הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

השפעות טיפוליות של תמצית Acorus calamus L. על פגיעת עור הנגרמת מקרינה במודל עכברוש

469 צפיות

⸱

DOI:

10.3791/69705

⸱

9 בינואר 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Nuclear Medicine, General Hospital of Northern Theater Command, 2College of Medicine and Biological Information Engineering, Northeastern University, 3Shenzhen Institute for Advanced Study, University of Electronic Science and Technology of China

במאמר זה

סיכום

פגיעות עור הנגרמות מקרינה הן סיבוך נפוץ וחמור של טיפול בקרינויה אצל חולי סרטן. אין טיפול קליני יעיל. פרוטוקול זה מעריך את ההשפעה הטיפולית של תמצית Acorus calamus L. על פגיעות עור הנגרמות מקרינה, במטרה לספק מועמדים תרופתיים חדשים ואסטרטגיות טיפוליות למניעה וטיפול קליני.

תקציר

פגיעות עור הנגרמות מקרינה הן סיבוך נפוץ ומשתק בטיפול בסרטן, ולעיתים קרובות גורם לעיכוב בהחלמת פצעים ולהגברת אי הנוחות אצל המטופל. ישנן מספר תרופות טיפוליות זמינות למניעה או טיפול. הרפואה הסינית המסורתית, ובמיוחד Acorus calamus L., הראתה פוטנציאל בטיפול במגוון מחלות עור, אך יעילותה בפגיעות עור הנגרמות מקרינה עדיין לא נחקרה.

מחקר זה השתמש במודל עכברוש של ספרג-דולי שנחשף לקרינה בעוצמה של 45 ג'יי כדי לגרום לפגיעת עור. העכברים טופלו בתמצית 10%, 20% ו-40% של Acorus calamus L. במשך 45 ימים. ריפוי פצעים, דלקת, אפופטוזיס ואנגיוגנזה הוערכו באמצעות קצב ריפוי פצעים, ניתוח היסטופתולוגי, מדידות ציטוקינים, צביעת TUNEL ואימונוהיסטוכימיה. הטיפול ב-Acorus calamus L. האיץ את ריפוי הפצעים, כאשר קבוצת המינון הבינוני הציגה את שיעור ההחלמה הגבוה ביותר (88.97% ב-45 ימים). ניתוח היסטופתולוגי חשף ירידה בדלקת, שיפור בארגון הקולגן ויצירת כלי דם חדשים. רמות הציטוקינים הדלקתיים בסרום (IL-1β, IL-6, TNF-α) ירדו באופן משמעותי, והאפופטוזיס ירד, עם מודולציה של חלבוני אפופטוטיים מרכזיים (P53, Bax, Bcl-2). ביטוי VEGF ו-bFGF הוגדל, מה שקדם אנגיוגנזה ותיקון רקמות. Acorus calamus L. משפר את ההחלמה של פגיעות עור הנגרמות מקרינה על ידי הפחתת דלקת, עיכוב אפופטוזיס וקידום אנגיוגנזה. ממצאים אלו מצביעים על פוטנציאל שלה כסוכן טיפולי לניהול נזקי עור הנגרמות מקרינה, ומספקים אלטרנטיבה מבטיחה לניהול פגיעות עור הנגרמות מקרינה באונקולוגיה קלינית. נדרשים מחקרים נוספים כדי להבהיר את המנגנונים המולקולריים שלו.

מבוא

פגיעת עור הנגרמת מקרינה היא סיבוך שכיח וקשה הן בתאונות גרעיניות והן בטיפול קרינתי של גידולים1. ברדיותרפיה, כ-95% מהמטופלים מפתחים מידה מסוימת של נזקי עור, כולל אדמומיות, דקקוומציה, כיבים נמקיים חוזרים, כאב מתמשך וסיכון מוגבר להתפתחות ממאירית2. נגעים אלו לעיתים קרובות עמידים לטיפול, מפחיתים משמעותית את איכות חייהם של המטופלים ולעיתים מחייבים הפסקת הקרינה, ובכך מהווים אתגר קליני משמעותי באונקולוגיה קרינתית. המנגנונים הבסיסיים של נזק עור שנגרם מקרינה הם מורכבים, וכוללים בעיקר ייצור רדיקלים חופשיים ברקמות העור, שמפריעים לתהליכים תאיים ומחמירים את תהליך הריפוי 4,5. זה מוביל לביטוי ממושך של גנים הקשורים לאפופטוזיס, תגובות דלקתיות לא מווסתות ומסלולי איתות משתנים, שכולם תורמים לטבע המתמשך של פצעים הנגרמות מקרינה6.

כיום אין טיפול זהב מקובל באופן אוניברסלי לפציעות עור הנגרמות מקרינה. הניהול הקליני מדגישגישות אנטי-דלקתיות או נוגדי חמצון, במיוחד סטרואידים מקומיים, שמפחיתים תגובות עור באמצעות השפעות אנטי-דלקתיות, מדכאות חיסון ומכווצות כלי דם, אך עלולות לגרום לדילול העור בשימוש ממושך8. אמיפוסטין, חומר מגן רדיואקטוני מאושר על ידי ה-FDA, מוגבל בשימוש קליני בשל תופעות לוואי משמעותיות9. גורמי גדילה מאיצים את ריפוי הפצע על ידי קידום התרבות תאים, אנגיוגנזה ויצירת רקמות גרנולציה, אך פעולותיהם ממוקדות מאוד, מציעות שליטה מוגבלת על פגיעות ודלקות עמוקות ברקמות, ונושאות סיכון להיפרפלזיה מופרזת7. כתוצאה מכך, הרפואה הסינית המסורתית (TCM) משכה תשומת לב בזכות הפילוסופיה ההוליסטית שלה, מרכיבים פעילים מרובים עם השפעות טיפוליות מגוונות ופרופיל בטיחות חיובי. מחקרים קודמים הראו שמוצרים טבעיים, כגון תמצית ליקריץ, אלוורה פוליסכרידי וכורכומין, מקלים על דלקת ונזק לרקמות הנגרמות מקרינה על ידי איסוף רדיקלים חופשיים, עיכוב מתווכים פרו-דלקתיים (TNF-α, IL-6), וקידום התרבות פיברובלסטים 10,11,12. עם זאת, רוב המחקרים הללו בוחנים תרכובות פעילות בודדות או מטרות בודדות, ומספקים תובנות לא מספקת לגבי מנגנוני פעולה סינרגטית מרובת רכיבים. Acorus calamus L., צמח הידוע בתכונותיו האנטי-דלקתיות, נוגדי חמצון, אנטי-בקטריאליות וריפוי פצעים, הראה פוטנציאל להפרעות עור שונות.

Acorus calamus L., עשב רב-שנתי ממשפחת Araneae, מכיל מספר תרכובות ביואקטיביות, כולל טרפנים, פנילפרופנואידים, פלבנואידים, סטרואידים ואלקלואידים. הרכבו הרב-רכיבי מאפשר פעולה סימולטנית על מספר מטרות, ומייצר השפעות פרמקולוגיות סינרגטיות13. מחקרים מראים כי הוא מעכב מסלולי איתות דלקתיים כמו NF-κB ו-MAPK ומפחית את ביטוי ה-mRNA של גורמים פרו-דלקתיים כמו TNF-α ו-IL-6, תוך הגברת פעילות אנזימי נוגדי חמצון כמו SOD ו-GSH-Px, ובכך יוצר השפעות אנטי-דלקתיות, נוגדי חמצון ואנטיבקטריאליות14,15. למרות יתרונותיו המתועדים בטיפול במצבים עוריים הנגרמים מזיהומים ואלרגיות, תפקידו של Acorus calamus L. בפגיעות עור הנגרמות מקרינה עדיין לא נחקר מספיק. מחקרים עדכניים הראו את השפעותיו המגנות מפני נזק שנגרם מקרינה, מקדמים ריפוי פצעים ומפחיתים דלקת13. עם זאת, המנגנונים הטיפוליים הספציפיים של Acorus calamus L. בפגיעות עור הנגרמות מקרינה טרם הוברו במלואם.

המטרה הכוללת של מחקר זה היא להעריך את ההשפעות הטיפוליות של תמצית Acorus calamus L. במודלים בעלי חיים של פגיעות עור הנגרמות מקרינה. אנו מעריכים את ריפוי הפצעים, תגובות דלקתיות והתנהגות תאית כדי להבהיר את מנגנוני הפעולה של התמצית ממספר זוויות שונות. הממצאים נועדו לקבוע בסיס תיאורטי לשימוש ב-Acorus calamus L. בניהול קליני של נגעי עור הנובעים מטיפול קרינתי בסרטן. בנוסף, המחקר יציג את המאפיינים התפקודיים של התמציה, תרחישי התערבות מתאימים ונתוני יעילות מרכזיים כדי לסייע לקוראים לשפוט האם גישה מבוססת מוצר טבעי זו משלימה את הצרכים המחקריים או הקליניים שלהם. בסופו של דבר, מחקר זה מחפש אפשרויות טיפוליות יעילות לשיפור איכות החיים של מטופלים המקבלים טיפול קרינתי בגידול.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

הניסויים בבעלי חיים שתוארו במחקר זה אושרו על ידי ועדת האתיקה למחקר רפואי של בית החולים הכללי של פיקוד התיאטרון הצפוני (מספר אישור אתיקה: 2018-03). חולדות SD זכרים בדרגת SPF (6-8 שבועות, משקל 190-220 גרם) שימשו במחקר. פרטי הריאגנטים והציוד בהם נעשה שימוש מופיעים בטבלת החומרים.

1. אחסון בעלי החיים הניסיוניים

  1. נבחרו 108 חולדות SD זכרים עם SPF, בגיל 6 עד 8 שבועות ומשקל בין 190 ל-220 גרם.
  2. שמרו על טמפרטורת החדר של בעלי החיים על 22 ± 2 מעלות צלזיוס, לחות יחסית של 50 ± 5%, ומחזור אור-חושך של 12 שעות. אפשרו לעכברים גישה חופשית למזון ולמים. לאחר תקופת הסתגלות של שבוע, המשיכו לניסויי המשך.

2. קיבוץ בעלי חיים

  1. חלק את העכברים באקראי לחמש קבוצות מובחנות: קבוצה נורמלית (נורמלי, n = 18), קבוצת מודל (מודל, n = 18), קבוצות תרופות חיוביות (חיובי, n = 18, קרם בטמתזון)16), קבוצת ניסוי במינון נמוך (ניסיוני-L, n = 18), קבוצת ניסוי במינון בינוני (ניסיוני-M, n = 18), וקבוצת ניסוי במינון גבוה (ניסיוני-H, n = 18). למעט הקבוצה הנורמלית, כל הקבוצות נחשפו לקרינה.

3. הקמת מודל של בעלי חיים לפגיעת עור רדיואקטיבי

  1. מתן הרדמה בדיוק ובאי נוחות מינימלית באמצעות הזרקה תוך-הצפקית (I.p.) של תמיסת 1% נתרן פנטוברביטל (40 מ"ג/ק"ג). אשר את עומק ההרדמה על ידי התבוננות בהיעדר רפלקס הקרנית ובחוסר תגובה לצביטת האצבעות. מרחו משחה על עיני העכברים כדי למנוע יובש.
  2. הסר את שיער הגב של העכברים עם מכונת גילוח חשמלית. אחר כך חטא את אזור הגב ביוד ו-75% אלכוהול.
  3. שים כל חולדה במצב שכיבה. אבטח את הרדיאטור 32P-β (קצב מינון פני השטח: 0.9 Gy/min) מעל אזור עמוד השדרה הדו-צדדי (2 ס"מ × 2 ס"מ) במרכז 1 ס"מ לרוחב לקו האמצעי, כדי להבטיח שהמקור נוגע באפידרמיס ללא רווח. אבטח את האפליקטור עם סרט רפואי סטרילי כדי למנוע תזוזה במהלך הקרנה. הקרינו את אזור העור היעד למשך 50 דקות כדי להגיע למינון ספוג של 45 Gy17.
  4. כאשר העכברוש מתעורר לאחר הקרינה, החזירו אותו לכלוב האישי שלו, תוך הבטחת גישה למים ומזון בחופשיות, שמירה על טמפרטורה של 22 ± 2 מעלות צלזיוס, לחות יחסית של 50 ± 5%, ומחזור אור-חושך של 12 שעות.
    הערה: תהליך הניסוי חייב לעמוד בקפדנות בעקרונות המוגשים של הגנה ביולוגית ורדיואקטיבית על תעסוקה. בנוסף, כל הנהלים התפעוליים חייבים לעמוד בהנחיות להשלכה נכונה ותואמת של פסולת רפואית ורדיואקטיבית, כדי להבטיח את בטיחות ובריאות כל הצוות המעורבים.

4. הכנת תמצית Acorus calamus L. ומתן תרופות

  1. שקלו את הקצוות של Acorus calamus L., ודאו ניקוי יסודי, אפשרו להם להתייבש באוויר, וטחנו לאבקה גסה (40 רשת). שלבו 10-20 נפחים של 50% אתנול והומוגניזציה בטמפרטורת החדר למשך 24 שעות
  2. לאחר שמאפשרים לתמצית לשקוע למשך 30 דקות, יש לשחרר את הסופרנטנט ולבצע סינון ראשוני דרך 4-8 שכבות של גזה כדי להסיר זיהומים גסים. לאחר מכן, מסננים באמצעות נייר סינון, ואידוי את הסינון בלחץ מופחת במאייד סיבובי בטמפרטורה של 50-60 מעלות צלזיוס כדי לשחזר את הממס, מה שמוביל לשאריות מוצקות ללא ממס (AE, תכולת לחות < 5%).
  3. הכנת משחה AE18
    הערה: ניסח משחות תמצית של 10% (Experimental-L, עם לבן), 20% (Experimental-M, עם תמצית), ו-40% (Experimental-H, w/w) Acorus calamus L. בהתאם למהדורת הפרמקופיאה הסינית 2020 (פרק כללי 0109)19.
    1. שקלו במדויק את AE (למשל, 20 גרם עבור 20% משחת) ואת פטרולטום בדרגת תרופות מתאימה (למשל, 80 גרם עבור משחה של 20%).
    2. הוסף 10% מהפטרולטום הכולל ל-AE, הטרטורציה בעוצמה במשך 5 דקות ליצירת משחה הומוגנית (שיטת דילול גיאומטרית, שמבטיחה שה-AE מתפזר באופן שווה בבסיס הליפופילי).
    3. המיס את הפטרולטום שנותר בטמפרטורה של 60 מעלות צלזיוס, קרר ל-55 מעלות צלזיוס, והוסיף לאט לאט למשחת AE-Petrolatum.
    4. ערבבו מגנטית ב-250 סל"ד במשך 30 דקות בטמפרטורה של 55 מעלות צלזיוס, ואז ערבבו ברציפות תוך כדי קירור לטמפרטורת החדר לקבלת משחה חלקה וללא חלקיקים.
    5. הכנת שליטה ריקה: המיס את הפטרולטום ב-60 מעלות צלזיוס, ערבב ב-250 סל"ד למשך 30 דקות, ומקרר לטמפרטורת החדר (זהה לבסיס המשחה של AE).
    6. אחסן את כל המשחות והפטרולטום הריק בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס במיכלים סטריליים אטומים.
  4. כל הקבוצות קיבלו תרופות מקומיות פעמיים ביום בשעה 09:00 ו-17:00 במשך 45 ימים רצופים לאחר ההקרנה (הקבוצה הנורמלית, שלא עברה הקרנה, קיבלה את אותו לוח זמנים סינכרוני). המינון שהוחל היה 0.2 גרם לסמ"ר, והתפזר באופן שווה על שטח של 2 ס"מ × 2 ס"מ בעור הגב. הקבוצה הרגילה קיבלה רכב (פטרולטום), וקבוצת הדגם קיבלה רכב (פטרולטום). קבוצת הביקורת החיובית קיבלה קרם בטאמתזון. קבוצות הניסוי L, M ו-H קיבלו קרמים המכילים AE ב-10%, 20% ו-40% (בצבע/לבן), בהתאמה. לאחר כל מריחה, האזור המטופל עבר עיסוי עדין במשך 10 שניות לשיפור הספיגה, והחולדות הוגבלו למשך 5 דקות כדי למנוע ליקוק.

5. איסוף רקמת עור ודם של עכברוש

  1. הרדימו את החולדות באמצעות תמיסת פנטוברביטל נתרן 1% (40 מ"ג/ק"ג, i.p.). חטא כלי ניתוח וכריתה את העור לאורך אזור הפצע.
  2. קיבעו חלק מהרקמה ב-4% פאראפורמלדהיד (10 מ"ל), חלק נוסף בגלוטראלדהיד/אוסמיום טטרוקסיד (5 מ"ל, 2.5%), ושמרו את השאר בחנקן נוזלי לניתוח נוסף (ראו טבלת חומרים).
  3. אסוף דגימות דם מהאאורטה הבטנית של העכברוש. צנטריפוגה ב-3,000 × גרם ב-4 מעלות צלזיוס למשך 15 דקות; שאיבת הסופרנטנט לצינורות EP; העלות ואחסון בטמפרטורה של -80 מעלות צלזיוס.

6. הערכת ריפוי

  1. צפו בפצע בימים ה-7, ה-15, ה-30 וה-45 לאחר ההקרנה וצלמו את פני הפצע עם מצלמה באיכות גבוהה. ייבא את התמונות ל-ImageJ וצייר את אזור הפצע לאורך קצה הפצע. חשב את השטח בתמונה. ודאו שכל פעולה עקבית כדי למנוע טעויות מדידה. חשב את זמן ההחלמה של הפצע וקצב ההחלמה.
    הערה: קצב ריפוי הפצע (%) = (אזור הקרינה הראשונית - אזור הפצע שלא החלים) / אזור הקרינה הראשוני. קריטריוני ריפוי הפצע: החלמה מלאה מוגדרת כאזור עם גלד < 5% משטח הפצע או אזור מחלים > 95% משטח הפצע. אזור הקרינה הראשוני: אזור הפצע שנמדד בזמן שבו בעלי החיים המוקרנים הציגו פצע יציב (קו בסיס).

7. בדיקת מיקרוסקופ אלקטרוני

  1. דגימה וקיבוע מהירים של רקמות
    1. השתמשו בלהב חד לכריתת בלוק רקמת עור בגודל 1 מ"ק, הכולל את שכבת האפידרמיס-דרמיס.
    2. טבלו מיד את הדגימה בבופר פוספט גלוטראלדהיד 2.5% מקורר מראש (0.1 מ', pH 7.4) בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס למשך 24 שעות לצורך קיבוע מקורר.
  2. שטיפת בופר
    1. יש לבצע שלוש שטיפות עם בופר פוספט של 0.1 מטר (pH 7.4), תוך מתן 15 דקות לכל שטיפה.
  3. פוסט קיבוע
    1. העבר את הדגימה לתמיסת טטרוקסיד אוסמיום 1% בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס לקיבוע שנמשך 1.5 שעות.
  4. התייבשות גרדיאנטית
    1. העבר בהדרגה דרך ריכוזי אצטון של 50%, 70%, 80%, 90% ו-100%, והקצה 15 דקות לכל שלב.
    2. חזור על הטיפול עם 100% אצטון שלוש פעמים, כאשר כל טבילה נמשכת 10 דקות.
  5. הטמעת שרף אפוקסי
    1. השרו את הדגימה בתערובת של 2:1 של אצטון ושרף אפוקסי למשך שעתיים, ולאחר מכן טבלו אותו בשרף אפוקסי טהור למשך הלילה.
    2. פולימר את הדגימה בטמפרטורה של 60°C במשך 48 שעות ליצירת בלוק מוצק.
  6. חתך וצביעה
    1. מייצר חתכים אולטרה-דקים של 70 ננומטר באמצעות אולטרה-מיקרוטום.
    2. צבעו עם אצטט אורניום במשך 15 דקות, ואז עם ציטראט עופרת במשך 5 דקות בטמפרטורה של 60 מעלות צלזיוס.

8. צביעת המטוקסילין-אאוזין (HE)

  1. בצע הטמעת פרפין
    1. מבצעים דגימות עור, הייבוש באמצעות גרדיאנט אלכוהול (למשל, 70%, 80% ו-95% אתנול, כל אחד למשך 15 דקות, ולאחר מכן שני שינויים של 100% אתנול, כל אחד ל-15 דקות), ולאחר מכן העבר לקסילן עד שהרקמה מגיעה למצב שקוף.
    2. טבלו בפרפין כדי להבטיח הטמעה, ואז אפשרו התגבשות.
  2. בצע הסרת שעווה והחזרת מים
    1. טבלו חלקי פרפין בקסילן I/II למשך 10 דקות כל אחד.
    2. שטפו קסילן עם 100% אתנול, ואז טבלו ב-95% אתנול למשך 3 דקות, 80% אתנול במשך 3 דקות, 70% אתנול למשך 3 דקות, ולבסוף שטפו במים מזוקקים.
  3. ביצוע צביעת גרעינית המטוקסילין
    1. השרו בתמיסת ההמטוקסילין של האריס למשך 7 דקות בטמפרטורת החדר.
    2. שטוף במים זורמים במשך 10 דקות עד שמופיע הצבע הכחול.
  4. יישום הבחנה וצביעה נגדית
    1. התמייסו באמצעות חומצה הידרוכלורית 1% באתנול למשך 3 שניות (שימו לב לבהירות גרעינית תחת המיקרוסקופ).
    2. צבע נגד עם תמיסת אמוניה של 0.5% למשך 30 שניות.
  5. ביצוע צביעת נגד אאוזין
    1. צבעו בתמיסת אאוזין של 0.5% (המכילה 1% חומצה אצטית קרחונית) למשך 90 שניות.
    2. שטוף במהירות במים מזוקקים במשך 5 שניות כדי להסיר כתמים מיותרים.
  6. בצע התייבשות ופינוי
    1. עוברים ברצף דרך 70%, 80%, 95%, 100% אתנול I/II (דקה אחת כל אחד).
    2. ניקוי עם קסילן I/II למשך 2 דקות כל אחד.
  7. ייסלו איטום ותצפית
    1. מרח שרף ניטרלי בכיוון הדרופ, ואז כסה עם קאברסליפ.
    2. ייבשו בתנור של 60 מעלות צלזיוס למשך 30 דקות לפני בדיקה מיקרוסקופית.

9. צביעת הטריכרום של מסון

  1. בצע הסרת שעווה שגרתית בדומה לצביעה לפני HE.
  2. צביעה גרעינית
    1. השרו בתמיסת המטוקסילין למשך 10 דקות.
    2. שטוף במים זורמים במשך 5 דקות עד שהגוון הכחול חוזר.
  3. צביעת סיבי קולגן
    1. טבלו בתערובת של אליזרין אדום ופוקסין חומצי למשך 5 דקות.
  4. התמיינות חומצה פוספומוליבדית
    1. העבר לתמיסת חומצה זרחנית מימית של 1% למשך דקה.
  5. צביעת נגד של מיופייברים
    1. העבר ישירות לתמיסה כחולה של 2.5% אנילין למשך 5 דקות.
    2. שטוף במהירות בתמיסה מימית של חומצה אצטית קרחונית של 0.5% למשך 5 שניות.
  6. התייבשות והרכבה
    1. בצע ייבוש אתנול בגרדיאנט: 95% אתנול I, 100% אתנול II (30 שניות כל אחד).
    2. נקי עם קסילן.
    3. התקן באמצעות שרף ניטרלי, מייבש בטמפרטורה של 60 מעלות צלזיוס, ולאחר מכן בדוק תחת מיקרוסקופ.

10. זיהוי ELISA של רמות IL-1β, IL-6 ו-TNF-α

הערה: IL-1β, IL-6 ו-TNF-α הם ציטוקינים פרו-דלקתיים חשובים המשמשים לעיתים קרובות להערכת נוכחות ועוצמת הדלקת. מעקב אחר רמות הנוזלים שלהם חיוני לקבלת תובנות על תהליכי דלקת ולקביעת יעילות הטיפולים האנטי-דלקתיים.

  1. הכינו דגימות סרום
    1. עקבו אחרי הפרוטוקול המפורט בשלב 5.3 כדי לאסוף דגימות סרום.
  2. תקנים מדוללים ודגימות
    1. ליצור דילול גרדיאנט של התקנים תוך שימוש בדילול הדגימה; מדלל דגימות סרום ביחס של 1:4.
  3. הוסף דגימות ודגם
    1. הכנסת 100 מיקרו-ליטר של התקן או הדגימה לכל באר; מכסים את הבארות בממברנה; דגירה ב-37 מעלות צלזיוס למשך 90 דקות; לאחר מכן להשליך את הנוזל ולטפוח את הבארות עד שייבש.
  4. זיהוי תגובה של נוגדנים-אנזים
    1. לחלק 100 מיקרוליטר של תגובת מסומנת באנזימים הספציפית ל-IL-1β, IL-6 ו-TNF-α לכל באר; דגירה ב-37 מעלות צלזיוס למשך 60 דקות; הסר את הנוזל ומייבש את הנוזל; שטוף את הצלחת ארבע פעמים עם 200 מיקרוליטר של בופר שטיפה.
    2. הוסף 100 מיקרוליטר של תמיסת סטרפטווידין-HRP (דילול של 1:100) לכל באר; דגירה בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס בחושך למשך 30 דקות; שטוף את הצלחת ארבע פעמים עם 200 מיקרוליטר של בופר שטיפה.
  5. פיתוח צבע וסיום
    1. הכנסת 100 מיקרוליטר של תמיסת מצע TMB לכל באר; דגרו בטמפרטורת החדר בחושך למשך 10 דקות; לאחר מכן מוסיפים 50 מיקרו-ליטר של תמיסת עצירה לכל באר.
  6. קריאת נתונים
    1. למדוד את הספיגה ב-450 ננומטר (עם אורך גל כיול של 630 ננומטר) באמצעות קורא בדיקה אימונוסורבנט המקושר לאנזימים בתוך 30 דקות; חשב את הריכוז (pg/mL) באמצעות עקומת הסטנדרט.

11. מבחן טונל

  1. טיפול מקדים בחתך
    1. הסר שעווה והתייבש חלקי פרפין עד שיגיעו למים מזוקקים.
    2. הכנס תמיסה עובדת של פרוטנאז K בריכוז של 20 מיקרוגרם/מ"ל, ודגרה ב-37 מעלות צלזיוס למשך 20 דקות.
    3. שטפו את החלקים שלוש פעמים עם PBS, כאשר כל שטיפה נמשכת 2 דקות.
  2. תגובת תיוג
    1. החלו את תערובת תגובת TUNEL המכילה אנזים TdT ו-dUTP מסומן בפלואורסאין.
    2. דגרו בתא לח בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס בחושך למשך 60 דקות.
  3. המרת אותות
    1. שטפו שלוש פעמים עם PBS, ותנו 5 דקות לכל כביסה.
    2. הכנס נוגדן אנטי-פלואורסצאין המסומן על ידי HRP בדילול של 1:500.
    3. דגרו בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס למשך 30 דקות.
  4. התפתחות כרומוגנית של DAB
    1. לאחר שטיפת PBS, יש להניח תמיסת כרומוגנית DAB ולנטר את ההתפתחות תחת מיקרוסקופ למשך 1 עד 3 דקות.
    2. עצור את התגובה באמצעות מים מזוקקים.
  5. צביעת נגד והרכבה
    1. הצבע נגד גרעינים עם המטוקסילין למשך דקה.
    2. ייבוש באמצעות אתנול מדורג, ניקוי עם קסילן, והרכבה עם שרף ניטרלי.
  6. פרשנות התוצאה
    1. זהה גרעינים אפופטוטיים כחומים-צהובים, בעוד שגרעינים רגילים נראים כחולים.
    2. בחר באקראי חמישה שדות בעלי הספק גבוה (400×) לכל שקופית כדי לחשב את קצב האפופטוזיס.

12. צביעת אימונוהיסטוכימיה

  1. הסרת שעווה ושחזור אנטיגנים
    1. השרתו חלקי פרפין בקסילן I למשך 10 דקות, ואז העבירו ל-Xylene II לעוד 10 דקות. לאחר מכן, ייבשו באמצעות סדרת אתנול גרדיאנט, שמתחילים ב-5 דקות ב-100% אתנול I, אחריהם 5 דקות ב-100% אתנול II, 3 דקות כל אחד ב-95%, 80% ו-70% אתנול, ולבסוף שטוף במים מזוקקים למשך 2 דקות.
    2. בצע תיקון חום בלחץ גבוה עם בופר סודרן ציטראט של 0.01 מטר ב-pH 6.0, תוך שמירה על טמפרטורה של 121 מעלות צלזיוס למשך 3 דקות.
  2. חסימת התאבכות אנדוגנית
    1. הכנס תמיסה של 3%H2O2 בטמפרטורת החדר למשך 10 דקות כדי לנטרל אנזימים אנדוגניים.
    2. מרחו תמיסת חסימה של 5% BSA על הרקמה ודגרו בתא לח בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס למשך 45 דקות; שאפו כל תמיסת חסימה עודפת בלי לשטוף.
  3. דגירה של נוגדנים
    1. תן תמיסה לחסימת BSA של 5% ודגרה בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס למשך 30 דקות.
    2. הוסף את תמיסת הנוגדן העיקרית שפועלת בריכוז האופטימלי (למשל, P53, Bax, Bcl-2, VEGF ו-bFGF) ודגר לילה בתא לחות בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס; שטוף שלוש פעמים עם בופר PBS-T המכיל 0.1% טווין-20 למשך 5 דקות כל אחת.
    3. הכנסת נוגדן משני המסומן על ידי HRP מדולל ב-1:200; דגירה בתא לח בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס למשך 60 דקות; שטפו שלוש פעמים עם בופר PBS-T למשך 5 דקות כל פעם. לאחר מכן, מוסיפים את תמיסת ה-ABC הצמודה ודגרו בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס למשך 30 דקות, ואחר כך שלוש שטיפות עם בופר PBS למשך 5 דקות כל אחת.
  4. פיתוח צבעי DAB
    1. הוסף תמיסת פיתוח DAB המכילה 0.02% H₂O₂ ועקוב אחרי ההתפתחות תחת מיקרוסקופ בטמפרטורת החדר למשך 1-4 דקות.
    2. סיימו מיד את התגובה עם מים מזוקקים.
  5. צביעת נגד והרכבה
    1. טבלו את הדגימה בתמיסת ההמטוקסילין של האריס למשך דקה ושטפו במים זורמים במשך 10 דקות כדי להשיג התאוששות כחולה.
    2. טבלו ברצף בפתרונות הבאים: 70% אתנול ל-30 שניות, 80% אתנול ל-30 שניות, 95% אתנול ל-30 שניות, 100% אתנול I לדקה אחת, ו-100% אתנול II לדקה אחת.
    3. לניקוי מלא וקיבוע מלאים, טבל בקסילן I למשך 2 דקות, ואז מעביר לקסילן II ל-2 דקות. הוסיפו את הרכבה ניטרלית של שרף בינונית, מכסים עם כיסוי מגן וייבשו בתנור של 60 מעלות צלזיוס למשך 30 דקות.
  6. כימות תוצאה
    1. צבע חום מסמן תגובה חיובית; אותות חיוביים (חום-צהוב) צריכים להיות מנוגדים מול הרקע השלילי.
    2. השתמש בתוכנת Image-Pro Plus כדי לחשב את אחוז התאים החיוביים לפחות בחמישה שדות ראייה.

13. זיהוי בלוטינג מערבי

  1. הכנת ניתוח רקמות
    1. הכנסת רקמת עור קפואה בחנקן נוזלי למלט פלדת אל-חלד מקוררת מראש בטמפרטורה של -80°C; הוסף בהדרגה חנקן נוזלי בשלוש רמות כדי להפחית את האידוי; לטחון בצורה אנכית עד שכל החלקיקים כבר אינם נראים; העבר את האבקה המתקבלת לצינור EP המכיל בופר ליזיס.
    2. לשלב מעכב פרוטאז (1:100) ומעכב פוספטאז (1:50); מערבולת על הקרח למשך 30 שניות; לבצע הפרעות אולטרסוניות; דגירה בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס בתנור רועד למשך שעתיים; צנטריפוגה ב-4 מעלות צלזיוס, 14,000 × גרם למשך 20 דקות; שאפו בזהירות את הסופרנטנט.
  2. כימות ועיבוד חלבונים
    1. מחלקים 5 מיקרו-ליטר מהסופרנטנט ללוח עם 96 בארות; הוספת 200 מיקרוליטר של תמיסת BCA עובדת; דגירה בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס בחושך למשך 30 דקות; מודד ספיגה ב-562 ננומטר באמצעות קורא מיקרופלט; קבעו ריכוז לפי עקומת הסטנדרט.
    2. משלבים 5× בופר עומס חלבון מופחת עם תמיסת החלבון ביחס של 4:1; דנטטור על ידי הנחתה באמבט מים רותחים למשך 15 דקות; אחסן בטמפרטורה של מינוס 20°C לשימוש עתידי.
  3. אלקטרופורזה SDS-PAGE
    1. הכינו ג'ל מתייחס ל-12% אקרילאמיד; שפוך את הג'ל עד שהוא מגיע לעומק של 1 ס"מ מתחת לשיני המסרק; לכסות באיזופרופנול למניעת חשיפה לאוויר; לאחר ההתמצקות, יש להסיר איזופרופנול; מזוג ג'ל ריכוז של 4%; הכנס מסרק עם 15 בארות; מאפשרים התגבשות בטמפרטורת החדר למשך 30 דקות; הוסף 5 מיקרוליטר של סמן חלבון מוצבע מראש לבאר הטעינה 1; מוסיפים 20 מיקרוליטר ליזאט ריק לבאר 2; הוסף 10 מיקרוליטר דגימה המכילה 40 מיקרוגרם חלבון לכל באר מ-3 עד 14.
    2. התחל אלקטרופורזה ב-80 וולט; לעבור ל-120 וולט כאשר הברומופנול הכחול נודד לג'ל ההפרדה; שמירה על טמפרטורה של 10-15 מעלות צלזיוס עם סירקולציה של מים קרחים; הרץ עד שהברומופנול הכחול מגיע ל-0.5 ס"מ מתחתית הג'ל.
  4. הליך ניקוי רטוב
    1. הכינו בופר העברה המכיל 20% מתנול; לפני הקירור ל-4 מעלות צלזיוס. הפעל את ממברנת ה-PVDF על ידי טבילה במתנול למשך דקה; לאזן את ממברנת ה-NC בבופר. הרכיבו את מהדק ההעברה בסדר הבא: "צלחת קתודה - רפידת ספוג - נייר פילטר - ג'ל - ממברנה - נייר פילטר - רפידת ספוג - צלחת אנודה"; הסר היטב כל בועה עם גלגל; קבעו פרמטרים לפי משקל מולקולרי החלבון היעד: עבור חלבונים < 50 kDa, השתמשו בהעברת מתח קבועה ב-100 וולט למשך 60 דקות; עבור חלבונים של 50-100 kDa, יש להפעיל העברת זרם קבוע ב-250 mA למשך 90 דקות; עבור חלבונים > 100 קילו-דלטון, יש לבצע העברת זרם קבועה ב-300 mA למשך 120 דקות; התחבר לאמבט מים בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס.
  5. הליך זיהוי חיסוני
    1. לאחר ההעברה, טבלו את ממברנת ה-PVDF במתנול למשך דקה אחת; לשטוף שלוש פעמים עם TBST למשך 5 דקות כל אחת; כיסו את פני הממברנה ב-3% H₂O₂/TBST; דגירה בטמפרטורת החדר בחושך למשך 15 דקות; לשאוב את הנוזל; הוספת פתרון חסימה של 5% BSA/TBST; בלוק למשך שעה אחת באינקובטור ניעור בטמפרטורה של 37°C; שטוף את הממברנה שלוש פעמים עם TBST למשך 5 דקות כל אחת.
    2. הוסף את תמיסת הנוגדן הפועלת הראשית (כגון P53, Bax, Bcl-2, VEGF ו-bFGF); דגירה למשך הלילה בטמפרטורה של 4°C בתנור ניעור; שטוף את הממברנה ארבע פעמים עם TBST למשך 10 דקות כל אחת; הוסף נוגדן משני המסומן על ידי HRP; דגירה על אינקובטור מנענע בטמפרטורת החדר למשך 90 דקות; שטוף את הממברנה שש פעמים עם TBST + 0.5% SDS למשך 8 דקות כל אחת.
  6. הדמיה כימלומינסצנטית
    1. מערבבים נפחים שווים של פתרונות ECL A ו-B; מצפים באופן אחיד את פני הממברנה; לאפשר לתגובה להתרחש בחושך במשך 60 שניות; שואף כל נוזל עודף; קבעו זמן חשיפה יחיד בין 1 ל-5 שניות לחלבוני אות חזקים; לבצע חשיפה מצטברת בחמישה מקטעים (10/30/60/120/300 שניות) לחלבוני אות חלשים; צלם תמונות באמצעות מדלמת כימילומינסנציה.
  7. תהליך ניתוח נתונים
    1. כימות חלבונים באמצעות תוכנת ImageJ; קביעת סף חיסור אחיד ברקע; חשב את היחס האפור בין חלבון המטרה לחלבון הייחוס (β-אקטין או GAPDH)
    2. ייבא את הנתונים ל-GraphPad Prism לניתוח.

14. ניתוח סטטיסטי

  1. הצג נתונים לפי ממוצע ± שגיאת ממוצע סטנדרטית. להשתמש במבחני t של דגימות עצמאיות להשוואות בין שתי קבוצות, ולהשתמש ב-ANOVA חד-כיווני להשוואות בין מספר קבוצות.
  2. ניתוח נתונים באמצעות SPSS 26.0 ו-GraphPad Prism 8.0.2.
  3. נבחן את P < 0.05 כאינדיקטור להבדלים מובהקים סטטיסטית.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

ההשפעה הטיפולית של Acorus calamus L. על פגיעת עור הנגרמת מקרינה
15 ימים לאחר ההקרנה, כל קבוצות העכברים הציגו קילוף יבש, אדמומיות מקומית, נפיחות, כיבים וגלדים. ב-30 יום לאחר ההקרנה, קבוצת הדגם הראתה את הנזק החמור ביותר לעור, כאשר גלדים וכיבים באתר המוקרן הגיעו לשיאם. לאחר 45 ימים, קבוצת הדגם הראתה נשירה מינימלית של גלד, והפצע הראה התכווצות מסוימת. לעומת זאת, קבוצות Acorus calamus L. וקבוצות חיוביות שטופלו תרופות הראו ירידה משמעותית בנזק לעור, כיבים בהירים יותר, ריפוי פצעים משופר וכיסוי אפיתל מהיר יותר ...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

פגיעות עור הנגרמות מקרינה נותרות אחת הסיבוכים השכיחים והמאתגרים ביותר בטיפול קליני בסרטן. כאיבר הגדול ביותר והמטרה הראשונה לקרינה, העור רגיש לנזק מרדיקלים חופשיים וממיני חמצן תגובתיים הנוצרים על ידי קרינה, מה שעלול לפגוע בתפקודי תאים, כולל חלוקת תאים, נדידה והתמיינות, ובסופו של דבר להוביל לעיכוב בריפוי פצעים ולנזק ברקמה20,21. פציעות אלו מתבטאות לעיתים קרובות כאריתמה, בצקת, כיבים חוזרים ונמק, ובמקרים חמורים הן עלולות

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

למחברים אין מה לחשוף.

תודות

עבודה זו נתמכה על ידי תוכנית המדע והטכנולוגיה המשותפת של מחוז ליאונינג (פרויקט טיפול טכני) (2024JH2/102600273) ופרויקט המחקר העצמאי של בית החולים הכללי של תיאטרון הצפון (ZZKY2024001, ZZKY2024002, ZZKY2024003).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
4% Paraformaldehyde Fix SolutionBeyotime Biotech Inc (Beyotime), סיןP0099
תמצית Acorus calamus L.הוכן פנימיתללא רשות;  פרוטוקול ההכנה המפורט מתואר בסעיף 4 של הפרוטוקול.
נוגדן אנטי-בקס   חברת ווהאן סרוויסביוביוטכנולוגיה בע"מ (ווהאן, חוביי, סין)GB11690
נוגדן אנטי-Bcl-2חברת ווהאן סרוויסביוביוטכנולוגיה בע"מ (ווהאן, חוביי, סין)GB113375
נוגדן אנטי-bFGFProteintech Group, Inc. (ווהאן, חוביי, סין)11234-1-AP
נוגדן אנטי-P53 חברת ווהאן סרוויסביוביוטכנולוגיה בע"מ (ווהאן, חוביי, סין)GB111740
נוגדנים נגד VEGF  חברת ווהאן סרוויסביוביוטכנולוגיה בע"מ (ווהאן, חוביי, סין)GB111971
ערכת בדיקת חלבון BCA  חברת ווהאן סרוויסביוביוטכנולוגיה בע"מ (ווהאן, חוביי, סין)G2026-200T
קרם בטמתזון  יונייטד פארמה בע"מ (סין)ללא רשות;ריכוז: 0.1% עם ביטוי<בר/> אישור תרופות לאומי מס': H19994057
אתנולשנחאי אלאדין ביוכימיה לטכנולוגיה בע"מ.E111991משמש כממס חילוץ לתמצית Acorus calamus L..
מערכת הדמיית ג'ל וכתמיםBio-Rad Laboratories, Inc. (הרקולס, קליפורניה, ארה"ב)חבר פרלמנט של כימדוק
ערכת צבע המטוקסילין-אאוסיןמדעי הסולארביולוגיה של בייג'ינג Technology Co., Ltd., (בייג'ינג, סין)   G1120
HRP נגד IgG נגד ארנב עזים (H+L)חברת ווהאן סרוויסביוביוטכנולוגיה בע"מ (ווהאן, חוביי, סין)GB23303
מיקרוסקופ פלואורסצנציה הפוךתאגיד אולימפוס (טוקיו, יפן)IX83   
מסון' ערכת כתמים משולשתמדעי הסולארביולוגיה של בייג'ינג Technology Co., Ltd., (בייג'ינג, סין)   G1340
קורא מיקרופלט (לזיהוי ספיגה, פלואורסצנציה וזוהר)Molecular Devices (סן חוזה, קליפורניה, ארה"ב)ספקטרמקס iD3
פטרולטוםחברת סינופארם כימיקלים ריג'נט בע"מ (שנגחאי, סין)ללא רשות;  פטרולטום לבן בדרגת פרמצבטיה; נקודת התכה: 45-60 ו-°G; C;  אישור תרופות לאומי מספר: H31022350
Rat IL-1 ובטא; ELISA Kit   Beyotime Biotech Inc (Beyotime), סיןPI303
ערכת Rat IL-6 ELISA & nbsp;  Beyotime Biotech Inc (Beyotime), סיןPI328
Rat TNF-α ELISA Kit   Beyotime Biotech Inc (Beyotime), סיןPT516
ערכת זיהוי אפופטוזיס תא TUNEL (DAB)Beyotime Biotech Inc (Beyotime), סיןC1091

מקורות

  1. Piffkó, A., et al. Radiation-induced amphiregulin drives tumour metastasis. Nature. 643 (8072), 810-819 (2025).
  2. Wang, K., Tepper, J. E. Radiation therapy-associated toxicity: Etiology, management, and prevention. CA Cancer J Clin. 71 (5), 437-454 (2021).
  3. Grosu-Bularda, A., et al. Navigating the complexities of radiation injuries: therapeutic principles and reconstructive strategies. J Pers Med. 14 (11), 1100(2024).
  4. Kemin, L., Rutie, Y. A critical review of the progress in prevention and treatment of radiation-induced skin damage. Front Oncol. 14, 1395778(2024).
  5. Borrelli, M. R., et al. Radiation-induced skin fibrosis: Pathogenesis, current treatment options, and emerging therapeutics. Ann Plast Surg. 83 (4S Suppl 1), S59-S64 (2019).
  6. Xu, Y., Liu, Q., Li, W., Hu, Z., Shi, C. Recent advances in the mechanisms, current treatment status, and application of multifunctional biomaterials for radiation-induced skin injury. Theranostics. 15 (7), 2700-2719 (2025).
  7. Deng, G. M., He, W. S., Liu, W. Y., Wu, F. S., Chen, J. B. Evolution of radiation-induced dermatitis treatment. Clin Transl Oncol. 26 (9), 2142-2155 (2024).
  8. Bian, X. W., et al. Epigenetic memory of radiotherapy in dermal fibroblasts impairs wound repair capacity in cancer survivors. Nat Commun. 15 (1), 9286(2024).
  9. Singh, V. K., Seed, T. M. The efficacy and safety of amifostine for the acute radiation syndrome. Expert Opin Drug Saf. 18 (11), 1077-1090 (2019).
  10. Wang, Z., Chen, R., Chen, J., Su, L. 18β-glycyrrhetinic acid alleviates radiation-induced skin injury by activating the Nrf2/HO-1 signaling pathway. Biol Chem. 405 (6), 407-415 (2024).
  11. Wang, Z. W., et al. Aloe polysaccharides mediated radioprotective effect through the inhibition of apoptosis. J Radiat Res. 45 (3), 447-454 (2004).
  12. Kongkham, B., Duraivadivel, P., Hariprasad, P. Acorus calamus L. rhizome extract and its bioactive fraction exhibits antibacterial effect by modulating membrane permeability and fatty acid composition. J Ethnopharmacol. 331, 118323(2024).
  13. Abdeahad, H., et al. Therapeutic potency of curcumin on radiodermatitis: A systematic review. Avicenna J Phytomed. 14 (3), 297-304 (2024).
  14. Kim, H., Han, T. H., Lee, S. G. Anti-inflammatory activity of a water extract of Acorus calamus L. leaves on keratinocyte HaCaT cells. J Ethnopharmacol. 122 (1), 149-156 (2009).
  15. Zhao, Y., et al. botanic, phytochemistry and pharmacology of the Acorus L. genus: A review. Molecules. 28 (20), 7117(2023).
  16. Kuan, C., et al. Rice bran extract alleviates inflammation and promotes wound healing in radiation dermatitis. Exp Dermatol. 34 (9), e70162(2025).
  17. Salgueiro, M. J., et al. Biological effects of brachytherapy using a (32)P-patch on the skin of Sencar mice. Appl Radiat Isot. 67 (32), 1769-1774 (2009).
  18. Jain, N., Jain, R., Jain, A., Jain, D. K., Chandel, H. S. Evaluation of wound-healing activity of Acorus calamus Linn. Nat Prod Res. 24 (6), 534-541 (2010).
  19. Chinese Pharmacopoeia Commission. Pharmacopoeia of the People's Republic of China, 2020 Edition. , China Medical Science Press. Beijing. (2020).
  20. Chen, Y., et al. Senescent fibroblast facilitates re-epithelization and collagen deposition in radiation-induced skin injury through IL-33-mediated macrophage polarization. J Transl Med. 22 (1), 176(2024).
  21. Milam, E. C., Rangel, L. K., Pomeranz, M. K. Dermatologic sequelae of breast cancer: From disease, surgery, and radiation. Int J Dermatol. 60 (4), 394-406 (2021).
  22. Haran, P., Shanmugam, R., Deenadayalan, P. Free radical scavenging, anti-inflammatory and antibacterial activity of Acorus calamus leaves extract against Pseudomonas aeruginosa and Staphylococcus aureus. Cureus. 16 (3), e55987(2024).
  23. Sytykiewicz, H., Łukasik, I., Goławska, S. Chemical composition, anti-tyrosinase and antioxidant potential of essential oils from Acorus calamus (L.) and Juniperus communis (L.). Molecules. 30 (11), 2417(2025).
  24. Liu, Y., et al. Proteomics and transcriptomics explore the effect of mixture of herbal extract on diabetic wound healing process. Phytomedicine. 116, 154892(2023).
  25. Zhou, L., Zhu, J., Liu, Y., Zhou, P. K., Gu, Y. Mechanisms of radiation-induced tissue damage and response. MedComm. 5 (10), e725(2020).
  26. Elgellaie, A., Thomas, S. J., Kaelle, J., Bartschi, J., Larkin, T. Pro-inflammatory cytokines IL-1α, IL-6 and TNF-α in major depressive disorder: Sex-specific associations with psychological symptoms. Eur J Neurosci. 57 (11), 1913-1928 (2023).
  27. García-García, M. L., et al. Fluoxetine modulates the pro-inflammatory process of IL-6, IL-1β and TNF-α levels in individuals with depression: A systematic review and meta-analysis. Psychiatry Res. 307, 114317(2022).
  28. Yan, T., et al. Single-cell RNA-seq analysis of molecular changes during radiation-induced skin injury: The involvement of Nur77. Theranostics. 14 (15), 5809-5825 (2024).
  29. Tu, W., et al. Integrative multi-omic analysis of radiation-induced skin injury reveals the alteration of fatty acid metabolism in early response of ionizing radiation. J Dermatol Sci. 108 (3), 178-186 (2022).
  30. Mukherjee, S., Dutta, A., Chakraborty, A. The cross-talk between Bax, Bcl2, caspases, and DNA damage in bystander HepG2 cells is regulated by γ-radiation dose and time of conditioned media transfer. Apoptosis. 27 (3-4), 184-205 (2022).
  31. Avadanei-Luca, S., et al. Tissue regeneration of radiation-induced skin damages using protein/polysaccharide-based bioengineered scaffolds and adipose-derived stem cells: A review. Int J Mol Sci. 26 (13), 6469(2025).
  32. Hartono, S. P., et al. Vascular endothelial growth factor as an immediate-early activator of ultraviolet-induced skin injury. Mayo Clin Proc. 97 (1), 154-164 (2022).
  33. Guangmei, D., Weishan, H., Wenya, L., Fasheng, W., Jibing, C. Evolution of radiation-induced dermatitis treatment. Clin Transl Oncol. 26 (9), 2142-2155 (2022).
  34. Gupta, S., et al. Exploring anticancer properties of medicinal plants against breast cancer by downregulating human epidermal growth factor receptor 2. J Agric Food Chem. 72 (17), 9717-9734 (2024).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

תמצית Acorus Calamusריפוי פצעיםרפואה סינית מסורתיתציטוקינים דלקתייםעיכוב אפופטוזהקידום אנגיוגנזהאנליזה היסטופתולוגיתאימונוהיסטוכימיה
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.