פרוטוקול זה מתאר שיטה ניתנת לשחזור להכנת מיקרושומן מעובד מכני מועשר ב-SVF מרקמת שומן אוטולוגית והזרקתו לפגמים טראומטיים ברקמות רכות מסוג חלל לצורך שחזור קליני.
Method Article
פרוטוקול זה מתאר שיטה ניתנת לשחזור להכנת מיקרושומן מעובד מכני מועשר ב-SVF מרקמת שומן אוטולוגית והזרקתו לפגמים טראומטיים ברקמות רכות מסוג חלל לצורך שחזור קליני.
פגמים טראומטיים ברקמות רכות מציבים אתגרים משמעותיים לשיקום עקב אובדן רקמות, פגיעה בכלי דם וקושי בהשגת כיסוי עמיד. רקמת השומן מספקת מקור רקמה אוטולוגי מעשי, ומיקרושומן מועשר בחלקי כלי דם סטרומליים (SVF) מעובד מכנית יכול להיות מוכן במהלך הניתוח ללא עיכול אנזימטי.
מחקר זה מציג פרוטוקול קליני סטנדרטי לאיסוף רקמת שומן אוטולוגית ולעיבודה למיקרושומן מועשר ב-SVF להזרקה למומים טראומטיים מסוג חלל ברקמות רכות. השומן נקטף ידנית מהירך או הבטן תחת לחץ שלילי נמוך, מפורק מכנית על ידי חיתוך ואמולסיפיקציה ממזרק למזרק, מסונן להשגת אחידות במיקרושומן, ומצנטריפוג לבידוד החלק המכיל SVF. המיקרושומן המעובד מוזרק לכל חלל הפצע בתבנית רב-שכבתית. ההערכה לאחר הניתוח כוללת הערכה קלינית סדרתית, תיעוד צילומי, ומדידת הקטנת אזור הפצע עד לאפיתליאליזציה.
בקבוצה קטנה, השיטה הייתה קשורה לכיווץ פצע מתקדם ולאפיתליאליזציה מלאה בתוך כ-4-8 שבועות, ללא סיבוכים משמעותיים. למרות שהרכב התאים והכדאיות לא נמדדו, השיטה סיפקה גישה תוך-ניתוחית אפשרית המתאימה לסביבות ללא גישה לעיבוד אנזימטי או מתקני מעבדה. פרוטוקול זה מציע שיטה מעשית ומינימלית להעברת מיקרושומן מועשר ב-SVF בניהול ליקויים טראומטיים מסוג חלל טראומטי, ויכול לשמש בסיס למחקרים מבוקרים נוספים.
פגמים טראומטיים ברקמות רכות מסוג חלל טראומטי ממשיכים לאתגר שיקום משמעותי, משום שהם משלבים אובדן רקמות, פגיעה ברפוזיה מקומית, וסיכון גבוה לזיהום ולהיווצרות מרחב מת. טכניקות כיסוי קונבנציונליות, כמו שתלי עור בעובי מפוצל או העברות פלפ, מספקות כיסוי עמיד במקרים רבים. עם זאת, הם מוגבלים לעיתים קרובות על ידי תחלואה באתר התורם, מורכבות טכנית ותוצאות משתנות לטווח ארוך, במיוחד במיטות מזוהמות או מצולקות 1,2,3.
רקמת השומן היא מקור שפע ונגיש בקלות לאוכלוסיית תאים הטרוגנית המכונה שבר וסקולרי סטרומלי (SVF). SVF כולל תאי סטרומל מזנכימליים, אבות אנדותליים, פריציטים ואלמנטים תומכים סטרומליים. כאשר נשמר בתוך חלקיקי רקמת השומן, ההקשר החוץ-תאי הטבעי של SVF נשמר במהלך הטיפול וההעברה הקלינית4. קלינית, דווח כי שתלי שומן מועשרים ל-SVF (מיקרושומן מועשר ב-SVF) משפרים את שימור השתל ומקושרים לאפיתל פצע מואץ במגוון אינדיקציות 5,6,7.
קיימות שתי אסטרטגיות עיקריות להשגת SVF מליפוספירה. עיכול אנזימטי בדרך כלל מניב ספירת תאים גרעיניים גבוהה יותר ליחידת נפח, אך דורש מגיבים ייעודיים, תשתית מעבדתית, זמני עיבוד ארוכים יותר, וכפוף למגבלות רגולטוריות ברובתחומי השיפוט. לעומת זאת, שיטות עיבוד מכניות כוללות חיתוך, אמולסיפיקציה ממזרק למזרק, סינון ושימוש במכשירים מכניים במערכת סגורה. גישות אלו מאפשרות הכנה מהירה תוך ניתוחית של מיקרושומן מועשר ב-SVF עם מינימום מניפולציה וזמני תגובה קצריםיותר 6,9,10,11. מערכות מכניות עדכניות דיווחו על זמני עיבוד <15 דקות ותפוקות המתקרבות לאלו של שיטות אנזימטיות בסדרות מסוימות, אם כי מספר התאים הנמדד והכדאיות משתנים בין מכשיר למפעיל9.
למרות הספרות המתרחבת על SVF מעובד מכני ועל השתלת שומן לכיבים כרוניים ומחלות כף רגל סוכרתית, פרוטוקולים סטנדרטיים וניתנים לשחזור המיועדים במיוחד למומים טראומטיים ברקמות רכות מסוג חור הם נדירים. דוחות קליניים שפורסמו עוסקים בדרך כלל בכיבים כרוניים, פצעים סוכרתיים או השתלת שומן אסתטית. עם זאת, רק מעטים מספקים פרוטוקול שלב תוך הניתוח שמפרט פרמטרי קציר, נקודות קצה אמולסיפיקציה, גודל נקבוביות סינון, כוח צנטריפוגציה (× גרם), מינון לפי אזור פצע וקריטריוני מוכנות לפצע להזרקה בסביבות טראומה 7,13.
לכן, הנחיית יישום מעשית חשובה לצוותים כירורגיים השוקלים גישה זו. בהתבסס על הספרות הזמינה וניסיוננו הניתוחי, נפחי שאיפה תוך-ניתוחיים טיפוסיים לחלל יחיד הם ~20-40 מ"ל. נפח זה בדרך כלל מניב מספיק מיקרושומן מעובד כדי למלא חללים קטנים עד בינוניים. לעומת זאת, שחזורים בנפח גדול ככל הנראה חורגים מהיקף העיבוד המכני בנקודת הטיפול ועלולים לדרוש פרוצדורות מדורגות או אסטרטגיות חלופיות 9,12. גישות מכניות ל-SVF פחות מתאימות לפצעים מזוהמים באופן חמור עד שהזיהום נשלט; במקרים כאלה, דברידמנט משלים וניהול זיהום (כולל אנטיביוטיקה ממוקדת וכאשר מתאים טיפול בפצע בלחץ שלילי) צריכים לקדם את השתלת7.
העבודה הנוכחית שואפת לספק פרוטוקול תוך ניתוחי מפורט וניתן לשחזור להכנת מיקרושומן מועשר ב-SVF באמצעות עיבוד מכני ולהזרקת מוצר זה לפגמים טראומטיים ברקמות רכות מסוג חלל. הפרוטוקול מדגיש פרמטרים תפעוליים מפורשים (קציר, רסס ואמולסיפיקציה מכנית, סינון, צנטריפוגציה המובעת כ-× g, טכניקת הזרקה ומדידת שטח פצע אובייקטיבי) כדי שצוותים כירורגיים אחרים יוכלו לאמץ ולאמת את השיטה בסביבותיהם.
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
כל ההליכים אושרו על ידי ועדת האתיקה המוסדית (אישור מס' KL-2025062) ובוצעה בהתאם להצהרת הלסינקי. התקבלה הסכמה מדעת בכתב מכל המטופלים לפני ההשתתפות.
1. בחירת מטופלים והערכה טרום-ניתוחית
2. הכנה לפני הניתוח
3. איסוף שומן
4. עיבוד מכני של מיקרושומן מועשר ב-SVF
5. הזרקה לאתר הפגם
6. טיפול לאחר הניתוח ומעקב
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
בסך הכל שמונה מטופלים עם מומים טראומטיים ברקמות רכות מסוג חלל טופלו באמצעות הפרוטוקול המתואר.
מאפייני הקוהורטה
הקבוצה כללה חמישה גברים ושלוש נקבות, עם גיל ממוצע של 51.5 ±-11.7 שנים (טווח: 38-74 שנים). פגמים נמצאו בגפה התחתונה (n = 5), בגפה העליונה (n = 2) ובגזע (n = 1). קוטר הפצע המקסימלי הממוצע היה 4.3 ± 1.0 ס"מ, עם ע...
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
מחקר זה מתאר פרוטוקול קליני ישים וניתן לשחזור לעיבוד מכני והשתלה של שומן מיקרו מועשר ב-SVF בניהול פגמים טראומטיים מסוג חלל רכות טראומטי. הפרוטוקול מיועד ליישום בנקודת טיפול במסגרת חדר ניתוח סטנדרטי ומעדיף פשטות, בטיחות וכדאיות פרוצדורלית על פני אפיון ביולוגי. בסדרה קלינית קטנה זו, כל הפגמים שטופלו הראו סגירת פצעים הדרגתית והשיגו אפיתליאליזציה מלאה בתוך 12 שבועות, ללא סיבוכים משמעותיים הקשורים להליך, מה שתומך בהיתכנות גישה זו בפרקטיקה קלינית. בהתאם לכך, פרשנויות מכניות מוגבלות במכוון לאסו...
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
למחברים אין ניגודי עניינים להצהיר עליהם.
מחקר זה נתמך על ידי תוכנית החדשנות האזורית האזורית של חוביי לשיתוף פעולה בינלאומי במדע וטכנולוגיה (מענק מס' 2023EHA043) ומהמחלקה לטראומה ואורתופדיה מיקרו, בית החולים ג'ונגנאן של אוניברסיטת ווהאן, הפרויקט הלאומי המרכזי למחקר קליני לשנת 2025 (פרויקט מס' 2025LCYJZX-ZD003). המחברים מודים בכנות לד"ר צ'י באיוון על עבודתו הקודמת שהיוותה השראה למחקר זה ועל מתן הדרכה חשובה במתודולוגיה קלינית. אנו גם מודים לצוותי הסיעוד והכירורגיה של בית החולים ג'ונגנאן על סיועו בטיפול במטופלים ובמעקב.
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
| Name | Company | Catalog Number | Comments |
|---|---|---|---|
| 0.9% סליין רגיל | Baxter Healthcare (או מקביל) | מגוון | משמש כתמיסה בסיסית לתמיסת תפוחה |
| קנולה בהזרקה עם קצה קהה (22 גרם & 50 מ"מ) | CONPUVON ( ;), סין | DZ 22× 50-C5 | משמש להזרקה רב-שכבתית של מיקרושומן מועשר ב-SVF |
| צנטריפוגה | ביוטכנולוגיה ותיקה ( ), סין | LTA-1600 | צנטריפוגה קלינית המסוגלת לייצר כ-400 פעמים; g |
| מצלמה דיגיטלית / סמארטפון | כל | לא זמין | צילום פצעים סטנדרטי במהלך מעקב |
| אפינפרין | בית מרקחת בית חולים מקומי | מגוון | מוסיפים למי מלח כדי להגיע לריכוז סופי של 1:500,000 |
| תוכנת ImageJ (גרסה 1.53 ומעלה) | המכונים הלאומיים לבריאות (ארה"ב) | תוכנה חופשית | משמש למדידת שטח פצע פלנימטרי |
| קנולה לשאיבת שומן (2– 3 מ"מ) | ספק רפואי סטנדרטי | לא זמין | משמש לקצירת רקמת שומן מאתר התורם |
| מחבר לואר-לוק (נקבה לנקבה) | בקטון דיקינסון (או מקביל) | מגוון | משמש לאמולסיפיקציה מכנית ממזרק למזרק |
| מזרק Luer-lock (1, 5, 10, 20 מ"ל) | הונגדה מדיקל דיווייקס ( ), סין | לא צויין (אספקה מוסדית) | משמש לשאיבה, עיבוד מכני והזרקה |
| תחבושת סטרילית / תחבושת | בית המרקחת של בית החולים | לא זמין | לכיסוי פצעים לאחר הניתוח |
| מספריים כירורגיים (סטריליים) | חברת גואנגג'ואו בייטאנג למכשירים רפואיים בע"מ. | BT00301 (או מודל מייצג דומה) | משמש לפיצול מכני של רקמת שומן |
| גזה וזלין (10 ס"מ ופעמים; 10 ס"מ) | חברת Huaxi Medical Dressing Co., Ltd. ( ), סין | לא צויין (אספקה מוסדית) | תחבושת לא דביקה המשמשת לטיפול בפצעים לאחר הניתוח |
Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.
Request permission to reuse the text or figures of this JoVE article
Request Permission
;), סין
), סין
), סין
), סין