הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

הקמת מודל עכברי לפיברוזיס כלייתי באמצעות פגיעה חד-צדדית-ריפרפוזיה איסכמיה ונפרקטומיה נגדית מאוחרת

384 צפיות

⸱

DOI:

10.3791/70598

⸱

22 במאי 2026

 ,  ,  ,  ,  , 
1Department of Pulmonary and Critical Care Medicine, Guangzhou Chest Hospital, Institute of Tuberculosis, Guangzhou Medical University, 2Department of Urology, The First Affiliated Hospital of Shandong First Medical University & Shandong Provincial Qianfoshan Hospital, 3Department of Transplantation, Nanfang Hospital, Southern Medical University

* These authors contributed equally

במאמר זה

סיכום

כאן מוצג פרוטוקול לקביעת מודל עכבר של פיברוזיס כלייתי באמצעות פגיעה חד-צדדית באיסכמיה-ריפרפוזיה ואחריה נפרקטומיה נגדית מאוחרת. אסטרטגיה זו מאפשרת מחקרים לאורך זמן של המעבר מ-AKI ל-CKD והערכה מדויקת של תפקוד הכליות השארי בנקודת הסיום.

תקציר

פגיעת איסכמיה-רפווזיה כלייתית (IRI) תורמת לפגיעה חריפה בכליה (AKI) ומהווה גורם מרכזי להתקדמות למחלת כליות כרונית (CKD). מודל בעלי חיים שניתן לשחזור הוא הכרחי כדי להקל על הערכת מנגנוני תיקון לא מסתגל ופיברוזיס. כאן מדווח מודל עכבר סטנדרטי של פיברוזיס כלייתי, שנקבע על ידי פגיעת איסכמיה-רפוזייה חד-צדדית (uIRI), ואחריה נפרקטומיה נגדית (CNx). אסטרטגיה זו מבטיחה הישרדות ארוכת טווח של בעלי חיים במהלך התקדמות המחלה, תוך מתן הערכה מדויקת של תפקוד הכליה השארי של הכליה הפגועה בזמן הקציר. עכברים זכרים מסוג C57BL/6 עברו איסכמיה חמה במשך 28 דקות בטמפרטורה של 37 מעלות צלזיוס, ובוצעה בדיקת CNx 24 שעות לפני כל נקודת סיום מחקר. עכברים הוקרבו להערכות היסטולוגיות ואימונוהיסטוכימיות בנקודות זמן הבאות: 2 ימים, 5 ימים, שבוע אחד, שבועיים, 3 שבועות ו-4 שבועות לאחר IRI. בימים 2 ו-5 לאחר הניתוח, הכליות הראו בעיקר נקרוזיס צינורית, במיוחד בצומת הקורטיקומדולר, ללא עדות לפיברוזיס אינטרסטיאלי. החל משבוע לאחר הניתוח, תכונות פתולוגיות אלו הוחלפו בחדירת תאים דלקתיים ואטרופיה צינורית מוקדמת; פיברוזיס בין-תחנות הופיעה גם היא והגיעה לשיא חומרתה בשבוע השני. בשבועות השלישי והרביעי לאחר הניתוח, הכליות הראו ניוון צינורות נרחב התואם לניוון חוסר שימוש. ראוי לציין כי הפיברוזיס הבין-תאי הופחת בהשוואה לשבוע השני, מה שמעיד על התקדמות לשלב הצלקת ההיפותאלי השקט. מודל זה משחזר ביעילות את התרחישים הקליניים של המעבר מ-AKI ל-CKD ומספק פלטפורמה אמינה לחקר מנגנונים פיברוטיים ולסקר התערבויות טיפוליות.

מבוא

פגיעת איסכמיה-ריפרפוזיה (IRI) היא אחד הגורמים הקריטיים המובילים לפגיעה חריפה בכליה (AKI) במסגרת קלינית1. הסיבות הנפוצות כוללות השתלת כליה (הכוללת איסכמיה קרה וחמה ואחריה רפרפוזיה של כליית התורם), ניתוחים קרדיווסקולריים או כלייתיים הדורשים סתימה זמנית של כלי דם, ומצבי היפופרפוזיה מערכתית הנגרמים מטראומה חמורה, דימום חמור או ספסיס2.

הפתופיזיולוגיה של IRI כוללת תהליך דו-פאזי מורכב. בתחילה, בשלב האיסכמי, הפסקת אספקת החמצן והחומרים המזינים מובילה להפרעה מטבולית, דלדול ATP והפרעה תאי שלד תאי אפיתל צינורית בכליה (TECs)3. בהמשך, שיקום זרימת הדם במהלך הרפוזיה, אף שהוא הכרחי להצלת הרקמה האיסכמית, מפעיל "פגיעה משנית" מורכבת יותר. 4 שלב זה של הפציעה מונע על ידי שרשרת אירועים, כולל לחץ חמצוני כתוצאה מהתפרצות של מיני חמצן תגובתי (ROS), תפקוד לקוי של האנדותל, חדירה המונית של תאים דלקתיים (כגון נויטרופילים ומאקרופאגים), והפעלת מערכת המשלים3. מפלים מורכבים אלו מחמירים יחד את האפופטוזיס והנמק של TECs, ומהווים את ההופעה הפתולוגית הראשית של AKI.

ראוי לציין ש-IRI אינו מוגבל לנזק חריף והפיך. ראיות משמעותיות מצביעות על כך שתיקון לא שלם או לא מסתגל לאחר IRI כלייתי הוא מנגנון מרכזי המניע את המעבר לפתולוגיה כרונית ארוכת טווח. בתנאים פיזיולוגיים, הכליה מתחילה תוכנית תיקון לאחר AKI, שמנקה תאים פגועים ומקדמת התרבות והבחנה של TECs ששרדו כדי לשקם את מבנה ותפקוד הצינורות הפגועים. עם זאת, לאחר פגיעה חמורה או חוזרת ב-IRI, תהליך התיקון עלול להפוך לבלתי מוסד, מה שמוביל בסופו של דבר לניוון צינורית, פיברוזיס בין-כלייתי, ולהאיץ את התפתחות והתקדמות מחלת כליות כרונית (CKD)5,6.

לכן, הבהרת מנגנוני המעבר מ-AKI ל-CKD ופיתוח התערבויות טיפוליות הם צרכים דחופים. מודלים של מכרסמים, במיוחד מודלים של עכברים, הפכו לכלים חיוניים וחיוניים לחקר פיברוזיס לאחר IRI בשל הרקע הגנטי המוגדר היטב והדמיון שלהם להתפתחות מחלות בבני אדם. עם זאת, קיימת הטרוגניות משמעותית במתודולוגיות IRI הנוכחיות (למשל, משך האיסכמיה, בקרת טמפרטורה, פציעה חד-צדדית לעומת דו-צדדית), מה שמוביל לשחזור ירוד ולהגבלת השוואות בין מחקרים7.

כדי להתמודד עם אתגרים אלו, המחקר הנוכחי מפרט פרוטוקול סטנדרטי למודל פציעת איסכמיה-ריפרפוזיה חד-צדדית מותאם (uIRI). כמו כן, פרוטוקול זה כולל ניתוח נפרקטומיה נגדית (CNx) שבוצעה 24 שעות לפני סיום המחקר. אסטרטגיה זו מתגברת על התמותה הגבוהה הקשורה לאיסכמיה דו-צדדית ומאפשרת הערכה מדויקת של תפקוד הכליה השארי וההתקדמות הפיברוטית בכליה הפגועה. מודל זה מסכם במדויק את המעבר הדינמי מ-AKI ל-CKD, ומספק פלטפורמה חזקה בחיים לחקירה מכנית וסינון טיפולי.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

כל הניסויים בבעלי חיים נערכו בהתאם לתקנות לניהול עניינים הנוגעים לבעלי חיים ניסיוניים. הפרוטוקול הניסויי אושר על ידי ועדת הטיפול והשימוש בבעלי חיים מוסדיים (IACUC) של חברת Guangzhou Jennio Biotech בע"מ (אישור מס' JENNIO-IACUC-2025-A053). כל ההליכים בוצעו בהתאם להדרכה לטיפול ושימוש בבעלי חיים במעבדה ולהנחיות המוסדיות, תוך שמירה מלאה על עקרונות 3R. ציר הזמן של המחקר, כולל נקודות ההקרבה ואיסוף הדגימות, מסוכם באיור 1.

1. הכנת בעלי חיים וכלים

  1. השתמשו בעכברים זכרים מסוג C57BL/6 (בני 8 שבועות, במשקל 20–25 גרם) המאוחסנים במתקנים ייחודיים ללא פתוגנים (SPF) לצורך המחקר.
  2. חלק את העכברים באקראי לקבוצת uIRI ולקבוצת ה-Sham. לכל אחת משש נקודות הזמן המיועדות (2 ימים, 5 ימים, שבוע אחד, 2 שבועות, 3 שבועות ו-4 שבועות), הקצה n = 4 עכברים לכל קבוצה.
    הערה: העכברים נשמרו במחזור של 12 שעות אור ו-12 שעות חושך עם גישה חופשית למזון ולמים. הם הסתגלו לסביבת המעבדה לפחות שבוע לפני הניסוי.
  3. חטא את כל כלי הניתוח באמצעות .אוטוקלבינג בקיטור בלחץ גבוה לפני השימוש.
  4. לשמור על טמפרטורת הגוף המרכזית של 37.0 מעלות צלזיוס ± 0.5 מעלות צלזיוס באמצעות מערכת ניטור הומורמית המצוידת בגלאי רקטלי לניטור טמפרטורה רציף. הכנס את הגשוש המשומן לרקטום מיד לאחר השראת ההרדמה ושמרו אותו במקום לאורך כל ההליך.
  5. הרדמו עכברים באמצעות מערכת הרדמה גזית של בעלי חיים קטנים עם איזופלוראן (5% לאינדוקציה, 1.5% לתחזוקה, עם קצב זרימת חמצן של 1.0 ליטר לדקה באמצעות אידוי מכויל).
    הערה: אשר הרדמה עמוקה בהיעדר רפלקס גמילה מהפדל. כל ההליכים הניתוחיים חייבים להתבצע רק לאחר שהעכבר הגיע למצב של הרדמה עמוקה.
  6. לגלח את הפרווה באזור הגב השמאלי.

2. הליך כירורגי

  1. דגם uIRI (יום 0)
    1. מקם את העכבר בדקוביטוס הצידי הימני כדי לחשוף את הצד השמאלי.
    2. בצע חתך עור אורך בגודל 1 ס"מ עד 1.5 ס"מ בגב השמאלי, ואחריו חתך שריר כדי להיכנס למרחב הרטרופריטוניאלי.
    3. דחוף בעדינות את הכליה השמאלית החוצה באמצעות מטוש כותנה סטרילי עם מלח.
      הערה: יש להזיז את הכליה רק על ידי מניפולציה של כרית השומן סביב הכליה או באמצעות מטליות צמר גפן סטריליות. מלקחיים לא צריכים לגעת בשטח הכליה.
    4. נתח בזהירות את הפדיקולה הכלייתית באמצעות מלקחיים דקים כדי לבודד את העורק והווריד מרקמת החיבור הסובבת.
    5. מהדק את הפדיקולה הכלייתית השמאלית באמצעות מיקרוקליפ וסקולרי לא טראומטי כדי לגרום לאיסכמיה.
      הערה: יש לבצע את ניתוח הפדיקול הכלייתי בצורה נקייה ומלאה. ההליך צריך להוציא במפורש את השופכן מהנחת הקלימפ. קלימפינג לא מכוון של שופכון עלול לגרום לפציעה היברידית של IRI/חסימת שופכון חד-צדדית (UUO), מה שעלול להכניס רכיב חסימתי קבוע.
    6. התחל טיימר מיד עם הלחיצה על ההידוק. משך האיסכמיה נקבע בקפדנות ל-28 דקות.
    7. בדוק את האיסכמיה באופן חזותי: צבע הכליה אמור להשתנות מאדום בוהק לסגול כהה תוך שניות.
    8. כסו את הכליה בגזה סטרילית טבוגה במי מלח חמים.
    9. לאחר 28 דקות, הסר את הקלמפ כדי להתחיל את ההחזרה.
    10. אשר את הריפרפוזיה ויזואלית: צבע הכליות אמור לחזור לורוד/אדום תוך כמה דקות.
    11. החזירו בעדינות את הכליה לחלל הבטן.
    12. סגור את שכבת השריר עם תפרים סופגים 5-0 ואת חתך העור בתפרי ניילון 5-0.
  2. מבצע שאם (יום 0)
    1. בצע את אותם שלבי הרדמה, חתך והוצאת כליות כפי שמתואר בשלב 2.1.
    2. נתח את הפדיקולה הכלייתית אך אל תלחץ את כלי הדם במהדק.
    3. השאירו את הכליה מחוץ לבית למשך אותו זמן (28 דקות) לפני שמחזירים אותה לחלל הבטן וסוגרים את החתך.
  3. ניתוח CNx
    הערה: יש לבצע CNx 24 שעות לפני נקודת הסיום המתוכננת של איסוף הדגימה עבור כל קבוצה ספציפית כדי להעריך את התפקוד השארי של הכליה הפגועה.
    לקבוצת היומיים: בצע CNx ביום הראשון לאחר IRI.
    לקבוצת 5 הימים: בצע CNx ביום הרביעי לאחר IRI.
    לקבוצת השבוע: בצע CNx ביום השישי לאחר IRI.
    לקבוצת השבועיים: בצע CNx ביום ה-13 לאחר IRI.
    לקבוצת 3 השבועות: בצע CNx ביום ה-20 לאחר IRI.
    לקבוצת 4 שבועות: בצע CNx ביום ה-27 לאחר IRI.
    1. הרדימו את העכבר כפי שמתואר בשלב 1.5. לאחר מכן, תגלח ותחטא את הצד הגבי הימני.
    2. בצע חתך קטן בצד ימין כדי לחשוף את הכליה הימנית.
    3. הוציא את הכליה הימנית החוצה ונתח בעדינות את הפדיקול הכלייתי.
    4. הדק את הפדיקולה הכלייתית (העורק, הווריד והשופכן) באמצעות תפר משי 4-0 שאינו נספג.
    5. כריתת הכליה הימנית הרחוקה מהקשירה.
      הערה: ודאו שאין דימום פעיל מהגזע.
    6. החזרו את גזע הפדיקולה לחלל הבטן וסגרו את החתך כפי שמתואר בשלב 2.1.12.
    7. אפשר לעכבר להתאושש על כרית חימום.

3. טיפול ומעקב לאחר הניתוח

  1. השאירו את העכברים על כרית החימום עד שיחזרו להכרה ולניידות מלאה.
  2. החזירו את העכברים לכלובים נקיים עם אוכל ומים נגישים בקלות.
  3. עקבו מדי יום אחרי מצב הבריאות של העכברים.
    1. בדוק תמותה מדי יום.
    2. עקבו אחרי שינויים בטיפוח, סימני מצוקה או כאב, ויציבה.
    3. בדוק חתכים לסימני זיהום, דלקת או התנתקות.

4. הערכות לאחר ניתוח

  1. איסוף דגימות
    הערה: עכברים הוקרבו בנקודות זמן מוגדרות: 2 ימים, 5 ימים, שבוע אחד, 2 שבועות, 3 שבועות ו-4 שבועות לאחר IRI להערכת התקדמות הפציעה והפיברוזיס.
    1. הרדימו את העכברים ב-3% איזופלורן.
    2. איסוף דגימות דם לניתוח ביוכימי בסרום (במידת הצורך).
    3. הורד את העכברים באמצעות ניתוק צוואר הרחם.
    4. קצור במהירות את הכליה השמאלית (הפצועה).
    5. חתך את רקמת הכליה: קיבע מנה אחת בפאראפורמלדהיד 4% מסחרי לניתוח היסטולוגי, והקפא את הרקמה הנותרת בחנקן נוזלי ואחסן בטמפרטורה של -80°C לניתוח מולקולרי.
  2. עיבוד רקמות וחתך
    1. ייבשו, נקו והטמיעו את הרקמות הקבועות בשעוות פרפין, תוך שמירה קפדנית על פרוטוקול עיבוד הרקמות שתואר על ידי פלדמן ווולף8.
    2. חתך את בלוקי הפרפין בעובי 4 מיקרון באמצעות מיקרוטום סיבובי.
    3. התקן את חלקי הרקמה על שקופיות זכוכית ואפה אותם בטמפרטורה של 60 מעלות צלזיוס במשך שעתיים כדי להבטיח היצמדות.
  3. צביעת המטוקסילין ואאוזין (H&E)
    1. דה-פרפין את סליידי הרקמה בקסילן והייבש אותן מחדש דרך סדרת אתנול מדורגת יורדת למים מזוקקים.
    2. בצע צביעת H&E להערכת נזק מורפולוגי. בצע את שלבי הצביעה והשטיפה בדיוק כפי שמפורט בפרוטוקול הסטנדרטי של פלדמן ווולף8.
    3. ייבוש, ניקוי וכיסוי את המחסניות המוכתמות באמצעות מדיום הרכבה שרפי.
  4. צביעת הטריכרום של מסון
    1. דה-פרפין והיבש מחדש את חלקי הרקמה למים מזוקקים.
    2. מרחו את צבעי המורדנט, הגרעיני, הציטופלזמי והקולגן ברצף להערכת הצטברות הקולגן ופיברוזיס הכלייתי. עקבו אחרי זמני הדגירה המדויקים של המגיב וצעדי השטיפה שפורטו על ידי אסלאם וקומאר9.
    3. שטוף, התייבש, ניקוי וכיסוי את המחסניות להערכה מיקרוסקופית.
  5. אימונוהיסטוכימיה (IHC)
    1. דה-פרפין והריבש מחדש את חלקי הרקמה.
    2. לבצע שחזור אפיטופים מושרה על ידי חום באמצעות בופר נתרן ציטראט של 10 מ"מ מול, המכיל 0.05% טווין-20 (pH 6.0) כפי שמתואר על ידי מגאקי ואח' 10.
    3. חסום פעילות פרוקסידאז אנדוגנית על ידי דגירה של החתכים במי חמצן 3%.
    4. חסום אתרי קישור לא ספציפיים באמצעות אלבומין סרום בקר 5% ב-PBS למשך 30 דקות בטמפרטורת החדר.
    5. דגרו את החתכים עם נוגדן ראשוני של אקטין (α-SMA) אנטי-אלפא-שריר חלק (דילול 1:400) במהלך הלילה בטמפרטורה של 4°C.
    6. שטפו את השקופיות ודגרו אותן עם הנוגדן המשני למשך שעה בטמפרטורת החדר.
    7. המחישו את האנטיגן המטרה באמצעות DAB וצביעה נגדית עם המטוקסילין, תוך שמירה על השלבים הפרוצדורליים שסופקו על ידי מגאקי ואח' 10.
    8. ייבוש, ניקוי וכיסוי את השקופיות להדמיה הסופית.

5. ניתוח סטטיסטי

  1. הצג את כל הנתונים הכמותיים כסטיית תקן ממוצעת ± (SD).
    הערה: ניתוחים סטטיסטיים ויצירת גרפים בוצעו באמצעות תוכנת GraphPad Prism גרסה 10.0. ההבדלים בין קבוצות מרובות לעומת קבוצת ביקורת אחת (שאם) נותחו באמצעות ניתוח חד-כיווני רגיל של שונות (ANOVA) ואחריו מבחן ההשוואות המרובות של דאנט. ערך P של < 0.05 נחשב מובהק סטטיסטית (*P < 0.05, **P < 0.01, ***P < 0.001, ****P. < 0.0001). NS מציין שאין הבדל משמעותי.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

במהלך כל תקופת הניסוי, שיעור ההישרדות הכולל היה 100% הן לקבוצת שאם והן לקבוצת uIRI (n = 4 לכל נקודת זמן). לא נצפו תמותה במהלך ניתוח ה-uIRI הראשוני או במהלך ההליך המאוחר של CNx. תוצאה זו מאשרת את פרופיל הבטיחות הגבוה והאמינות של פרוטוקול דו-שלבי זה בהשוואה למודלים דו-צדדיים של איסכמיה, אשר בדרך כלל סובלים מתמותה משמעותית הנגרמת מאורמיה.

צביעת H&E, צביעת טריכרום של מסון, וצביעה IHC ל-α-SMA בוצעו בשש נקודות זמן (איור 2) כדי לבחון את ...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

המחקר הנוכחי מתאר פרוטוקול סטנדרטי להקמת מודל עכבר לפיברוזיס אינטרסטיציאלי כלייתי באמצעות uIRI, ולאחר מכן CNx שבוצע 24 שעות לפני סיום המחקר. סקר היסטופתולוגי דינמי חשף שלבים פתולוגיים מובחנים: נמק צינורית חריפה המאופיין בשיא ההיכרויות בימים 2–5, ואחריה פיברוגנזה פעילה והפעלה של מיופיברובלסטים שמגיעים לשיא בשבוע 1–2, ובמיוחד בשבועות 3–4 הרקמה עברה לשלב כרוני המאופיין בהצטברות קולגן יציבה אך ירידה משמעותית בביטוי α-SMA הבין-סטטיאלי. מודל העכבר ששימש במחקר זה מייצג מודל תקף של המעבר מ-AKI ל...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים מצהירים שאין להם אינטרסים מתחרים.

תודות

מחקר זה נתמך על ידי הקרן הלאומית למדעי הטבע של סין (82373042), צוות החדשנות המשותף למחקר קליני ובסיסי (202409), וקרן המדעים הטבעיים של מחוז שאנדונג (ZR2022QH291, ZR2025MS1199).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
נוגדן אנטי-&אלפא;-SMAפרויטנטק14395-1-APנוגדן ראשוני המשמש ב-IHC לזיהוי ביטוי ו-אלפא-SMA ולהערכת הפעלת מיופיברובלסט
ערכת בדיקת דם לאוריאה חנקן (BUN)מכון המחקר לביוטכנולוגיה של נאנג'ינג ג'יאנצ'נג בע"מ.C013-2-1משמש לכימות רמות BUN בסרום להערכת תפקוד כליה שארתי
ערכת בדיקה של קריאטינין (CRE)מכון המחקר לביוטכנולוגיה של נאנג'ינג ג'יאנצ'נג בע"מ.C011-2-1משמש לכימות רמות קריאטינין בסרום להערכת תפקוד כלייתי שאריתי
מערכת ההרדמה הגזיתנאנג'ינג קלווין ביוטכנולוגיה בע"מ.KW-MZJ-4מצויד באיזופלורן להרדמה כללית
תוכנת GraphPad PrismGraphPad Software, Inc.לא זמיןמשמש לניתוח סטטיסטי וייצוג גרפי של נתונים (https://www.graphpad.com)
מערכת ניטור הומורמיתמדעי ההתנהגותCS-HS-0001מצויד בגלאי רקטלי לניטור ווויסות טמפרטורת גוף בלולאה סגורה ורציף
ImageJ Softwareהמכונים הלאומיים לבריאותלא זמיןתוכנה בקוד פתוח המשמשת לכימות מורפומטרי של אזורים פיברוטיים ואות IHC
איזופלוראןRWD לייף סיינס בע"מ;R510-22חומר הרדמה משאף המשמש במהלך ניתוחים
מסון' ערכת הצביעה בטריכרוםביוטייםC0189Mלכמת הצטברות קולגן
מיקרוקליפ וסקולרי לא טראומטיחברת רובוז כירורגיה אינסטרומנטRS-5481Tהשתמשתי בלחיצה על הפדיקול הכלייתי למשך 28 דקות
פאראפורמלדהיד (4%)ביוטיים ביוטק בע"מP0099-100mlמשמש לקיבוע מהיר של דגימות רקמת כליה שנקטפו
בופר נתרן ציטראט (10 מ"מ, pH 6.0)תרמו פישר סיינטיפיק בע"מ;005000משמש לשחזור אפיטופים מושרה על ידי חום לפני צביעת אימונוהיסטוכימיה
מיקרוסקופ כירורגי סטריאוטקסיבייג'ינג ג'ונגטיאן גואנגג'נג טכנולוגיה בע"מTS-39NKמשמש לביצוע ניתוח IRI

מקורות

  1. Lameire, N. H., et al. Acute kidney injury: An increasing global concern. Lancet. 382 (9887), 170-179 (2013).
  2. Sharfuddin, A. A., Molitoris, B. A. Pathophysiology of ischemic acute kidney injury. Nat Rev Nephrol. 7 (4), 189-200 (2011).
  3. Eltzschig, H. K., Eckle, T. Ischemia and reperfusion--from mechanism to translation. Nat Med. 17 (11), 1391-1401 (2011).
  4. Bonventre, J. V., Yang, L. J. T. Cellular pathophysiology of ischemic acute kidney injury. J Clin Invest. 121 (11), 4210-4221 (2011).
  5. Venkatachalam, M. A., Weinberg, J. M., Kriz, W., Bidani, A. K. Failed tubule recovery, AKI-CKD transition, and kidney disease progression. J Am Soc Nephrol. 26 (8), 1765-1776 (2015).
  6. Ferenbach, D. A., Bonventre, J. V. J. N. R. N. Mechanisms of maladaptive repair after AKI leading to accelerated kidney ageing and CKD. Nat Rev Nephrol. 11 (5), 264-276 (2015).
  7. Wei, Q., Dong, Z. J. Mouse model of ischemic acute kidney injury: Technical notes and tricks. Am J Physiol Renal Physiol. 303 (11), F1487-F1494 (2012).
  8. Feldman, A. T., Wolfe, D. Tissue processing and hematoxylin and eosin staining. Methods Mol Biol. 1180, 31-43 (2014).
  9. Islam, M. A., Kumar, S. Masson's trichrome staining technique to evaluate tissue fibrosis. Methods Mol Biol. 2983, 91-100 (2026).
  10. Magaki, S., Hojat, S. A., Wei, B., So, A., Yong, W. H. An introduction to the performance of immunohistochemistry. Methods Mol Biol. 1897, 289-298 (2019).
  11. Marschner, J. A., Schäfer, H., Holderied, A., Anders, H. J. Optimizing mouse surgery with online rectal temperature monitoring and preoperative heat supply: Effects on post-ischemic acute kidney injury. Plos One. 11 (2), e0149489(2016).
  12. Lu, X., et al. C57BL/6 and 129/Sv mice: genetic difference to renal ischemia-reperfusion. J Nephrol. 25 (5), 738-743 (2012).
  13. Wei, Q., Wang, M. H., Dong, Z. J. Differential gender differences in ischemic and nephrotoxic acute renal failure. Am J Nephrol. 25 (5), 491-499 (2005).
  14. Skrypnyk, N. I., Harris, R. C., de Caestecker, M. P. Ischemia-reperfusion model of acute kidney injury and post injury fibrosis in mice. J Vis Exp. (78), e50495(2013).
  15. Chou, Y. H., et al. Methylation in pericytes after acute injury promotes chronic kidney disease. J Clin Invest. 130 (9), 4845-4857 (2020).
  16. La Russa, A., et al. Kidney fibrosis and matrix metalloproteinases (MMPs). Front Biosci (Landmark Ed). 29 (5), 192(2024).
  17. Fu, Y., et al. Rodent models of AKI-CKD transition. Am J Physiol Renal Physiol. 315 (4), F1098-F1106 (2018).
  18. Soranno, D. E., et al. Matching human unilateral AKI, a reverse translational approach to investigate kidney recovery after ischemia. J Am Soc Nephrol. 30 (6), 990-1005 (2019).
  19. Lourenço, B. N., et al. Development of a model of tubulointerstitial fibrosis using transient unilateral renal ischemia and delayed contralateral nephrectomy in domesticated cats. Comp Med. 74 (4), 274-283 (2024).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

פגיעה חריפה בכליותמחלה כרונית של הכליותאטרופיה טובולריתפיברוזיס אינטרסטיציאליהערכה היסטולוגיתהערכה אימונוהיסטוכימית
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.