מאמר שיטה

הפרדה אוטומטית של HPLC באמצעות LC-mate: דוגם אוטומטי משולב ואוסף חלקיקים לטיהור בקנה מידה מיקרו

DOI:

10.3791/69685

⸱

27 בפברואר 2026

 , 
1Natural Product Research Center, Shanghai Institute of Materia Medica, Chinese Academy of Sciences, 2University of Chinese Academy of Sciences

במאמר זה

סיכום

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

פותח דגם אוטומטי משולב וקולקטור שבר (LC-mate) לאוטומציה של הפרדות HPLC חוזרות. תואם לגלאי HPLC שמפיקים אותות אנלוגיים, LC-mate משפר את ביצועי מערכות המופעלות ידנית ומאיץ תהליכי מחקר התלויים בכרומטוגרפיה נוזלית בעלת ביצועים גבוהים.

תקציר

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כרומטוגרפיה נוזלית בעלת ביצועים גבוהים (HPLC) ממלאת תפקיד מרכזי בטיהור תרכובות בעלות ערך גבוה, ועונה על הדרישות הגוברות של תחומי כימיה וביולוגיה הן באקדמיה והן בסביבות תעשייתיות. עם זאת, הזרקה ידנית חוזרת ואיסוף חלקיקים במהלך טיהור בקנה מידה מיקרו מגבילים משמעותית את היעילות והשחזור. כדי להתגבר על צוואר הבקבוק הזה, פיתחנו מערכת משולבת לאוטוסמפלר ואיסוף שברים, שנקראת זמנית LC-mate, אשר מאוטומציה של הפרדות חוזרות על ידי תגובה ישירה לאותות אנלוגיים מגלאי HPLC. המכשיר בנוי סביב שסתום מתג בלחץ גבוה בעל שישה פורטים להזרקת דגימות ושסתום בורר לאיסוף שברים, כאשר פרמטרי התפעול נשלטים באמצעות ממשק מסך מגע אינטואיטיבי. LC-mate תואם לגלאי HPLC מסחריים המסוגלים להוציא יציאה אנלוגית ויכול גם להשיג הפרדה חוזרת של מצב שחרור גרדיאנט באמצעות הפעלת אות סינכרוני. ניסויים בהדגמה אישרו הפעלה יציבה והפרדות ניתנות לשחזור לטיהור מוצרים טבעי, והראו הפחתה ברורה בזמן הטיפול הידני. המערכת מציעה פתרון מעשי ונגיש לשיפור האוטומציה בתהליכי עבודה קונבנציונליים של HPLC, ומגשרת על הפער בין מערכות טיהור ידניות למערכות טיהור אוטומטיות לחלוטין.

מבוא

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

כרומטוגרפיה, שפותחה על ידי מ.ס. צווט בתחילת המאה ה-20, התפתחה לכרומטוגרפיה נוזלית מודרנית בעלת ביצועים גבוהים (HPLC) בשנות ה-60 עם התקדמות במכשור 1,2,3.

כיום, HPLC ממלא תפקיד קריטי בטיהור תרכובות בעלות ערך גבוה, ועונה על הביקושים הגוברים של תחומי ביומדיסין, כימיה וביולוגיה הן בתחומים אקדמיים והן בתחומים תעשייתיים. במחקר אקדמי, טיהור בקנה מידה מיקרו של מוצרים טבעיים ופתרון מולקולות כיראליות תלויים באופן קריטי בטכניקות HPLC חצי-הכנה 4,5,6,7,8. ברוב המקרים המעשיים, חוקרים מזריקים חלק מהתמיסה של הדגימה לעמודת HPLC בכל פעם במקום את כולה כדי למנוע אובדן דגימה בלתי צפוי או בשל מגבלת גודל העמודה, מה שהופך הזרקת דגימה ואיסוף חלקים חוזרים לבלתי נמנעים. למרות יכולת ההפרדה יוצאת הדופן שלו, השימוש ב-HPLC לטיהור דגימות נותר מוגבל בשל מגבלות מובנות במכשור ובזרימות העבודה הנוכחיות. צוואר בקבוק מרכזי טמון בתלות הכבדה בהתערבות ידנית, במיוחד בהזרקת דגימות ואיסוף חלקיקים. תהליכים אלו לא רק גוזלים זמן ודורשים עבודה רבה, אלא גם חשופים לטעויות אנוש, מה שפוגע בקצב התפוקה, השחזוריות והיעילות התפעולית הכוללת 9,10.

אוטוסמפלרים מסחריים ואוספי חלקים מיצרני HPLC גדולים, כגון Agilent, Shimadzu ו-Waters, מספקים אוטומציה אמינה ומדויקת, אך בדרך כלל מוגבלים בתוך מערכות חומרה ותוכנה קנייניות. לדוגמה, דגם אוטומטי Agilent 1260 Infinity II ואוסף השברים G1364F משולבים בצורה חלקה במערכות ה-HPLC של Agilent, ומספקים שחזור מצוין אך תאימות מוגבלת בין פלטפורמות. באופן דומה, דגמי SIL-20A/40C של Shimadzu ואוספי השברים FRC-40/FRC-10A מציעים קצב העברה גבוה ודיוק מכני מצוין, אך תלויים בארכיטקטורות הבקרה LC-20 ו-Nexera של Shimadzu. מודולי הסמפלר האוטומטי HPLC ואיסוף השברים III של Waters Alliance מספקים גם הם ביצועים עמידים ופורמטים גמישים לאיסוף (עד 300 מ"ל לדקה), אך נשארים מותאמים לסביבות ה-UHPLC וה-LC-MS הקנייניות של Waters. בנוסף, אוטוסמפלרים מסורתיים התלויים במחטי הזרקה עשויים להפחית את שחזור הדגימות, ואוספי שברים מבוססי צינור עלולים להיות לא נוחים בטיפול בנפחי שוטף גדולים. ברוב מכשירי HPLC האחרים, הפרדה חצי-הכנתית עדיין תלויה בהפעלה ידנית חוזרת ומייגעת.

אתגרים אלו מדגישים את הצורך בגישה חדשנית לאוטומציה של טיהור דגימות בתהליכי עבודה של HPLC. כדי לענות על צורך זה, פיתחנו את LC-mate, מכשיר קומפקטי ורב-שימושי שמשלב מודולי אוטוסמפלר ואיסוף שברים לפלטפורמה אחת. הליבה הנוזלית של LC-mate מורכבת משני רכיבים מרכזיים: שסתום מיתוג בלחץ גבוה בעל שישה פורטים (SKVA-3130-S) עשוי פלדת אל-חלד SUS 316 עם מסלול זרימה של 0.4 מ"מ ותמיכה בלחץ פעולה עד 45 מגה-פסקל, דירוג לשליטה מדויקת בהזרקת דגימה, ושסתום בחירה רב-ערוצים בעל 10 ערוצים עם נפח מתים מינימלי (27.5 מיקרוליטר פורט לפורט, חריץ רוטור של 5 מיקרוליטר) עם קוטר ערוץ זרימה של 1.2 מ"מ לאיסוף שברים יעיל. תצורה זו מצמצמת נפח מת ומפחיתה את הסיכון לזיהום צולב. לפרטים מפורטים על מכשירים, אנא עיינו בטבלה 1. LC-mate עשוי לקבל פלט אנלוגי מגלאי HPLC ולהפעיל את מכשיר ה-HPLC באמצעות אות סינכרוני, מה שמאפשר שליטה עצמאית הן בהזרקת הדגימה והן באיסוף החלקים.

טבלה 1: פרמטרים הקשורים למכשיר LC-mate. אנא לחצו כאן להורדת הטבלה הזו.

המכשיר מצויד בתוכנת שליטה ידידותית למשתמש ובממשק מסך מגע אינטואיטיבי המאפשר הדמיה בזמן אמת של אותות כרומטוגרפיים אנלוגיים. LC-mate תומך גם במצב הפרדה איזוקרטי וגם במצב גרדיאנט, ומאפשר למשתמשים להגדיר פרמטרים מרכזיים - כולל נפח ההזרקה, מספר זמני החזרה, זמן האינטרוול של כל הזרקה, ומצב איסוף [מבוסס סף, מבוסס זמן, או איסוף הכל (איסוף שברים מעל ומתחת לסף)], ולהפעיל פעולה אוטומטית מלאה עם פקודה אחת. דבר זה מבטל את הצורך בהתערבות ידנית חוזרת ומגביר משמעותית את יעילות טיהור HPLC.

איור 1 ממחיש את המראה הכולל, עקרון ההפעלה והתצורה של ה-LC-mate המשולב עם מערכת HPLC.

figure-introduction-1
איור 1: עיצוב והגדרת מערכת LC-mate. (א) פריסת סכמטית. (ב) דיאגרמת מכשירים. (ג) תמונת סידור מעשית. (D) חיבור קו העברת האות בין גלאי ה-UV ל-LC-mate. אנא לחצו כאן כדי לצפות בגרסה מוגדלת של הדמות הזו.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

1. בדיקת החיבור

  1. בדוק את חיבורי הצנרת של הממס בין ה-HPLC, LC-mate והעמודה הכרומטוגרפית כדי להבטיח מסלולי זרימה תקינים (איור 1A).
  2. בדוק את חיבור קו העברת האות בין גלאי ה-UV ל-LC-mate, כפי שמוצג באיור 1D.
    1. חבר את החוט השחור לטרמינל האדום ואת החוט הלבן לטרמינל השחור כדי להתאים לקוטביות האות האנלוגי.
    2. תסתכל על תצוגת ה-LC-mate. אם מופיע גל האות האנלוגי, החיבור נכון.
      הערה: אם אין גל נראה, הפוך את החיבורים: חבר את החוט השחור לטרמינל השחור ואת החוט הלבן לטרמינל האדום.
  3. בדוק את חיבור הטריגר בין גלאי UV ל-LC-mate.
    1. חבר את קצה כבל הנתונים לפתח היציאה של גלאי ה-UV.
    2. חבר את החוטים השחורים והלבנים מהקצה השני לטרמינלי ההדק הכחול והשחור ב-LC-mate, בהתאמה.
    3. הדק את הטרמינל והטריגר כדי להבטיח חיבור יציב.

2. הפעלת מערכת ההפרדה המשולבת

  1. ודא הפעלה תקינה של ה-HPLC.
  2. ודא הפעלה תקינה של ה-LC-mate.
    1. בעת הפעלת מערכת LC-mate, לחצו על סמל LC-mate בממשק כדי להריץ אוטומטית את תוכנית הבדיקה העצמית של המערכת ולאתחול מודולי חומרה מרכזיים.
    2. המתינו לטון הקצר של פרומפט Di (כ-0.5 שניות) ולהיעלמות ההודעה "בדיקה עצמית" על המסך לאחר סיום הבדיקה העצמית, שכן הם מצביעים על סיום האתחול.

3. אופטימיזציה של תנאי

  1. הגדר את תנאי ההפרדה ב-HPLC והתחל בהסרה כדי להשיג איזון עמודות.
  2. לחצו על סמל הבדיקה בצד השמאלי של המסך של LC-mate, והממשק הבא יוצג על המסך (איור 2A). נפח הזרקת קלט, זמן השחרור וזמני חזרה, ולחץ על אייקון ההתחלה; יוחל הרצת האוטוסמפלר, איסוף השברים ו-HPLC. במקרה זה, האלואנט זורם רק דרך יציאה 10 של שסתום הבורר, וניתן לאסוף אותו ידנית או להשליך אותו.
  3. זהה את תנאי ההפרדה האפשריים, כולל רזולוציה, זמן ריצה, זמן שמירה, נפח הזרקה ואורך גל UV וכו', כדי להקל על הפרדה ואיסוף שברים במצבים מתאימים.

4. ריצה אוטומטית

הערה: בהתבסס על הכרומטוגרם של תנאי הפרדה אפשריים, ניתן לבחור שיטת איסוף שברים מתאימה מתוך אפשרויות הסף, איסוף התזמון ואיסוף הכל בצד שמאל של הממשק.

  1. איסוף שברים על בסיס ערך סף
    1. בחר את מודול פונקציית הסף בצד שמאל של הממשק, והמערכת תציג את ממשק הגדרת הפרמטרים כפי שמוצג באיור 2B.
    2. הזן את נפח ההזרקה, זמני החזרה, סף וזמן השחרור, ולחץ על התחל; ה-HPLC וה-LC-mate ירוצו אוטומטית. שברים עם שיאים כרומטוגרפיים העולים על הסף ייאספו בבקבוקי איסוף שונים.
    3. עקבו אחרי סימני המצב המסודרים אנכית על התצוגה: צפו בהזרקה בתהליך כדי לוודא שההכנסת הדגימה החלה. בדוק את ההפרדה בתהליך כדי לוודא שההפרדה הכרומטוגרפית מתרחשת. שימו לב ל"ריקון מזרק" כדי לזהות מתי המזרק מפנה נוזל שנותר. שימו לב להדגשה כחולה של הטקסט המתאים כדי לאשר איזו מצב תפעולי פעיל כרגע.
      הערה: במהלך תהליך ההפרדה, לחיצה על סמל "כרומטוגרמה" תציג את הכרומטוגרמה וקו הסף בממשק חדש, והכרומטוגרמה זהה לזו שמופיעה על המסך של המחשב השולט ב-HPLC.
  2. איסוף שברים לפי תקופת זמן
    1. בחר את מודול איסוף התזמון מהצד השמאלי של הממשק כדי לפתוח את תפריט הגדרות הפרמטרים (איור 2C).
    2. הזן את הפרמטרים הנדרשים: נפח הזרקה, זמני חזרה, זמן השחרור, וסדרת זמן איסוף נדרש.
    3. לחץ על כפתור ההתחלה כדי להתחיל את הרצף האוטומטי, ואז מערכת HPLC ו-LC-mate ירוצו שוב ושוב לפי הפרמטרים שנקבעו.
  3. איסוף שברים עם מצב "איסוף הכל"
    1. בחר את מודול הפונקציות Collect All בצד שמאל של הממשק, המערכת תציג את ממשק הגדרת הפרמטרים כפי שמוצג באיור 2D.
    2. קבע ערך סף איסוף, ופסגות כרומטוגרפיות שמעל או מתחת לסף ייאספו בנפרד, מה שעשוי להבטיח שלא יאבד תרכובת בתערובת.
      הערה: אצטוניטריל הוא ממס דליק ורעיל. כל ההליכים הכוללים אצטוניטריל או ממסים אורגניים אחרים חייבים להתבצע במעבדה מאווררת היטב. הצוות חייב ללבוש ציוד מגן אישי (PPE) מתאים, כולל משקפי התזת כימיים וכפפות עמידות לממסים, בכל עת. יש לאסוף פסולת אצטוניטריל וממסים אורגניים אחרים במיכלים מסומנים ומסומנים כראוי לפסולת כימית מסוכנת. זרמי הפסולת הללו טופלו בהתאם לפרוטוקול הבריאות והבטיחות הסביבתית של המוסד שלנו על ידי שירות סילוק מורשה.

5. ניקוי צינורות

הערה: ניקוי הצינור מבטיח שאף דגימה לא תישאר בצינור כאשר משתמשים באוטוסמפלר בפעם הבאה.

  1. הכינו בקבוק קטן של ממס נקי, והכניסו את צינור ההזרקה של האוטוסאמפלר לממס.
  2. בחר את מודול הניקוי מהממשק השמאלי כדי לפתוח את תפריט הגדרות הפרמטרים (איור 2E).
  3. ניקוי צינור המזרק
    1. הגדר את נפח ההזרקה בין 0 ל-1000, וקבע את זמני החזרה (בלי הגבלות).
    2. לחצו על הניקוי מתחת ל"ניקוי הושלם" כדי להתחיל את ניקוי צינור המזרק.
    3. עקוב אחרי ספירת ה"מחזורים" כדי לעקוב אחרי מספר מחזורי הכביסה שהושלמו.
  4. ניקוי צינור האיסוף
    1. הגדר את זמן הניקוי (בלי הגבלות).
    2. לחצו על הניקוי מתחת ל"צינור נוכחי" כדי להתחיל בצינור ניקוי האיסוף.
    3. עקבו אחרי תצוגת הצינור הנוכחי כדי לאשר איזה צינור מנוקה, כאשר המערכת מעבדת ברצף מצינור 0 לצינור 10.

figure-protocol-1
איור 2: ממשק מסך מגע LC-mate להפעלת שיטה. (א) מסך אופטימיזציה. (B) מצב סף. (ג) מצב תזמון. (D) מצב איסוף כולם. (ה) ניקוי צינורות. (F) הגדרות. אנא לחצו כאן כדי לצפות בגרסה מוגדלת של הדמות הזו.

6. הוראות לשמירת נתונים

  1. הפעל שמירה אוטומטית. המערכת שומרת אוטומטית את הכרומטוגרמה לאחר סיום כל מחזור שחרור.
  2. בצע שמירה ידנית. לחץ על כפתור השמירה לאחר סיום ההשחרור. הזן את המטא-דאטה הנדרש בתיבת הדו-שיח כדי לשמור את הקובץ.
  3. בחר מיקום אחסון. בחר לשמור קבצים באחסון המקומי של המכשיר, בכרטיס SD או בכונן USB חיצוני.
    הערה: השתמש בכונן USB חיצוני לכל אחסון הנתונים כדי להימנע ממגבלות קיבולת ולהבטיח גישה נוחה לנתונים.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

טיהור של 2"-O-גלואיל-היפרוזיד
2"-O-גלויל-היפרוסיד (2-GH) הוא מרכיב מרכזי מסיס במים ב-Euphorbia helioscopia L., רפואה סינית מסורתית עם היסטוריה ארוכה של שימוש לפתרון ליחה ולחות11. המבנה הכימי שלו מוצג באיור 3. נמצא לאחרונה כי ל-2-GH יש אפקט אנטי-פיברוטי בדגם12 של בעל חיים. כדי להכין מספיק דגימת 2-GH טהורה למחקר פרמקולוגי נוסף, בוצעה...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

תוצאות אלו מראות שמערכת LC-mate יכולה לבצע באופן אוטונומי הזרקת דגימות רציפה ואיסוף חלקים בהתאם לפרמטרים שנקבעו, ובכך למזער משמעותית את ההתערבות הידנית ולהגביר את יעילות ההפרדה. המערכת כוללת ממשק ידידותי למשתמש, שדורש רק הגדרה ראשונית של חומרה ואחריה הפעלה אינטואיטיבית של מסך מגע.

כדי להבטיח הצלחה ניסיונית, שלושה היבטים קריטיים דורשים תשומת לב. ראשית, כבלי האות האנלוגי והטריגר חייבים להיות מחוברים כראוי בין גלאי ה-HPLC ל-LC-mate (כפי שמפורט בפרוטוקול שלב 1.2.2...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

ויימין ג'או הציע את עיצוב ה-LC-mate, שבוצע על ידי מהנדסים בחברת Shanghai Betterren Medical Technology Co., Ltd. פטנט למכשיר זה מוחזק במשותף על ידי Shanghai Betterren Medical Technology Co., Ltd. ומכון שנחאי לחומרים רפואיים, האקדמיה הסינית למדעים.

תודות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

המחברים מודים בכנות ל-Shanghai Betterren Medical Technology Co., Ltd. על כל תרומתם בהפיכת הרעיון לשחרור כימאים מהפעלה ידנית מייגעת של HPLC למציאות, ולמר שוהונג הה מחברת Welch Materials Inc. על בדיקת החזרתיות של LC-mate.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
כרומטוגרף נוזלי ביצועים גבוהים-EasySep-1050שנגחאי טונגווי אנליזה טכנולוגית בע"מ. דף האינטרנט של הכלי EasySep®-1050 https://www.instrument.com.cn/netshow/sh100522/C140238.htm1009992מערכת HPLC מודולרית מופרטיבית המשמשת בפרוטוקול. הוא כולל משאבת העברת ממס, גלאי UV/VIS ושסתום הזרקה ידני. מערכת זו מהווה את יחידת ההפרדה המרכזית ש-LC-mate מפעילה אוטומציה.
(עמוד כרומטוגרפי נוזלי) Sharpsil-U C18 150 מ"מ (L) & פעמים; 30 מ"מ (תעודה מזהה) S-10 ומיקרו; m, 100Aחברת פיתוח תעשייתי שנחאי שואנמיי בע"מ.U180110-300150הפוך - עמודת כרומטוגרפיה בשלב C18 עם גודל חלקיקים של 10 & mu; m וגודל נקבוביות של 100 & Aring;. הוא מיועד להפרדת מולקולות קטנות (כגון תרופות, תרכובות אורגניות) ויש לו שכפול ויציבות טובות. ממדי העמודה (אורך 150 מ"מ, קוטר פנימי 30 מ"מ) מתאימים לכרומטוגרפיה הכנה או חצי-הכנה.
LC-mateShanghai Betterren Medical Technology Co., Ltd. לכל שאלה ב-  הכלי LC-mate, אנא צור קשר עם המחבר המקביל בדוא"ל: wmzhao@simm.ac.cn GD202200337ציוד עזר למערכות כרומטוגרפיה נוזלית, ככל הנראה משמש להזרקת דגימות, ניהול פאזה ניידת או איסוף נתונים. ניתן לשלב אותו עם מערכות HPLC לשיפור האוטומציה והיעילות של תהליכים ניסיוניים

מקורות

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
  1. Snyder, L. R., Kirkland, J. J., Dolan, J. W. Introduction to modern liquid chromatography. , 3rd ed, John Wiley & Sons. Hoboken, NJ. (2010).
  2. Georges, A. Preparative liquid chromatography. J Chromatogr A. 965 (1-2), 129-161 (2002).
  3. Hostettmann, K., Marston, A., Hostettmann, M. Preparative chromatography techniques: applications in natural product isolation. , Springer. Berlin. (1998).
  4. Queiroz, E. F., Guillarme, D., Wolfender, J. L. Advanced high-resolution chromatographic strategies for efficient isolation of natural products from complex biological matrices: From metabolite profiling to pure chemical entities. Phytochem Rev. 23 (5), 1415-1442 (2024).
  5. Glowniak, K., Zgórka, G., Józefczyk, A., Furmanowa, M. Sample preparation for taxol and cephalomannine determination in various organs of Taxus sp. J Pharm Biomed Anal. 14 (8-10), 1215-1220 (1996).
  6. Gumustas, M., Ozkan, S. A., Chankvetadze, B. Analytical and preparative scale separation of enantiomers of chiral drugs by chromatography and related methods. Curr Med Chem. 25 (33), 4152-4188 (2018).
  7. Wu, T., et al. Preparative separation of four isomers of synthetic anisodamine by HPLC and diastereomer crystallization. Chirality. 31 (1), 11-20 (2019).
  8. Aguilar, M. I. HPLC of peptides and protein: Methods and protocols. , Humana Press. Totowa, NJ. (2004).
  9. Dong, M. W. Modern HPLC for practicing scientists. , John Wiley & Sons. Hoboken, NJ. (2006).
  10. Meyer, V. R. Practical high-performance liquid chromatography. , 5th ed, John Wiley & Sons. Chichester, UK. (2010).
  11. Ding, J., et al. Research progress on modern pharmacological effects and clinical applications of Euphorbia helioscopia L. World Chin Med. 20 (14), 2588-2594 (2025).
  12. Wang, J. Q., et al. Hypericin ameliorates renal tubulointerstitial fibrosis by inhibiting YAP. Acta Med Univ Sci Technol Huazhong. 54 (2), 190-197 (2025).
  13. Li, W. J., et al. Research progress on the hypoglycemic effects of Litsea coreana leaves. Mod Food Sci Technol. 38 (4), 292-297 (2022).
  14. 1260 Infinity Variable Wavelength Detector User Manual. Document G1314-90013. , Agilent Technologies Inc. https://www.agilent.com/cs/library/usermanuals/Public/G1314-90013_VWD-B-C_USR_EN.pdf (2010).
  15. 2487 Dual λ absorbance detector operator's guide. Document WAT048740, Rev. 2. , Waters Corporation. (2004).
  16. UltiMate 3000 series variable wavelength detectors VWD-3100 and VWD-3400RS operating instructions. Document 4820.7451, Rev. 1.7. , Thermo Fisher Scientific. https://conquerscientific.com/wp-content/uploads/2023/01/waters-2487-dual-absorbance-detector_operators-guide.pdf (2013).
  17. UltiMate 3000 VWD-3400RS detector product specifications. , Thermo Fisher Scientific. https://www.thermofisher.cn/order/catalog/product/cn/zh/5074.0010 (2013).
  18. Vargas Medina, D. A., Lozada-Blanco, A., García Rodríguez, J. P., Lanças, F. M., Santos-Neto, ÁJ. An open-source smart fraction collector for isocratic preparative liquid chromatography. HardwareX. 15, e00462(2023).
  19. Caputo, M., Lyles, J. T., Salazar, M. S., Quave, C. L. LEGO MINDSTORMS fraction collector: A low-cost tool for a preparative high-performance liquid chromatography system. Anal Chem. 92 (4), 1687-1690 (2020).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

בקש הרשאה לשימוש חוזר בטקסט או באיורים של מאמר JoVE זה

בקש הרשאה

תגיות

מאמרים קשורים