הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר מחקר

פקטור גדילה של הפטוציטציטים בסרום לפני ניתוח וציון פרוגנוסטי דלקתי כסמנים פרוגנוסטיים בקרצינומה של תאי קשקש בפה

102 צפיות

⸱

DOI:

10.3791/70257

⸱

3 באפריל 2026

 , 
1Department of Stomatology, Wuxi Second People's Hospital, Jiangnan University Medical Center, 2Department of Stomatology, Mental Health Center of Jiangnan University, Wuxi Central Rehabilitation Hospital

במאמר זה

סיכום

מחקר זה נועד לבחון את הקשר הפוטנציאלי בין גורם גדילה של צירי כבד בסרום לפני הניתוח (HGF) לבין ציון פרוגנוסטי דלקתי חקרני ראשוני (IBPS) לבין הישרדות כוללת לאחר ניתוח (OS) והישרדות ללא מחלות (DFS) אצל חולים עם קרצינומה של תאי קשקש בפה.

תקציר

קרצינומה של תאי קשקש אוראליים (OSCC) היא ממאירות אגרסיבית המשפיעה על פרוגנוזה ואיכות החיים של המטופל. זיהוי אינדיקטורים פרוגנוסטיים מתאימים עשוי לסייע בשיפור קבלת ההחלטות הקליניות. מחקר זה נועד להעריך את הקשר בין גורם גדילה של הפטוציטציטים בסרום (HGF) וציון פרוגנוסטי דלקתי (IBPS) לפני הניתוח לבין תוצאות פתולוגיות לאחר ניתוח אצל מטופלים עם ה-OSCC. בסך הכל נרשמו 158 נבדקים במחקר רטרוספקטיבי זה (2020–2022), כולל 79 מקרים בקבוצת A (קבוצת ביקורת בריאה) ו-79 מקרים בקבוצת B (קבוצת OSCC). נמדדו HGF בסרום וסמנים דלקתיים, וחושב IBPS. בוצעו ניתוחים השוואתיים בין קבוצות A ו-B, וניתוחים פרוגנוסטיים בוצעו בתוך קבוצת B. רגרסיה לוגיסטית שימשה לבחינת גורמים נלווים, בעוד שבוצעו ניתוחי הישרדות ומאפייני תפעול מקלט (ROC) להערכת ביצועים פרוגנוסטיים. מאפייני הבסיס היו ניתנים להשוואה בין שתי הקבוצות (P > 0.05). רמות HGF ו-IBPS היו גבוהות משמעותית בקבוצת B מאשר בקבוצת A (P < 0.05). בקבוצת B, HGF ו-IBPS גבוהים היו קשורים לתחזית גרועה יותר (HGF OR = 2.010, רווח בר-סמך 95%: 1.046–3.863; IBPS OR = 2.603, רווח בר-סמך 95%: 1.316–5.148, P < 0.05) ותוצאות פתולוגיות שליליות לאחר ניתוח. השילוב של HGF ו-IBPS הראה שיפור ביכולת ההבחנה לחיזוי פרוגנוסטי (AUC = 0.776, P < 0.001). HGF ו-IBPS לפני הניתוח הם חריגים אצל מטופלי OSCC וקשורים לתוצאות פתולוגיות לאחר ניתוח לאחר מעקב של 20 חודשים. תצפיות אלו עשויות לתמוך בחקירות נוספות על סטרטיפיקציה של סיכונים לפני ניתוח ומעקב קליני עבור מטופלים עם OSCC.

מבוא

קרצינומה של תאי קשקש בפה (OSCC) היא גידול ממאיר נפוץ בראש ובצוואר, שמקורו בתאי האפיתל של הרירית הפה. OSCC תורם לעומס מחלות משמעותי ברחבי העולם, ומהווה איום על בריאות האדם. לפי הסטטיסטיקות הרלוונטיות, מספר המקרים החדשים של OSCC שאובחנו ממשיך לגדול מדי שנה, והשכיחות שלו מראה הבדלים גאוגרפיים ואוכלוסייתייםמסוימים 1. מנקודת מבט פתולוגית, OSCC הוא תהליך רב-גורמי, רב-שלבי ומורכב. מחקרים רבים הראו כי הרגלי אורח חיים לקויים לטווח ארוך, כגון עישון, שימוש לרעה באלכוהול וזיהום בנגיף הפפילומה האנושי, הם גורמי סיכון גבוהים להשראת ה-OSCC. גורמים אלו עלולים להוביל למוטציות בגנים של תאי אפיתל רירית הפה, להפריע לוויסות התקין של התרבות תאים, התמיינות ואפופטוזיס, ולבסוף להוביל להתפתחות תאי סרטן. בתהליך התפתחות הגידול, תאי סרטן יפלשו באופן מתמיד לרקמות ולאיברים הסובבים, ובמקביל מתרחשת גרורות מרוחקות דרך כלי לימפה וכלי דם, מה שמשפיע קשות על הפרוגנוזה של מטופלים 2,3.

מבחינת מאפיינים קליניים, התסמינים המוקדמים של חולי OSCC נוטים להיות ערמומיים יותר ועשויים להופיע רק ככיבים מקומיים, גושים קשים או גושים ברירית הפה, שקל להתעלם מהם על ידי מטופלים4. ככל שהמחלה מתקדמת, המטופלים עלולים לפתח תסמינים כמו כאב, דימום, דיספגיה והפרעות דיבור, המשפיעות קשות על איכות חייהם. כאשר המחלה מתקדמת לשלב מתקדם, הגידול עלול לפלוש למבנים חשובים כמו עצם הלסת ובלוטות הלימפה בצוואר, מה שמוביל להשלכות חמורות כמו עיוותים בפנים ובלוטות לימפה מוגדלות בצוואר. כריתה כירורגית היא כיום אחד מעמודי התווך של הטיפול ב-OSCC. עם זאת, למרות היכולת של הניתוח להסיר רקמת גידול הנראית לעין, חלק משמעותי מהמטופלים עדיין חווים הישנות וגרורות לאחר הניתוח. מחקרים הראו ששיעור ההישרדות של מטופלי OSCC לאחר ניתוח במשך 5 שנים הוא רק כ-60%, ויותר ממחציתם יחזרו לפעול תוך שנתייםלאחר הטיפול הכירורגי הראשון. הישנות גידול וגרורות לא רק מגבירים את הקושי בטיפול הבא, אלא גם מפחיתים מאוד את סיכויי ההישרדות של המטופלים. בנוסף, ניתוח מביא סדרה של טראומות פיזיולוגיות ונפשיות למטופלים, כגון שינויים במראה הפנים ופגיעה בתפקודי הלעיסה והבליעה, המשפיעים קשותעל איכות חייהם לאחר הניתוח. לכן, הערכה מדויקת וחזויה של תוצאות פתולוגיות לאחר ניתוח אצל מטופלי OSCC היא קריטית לפיתוח תוכניות טיפול מותאמות אישית ולשיפור הישרדותם ואיכות חייהם של המטופלים.

למרות השימוש הנרחב בשלבים קליניים-פתולוגיים, פרמטרים קונבנציונליים לעיתים קרובות אינם מצליחים למיין כראוי את הסיכון לאחר הניתוח אצל מטופלים בודדים. סמנים או יחסים דלקתיים בודדים כגון NLR, PLR ו-LMR נמצאים בשימוש נרחב, אך חסרים מידע פרוגנוסטי משולב, וביצועיהם נותרים לא עקביים בין קבוצות. באופן דומה, סמנים ביולוגיים בסרום המשמשים בבידוד מספקים לעיתים קרובות דיוק חיזוי מוגבל8. עד כה, מעט מחקרים שילבו HGF בסרום עם ציון דלקתי מקיף כדי לשפר את הסטרטיפיקציה של הסיכון לפני הניתוח ב-OSCC. זהו פער ידע חשוב שהמחקר הנוכחי שואף לטפל בו9.

פקטור גדילה של הפטוציטאים (HGF) הוא גליקופרוטאין המורכב מ-728 שאריות חומצות אמינו, ומבנהו המולקולרי מכיל שרשראות α ו-β המקושרות בקשרי דיסולפיד ליצירת הטרודימר10. כציטוקין רב-תכליתי, HGF מופרש בעיקר על ידי תאי סטרומל מזנכימליים בתנאים פיזיולוגיים ומפעיל מסלולי איתות מרובים, כגון PI3K/AKT, על ידי קישור לקולטני c-Met על פני תאי המטרה, ובכך ממלא תפקיד חשוב בהתרבות תאים, נדידה, פלישה ואנגיוגנזה11. בשנים האחרונות, יותר ויותר מחקרים מתמקדים במנגנון תפקידו של HGF ביצירת גידולים והתפתחותם. ב-OSCC, רמות HGF בסרום לפני הניתוח קשורות קשר הדוק לתחזית המטופל. מחקרים רלוונטיים הראו שרמות HGF בסרום לפני ניתוח אצל חולי OSCC גבוהות משמעותית מאלו שבאוכלוסייה בריאה, ורמות ה-HGF עולות בהדרגה עם התקדמות הגידול12. נמצא כי חולי סרטן עם רמות גבוהות של HGF בסרום היו גם בסיכון מוגבר משמעותית להישנות ולגרורות לאחר הניתוח. ייתכן שזה נובע מהעובדה ש-HGF מקדם התפשטות, נדידה ויכולת פולשין של תאי סרטן, וכן מעורר אנגיוגנזה של גידול, המספקת את החומרים המזינים והחמצן הדרושים לצמיחת הגידול ולגרורות13,14. לכן, רמות HGF בסרום לפני הניתוח צפויות לשמש כמדד חשוב לתוצאות פתולוגיות לאחר ניתוח אצל מטופלי OSCC.

דלקת משחקת תפקיד חשוב בהתפתחות גידולים, התקדמות וגרורות. ציון הפרוגנוסטי של הדלקת (IBPS) הוא הערכה מקיפה של מצב הדלקת של הגוף, המנבא את התחזית של מטופלי גידול על ידי שילוב גורמים רבים הקשורים לדלקת או ספירת תאים. נכון להיום, רכיבי הניקוד הספציפיים של IBPS אינם סטנדרטיים במלואם, ואינדיקטורים דלקתיים נפוצים כוללים ספירות נויטרופילים, לימפוציטים, טסיות ומונוציטים ויחסים נגזרים שלהם, כגון יחס נויטרופילים-לימפוציטים (NLR), יחס טסיות-לימפוציטים (PLR) ויחס לימפוציטים-מונוציטים (LMR)16. מחקרים הראו כי יש חדירה גדולה של תאים דלקתיים למיקרו-סביבת הגידול של חולי OSCC, ותאים דלקתיים אלו מפרישים ציטוקינים וכמוקינים שמקדמים התפשטות, נדידה ופלישה של תאי גידול. במקביל, דלקת יכולה גם לגרום לאנגיוגנזה של הגידול, ולספק את התנאים הנדרשים לצמיחת הגידול. על ידי ניתוח אינדיקטורים לדלקת דם היקפית אצל חולי OSCC, נמצא כי מטופלים עם IBPS גבוה יותר היו גם בסיכון גבוה יותר להישנות ולגרורות לאחר ניתוח, והישרדות כוללת קצרה משמעותית. אינדיקטורים הקשורים לדלקת כמו NLR, PLR ו-LMR, לדוגמה, הוכחו כקשורים קשר הדוק לתחזית של מטופלי OSCC. רמות NLR ו-PLR גבוהות בדרך כלל מצביעות על כך שלמטופלים יש פרוגנוזה פחות טובה, בעוד שרמות LMR גבוהות קשורות לתחזית טובהיותר 17. לכן, IBPS יכול לשמש כמדד פוטנציאלי להערכת תוצאות פתולוגיות לאחר ניתוח אצל מטופלי OSCC, ולספק נקודת ייחוס חשובה להחלטות טיפול קליניות.

בהשוואה לשלבים קליניקופתולוגיים מסורתיים, יחסי דלקת יחידים או סמנים מבודדים בסרום הביולוגי, הפאנל המשולב של HGF ו-IBPS מציע מספר יתרונות פוטנציאליים: הוא זעיר פולשני, חסכוני, זמין באופן שגרתי מבדיקות דם לפני הניתוח, וניתן לקבל אותו לפני התערבות ניתוחית. בניגוד להדמיה או לשלב היסטופתולוגי, אסטרטגיה משולבת זו מאפשרת סיווג סיכון כמותי מוקדם במקום הערכה סובייקטיבית או לאחר ניתוח בלבד18,19. ראוי לציין כי זיהומים מערכתיים, מחלות דלקתיות כרוניות ותרופות מסוימות עלולים לשנות סמנים דלקתיים היקפיים וכך להשפיע על ערכי IBPS20. מודל זה שואף לשכב את הסיכון לפני הניתוח עבור מטופלי OSCC העוברים טיפול כירורגי, אך יש לנקוט זהירות בעת השלכת ממצאים אלו לאוכלוסיות או סביבות קליניות אחרות.

בהתבסס על הרקע לעיל, מטרת המחקר הייתה לחקור את הערך הפרוגנוסטי של רמות HGF בסרום ו-IBPS על תוצאות פתולוגיות לאחר ניתוח של מטופלי OSCC. השענו כי רמות HGF גבוהות בסרום לפני הניתוח ו-IBPS לא תקינות קשורות לתוצאות פתולוגיות גרועות לאחר הניתוח אצל מטופלי OSCC, וכי על ידי זיהוי רמות HGF בסרום לפני הניתוח וחישוב IBPS, ניתן לספק לרופאים מידע פרוגנוסטי מדויק יותר, שיכול להנחות פיתוח תוכניות טיפול מותאמות אישית ולשפר את שיעורי ההישרדות ואיכות החיים של המטופלים. המשמעות החיובית של מחקר זה טמונה בכך: מצד אחד, אם ניתן לאשר שרמות HGF בסרום לפני הניתוח ו-IBPS מחזיקות ערך פרוגנוסטי טוב לתוצאות הפתולוגיות לאחר הניתוח של מטופלי OSCC, הוא יספק לרופאים מדדי הערכה פרוגנוסטיים חדשים, שיסייעו להעריך את מצבם בצורה מקיפה ומדויקת יותר. ולספק בסיס חזק לפיתוח תוכניות טיפול מותאמות אישית. מצד שני, על ידי זיהוי מטופלים בסיכון גבוה בשלב מוקדם, הרופאים יכולים לנקוט צעדים טיפוליים פעילים יותר, כגון חיזוק המעקב לאחר הניתוח וקידום טיפול אדג'ובנטי, ובכך להפחית את הסיכון להישנות ולגרורות ולשפר את הישרדות המטופלים. בנוסף, מחקר זה עשוי לספק רעיונות וכיוונים חדשים למחקר מעמיק על הפתוגנזה והמטרות הטיפוליות של OSCC, עם חשיבות תיאורטית וקלינית חשובה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

המחקר בוצע בהתאם להצהרת הלסינקי ולהנחיות האתיקה של בית החולים, ואושר על ידי בית החולים העממי השני של ווקסי, המרכז הרפואי של אוניברסיטת ג'יאנגנאן והוועדות האתיות (מס' אתיקה 2024-Y-231). כל הדגימות הביולוגיות האנושיות (דם ורידי ואליקווטים בסרום) טופלו בהתאם בקפדנות לתקנות הבטיחות הביולוגית (GB 19489-2008). כל הפעולות בוצעו בארון בטיחות ביו כדי למנוע זיהום דגימות וחשיפה לצוות. השלכת דגימות ביולוגיות משומשות, קצות פיפטות מזוהמים וצינורות מיקרוצנטריפוגה בוצעה בהתאם לתקני ניהול פסולת רפואית: דגימות וחומרים מזוהמים עברו אוטוקלב בטמפרטורה של 121 מעלות צלזיוס למשך 30 דקות, ולאחר מכן הועברו למוסדות מוסמכים לטיפול מרכזי להבטחת בטיחות ביולוגית.

עיצוב מחקר
זה היה מחקר קוהורט רטרוספקטיבי במרכז יחיד שמטרתו לחקור את הערך הפרוגנוסטי של רמות HGF בסרום ו-IBPS על התוצאות הפתולוגיות לאחר ניתוח של מטופלי OSCC. עיצוב המחקר הזה עוקב אחר הנחיות REMARK (המלצות דוח מחקר פרוגנוסטי של סימן גידול). האוכלוסייה שלמדה במחלקת השיניים של בית החולים השני של ווקסי, מרכז הרפואי של אוניברסיטת ג'יאנגנאן, מינואר 2020 עד דצמבר 2022, נבחרה כאוכלוסיית המחקר. נאספו בסך הכל 170 מקרים של מידע, 165 מקרים נכללו לאחר החרבה, 7 מקרים אבדו במהלך תקופת המעקב, ולבסוף 79 מקרים בקבוצת A (קבוצת ביקורת בריאה, אנשים בריאים שאושפזו לבדיקה גופנית באותה תקופה) ו-79 מקרים בקבוצת B (קבוצת OSCC, חולים עם OSCC) נכללו. תרשים הזרימה של מחקר זה מוצג באיור 1. אספנו נבדקים זכאים דרך מערכת הרשומות הרפואיות האלקטרוניות של בית החולים ומאגר המרכז לבדיקה גופנית, ואספו נתונים קליניקופתולוגיים מפורטים של קבוצת A (קבוצת ביקורת בריאה) וקבוצת B (קבוצת OSCC). ביצע מעקב לאחר ניתוח למטופלים מקבוצת B במהלך המחקר כדי לתעד הישנה, גרורות והישרדות. כלל רק קבוצת ביקורת בריאה לזיהוי ביטוי שונה של סמנים דלקתיים בין חולי OSCC לאנשים בריאים, מה שסיפק בסיס רציונלי לקביעת ערך החיתוך עבור IBPS שנבנה בעצמו. הערכנו את הערך הפרוגנוסטי של IBPS ואימתנו אותו בקרב קבוצת המטופלים של OSCC בהתבסס על התוצאות הפתולוגיות שלאחר הניתוח. עיצוב מחקר זה הבטיח את דיוק הנתונים ואת התוקף המדעי של המחקר באמצעות קריטריוני קיבוץ מחמירים, תהליך בדיקות מעבדה סטנדרטי ומנגנון מעקב שיטתי, וסיפק מסגרת מחקר קפדנית לניתוח הערך הפרוגנוסטי של רמות HGF וציוני IBPS בתוצאות הפתולוגיות שלאחר הניתוח של OSCC, שצפויה לספק בסיס מדעי לפיתוח פרוטוקולי הערכה פרוגנוסטיים מותאמים אישית ולטיפול אסטרטגיות במרפאה.

קריטריוני הכללה והחרגה
קריטריוני הכללה: (1) מטופלים שאובחנו עם OSCC21; (2) גיל 40–65; (3) עם מידע קליני מלא; (4) קיבל תוכנית טיפול מקיפה רציפה המבוססת על ניתוח והשלמה על ידי הקרנות סלקטיביות; (5) מטופלים עם ציות טוב ונכונות לשתף פעולה עם תוכנית הטיפול שפותחה במחקר; (6) מצבם הנפשי הכללי של המטופלים טוב, גופם בריא בעיקר, והם יכולים להביע בכנות את תלונותיהם על התסמינים ולענות על שאלות רלוונטיות מאנשי מקצוע בתחום הבריאות; (7) המטופלים ובני משפחותיהם קיבלו הודעה והסכימה, וחתמו על טופס הסכמה מדעת.

קריטריונים להחריג: (1) מטופלים עם גידולים ממאירים משולבים שאינם OSCC; (2) מטופלים עם שילוב של מחלות מערכתיות חמורות או מחלות מערכת חיסון; (3) מטופלים עם תפקוד לקוי של קרישת דם משולבת, או ליקויים תפקודיים חמורים בלב, בכבד או בכליות, מחלות לב קשות או מחלות חמורות יותר; (4) מחלות זיהומיות כרוניות משולבות, בשילוב עם מחלות מין אחרות (כגון עגבת, זיבה וכו'); (5) חריגות משולבות בתפקוד המוח, הלב, הכבד והכליות; (6) מטופלים שהיו מעורבים בניסויים קליניים או מחקרים קליניים; (7) בקשה להפסיק טיפול או לשחרור אוטומטי מסיבות אישיות; (8) מצבים נוספים שלדעת הרופא החוקר אינם צריכים להיכלל; (9) נסיבות נוספות המשפיעות על מדדי תצפית המשך.

שיטת קיבוץ
חילקו את הנבדקים לשתי קבוצות: קבוצה א': קבוצת ביקורת בריאה (n = 79), קבוצת ב': קבוצת OSCC (n = 79).

איסוף מדדים
אספתי את המידע הבסיסי על מטופלים בשתי הקבוצות.

איסוף דגימות
אספנו דגימות דם ורידי בצום (5 מ"ל) מכל המשתתפים מוקדם בבוקר לפני הניתוח ושמרו על טמפרטורת החדר (25 ± 2 מעלות צלזיוס) במהלך ההובלה. עיבדתי את דגימות הדם תוך 30 דקות (1,800 שניות) מהאיסוף. העברתי את סרום הסופרנטנט לאליקווטים של 0.5 מ"ל באמצעות צינורות מיקרוצנטריפוגה פוליפרופילן סטריליים לאחר צנטריפוגה ב-3,000 × גרם למשך 15 דקות בטמפרטורת החדר (25 ± 2 מעלות צלזיוס). הנחתי מיד את כל האליקווטים במקפיא בטמפרטורה נמוכה במיוחד בטמפרטורה נמוכה של -80 מעלות צלזיוס לאחסון ארוך טווח עד לניתוח, והימנעות ממחזורי הקפאה והפשרה חוזרים (לא מותר יותר ממחזור הקפאה והפשרה אחד במידת הצורך).

רמת HGF בסרום
קבעו את ריכוזי ה-HGF בסרום באמצעות ערכת בדיקה מסחרית מקושרת באנזימים (ELISA) לפי הוראות היצרן22. בקצרה, הפשרו דגימות סרום בטמפרטורה של 4°C למשך 30 דקות כדי למנוע דנאטורציה של חלבון, ואז דיללו ביחס של 1:1 עם בופר הדילול שסופק על ידי הערכה. הוסיפו תקנים, בקרות ודגימות סרום מדוללות (100 מיקרוליטר לבאר) ללוח ELISA ודגרו בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס למשך 60 דקות. לאחר שטיפת הצלחת 5 פעמים עם בופר השטיפה שסופק, הוספתי את הנוגדן הראשי ודגרה בטמפרטורה של 37°C למשך 30 דקות נוספות. לאחר סבב שטיפה שני, נוסף המצע הכרומוגני, והתגובה דוגרה בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס בחושך למשך 15 דקות, והתגובה הסתיימה עם תמיסת העצירה. מדדתי את הספיגה ב-450 ננומטר באמצעות קורא ELISA תוך 10 דקות לאחר הסיום. יישמו נהלי בקרת איכות סטנדרטיים לאורך כל הבדיקה, כולל שימוש בכיובים ובקרים שסופקו על ידי הערכה. מקדם השונות התוך-מבחן (CV) היה < 5% וה-CV בין הבדיקות היה < 8%, מה שמאשר ביצועים אנליטיים אמינים.

חישוב IBPS
ניתח את דגימות הסרום באמצעות אנלייזר המטולוגיה אוטומטי XN3000 והתגובות הנלוות23. הפשרתי את דגימות הסרום בטמפרטורה של 4 מעלות צלזיוס למשך 20 דקות והתאזנתי לטמפרטורת החדר (25 ± 2 מעלות צלזיוס) למשך 10 דקות לפני הבדיקה. בדיקות דם שגרתיות בוצעו בטמפרטורה של 25 ± 2 מעלות צלזיוס כדי לקבל את ספירות הלויקוציטים, הנויטרופילים, הלימפוציטים והטסיות, ולאחר מכן חושבו ספירת נויטרופילים/ספירת לימפוציטים (NLR) ו-PLR (ספירת טסיות/לימפוציטים). כיול קבוע של מכשירי הבדיקה בוצע בטמפרטורה של 25 מעלות צלזיוס, כאשר CV בתוך האצווה < 3% ו-CV בין אצווה < 5% למדדי שגרת הדם. השתמשו במבחן אימונוטורבידימטרי למדידת תכולת CRP בסרום באנלייזר הביוכימי האוטומטי. דגימות הסרום הופשרו בטמפרטורה של 4°C למשך 20 דקות והתאזנו ל-37°C למשך 5 דקות לפני גילוי. ביצעתי את הבדיקה בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס עם זמן דגירה של 10 דקות, וניטרנו את התגובה ברציפות ב-546 ננומטר. המכשיר הופעל בהתאם למדריך ההוראות להשלמת המבחן. זיהוי CRP עם CV בתוך אצווה < 4% ו-CV בין אצווה < 6%. הניקוד בוצע לפי סולם IBPS הביתי שלנו. מערכת הניקוד של IBPS מתייחסת לשיטת הבנייה של ציוני פרוגנוזה דלקתית קודמים, ומכוונת את משקלי המדדים בהתבסס על תוצאות טרום-ניסיוניות של מחקר זה. ערך NLR ≤3.0 נקבע כ-0 נקודות, 3.0–5.0 נקודה אחת, >5.0 נקבע כ-2 נקודות. ערכי PLR ≤150 נקבעו כ-0 נקודות, 150–300 נקודה אחת, ו->300 נקבע כ-2 נקודות. תכולת CRP ≤50 מ"ג/ליטר הייתה 0 נקודות, 50–100 מ"ג/ליטר הייתה נקודה אחת, ו->100 מ"ג/ל-L הייתה 2 נקודות. ציון IBPS כולל = ציון CRP + ציון NLR + ציון PLR. קריטריוני סטרטיפיקציה: ≤ 4 נקודות לסיכון בינוני-נמוך, 5–6 נקודות לסיכון גבוה. ערכי החיתוך וקריטריוני הניקוד ל-NLR, PLR ו-CRP נקבעו בהתבסס על ציונים פרוגנוסטיים דלקתיים שפורסמו בעבר בשילוב עם ניתוח נתונים חקרני באוכלוסיית המחקר הנוכחית, ולא באמצעות אופטימיזציה סטטיסטית כמו אינדקס יודן או ניתוח עקומת תכונות תפעולית של מקלט.

ביקורי המשך
במחקר זה נערך מעקב סטנדרטי של 20 חודשים להערכת תוצאות לאחר ניתוח במטופלים. שעת תחילת המעקב הייתה ביום הניתוח עבור מטופלי קבוצת B (קבוצת OSCC), וזמן הסיום היה 31 באוגוסט 2024. אומץ שילוב של מעקב אמבולטורי ומעקב טלפוני. ביצעו בדיקה גופנית והדמיה בכל מעקב לאישור הישנות או גרורות גידול. המדדים הפרוגנוסטיים העיקריים היו הישרדות כוללת (OS) והישרדות ללא מחלות (DFS). OS הוגדר כזמן מיום הניתוח ועד המוות מכל סיבה. DFS הוגדר כזמן מיום הניתוח ועד להישנות, התקדמות או מוות הגידול מסיבות הקשורות לגידול.

חישוב גודל מדגם
מחקר זה השתמש ב-G*Power 3.1.9.7 להערכת גודל המדגם כדי להבהיר את הערך הפרוגנוסטי של רמות HGF ואת ציוני IBPS לתוצאות פתולוגיות לאחר ניתוח בקרב מטופלי OSCC. קבעו רמת בדיקה של α של 0.05 (דו-צדדי), יעילות בדיקה של 85%, ו-AUC של גורם דלקתי צפוי של 0.75, כפי שחושב על ידי התוכנה, ונדרשו 75 מקרים בכל קבוצה כדי לעמוד בדרישות הסטטיסטיות של ניתוח עקומות ROC ורגרסיה רב-גורמית. בהתחשב באי-הוודאויות לגבי פוטנציאל לנשירה ונתונים חסרים, גודל המדגם של מחקר זה נקבע לבסוף כ-79 מקרים לכל קבוצה כדי להבטיח שלמחקר תהיה יעילות סטטיסטית מספקת להסקת מסקנות אמינות.

ניתוח סטטיסטי
השתמשתי בתוכנת SPSS 28.0 לניתוח נתונים. GraphPad Prism 9.0 משמש לציור עקומות הישרדות, בעוד ש-Lucidchart משמש לציור תרשימי זרימה. בדקתי קודם את הנתונים במחקר להתפלגות תקינה. השווה מאפייני בסיס בין קבוצת A לקבוצת B באמצעות מבחן t לדגימות עצמאי לנתוני מדידה ומבחן χ2 לנתוני ספירה. מאפייני קו הבסיס תיארו כספירה [n (%)] ונתוני מדידה (מבוטאים כ-x ± s). מדדים שכללו HGF, NLR, PLR ו-CRP הובאו ל-x ± s, והשוואות בין-קבוצתיות בוצעו גם הן באמצעות מבחן t מדגם עצמאי. ניתוח רגרסיה לוגיסטית בינארית שימש לחקירת הקשר בין רמות HGF, ציוני IBPS ותוצאות פתולוגיות לאחר ניתוח (משתנה תלוי, 1 = שלילי, 0 = חיובי), כאשר מקדמי רגרסיה חיוביים הצביעו על מתאם חיובי בין מדדים לתוצאות שליליות. שיטת קפלן-מאייר שימשה לשרטוט עקומות OS ו-DFS של קבוצת A וקבוצת B, ומבחן ה-log-rank יושם להשוואת ההבדלים הסטטיסטיים בשיעורי ההישרדות בין קבוצות. הערך הפרוגנוסטי של המדדים הנ״ל עבור מטופלי OSCC נותח באמצעות עקומת מאפיין הפעולה של המקלט (ROC) ושטח מתחת לעקומה (AUC) כדי לקבוע את ערך החיתוך האופטימלי, הרגישות והספציפיות. נתוני הספירה הוצגו כ-n (%), וההשוואה בין קבוצת A לקבוצת B נותחה באמצעות מבחן χ2 . כל המבחנים הסטטיסטיים היו דו-צדדיים, ו-P < 0.05 הצביעו על הבדל מובהק סטטיסטית.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

ניתוחים אבחנתיים (קבוצת OSCC לעומת קבוצת ביקורת בריאה)
מידע בסיסי
מחקר זה כלל 79 מטופלים שאובחנו עם OSCC בבית החולים ווקסי, מרכז הרפואי של אוניברסיטת ג'יאנגנאן, בין ינואר 2020 לדצמבר 2022, ו-79 אנשים בריאים שאושפזו לבדיקה גופנית נבחרו גם הם כביקורת. המטרה הייתה לנתח את הערך הפרוגנוסטי של רמות HGF וציוני IBPS על תוצאות פתולוגיות לאחר ניתוח של מטופלי OSCC. התוצאות הראו (טבלה 1) כי אף אחד מההבדלים בכל מאפיין בסיסי בין קבוצות הפרוגנוס...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

OSCC הוא הסוג הנפוץ ביותר של סרטן הפה. המאפיינים הפתולוגיים שלו מוגדרים בעיקר על ידי התמיינות קשקשית של תאי הגידול. בהתבסס על דמיון במורפולוגיה ובמבנה התאים עם תאים קשקשיים תקינים, ניתן לסווג את OSCC לתת-סוגים ממוינים מאוד, מתמיין במידה בינונית ובעלי התמיינות לקויה. תאי סרטן ב-OSCC ממוינים מאוד דומים לתאים קשקשיים רגילים במורפולוגיה ומראים מבנה יחסית סדיר, בעוד שגידולים עם התמיינות לקויה מציגים מורפולוגיה תאית לא תקינה, מבנה לא מסודר ורמת ממאירות גבוהה24. התסמינים...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים מאשרים שאין להם ניגודי עניינים פיננסיים.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
אנלייזר המטולוגיה אוטומטיתאגיד SysmexXN3000RRID: SCR_019145 / בדיקת דם שגרתית (לויקוציטים, נויטרופילים, לימפוציטים, ספירת טסיות)  
ערכת ELISAשנגחאי צ'ינצ'נג ביוטכנולוגיה בע"מQC-HGF-HuRRID: AB_2898765 / מדידת ריכוז HGF בסרום
פריזמת GraphPadGraphPad Software, Inc.9RRID: SCR_002798 / גרפיית עקומת הישרדות
G*Powerהיינריך-היינה-אוניברסיטä t Dü סלדורף3.1.9.7RRID: SCR_013756 / הערכת גודל מדגם
תגובת בדיקה אימונוטורבידימטרית ל-CRPחברת Shanghai Kewa Bioengineering בע"מBH031MRRID: AB_2898766 / מדידת תכולת CRP בסרום
SPSSתאגיד IBM28RRID: SCR_002865 / ניתוח סטטיסטי של נתונים

מקורות

  1. Chamoli, A., et al. Overview of oral cavity squamous cell carcinoma: risk factors, mechanisms, and diagnostics. Oral Oncol. 121, 105451(2021).
  2. Badwelan, M., Muaddi, H., Ahmed, A., Lee, K. T., Tran, S. D. Oral squamous cell carcinoma and concomitant primary tumors: What do we know? A review of the literature. Curr. Oncol. 30 (4), 3721-3734 (2023).
  3. Ren, J. Advances in combination therapy for gastric cancer: integrating targeted agents and immunotherapy. ACPT. 1 (1), 1-15 (2024).
  4. Jagadeesan, D., et al. Comprehensive insights into oral squamous cell carcinoma: diagnosis, pathogenesis, and therapeutic advances. Pathol. Res. Pract. 261, 155489(2024).
  5. Li, C., Dong, X., Li, B. Tumor microenvironment in oral squamous cell carcinoma. Front. Immunol. 15, 1485174(2024).
  6. Vitório, J. G., et al. Metabolic landscape of oral squamous cell carcinoma. Metabolomics. 16 (10), 105(2020).
  7. Yao, C., Chang, E. I., Lai, S. Y. Contemporary approach to locally advanced oral cavity squamous cell carcinoma. Curr Oncol Rep. 21 (11), 99(2019).
  8. Benito-Ramal, E., Egido-Moreno, S., González-Navarro, B., Jané-Salas, E., Roselló-Llabrés, X., López-López, J. Role of selected salivary inflammatory cytokines in the diagnosis and prognosis of oral squamous cell carcinoma. A Systematic Review and Meta-analysis. Med Oral Patol Oral Cir Bucal. 28 (5), e474-e486 (2023).
  9. Yang, Y., et al. et al. association between immunoinflammatory biomarkers NLR, PLR, LMR and nonalcoholic fatty liver disease: a systematic review and meta-analysis. Exp Med. 25, 39(2025).
  10. Gao, Q., et al. Hepatocyte growth factor promotes melanoma metastasis through ubiquitin-specific peptidase 22-mediated integrins upregulation. Cancer Lett. 604, 217196(2024).
  11. Huang, M., et al. C-C motif chemokine ligand 5 confines liver regeneration by down-regulating reparative macrophage-derived hepatocyte growth factor in a forkhead box O 3a-dependent manner. Hepatology. 76 (6), 1706-1722 (2022).
  12. Chu, T. Y., et al. Insulin-like growth factor (IGF) and hepatocyte growth factor (HGF) in follicular fluid cooperatively promote the oncogenesis of high-grade serous carcinoma from fallopian tube epithelial cells: Dissection of the molecular effects. Mol Carcinog. 62 (9), 1417-1427 (2023).
  13. Yu, J., Chen, G. G., Lai, P. B. S. Targeting hepatocyte growth factor/c-mesenchymal-epithelial transition factor axis in hepatocellular carcinoma: Rationale and therapeutic strategies. Med Res Rev. 41 (1), 507-524 (2021).
  14. Jones, G. S., et al. Hepatocyte growth factor pathway expression in breast cancer by race and subtype. BCR. 23 (1), 80(2021).
  15. Nicolau, C., Antunes, N., Paño, B., Sebastia, C. Imaging characterization of renal masses. Medicina. 57 (1), 51(2021).
  16. Liu, Y., et al. A novel and validated inflammation-based prognosis score (IBPS) predicts outcomes in patients with diffuse large B-cell lymphoma. Cancer Manag Res. 15, 651-666 (2023).
  17. Matsuo, M., et al. Inflammation-based prognostic score as a prognostic biomarker in patients with recurrent and/or metastatic head and neck squamous cell carcinoma treated with nivolumab therapy. In vivo. 36 (2), 907-917 (2022).
  18. de Morais, E. F., Mäkitie, A., Coletta, R. D., Almangush, A. Stromal prognostic markers for oral cancer: an update. Oral Diseases. 31 (7), 2019-2025 (2025).
  19. Peng, F., et al. Prognostic significance of plasma hepatocyte growth factor in sepsis. J Intensive Care Med. 37 (3), 352-358 (2022).
  20. Johnkennedy, N., Mercy, O. C. Perspective of inflammation and inflammation markers. Journal La Medihealtico. 3 (1), 16-26 (2022).
  21. de Souza, G. P., et al. Oral basaloid squamous cell carcinoma: A case report with emphasis on histopathological diagnosis criteria. Oral Oncol. 127, 105814(2022).
  22. Wang, D., et al. Lipopolysaccharide-pretreated mesenchymal stem cell-conditioned medium optimized with 10 filter attenuates the injury of H9c2 cardiomyocytes in a model of hypoxia/reoxygenation. Can J Physiol Pharmacol. 100 (7), 651-664 (2022).
  23. Eyiol, A. The relationship of pan-immune-inflammation value (PIV) and HALP score with prognosis in patients with atrial fibrillation. Medicine. 103 (36), e39643(2024).
  24. Zhou, J., et al. Tumor-colonized Streptococcus mutans metabolically reprograms tumor microenvironment and promotes oral squamous cell carcinoma. Microbiome. 12 (1), 193(2024).
  25. Fukushima, H., et al. Extranodal extension and epithelial cell adhesion molecule over-expression in oral squamous cell carcinoma. Anticancer Res. 43 (11), 5155-5166 (2023).
  26. Cao, M., et al. Personalized targeted therapeutic strategies against oral squamous cell carcinoma. An evidence-based review of literature. Int J Nanomedicine. 17, 4293-4306 (2022).
  27. Tan, Y., et al. Oral squamous cell carcinomas: state of the field and emerging directions. Int J Oral Sci. 15 (1), 44(2023).
  28. Pai, P., Kittur, S. K. Hepatocyte growth factor: a novel tumor marker for breast cancer. J Cancer Res Ther. 19 (Supplement), S0(2023).
  29. Cai, M., et al. Overexpression of angiogenic factors and matrix metalloproteinases in the saliva of oral squamous cell carcinoma patients: Potential non-invasive diagnostic and therapeutic biomarkers. BMC Cancer. 22 (1), 530(2022).
  30. Nakazawa, N., et al. Examining the efficacy of nivolumab for gastric cancer focusing on using an inflammation-based prognostic score: a multicenter retrospective study. Anticancer Res. 43 (2), 927-934 (2023).
  31. Goda, H., Adachi, T., Nakashiro, K., Kuribayashi, N., Uchida, D. Abstract LB329: Interleukin6 as a potential prognostic marker and therapeutic target in oral squamous cell carcinoma. Cancer Res. 84 (7), 329(2024).
  32. Kimura, K., Ohnishi, Y., Okamura, T., Tominaga, K., Nakajima, M. Effect of HGF/c-Met pathway in oral squamous cell carcinoma on EMT and metastatic potential. J Osaka Dent Univ. 54 (1), 135-144 (2020).
  33. Sasahira, T., Kurihara-Shimomura, M., Shimojjukoku, Y., Shima, K., Kirita, T. Searching for new molecular targets for oral squamous cell carcinoma with a view to clinical implementation of precision medicine. J Pers Med. 12 (3), 413(2022).
  34. Banna, G. L., et al. Biological rationale for peripheral blood cell–derived inflammatory indices and related prognostic scores in patients with advanced non-small-cell lung cancer. Curr Oncol Rep. 24 (12), 1851-1862 (2022).
  35. Sarkar, S., Kannan, S., Khanna, P., Singh, A. K. Role of platelet to lymphocyte count ratio (PLR), as a prognostic indicator in COVID-19: a systematic review and meta-analysis. J Med Virol. 94 (1), 211-221 (2022).
  36. Huang, L., Li, F., Gu, W., Zhao, W. Clinical value of the serum procalcitonin to albumin ratio in the diagnosis and prognosis of sepsis-associated ARDS patients: a retrospective study. Ann Clin Lab Sci. 53 (6), 946-958 (2023).
  37. Ashrafizadeh, M. Cell death mechanisms in human cancers: molecular pathways, therapy resistance and therapeutic perspective. JCBT. 1 (1), 17-40 (2024).
  38. Kubota, K., et al. Utility of prognostic nutritional index and systemic immune-inflammation index in oral cancer treatment. BMC Cancer. 22 (1), 368(2022).
  39. Mariani, P., et al. Pre-treatment neutrophil-to-lymphocyte ratio is an independent prognostic factor in head and neck squamous cell carcinoma: Meta-analysis and trial sequential analysis. J Oral Pathol Med. 51 (1), 39-51 (2022).
  40. Wu, X., et al. Identification of diagnostic and prognostic signatures derived from preoperative blood parameters for oral squamous cell carcinoma. Ann Transl Med. 9 (15), 1220(2021).
  41. Sekar, D., Selvakumar, S. C., Auxzilia Preethi, K. Therapeutic nature of microRNAs in oral squamous cell carcinoma (OSCC). Oral Oncol. 134, 106106(2022).
  42. Sekar, D. Implications of microRNA-21 and its involvement in the treatment of different type of arthritis. Mol Cell Biochem. 476 (2), 941-947 (2021).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

HGFIBPSROC
צור קשר
המלצה לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

2026 © זכויות יוצרים MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.