הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

התמיינות והשראת הצטברות טיפות שומן בשומנים אנושיים כמודל לחקר השמנת יתר במבחנה

275 צפיות

⸱

DOI:

10.3791/69759

⸱

20 במרץ 2026

 ,  ,  , 
1Department of Cell Pathology, Faculty of Biotechnology, University of Wroclaw

במאמר זה

סיכום

הפרוטוקול המוצג נועד לפתח מודל תאי המדמה השמנת יתר אנושית. כדי להשיג זאת, תאי גזע שמקורם בשומן אנושיים מופרדים לשומנים שומנים, אשר משמנים לאחר מכן באמצעות תערובת של חומצות שומן נבחרות.

תקציר

שינויים הקשורים להשמנה ברקמת השומן משנים פרופילי הפרשה מקומיים ומשפיעים על אינטראקציות עם תאים אחרים בסביבה, כולל תאי סרטן. האספקה המתמשכת של חומרים מזינים משנה את חילוף החומרים של תאי השומן, והופכת אותם לשמש כמאגר שומן. בדרך כלל, המחקר על מנגנוני השמנה נשען על מודלים בעלי חיים, שאינם מאפשרים ניתוח תהליכים מטבוליים ברמה התאית. לכן, יש צורך לפתח מודל מבחנתי אמין של השמנת יתר אנושית, שיכול לסייע בחקר שינויים בתפקוד השומנים השמנים לעומת מקביליהם רזים. עבודה זו מציגה פרוטוקול להבדלת אדיפוציטים אנושיים מקודמיהם (תאי גזע שמקורם בשומן) באמצעות תערובת של אינסולין, איזובוטיל-1-מתילקסנתין, דקסמתזון ואינדומטצין. בהמשך, שומנים מופרדים הוגדרו עם סט של חומצות שומן, כולל לינולאאט, פאלמיטאט ואולאט, כדי לקדם הצטברות שומן. כתוצאה מכך, הושג מודל חשוב המדמה את התאים ההיפרטרופיים בתנאי השמנה, שניתן להשתמש בו למחקרים נוספים.

מבוא

השמנה נחשבת לגורם סיכון מרכזי למגוון רחב של מחלות, כגון הפרעות במערכת השרירים והשלד, מחלות לב וכלי דם, עמידות לאינסולין, תסמונת מטבולית, סוכרת וסוגים נבחרים של סרטן1. השמנה היא אחת הבעיות הבריאותיות הציבוריות הבולטות והפחות מוערכות, עם סיבות רב-יסודיות. בקצרה, השמנת יתר נגרמת מחוסר איזון בין קלוריות שנצרכות לנצרכים, מה שמוביל לשיפור אגירת השומן2. עודף הקלוריות מוביל להתרחבות פתולוגית ולתפקוד לקוי של רקמת השומן (AT), המרכיב המרכזי בשליטה של הגוף על הומאוסטזיס האנרגיטי.

שדיפוציטים הם המרכיב התאית העיקרי ב-AT3. הגורם העיקרי לצמיחת AT בתנאי השמנה הוא היפרטרופיה של התאים, כלומר העלייה בנפח השומן על ידי עלייה בכמות השומן המאוחסנת בציטופלזמה בצורת טיפות שומן (LDs). גם אם ההשמנה היא הפרעה פתולוגית מורכבת, מחקרים על התפקוד הביולוגי של שומניות יכולים לשמש מודל לניתוח הגורמים שלה ולחקר אסטרטגיות טיפול חדשות. דבר זה מדגיש את הצורך בהבנה מעמיקה יותר של המנגנונים המולקולריים שמניעים שינויים בתפקוד השומנים, כדי לפתח אסטרטגיות טיפוליות חדשות המיועדות למחלות הקשורות להשמנה.

המודלים של בעלי החיים הם הקרובים ביותר להשתקפות תנאים פיזיולוגיים, מה שהופך אותם לשימוש נרחב למחקרים in vivo של השמנת יתר5. עם זאת, הסקת מסקנות לגבי תהליכים ביולוגיים בסיסיים ברמה התאית נותרת אתגר רב במערכת רב-שכבתית כזו, המעדיפה שימוש במודלים של שומן חוץ-גופית . המחקר במבחנה מבוסס לרוב על מודל תאי העכבר 3T3-L1, אשר בתנאים מתאימים מקבל פנוטיפדמוי שומן 6. עם זאת, בשל מוצאו, מודל זה אינו יכול לשמש לניתוחים מורכבים יותר, כגון תנאי קו-קולטורציה עם תאים אנושיים, והתוצאות לא תמיד ניתנות לתרגום ישיר לשומנים אנושיים. מכל הסיבות הללו, נבדק מודל המדמה השמנת יתר בבני אדם, והשימוש בתאי גזע שמקורם בשומן אנושיים (ADSCs) עם ההבדלה שלהם נראית רציונלית. לכן, מודל זה מתאים ביותר לחקר היפרטרופיה של שדיפוציטים אנושיים במבחנה בשל מורכבותו הנמוכה. היא מאפשרת השוואת פרמטרים של סוג תרבית תא יחיד בתנאים שונים, דבר שאינו ניתן להשגה ב-vivo בשל נוכחות מספר סוגי תאים ברקמת השומן.

פרה-אדיפוציטים אנושיים ותאי גזע שמקורם בשומן המבודדים מ-AT הם הדוגמאות הנפוצות ביותר לחקר תפקוד לקוי של רקמה זו. תאים אלו, לאחר התמיינות, מהווים מודל אטרקטיבי לוויסות רמות LD בדיפוציטים על ידי השמנה נוספת. עם זאת, ישנם מעט יחסית מחקרים שבודקים היפרטרופיה בתאים אנושיים 7,8,9, ורובם משתמשים רק בסוג אחד של חומצת שומן (FA) כדי לגרום להצטברות LD.

פרוטוקול זה מציע להשלים את הדיפוציטים האנושיים בתערובת של FAs (פאלמיטט, אוליאט ולינולאט) כדי לחקות סביבות השמנת יתר. דבר זה מאפשר השגת כלי המבוסס על שומנים אנושיים עמוסים בשומנים אנושיים, שניתן להשוות ישירות לתאי שומן בקרה (נאיביים). מודל זה יכול לשמש לאחר מכן לחקר השינויים הפנוטיפיים והפונקציונליים בקרב שומנים תקינים והיפרטרופיים, או, במידת הצורך, ניסויים בתנאי קו-קולטורציה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

השתמש בטכניקות סטריליות לביצוע כל שלבי הפרוטוקול במכסה תרבית תאי זרימה למינרי. ראו טבלת חומרים לפרטים על כל החומרים והציוד. פרוטוקול ההתמיינות המתואר להלן מתאים לתאי גזע שמקורם בשומן אנושי ועשוי להיות שונה בין סוגי תאים אחרים ומקורם. החומרים והציוד בהם משתמשים מופיעים בטבלת החומרים.

1. הכנת ADSCs להבדלה

  1. הכנת מדיום גדילה של ADSC (GM): תוסף מדיום הנשר המותאם (DMEM) של Dulbecco המכיל 1 גרם גלוקוז עם 10% סרום בקר עוברי (FBS), 2 מ"מ גלוטמין ואנטיביוטיקה - תמיסה אנטי-מיקוטית (100 U/mL פניצילין, 100 מיקרוגרם/מ"ל סטרפטומיצין, 0.25 מיקרוגרם/מ"ל אמפוטריצין B).
  2. חממו את תמיסת ה-GM של ADSC, תמיסת המלח עם בופר הפוספט (PBS), ותמיסת הטריפסין/EDTA ל-37 מעלות צלזיוס.
    הערה: ADSCs מתקבלים ממקורות מסחריים. השתמש בתאים במעברים הראשונים. מספר מעברים מובילים לירידה בפוטנציאל ההבדלה של ADSCs10.
  3. הסר באופן אספטי את ה-GM של ADSCs מה-ADSCs שגדלים בבקבוק T75 המיועד לתרבות תאים.
  4. שטוף את שארית ה-ADSCs GM על ידי שטיפת תבנית תרבית התאים ב-5 מ"ל של PBS.
  5. הסר את כל נפח ה-PBS מהבקבוקון.
  6. הוסף 2 מ"ל טריפסין/EDTA לצלחת התרבית ודגר אותה בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עד שהתאים מנותקים. עקוב אחרי התהליך הזה עם מיקרוסקופ הפוך.
    הערה: נגיעה בצלחת התרבית תזרז את ניתוק התאים.
  7. חסמו את פעילות הטריפסין על ידי הוספת 6 מ"ל של ADSC GM טריים.
  8. העבר את כל נפח המתלים של התא מהצלחת לצינור מתאים לצנטריפוגה.
  9. צנטריפוגה את התאים בעוצמה של 300 x גרם למשך 5 דקות בטמפרטורת החדר (RT).
  10. הסר את הסופרנטנט.
  11. תשעית תאים ב-2 מ"ל של ה-ADSCs החדשים GM.
  12. חשב את צפיפות התאים והכדאיות באמצעות המוסיטומטריד או מונה תאים אוטומטי.
    הערה: ניתן להעריך את עמידות התאים באמצעות צביעת צבע כחול טרייפן.
  13. זרעו את התאים במספר הרצוי של בארות, 15,000 תאים לבאר, לוח פלסטיק עם 96 בארות ב-100 מיקרוליטר של מדיום גדילה של ADSC.
    הערה: תאי זרעים תמיד בשכפול כדי להשיג שומניות המיועדות לשליטה ולדגירה בתנאי FA. בהתאם לסוג הניסוי, ניתן לזרוע ADSCs על סוגים שונים של צלחות או כלים מפלסטיק. צפיפות הזריעה המומלצת היא 30,000-60,000 תאים לסמ"ר. בהתאם למספר התאים הנדרש לניתוחים הבאים או לניסויים בהמשך, יש להתאים את פורמט צלחת תרבית התאים ללוחות של 6 או 12 בארות.
  14. תרבית התאים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס באטמוספירה לחה המכילה 5%CO2.
  15. כאשר התאים מגיעים ל-100% מפגש (בדרך כלל 24-48 שעות לאחר הציפוי), השרו את התמיינתם לשומנים לפי ההוראות הבאות.
    הערה: חשוב להגיע לרמת התנגשות תאים גבוהה לפני השראת התמיינות. במקרים אחרים, זה עשוי להשפיע על יעילות ההבדלה. אם לתאים מצופים לוקח יותר מ-48 שעות להגיע לחיבור גבוה, החליפו את המדיום כל 3-4 ימים למדיום הגידול הטרי של ADSC.

2. השראה של התמיינות אדיפוגנית

  1. הכנת מדיום התמיינות (DM): הוסף מדיום DMEM/F12 עם 10% FBS, 2 מ"מ גלוטמין, אנטיביוטיקה - תמיסה אנטי-מיקוטית (100 U/mL פניצילין, 100 מיקרוגרם/מ"ל סטרפטומיצין, 0.25 מיקרוגרם/מ"ל אמפוטריצין B), 5 מיקרוגרם/מ"ל אינסולין, 0.5 מ"מ 3-איזובוטיל-1-מתילקסנתין (IBMX), 5 מיקרומום דקסמתזון, ו-200 מיקרומום אינדומתצין.
    הערה: הכינו את ה-DM רק בנפח הנדרש לשימוש ישיר. אל תאחסן אותו לתקופה ארוכה, ותמיד תשתמש ב-DM טרי. לפני השימוש, חממו את ה-DM באמבט מים ל-37 מעלות צלזיוס. IBMX ואינדומתצין עלולים לשקוע אם מוסיפים אותם למדיום בטמפרטורה נמוכה מ-37 מעלות צלזיוס. כדי להמיס אותו, חממו את הנוזל באמבט מים לטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס.
  2. הסר ומסיר באופן אספטי את כל נפח המדיום מה-ADSCs המתאחדים.
    הערה: יש להסיר לחלוטין את מדיום הגידול של ADSC לפני הוספת DM.
  3. הוסיפו בזהירות 100 מיקרוליטר לבאר של DM לתאים שגדלים בלוח של 96 בארות.
    הערה: אל תתנו לתאים להתייבש בעת החלפת מדיום.
  4. דגרו את התאים באינקובטור בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס, 5%CO2 למשך 7 ימים.
  5. הסר והשליך את כל כרך ה-DM מה-ADSCs.
  6. הוסיפו בזהירות 100 מיקרוליטר/באר של DM טרי לתאים שגדלים בלוח של 96 בארות.
  7. דגרו את התאים באינקובטור בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס, 5%CO2, במשך 7 הימים הבאים.
    הערה: התקדמות התמיינות אדיפוגנית ניתנת לזיהוי באמצעות תצפית בשדה בהיר של ואקואולות שומן המופיעות בתאים המושרים.

3. השמנת שומנים

  1. הכינו מדיום תרבית דיפוציטים בתוספת FAs: השלים מדיום DMEM/F12 עם 10% FBS, 2 מ"מ גלוטמין, אנטיביוטיקה - תמיסה אנטי-מיקוטית (100 U/mL פניצילין, 100 מיקרוגרם/מ"ל סטרפטומיצין, 0.25 מיקרוגרם/מ"ל אמפוטריצין B), 0.33 מ"מ לינולאטיס, 0.17 מ"מ פלמיטאט ו-0.17 מ"מ אולאט.
  2. הכנת מדיום תרבית שומן בקרה: הוסף מדיום DMEM/F12 עם 10% FBS, 2 מ"מ גלוטמין, אנטיביוטיקה - תמיסה אנטי-מיקוטית (100 U/mL פניצילין, 100 מיקרוגרם/מ"ל סטרפטומיצין, 0.25 מיקרוגרם/מ"ל אמפוטריצין B), אלבומין סרום בקר (BSA) של 0.44%, ו-0.26% אתנול (שני התרכובות האחרונות שימשו גם כממסים של FA).
    הערה: הכינו שליטה ותשלמים עם מדיום תרבית שומן של FA רק בנפח הנדרש לשימוש ישיר. אל תאחסן אותה לפרק זמן ארוך, ותמיד תשתמש בחומר טרי מוכן. לפני השימוש, חממו את המדיה באמבט מים ל-37 מעלות צלזיוס.
  3. לאחר סך של 14 ימי התמיינות, יש להסיר ולזרוק בזהירות את כל נפח התווך הדיפוציטי שהתבדלו על לוח של 96 בארות.
  4. הוסיפו בזהירות 100 מיקרוליטר/באר של מדיום תרבית שומן עם FAs למחצית מהבארות עם תאים שגדלים בצלחת של 96 בארות.
  5. הוסיפו בזהירות 100 מיקרוליטר/באר של מדיום תרבית שומן שומן בקרה למחצית השנייה של הבארות עם תאים שגדלים בלוח של 96 בארות.
    הערה: אל תתנו לתאים להתייבש בעת החלפת מדיום.
  6. דגרו את התאים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס באטמוספירה לחה המכילה 5%CO2 למשך 48 השעות הבאות.
  7. לאחר 48 שעות, השתמשו בתאי הבקרה ובתאי הביקורת שדוגרו עם FAs לניסויים הבאים.
    הערה: בשלב זה, ניתן להשתמש בדיפוציטים משומנים שהושגו למטרות ניסוי רבות, כמו צביעת תאים, ניתוח חילוף חומרים תאי או תרכזות משותפת עם סוגי תאים אחרים.

4. כתמי טיפות שומן

  1. הכינו מדיום תרבית שומן: השלמו מדיום DMEM/F12 עם 10% FBS, 2 מ"מ גלוטמין ואנטיביוטיקה - תמיסה אנטי-מיקוטית (100 U/mL פניצילין, 100 מיקרוגרם/מ"ל סטרפטומיצין, 0.25 מיקרוגרם/מ"ל אמפוטריצין B).
  2. דילל צבע פלואורסצנטי כדי לצבוע LDs במדיום תרבית שומנים בדילול של 1:1000.
  3. הסר והשליך את כל הנפח של מדיום תרבית הדיפוציטים והתווך של תרבית הדיפוציטים יחד עם FAs מתאים שגדלים בלוח של 96 בארים.
  4. הוסיפו בזהירות 50 מיקרוליטר/באר של מדיום תרבית שומן עם צבע פלואורסצנטי.
    הערה: אל תתנו לתאים להתייבש בעת החלפת מדיום.
  5. דגרו תאים בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס באטמוספרה לחה המכילה 5%CO2 למשך 15 דקות.
  6. שטוף את צבע הפלואורסצנציה על ידי החלפתו במדיום תרבית שומן של 100 מיקרוליטר/באר.
  7. קליטת תמונה בערוץ זיהוי פלואורסצנציה ירוק (למשל 427 ננומטר/אלמטרומיום 585 ננומטר) באמצעות מיקרוסקופ פלואורסצנטי.
    הערה: זהו הפרוטוקול לצביעת תאים חיים. ניתן לבצע צביעה גם לאחר קיבוע פורמלדהיד של התאים.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

השיטה המתוארת כאן מאפשרת התמיינות של ADSCs אנושיים לשומנים בוגרים, ואחריה הצטברות שומנים מוגברת, המדמה את התאים ההיפרטרופיים שנצפו במצבי השמנת יתר. מסלול הזמן של ההבדלה של ADSCs אנושיים מוצג באיור 1. ביום 0, כאשר התאים מגיעים ל-100% מפגש (איור 1A), ADSCs מציגים מורפולוגיה מוארכת דמוית ציר (spindle). בשלב זה, ניתן ליישם את פרוטוקול ההתמיינות באמצעות מעוררי אדיפוגני המכילים DM. לאחר 24 שעות, התאים עוברים שינויים מורפולוגיים, ותאים...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

הפרוטוקול הנוכחי הוא הליך דו-שלבי שניתן לשכפול להבדיל של ADSCs, ואחריו דגירה עם FAs להשגת מודל תאי המדמה השמנת יתר. השלב הקריטי שקובע את יעילותו הוא מספר המעברים של ADSCs לאחר בידודם. מעברים מרובים מובילים לירידה בפוטנציאל ההתמיינות של תאים אלו10.

במהלך התמיינת שומרי הדם, ADSCs מועברים מתאים מתחלקים לשומנים שנעצרים בצמיחה. עצירת גדילה בפרה-אדיפוציטים היא שלב מוקדם להשראה התמיינתית12. רק בתאים שעצרו גדילה, שניתן ל...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים מצהירים כי אין להם אינטרסים פיננסיים מתחרים ידועים או מערכות יחסים אישיות שיכולות להיראות כמשפיעות על העבודה המדוונת במאמר זה.

תודות

המאמר מומן על ידי המרכז הלאומי למדע, פולין, עם מענקים שהתקבלו על ידי דורוטה נובאק (OPUS 22, מס' 2021/43/B/NZ3/01458) ואלכסנדרה סימיצ'ייב (SONATA, 2020/39/D/NZ5/02330).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
3-איזובוטיל-1-מתילקסנתין (IBMX)מרקI5879
0.25% טריפסין/0.05% EDTA pH 7.2IITD PAN, Wrocfigure-materials-1או, פולין20-500
לוח 96 בארותתרמו130188
אנטיביוטיקה-תמיסה אנטי-מיקוטיתסיגמא-אלדריץ'A5955
אלבומין סרום בקר (BSA)סיגמא-אלדריץ'A3294
מונה תאיםלא זמיןלא זמין
צנטריפוגהלא זמיןלא זמין
דקסמתזוןסיגמא-אלדריץ'D4902
ה-Modified Eagle Medium (DMEM) של DulbeccoIITD PAN, Wrocfigure-materials-2או, פולין10-500מכיל 1 גרם לליטר גלוקוז
תערובת המזון F12 של Dulbecco Modified Eagle Medium: תערובת נוטריאנטים F12גיבקו11320-033
אתנולצ'מפור113964200#1L
סרום בקר עוברי (FBS)גיבקוA5256701
תאי גזע שמקורם בשומן של hADSCלונזהPT-5006
חממהלא זמיןלא זמין
אינדומתציןסיגמא-אלדריץ'I8280-5G
אינסוליןסיגמא-אלדריץ'I9278
מיקרוסקופ הפוךלא זמיןלא זמין
L-גלוטמיןסיגמא-אלדריץ'25030-024
מלח נתרן חומצה לינולאיתסיגמא-אלדריץ'L8134
LipidSpot פלואורסצנטיביוטיום70065
סליין ממוגן בפוספט (PBS)תרמו10010023
סודים אולאטסיגמא-אלדריץ'O7501
סודים פאלמיטטהסיגמא-אלדריץ'P9767
בקבוק תרבית תאים T75תרמו130190
כחול טרייפןסיגמא-אלדריץ'95896HJ

מקורות

  1. Lin, X., Li, H. Obesity: Epidemiology, pathophysiology, and therapeutics. Front Endocrinol. 12, 706978(2021).
  2. Wen, X., et al. Signaling pathways in obesity: Mechanisms and therapeutic interventions. Signal Transduct Target Ther. 7 (1), 298(2022).
  3. Sharma, S., Muthu, S., Jeyaraman, M., Ranjan, R., Jha, S. K. Translational products of adipose tissue-derived mesenchymal stem cells: bench to bedside applications. World J Stem Cells. 13 (10), 1360-1381 (2021).
  4. Guerreiro, V. A., Carvalho, D., Freitas, P. Obesity, adipose tissue, and inflammation answered in questions. J Obes. 2022, 2252516(2022).
  5. Kleinert, M., et al. Animal models of obesity and diabetes mellitus. Nat Rev Endocrinol. 14 (3), 140-162 (2018).
  6. Ruiz-Ojeda, F. J., Rupérez, A. I., Gomez-Llorente, C., Gil, A., Aguilera, C. M. Cell models and their application for studying adipogenic differentiation in relation to obesity: A review. Int J Mol Sci. 17 (7), 1040(2016).
  7. Małodobra-Mazur, M., et al. Metabolic differences between subcutaneous and visceral adipocytes differentiated with an excess of saturated and monounsaturated fatty acids. Genes. 11 (9), 1-16 (2020).
  8. Ishaq, A., Tchkonia, T., Kirkland, J. L., Siervo, M., Saretzki, G. Palmitate induces DNA damage and senescence in human adipocytes in vitro that can be alleviated by oleic acid but not inorganic nitrate. Exp Gerontol. 163, 111798(2022).
  9. Berger, E., Géloën, A. Insulin prevents fatty acid induced increase of adipocyte size. Adipocyte. 11 (1), 510-528 (2022).
  10. Eom, J., et al. Visualization and quantification of mesenchymal cell adipogenic differentiation potential with a lineage specific marker. J Vis Exp. (133), e57153(2018).
  11. Pietraszek-Gremplewicz, K., et al. Response of primary human adipocytes to fatty acid treatment. J Cell Mol Med. 29 (10), e70622(2025).
  12. Zhu, D., Shi, S., Wang, H., Liao, K. Growth arrest induces primary-cilium formation and sensitizes IGF-1-receptor signaling during differentiation induction of 3T3-L1 preadipocytes. J Cell Sci. 122 (15), 2760-2768 (2009).
  13. Rosen, E. D., et al. PPARγ is required for the differentiation of adipose tissue in vivo and in vitro. Mol Cell. 4 (4), 611-617 (1999).
  14. Scott, M. A., Nguyen, V. T., Levi, B., James, A. W. Current methods of adipogenic differentiation of mesenchymal stem cells. Stem Cells Dev. 20 (10), 1793-1804 (2011).
  15. Styner, M., Sen, B., Xie, Z., Case, N., Rubin, J. Indomethacin promotes adipogenesis of mesenchymal stem cells through a cyclooxygenase independent mechanism. J Cell Biochem. 111 (4), 1042-1050 (2010).
  16. Klemm, D. J., et al. Insulin-induced adipocyte differentiation: activation of CREB rescues adipogenesis from the arrest caused by inhibition of prenylation. J Biol Chem. 276 (30), 28430-28435 (2001).
  17. Inthanon, K., Sririwichitchai, R., Davies, N. M. Rapid screening of adipogenic responses to EGCG in non-induced L929 adipocytes using image-based analysis compared to the conventional 3T3-L1 method. J Appl Pharm Sci. 15 (5), 138-148 (2025).
  18. Abbasi, K., Mehdizadeh, A., Hamishehkar, H., Nouri, M., Darabi, M. Fatty acid composition of lipid fractions in white- and brown-like adipocytes derived from human mesenchymal stem cells. Adipocyte. 14 (1), 2566481(2025).
  19. Pieters, V. M., et al. A three-dimensional human adipocyte model of fatty acid-induced obesity. Biofabrication. 14 (4), 045009(2022).
  20. Watt, M. J., Hoy, A. J., Muoio, D. M., Coleman, R. A. Distinct roles of specific fatty acids in cellular processes: implications for interpreting and reporting experiments. Am J Physiol Endocrinol Metab. 302, 1-3 (2012).
  21. Alsabeeh, N., Chausse, B., Kakimoto, P. A., Kowaltowski, A. J., Shirihai, O. Cell culture models of fatty acid overload: problems and solutions. Biochim Biophys Acta Mol Cell Biol Lipids. 1863 (2), 143-150 (2018).
  22. Fuster, J. J., Ouchi, N., Gokce, N., Walsh, K. Obesity-induced changes in adipose tissue microenvironment and their impact on cardiovascular disease. Circ Res. 118 (11), 1786-1807 (2016).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

In Vitro
צור קשר
המלצה לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

2026 © זכויות יוצרים MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.