סקר חתך משקי בית זה חקר את נוכחות ותפוצת המינים של קרדית אבק הבית בבתים שנבחרו קלינית במחוז אורדו, טורקיה. נאספו דגימות אבק מ-160 משקי בית, ומיני עכבישים זוהו במיקרוסקופ כדי לקבוע את שכיחות הקרדיות הסביבתיות.
הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.
מאמר מחקר
סקר חתך משקי בית זה חקר את נוכחות ותפוצת המינים של קרדית אבק הבית בבתים שנבחרו קלינית במחוז אורדו, טורקיה. נאספו דגימות אבק מ-160 משקי בית, ומיני עכבישים זוהו במיקרוסקופ כדי לקבוע את שכיחות הקרדיות הסביבתיות.
מחקר חתך סביבתי זה חקר את השכיחות והתפוצה המינים של קרדית אבק הבית בדגימות אבק ביתיות שנאספו מבתים של פרטים עם תלונות אלרגיות במחוז אורדו, טורקיה. נאספו דגימות אבק מ-160 משקי בית של אנשים שדיווחו על אסתמה או תלונות אלרגיות אחרות במהלך ביקורים במרפאה אמבולטורית. מצבים אלרגיים התבססו על דיווחים עצמיים של המשתתפים ולא אושרו קלינית. הדגימות נאספו מאזורים שונים בבית, כולל חדרי שינה ומגורים, באמצעות שואב אבק נייד, ונבדקו במיקרוסקופית לפי שיטת ההשקעה בחומצה לקטית. זיהוי המינים בוצע על דגימות חיוביות באמצעות מפתחות מורפולוגיים סטנדרטיים. קרדיות אבק הבית זוהו ב-105 (65.6%) משקי בית, עם זיהויים לאורך כל השנה. המינים המזוהים ביותר היו Dermatophagoides pteronyssinus, Dermatophagoides farinae, Dermatophagoides spp., Cheyletus spp., Chortoglyphus arcuatus, Acarus siro, Glycyphagus domesticus, Oribatida spp., ו-Euroglyphus maynei. ניתוחים סטטיסטיים לא הראו קשר מובהק בין נוכחות קרדית לבין רוב המשתנים הדמוגרפיים, הסביבתיים או הקשורים לדיור; עם זאת, גיל זוהה כגורם הקשור לחיוביות לקרדיות. הממצאים מצביעים על כך שקרדית אבק הבית נפוצה מאוד במשקי בית באזור הים השחור הלח ומדגישים את הרלוונטיות הפוטנציאלית שלהן עבור אנשים עם מצבים אטופיים. מתן מידע מעשי למטופלים ולבני משפחותיהם על אמצעי הדברת קרציות ביתיות יכול לשפר את איכות הסביבה הפנימית ואת ניהול התסמינים.
קרדיות אבק הבית הן פרוקי-רגליים הנפוצים ביישובים אנושיים. בשל גודלם המיקרוסקופי, הם לעיתים קרובות אינם מורגשים ונשארים במרחבי מגורים. אורגניזמים אלה ניזונים בעיקר מחלקיקי עור של אדם ובעלי חיים; נבגים פטרייתיים וחלקיקים אורגניים שונים הם גם הם בין מקורות המזון שלהם. מחזור החיים וצפיפות האוכלוסייה של הקרדיות תלויים בגורמים סביבתיים כגון טמפרטורה, לחות יחסית וזמינות מזון. סביבות פנימיות עם תנאי מיקרו-אקלים מתאימים מעדיפות התרבות קרדית 1,2,3.
חשיבות קרדיות אבק הבית בחשיפה סביבתית הוכרה לראשונה בתחילת המאה ה-20; הקשר בין אורגניזמים אלה לסביבה הפנימית נקבע בשילוב עם תלונות נשימתיות שנצפו בקרב אנשים העובדים בטחנות קמח1. בעקבות תשומת הלב של קוק לרכיבים האלרגניים באבק הבית, וורהורסט ואח' (1967)4 הראו כי קרציות הן המקור הביולוגי העיקרי לאבק הבית, ממצא הנחשב לאבן דרך משמעותית במחקרי חשיפה סביבתית פנימית.
מבין האלרגנים שמקורם בבעלי חיים, זוהו 19 אלרגנים למערכת הנשימה, 28 אלרגנים למזון ו-3 אלרגנים לארס, ונרשם כי מספר האלרגנים המדווחים בספרות עלה עם הזמן5. אנטיגנים שמקורם בקרדית יכולים להצטבר בחומרים ביתיים כמו מיטות, שמיכות, כריות, מצעים, רהיטים מרופדים, שטיחים ומוצרי טקסטיל העשויים מכותנה, צמר, נוצות או סיבים אחרים. אנטיגנים אלו יכולים להשתחרר לסביבה באמצעות חומרים אלו או תנועות מכניות ולהתפשט באוויר. דווח כי חלק מהאנטיגנים בקבוצה II הם בעלי גודל חלקיקים קטן מ-5 מיקרון ולכן יכולים להיות נוכחים בשברהנשימה 6.
לי ואח' (2009)7 דיווחו שמספר מסוים של קרציות יכול לייצר כמות משמעותית של אנטיגן ביום. הודגש כי רמות גבוהות של חשיפה סביבתית, במיוחד בילדות, עשויות להיות חשובות להתפתחות המודעות; זה עשוי להשתנות בהתאם לגורמים אישיים וסביבתיים 8,9,10. עם זאת, מצוין שרוב הקשרים הללו הוערכו על פי רמות החשיפה הסביבתית, ויש להעלות בזהירות מסקנות סיבתיות לגבי תוצאות קליניות.
דווח כי שכיחות מחלות אלרגיות עולה בכ-1% מדי שנה; הוצע כי עלייה זו עשויה להיות קשורה לשינויים בגורמים סביבתיים ולא להתקדמות בשיטות האבחון11. גורמים כמו שינויי אקלים גלובליים, זיהום אוויר, חשיפה מוגברת לאבקנים ועלייה בתדירות אירועי מזג אוויר קיצוניים הוצעו כגורמים אפשריים לחשיפה לאלרגנים סביבתיים12. אסתמה מדווחת כאחת המחלות הכרוניות הנפוצות ביותר בעולם, עם שכיחות נעה בין 1% ל-18% בהתאם לאזור13.
התפוצה והנפוצה של קרדית אבק הבית עשויות להיות מושפעות מגורמים כמו מאפייני אקלים, מבנה מגורים, שיטת הדגימה ותדירות הדגימה, כפי שמודגש בספרות 7,14. עם זאת, מחקרים עם מדגמים גדולים ושיטת דגימה אחת מוגבלים, במיוחד באזורים עם אקלים לח כמו אזור הים השחור. מצב זה מחייב הערכת נוכחות ותפוצה של קרדית אבק הבית ברמה האזורית בהקשר של חשיפה סביבתית.
מטרת המחקר החתך והתיאורי הזה היא לקבוע את השכיחות והתפלגות המינים של קרדית אבק הבית בדגימות אבק הבית שנאספו מבתים במחוז אורדו, שם הטמפרטורה הממוצעת השנתית היא 14.4 מעלות צלזיוס והלחות היחסית נעה בין 60%–90% בחודשי הקיץ, ולהעריך גורמים סביבתיים ודמוגרפיים העלולים להשפיע על נוכחות הקרדית. המחקר משער כי האקלים הלח והמתון של מחוז אורדו יוצר תנאים מיקרו-אקלימיים מתאימים לנוכחות קרדית אבק ביתי, וששכיחות הקרדיות עשויה להשתנות בהתאם לגורמים סביבתיים פנימיים.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
מחקר זה אושר על ידי ועדת האתיקה למחקר קליני של אוניברסיטת אורדו (אישור מס': 09/11/2017–138). המחקר נערך בהתאם להנחיות אתיות מוסדיות ולאומיות רלוונטיות, כולל הצהרת הלסינקי. התקבלה הסכמה מדעת בכתב מכל המשתתפים במחקר. ההסכמה שהושגה מכסה במפורש ביקורי בית ואיסוף דגימות אבק מבתים.
1. עיצוב מחקר
זהו מחקר חתך ותיאורי של שכיחות קרדית אבק הבית שנערך במחוז אורדו, טורקיה. דגימות אבק ביתיות נאספו ממשטחים פנימיים ספציפיים שבהם מצפים להצטברות קרדית. הדגימה בוצעה ממזרנים, חומרי מיטה (כריות ושמיכות), שטיחים ורהיטים מרופדים שנמצאו בחדרי שינה וסלון. האבק נאסף באמצעות שואב אבק נייד, ודגימות מאזורים שונים באותו בית נאספו ליצירת דגימת אבק ביתית מורכבת.
2. חקר את האוכלוסייה והגדרת הקוהורט הקליני
אוכלוסיית המחקר מורכבת מאנשים שביקרו במרפאות אמבולטוריות לאוזן, אף וגרון ורפואה פנימית בבית החולים הפקולטה לרפואה של אוניברסיטת אורדו בשל תלונות אסתמה ו/או אלרגיות. הקריטריונים להכללה של המשתתפים היו בני 18 ומעלה, הסכמה לאיסוף דגימות אבק מסביבת הבית שלהם, והסכמה לענות על השאלון. אנשים שלא הסכימו לביקור בית, לא סיפקו הסכמה בכתב, או שלא ניתן היה לקבל מספיק דגימות אבק ביתיות, הוצאו מהמחקר. האבחנות הקליניות הוערכו על בסיס דיווחים עצמיים של מטופלים וסיבות לביקורים במרפאה אמבולטורית; לא בוצעה בדיקות אימות קליניות או אבחון. כל מטופל הותאם למשק בית, והניתוחים נערכו ברמת משק הבית. מחוז אורדו ממוקם באזור הים השחור המזרחי בטורקיה ומתאפיין באקלים לח וממוזג עם לחות גבוהה לאורך כל השנה, תנאים שעשויים להעדיף את הישרדות והתרבות קרדיות אבק הבית.
3. יחידת דגימה ושיטת דגימה
יחידת הדגימה העיקרית למחקר זה הייתה משק הבית. נאספו מספר דגימות תת-אבק ממיקומים פנימיים שונים בכל בית, עם דגש מיוחד על חדרי שינה ואזורי מגורים. למרות שתתי-הדגימות נאספו בנפרד, הן אוחדו ונותחו כדגימת אבק ביתית מורכבת אחת במעבדה, כדי לייצג את החשיפה הכוללת לקרדית הבית. כדי להעריך צפיפות קרדית, כ-1 גרם אבק מכל דגימה ביתית מורכבת עובדה בשיטת ההשקעה בחומצה לקטית. כל הקרדיות שנצפו בשקופיות מיקרוסקופיות שהוכנו מהדגימה הזו נספרו. מספר הקרדיות הכולל שזוהו הוצג כמספר הקרציות לגרם אבק ביתי.
כל משק בית נמדגם פעם אחת בלבד, ולא בוצעה דגימה חוזרת. דגימות אבק ביתיות נאספו באמצעות שקיות אבק חד-פעמיות שהוקצו לכל אזור דגימה, ובשואב אבק נייד עם כוח יניקה של 1200 ואט. הדגימה בוצעה בקצב סטנדרטי של כ-2 דקות למטררבוע כדי להבטיח עקביות ושחזוריות בכל משקי הבית.
4. נהלי מעבדה וזיהוי קרדית
לאחר שהדגימות הובאו למעבדה, הן נופפו להסרת חלקיקים גסים. הדגימות נבדקו בשיטת השקיעת חומצה לקטית. שיטת המשקעים בחומצה לקטית שימשה לניקוי דגימות אבק על ידי המסה של פסולת אורגנית, הקלה על הפרדה והמחשה של קרציות ואפשרה זיהוי מיקרוסקופי אמין וזיהוי מורפולוגי. גרם אחד של אבק בית נוסף ל-5 מ"ל של 90% חומצה לקטית במבחנות. הצינורות עורבבו בעדינות ודגרו במשך שעה אחת. לאחר הדגירה, דגימות שנאספו הן מהמשטח והן מהתחתית של הנוזל הותקנו בין מחסנית לכיסוי ובדקו תחת מיקרוסקופ קל ב-100×, 200× ו-400× הגדלות15. זיהוי מינים בוצע לאחר מכן על דגימות אבק שבהן זוהו קרדיות.
דגימות שבהן זוהו קרציות הוגדרו כ"חיוביות לקרדית". נוכחות של לפחות קרדית אחת בכל שלב התפתחותי (זחל, נימפה או בוגר) במחסן נחשבה מספיקה כדי שהמחיה תיחשב חיובית לקרדית. לזיהוי מינים בדגימות חיוביות, קרציות שנראו תחת מיקרוסקופ סטריאומיקרוסקופ נאספו באמצעות מחט מזרק אינסולין עם קצה דק לאחר סינון מהסופרנטנט על נייר סינון והורכבו במדיום של הוייר. דגימות מוכנות נבדקו תחת מיקרוסקופ אור לזיהוי מורפולוגי. ניתוחים סטטיסטיים בוצעו באמצעות תוכנות ניתוח סטטיסטי 16,17,18,19,20. הדגימות זוהו לפי מינים, סוג או רמות טקסונומיות גבוהות יותר בהתאם לשלב ההתפתחות ולזמינות תכונות אבחנתיות. מיני דרמטופאגוידס כוללים שלבי זחל, פרוטונימפה ודאויטונימפה שלא ניתן היה לזהות באופן אמין ברמת המין. Oribatida מייצגת קרציות שזוהו ברמת הסדר. זחלים ונימפה לא מזוהים מתייחסים לדגימות לא בוגרות, ואימאגו לא מזוהה לדגימות בוגרות, שלא ניתן היה לסיווג טקסונומית בשל מאפיינים מורפולוגיים לא מספקים או פגומים. המספר הכולל מייצג את הספירה המצטברת של כל הפרטים של הקרדית שזוהו בדגימות חיוביות.
5. יישום סקר והגדרות משתנות
סקר שכלל שאלות על מאפיינים דמוגרפיים, מבנה דיור, גורמים סביבתיים ותלונות אלרגיות נערך למשתתפים. הנתונים הוערכו על בסיס הצהרות המשתתפים ולא אומתו קלינית.
6. ניתוח סטטיסטי
הקשר בין משתנים קטגוריים נבדק באמצעות מבחן חי-ריבוע, והשינוי בצפיפות הקרדיות לפי מאפיינים דמוגרפיים וחיוניים נבדק באמצעות מבחני Mann-Whitney U או Kruskal-Wallis. רגרסיה לוגיסטית בינארית שימשה לבחינת הקשר בין המשתנה התלוי (חיוביות של הקרדית) לבין המשתנים הבלתי תלויים. חושבו יחסי סיכויים (ORs) עם רווחי סמך של 95% (CIs).
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
תפוצת מינים
טקסונים מדווחים ברמת המין או הסוג שבו היה ניתן לזהות מורפולוגית; דגימות שזוהו רק ברמות טקסונומיות גבוהות יותר מצוינות במפורש. במחקר נבדקו דגימות אבק מ-160 משקי בית. זוהו קרדית אבק ב-105 משקי בית, בעוד 55 משקי בית הוערכו כשליליים. ערכי צפיפות העכביש חושבו בהתבסס על מספר הקרדיות הכולל שנצפו בתכשירים מיקרוסקופיים שנאספו מגרם אחד של אבק ביתי.
התפלגות הדגימות לפי טקסונים שזוהו מוצגת בטבלה 1, המסכמת את נוכחות מיני הקרדיות וקבוצות טקסונומיות גבוהות יות...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
טבלה 6 משווה את שכיחות קרדית אבק הבית במדינות ואזורים שונים בטורקיה, יחד עם עיצוב הדגימה, גודל המדגם ומאפייני האקלים. כאשר נבדקים מחקרים, נמצא כי שכיחות הקרדיות בדרך כלל גבוהה יותר באזורים עם אקלים חם ולח; במיוחד, שיעורי החיוביות הגיעו ל-100% במחקרים שבהם נאספו דגימות במרווחים קבועים מאותם מגורים. לעומת זאת, שיעורי השכיחות היו נמוכים יותר במחקרים שהשתמשו בשיטת דגימה אחת ובגודל מדגם גדול יותר. ממצאים אלו מצביעים על כך שבנוסף לגורמים אקלימיים, תדירות הדגימה, השיטה וגודל המ...
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
אין ניגוד עניינים בין המחברים. המחקר הוצג כפוסטר בקונגרס ה-21 לפרזיטולוגיה, שהתקיים באיזמיר בין 28 בספטמבר ל-3 באוקטובר 2019.
עבודה זו נתמכה על ידי יחידת תיאום פרויקטי מחקר מדעי של אוניברסיטת אורדו במסגרת מענק AR-1505.
הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.
| שם | חברה | מספר קטלוג | הערות |
|---|---|---|---|
| שואב אבק נייד (1200 וואט) | ארסליק | S 7564 | משמש לאיסוף אבק ביתי |
| שקיות אבק חד-פעמיות | ארסליק | תואם ל-S 7564 | לשימוש חד-פעמי לכל משק בית |
| מסננת (רשת עדינה) | מעבדת הבידוד | 092.01.001 | הסרת חלקיקים גסים |
| מבחנות (15 מ"ל) | מעבדת הבידוד | 077.01.015 | למשקעים בחומצה לקטית |
| חומצה לקטית (90%) | מרק | 100135 | הבהרת אבק |
| מיקרוסקופ אור | אולימפוס | CX43 | × 100, & 200, & הגדלות של 400 |
| מיקרוסקופ סטריאו | אולימפוס | SZ61 | אוסף קרציות נראות לעין |
| שקופיות מיקרוסקופ | מעבדת הבידוד | 064.01.001 | הכנת דוגמאות |
| החלקות כיסוי | מעבדת הבידוד | 064.02.001 | הכנת דוגמאות |
| הוייר' מדיום s | סיגמא-אלדריץ' | H3147 | מדיום התקנה לקרדיות |
| קצות מזרקים (PP) | אפנדורף | 30000813 | העברת קרדית |
| נייר פילטר | ווטמן | דרגה 1 | סינון של סופרנטנט |
| RPMI-1640 בינוני | גיבקו | 11875-093 | התפשטות טפילים |
| תוכנת ניתוח סטטיסטי | IBM | SPSS v22.0 | ניתוח נתונים |