הרשמה ל-JoVE נדרשת לצפייה בתוכן זה. התחברו או התחילו בגרסת ניסיון בחינם.

מאמר שיטה

אלטרנטיבה זולה לבחינת העדפה חברתית בדגי זברה (Danio rerio) באמצעות משימת שחייה חופשית פתוחה בת 3 חדרים

194 צפיות

⸱

DOI:

10.3791/70610

⸱

7 באוגוסט 2026

 ,  ,  ,  ,  ,  , 
1Christopher Newport University, 2Virginia Governor's School for Science and Technology, 3Bay Path University

במאמר זה

סיכום

משימות העדפה חברתית רב-תאיות הותאמו ממכרסמים לדגי זברה, מה שמקל על חקר התנהגות חברתית באורגניזמים מודליים. פרוטוקול זה מאשר משימת אקווריום פתוח בעלות נמוכה עם שלושה תאים באמצעות מצלמות רשת ותוכנות קוד פתוח למדידת העדפה חברתית לדגי זברה, מה שהופך אותה לנגישה למחקר ולהוראה לסטודנטים לתואר ראשון.

תקציר

הבנת התנהגות חברתית היא עיסוק מרכזי במחקר נוירו-התנהגותי, שנחקר לעיתים באמצעות משימות העדפה חברתית. משימות אלו, שפותחו במקור עבור מכרסמים ולאחר מכן הותאמו לדגי זברה, משמשות באופן נרחב לבחינת דינמיקות ותגובות חברתיות. משימת השחייה החופשית עם מיכל פתוח בשלושה תאים (OTFST) כוללת מיכל מרכזי משני מיכלי גירוי עם מצלמה הממוקמת כדי לתעד את התנהגות הנבדק במיכל המרכזי וסרטי תאורה אחוריים לשיפור איכות ותוקף הווידאו. פרוטוקול זה משתמש במערכת זולה עם מצלמות רשת USB וחומרים זמינים בקלות. אנו מציגים את השימוש ב-DeepLabCut, כלי קוד פתוח להערכת תנוחה ללא סימנים, המאפשר מעקב וידאו מדויק אחר תנועות בעלי חיים ומספק נתוני סדרות זמן מיקומיות לניתוח עבור מדדים שונים. מפגשי פיילוט מאשרים את יכולת המערכת ללכוד התנהגות העדפה חברתית חזקה. גישה חסכונית זו מציעה פלטפורמה נגישה וניתנת להרחבה למעבדות החוקרות אינטראקציה חברתית בדגי זברה, והגמישות והפשטות היחסית של ה-OTFST בעל שלושה חדרים הופכות אותו למתאים למעבדות הוראה לתואר ראשון ולפרויקטים מחקריים.

מבוא

העדפה חברתית היא הנטייה של הפרט להשתתף, לחפש או להימנע מגירויים חברתיים, והיא היבט יסודי בהתנהגות חברתית שממלא תפקיד קריטי ביצירת קשרים והיררכיות בתוך קבוצות בעלי חיים, כולל בני אדם 1,2,3,4. הבנת העדפה חברתית חיונית לאפיון המנגנונים העצביים וההתנהגותיים שמאחורי האינטראקציה החברתית. מחקרים קודמים מצביעים על כך שחסרים בהעדפות חברתיות יכולים להיות קשורים להפרעות נוירו-התפתחותיות ופסיכיאטריות 5,6,7,8. מודלים בעלי חיים יכולים לספק תובנות לגבי הבסיס הביולוגי של התנהגות חברתית ולסייע בפיתוח כלים תרגומיים לאבחון וטיפול בלקויות חברתיות. מודלים אלו של בעלי חיים, החל ממכרסמים 9,10 ועד מינים ימיים11,12, מספקים מסגרות שימושיות לגילוי.

מכרסמים שימשו לראשונה למחקר התנהגותי בתחילת המאהה-19, בשל הדמיון הפיזיולוגי שלהם לבני אדם14,15. בעוד שהתנהגויות כמו תוקפנות נחקרו במקור, מדדים שיטתיים של העדפה חברתית נותרו מינימליים. החוקרים מילאו פער זה על ידי פיתוח משימת ההעדפה החברתית בת שלושה חדרים, שהוצגה על ידי נדלר ואחרים. המכשיר מורכב משלושה חדרים מחוברים. בדרך כלל, תא צדדי אחד מכיל סוג חד-מיני חדש בעוד החדר השני נשאר ריק. הנבדק מורשה לחקור בחופשיות את כל החדרים, כאשר הזמן בכל חדר נרשם ומוערך כמדד העדפה. המכשיר וההליך הזה, יחד עם מספר וריאציות, זכו לפופולריות רחבה ושימשו לחקר היבטים שונים של ביצועים חברתיים 17,18,19 וליקויים חברתיים במודלים של מכרסמים להפרעת ספקטרום האוטיזם 5,20,21. עם זאת, מחקרים על מכרסמים יקרים יותר ודורשים מקום משמעותי. כתוצאה מכך, חוקרים רבים פנו לשימוש במינים מימיים למחקר נוירו-התנהגותי.

מינים מימיים, ובעיקר דגי זברה (Danio rerio), מחזיקים ברפרטואר התנהגותי מורכב, כולל אינטראקציות חברתיות מורכבות22. בשל שימושם כמודל מחקר ביו-רפואי וחשיבות האינטראקציה החברתית באקולוגיה ההתנהגותית שלהם, דגי זברה מספקים מסגרת משמעותית לתגובות חברתיות שניתן להשתמש בה בהשוואה לבני אדם23. דגי זברה הפכו לפופולריים יותר ויותר במחקר נוירו-מדעי ההתנהגות, שכן הם זולים לתחזוקה ודורשים שטח אחסון קטן יחסית, מה שהופך מין זה למודל מעשי וחסכוני למחקרים רחבי היקף של התנהגות חברתית והעדפה24. במחקרים מסוימים, תצורת מיכל סמוכה שימשה לחקר אינטראקציות חברתיות במינים מימיים25,26; עם זאת, מבנה זה סיפק קצב תפוקה מוגבל יחסית להערכת העדפה חברתית, שכן הוצג רק גירוי אחד. מגבלה זו טופלה על ידי התאמת משימת שלוש החדרים של עכברים לדגי זברה בשנת 2018. המכשיר המותאם למשימת השחייה החופשית עם מיכל פתוח בעל שלושה תאים (OTFST) כלל מיכל אקרילאמיד יחיד מחולק במחסומי אקרילאמיד קבועים לספק אזור התחלה ניטרלי ושני תאים צדדיים, כאשר כל תא צד מכיל מין מוכר או חדש. כדי למדוד העדפה חברתית, נרשם הזמן המצטבר ליד כל תא צדדי, מה שהראה כי חשיפה לאתנול ו-sam2 knockout הפחיתו את העדפת החידוש בדג זברה27. בעוד שמבחן האינטראקציה החברתית התלת-תאית של מכרסמים מאפשר אינטראקציות מורכבות ורב-מודליות בין הנבדק לבין בני המין דרך האמצעים הוויזואליים, הכימיים, המישושיים והאקוסטיים, השימוש בחדרים נפרדים ל-OTFST בעל שלושה תאים ימיים מפחית את האינטראקציה בין הנבדק לבעלי החיים המגרים רק למודאליות הוויזואלית. למרות שהאינטראקציה החד-מודלית הזו עשויה להיות נמוכה יותר בתוקף האקולוגי, היא מספקת שליטה ניסויית יותר ומגבירה פשטות לפרויקטים שמבצעים חוקרים לתואר ראשון. בספרות הספרותית, חוקרים שונים חקרו מאז התאמות של ה-OTFST התלת-תארי כדי לחקור גורמים גנטיים וסביבתיים המשפיעים על התנהגות חברתית בדגי זברה 28,29,30,31,32.

ההתאמה הנוכחית של ה-OTFST בעל שלושה תאים נועדה לשמש כמכשיר מודל רב-שימושי וידידותי לסטודנטים לתואר ראשון. FishLab, מעבדה לתואר ראשון מלא, יצרה והשתמשה במערכת זו והוכיחה את יעילותה ככלי עתיר תפוקה לחקר העדפה חברתית בדגי זברה. מחקרים המשתמשים במערך זה חקרו היבטים רבים של העדפה חברתית של דגי זברה בתגובה למניפולציות של משתנים עצמאיים שונים. המחקר הראשון הראה שדג זברה מסוגל לזהות גירויים חברתיים חיים לעומת סימולציה33, בעוד שהמחקר השני חקר העדפה לשונית מבוססת לעומת שונית חדשה34. המחקר האחרון בדק את יכולתם של דגי זברה להבחין בין שוניות עם אזעקות כימיות לבין שניות ללא אזעקה35. יחד, מחקרים אלו עוסקים בהיבטים שונים של התנהגות חברתית, כולל ריאליזם, היכרות וזיהוי איומים, תוך הדגמת קווים משותפים בהעדפות לשריפה והערכת תגובות לסיכון טורף. עם זאת, ההתקנה ששימשה למחקרים קודמים השתמשה במצלמות IP דיגיטליות שהותקנו על ציוד מצלמה מקצועי, מערכת ארון ימית ייעודית, ותוכנה קניינית הן לרכישת וידאו והן לניתוחים, עם עלות כוללת שעלולה להיות גבוהה מדי עבור חוקרים/מדריכים עם תקציבים תפעוליים קטנים. עם הופעת תוכנות קוד פתוח ומצלמות רשת מבוססות USB איכותיות, גרסה זולה זמינה כעת לחוקרים המעוניינים ליישם טכניקה זו עם חוקרים לתואר ראשון, עם מחיר כולל (כ-2,000 דולר; ללא המחשב) נמוך משמעותית מהעלות של המערכת היקרה (כ-20,000+, ללא המחשב).

הפרוטוקול הבא מפרט את פיתוח ויישום גרסה זולה של ה-OTFST בעל שלושה תאים לדגי זברה. המחיר הנגיש, הפשטות והגמישות שלו הופכים אותו לכלי שימושי למעבדות קטנות או לסביבות חינוכיות עם מימון מוגבל. בשילוב עם דיור זול, כמו אקווריום בנפח 10 גלון נפוצים, ההתקנה הנוכחית עולה הרבה פחות לפריסה ותחזוקה. בנוסף, השימוש בתוכנות גישה פתוחה כמו מערכת שידור פתוחה (OBS) להקלטת סשנים ניסיוניים ויישומי מעקב שונים (כגון DeepLabCut, SLEAP וכו') מספק מסגרת נגישה וזולה ללכידת וידאו וליצירת נתוני סדרות זמן של אינטראקציות חברתיות עם דגי זברה.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

פרוטוקול

כל ההליכים הניסיוניים אושרו על ידי ועדת טיפול ושימוש בבעלי חיים מוסדית (IACUC) באוניברסיטת כריסטופר ניופורט (פרוטוקול #2025-23).

1. בעלי חיים

  1. יש להשיג דגי זברה קצרי סנפיר בוגריםמסוג 23,36,37, אם כי ניתן להשתמש בזנים נוספים. לחלופין, להשיג עוברים ולגדל אותם בתוך הבית.
  2. שים את הדגים במיכלים עצמאיים בנפח 10 גלון (38 ליטר) בצפיפות של כ-2 דגים לגלון (3.8 ליטר) מים. צייד מיכלים במסנני ביולוגיה פעילים, אבני אוויר ומחממים תת-ימיים. לחלופין, דגי בית במערכת מתלה ימית.
  3. לשמור על פרמטרי איכות המים בטווחים הבאים: pH 7.0–8.0, מוליכות 400–700 מיקרו-S, טמפרטורה 25–27 °C, <40 ppm ניטראטים, <0.2 ppm ניטריטים, ו-0.01–0.1 ppm אמוניה.
  4. שמרו על בעלי החיים תחת אור חשוך של 12 שעות:12 שעות והאכיל פעם ביום בפתיתי מסחריים.
  5. בחר בעלי חיים באקראי מהמכלים הללו לצורך הקצאה ניסיונית.
  6. בסיום הניסוי, יש להשתמש בבעלי החיים למטרות מחקר/הוראה אחרות, או הורד אותם על ידי טבילה ב-250-500 מ"ג/מ"ל טריקאין עם בופר למשך 30 דקות, ולאחר מכן בשיטה פיזית (למשל, כריתת ראש) כדי להבטיח מוות. השתמש בבעלי החיים שהושמתו לבדיקות ביולוגיות ו/או ניתוחים נוירוכימיים נוספים.

2. ציוד ותוכנה לשחייה חופשית עם מיכל פתוח בעל 3 תאים

  1. בניית תאי בדיקה
    1. הסר בזהירות את המסגרת הפלסטית מתחתית כל מיכל של 5.5 גלון. השתמש בכלי סיבובי עם גלגל חיתוך כדי לחתוך את הפלסטיק בפינות ולהקל על ההסרה. לאחר שהחיתוך הפלסטי נחתך, הפריד את הפלסטיק מהדבק הסיליקוני באמצעות סכין פלסטלינה רגילה.
    2. כדי לפזר את התאורה האחורית, כסו את גב שלושת המיכלים, את הקצה השמאלי של מיכל אחד, ואת הקצה הימני של המיכל השני עם ציפוי מדף דביק לבן. השאירו את הקצוות חשופים במיכל שישמשו כתא המרכזי.
    3. הניחו קו אופקי שחור לציון רמת המילוי בעומק 4.5 ס"מ מתחת לשוליים העליונים בחזית כל תא, באמצעות טוש אמייל או עם סרט סידור גרפי שחור.
    4. חתכו יריעה אחת של פילטר קיטוב כדי להתאים לצד הקצה החשופ של כל מיכל משני הצדדים. כיוון את דפי הסינון ב-90° זה לזה. השתמש בסרט שקוף לאורך כל ארבעת הקצוות כדי למנוע כניסת מים לחלל שבין זכוכית האקווריום לחומר המסנן.
      הערה: ההזזות של המסננים הקיטביים תמנע מבעלי החיים הגירויים בתא גירוי משני הצדדים לראות את בעלי החיים (או הגירויים האחרים) בתא הגירוי הצדדי השני, ועדיין יאפשרו להם לראות את הנבדק. הנבדק במיכל המרכזי יכול לראות את הגירויים הוויזואליים בשני התאים הצדדיים.
    5. בנה את בסיס פוליוויניל כלוריד (PVC) כדי ליישר את מיקום המיכלים המדויק על שולחן ההתקנה. חתכו את תחתית הבסיס מדף PVC לבן בעובי 1/4 אינץ' (0.635 ס"מ) בגודל 21 ס"מ על 122.5 ס"מ וחתוך את חלקי הקצוות מלוח גימור PVC בגודל 1 על 2 באורך 21 ס"מ.
    6. ניסו להתאים את הקצוות לבסיס עם שלושת המיכלים במקומם. ודאו הכנסת והסרה קלה של לוחות המחיצה (למטה) וודאו שהמיכלים הצדדיים אינם צמודים זה לזה בצדדי המיכל המרכזי. לאחר סיום התקנת הבדיקה, חבר את חלקי הקצוות לבסיס ה-PVC עם מלט PVC.
    7. כדי ליצור מכסים שקופים לכל תא, חתוך את גיליון הפוליקרבונט לשלושה חלקים בגודל החיצוני של השפה העליונה של מיכל 5.5 גלון (40 ס"מ × 21 ס"מ). חתוך תעלת ראבט (6 מ"מ × 4 מ"מ) סביב קצה כל מכסה כדי לספק מיקום בטוח של המכסה מעל החדר.
    8. כסו את התאים במכסים בכל פעם שבעלי חיים מוחזקים בתאים. הניחו מחמם תת-ימי ואבן אוויר המחוברת למשאבת אוויר לאקווריום בזמן שהחיות מוחזקות בתאים שלהן כדי לספק שליטה בטמפרטורה ואוורור. השתמש בשסתום אוויר תלת-כיווני כדי לאזן את זרימת האוויר בין שלוש אבני האוויר.
    9. צרו מחיצות אטומות פשוטות למיקום בין התא המרכזי לכל תא משני הצדדים, כדי לשלוט מתי הנבדקים מקבלים חשיפה ויזואלית לגירויים חברתיים על ידי למינציה של שני דפי קרטון A4 בהירים.
    10. הכינו את המחיצות לתלייה ולהסרה מרחוק על ידי ניקוב שני חורים בגודל 85 מ"מ ו-125 מ"מ לאורך קצה אחד של 210 מ"מ של כל גיליון למינציה.
    11. חתכו שני חוטים חזקים באורך 75 ס"מ והעבירו את החוט דרך כל חור וקשורים את הקצוות שנותרו יחד, ומחברים את שני הסדינים בקשר מרכזי.
    12. חתכו חוט באורך 6 מטר. קשור קצה אחד של החוט באורך 6 מטר ליוק ליצירת קו מרכזי קשור, והשחיל את קצה החוט החופשי דרך גלגלת עיניים מסתובבת.
    13. התקן את גלגלת העין המסתובבת על התקרה מעל המיכל המרכזי וודא שקצה החוט תלוי מחוץ למערכת הניסיונית (איור 1A).
  2. בניית מערכת התאורה
    1. תכין מסגרת מ-1/4 אינץ' (0.635 ס"מ) יריעת PVC לבנה בעובי 1/4 אינץ' (0.635 ס"מ) לתאורת הפאנל. חתכו שני חלקי קצה (10 ס"מ × 31.5 ס"מ) וחלק עליון וחלק תחתון (10 ס"מ × 122 ס"מ). ניסו להתאים את חלקי המסגרת יחד כך שהלוח יתאים בתוך המסגרת. לאחר בדיקת ההתאמה, חבר את חלקי המסגרת באמצעות מלט PVC.
    2. תבקש מחשמלאי מוסמך להוסיף כבל תלת-מוליכים לאור הפאנל.
    3. תבקש מחשמלאי מוסמך לחבר את הדימר הסליידר כדי לשלוט בשקע היציאה במארז האטום. חבר את נורת הפאנל לשקע הזה.
    4. כוון את הדימר של הסליידר כדי לכוון את בהירות התאורה האחורית ל-350 לוקס. מלאו את התאים במים והזיזו את דימר הסליידר כדי לכוון את הבהירות בחזית התאים ל-15 לוקס.
      הערה: חוקרים צריכים לבדוק את התאורה לפני, במהלך ואחרי המחקר כדי לוודא שהגדרות הבהירות נשמרו.
  3. בניית וילון ומסגרת מצלמה
    1. התקן את שולחן הבדיקה עם מנורת הפאנל, לוח בסיס המיכל ושלושת התאים. מקמו וכווננו את שני עמודי היריעה אנכית כך שכל אחד מהם יתאים היטב מהרצפה ועד התקרה, לפחות 75 ס"מ מקדמת המיכלים.
    2. צרו כיס עליון לכל וילון על ידי קיפול קצה אחד של הסדין מעל 60 ס"מ ותפירת תפר ישר באורך 6 ס"מ מהקיפול העליון כדי ליצור כיס שבו חלק המסגרת יוכל להחליק לתוכו.
    3. מדדו את המידות של מקטעי החיבור והייצוב של מערכת המסגרת בהתאם לרוחב ולעומק השטח שישמש להתקנה.
      הערה: בהתקנה הנוכחית ב-FishLab, עמודי היריעה האנכיים הוצבו במרחק 146.5 ס"מ מהקיר האחורי בפינת המעבדה. עמוד היריעה הפנימי ממוקם במרחק 6.5 ס"מ מהקיר הצדדי, בעוד עמוד היריעה החיצוני ממוקם במרחק 142.5 ס"מ מהקיר הצדדי.
    4. חתכו שלושה מקטעים של צינור מתכת חשמלי (EMT) בקוטר 143 ס"מ לשימוש כאזורי ייצוב לצדדים של המסגרת. העבר חלק אחד דרך הכיס העליון של הווילון הנייד ומקם אופקית 190 ס"מ מעל הרצפה.
    5. חבר את החלק לעמוד החיצוני של הברזנט עם מהדק T בקצה אחד והשקע המודפס בתלת-ממד בקצה השני. חבר את השקע המודפס בתלת-ממד לקיר האחורי באמצעות ברגים. חבר את שני החלקים האחרים לעמוד היריעה הפנימי.
    6. העבר את החלק העליון דרך הכיס העליון של אחד הווילונות הקבועים ומקם 190 ס"מ מעל הרצפה. חבר לעמוד היריע הפנימי עם מהדק T בקצה אחד ושקע מודפס בתלת-ממד בקצה השני.
    7. חבר את השקע המודפס בתלת-ממד לקיר הצד באמצעות ברגים. הניחו את חלק הייצוב הסופי 120 ס"מ מעל הרצפה וחברו אותו בדומה לשני חלקי הייצוב האחרים.
    8. חתכו קטע נוסף של צינור EMT באורך 127 ס"מ שישמש כחלק מייצב לחזית המסגרת. העבירו את החלק הזה דרך הכיס העליון של הווילון הקבוע השני והתקינו אותו בגובה 193 ס"מ מעל הרצפה על ידי חיבור כל קצה לעמודי היריעה באמצעות מהדק T בכל קצה.
    9. חתכו את החלק הנותר של צינור EMT באורך 145 ס"מ כדי שישמש כמוט הרכבה למצלמה. מקם את החלק הזה אופקית בגובה 88 ס"מ מעל הרצפה כדי ליישר את המצלמות עם מרכז המיכלים. התקן קצה אחד לתוך שקע מודפס בתלת-ממד, שמוברג לקיר, והשתמש בקליפסים מוצלבים מותאמים אישית לאחיזת מוט המצלמה בחוזקה כנגד עמודי היריעה (איור 1B).
  4. בניית מערכת המצלמה
    1. מהדק מתקן מצלמה אחד על מוט המצלמה כך שהמרכזים האופקיים והאנכיים של המצלמה יתיישרו עם המרכזים האופקיים והאנכיים המתאימים של תא המרכז.
      הערה: ניתן להתקין מצלמות נוספות מול כל תא משני הצדדים אם החוקרים רוצים להשיג וידאו דיגיטלי של תגובות בעלי חיים חיים המשמשות כגירוי חזותי. ההתקנה הפשוטה ביותר כוללת הצבת מצלמה אחת לצילום וידאו של תא הניסוי המרכזי. עבור גירויים חברתיים חיים בתאי הגירוי, ייתכן שחוקרים ירצו גם לאסוף וידאו של התאים.
    2. התקן כל מצלמה על עמוד מושחל של כל מתקן מצלמה. כוון כל מצלמה כך שהתמונה תהיה מרוכזת באזור התצפית של התא שלה.
    3. אבטח את כבלי ה-USB של כל מצלמה על מוט המצלמה באמצעות רצועות או קשרים כדי למנוע תלייה של הכבלים, מה שעלול לגרום למצלמות לא מיושרות.
    4. חתכו קטע מדפי תיל באורך 140 ס"מ וחברו אותו אנכית לחלק החיצוני של חזית המסגרת כדי למנוע מהמצלמות לצאת מהיישור. התקן את "כלוב המצלמה" באמצעות מהדקי T המחוברים לעמודי היריעה.
      הערה: כלוב מצלמה שני יכול להיות מותקן בתוך המסגרת כדי למנוע עוד יותר מהמצלמות לצאת מהיישור; ייתכן שיהיה צורך להסיר קטע קטן של רשת חוטים אם חזית המצלמות "כלובה" כדי למנוע הסתרה של תמונות המיכל.
  5. טעינת והגדרת תוכנת רכישה - אולפן שדרן פתוח (OBS)
    1. הורד את OBS והתקן אותו על מחשב מקומי שמופעל על ידי Windows. הפעל את OBS Studio והפעיל את אשף התצורה האוטומטית כדי לייעל את ההגדרות לצרכי ההקלטה הספציפיים, משאבי החומרה ותנאי הרשת.
      הערה: כלי זה זמין תחת Tools > Auto-Configuration Wizard.
    2. בדוק את ההגדרות הבסיסיות לפני שאתה מגדיר את המצלמה. הגדר את רזולוציית הבסיס (Canvas) שתתאים לרזולוציית התצוגה, והגדר את רזולוציית הפלט (Scaled) לרזולוציית ההקלטה (למשל, 720 פיקסלים).
    3. צור סצנה על ידי לחיצה ימנית בתיבת הסצנות (או השתמש בצלב בתחתית). הקצה שם לזירה. השתמש בסצנה כדי להגדיר את פריסת הנחל.
    4. הוסף מקור חדש על ידי לחיצה ימנית על תיבת המקורות (או השתמש בסמל פלוס בתחתית). בחר במכשיר לכידת וידאו כדי להוסיף מצלמת רשת. הקצה לכל מצלמה שם ייחודי (למשל, "מצלמה-שמאל", "מצלמה-מרכז", "מצלמה-ימין"). חזור על תהליך זה עבור מצלמות או מקורות נוספים לפי הצורך.
    5. מקורות מיקום ושינוי גודל בחלון התצוגה המקדימה. ודא שהמצלמה נראית על ידי אישור שהיא רשומה מעל מקורות אחרים ברשימת המקורות . כדי למרכז את תצוגת המצלמה על הקנבס, בחר את המקור ברשימת המקורות (תיבה אדומה תופיע תיבת הגבול), ולחץ על CTRL+D (מרכז למסך).
    6. מלאו את כל המסך במקור על ידי לחיצה על CTRL+F (התאמה למסך) או CTRL+S (מתיחה למסך), אם רוצים. חתך את המקור על ידי החזקת מקש Alt תוך כדי גרירת תיבת הגבול. אמת את החיתוך על ידי בדיקת הקצוות שהפכו לירוקים.
    7. כוון תכונות וידאו כמו בהירות וניגודיות על ידי לחיצה כפולה על המצלמה הנבחרת ברשימת המקורות ובחירה בהגדרת וידאו. שנו הגדרות באמצעות תפריט התכונות .

3. בדיקות התנהגות

  1. הסתגלות
    1. מלא את כל שלושת התאים במים ממיכלי הבית. הניחו מחסומים אטומים בין כל תא והשאירו אותם במקומם לאורך כל תקופת ההסתגלות. העבר נבדק אחד לתא הניסוי המרכזי ואפשר לו להסתגל לפחות שעה לפני הבדיקה.
      הערה: תקופת ההסתגלות לתוצאות הייצוגיות נקבעה על 3 שעות. תקופת ההסתגלות הכרחית לבעלי חיים כדי להתאושש מכל עומס העברה רגעי ולהסתגל לסביבת התא לפני בדיקות התנהגות.
    2. בתחילת תקופת ההסתגלות, יש למקם את הגירויים החברתיים בתאי הגירוי הצדדיים. מרכזים את הגירויים החברתיים המלאכותיים בתא הגירוי השמאלי והעבר להקת 4 דגים קטנים (2 זכרים ו-2 נקבות בגודל, גיל והיכרות דומים) לתא הגירוי הימני.
      הערה: מיקומי הגירויים החברתיים המלאכותיים והגירויים החברתיים החיים היו קבועים ולא מאוזנים בפרוטוקול הנוכחי, שכן מחקרים קודמים33,34 לא זיהו השפעה של מיקום הגירוי באמצעות OTFST. איזון נגד במקרה זה ידרוש הכפלה מיותרת של מספר בעלי החיים המשמשים למחקר, בניגוד ל"3R" של מחקר בעלי חיים. פרוטוקול זה מספק גמישות באופי הגירויים שיש לבדוק, למשל, מודלים סטטיים, מינים סימפטריים או חדשים וכו'.
    3. במהלך ההסתגלות, יש לספק לכל התאים המכילים בעלי חיים חיים תנור מים (בטמפרטורה של 26 מעלות צלזיוס), אבן בועות המחוברת למשאבת האוויר של האקווריום, ומכסה מיכל לשמירה על תנאי אחיזה יציבים. הסר את המחממים ואבני הבועות לפני תחילת סשן ניסיוני.
  2. בדיקות ניסיוניות
    1. אמת את מצב הפעילות של הגירויים החברתיים שנבדקים בכל אחד מהמכלים המקיפים והנבדק במיכל המרכזי. השתמש במצלמה היחידה במיכל המרכזי כדי להקליט וידאו לכל נבדק.
      הערה: התוצאות המייצגות בפרוטוקול זה הן שכפול של תנאי בודד מ-Velkey ואח' 33 כדי לבדוק את העדפת דגי הזברה בין גירויים חברתיים בעלי דיוק נמוך (מודלים ניידים) לגירויים חברתיים בעלי דיוק גבוה (שוניות חיים).
    2. פתח את אולפן OBS כדי להתחיל להקליט סשן. שנה את גודל תצוגת המצלמה המרכזית כדי למלא את המסך על ידי לחיצה וגרירת פינות הווידאו. בחר התחל הקלטה תחת השליטה בפינה הימנית התחתונה של המסך.
    3. מיד לאחר תחילת ההקלטה, יש להסיר את המחסומים האטומים באמצעות מערכת מיתר הגלגלת. המשיכו להקליט במשך 10 דקות ואפשרו לנבדק להיחשף בו-זמנית לשני הגירויים החברתיים בזמן שהוא נע בחופשיות בתוך תא הניסוי המרכזי.
    4. סיימו את הסשן בבחירת עצור הקלטה תחת בקרות. גש לסשנים שהוקלטו על ידי בחירת קובץ בתפריט השמאלי העליון ובחירת 'הצג הקלטות מהתפריט הנרחב'.
      הערה: הסרטונים שהתקבלו מספקים נתונים לא מובנים המתאימים למגוון ניתוחים.
    5. העבר דגים חיים לאקווריומים, הסר את המים מכל שלושת התאים, שטוף היטב במים (הימנע מקבלת מים בין הסרטים המקוטבים), רסס כל תא בחומצה ציטרית 5% לחיטוי, אפשר לתאים להתייבש באוויר ללילה, ולשטוף בתחילת יום הניסוי הבא לפני שמונחים חזרה על שולחן הבדיקה.

4. קבלת נתונים מובנים לניתוחים

  1. בחר תוכנת ניתוח תנועה (למשל, DeepLabCut; ראה https://www.mackenziemathislab.org/deeplabcut). התקן את DeepLabCut על המחשב, בהתאם למדריך המשתמש https://deeplabcut.github.io/DeepLabCut/docs/installation.html. עיינו במידע ובמדריך המשתמש של התוכנה הנבחרת להוראות נוספות אם אינכם משתמשים ב-DeepLabCut.
  2. טעין ארבעה עד חמישה סרטונים ל-DeepLabCut לאימון מודלים, וחילוץ 20–30 פריימים לכל וידאו. הגדר לפחות שלוש נקודות מעקב עיקריות (למשל, ראש, גזע, זנב) והכשר את הרשת לעקוב אחרי נקודות אלו על פני מסגרות.
    הערה: למידע נוסף, עיינו במדריך המשתמש של DeepLabCut בכתובת https://deeplabcut.github.io/DeepLabCut/docs/standardDeepLabCut_UserGuide.html. התוצאות המייצגות משתמשות ב-22 פריימים המתויגים מחמישה סרטונים עם 3 נקודות מעקב.
  3. השתמש ברשת עצבית מבוססת ResNet-101 כדי לאמן את המודל. קבע את מספר האיטרציות הנדרשות להשלמת ההכשרה (בין 100,000 ל-200,000 מוצע). קבעו ערך חיתוך p בין 0.5 ל-1.
    הערה: לתוצאות המייצגות, נעשה שימוש ב-150,000 איטרציות לאימון המודל עם חיתוך p של 0.7. אם הרשת המאומנת יורדת מתחת לנקודת החיתוך של 0.7 p, הגדלת ניגודיות הווידאו או שינוי קונבנציית התיוג יפתרו את הבעיה הזו.
  4. פרוס את מודל DeepLabCut המאומן במלואו בסרטונים הניסיוניים שנותרו. להוציא נתוני מיקום לכל ניסוי. עקבו אחרי מדריך המשתמש בכתובת https://deeplabcut.github.io/DeepLabCut/docs/beginner-guides/Training-Evaluation.html.
    הערה: עבור התוצאות המייצגות, אימתנו עם 2 ערבובים וקבענו ששגיאת הבדיקה הייתה 2 פיקסלים:Train 4 פיקסלים (עם גודל תמונה של 1600 על 820 פיקסלים). לאחר מכן שימשה הרשת לניתוח סרטוני הניסוי שהושגו מהמערכת הניסוייתית הנוכחית.
  5. השתמש בתוכנות קידוד, כמו פייתון, כדי להגדיר ולנתח תנועה בשלושת אזורי הזירה האנכיים ברוחב שווה כדי לכמת העדפה. מדוד את הזמן באזור לפחות בשתי נקודות גוף בתוך האזור המזוהה כדי להפחית רעש מעקב. השתמשו בנוסחה: סך הזמן באזור = (סך הפריימים באזור)/(סך כל הפריימים באזור).
  6. אם רוצים מדידה של תיגמוטקסיס, כמתים את האזורים לאורך כל גוף דג הזברה מדפנות האקווריום, מה שיספק מדד לנטייה הפסיבית של הנבדקים להישאר קרוב לגבול אנכי. מדד זה מתאים במיוחד למיכלים ניסיוניים גדולים יחסית.
  7. השתמש באותה תוכנת קידוד כדי להגדיר ולמדוד את זמן השהייה ללא תנועה (למשל, קפיאה). הגדר את סף התנועה ב-2–5 פיקסלים לכל פריים עם מינימום מספר פריימים רצופים של 15 פריימים.
    הערה: לתוצאות המייצגות, זוהה הקפאה עם סף של 3 פיקסלים לכל פריים במשך 15 פריימים.
  8. איסוף וייצוא מדדים לניתוח סטטיסטי והדמיות.
    הערה: לניתוח נתונים, ראו את https://github.com/farhanaugustine/DeepLabCut-Analysis-Jupyter-Scripts. אנחנו

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

תוצאות

כדי לאמת את השיטות הזולות שתוארו לעיל, תנאי אחד מתוך הניסויים שנערכו ב-Velkey ו... AL.33 שוכפל באמצעות המערכת הזולה הנוכחית. הנבדקים (N = 23, 11 גברים ו-12 נשים) הוצגו בצד שמאל עם גירויים חברתיים ניידים מלאכותיים (באיכות נמוכה) וגירויים חברתיים חיים (נאמנות גבוהה) מימין (איור 2); מאחרשמחקרים קודמים 33,34 לא זיהו השפעות או אינטראקציות של מיקום הגירוי באמצעות OTFST, מיקומי הגירו...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

דיון

הפרוטוקול הנוכחי מראה כי ההתאמה הזולה הנוכחית של OTFST תלת-תארי יכולה לשמש לאפיון אמין של העדפה חברתית בדגי זברה בוגרים כפי שנמדדת לפי זמן השהייה באזור. באמצעות חומרי בנייה זולים, מצלמת רשת מחוברת ל-USB, ויישומי תוכנה לרכישה וניתוח בקוד פתוח, המערכת הנוכחית שיחזרה בהצלחה את הממצא שלפיו דגי זברה מעדיפים להקת דו-מינים חיים על פני דגמים נעים באיכות נמוכה יותר. תוצאות אלו מאשרות את יישום מודל OTFST תלת-תאים בעלות נמוכה לחקר העדפה חברתית מתווכת חזותית בדגים. על פי הפרוטוקול הנוכחי, חשוב לכלול...

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

גילויים

המחברים מצהירים שאין ניגוד עניינים. למממנים לא היה תפקיד בתכנון המחקר; באיסוף, ניתוחים או פרשנות של נתונים; בכתיבת כתב היד; או בהחלטה לפרסם את התוצאות.

תודות

המחברים מבקשים להודות לרומל פגקלינאוואן, רובי באק, אליזבת הילץ, היילי דוויט, מאיה טנקרסלי, אלכסיס תאי-נגוין, גריידי פלמינג, ג'ייקוב יאנג וג'ק מדלין מצוות TheFishLab באוניברסיטת כריסטופר ניופורט על תרומתם לגידול בעלי חיים ולאיסוף נתונים לניסוי האימות. המחברים מבקשים גם להודות לסמנתה קומונס על סיועה במהלך תוכנית הקפטנים הקהילתיים בקיץ 2025, כולל ביצוע מלאי של כל רכיבי ההתקנה היקרה הקיימת וכן ההתקנה הזולה. המחברים רוצים גם להודות למשרד מחקר הסטודנטים והפעילות היצירתית באוניברסיטת כריסטופר ניופורט על המימון שניתן ל-K.K. במסגרת תוכנית המלגאים הקיציים לתואר ראשון. איור 2 נוצר ב-BioRender על ידי קינסלו, ק. (2025). https://BioRender.com/wbf0wph.

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

חומרים

רשימת החומרים שנעשה בהם שימוש במאמר זה
שםחברהמספר קטלוגהערות
10-Gallon AquariumAqueon, Inc. Franklin, WI, USA#100110010שנרכש בחנות מקומית לציוד לחיות מחמד (1 עד 4)
12 חתיכות מהדקי צינור T בגודל 1 אינץ'JoyHua Trade, ChinaASIN #B0DF19DJF1שנרכש מ-Amazon.com (1)
תיבת חשמל דו-גנגיתSigma Engineered Solutions, Raleigh, NC, USA# 14350שנרכש בחנות חומרה מקומית (1)
צינור מתכתי חשמלי כסף-מטאלי של 3/4 אינץ' (EMT) - 10 רגלWheatland Tube, Inc., Wheatland, PA, USA#0550110000שנרכש בחנות חומרה מקומית (3)
כבל 3-מוליךUtilitech, Inc., Charlotte, NC, USAUT010710שנרכש בחנות חומרה מקומית (1)
שקע 3-קרביEaton, Inc., Beachwood, OH, USA#270W-SP-LWשנרכש בחנות חומרה מקומית (1)
שסתום אוויר 3-כיווניPenn-Plax, Inc. 35 Marcus Blvd. Hauppauge, NY, USAדגם VN3שנרכש בחנות מקומית לציוד לחיות מחמד (1)
מסנן ביולוגי פעיל Penguin 100Spectrum Brands Pet, LLC, Blacksburg, VA, USA#PF00100Bשנרכש בחנות מקומית לציוד לחיות מחמד (1 עד 4)
אבני אווירPenn-Plax, Inc. 35 Marcus Blvd. Hauppauge, NY, USAדגם AS6Qשנרכש בחנות מקומית לציוד לחיות מחמד (3)
צינורות אוויר לאקווריוםPenn-Plax, Inc. 35 Marcus Blvd. Hauppauge, NY, USAדגם STD8שנרכש בחנות מקומית לציוד לחיות מחמד (1)
סדיני תאום מבד שחור (167.6 ס"מ X 243.8 ס"מ)Royale Linens, Inc., Melville, NY, USA#00011342258875שנרכש מ-Amazon.com (3)
מצלמת אינטרנט Brio 4kLogitech International S.A., Lausanne, Switzerland960-001419שנרכש מ-Amazon.com (1 עד 3)
מחשב (מספיק להפעלת Open Broadcaster Studio ומצלמות אינטרנט 1-3)Dell, Inc., Round Rock, TX, USAOptiPlex Micro 7010שנרכש מ-dell.com (1)
תאורת לד מדורגתLithonia Lighting-Acuity Brands, Inc. Conyers, GA, USACTCL-153P-WHשנרכש מ-Amazon.com (1)
מוט בקרת אבק E-Z Up (חבילה של 2)Trimaco, Inc., Cary, NC, USA# 00047034547330שנרכש מ-Amazon.com (1)
חוטי חומרה לרגלייםמשתנהמשתנהשנרכש בחנות חומרה מקומית (1)
פילטרים מקטבים ליניארייםB&H Foto & Electronics, Inc., New York, NY USARosco #7300שנרכש באינטרנט (7)
תוכנת Open BroadcasterOBS Projectv32.0.0הורדה מ-https://obsproject.com (1)
יריעת פוליקרבונט (0.38 אינץ'/9.6 מ"מ עובי)Spectraglass, ltd., Perth, ScotlandUPC # 608037376817שנרכש מ-Amazon.com (1)
מלט PVC (PVC), פחית 4 אוזThe AZEK Co, Chicago, IL, USA#ARAD0004OZשנרכש בחנות חומרה מקומית (1)
אקווריום 5.5 גלון ללא שפהAqueon, Inc. Franklin, WI, USA#100541424שנרכש בחנות מקומית לציוד לחיות מחמד (3)
סרט פלסטיק לבן דביק אוטוCON-TACT Brand, La Miranda, CA, USA#16F-C9A952-06שנרכש בחנות חומרה מקומית (1)
מתג הדרגה מסוג SliderLutron, Inc., Cooperburg, PA, USA#LECL-150H-WHשנרכש בחנות חומרה מקומית (1)
גלגלת קטנהמשתנהמשתנהשנרכש בחנות חומרה מקומית (1)
חימום תת-מימי 50W (מוגדר מראש ל-26C)Aqueon, Inc. Franklin, WI, USA#100106251שנרכש בחנות מקומית לציוד לחיות מחמד (3 עד 7)
הרכבת מצלמה סופר קלייפJINSUI, ChinaX0040GEYLRשנרכש מ-Amazon.com (1 עד 3)
משאבת אוויר Tetra Whisper 10 לאקווריוםSpectrum Pet, Home & Garden, Inc., Middleton, WI, USAUPC #046798778516שנרכש בחנות מקומית לציוד לחיות מחמד (1)
מתחם חשמלי מחוסן 2-גנגיHubbell, Inc., Shelton, CT, USA#MM2420Cשנרכש בחנות חומרה מקומית (1)
יריעת PVC לבן 1/4 אינץ' X 24 אינץ' 48 אינץ'Royal Building Products, Bristol, TN, USA#3101שנרכש בחנות חומרה מקומית (2)
לוח תקרה PVC לבן, מידה 1 X 2

מקורות

  1. Seo, H., Lee, D. Neural basis of learning and preference during social decision-making. Curr Opin Neurobiol. 22 (6), 990-995 (2012).
  2. Bray, J., et al. Social bonds predict dominance trajectories in adult male chimpanzees. Anim Behav. 179, 339-354 (2021).
  3. Tibbetts, E. A., Pardo-Sanchez, J., Weise, C. The establishment and maintenance of dominance hierarchies. Philos Trans R Soc B. 377 (1845), 20200450(2022).
  4. Chase, I. D., Tovey, C., Spangler-Martin, D., Manfredonia, M. Individual differences versus social dynamics in the formation of animal dominance hierarchies. Proc Natl Acad Sci U S A. 99 (8), 5744-5749 (2002).
  5. DeLorey, T. M., et al. Gabrb3 gene deficient mice exhibit impaired social and exploratory behaviors, deficits in non-selective attention and hypoplasia of cerebellar vermal lobules: a potential model of autism spectrum disorder. Behav Brain Res. 187 (2), 207-220 (2008).
  6. Lee, J., Green, M. F. Social preference and glutamatergic dysfunction: underappreciated prerequisites for social dysfunction in schizophrenia. Trends Neurosci. 39 (9), 587-596 (2016).
  7. Fortier, A. V., et al. Prefrontal circuits guiding social preference: implications in autism spectrum disorder. Neurosci Biobehav Rev. 141, 104803(2022).
  8. Weiner, J. Social Relationships of Individuals with ADHD Across the Lifespan. Clinical Handbook of ADHD Assessment and Treatment Across the Lifespan. Matson, J. , Springer. Cham. (2023).
  9. Toth, I., Neumann, I. D. Animal models of social avoidance and social fear. Cell Tissue Res. 354, 107-118 (2013).
  10. Guo, M., Sun, L. From rodents to humans: rodent behavioral paradigms for social behavioral disorders. Brain Circ. 9 (3), 154-161 (2023).
  11. Geng, Y., Peterson, R. T. The zebrafish subcortical social brain as a model for studying social behavior disorders. Dis Model Mech. 12 (8), dmm039446(2019).
  12. Ogawa, S., Pfaff, D. W., Parhar, I. S. Fish as a model in social neuroscience: conservation and diversity in the social brain network. Biol Rev. 96 (3), 999-1020 (2021).
  13. Moss, S. M. Notes on the habits of a domesticated white rat, and a terrier dog (Flora), that lived in harmony together. Mag Nat Hist. 9, 182-185 (1836).
  14. Kietzman, H. W., Gourley, S. L. How social information impacts action in rodents and humans: the role of the prefrontal cortex and its connections. Neurosci Biobehav Rev. 147, 105075(2023).
  15. Bryda, E. C. The mighty mouse: the impact of rodents on advances in biomedical research. Mo Med. 110 (3), 201-211 (2013).
  16. Nadler, J. J., et al. Automated apparatus for quantitation of social approach behaviors in mice. Genes Brain Behav. 3 (5), (2004).
  17. Yang, M., Silverman, J. L., Crawley, J. N. Automated three-chambered social approach task for mice. Curr Protoc Neurosci. 56, 8.26.1-8.26.16 (2011).
  18. Zhao, C., Gammie, S. C. The circadian gene Nr1d1 in the mouse nucleus accumbens modulates sociability and anxiety-related behaviour. Eur J Neurosci. 48 (3), 1924-1943 (2018).
  19. Arakawa, H. Revisiting sociability: factors facilitating approach and avoidance during the three-chamber test. Physiol Behav. 272, 114373(2023).
  20. Crawley, J. N. Designing mouse behavioral tasks relevant to autistic-like behaviors. Ment Retard Dev Disabil Res Rev. 10 (4), 248-258 (2004).
  21. Ehninger, D., et al. Gestational immune activation and Tsc2 haploinsufficiency cooperate to disrupt fetal survival and may perturb social behavior in adult mice. Mol Psychiatry. 17 (1), 62-70 (2012).
  22. Ward, A. J. W., Kent, M. I. A., Webster, M. M. Social recognition and social attraction in group-living fishes. Front Ecol Evol. 8, 15(2020).
  23. Gerlai, R. Misbehaving fish: the role of these simple vertebrates in the analysis of human brain function and dysfunction. Brain Res. 1863, 149795(2025).
  24. Norton, W., Bally-Cuif, L. Adult zebrafish as a model organism for behavioural genetics. BMC Neurosci. 11 (1), 90(2010).
  25. Faustino, A. I., Tacão-Monteiro, A., Oliveira, R. F. Mechanisms of social buffering of fear in zebrafish. Sci Rep. 7, 44329(2017).
  26. Akinrinade, I. D., Varela, S. A. M., Oliveira, R. F. Sex differences in social buffering and social contagion of alarm responses in zebrafish. Anim Cogn. 26 (4), 1307-1318 (2023).
  27. Ariyasiri, K., et al. Pharmacological (ethanol) and mutation (sam2 KO) induced impairment of novelty preference in zebrafish quantified using a new three-chamber social choice task. Prog Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry. 88, 53-64 (2018).
  28. Angiulli, E., et al. Increase in environmental temperature affects exploratory behaviour, anxiety and social preference in Danio rerio. Sci Rep. 10 (1), 5385(2020).
  29. Lindeyer, C. M., et al. Nonapeptide influences on social behaviour: effects of vasotocin and isotocin on shoaling and interaction in zebrafish. Behaviour. 152 (7-8), 897-915 (2015).
  30. Landin, J., et al. Oxytocin receptors regulate social preference in zebrafish. Sci Rep. 10 (1), 5435(2020).
  31. Aslanzadeh, M., et al. The body size of stimulus conspecifics affects social preference in a binary choice task in wild-type, but not in dyrk1aa mutant, zebrafish. Zebrafish. 16 (3), 262-267 (2019).
  32. Ribeiro, D. Oxytocin receptor signalling modulates novelty recognition but not social preference in zebrafish. J Neuroendocrinol. 32 (4), e12834(2020).
  33. Velkey, A. J., et al. High fidelity: assessing zebrafish (Danio rerio) responses to social stimuli across several levels of realism. Behav Processes. 164, 100-108 (2019).
  34. Velkey, A. J., Koon, C. H., Danstrom, I. A., Wiens, K. M. Female zebrafish (Danio rerio) demonstrate stronger preference for established shoals over newly-formed shoals in the three-tank open-swim preference test. PLoS One. 17 (9), e0265703(2022).
  35. Velkey, A. J., et al. Zebrafish (Danio rerio) prefer undisturbed shoals over shoals exposed to the synthetic alarm substance hypoxanthine-3N-oxide (C5H4N4O2). Biology. 14 (3), 233(2025).
  36. Canzian, J., Fontana, B. D., Quadros, V. A., Rosemberg, D. B. Conspecific alarm substance differently alters group behavior of zebrafish populations: putative involvement of cholinergic and purinergic signaling in anxiety- and fear-like responses. Behav Brain Res. 320, 255-263 (2017).
  37. Do Nascimento, B. G., Maximino, C. Social investigation and social novelty in zebrafish: roles of salience and novelty. Behav Processes. 210, 104903(2023).
  38. Bolgan, M., O’Brien, J., Gammell, M. The behavioural repertoire of Arctic charr (Salvelinus alpinus (L.)) in captivity: a case study for testing ethogram completeness and reducing observer effects. Ecol Freshw Fish. 25 (2), 318-328 (2016).
  39. Thomsen, H., Jensen, T. H., Ydesen, K., Madsen, N. Use of ethograms to analyse shoaling behaviour of mackerel (Scomber scombrus) in an aquarium. Genet Biodivers J. , (2020).
  40. Rodriguez, A., et al. ToxTrac: a fast and robust software for tracking organisms. Methods Ecol Evol. 9 (3), 460-464 (2018).
  41. Pereira, T. D., et al. SLEAP: a deep learning system for multi-animal pose tracking. Nat Methods. 19 (4), 486-495 (2022).
  42. Mathis, A., et al. DeepLabCut: markerless pose estimation of user-defined body parts with deep learning. Nat Neurosci. 21 (9), 1281-1289 (2018).
  43. Gerlai, R. Social behavior of zebrafish: from synthetic images to biological mechanisms of shoaling. J Neurosci Methods. 234, 59-65 (2014).
  44. Collar, D. C., Thompson, J. S., Ralston, T. C., Hobbs, T. J. Fast-start escape performance across temperature and salinity gradients in mummichog Fundulus heteroclitus. J Fish Biol. 96 (3), 755-767 (2020).
  45. Collar, D. C., Hobbs, T. J., Thompson, J. S. Scaling of fast-start performance and its thermal dependence in mummichog Fundulus heteroclitus. J Fish Biol. 104 (3), 611-623 (2024).
  46. Collar, D. C., Stanley, K. L., Thompson, J. S. Fast-start performance and its dependence on temperature and salinity in sheepshead minnow (Cyprinodon variegatus). Environ Biol Fishes. 108 (10), 1515-1530 (2025).

הגישה מוגבלת. התחברו או התחילו תקופת ניסיון כדי לצפות בתוכן זה.

הדפסות חוזרות והרשאות

תגיות

התנהגות חברתית של דגי זברפישמשימת שלושה תאיםמעקב באמצעות DeepLabCutאמידת תנוחה ללא סמניםניתוח וידאו התנהגותימערך בעלות נמוכהאינטראקציה חברתיתמחקר נוירו-התנהגותי
אלטרנטיבה זולה לבחינת העדפה חברתית בדגי זברה (Danio rerio) באמצעות משימת שחייה חופשית פתוחה בת 3 חדרים
צרו קשר
המליצו לספרייה

פרטיות

תנאי שימוש

מדיניות

זכויות יוצרים © 2026 MyJoVE Corporation. כל הזכויות שמורות.