הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

הקמת מודל עכברוש לדחייה חריפה בתיווך נוגדנים בהשתלת כליה

294 צפיות

⸱

DOI:

10.3791/69793

⸱

10 בפברואר 2026

 ,  ,  ,  , 
1Department of Urology, The First Affiliated Hospital of Shandong First Medical University & Shandong Provincial Qianfoshan Hospital

* These authors contributed equally

במאמר זה

סיכום

מאמר זה מתאר את הקמת מודל עכברוש לדחייה חריפה בתיווך נוגדנים (AAMR) בהשתלת כליה. המודל מושרה על ידי תחושת תחושה מוקדמת של חולדות לואיס המקבלים עם שתלי עור מעכברי Brown Norway תורמים 14 ימים לפני השתלת הכליה, ומספק פלטפורמה חזקה ללימוד פתופיזיולוגיה של AAMR.

תקציר

דחייה חריפה בתיווך נוגדנים (AAMR) נותרה מכשול מרכזי להישרדות השתל לטווח ארוך בהשתלת כליה. הפתופיזיולוגיה של AAMR מונעת בעיקר על ידי נוגדנים ייעודיים לתורם (DSA) שמפעילים את התולים התולתליים, מה שמוביל לפגיעה בתאי האנדותל, דלקת כלי דם ותפקוד לקוי של השתל. למרות ההתקדמות בטיפולים מדכאי חיסון, הטיפול ב-AAMR נותר לא אופטימלי. לכן, פיתוח מודלים אמינים לבעלי חיים ל-AAMR הוא חיוני להבנת המנגנונים שלו ולהערכת התערבויות טיפוליות פוטנציאליות. במחקר זה, מודל חולדה של AAMR הוקם על ידי העלאת רגישות לעכברי לואיס המקבלים עם שתלי עור של עכברוש בראון נורווגיה במשך 14 ימים לפני השתלת הכליה. לא ניתנו תרופות מדכאות חיסון למקבלות לאורך כל המחקר. ניתוח הישרדות הראה ירידה משמעותית בהישרדות השתלים בקבוצה האלוגנית המוקדמת בהשוואה לקבוצה הלא רגישה מראש (6.2 ± 1.1 יום לעומת 10.0 ± 0.7 יום, P < 0.001). רמות DSA-IgG בסרום עלו משמעותית מהיום השביעי לאחר השתלת העור והמשיכו לעלות עד היום החמישי לאחר השתלת הכליה, ורמות DSA-IgM בסרום עלו משמעותית בימים ה-7 וה-14 לאחר השתלת העור. החל מ-6 שעות לאחר השתלת הכליה, האלוגרפטים החלו להראות סימנים של גלומרוליטיס, קפיליטיס פריציובולרי והצטברות C4d בנימים. החל מ-3 ימים לאחר השתלת הכליה, נצפו נזק משמעותי לאלוגרפט ונמק צינורית. שינויים אלו החמירו בהדרגה עם הזמן וכולם תואמים את מאפייני AAMR. מודל זה מסכם ביעילות את המאפיינים המרכזיים של AAMR, ומספק פלטפורמה איתנה למחקרים עתידיים על מנגנונים בסיסיים וטיפולים פוטנציאליים.

מבוא

השתלת כליה (KT) הפכה לגישה טיפולית קריטית למחלות כליות בשלב סופי 1,2. עם זאת, דחיית השתלה נותרה גורם מרכזי המשפיע על הישרדות ארוכת הטווח של אלוגרפטים כלייתיים 3,4. הסוגים העיקריים של דחייה הנצפים קלינית הם דחייה חריפה (AR) ודחייה כרונית (CR). דחייה חריפה מסווגת עוד לדחייה חריפה בתאי T (TCMR) ודחייה חריפה בתיווך נוגדנים (AAMR)5,6,7. בשנים האחרונות, עם פיתוח ויישום של תרופות מדכאות חיסון, שכיחות TCMR נשלטה ביעילות. עם זאת, AAMR נותר אחד הגורמים המרכזיים לתפקוד לקוי של האלוגרפט 8,9.

הפתופיזיולוגיה של AAMR נחשבת למונעת על ידי נוגדנים ספציפיים לתורם (DSA) שנוצרים לפני או אחרי ההשתלה10. כאשר DSA נקשר לאנטיגנים על תאי האנדותל הווסקולרי של האלוגרפטים, מפל המשלים הקלאסי מופעל, מה שמוביל להיווצרות קומפלקסי התקפה ממברנתיים ולנזק אלוגרפט11. במהלך הפעלת המשלים, קטע הפיצול C4d נקשר באופן קוולנטי למשטחי תאי אנדותל קפילריים אלוגרפטים. בנוסף, כימואטריטים כמו מוצרי חיתוך משלים C3a ו-C5a מגייסים תאים דלקתיים (למשל, מקרופאג'ים) לחדור לנימי האלוגרפט, מה שמוביל לקפילריטיס ולפציעת השתל נוספת12,13. לכן, האבחנה הקלינית של AAMR מתבססת בעיקר על ראיות לרמות DSA גבוהות בדם, קפיליטיס, נמק צינורית והפקדת C4d בנימי השתל 14,15,16. האסטרטגיות הטיפוליות הנוכחיות ל-AAMR כוללות בעיקר דיכוי פעילות תאי B או פלזמה, הסרת DSA במחזור הפעולה ועיכוב הפעלת המשלים. אלה כוללים פלסמפרזיס, ספיחה חיסונית, נוגדן מונוקלונלי CD20 (ריטוקסימאב), מעכבי פרוטאזום (בורטזומיב), מעכבי משלים (אקוליזומאב) ואנזים מפרק IgG (IdeS)17,18,19,20,21,22,23,24,25. עם זאת, היעילות הכוללת של הטיפול נותרה פחות אופטימלית, שכן לא הוכח טיפול סטנדרטי כיעיל באופן משמעותי בניסויים אקראיים. יתרה מזאת, אסטרטגיות דיכוי חיסון הנוכחיות קשורות לעיתים קרובות לנטל משמעותי של תופעות לוואי, במיוחד רגישות מוגברת לסיבוכים זיהומיים חמורים ולממאירות 21,25,26,27. לכן, נדרש מחקר נוסף להבהרת הפתופיזיולוגיה של AAMR ולפיתוח גישות טיפוליות יעילות יותר.

חקירת מנגנוני מחלות וחקר אסטרטגיות מניעה חדשניות נשענות על מודלים של בעלי חיים קטנים, מה שהופך את הקמת מודל AAMR אמין ב-KT לחיונית. קבוצת המחקר שלנו בעלת ניסיון נרחב בבניית דגמי KT AAMR28 של חולדות. מחקר זה ביצע KT באמצעות עכבר בראון נורווגיה (BN) לעכברוש לואיס. חולדות BN (RT1n) ולואיס (RT1l) מייצגות זוג שאינו תואם לחלוטין ל-MHC, ומספקים בסיס גנטי חזק לדחייה אלוגנית29. בהשוואה לגישות מודל חלופיות, שיטת הפרה-סנסטיזציה של שתלי עור הנהוגה כאן מציעה יתרונות ברורים בעמידות וברלוונטיות פיזיולוגית. בניגוד למודלים פסיביים של העברת נוגדנים שמסתמכים על הזרקה חולפת וחסרים מעורבות חיסונית של המארח, גישת הרגישות הפעילה הזו יוצרת זיכרון חיסוני ארוך טווח, ומדמה במידה רבה את התרחיש הקליני של מטופלים רגישים מאוד30. יתרה מזאת, בניגוד לעיצובים אחרים של רגישות, כמו עירוי דם ייעודי לתורם, שעשויים להניב טיטרים משתנים של נוגדנים או אפילו לגרום לסבילות בהתאם לפרוטוקול, השתלת עור מספקת גירוי יחיד, עוצמתי ואימונוגנימאוד 29. דבר זה מבטיח יצירה שחוזרת של DSA בדרגה גבוהה והופעה עקבית של פנוטיפים של AAMR (למשל, קפיליטיס, הצטברות C4d) בתוך חלון מוגדר של 5 עד 7 ימים, מה שהופך אותו לפלטפורמה ישימה להערכת יעילות טיפולית. הקמנו את מודל AAMR על ידי ביצוע KT בעכברים האלוגניים הללו לאחר שבועיים של קדם-רגישות לשתלי עור והערכנו את המודל באמצעות ניתוחים סרולוגיים, היסטופתולוגיים ואימונולוגיים.

לגבי היישום של המודל, משתמשי פרוטוקול זה יכולים לצפות להופעה ניתנת לשחזור של פנוטיפים של AAMR בין הימים 5 ל-7 לאחר ההשתלה. הקריאות העיקריות החיוניות לאימות מודל זה כוללות את הקינטיקה של ייצור DSA (IgG ו-IgM) בדם, עדויות היסטולוגיות לדלקת מיקרווסקולרית (גלומרוליטיס וקפילליטיס פריבובולרי), והפקדה מפוזרת של C4d בנימים פריציובולריים. עם זאת, הקוראים צריכים להיות מודעים למגבלה יסודית: שיטת הקדם-רגישות של העור מעוררת תגובה אלואימונית רחבה הכוללת הן את זרועות ההומור והן את הזרועות התאיות. כתוצאה מכך, מודל זה מתבטא בדרך כלל כפתולוגיית דחייה מעורבת – המאופיינת בתכונות AAMR דומיננטיות עם TCMR נלווי, ולא בתהליך מבודד המתווך על ידי נוגדנים.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

כל ההליכים בבעלי חיים בוצעו בהתאם בקפדנות להנחיות המוסדיות ואושרו על ידי ועדת האתיקה לבעלי חיים מוסדיים של אוניברסיטת שאנדונג הראשונה לרפואה ובית החולים הפרובינציאלי צ'יאנפושאן. כל הנהלים עמדו בעיקרון 3R ובהכרזת הלסינקי (אישור מס' JENNIO-IACUC-2024-A066). הריאגנטים והציוד ששימשו במחקר זה מפורטים בטבלת החומרים.

1. הכנת בעלי חיים

  1. בוגרים זכרים BN (RT1n) ו-Lewis (RT1l) (200-250 גרם) במתקנים ספציפיים ללא פתוגנים (SPF). כזנים קרובי משפחה, הפרטים באותו זן זהים גנטית, מה שמבטיח אחידות התורמים.
  2. חלק את העכברים לארבע קבוצות ניסוי כפי שמתואר באיור 1: (1) KT סינגני, (2) KT סינגני לאחר השתלת עור (ST), (3) KT אלוגני, ו-(4) KT אלוגני לאחר ST.
    הערה: יש לבצע את כל ההליכים הכירורגיים בחדר ניתוח SPF תחת מיקרוסקופ סטריאו. שמרו על טמפרטורת גוף של 37 מעלות צלזיוס באמצעות שולחן ניתוח תרמוסטטי לאורך כל ההליכים.
  3. השרה הרדמה עם 4%-5% איזופלורן הנושא על ידי 100% חמצן בקצב זרימה של 1.0 ליטר לדקה בתא השראה (בהתאם לפרוטוקולים שאושרו על ידי המוסד). לאחר ההשראה, שמרו על ההרדמה עם איזופלורן של 1.5%-2% דרך חרוט אף. עומק ההרדמה נמדד על ידי אימות אובדן רפלקס המשיכה של הדוושה לאורך כל ההליך.

2. קדם-רגישות באמצעות ST (לקבוצות 2 ו-4)

  1. קצור שתל עור בעובי מלא בגודל 2 ס"מ על 2 ס"מ מזנב של עכברוש תורם (לואיס עבור קבוצה 2; BN לקבוצה 4).
    הערה: העכברוש התורם המשמש להשתלת עור הוא אדם שונה מתורם הכליה הבא, אף על פי שהם מאותו זן ממשפחת קרובה גנטית.
  2. הכינו מיטת שתל באותו גודל בגב העכברוש המקבל.
  3. מניחים את שתל העור של התורם על המיטה המוכנה ואבטחו אותו באמצעות תפרים מופרעים כפי שתואר קודם31.
  4. יש להקדיש 14 ימים לרגישות לפני שממשיכים בהשתלת כליה.

3. ניתוח תורם עבור KT

  1. הרדמה את עכברוש התורם (לואיס לקבוצות 1 ו-2; BN לקבוצות 3 ו-4).
  2. הניחו את העכברוש על הגב ובצעו לפרוטומיה אמצעית שמתרחשת מתהליך הזיפואיד לסימפיזיס הערווה (כ-3-4 ס"מ) כדי לחשוף לחלוטין את איברי הבטן32.
  3. משוך בעדינות את המעיים כדי לראות את הכליה השמאלית ואת כלי הדם הנלווים אליה.
  4. לבודד את עורק הכליה השמאלי במקורו מהאורטה הבטנית ואת הוריד הכליה השמאלי במפגש עם הווריד הנבוב התחתון.
    הערה: אנו בוחרים לבודד ולנתק את כלי הדם ישירות באוסטיה שלהם מבלי לקצור כתם אאורטה או וריד (טלאי קארל). בעוד שטכניקה זו דורשת מיומנויות מיקרוכירורגיות מדויקות לאנסטומוזה, אנו מעדיפים אותה כדי למזער את היקף הארטריוטומיה באאורטה המקבל ולהפחית את הסיכון לטרומבוזה הנגרמת מטורבולנציה הקשורה לשחזור הטלאות.
  5. הפירו את הכליה השמאלית בכ-2 מ"ל של סליין קר (4 מעלות צלזיוס) הפאריני (125 U/mL) דרך האאורטה הבטנית עד שהכליה הופכת לחיוורת31.
  6. חתך את וריד הכליה השמאלי, ואחריו את העורק הכלייתי השמאלי.
  7. חתך את השופכן, וודא שכתם קטן בשלפוחית נשאר מחובר.
  8. קצור את הכליה והניח אותה מיד ב-0.5-1.0 מ"ל של תמיסת שימור כליות היפרטוניות קר ציטראט אדנין (HCA) על קרח.

4. פעולת מקבל עבור KT

  1. להרדים את המקבל עכברוש לואיס.
  2. בצע לפרוטומיה בקו אמצעי וחשוף את האאורטה הבטנית והווריד הנוב התחתון מתחת לגובה כלי הכליה המקומיים.
  3. בודדו קטע של האאורטה הבטנית והווריד הנבוב התחתון.
  4. מהדקים את הקטע הווסקולרי המבודד באמצעות קליפסי בולדוג וסקולריים.
  5. בצע חתך אורכי קטן (באורך של כ-1.0-1.5 מ"מ, תואם לקוטר עורק הכליה של התורם) באאורטה הבטנית ולבצע אנסטומוזה מקצה לצד עם עורק הכליה התורם באמצעות תפרי ניילון 10-0 באופן רציף.
  6. בצע חתך תואם בווריד הנוב התחתון ובצע אנסטומוזה מקצה לצד עם וריד הכליה התורם באמצעות 8-0 תפרי ניילון.
    הערה: הפריטיניזציה הסיסטמית אינה מתבצעת על המקבל כדי למנוע דימום מופרז.
  7. ראשית, הסר את הקלמפ הווסקולרי של הווריד הנבוב התחתון כדי ליצור זרימה ורידית. לאחר מכן, הסר לאט את המהדק העורקי באאורטה הבטנית כדי לשחזר את זרימת הדם לשתל.
  8. בדוק המוסטזיס והעריך פרפוזיה של השתל. דחסו כל נקודת תקלה קטנה עם מטליות כותנה.
    הערה: כליה שחוללה בהצלחה צריכה להפוך לורוד ולהיות מוצק במהירות.
  9. לבצע שחזור דרכי השתן על ידי אנסטומוזה של כתם שלפוחית השתן התורם לכיפה של שלפוחית השתן של המקבל באמצעות תפרי ניילון 10-0.
  10. יש להסיר את שתי הכליות המקומיות של העכברוש המקבל כדי להבטיח שההישרדות תלויה אך ורק בתפקוד השתל.
    הערה: לאורך כל ההליך, זמן האיסכמיה הקרה הכולל (מהקציר של התורם ועד ריפרפוזיה) נשמר מתחת ל-60 דקות, וזמן האיסכמיה החמה (במהלך האנסטומוזה) נשמר מתחת ל-30 דקות כדי למזער פגיעה איסכמית.
  11. סגרו את חתך הבטן בשכבות באמצעות תפרי משי של 5-0.
  12. מיד לאחר סגירת הפצע, ניתן להזריק בופרנורפין (0.05 מ"ג/ק"ג) תת-עורית לטיפול בכאבים ופניצילין (40,000 U/kg) בתוך השריר כדי למנוע זיהום. נתנו 1-2 מ"ל תמיסת מלח חמים וסטרילית תת-עורית כדי למנוע התייבשות.

5. טיפול ומעקב לאחר הניתוח

  1. עוקבים מדי יום אחר חולדות המקבל להישרדות, התנהגות (ערנות, ניידות) ומצב פיזיולוגי (צריכת מזון, הפרשה).
  2. בדקו את החתך הניתוחי מדי יום לסימני זיהום או התנתקות.
  3. עוקבים אחרי חולדות כל שעה במשך 24 השעות הראשונות לאחר הניתוח, לפחות שלוש פעמים ביום בימים 2-3, ופעם או פעמיים ביום לאחר מכן.
  4. יש להוציא מניתוח סופי נמנים שמתו בתוך 24 שעות לאחר ההשתלה עקב סיבוכים טכניים, כגון טרומבוזיס וסקולרי, דליפת שתן או דימום. במחקר זה, שיעור ההצלחה הכולל בניתוח עמד על כ-90%.

6. הערכות לאחר השתלה

  1. זיהוי רמות DSA
    1. אסוף דגימות דם מהוריד הזנב בימים 0, 3, 7 ו-14 לאחר ST ובימים 1, 3 ו-5 לאחר KT.
    2. צנטריפוגה את הדגימות בטמפרטורה ~1500 x גרם למשך 10 דקות להפרדת הסרום ואחסון בטמפרטורה של -20°C עד לניתוח.
    3. קצור את הטחול מעכברוש תורם ופירוקו מכנית דרך מסננת תאים של 70 מיקרון למלח זרחן קר (PBS). ליז תאי דם אדומים באמצעות בופר ליזינג ACK למשך 5 דקות, ואז לשטוף את התאים פעמיים עם PBS (צנטריפוגה ב-300 × גרם למשך 5 דקות). ספר את התאים וכיוון את הריכוז הסופי ל-1 × 107 תאים/מ"ל.
    4. מדלל את סרום המקבל 1:25 עם PBS.
    5. דגרו 50 מיקרוליטר של הסרום המדולל עם 5 ×-105 טחולים תורמים למשך 30 דקות בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס.
    6. שטוף את התאים פעמיים עם 2 מ"ל PBS על ידי צנטריפוגה ב-400 × גרם למשך 5 דקות בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס
    7. דגרו את התאים בנוגדני IgG אנטי-חולדה מצומדים ב-FITC וב-PE נגד IgM (ראו טבלת החומרים לשיבוטים ספציפיים) למשך שעה בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס.
    8. שטפו את התאים והחזירו אותם ל-PBS לריכוז של 5 ×-106 תאים/מ"ל.
    9. ניתחו את הדגימות באמצעות ציטומטר זרימה כדי לכמת את עוצמת הפלואורסצנציה הממוצעת (MFI) של DSA-IgG ו-IgM.
  2. בדיקה פתולוגית של שתלי כליה
    1. קציר שתלי כליה בנקודות זמן מוגדרות (קציר ביום החמישי לאחר KT ל-KT סינגני לאחר קבוצת ST; 6 שעות, 12 שעות, 1 יום, 2 יום, 3 יום, 4 ימים ו-5 ימים לאחר KT עבור KT אלוגני לאחר קבוצת ST).
    2. מקבע את דגימות הרקמה ב-4% פרפורמלדהיד למשך 24 שעות בטמפרטורת החדר. לאחר ההתייבשות והניקוי, הטמיעו את הרקמות בבלוקי פרפין וחתכו לחלקים של 4 מיקרון.
    3. לבצע צביעת המטוקסילין-אאוזין (HE) וצביעת חומצה-שיף מחזורית (PAS) על מקטעים.
    4. באימונוהיסטוכימיה, יש לבצע שליפת אנטיגנים על ידי השקיעת החלקים בבופר EDTA (pH 9.0) וחימום בסיר לחץ. כאשר הלחץ מלא, שמרו על הטמפרטורה למשך 5 דקות, ואחר כך קירור טבעי לטמפרטורת החדר.
    5. טפל בחלקים במי חמצן של 3% למשך 10 דקות.
    6. דגרו קטעים בלילה בטמפרטורה של 4°C עם נוגדנים ראשוניים נגד CD31 ו-C4d.
    7. מרח DAB+ סובסטרט-כרומוגן למשך 30 שניות בטמפרטורת החדר לצורך ויזואליזציה.
    8. סרקו את החלקים המוכתמים באמצעות סורק שקופיות דיגיטלי.

7. ניתוח סטטיסטי

  1. נתונים כמותיים מוצגים כסטיית תקן ממוצעת ± (SD). ניתוחים סטטיסטיים בוצעו באמצעות תוכנה סטטיסטית מתאימה.
  2. הערכת שיעורי הישרדות של מקבל באמצעות ניתוח קפלן-מאייר.
  3. השווה נתונים כמותיים בין קבוצות באמצעות מבחן t של סטודנט.
    הערה: ערך P < 0.05 נחשב למובהק סטטיסטית.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

זמן הישרדות של אלוגרפט כליה
המקבלים הן ב-KT הסינגני והן ב-KT הסינגני לאחר קבוצות ST שרדו לטווח ארוך ללא דחייה לאורך כל תקופת התצפית של חודש. לעומת זאת, זמן ההישרדות של האלוגרפטים בקבוצת ה-KT האלוגנית ושל ה-KT האלוגני לאחר קבוצת ST היה (10.0 ± 0.7) ימים ו-(6.2 ± 1.1) ימים, בהתאמה, עם הבדל מובהק סטטיסטית בין שתי הקבוצות (איור 2A).

רמות DSA (IgG ו-IgM)
רמות DSA-IgG בסרום ב-KT אלוגני לאחר מקבלי ...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

AAMR נותר אתגר משמעותי ב-KT בשל ההתקדמות המהירה והתוצאות הקליניות השליליותשלו. אפילו עם טיפולים יעילים נגד דחייה שהופכים אפיזודות חריפים, יותר מ-40% מהמטופלים מתקדמים ל-AMR כרוני. לאחר אבחנה כרונית של AMR, שיעור ההישרדות של השתל במשך חמש שנים לעיתים יורד מתחת ל-50%. שיעור ההישרדות של השתל במשך 4 שנים אצל מטופלים חיוביים ל-C4d הוא רק 50%, בעוד שבחולים שליליים ל-...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים מצהירים שאין ניגוד עניינים.

תודות

מחקר זה נתמך על ידי הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (82373042), צוות החדשנות המשותף למחקר קליני ובסיסי (202409), וקרן המדעים הטבעיים של מחוז שאנדונג (ZR2022QH291, ZR2025MS1199).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
נוגדן מונוקלונלי אנטי-CD31אבקאם (בריטניה)AB64543לאימונוהיסטוכימיה (תיוג תאי אנדותל וסקולריים)
מספר שיבוט: TLD-3A12
אנטי-C4d  נוגדןהיקולט ביוטק (הולנד)HP8034באימונוהיסטוכימיה (זיהוי הצטברות משלים), דילול הוא 1:50
מספר שיבוט: NA (פוליקלונלי)
נוגדן IgG אנטי-חולדה עם FITC קונוגטיביאבקאם (בריטניה)ab6840משמש לכימות ציטומטרי זרימה של רמות DSA-IgG
מספר שיבוט: פוליקלונלי
מערכת ההרדמה הגזיתנאנג'ינג קלווין ביוטכנולוגיה בע"מ.KW-MZJ-4מצויד באיזופלוראן להרדמה כללית
מספר שיבוט: NA (פוליקלונלי)
נוגדן IgM נגד עכברוש ב-PE-קונוגגציהביולוגיה אגדה408918משמש לכימות ציטומטרי זרימה של רמות DSA-IgM
מספר שיבוט: MRM-47
מיקרוסקופ כירורגי סטריאוטקסיבייג'ינג ג'ונגטיאן גואנגג'נג טכנולוגיה בע"מTS-39NKמשמש לניתוח השתלת כליה בעכברים
מספר שיבוט: NA
מהדקי בולדוג וסקולרייםחברת רובוז כירורגיה אינסטרומנטRS-5481Tמשמש לחסימת זרימת הדם במהלך השתלת כליה
מספר שיבוט: NA

מקורות

  1. Perico, N., et al. Long-term clinical and immunological profile of kidney transplant patients given mesenchymal stromal cell immunotherapy. Front Immunol. 9, 1359(2018).
  2. Tonnus, W., et al. Rubicon-deficiency sensitizes mice to mixed lineage kinase domain-like (MLKL)-mediated kidney ischemia-reperfusion injury. Cell Death Dis. 13 (3), 236(2022).
  3. Sedej, I., et al. Extracellular vesicle-bound DNA in urine is indicative of kidney allograft injury. J Extracell Vesicles. 11 (9), e12268(2022).
  4. Nian, Y., et al. IL-21 receptor blockade shifts the follicular T cell balance and reduces de novo donor-specific antibody generation. Front Immunol. 12, 661580(2021).
  5. Luan, D., et al. FOXP3 mRNA profile prognostic of acute T cell-mediated rejection and human kidney allograft survival. Transplantation. 105 (8), 1825-1839 (2021).
  6. Duneton, C., Winterberg, P. D., Ford, M. L. Activation and regulation of alloreactive T cell immunity in solid organ transplantation. Nat Rev Nephrol. 18 (10), 663-676 (2022).
  7. Mirzakhani, M., et al. Soluble CD30, the immune response, and acute rejection in human kidney transplantation: A systematic review and meta-analysis. Front Immunol. 11, 295(2020).
  8. Sellarés, J., et al. Understanding the causes of kidney transplant failure: the dominant role of antibody-mediated rejection and nonadherence. Am J Transplant. 12 (2), 388-399 (2012).
  9. Montgomery, R. A., Loupy, A., Segev, D. L. Antibody-mediated rejection: new approaches in prevention and management. Am J Transplant. 18 (Suppl 3), 3-17 (2018).
  10. Heeger, P. S., Haro, M. C., Jordan, S. Translating B cell immunology to the treatment of antibody-mediated allograft rejection. Nat Rev Nephrol. 20 (4), 218-232 (2024).
  11. Chong, A. S. Mechanisms of organ transplant injury mediated by B cells and antibodies: Implications for antibody-mediated rejection. Am J Transplant. 20, 23-32 (2020).
  12. Bery, A. I., Hachem, R. R. Antibody-mediated rejection after lung transplantation. Ann Transl Med. 8 (6), 411(2020).
  13. Trivyza, M. S., et al. Circulating immune complexes and complement activation in sensitized kidney transplant recipients. Int J Mol Sci. 25 (20), (2024).
  14. Gupta, S., et al. Impact of early rejection treatment on infection development in kidney transplant recipients: A propensity analysis. J Transplant. 2024, 6663086(2024).
  15. Haas, M., et al. Banff 2013 meeting report: Inclusion of C4d-negative antibody-mediated rejection and antibody-associated arterial lesions. Am J Transplant. 14 (2), 272-283 (2014).
  16. Loupy, A., et al. The Banff 2019 Kidney Meeting Report (I): Updates on and clarification of criteria for T cell- and antibody-mediated rejection. Am J Transplant. 20 (9), 2318-2331 (2020).
  17. Stegall, M. D., Gloor, J. M. Deciphering antibody-mediated rejection: New insights into mechanisms and treatment. Curr Opin Organ Transplant. 15 (1), 8-10 (2010).
  18. Stegall, M. D., et al. Terminal complement inhibition decreases antibody-mediated rejection in sensitized renal transplant recipients. Am J Transplant. 11 (11), 2405-2413 (2011).
  19. Sorohan, B. M., et al. Complement in antibody-mediated rejection of the kidney graft: from pathophysiology to clinical practice. J Clin Med. 14 (8), (2025).
  20. Montgomery, R. A., Loupy, A., Segev, D. L. Antibody-mediated rejection: New approaches in prevention and management. Am J Transplant. 18 (Suppl 3), 3-17 (2018).
  21. Eskandary, F., et al. A randomized trial of bortezomib in late antibody-mediated kidney transplant rejection. J Am Soc Nephrol. 29 (2), 591-605 (2018).
  22. Matsuda, Y., Watanabe, T., Li, X. K. Approaches for controlling antibody-mediated allograft rejection through targeting B cells. Front Immunol. 12, 682334(2021).
  23. Cohen, P., Tcherpakov, M. Will the ubiquitin system furnish as many drug targets as protein kinases. Cell. 143 (5), 686-693 (2010).
  24. Choi, A. Y., et al. Emerging new approaches in desensitization: Targeted therapies for HLA sensitization. Front Immunol. 12, 694763(2021).
  25. Jordan, S. C., et al. IgG endopeptidase in highly sensitized patients undergoing transplantation. N Engl J Med. 377 (5), 442-453 (2017).
  26. Perrottet, N., Koller, M. T., Hadaya, K., De Geest, S., Descoeudres, C. Infectious complications and graft outcome following treatment of acute antibody-mediated rejection after kidney transplantation: A nationwide cohort study. PLoS One. 16 (4), e0250829(2021).
  27. Schinstock, C. A., Mannon, R. B., Budde, K. Recommended treatment for antibody-mediated rejection after kidney transplantation: The 2019 expert consensus from the Transplantation Society working group. Transplantation. 104 (5), 911-922 (2020).
  28. Liao, T., He, W., Zhang, L. Noninvasive quantification of intrarenal allograft C4d deposition with targeted ultrasound imaging. Am J Transplant. 19 (1), 259-268 (2019).
  29. Huang, G., Wang, C., Zhang, M. Characterization of transfusion-elicited acute antibody-mediated rejection in a rat model of kidney transplantation. Am J Transplant. 14 (5), 1061-1072 (2014).
  30. Wasowska, B. A., et al. Passive transfer of alloantibodies restores acute cardiac rejection in IgKO mice. Transplantation. 71 (6), 727-736 (2001).
  31. Liao, T., et al. Noninvasive quantification of intrarenal allograft C4d deposition with targeted ultrasound imaging. Am J Transplant. 19 (1), 259-268 (2019).
  32. Ahmadi, A. R., Smith, B. H., Zhang, Y. Orthotopic rat kidney transplantation: A novel and simplified surgical approach. J Vis Exp. (147), e59403(2019).
  33. Rodrigo, E., Chedid, M. F., Segundo, D. S., Millán, J., López-Hoyos, M. Acute rejection following kidney transplantation: State-of-the-art and future perspectives. Curr Pharm Des. 26 (28), 3468-3496 (2020).
  34. Schinstock, C., Stegall, M. D. Acute antibody-mediated rejection in renal transplantation: Current clinical management. Curr Transplant Rep. 1 (2), 78-85 (2014).
  35. Chehade, H., Pascual, M. The challenge of acute antibody-mediated rejection in kidney transplantation. Transplantation. 100 (2), 264-265 (2016).
  36. Mauiyyedi, S., et al. Acute humoral rejection in kidney transplantation: II. Morphology, immunopathology, and pathologic classification. J Am Soc Nephrol. 13 (3), 779-787 (2002).
  37. Lederer, S. R., et al. Impact of humoral alloreactivity early after transplantation on the long-term survival of renal allografts. Kidney Int. 59 (1), 334-341 (2001).
  38. Salvadori, M., Bertoni, E. Impact of donor-specific antibodies on the outcomes of kidney graft: Pathophysiology, clinical, therapy. World J Transplant. 4 (1), 1(2014).
  39. Baldwin, W. M. III, Valujskikh, A., Fairchild, R. L. Mechanisms of antibody-mediated acute and chronic rejection of kidney allografts. Curr Opin Organ Transplant. 21 (1), 7-14 (2016).
  40. Chong, A. S., Rothstein, D. M., Safa, K., Riella, L. V. Outstanding questions in transplantation: B cells, alloantibodies, and humoral rejection. Am J Transplant. 19 (8), 2155-2163 (2019).
  41. Roders, N., Schlotterer, A., Axt-Fliedner, R. SYK inhibition induces apoptosis in germinal center-like B cells by modulating the antiapoptotic protein myeloid cell leukemia-1, affecting B-cell activation and antibody production. Front Immunol. 9, 787(2018).
  42. Benzimra, M., Calligaro, G. L., Glanville, A. R. Acute rejection. J Thorac Dis. 9 (12), 5440-5457 (2017).
  43. Roberts, D. M., Jiang, S. H., Chadban, S. J. The treatment of acute antibody-mediated rejection in kidney transplant recipients: A systematic review. Transplantation. 94 (8), 775-783 (2012).
  44. Bickerstaff, A., Nozaki, T., Wang, J. J., et al. An experimental model of acute humoral rejection of renal allografts associated with concomitant cellular rejection. Am J Pathol. 173 (2), 347-357 (2008).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

C4d
צור קשר
המלצה לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

2026 © זכויות יוצרים MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.