר כהשלמה תוך 72 שעות מהקבלה עם ≤1 פריט חסר לכל תחום. ריצות הבדיקה דרשו מעבר QC פנימי לפי יעדי היצרן לפני פרסום תוצאות המטופלים.

פרוטוקול זה מספק מסגרת ניתנת לשחזור להערכת יחסי הגומלין בין לחץ פסיכולוגי, מתווכים דלקתיים וסמנים ביולוגיים קליניים בדלקת ריאות Mycoplasma pneumoniae בילדים וקובע נקודות ביקורת מעשיות (איכות BALF, תזמון CSQ, בדיקת QC) כדי לתמוך ביישום אמין בין מרכזים.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

עיצוב המחקר הכולל וזרימת העבודה מסוכמים באיור 1. LDH הוכיח דיוק גבוה יותר בחיזוי סיבוכים חמורים (AUC = 0.89, 95% CI: 0.83-0.95) בהשוואה ל-CRP (AUC = 0.76) ו-IL-6 (AUC = 0.72). החתך האופטימלי ל-LDH היה 450 U/L, מה שהניב רגישות של 82% וסגוליות של 81%. רגרסיה לוגיסטית אישרה כי LDH ≥ 450 U/L היה קשור באופן עצמאי לאשפוז ממושך (OR = 2.1, 95% CI: 1.2-3.7). עומס MP-DNA מתמשך גם ניבא משך מחלה ארוך יותר וציוני CSQ גבוהים יותר, מה שמדגיש את יחסי הגומלין בין נטל הפתוגנים...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

דלקת ריאות מיקופלזמה פנאומוניה (MP) בילדים היא מחלה הטרוגנית, כאשר חוסר ויסות חיסוני פועל כגורם מרכזי לחומרה ולהחלמה. חוסר ויסות זה נובע מאינטראקציות בין תגובות חיסוניות של המארח וגורמי אלימות MP, המעצבים הן את מהלך המחלה והן את תגובות הטיפול. סמנים ביולוגיים קליניים, אם כן, מייצגים כלים חיוניים לריבוד מטופלים, הנחיית טיפול ופרוגנוזה.

CRP משמש כסמן קו קדמי לדלקת בשלב חריף, אם כי חוסר הספציפיות שלו מגביל את ערך החיזוי. LDH, המשקף פגיעה ברקמות והיפוקסיה...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים מצהירים שאין ניגודי אינטרסים.

תודות

אנו מודים לצוות הקליני והסיעודי של בית החולים לילדים במחוז אנהוי על עזרתם ברישום מטופלים ואיסוף נתונים. אנו אסירי תודה גם לילדים המשתתפים ולמשפחותיהם על שיתוף הפעולה לאורך המחקר.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
שאלון מתח לילדים (CSQ)לא צויןהערכה פסיכומטרית של לחץ
ערכת בדיקת CRPסימנס Healthineers11537224 (Atellica CH hCRP2, 720 בדיקות)מדידת חלבון מגיב C
ערכת בדיקת D-dimerדיאגנוסטיקה סטאגו00515 (STAÂ- Liatest ערכת D-Di)מדידת רמות D-dimer בפלזמה
IBM SPSS סטטיסטיקה גרסה 28.0IBM Corp., ארמונק, ניו יורק, ארה"בניתוח נתונים
ערכת בדיקה IL-6רוש דיאגנוסטיקס09015612190 (חבילת COBAS E 801); 09015612500 (100 בדיקות)מדידת אינטרלוקין-6
ערכת בדיקת LDHלא צויןMAK066 (ערכת בדיקת פעילות MilliporeSigma LDH)מדידת פעילות לקטט דהידרוגנאז
ברונכוסקופ גמיש לילדים (למשל, BF-P190)אולימפוסBF-P190 (מספר דגם/הזמנה)אוסף שטיפת הסימפונות
אוקסימטר דופקלא צויןלא מסופקמדידת ריווי חמצן

מקורות

  1. Wang, X., et al. Mycoplasma pneumoniae triggers pneumonia epidemic in autumn and winter in Beijing: A multicentre, population-based epidemiological study between 2015 and 2020. Emerg Microbes Infect. 11 (1), 1508-1517 (2022).
  2. Sun, Y., et al. Characterizing the epidemiology of Mycoplasma pneumoniae infections in China in 2022-2024: A nationwide cross-sectional study of over 1.6 million cases. Emerg Microbes Infect. 14 (1), 2482703(2025).
  3. Zhu, Y., et al. Immune response plays a role in Mycoplasma pneumoniae pneumonia. Front Immunol. 14, 1189647(2023).
  4. Li, J., et al. Metabolomic analysis reveals potential biomarkers and the underlying pathogenesis involved in Mycoplasma pneumoniae pneumonia. Emerg Microbes Infect. 11 (1), 593-605 (2022).
  5. Rowlands, R. S., Meyer Sauteur, P. M., Beeton, M. L. On Behalf of the ESCMID study group for mycoplasma and chlamydia infections ESGMAC n. Mycoplasma pneumoniae: Not a typical respiratory pathogen. J Med Microbiol. 73 (10), 1910(2024).
  6. Li, X., Li, T., Chen, N., Kang, P., Yang, J. Changes of Mycoplasma pneumoniae prevalence in children before and after the COVID-19 pandemic in Henan, China. J Infect. 86 (3), 256-308 (2023).
  7. Cryan, J. F., et al. The microbiota-gut-brain axis. Physiol Rev. 99 (4), 1877-2013 (2019).
  8. Marwaha, K., et al. Exploring the complex relationship between psychosocial stress and the gut microbiome: Implications for inflammation and immune modulation. J Appl Physiol Bethesda, MD 1985. 138 (2), 518-535 (2025).
  9. Deng, Y., et al. Involvement of the microbiota-gut-brain axis in chronic restraint stress: Disturbances of the kynurenine metabolic pathway in both the gut and brain. Gut Microbes. 13 (1), 1-16 (2021).
  10. Li, X., et al. The immune modulatory role of surfactants in Mycoplasma pneumoniae infection. J Inflamm Res. 18, 2909-2922 (2025).
  11. Shao, L., Yu, B., Lyu, Y., Fan, S., Gu, C., Wang, H. The clinical value of novel inflammatory biomarkers for predicting Mycoplasma pneumoniae infection in children. J Clin Lab Anal. 39 (3), e25150(2025).
  12. Wang, P., Yao, J., Li, Y., Huang, X., Deng, C. Analysis of clinical characteristics and laboratory examination data of 112 cases of Mycoplasma pneumoniae pneumonia in children. Medicine (Baltimore). 103 (47), e40628(2024).
  13. Shashidhara, A. K., Bala, S., Browne, S., Cliff, M., Mallia, P. Post-infectious Inflammatory motor-predominant neuropathy following Mycoplasma infection. Cureus. 16 (11), e74657(2024).
  14. Jiang, C., Bao, S., Shen, W., Wang, C. Predictive value of immune-related parameters in severe Mycoplasma pneumoniae pneumonia in children. Transl Pediatr. 13 (9), 1521-1528 (2024).
  15. Wang, C., et al. Suppressing neutrophil itaconate production attenuates Mycoplasma pneumoniae pneumonia. PLOS Pathog. 20 (11), e1012614(2024).
  16. Yi, X., Jia, W., Li, W., Jia, C., Song, C. Diagnostic value of cytokines in severe childhood Mycoplasma pneumoniae pneumonia combined with Adenovirus infection. Ital J Pediatr. 50 (1), 92(2024).
  17. Lu, D., et al. Clinical characteristics and immune responses in children with primary ciliary dyskinesia during Pneumonia episodes: A case-control study. Child Basel Switz. 10 (11), 1727(2023).
  18. Cheng, J., et al. Proteomic profiling of urinary small extracellular vesicles in children with pneumonia: a pilot study. Pediatr Res. 94 (1), 161-171 (2023).
  19. Wei, D., Zhao, Y., Zhang, T., Xu, Y., Guo, W. The role of LDH and ferritin levels as biomarkers for corticosteroid dosage in children with refractory Mycoplasma pneumoniae pneumonia. Respir Res. 25 (1), 266(2024).
  20. Li, J., et al. Biomarkers of Mycoplasma pneumoniae pneumonia in children by urine metabolomics based on Q Exactive liquid chromatography/tandem mass spectrometry. Rapid Commun Mass Spectrom RCM. 36 (5), e9234(2022).
  21. Zhou, X., et al. Using random forest and biomarkers for differentiating COVID-19 and Mycoplasma pneumoniae infections. Sci Rep. 14 (1), 22673(2024).
  22. Liu, J., et al. Proteomics study of Mycoplasma pneumoniae pneumonia reveals the Fc fragment of the IgG-binding protein as a serum biomarker and implicates potential therapeutic targets. Front Med. 16 (3), 378-388 (2022).
  23. Huang, F., et al. Ribosomal RNA-depleted RNA sequencing reveals the pathogenesis of refractory Mycoplasma pneumoniae pneumonia in children. Mol Med Rep. 24 (5), 761(2021).
  24. Xu, W., et al. Clinical and CT characteristics of human metapneumovirus-associated severe pneumonia in children in Beijing. Ital J Pediatr. 51 (1), 136(2025).
  25. Ye, Y., et al. A machine learning model for predicting severe Mycoplasma pneumoniae pneumonia in school-aged children. BMC Infect Dis. 25 (1), 570(2025).
  26. Liu, J., et al. Comparative analysis of the clinical characteristics of severe Mycoplasma pneumoniae pneumonia and severe bacterial pneumonia in children. BMC Pediatr. 25 (1), 439(2025).
  27. Li, X., et al. Development and validation of a nomogram for predicting necrotizing pneumonia in children with refractory Mycoplasma pneumoniae pneumonia. Ital J Pediatr. 51 (1), 150(2025).
  28. Fu, R., et al. DNA and RNA detection of inactivated Mycoplasma pneumoniae in different microenvironments. Pediatr Pulmonol. 60 (3), e71040(2025).
  29. Feng, W., Lin, Y., Wang, Q., Qian, X. The correlation between positive rate of antibody or DNA and children's age with suspected Mycoplasma pneumoniae infection. Ital J Pediatr. 51 (1), 156(2025).
  30. Huang, X., et al. Neutrophils are involved in the development and outcomes of plastic bronchitis associated with Mycoplasma pneumoniae pneumonia. Respir Res. 26 (1), 92(2025).
  31. Xiao, Y., et al. Interpretation of pathogenicity and clinical features of multiple pathogens in pediatric lower respiratory tract infections by tNGS RPTM analysis. Eur J Clin Microbiol Infect Dis Off Publ Eur Soc Clin Microbiol. 44 (6), 1313-1324 (2025).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

LDHD DimerMP DNA
צור קשר
המלצה לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

2026 © זכויות יוצרים MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.