Method Article

פרוטוקול לבניית מודל עכבר של פיברוזיס שריר הלב יתר לחץ דם באמצעות אנגיוטנסין II

DOI:

10.3791/69409

⸱

November 14th, 2025

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1The Affiliated Traditional Chinese Medicine Hospital, Southwest Medical University, 2Shenzhen Traditional Chinese Medicine Hospital, 3Guangdong-Macao In-Depth Cooperation Zone in Hengqin, Chinese Medicine Guangdong Laboratory (Hengqin Laboratory), 4State Key Laboratory of Traditional Chinese Medicine Syndrome, Guangdong Provincial Hospital of Chinese Medicine, Guangdong Provincial Academy of Chinese Medical Sciences, The Second Affiliated Hospital of Guangzhou University of Chinese Medicine, Guangzhou University of Chinese Medicine, 5School of Pharmacy, Southwest Medical University

* These authors contributed equally

In This Article

Summary

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

עירוי רציף של אנגיוטנסין II (Ang II) באמצעות משאבות אוסמוטיות הוא אחת השיטות הקלאסיות לבניית מודלים של בעלי חיים של פיברוזיס שריר הלב יתר לחץ דם. פרוטוקול זה ייעל באופן שיטתי את תהליך בניית המודל הזה ופירט את נקודות המפתח של השתלת משאבה אוסמוטית, מיקום והגדרת ריכוז Ang II.

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

עירוי רציף של אנגיוטנסין II (Ang II) באמצעות משאבות אוסמוטיות הוא גישה בשימוש נרחב לביסוס מודלים בבעלי חיים של פיברוזיס שריר הלב יתר לחץ דם. עם זאת, טכניקה זו מציגה מגבלות מסוימות בדוחות הנוכחיים, כגון חוסר היציבות של Ang II, מיקום משאבה לא מדויק והיעדר נוהל סטנדרטי. הדיווחים הנוכחיים על המתודולוגיה להקמה נותרו מוגבלים יחסית. פרוטוקול זה ייעל באופן שיטתי את הקמתם של מודלים של פיברוזיס יתר לחץ דם המושרה על ידי משאבת Ang II בעכברים, כולל הכנה סטנדרטית של תמיסת Ang II, כיול מינון, השתלה תת עורית מדויקת של משאבות אוסמוטיות ותקנים כמותיים לאינדיקטורים להערכת מודל. תוצאות הניסוי הראו כי Ang II גרם ליתר לחץ דם בשריר הלב בעכברים עם שיעורי הישרדות גבוהים. רמות לחץ הדם הסיסטולי (SBP) התייצבו על 160 מ"מ כספית לאחר שבעה ימים של השתלה תת עורית. עכברי המודל הפחיתו משמעותית את שברי הפליטה של החדר השמאלי והגדילו את הממדים הדיאסטוליים הסופיים של החדר השמאלי. בהשוואה לקבוצת ניתוחי הדמה, שקיעת הקולגן ברקמת שריר הלב האינטרסטיציאלית ובאזורים הפרי-וסקולריים עלתה. מחקר זה, המבוסס על גודל מדגם קטן (n = 6), אימת באופן ראשוני את ההיתכנות של הקמת מודל עכבר של פיברוזיס שריר הלב יתר לחץ דם באמצעות Ang II בשילוב עם משאבה אוסמוטית, והקים מערכת אימות פנוטיפ כמותית.

Introduction

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

פיברוזיס שריר הלב (MF), תוצאה פתולוגית עיקרית של יתר לחץ דם, מאופיינת בתצהיר יתר של סיבי קולגן בתוך שריר הלב הפגוע או הדחוס. הוא מייצג את אחת הצורות החשובות ביותר של נזק לאיברי מטרה בתיווך יתר לחץ דם ותורם לתפקוד לקוי מתקדם של הלב 1,2. הקמת מודלים מתאימים לבעלי חיים חיונית לקידום המחקר המכניסטי ולפיתוח אסטרטגיות טיפוליות חדשות לפיברוזיס בשריר הלב יתר לחץ דם. אנגיוטנסין II (Ang II), אפקטור מרכזי של מערכת רנין-אנגיוטנסין, ממלא תפקיד מרכזי בפתוגנזה של יתר לחץ דם3. אינדוקציה מבוססת Ang II הפכה אפוא לגישה בשימוש נרחב לביסוס מודלים של יתר לחץ דם בעכברים.

השיטות הנוכחיות לבניית מודלים של בעלי חיים ליתר לחץ דם כוללות בעיקר אינדוקציה כירורגית, אינדוקציה פרמקולוגית ומודלים ספונטניים טרנסגניים. אינדוקציה כירורגית משתמשת בדרך כלל בטכניקות כגון התכווצות עורק הכליה, התכווצות אבי העורקים העולה או התכווצות קשת אבי העורקים כדי להגביר באופן מלאכותי את ההתנגדות לזרימת הדם, ובכך לגרום ללחץ דם גבוה4. בעוד ששיטות אלו יכולות לבסס במהירות מצבי יתר לחץ דם המתאימים לחקר תהליכי שיפוץ לב הקשורים לעומס לחץ, הן כרוכות בהליכים מורכבים עם סיבוכים רבים לאחר הניתוח. אינדוקציה פרמקולוגית משתמשת בדרך כלל בהזרקה תוך-צפקית או במתן דרך הפה כדי להעלות את לחץ הדם בחיות ניסוי5. בעוד שהטכנולוגיה פשוטה יחסית, יציבות המודל נותרה רגישה להפרעות ממינון התרופות, תדירות המתן ותגובות הלחץ של בעלי חיים. מודלים טרנסגניים כגון חולדות עם יתר לחץ דם ספונטני ועכברים עם יתר לחץ דם BPH/2J, המציגים פנוטיפים יציבים של יתר לחץ דם, נמצאים בשימוש נרחב במחקר יתר לחץ דם תורשתי. עם זאת, המנגנונים הפתוגניים הייחודיים שלהם מגבילים את יכולתם לדמות יתר לחץ דם קליני המושרה על ידי ריבוי גורמים.

לאחרונה, מודלים של יתר לחץ דם המבוססים על עירוי Ang II רציף באמצעות משאבות אוסמוטיות תת עוריות צברו פופולריות. שיטה זו מאפשרת שחרור מתמשך של Ang II בקצב קבוע, תוך שמירה על ריכוזי דם יציבים לאורך תקופות ממושכות כדי לחקות מקרוב תהליכים פתולוגיים ולשכפל פיברוזיס יתר לחץ דם של עכברים 6,7,8. עם זאת, נותרו מגבלות חשובות, במיוחד בנוגע לסטנדרטיזציה של הפרוטוקול ותוצאות פיברוטיות לא עקביות, שיכולות להיות מושפעות מגורמים כמו טכניקת השתלת משאבה ותגובות ספציפיות לבעלי חיים9. כדי להתמודד עם פערים אלה, מחקר זה מחדד את המודל המבוסס על משאבה אוסמוטית Ang II, מתקנן שלבי מפתח ומספק פרוטוקול חזותי. שיפורים אלה משפרים את יכולת השחזור והישימות המעשית, ומציעים התייחסות רבת ערך למחקרים עתידיים על פיברוזיס יתר לחץ דם בשריר הלב.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כל הליכי הניסוי בוצעו על פי ההנחיות לטיפול ושימוש בחיות מעבדה של המכונים הלאומיים לבריאות, ופרוטוקולי הניסוי אושרו על ידי ועדת המחקר בבעלי חיים של האוניברסיטה הרפואית של סאות'ווסט (מספר אישור SWMU2020317).

1. הכנת תמיסת Ang II ומילוי המשאבה האוסמוטית

  1. בחר 12 עכברים זכרים C57BL/6J בדרגת SPF (ראה טבלת חומרים) במשקל 20 ± 1 גרם על ידי בחירת בעלי חיים בני 8 שבועות לאחידות ההתפתחותית שלהם כדי לשלוט בגורמים מבלבלים הקשורים לגיל. חלקו את העכברים לקבוצת ניתוחי דמה וקבוצת מודל בשיטת אקראיות פשוטה, עם 6 עכברים בכל קבוצה.
  2. מדוד את משקל הגוף ההתחלתי של העכבר וקבע את המינון של Ang II (ראה טבלת חומרים) כ-1.46 מ"ג/ק"ג/יום.
    הערה: על פי הניסוי הראשוני, 1.46 מ"ג/ק"ג/יום הוא המינון האופטימלי של Ang II. מינון זה שומר באופן אמין על לחץ דם סיסטולי בכ-160 מ"מ כספית, וגורם ביעילות לפיברוזיס פתולוגי בשריר הלב תוך הבטחת הישרדות בעלי החיים לאורך המחקר בן 4 השבועות.
  3. הוסף 2.45 מ"ל של 0.9% מי מלח סטריליים, מקוררים מראש ל-4 מעלות צלזיוס, ל-10 מ"ג של אבקת ליופיליזציה של Ang II. מערבבים היטב את התמיסה ושומרים אותה על קרח לשימוש מיידי.
  4. בצע את ההליך על קרח באמצעות מזרק כדי לשאוב תמיסת Ang II, ולאחר מכן הזריק ברצף 200 מיקרוליטר (ריכוז 3.91 ממול/ליטר) לכל אחד מששת תאי המשאבה האוסמוטית (ראה טבלת חומרים).
  5. הפעל את כונן הלחץ האוסמוטי על ידי טבילת המשאבה במי מלח סטריליים של 37 מעלות צלזיוס למשך 48 שעות.
    הערה: מלאו את המשאבות האוסמוטיות לקבוצת ניתוחי הדמה בנפח שווה של מי מלח. מכיוון ש-Ang II רגיש לאור, יש לבצע את ההליך תחת הגנה מלאה מפני אור לאורך כל הדרך.

2. השתלת המשאבות האוסמוטיות ובניית דגם 6

  1. הכנת בעלי חיים והרדמה
    1. צץ את העכברים למשך 4 שעות עם גישה חופשית למים. לאחר מכן, שקלו כל עכבר וחשבו את מינון ההרדמה המתאים (80 מ"ג/ק"ג פנטוברביטל נתרן)10.
    2. להרדים את העכברים באמצעות הזרקה תוך-צפקית של המינון המחושב של נתרן פנטוברביטל.
      הערה: טיפול בפנטוברביטל דורש עמידה בתקנות, פעולה במכסה אדים, לבישת ציוד מגן ותיוג נוזל שיורי לסילוק נפרד.
  2. הסר את השיער מעור הגב מעל האזור המשתרע מבסיס הזנב לאזור הגב האמצעי באמצעות סכין גילוח או קרם אפילציה.
  3. יש לחטא היטב את האזור המגולח שלוש פעמים עם 70% אתנול11.
  4. בעזרת אזמל מבצעים חתך תת עורי של 0.5 ס"מ בתוך האזור המחוטא.
  5. דרך החתך, השתמש במלקחיים כדי להפריד בצורה בוטה את הרקמה התת עורית לכיוון הצוואר האחורי, וליצור כיס.
  6. כוון את גוף המשאבה כשקצה הצנתר שלו מצביע לכיוון ראש העכבר. לאחר מכן, מהדקים את הקצה בעזרת מלקחיים המוסטטיים והכנס את המשאבה תת עורית לכיוון זה.
  7. לאחר השתלת המשאבה יש לתפור את הרקמה התת עורית בתפרים נספגים 6-0 ולסגור את חתך העור בתפרים כירורגיים. לאחר מכן, הנח את העכבר במחצלת תרמית שחוממה מראש ל-37 מעלות צלזיוס עד שהוא מתאושש לחלוטין מההרדמה (כ-5-10 דקות).
  8. יש להחדיר באופן רציף את תמיסת Ang II המוכנה במינון שנקבע מראש (1.46 מ"ג/ק"ג/יום) באמצעות המשאבות האוסמוטיות למשך 28 יום.
  9. עם השלמת תקופת העירוי של 28 יום, אסוף את כל נתוני הניסוי. לאחר מכן, יש להרדים את העכברים באותו אופן שנעשה בהרדמות קודמות, כלומר לפי ההליכים המתוארים בשלבים 2.1.1-2.1.2, ולהמית אותם על ידי פריקת צוואר הרחם.

3. מדידת לחץ דם

  1. ציוד (ראה טבלת חומרים) חימום מוקדם: הגדר את פלטפורמת החימום ל-37-38 מעלות צלזיוס כדי להבטיח הרחבת כלי דם בכלי הדם של זנב העכבר.
  2. אחוז בעדינות בעכבר והנח אותו במחזיק הריסון, וודא שהזנב בולט בחופשיות דרך החור האחורי. לאחר מכן, נקו היטב את הזנב החשוף בעזרת צמר גפן ספוג אלכוהול.
  3. הניחו שרוול מתנפח בבסיס הזנב. מקם את חיישן הדופק במרחק של כ-5-10 מ"מ מהשרוול בחלק הזנב האמצעי עד התחתון.
  4. הפעל את המכשיר והמתן עד שצורת גל הדופק תתייצב לפני שתמשיך.
  5. התחל את מחזור המדידה. המערכת תנפח אוטומטית את השרוול ללחץ העולה על 200 מ"מ כספית כדי לחסום את זרימת הדם, ואז תתרוקן לאט במהירות של 2-3 מ"מ כספית לשנייה. החיישן מזהה את הופעת גל הדופק עם חידוש הזרימה, וקובע את הלחץ הסיסטולי.
  6. מדוד את לחץ הדם הסיסטולי (SBP) במרווחים של 7 ימים לאחר הדוגמנות, בסך הכל חמש מדידות. עבור כל עכבר בכל נקודת זמן, רשום שלוש קריאות עוקבות, מה שמאפשר תקופת מנוחה של 2 דקות בין מדידות עוקבות.
  7. לאחר המדידות, החזירו את העכבר לכלוב שלו עם אוכל ומים. נקה את המחזיק ואת שרוול הזנב כדי למנוע זיהום צולב.

4. מדידת תפקוד הלב

  1. ביום ה-28 של המודל, הרדמו את כל עכברי הניסוי עם נתרן פנטוברביטל (80 מ"ג/ק"ג פנטוברביטל נתרן).
  2. מקם את העכבר במצב שכיבה על פלטפורמה בטמפרטורה קבועה.
  3. בצע אקו לב דרך בית החזה באמצעות מערכת אולטרסאונד (ראה טבלת חומרים). חבר את גפי העכבר לאלקטרודות על הפלטפורמה כדי לנטר אותות אלקטרוקרדיוגרמה (ECG).
  4. השג הדמיה קצרת ציר ברמת שריר החלב באמצעות אולטרסאונד במצב M כדי לדמיין את הלב ולנתח את תפקוד הלב. צלם שלוש תמונות לכל עכבר וממוצע הנתונים לניתוח עוקב של הממד הדיאסטולי הפנימי של החדר השמאלי (LVIDd), הקוטר הסיסטולי הפנימי של החדר השמאלי (LVIDs), קיצור חלקי החדר השמאלי (LVFS) ושבר פליטת החדר השמאלי (LVEF).
    הערה: שמור על מגע בדיקה עם דופן בית החזה מבלי לדחוס את חלל בית החזה; להבטיח קו דגימה במצב M בניצב למחיצת החדר; בצע מדידות רציפות במשך ≥ 3 מחזורי לב כדי לקבל ערכים ממוצעים.

5. מכתים מאסון

  1. דגימת לב וקיבוע
    1. להרדים את העכבר עם נתרן פנטוברביטל (80 מ"ג/ק"ג פנטוברביטל נתרן). לאחר מכן, בצע חתך אורכי של כ-1.5 ס"מ בחלל בית החזה באמצעות מספריים, קשר את כלי הלב העיקריים וכרת במהירות את הלב כדי למנוע פגיעה במתיחה12.
    2. שטפו מיד את הלב שנכרת עם PBS מקורר מראש כדי להסיר דם ולנגב בעדינות את עודפי הלחות באמצעות נייר סינון נקי. לאחר מכן, בצע חתך רוחבי לאורך השריר הפפילרי כדי לקבל פרוסת רקמה בעובי 3 מ"מ.
    3. לקיבוע, טבלו את דגימות הלב ב-4% פרפורמלדהיד למשך למעלה מ-48 שעות, מה שמבטיח יחס מינימלי של רקמה לנפח קיבוע של 1:10.
  2. הסר את רקמת הלב מקיבוע הפרפורמלדהיד 4%. לאחר מכן, מתחת למכסה אדים, פורסים דק את הרקמה בעובי של 4 מיקרומטר בעזרת סכין כירורגית ומעבירים את הפרוסות לקלטת התייבשות13.
  3. טען קטעי רקמות למייבש ובצע את השלבים הבאים: 70% אתנול, 80% אתנול, 95% אתנול למשך שעה כל אחד; 100% אתנול I ו-II למשך 45 דקות כל אחד; קסילן I ו-II למשך 30 דקות כל אחד.
  4. הטמיעו את הרקמה בפרפין, ולאחר מכן מצקו את הבלוקים על צלחת קרה מקוררת מראש של -20 מעלות צלזיוס.
  5. השתמש במיקרוטום פרפין כדי להשיג חתכים אורכיים בעובי 4 מיקרומטר מגושי הרקמה המוטבעים בפרפין. לאחר מכן, טבלו ברצף את החלקים בתמיסות הבאות למשך 5 דקות כל אחד כדי להפחית אותם ולהחזיר להם נוזלים: קסילן I, קסילן II, אתנול מוחלט, 95% אתנול, 80% אתנול, 70% אתנול, ולבסוף מים מזוקקים.
  6. טבלו את הרקמה בתמיסת צביעת ההמטוקסילין מברזל של Weigert המוכנה למשך 8 דקות. לאחר מכן, יש לשטוף שוב ושוב במים מזוקקים כדי להסיר עודפי תמיסת כתמים. התמיין בתמיסת התמיינות אתנול חומצית למשך 5 שניות, ולאחר מכן הכחול בתמיסת הכחול של מאסון למשך 5 דקות. לבסוף, יש לשטוף במים מזוקקים14.
  7. צבעו את החלקים באדום קרמין למשך 10 דקות, ומרחו כ-200-300 מיקרוליטר לכל שקופית כדי להבטיח כיסוי מלא ואחיד של הרקמה. לאחר מכן, שטפו את החלקים בחומצה אצטית קרחונית של 0.2% למשך דקה.
  8. טפל בחלקים בתמיסת חומצה פוספומוליבדית למשך כ -5 דקות, או עד שסיבי השריר הופכים לאדומים. לאחר מכן, צבעו את החלקים בנפח מספיק של תמיסת אנילין כחולה כדי לכסות את הרקמה לחלוטין (בדרך כלל 200-300 מיקרוליטר לשקופית) למשך 5 דקות. לבסוף, שטפו את החלקים בתמיסת חומצה אצטית קרחונית0.2% 15.
  9. ייבשו את החלקים באמצעות סדרת אתנול מדורגת. המשך לנקות את הרקמות עם קסילן באמצעות שלוש טבילות של 1-2 דקות כל אחת.
  10. הרכיב את החלקים על ידי מריחת כמות קטנה של שרף ניטרלי וכיסוי בכיסוי.
  11. בדיקה מיקרוסקופית (ראה טבלת חומרים): התבונן ברקמות מוכתמות מאסון בהגדלה של 40×, 20× ו-10×. צלם כל שקופית כדי לשמר תמונות מייצגות.
    הערה: השלך את כל הפסולת בהתאם לפרוטוקולי הבטיחות המוסדיים. אסוף תמיסת התמיינות חומצית וחומצה אצטית קרחונית בחביות עמידות בפני קורוזיה, נטרל פסולת בריכוז גבוה ל-pH 6-8, ואל תערבב עם תמיסות אלקליין. אחסן אתנול בחביות חסינות פיצוץ במקום קריר, הרחק ממקורות אש. החזק קסילן בחביות חומות, פעל במכסה אדים עם ציוד מגן שנלבש, ואל תערבב חומצות (חומרים) עם אתנול. הניחו רקמות של בעלי חיים במיכלים מסומנים, אטמו אותן ואחסנו אותן בתנאי הקפאה16. לבסוף, להעביר את כל הפסולת למוסדות מקצועיים מוסמכים לסילוק; אסור בהחלט לערבב פסולת או להשליך אותה כלאחר יד.

6. ניתוח סטטיסטי

  1. אסוף את כל הנתונים המספריים ונתח באמצעות GraphPad Prism 9.0.
  2. השתמש במבחן t של מדגם בלתי תלוי כדי לנתח את ההבדלים בין הקבוצות.
  3. הגדר מובהקות סטטיסטית כ-**P <-0.01 עבור מובהקות גבוהה ו-*P <-0.05 עבור מובהק.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Results

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

שנים עשר עכברים הושתלו תת עורית עם משאבות אוסמוטיות ושרדו. כל קבוצות המודל פיתחו יתר לחץ דם (n = 6). שבעה ימים לאחר ההשתלה, ה-SBP הממוצע בקבוצת המודל עלה על 160 מ"מ כספית (איור 1A). בימים 14, 21 ו-28, ה-SBP בקבוצת המודל נשאר באופן עקבי מעל 160 מ"מ כספית. לעומת זאת, קבוצת ניתוחי הדמה שמרה על רמות SBP תקינות (כ-90-110 מ"מ כספית) לאורך כל הניסוי ללא עלייה משמעותית.

עשרים ושמונה ימים לאחר השתלת המשאבה האוסמוטית, אקו לב הצביע על כך שבהשוואה לקבוצת ניתוחי הדמה, קבוצת המ...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Discussion

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

פרוטוקול זה ייעל את שלבי המפתח הכרוכים בעירוי מתמשך של Ang II כדי לגרום לפיברוזיס יתר לחץ דם בשריר הלב באמצעות משאבה אוסמוטית ופירט את ההיבטים הקריטיים, כגון מיקום ההשתלה של המשאבה האוסמוטית וקביעת ריכוז Ang II. המשאבה מדגם 2004 נבחרה למשך 4 שבועות, ומינון Ang II חושב על סמך קצב העירוי הנומינלי, תוך התחשבות בשונות מינימלית בין אצווה. יעילותו של מודל זה אושרה באמצעות ניטור SBP, אולטרסאונד דופלר בצבע הלב וצביעה של מאסון. בפרוטוקול זה, נעשה שימוש בעכברי C57BL/6J זכרים בני 8 שבועות כדי להבטי...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כל המחברים מצהירים כי לכתב היד הזה אין ניגודי אינטרסים.

Acknowledgements

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

עבודה זו נתמכה על ידי הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (82074378), פרויקט מחלקת המדע והטכנולוגיה של מחוז סצ'ואן (2022YFS0618), פרויקט משרד המדע והטכנולוגיה ועבודת הכישרונות של לוז'ו (2023JYJ029), פרויקט המעבדה המחוזית לרפואה סינית מסורתית גואנגדונג (HQCML-C-2024005), תוכנית המדע והטכנולוגיה של שנזן (JCYJ20230807094603007, JCYJ20240813152440051), קרן המחקר הרפואי של שנזן (A2403028), פרויקט האגודה הרפואית של סצ'ואן (Q2025014) והפרויקט של האוניברסיטה הרפואית הדרום-מערבית (2024ZKZ007, 2024ZKY073, 2023ZYYQ04). למממן לא היה תפקיד בתכנון המחקר, בניתוח הנתונים או בהחלטה לפרסם.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
אנג השניתאגיד סיגמא-אלדריץ'סיגמא, A9525
מכונת הרדמה לבעלי חייםשנזן פרס מדעי החיים בע"מR530
מכונת הנשמה לבעלי חייםשנזן פרס מדעי החיים בע"מR415
GraphPad Prism GraphPad Software Inc.גרסה 9.0
מד לחץ דם חכם ולא פולשניניפון סופט דרגון בע"מסופטרון, BP-98A
מיקרוסקופ אורחברת ייג'ינגטונג אופטיקת (שנגחאי) בע"מאולימפוס, SZ61TR
תמיסת צביעה וערכת צביעה של Masson Tricolorבייג'ינג סוליבאו טכנולוגיה בע"מסולארביו, G1340
עכבריםצ'נגדו דוסי אקספריימנטל אנימנטל אניימנטל בע"מC57BL/6J
משאבות אוסמוטיותתאגיד אלזהאלזט, דגם 2004
מערכות הדמיית אולטרסאונדתאגיד FUJIFILM VisualSonics, קנדהFUJIFILM, Vevo 3100

References

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Zhao, D., Liu, J., Wang, M., Zhang, X., Zhou, M. Epidemiology of cardiovascular disease in China: current features and implications. Nat Rev Cardiol. 16 (4), 203-212 (2019).
  2. Czubryt, M. P., Hale, T. M. Cardiac fibrosis: pathobiology and therapeutic targets. Cell Signal. 85, 110066(2021).
  3. Young, C. N., Davisson, R. L. Angiotensin-II, the brain, and hypertension: an update. Hypertension. 66 (5), 920-926 (2015).
  4. Goldblatt, H., Lynch, J., Hanzal, R. F., Summerville, W. W. Studies on experimental hypertension: I. the production of persistent elevation of systolic blood pressure by means of renal ischemia. J Exp Med. 59 (3), 347-379 (1934).
  5. Mezzano, S. A., Ruiz-Ortega, M., Egido, J. Angiotensin II and renal fibrosis. Hypertension. 38 (3), 635-638 (2001).
  6. Liu, Q., et al. Zhilong Huoxue Tongyu capsule inhibits hypertensive myocardial fibrosis via balancing TGF-β1/Smad3/Erbb4-IR/miR-29b pathway. Sci Rep. 15 (1), 25127(2025).
  7. Han, Y. J., Hu, W. Y., Piano, M., De Lanerolle, P. Regulation of myosin light chain kinase expression by angiotensin II in hypertension. Am J Hypertens. 21 (8), 860-865 (2008).
  8. Dikalova, A., et al. Nox1 overexpression potentiates angiotensin II-induced hypertension and vascular smooth muscle hypertrophy in transgenic mice. Circulation. 112 (17), 2668-2676 (2005).
  9. Zheng, H. Q., et al. Induction of thoracic aortic dissection: a mini-review of β-aminopropionitrile-related mouse models. J Zhejiang Univ Sci B. 21 (8), 603-610 (2020).
  10. Taiji, S., et al. Changes in breathing pattern during severe hypothermia and autoresuscitation from hypothermic respiratory arrest in anesthetized mice. Physiol Rep. 9 (23), e15139(2021).
  11. Lu, H., et al. Subcutaneous angiotensin II infusion using osmotic pumps induces aortic aneurysms in mice. J Vis Exp. (103), e53191(2015).
  12. Gao, E., et al. A novel and efficient model of coronary artery ligation and myocardial infarction in the mouse. Circ Res. 107 (12), 1445-1453 (2010).
  13. Liu, M., et al. Zhilong Huoxue Tongyu capsule inhibits rabbit model of hyperlipidemia and atherosclerosis through NF-κB/NLRP3 signaling pathway. Heliyon. 9 (11), e20026(2023).
  14. Foot, N. C. The Masson trichrome staining methods in routine laboratory use. Stain Technol. 8 (3), 101-110 (1933).
  15. Van De Vlekkert, D., Machado, E., D'azzo, A. Analysis of generalized fibrosis in mouse tissue sections with Masson's trichrome staining. Bio Protoc. 10 (10), e3629(2020).
  16. Bansod, H. S., Deshmukh, P. Biomedical waste management and its importance: a systematic review. Cureus. 15 (2), e34589(2023).
  17. Li, X., et al. Epigenetics-based therapeutics for myocardial fibrosis. Life Sci. 271, 119186(2021).
  18. Villalobos, E., et al. Fibroblast primary cilia are required for cardiac fibrosis. Circulation. 139 (20), 2342-2357 (2019).
  19. Percie Du Sert, N., et al. The ARRIVE guidelines 2.0: updated guidelines for reporting animal research. Br J Pharmacol. 177 (16), 3617-3624 (2020).
  20. Kawada, N., et al. A mouse model of angiotensin II slow pressor response: role of oxidative stress. J Am Soc Nephrol. 13 (12), 2860-2868 (2002).
  21. Tamplin, M. R., et al. Longitudinal testing of retinal blood flow in a mouse model of hypertension by laser speckle flowgraphy. Transl Vis Sci Technol. 10 (2), 16(2021).
  22. Lever, A. F., Lyall, F., Morton, J. J., Folkow, B. Angiotensin II, vascular structure and blood pressure. Kidney Int Suppl. 37, S51-S55 (1992).
  23. Kuwahara, F., et al. Hypertensive myocardial fibrosis and diastolic dysfunction: another model of inflammation. Hypertension. 43 (4), 739-745 (2004).
  24. Schultz, J. E. L., et al. TGF-β1 mediates the hypertrophic cardiomyocyte growth induced by angiotensin II. J Clin Invest. 109 (6), 787-796 (2002).
  25. Ye, S., et al. Celastrol attenuates angiotensin II-induced cardiac remodeling by targeting STAT3. Circ Res. 126 (8), 1007-1023 (2020).
  26. González, A., et al. Myocardial interstitial fibrosis in hypertensive heart disease: from mechanisms to clinical management. Hypertension. 81 (2), 218-228 (2024).
  27. Ock, S., et al. IGF-1 protects against angiotensin II-induced cardiac fibrosis by targeting αSMA. Cell Death Dis. 12 (7), 688(2021).
  28. Li, R., Frangogiannis, N. G. Integrins in cardiac fibrosis. J Mol Cell Cardiol. 172, 1-13 (2022).
  29. Wang, M. Y., et al. OTUD1 promotes hypertensive kidney fibrosis and injury by deubiquitinating CDK9 in renal epithelial cells. Acta Pharmacol Sin. 45 (4), 765-776 (2024).
  30. Ravanetti, F., et al. Modeling pulmonary fibrosis through bleomycin delivered by osmotic minipump: a new histomorphometric method of evaluation. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 318 (2), L376-L385 (2020).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Reprints and Permissions

Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article

Request Permission

Tags

Hypertensive Myocardial FibrosisAngiotensin IIOsmotic PumpMouse ModelCollagen DepositionSubcutaneous ImplantationSystolic Blood PressureLeft Ventricular FunctionPhenotype VerificationModel Evaluation
Video Coming Soon

Related Articles