הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר מחקר

פגיעה מאוחרת ומתקדמת באשכים לאחר החשיפה בעכברים עקב חלקיקים דקים (PM2.5)

313 צפיות

⸱

DOI:

10.3791/69626

⸱

12 בדצמבר 2025

 ,  ,  ,  ,  , 
1School of Medicine, Fujian Health College

במאמר זה

סיכום

חשיפה ל-PM2.5 גורמת לפגיעה מאוחרת באשכים במודלים של חולדות באמצעות תגובות דלקתיות ממושכות, אפופטוזיס מוגבר של תאי נבט, ירידה בוויסות של קונקסין-43/אוקלודין, ואיתות התואמים את הפעלת מסלול JNK, המדגיש את האיום ארוך הטווח על בריאות הרבייה הגברית.

תקציר

חלקיקים עדינים (PM2.5) מעורבים יותר ויותר בפגיעה ברבייה של הגברים. עם זאת, מכיוון שרוב המחקר נשאר ממוקד חריף, מתעכב, מתמשך או מתקדם לאחר החשיפה – קריטי להערכת סיכון לטווח ארוך – עדיין לא מובן היטב. הקמנו מודל עכברוש לפתרון זמן כדי לקבוע האם הפציעה נמשכת או מחמירה לאחר החשיפה. שבעים ושתיים זכרים של חולדות ספרג-דולי חולקו באקראי לתשע קבוצות (ביקורת; רכב בגיל 24 שעות, 1, 2 ו-4 חודשים; PM2.5 באותן נקודות זמן) וקיבלתי PM2.5 תוך אף ב-5 מ"ג/ק"ג/יום במשך 7 ימים. כמתנו את איכות הזרע ומדדי האיברים הרבייתיים, בדקנו היסטולוגיה של אשכים ואולטרסטרוקטר, מדדנו טסטוסטרון בדם, FSH, LH ו-E2, פרופילנו mRNA של ציטוקינים דלקתיים (IL-1β, IL-6, TNF-α, IFN-γ), הערכנו אפופטוזיס תאי נבט באמצעות TUNEL, והערכנו חלבונים מחוברים וקשורים ללחץ (Connexin-43, Occludin, JNK). חשיפה ל-PM2.5 גרמה לירידות מתמשכות בריכוז הזרע ובתנועתיותו, יחד עם עלייה במומים ואטרופיה באשכים ובאפידידימלים שלא התאוששו במהלך 4 החודשים לאחר החשיפה. היסטולוגיה הראתה דילול הדרגתי של האפיתל הזמניפרי וניוון אולטרסטרוקטורי. הפרעות אנדוקריניות היו גם ניכרות, עם ירידה בטסטוסטרון ושינוי בגונדוטרופינים. מבחינה מכנית, החשיפה ל-PM2.5 שמרה על ביטוי גבוה של IL-1β ו-IL-6, קידמה אפופטוזיס של תאי נבט, והורידה את קונקסין-43 ואוקלודין, תוך הצגת דפוסים התואמים את הפעלת מסלול JNK. יחד, ממצאים אלו מראים רעילות אשכית מאוחרת ומתקדמת לאחר סיום החשיפה ל-PM2.5 ומצביעים על כך ששמירה על שלמות החיבור ומיקוד ב-JNK עשויים להפחית נזק רבייה ארוך טווח.

מבוא

PM2.5, תערובת מורכבת של חלקיקים דקים בקוטר אווירודינמי של ≤2.5 מיקרון, מקורו בפליטות תעשייתיות, פליטת כלי רכב ושריפת ביומסה, והפך לזיהום סביבתי עולמי מרכזי1. מחקרים אפידמיולוגיים מקשרים בין חשיפה ל-PM2.5 למחלות נשימה ולב וכלי דם2, וכן ליקויים במערכת הרבייה3. ההשפעה על פוריות הגברים מדאיגה במיוחד בשל הראיות לכך שזיהום אוויר עלול להפחית את איכות הזרע4. גורמים גבריים תורמים ליותר ממחצית ממקרי אי-הפוריות בעולם, ומספר מחקרים מדווחים על ירידות משמעותיות בפרמטרי הזרע בעשורים האחרונים. ניתוחים גלובליים אחרונים מאשרים עוד ירידה נרחבת באיכות הזרע באזוריםשונים. בעוד שגורמים כמו עישון, שימוש באלכוהול, קרינה וחשיפה לכימיקלים הם סיכונים מבוססים7, PM2.5 הפך לרעיל רבייתי נוסף המכוון לאשכים8.

האשכים רגישים מאוד לרעלים סביבתיים בשל המבנה הפיזיולוגי הייחודי שלהם והפעילות המתמשכת של הזרע. מחקרים קודמים הראו כי חשיפה ל-PM2.5 עלולה לגרום לנזק לאשכים דרך מסלולים שונים, כגון לחץ חמצוני, תגובות דלקתיות והפרעה במחסום הדם-אשך9. השפעות חריפות אלו מאופיינות בירידה באיכות הזרע, היסטולוגיה לא תקינה של האשכים וחוסר איזון הורמונלי10. עם זאת, רוב המחקרים מתמקדים בפגיעה מיידית, מה שמשאיר את ההשפעות ארוכות הטווח או המאוחרות מאופיין בצורה לקויה.

למודלים הנוכחיים של חשיפה ל-PM2.5 יש מגבלות מובנות: שאיפת כל הגוף מדמה חשיפה טבעית אך דורשת ציוד מיוחד וחסרה דיוק מינון11, בעוד שהזרקה תוך-קנה מבטיחה שליטה במינון אך היא פולשנית ואינה מצליחה לשכפל את הצטברות החלקיקים הפיזיולוגית12. המודל התוך-נזלי שלנו נמנע מהחסרונות הללו – המשלוח הלא פולשני שלו תואם את דפוסי השקיעה בדרכי הנשימה העליונה, מאפשר שליטה מדויקת במינון, ותומך בדגימה רב-זמנית ארוכת טווח לזיהוי פציעה מאוחרת, העולה על היכולת של מודלים מסורתיים ממוקדי אקוטי13.

המינון שלנו של 5 מ"ג/ק"ג ליום PM2.5 תואם את פרדיגמות החשיפה התת-חריפה למכרסמים שהוכחו כמעוררות תגובות רבייה, ובאמצעות המרת שטח פנים הגוף, מעלה מינון אנושי פי ~6 מרמות הסביבה - הסטנדרט להאצת ביטויים ארוכי טווח של רעילות14. שיקולי המין חלים: בעוד שחולדות חולקות פיזיולוגיה של אשכים שמורת עם בני אדם, מחזור הזרע הקצר יותר שלהם עשוי להאיץ את התקדמות הפציעה שנצפתה בנקודות הזמןשלנו 15, והלידה התוך-אפית שונה מהשקיעה הנשימתית התחתונה של האדם, אם כי התפשטות רעלים מערכתית לאשככים מאושרת.

ההשפעות המאוחרות של חשיפה לרעלים סביבתיים הן קריטיות להערכת סיכוני רבייה ארוכי טווח, שכן הן עשויות לחשוף נזק בלתי הפיך שאינו ניכר בתצפיות קצרות טווח16. לדוגמה, חלק מהרעלים עלולים לגרום לפגיעות סמויות באשכים, שמתבטאות בהדרגה או מחמירה עם הזמן, אפילו לאחר הפסקת החשיפה, מה שעלול להוביל לתפקוד רבייתי כרוני17. בהינתן הנפוצים וההתמדה של PM2.5, קביעת האם רעילות הרבייה שלו נמשכת או מחמירה לאחר החשיפההיא קריטית.

דלקת ממושכת, לחץ חמצוני ומנגנוני תיקון פגומים הם גורמים סבירים להשפעות מאוחרות. העלאת ויסות של IL-1β, IL-6 ו-TNF-α המושרה על ידי PM2.5 יכולה לשמור על דלקת כרונית, לשבש את יצירת הזרע ולקדם אפופטוזיס תאי נבט19. נזק לחלבוני הצומת המרכזיים, כמו Connexin-43 ו-Occludin, פוגע במחסום הדם-אשך ועלול למנוע התאוששות פונקציונלית20. הפעלת מסלול הקינאז הסופי של c-Jun (JNK), המתווך של מאמץ ואיתות אפופטוטי, גם היא מעורבת21.

למרות ההכרה הגוברת ברעילות הרבייה של PM2.5, קיים פער ידע משמעותי לגבי הדינמיקה הזמנית של נזק אשכים לאחר הפסקת החשיפה. בפרט, עדיין לא ברור כמה זמן נמשכות הפציעות באשכים, האם הן מחמירות עם הזמן, ואילו מסלולים מולקולרייםמניעים את ההשפעות המאוחרות הללו. מענה לשאלות אלו הוא קריטי לפיתוח אסטרטגיות מניעתיות וטיפוליות ממוקדות להפחתת נזק רבייתי לגברים הנגרמת על ידי PM2.5.

נותרו פערים משמעותיים בנוגע למשך, להתקדמות ולמנגנונים של פגיעה באשכים הנגרמת על ידי PM2.5 לאחר הפסקת החשיפה. מחקר זה מתמודד עם פערים אלה על ידי הערכת נקודות קצה רבייה; היסטופתולוגיה; פרופילי הורמונים - במיוחד הורמון מגרה זקיקים (FSH), הורמון לוטאיניזציה (LH) ואסטרדיול (E2); דלקת; אפופטוזיס; וביטוי חלבון מחסום בנקודות זמן מרובות לאחר החשיפה. הממצאים מספקים תובנות לגבי הסיכונים ארוכי הטווח ברבייה של PM2.5 ומנחים אסטרטגיות בריאות ציבוריות להגנה על פוריות גברית.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

כל ההליכים לבעלי חיים בוצעו בהתאם לתקנות מוסדיות ואושרו על ידי ועדת האתיקה לבעלי חיים של מכללת הבריאות פוג'יאן (אישור פרויקט מס': DW2024-01).

בטיחות ופסולת מסוכנת
חומרים רעילים כולל פורמלין, טטרוקסיד אוסמיום וכלורופורם טופלו במכסה אדים מוסמך תוך לבישת ציוד מגן אישי מתאים. פסולת אורגנית הלוגנית ותמיסות המכילות אוסמיום נאספו במיכלים ייעודיים והושלכו בהתאם לדרישות המוסדיות. פנטוברביטל נתרן נרשם כחומר מבוקר, והחריפים טופלו בבטחה לאורך כל המחקר.

חומר וטיפול ב-PM2.5
חומר ייחוס סטנדרטי של PM2.5 שימש למינון. בהתאם לשיטות הכנת חלקיקים שנקבעו, אבקה יבשה הושתה ב-PBS סטרילי בריכוז הנדרש ועוברה באמבט מים למשך 10-15 דקות מיד לפני השימוש, ללא חומר פעיל. מתלים עובדים הוכנו טריים מדי יום. רמות האנדוטוקסין הוערכו באמצעות בדיקת ליזאט אמבוציט לימולוס ולא היו ניתנות לזיהוי. כאשר נדרש, נכללו בקרות פולימיקסין-B כדי להוציא השפעות מונעות LPS.

בניית מודלים של בעלי חיים בחיים
שבעים ושתיים חולדות ספרג-דולי זכרים עם SPF (בני חודשיים, 190 ± 10 גרם) אוחסנו בתנאים סטנדרטיים וחולקו באקראי לתשע קבוצות (n = 8 לכל קבוצה), שכללו קבוצת ביקורת, קבוצות רכב שנדגמו בגיל 24 שעות, 1, 2 ו-4 חודשים, וקבוצות שנחשפו ל-PM2.5 באותן נקודות זמן. PM2.5 ניתנה דרך האף ב-5 מ"ג-ק"ג-1∙יום-1 ב-10-20 מיקרוליטר לנאריס תחת הרדמה איזופלורנית קלה פעם ביום במשך 7 ימים. לאחר הזריקה, החולדות הונחו על הגב למשך דקה עד שתיים דקות כדי להקל על השאיפה. בעלי החיים נשמרו עד להמתת חסד בנקודות הזמן שנקבעו לאחר החשיפה, ומסת הגוף נרשמה לצורך חישובי מקדמי האיברים. נקודות הקצה כללו מקדמי איברים, איכות זרע, היסטולוגיה ואולטרסטרוקטורם, הורמוני רבייה בסרום ובדיקות מולקולריות.

מורפולוגיה של איברי רבייה והערכת איכות הזרע
אשכים ואפידידימידים ננתחו בהרדמה עמוקה בפנטוברביטל, טושטשו ונשקלו כדי לחשב מקדמי איברים. הזרע נאסף מאפידידימיס הקאודה על ידי טחינה בבופר חימום מוקדם בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס. הריכוז נקבע באמצעות המוסיטומטר. התנועתיות הוערכה על ידי בדיקת לפחות 200 זרעים בחמישה שדות או יותר שאינם חופפים על שקופיות שהתחממו מראש. המורפולוגיה הוערכה לאחר קיבוץ, מריחה וצביעה באאוזין-ניגרוזין או Diff-Quik, כאשר לפחות 200 זרעים נמדדו לכל עכברוש. כל ההערכות היו עיוורות, ושכפולים טכניים נמדדו בממוצע כדי לקבל ערך אחד לכל בעל חיים.

ניתוח היסטולוגי ואולטרה-מבני של רקמת אשכים
האשכים הוקצו בפורמלין נייטרלי 10%, עובדו באמצעות אתנול וקסילן מדורגים, מוטמעים בפרפין, וחתיכים ב-5 מיקרון לצביעת HE. חתכים מוכתמים הוערכו באמצעות דגימה אקראית שיטתית, כאשר הוחלו חריגות עבור חתכים אלכסוניים, ארטיפקטים או קיבוע לקוי. קוטר הצינורות חושב מצירים אורתוגונליים, ועובי האפיתל נמדד בנקודות מרווחות שווות. הניתוחים היו עיוורים, והועברו לפחות 10 צינורות לכל עכברוש.

ל-TEM, גושי רקמה קטנים קיבעו בגלוטראלדהיד, הוקמעו לאחר טטרוקסיד אוסמיום, התייבשו, חודרו בשרף ופולימרזו. חתכים דקים במיוחד צולמו באצטט אורניל וציטרט עופרת וצולמו בעוצמה של 60-120 קילו-וולט בהגדרות עקביות. בקרת איכות כללה הערכה של שלמות הממברנה והמיטוכונדריה והימנעות מפריטי חילוץ.

מבחן אימונוסורבנט מקושר באנזימים (ELISA)
נאסף דם מהאאורטה הבטנית תחת הרדמה בתוך חלון בוקר קבוע כדי לשלוט בשינויים צירקדיים. לאחר קרישה וצנטריפוגה, הסרום נלקח ואוחסן בטמפרטורה של −80 מעלות צלזיוס. טסטוסטרון, FSH, LH ו-E2 נמדדו באמצעות פלטפורמת אימונואסיי מאומתת. הדגימות הופעלו בשכפול עם בקרות מתאימות, ודיוק הבדיקה עמד במפרטי הפלטפורמה. דגימות עם המוליזציה או ליפמיות הוצאו.

תגובת שרשרת פולימראז כמותית בזמן אמת (RT-qPCR)
סך ה-RNA הופק מרקמת אשכים באמצעות פנול-כלורופורם וטוהר באמצעות משקעי איזופרופנול ושטיפת אתנול. איכות ה-RNA אושרה באופן ספקטרופוטומטרית. cDNA סונתזה, ובוצע RT-qPCR עם כימיה מבוססת צבע בתנאי מחזור סטנדרטיים, ולאחר מכן ניתוח עקומת התכה. רמות הביטוי נורמל ל-GAPDH באמצעות שיטת 2−ΔΔCq .

ניתוח כתמים מערביים
ליזטים חלבונים הוכנו בבופר RIPA עם מעכבי פרוטאז, נמדדו באמצעות בדיקת BCA ודנוטרציה בבופר הטעינה. העברת SDS-PAGE ו-PVDF בוצעה בתנאים מבוקרים. הממברנות נחסמו, דגרו עם נוגדנים ראשוניים ל-Connexin-43, Occludin, JNK ו-GAPDH, ואחריהם נוגדנים משניים מצומדים ל-HRP. רצועות זוהו באמצעות כימילומינסנציה, וצפיפות כללה חיסור רקע, נרמול ל-GAPDH, והרחבה לקבוצת הביקורת.

ניתוח סטטיסטי
הנתונים דווחו כממוצע ± SD. ANOVA חד-כיווני עם מבחן הפוסט-הוק של טוקי או מבחן t של סטודנט שימש במידת הצורך, כאשר נתונים לא פרמטריים נותחו במבחן Mann-Whitney U . ערך p < 0.05 נחשב משמעותי.

השלמה וניקוי
כל הפסולת הכימית המסוכנת נלקחה והושלקה כראוי. נתונים גולמיים, כולל פלטי מכשירים וקבצי ניתוח, נשמרו בארכיון עם הערות מתאימות כדי להבטיח מעקב.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

הידרדרות מתמשכת בתפקוד הרבייה הזכרית בעכברים, המאופיינת בירידה באיכות הזרע ופגיעה בהתפתחות איברי הרבייה עקב חשיפה ל-PM2.5

כדי לחקור את השפעת PM2.5 על תפקוד הרבייה הזכרי, איכות הזרע, מקדמי איברי הרבייה ומדדים קשורים נבדקו בתשע קבוצות של זכרים חולדות. בוצעו ניתוחים ביחס לנקודת הזמן של 24 שעות לאחר החשיפה. למרות שלא נכללה נקודת זמן לדגימה ביום השביעי, תגובות דלקתיות ופגיעה היסטולוגית היו ברורות במשטר הנוכחי, התומכות בתוקף תנאי החשיפה.

חולדות שנחשפו ל-P...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

חשיפה קצרה ל-PM2.5 לוותה בהידרדרות הדרגתית לאחר החשיפה של תפקוד הרבייה הגברי במשך 1-4 חודשים. ממצאים אלו תומכים ברעילות רבייה תלויה בזמן שנמשכת לאחר הפסקת המינון ומרחיבים תצפיות קודמות על פגיעה רבייתית הקשורה ל-PM2.523.

כדי לשפר את השחזוריות, סידרנו ארבעה מרכיבים. ראשית, עקביות החשיפה נשמרה על ידי נרמול המינון למסת הגוף, שליטה בנפח התוך-אף ובמיקום, ושימוש בהרדמה קצרה עם התאוששות על שכיבה. שנית, לוח זמנים מדורג לאחר החשיפה ב-24 שעות, 1, ...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

למחברים אין ניגודי עניינים להצהיר עליהם.

תודות

עבודה זו נתמכה על ידי קרן המדע הטבעי של מחוז פוג'יאן, סין (מענק מס' 2023J01170).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
1% אוסמיום טטרוקסידTCI, סיןO0308לניתוח TEM של רקמת אשכים לאחר קיבוע
10% פורמלין ניטרלי עם בופרסולארביו, סיןPC0020לקיבוע דגימות רקמת אשכים בצביעת HE
2.5% גלוטראלדהידסולארביו, סיןG1102לתיקון דגימות רקמת אשכים בניתוח TEM
75% אתנולאקרוס אורגניקס, ארה"ב61509-0040לצורך טיהור RNA ששקע ב-RT - qPCR
מדלמת כימילומינסנציה אוטומטיתביו-רד, ארה"בכימדוקמשמש להדמיה אוטומטית של אותות כימילומינסנטיים ב-Western Blotting.
ערכת בדיקת חלבון BCAסולארביו, סיןPC0020לקביעת ריכוז חלבון כולל בניתוח ווסטרן בלוט
מאגר חסימהלא צויןT7131Aבשימוש בניתוח כתמים מערביים לביטול קישור לא ספציפי
כלורופורםאקרוס אורגניקס, ארה"ב327270010משמש בהפרדת RNA במהלך RT - qPCR
קונקסין - 43אבקאם, ארה"בab11370מזהה את הביטוי וההתפלגות של חלבון מחסום דם - אשך מרכזי כדי לסייע בהערכת שלמות המחסום
ערכת ECLביושארפ, סיןBL520Bלהמחשת רצועות חלבון בניתוח ווסטרן בלוט
ערכות ELISA (לטסטוסטרון, FSH, LH, E2)אבקאם, בריטניהab108666; ab108702; ab108651; ab108667לזיהוי הורמוני רבייה בסרום
אאוסיןסולארביו, סיןG1002בשימוש בצביעת HE של רקמת אשכים
שרף אפוקסיסולארביו, סיןGP2001להטמעת דגימות רקמת אשכים בניתוח TEM
GAPDHאבקאם, ארה"בab128915מעריך את האפופטוזיס של תאי אשכים הנגרמת על ידי PM2.5 ומספק בסיס מורפולוגי לחקר השפעתו על אפופטוזיס תאי אשך
המטוקסיליןסולארביו, סיןG1077בשימוש בצביעת HE של רקמת אשכים
מערכת הדמיהניקון, יפןניקון DS-U3משמש להדמיה דגימות תחת מיקרוסקופ.
איזופרופנולאקרוס אורגניקס, ארה"בAC447080025משמש במשקעים של RNA במהלך RT - qPCR
JNK אבקאם, ארה"בab124956חוקר את המנגנון המולקולרי של פגיעת אשכים הנגרמת על ידי PM2.5 ומזהה את סוגי התאים שבהם הוא מופעל
  קורא מיקרופלטמכשירים מולקולריים, ארה"בספקטרמקס iD3משמש לזיהוי אותות בלוחות מיקרו (למשל, ספיגה, פלואורסצנציה).
אוקלודיןאבקאם, ארה"בAB31721מבין את דרגת הנזק של מחסום הדם - האשך וחוקר את האינטראקציות בין חלבונים רלוונטיים
מיקרוסקופ אופטיצ'ונגצ'ינג אופטו - כלי אלקטרוני, סיןBDS200משמש לתצפית מיקרוסקופית אופטית כללית.
  מיקרוטום פתולוגיכלי שנגחאי קאייו, סיןRM2016משמש לחיתוך קטעים של רקמות פתולוגיות.
פנטוברביטל נתרןסולארביו, סיןG1102משמש להזרקה תוך-פריטוניאלית בחולדות לפני איסוף דם
חומר ייחוס סטנדרטי של PM2.5המכון הלאומי למטרולוגיה, סיןGBW13643לגבי חשיפה ל-PM2.5 בקבוצת ניסוי
ממברנת פוליווינילידין דיפלואוריד (PVDF)תרמו פישר, ארה"ב88585בשימוש בניתוח Western Blot להעברת חלבון
ערכת ריאגנט PrimeScript RTטאקארה, יפןRR037Qלצורך סינתזת cDNA ב-RT - qPCR
מערכת PCR בזמן אמתרוש, שווייץLightCycler 480משמש לתגובת שרשרת פולימראז בזמן אמת לניתוח ביטוי גנים.
מאגר ניתוק RIPAטאקארה, יפן  RR9161להפקת חלבונים בניתוח ווסטרן בלוט
שייקרתרמו, ארה"בMAXQ-4000משמש לנעירת דגימות בניסויים.
SPSSIBM, ארה"ב28לניתוח נתונים
סליין סטריליסולארביו, סיןS8160בשימוש בטיפול קבוצתי ברכב
ערכת TB Green Premix Ex Taq IIטאקארה, יפןRR820Sבשימוש ב-RT - qPCR
מיקרוסקופ אלקטרונים להעברת חשמל (TEM)היטאצ'י, יפןHT7800/HT7700משמש לתצפית אולטרה-סטרוקטורלית בקנה מידה ננומי.
ריאגנט טריזולאמביון, סין15596018להפקת RNA כולל ב-RT - qPCR
אולטרהמיקרוטוםלייקה, גרמניהלייקה UC7משמש לחיתוך חלקים דקים במיוחד ל-TEM.
מערכת העברת חלבון אוניברסלית / מכונת כתם העברת חלבוןביו-רד, ארה"בטרנס-בלוט טורבומשמש להעברת חלבון ב-Western blotting.
מיקרוסקופ אופטי זקוףניקון, יפןניקון אקליפס E100משמש לתצפית מיקרוסקופית אופטית זקופה.
אצטט אורנילמרק, גרמניה201030לצביעת חתכים דקים במיוחד בניתוח TEM של רקמת אשכים

מקורות

  1. Li, F., et al. Environmental pollution and human fertility: investigating the relationship between PM2.5 exposure and assisted reproductive technology outcomes. BMC Public Health. 25 (1), 1357(2025).
  2. Hayes, R. B., et al. PM2.5 air pollution and cause-specific cardiovascular disease mortality. Int J Epidemiol. 49 (1), 25-35 (2020).
  3. Montano, L., et al. Air pollution and COVID-19: a possible dangerous synergy for male fertility. Int J Environ Res Public Health. 18 (1), 1-15 (2021).
  4. Nassan, F. L., et al. Residential distance to major roadways and semen quality, sperm DNA integrity, chromosomal disomy, and serum reproductive hormones among men attending a fertility clinic. Int J Hyg Environ Health. 221 (6), 830-837 (2018).
  5. Aliakbari, F., et al. A review of methods for preserving male fertility. Zygote. 30 (3), 289-297 (2022).
  6. Santi, D., et al. Seasonal variation of semen parameters correlates with environmental temperature and air pollution: a big data analysis over 6 years. Environ Pollut. 235 (1), 806-813 (2018).
  7. Gabrielsen, J. S., Tanrikut, C. Chronic exposures and male fertility: the impacts of environment, diet, and drug use on spermatogenesis. Andrology. 4 (4), 648-661 (2016).
  8. Wang, C., et al. Exposure to automobile exhaust-derived PM2.5 induces spermatogenesis dysfunction by damaging UPR(mt) of prepubertal rats. Ecotoxicol Environ Saf. 245 (1), 114087(2022).
  9. Lafuente, R., García-Blàquez, N., Jacquemin, B., Checa, M. A. Outdoor air pollution and sperm quality. Fertil Steril. 106 (4), 880-896 (2016).
  10. Li, D., et al. Multiple organ injury in male C57BL/6J mice exposed to ambient particulate matter in a real-ambient PM exposure system in Shijiazhuang, China. Environ Pollut. 248 (1), 874-887 (2019).
  11. Chen, T., Jia, G., Wei, Y., Li, J. Beijing ambient particle exposure accelerates atherosclerosis in ApoE knockout mice. Toxicol Lett. 223 (2), 146-153 (2013).
  12. Liu, F., Li, W., Pauluhn, J., Trübel, H., Wang, C. Lipopolysaccharide-induced acute lung injury in rats: comparative assessment of intratracheal instillation and aerosol inhalation. Toxicology. 304 (1), 158-166 (2013).
  13. Seo, Y., et al. Optimizing anesthesia and delivery approaches for dosing into lungs of mice. Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol. 325 (3), L262-L269 (2023).
  14. Liu, B., et al. Spermatogenesis dysfunction induced by PM2.5 from automobile exhaust via the ROS-mediated MAPK signaling pathway. Ecotoxicol Environ Saf. 167 (1), 161-168 (2019).
  15. Fang, F., et al. Changes in the antioxidant level, cell cycle progression and apoptosis of testicular cells in rats with diet-induced impaired glucose regulation. Zhonghua Nan Ke Xue. 19 (5), 403-408 (2013).
  16. Zhou, L., et al. PM2.5 exposure impairs sperm quality through testicular damage dependent on NALP3 inflammasome and miR-183/96/182 cluster targeting FOXO1 in mouse. Ecotoxicol Environ Saf. 169 (1), 551-563 (2019).
  17. McCue, K., DeNicola, N. Environmental exposures in reproductive health. Obstet Gynecol Clin North Am. 46 (3), 455-468 (2019).
  18. Yang, R., et al. Chemical composition and transgenerational effects on Caenorhabditis elegans of seasonal fine particulate matter. Toxics. 11 (4), 1-12 (2023).
  19. Wong, E. W., Cheng, C. Y. Impacts of environmental toxicants on male reproductive dysfunction. Trends Pharmacol Sci. 32 (5), 290-299 (2011).
  20. Zheng, S., et al. Fine particulate matter (PM2.5) and the blood-testis barrier: an in vivo and in vitro mechanistic study. Environ Health Perspect. 133 (4), 47006(2025).
  21. Zhang, B. Y., et al. Schisandrin B alleviates testicular inflammation and Sertoli cell apoptosis via AR-JNK pathway. Sci Rep. 14 (1), 18418(2024).
  22. Allard, E. K., Boekelheide, K. Fate of germ cells in 2,5-hexanedione-induced testicular injury. II. Atrophy persists due to a reduced stem cell mass and ongoing apoptosis. Toxicol Appl Pharmacol. 137 (1), 149-156 (1996).
  23. Wei, X., et al. Inter- and trans-generational impacts of real-world PM2.5 exposure on male-specific primary hypogonadism. Cell Discov. 10 (1), 44(2024).
  24. Liu, J., et al. Maternal exposure to PM2.5 disrupting offspring spermatogenesis through induced Sertoli cells apoptosis via inhibin B hypermethylation in mice. Ecotoxicol Environ Saf. 241 (1), 113760(2022).
  25. Ren, L., et al. Maternal exposure to PM2.5 induces the testicular cell apoptosis in offspring triggered by the UPR-mediated JNK pathway. Toxicol Res (Camb). 11 (2), 226-234 (2022).
  26. Liu, J., et al. Fine particle matter disrupts the blood-testis barrier by activating TGF-beta3/p38 MAPK pathway and decreasing testosterone secretion in rat. Environ Toxicol. 33 (6), 711-719 (2018).
  27. Thangavel, P., Park, D., Lee, Y. C. Recent insights into particulate matter (PM2.5)-mediated toxicity in humans: an overview. Int J Environ Res Public Health. 19 (1), 1-20 (2022).
  28. Curbani, F., de Oliveira Busato, F., do Nascimento, M. M., Olivieri, D. N., Tadokoro, C. E. Inhale, exhale: why particulate matter exposure in animal models are so acute. Environ Pollut. 251 (1), 230-237 (2019).
  29. Mruk, D. D., Cheng, C. Y. The mammalian blood-testis barrier: its biology and regulation. Endocr Rev. 36 (5), 564-591 (2015).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

חשיפה ל-PM2.5איכות זרערעילות רבייתיתמודל חולדותאפופטוזיס של תאי נבטציטוקינים דלקתייםשיבוש אנדוקרינינתיב JNK
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.